8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

1/21

1

ZAT WARNA& PEWARNAAN

MIKROTEKNIK HEWAN

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

2/21

2

SENYAWA ORGANIK YG KOMPLEKS

MEMPUNYAI PEMBAWAAN KHUSUS

YAKNI, WARNA YG DAPATDIPERTAHANKAN DI DALAM

JARINGAN

ZAT WARNA TERDIRI ATASAuxochrome &Chromophore

ZAT WARNA

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

3/21

3

ZAT WARNA

CHROMOPHEREsenyawa kimia yg memberikan warna (ttp.Bukanlah mrpk zat warna)

bila dicelup ke dalam pelarut chromophere

jaringan kembali tidak berwarna

AUXOCHROME

chromophore a/ dapat tetap terikat di dalam

jaringan bila ada radikel ygmengikatnyaradikel auxochrome yg palingpentingNH2 & OH

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

4/21

4

STRUKTUR SEL & AFINITASNYA

THD ZAT WARNA

TERNYATA BHW MATERI 2 PENYUSUN SELMEMP. SIFAT ASAM / BASA YG BERBEDA-BEDA

HAL INI MENYEBABKAN REAKSIPENYERAPAN ZAT WARNA BERBEDA

KRN ZAT WARNA SENDIRI MEMP. SIFATASAM / BASA YG BERBEDA

Mitokhondria (sifat asam) MENYERAP ZATWARNA YG BERSIFAT BASA dan sebaliknya

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

5/21

5

PENGGOLONGAN ZAT WARNA

MENURUT SIFAT : z.w. asam & z.w. basa

MENURUT ASAL : z.w.alami & z.w. sintesis

MENURUT KEMAMPUAN MEWARNAI

JARINGAN : z.w. substantif& z.w. ajective MENURUT STRUKTUR KIMIA :

** z.w. triphenyl methane

** z.w. xanthene

** z.w. thiazine

** z.w. azine

** z.w. azo

** z.w. nitro

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

6/21

6

PENGGOLONGAN CARA PEWARNAAN

BDSK JUMLAH ZAT YG DGNKpewarnaan tunggal; pewarnaan rangkapdua; p. rangkap tiga; p. rangkap empat

BDSK PENGARUH ZAT WARNA THDBAHAN pengaruh EFEKTIF; pengaruhDIFFUS

BDSK CARA PEMBERIAN Z.W

simultan; suksedan BDSK TEBAL TIPIS Z.W pewarnaan

progressif; p. regressif

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

7/21

7

KLASIFIKASI ZAT WARNA

MENURUT SIFAT

(1) z.w. ASAM : garam-garam dr asam-

asam pembawa warna dg radikel basa yg

tidak berwarnasebag.besar adl garm-garam Na/Potassium (K)

Exp : Acid Fuchsin, Eosin dll

(2) z.w. BASA : sebagian besar chloride /sulphate basa organik

Exp : Hematoxylin; Basic fuchsin dll

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

8/21

8

KLASIFIKASI

ZAT WARNA

BDSK ASAL

(1) z.w. ALAMI : z.w. yg diperoleh drtumbuhan/hewan

Exp :Hematoxylin Hematoxyloncamphechianum, L (1918)

Carmineberasal dr hewan Coccuscacti (hanya yg betina)/insecta; hidup pdtanaman cactusOpuntia coccinelifera

(2) z.w. SINTESIS : z.w. yg dibuat di pabrik

Exp : basic fuchsin, dibuat dari Anilline ygdicampur dg paratoluidin

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

9/21

9

MENURUT

KEMAMPUANMEWARNA JARINGAN

z.w. SUBSTANTIF

z.w.apabila diberikan pd jaringan dapatlangsung mewarnai dg baik

Exp : Neutral Red, Jannus Green B, dll

u/ sel-sel hidup (exp. Epitelmukosa pipi)

z.w. AJECTIVE

z.w. yg dpt mewarnai jaringan dg baik biladiberikan pertolongan suatu MORDANT,substansi yg dpt memfiksir / mengikat z.w.sebelumnya yg diberikan pd jaringan ygdiwarnai

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

10/21

10

bdsk STRUKTUR KIMIA

Golongan TRIPHENYL METHANE

-bersifat basa : basic fuchsin, crystal

violet; methyl green; Anillin blue-bersifat asam : acid fuchsin; light

green; fast green; methyline blue

-basa mewarnai khromatin-asam mewarnai sitoplasma

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

11/21

11

bdsk STRUKTUR KIMIA

Golongan XANTHENE

Exp : Eosin-Ydgnk sbg counterstain

biasanya u/hematoxylin Ehrlich & Meyer

-sifat asammewarnai sitoplasma

-konsentrasi lemah (0,1%), bisa aquosa

maupun spirituosabila kuat menghilangkanwarna basa sebelumnya

-mrpk zat warna fluorescent

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

12/21

12

bdsk STRUKTUR KIMIA

Golongan THIAZINE

Exp : Thionine (awalan Thi menunjukadanya sulphur)

- dalam industri tekstilmewarna katuntaninsbg mordant

-dalam sitologimewarnai khromatin

Exp : Toluidin bluebersifat metachromatis,

bila u/ mewarnai jaringana/ menimbulkanbbrp macam warna pd jaringan tersebut

-chromatin biru; mucus; substansi dasar drkartilago, & granula Mastcellaspek merah

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

13/21

13

bdsk STRUKTUR KIMIA

Lanjutan golongan THIAZINE

Exp : Methyline blue basapewarna

darah Eosin Methylin blue (pewarnaMay Gruunwald)

-sifat Polychromatis z.w. yg dapat

berubah warnanya menjadi warna lainsecara spontan

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

14/21

14

bdsk STRUKTUR KIMIA

Golongan AZINE

Exp :

-safraninu/ mewarnai khromatin, trtm

kromosom

-Neutral redu/ mempelajari sel hidupdaya

penetrasi cepat, mudah&

sgt toksik-Jannus green-Bz.w.vital, afinitas besar thd

mitokhondria sel hidup

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

15/21

15

bdsk STRUKTUR KIMIA

Golongan A Z O

Exp :

- Orange-G sifat asam, sbg counterstain /imbanganorange-G, chromatophore

2R;

Xylidine ponceau; Bourdeaux red (semuamono azo); & Biebrich Scarlet (dis azo)

- Trypan blue, trypan red, vital red & Tris azo(chlorazol black E) sgt baik u/ mempelajarisel-sel dr sistem Reticulo endothelial)

- yang sifat basa : Jannus green-B &Bismarck Brown-Y

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

16/21

16

bdsk STRUKTUR KIMIA

Golongan NITRO

Exp : Picric acidselain fungsi sbg z.w.

juga sbg fiksatif / dan diferensiator

juga sbgcounterstain u/ z.w. carmine

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

17/21

17

Penggolongan CARA PEWARNAAN

BDSK JUMLAH ZAT YG DGNK

a. Pewarna Tunggal

Exp : Gentiane violet u/ melihat adanya

polysacharid, Sulphate ester & hyaluronicacid

(metode KiyoshiHarada (Gurr, 1960)

b. Pewarna Rangkap dua

Exp : Ehrlichs Hematoxylin-Eosin

Harris Hematoxylin-Eosin

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

18/21

18

Penggolongan CARA PEWARNAAN

Pewarnaan Rangkap Tiga

Exp : Mallory Triple Stain (Orange G;

Aci

d Fuchsi

n; Annili

ne Bl

ue)ditambah mordantPMA (PhosphoMolibdic Acid)/PTA, Phospho TuncsticAcid

Pewarnaan Rangkap empatjarang dgnk dalam jaringan

Kornhausers Quadraple Stain

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

19/21

19

BdskPENGARUH Z.W. THDBAHAN YG DIWARNAI

PEWARNAAN EFEKTIF

z.w.mempengaruhi satu / bbrp bagianjaringan saja / salah satu bagian dr sel

Exp : Toluidin Bluejaringan mesenterium,terpulas jelasgranula Mastcellnya

PEWARNAAN DIFFUS

z.w. memulas seluruh jaringan, hampirsemua z.w. diffus sifatnya

Exp : Eosinmewarnai seluruhsel/jaringaninti & sitoplasmanya; hanyapenyerapannya sj yg tdk sama

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

20/21

20

Bdsk CARA PEMBERIAN Z.W

PEWARNAAN SIMULTAN

dua macam z.w. / lebih dbrk scr bersama-sama dlm satu waktu

Exp : Mallory tdd Orange G & Annilineblue aksi keduanya berlangsung sama-sama dalam satu waktu

PEWARNAAN SUKSEDANExp : Hematoxylin Eosinbergantian satupersatu diberikanada masa pencuciansendiri-sendiri

8/9/2019 Zat Warna & Klasifikasinya - Mikroteknik Hw

21/21

21

Bdsk TEBAL TIPIS PEMBERIAN

PEWARNAAN PROGRESSIF

pemberian z.w. pd jaringan sangattipisshg warna tepat, diperoleh setelahmenggunakan waktu yg lama

PERWARNAAN REGRESSIF

pemberian z.w. sekalian tebalsedikitdemi sedikit ditipiskan, mgnkdefferensiatordg proses diferensiasi