UJI EFEK ANALGESIK EKSTRAK ETANOL DAUN SENGGANI (Melastoma polyanthum Bl.) PADA MENCIT PUTIH BETINA
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) Program Studi Ilmu Farmasi
Oleh: Galuh Nindya Tyas Tusthi
NIM: 038114001
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA 2007
i
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN
Bukankah Kami telah melapangkan untukmu dadamu? dan Kami telah menghilangkan daripadamu bebanmu, yang memberatkan punggungmu ?
Karena sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan. Maka apabila kamu telah selesai (dari suatu urusan), kerjakanlah dengan
sungguh-sungguh (urusan) yang lain, dan hanya kepada Allah hendaknya kamu berharap.
(Q.S: Al Insyiraah: 1-8)
Kupersembahkan karyaku kepada...
Allah SWT yang telah memberikan rahmatNya kepadaku...
Bapak (alm), Ibu (almh), mas Danang, dan dek Yoga yang aku sayangi
dan selalu menjadi semangat dalam hidupku...
Sahabat-sahabat yang selalu menemaniku
dan memberi dorongan kepadaku...
I Love U all... Allah akan membalas semua yang
pernah kalian berikan padaku...
Almamaterku tercinta...
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
v
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PRAKATA
Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat dan karunia-Nya
sehingga penyusun dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul: “Uji Efek Analgesik
Ekstrak Etanol Daun Senggani (Melastoma polyanthum Bl.) pada Mencit Putih
Betina”, sebagai salah satu syarat untuk menyelesaikan pendidikan strata satu.
Dalam menyusun skripsi ini penyusun banyak mendapat bantuan berupa
bimbingan, dorongan, sarana, maupun finansial dari berbagai pihak. Untuk itu
penyusun mengucapkan banyak terima kasih kepada
1. Rita Suhadi, M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi, Universitas Sanata
Dharma, Yogyakarta.
2. dr. Luciana Kuswibawati, M.Kes., selaku Dosen Pembimbing Utama atas
bimbingan, pengarahan, dan dukungannya selama penelitian sampai penyusunan
skripsi ini.
3. Drs. Mulyono, Apt., selaku Dosen Penguji yang telah memberikan masukan,
kritik,dan saran untuk kesempurnaan skripsi ini.
4. Erna Tri Wulandari, M.si., selaku Dosen Penguji yang telah memberikan
masukan, kritik, dan saran untuk kesempurnaan skripsi ini.
5. Kepala BPTO Tawangmangu yang telah membantu dalam penyediaan senggani
sebagai tanaman yang diteliti.
6. Mas Heru, Mas Parjiman, Mas Kayat, Mas Wagiran dan Mas Ottok yang telah
membantu dalam terlaksananya penelitian ini.
vi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7. Teman-teman “seperjuangan” di Laboratorium, Ningrum, Prita, dan Aan, yang
banyak membantu saat penelitian.
8. Keluarga besarku yang selalu mendukung dan memberi semangat hidup untukku.
9. Sahabat-sahabatku Ningrum_ndutz ku dan Prita_imut ku yang selalu
menemaniku di saat senang maupun susah.
10. Teman-teman kos Poncowati: mba’ Erlyn, Dona_tebo, Mareya, Dixie, Anjar,
Produs, Ranee, Tika, Maria, Eva, ‘n Mayang
11. Teman KKN angkatan XXXIII dusun Ceporan: Arip, papi Eko, Citra, mami
Erline, jeng Windoetz, eM_eM, Olive, Candra, thanks yaa supportnya...
12. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu yang telah membantu
penyelesaian skripsi ini.
Penyusun menyadari bahwa penelitian yang telah dilakukan untuk
penyusunan skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan. Walaupun demikian penyusun
berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi masyarakat dan perkembangan
ilmu pengetahuan.
Yogyakarta, Februari 2007
Penyusun
vii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ...................................................................................... i
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................. ii
HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................ iii
HALAMAN PERSEMBAHAN ..................................................................... iv
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ......................................................... v
PRAKATA ..................................................................................................... vi
DAFTAR ISI .................................................................................................. viii
DAFTAR TABEL .......................................................................................... xii DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xv
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xvii
INTISARI ...................................................................................................... xix
ABSTRACT ..................................................................................................... xx
BAB I. PENGANTAR .................................................................................. 1
A. Latar Belakang .......................................................................................... 1
B. Permasalahan ............................................................................................. 3
C. Keaslian Penelitian .................................................................................... 3
D. Manfaat Penelitian .................................................................................... 5
1. Manfaat teoritis .................................................................................. 5
2. Manfaat praktis .................................................................................. 5
E. Tujuan Penelitian ....................................................................................... 6
1. Tujuan umum ..................................................................................... 6
viii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2. Tujuan khusus ................................................................................... 6
BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA .......................................................... 7
A. Tanaman Senggani ................................................................................... 7
1. Klasifikasi tumbuhan Senggani ........................................................ 7
2. Morfologi .......................................................................................... 7
3. Sinonim ............................................................................................. 8
4. Nama daerah ...................................................................................... 8
5. Kandungan kimia .............................................................................. 9
6. Khasiat dan kegunaan Senggani ....................................................... 16
B. Metode Penyarian ..................................................................................... 16
C. Radikal Bebas dan antioksidan ................................................................ 19
1. Radikal bebas .................................................................................... 19
2. Antioksidan ....................................................................................... 21
D. Nyeri ......................................................................................................... 23
E. Analgetika ................................................................................................. 29
F. Asetosal .................................................................................................... 34
G. Metode Pengujian Efek Analgesik ........................................................... 36
H. Landasan Teori ......................................................................................... 40
I. Hipotesis .................................................................................................. 42
BAB III. METODOLOGI PENELITIAN
A. Jenis Rancangan Penelitian ...................................................................... 43
B. Metode Penelitian ..................................................................................... 43
C. Variabel Operasional ................................................................................. 44
ix
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1. Variabel ............................................................................................. 44
2. Definisi operasional ......................................................................... 44
D. Bahan Penelitian ...................................................................................... 46
E. Alat atau Instrumen Penelitian ................................................................ 47
F. Tata Cara Penelitian ................................................................................. 48
1. Pengumpulan bahan .......................................................................... 48
2. Pembuatan ekstrak etanol daun senggani ......................................... 48
3. Pembuatan CMC-Na 1% .................................................................. 49
4. Pembuatan suspensi asetosal 0,5% dalam CMC-Na 1% .................. 49
5. Pembuatan asam asetat 1% ............................................................... 49
6. Pembuatan suspensi ekstrak etanol daun senggani 5% dalam
CMC-Na 1% ..................................................................................... 49
7. Penetapan kriteria geliat .................................................................... 49
8. Penetapan kadar dan dosis asam asetat ............................................. 50
9. Penetapam kontrol negatif ................................................................ 51
10. Penetapan selang waktu pemberian rangsang ................................... 51
11. Penetapan dosis dan kadar asetosal ................................................... 51
12. Penetapan dosis dan kadar ekstrak etanol daun senggani ................. 52
13. Seleksi hewan uji .............................................................................. 53
14. Perlakuan hewan uji ........................................................................... 53
G. Analisis Hasil ............................................................................................ 54
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ..................................................... 56
A. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Senggani .............................................. 56
x
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
B. Uji Pendahuluan ............................................................................. 57
1. Penentuan kriteria geliat ................................................................... 58
2. Penetapan dosis asam asetat .............................................................. 58
3. Penetapan kontrol negatif ................................................................. 61
4. Penetapan selang waktu pemberian rangsang ................................... 63
5. Penetapan dosis asetosal ................................................................... 65
B. Pengujian Efek Analgesik Ekstrak Etanol Daun Senggani ...................... 68
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ...................................................... 85
A. Kesimpulan .............................................................................................. 85
B. Saran ......................................................................................................... 85
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... 86
LAMPIRAN .................................................................................................. 90
BIOGRAFI PENULIS .................................................................................. 122
xi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Rata-rata jumlah kumulatif geliat hewan uji pada penetapan
dosis efektif asam asetat ............................................................. 58
Tabel 2. Ringkasan analisis variansi satu arah pada penetapan dosis
efektif asam asetat ...................................................................... 59
Tabel 3. Hasil analisis uji Scheffe pada penetapan dosis efektif asam
asetat ........................................................................................... 60
Tabel 4. Rata-rata jumlah kumulatif geliat hewan uji pada penetapan
kontrol negatif ............................................................................ 61
Tabel 5. Rata-rata jumlah kumulatif geliat hewan uji dan
% penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang
waktu pemberian rangsang ......................................................... 63
Tabel 6. Ringkasan analisis variansi satu arah % penghambatan terhadap
geliat pada penetapan selang waktu pemberian rangsang .......... 63
Tabel 7. Hasil analisis uji Scheffe % penghambatan terhadap geliat pada
penetapan selang waktu pemberian rangsang ............................ 64
Tabel 8. Rata-rata jumlah kumulatif geliat hewan uji dan
% penghambatan terhadap geliat pada penetapan
dosis asetosal .............................................................................. 65
Tabel 9. Ringkasan analisis variansi satu arah % penghambatan terhadap
geliat pada penetapan dosis asetosal .......................................... 66
xii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Tabel 10. Hasil analisis uji Scheffe % penghambatan terhadap geliat pada
penetapan dosis asetosal ............................................................. 66
Tabel 11. Rata-rata jumlah kumulatif geliat hewan uji dan % penghambatan
terhadap geliat pada kelompok perlakuan .................................. 69
Tabel 12. Ringkasan analisis variansi satu arah % penghambatan terhadap
geliat pada kelompok perlakuan ................................................ 71
Tabel 13. Hasil analisis uji Scheffe % penghambatan terhadap geliat pada
kelompok perlakuan ................................................................... 71
Tabel 14. Persen perubahan daya analgesik kelompok perlakuan
dibandingkan asetosal dosis 91 mg/kgBB .................................. 75
Tabel 15. Ringkasan analisis variansi satu arah % perubahan daya
analgesik ..................................................................................... 76
Tabel 16. Hasil analisis uji Scheffe % perubahan daya analgesik .............. 77
Tabel 17. Jumlah geliat hewan uji pada penetapan dosis efektif asam
asetat ........................................................................................... 95
Tabel 18. Jumlah geliat hewan uji pada penetapan kontrol negatif ........... 98
Tabel 19. Jumlah geliat hewan uji pada penetapan selang waktu
pemberian .................................................................................. 100
Tabel 20. Data % penghambatan terhadap jumlah geliat pada penetapan
selang waktu pemberian ............................................................. 103
Tabel 21. Jumlah geliat hewan uji pada penetapan dosis efektif asetosal .. 105
Tabel 22. Data % penghambatan terhadap jumlah geliat pada penetapan
dosis efektif asetosal .................................................................. 108
xiii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Tabel 23. Data jumlah geliat hewan uji setelah pemberian asam asetat
pada semua kelompok perlakuan ............................................... 110
Tabel 24. Data % penghambatan terhadap jumlah geliat pada semua
kelompok perlakuan ................................................................... 114
Tabel 25. Data % Perubahan daya analgesik terhadap kontrol positif ....... 117
xiv
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Kerangka flavonoid (1a) dan sistem penomoran turunan
flavonoid (1b) .......................................................................... 9
Gambar 2. Struktur kimia kuersetin .......................................................... 11
Gambar 3. Struktur kimia rutin ....................................................................... 11
Gambar 4. Struktur kimia quercitrin ......................................................... 12
Gambar 5. Struktur umum steroid ............................................................ 14
Gambar 6. Struktur kimia β-sitosterol ...................................................... 14
Gambar 7. Struktur kimia α-amyrin ......................................................... 15
Gambar 8. Pembagian kualitas nyeri berdasarkan lokalisasi .................... 24
Gambar 9. Mediator yang dapat menimbulkan rangsang nyeri setelah
kerusakan jaringan .................................................................. 27
Gambar 10. Terjadinya nyeri; penghantaran impuls; lokalisasi dan rasa
nyeri serta inhibisi nyeri endogen .......................................... 28
Gambar 11. Diagram perombakan asam arakidonat ................................... 33
Gambar 12. Struktur molekul Asetosal ....................................................... 34
Gambar 13. Skema kerja penelitian .................................................................. 55
Gambar 14. Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat pada penetapan
dosis efektif asam asetat ........................................................ 59
Gambar 15. Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat pada penetapan
kontrol negatif ......................................................................... 62
xv
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Gambar 16. Diagram batang rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada
penetapan selang waktu pemberian rangsang ......................... 63
Gambar 17. Diagram batang rata-rata % penghambatan terhadap geliat
pada penetapan dosis asetosal.................................................. 67
Gambar 18. Diagram batang rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada
kelompok perlakuan ................................................................ 70
Gambar 19. Diagram batang rata-rata % perubahan daya analgesik terhadap
kontrol positif .......................................................................... 76
Gambar 20. Diagram batang perbandingan daya analgesik dengan daya anti-
inflamasi ekstrak etanol daun senggani .................................. 78
Gambar 21. Perbandingan daya analgesik ekstrak etanol daun senggani
dengan daya analgesik ekstrak petroleum eter daun senggani
pada mencit putih betina ......................................................... 80
Gambar 22. Rangkuman daya analgesik dan daya anti-inflamasi ekstrak
etanol daun senggani dan ekstrak petroleum eter daun
senggani ................................................................................... 82
Gambar 23. Tumbuhan senggani ................................................................ 91
Gambar 24. Daun senggani ......................................................................... 92
Gambar 25. Serbuk daun senggani ............................................................. 92
Gambar 26. Ekstrak etanol daun senggani .................................................. 94
xvi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat pernyataan pengambilan simplisia senggani
(Melastoma polyanthum Bl.) ................................................ 90
Lampiran 2. Foto tumbuhan, daun, serbuk daun senggani dan ekstrak
etanol daun senggani ............................................................ 91
Lampiran 3. Data jumlah geliat hewan uji dan hasil analisis variansi satu
arah pada penetapan dosis efektif asam asetat ..................... 95
Lampiran 4. Data jumlah geliat hewan uji dan hasil analisis variansi satu
arah pada penetapan kontrol negatif ................................... 98
Lampiran 5. Data jumlah geliat hewan uji dan hasil analisis statistik pada
penetapan selang waktu pemberian ..................................... 100
Lampiran 6. Data % penghambatan terhadap jumlah geliat dan hasil
analisis statistik pada penetapan selang waktu pemberian .. 103
Lampiran 7. Data jumlah geliat hewan uji dan hasil analisis variansi satu
arah pada penetapan dosis efektif asetosal ........................... 105
Lampiran 8. Data % penghambatan terhadap jumlah geliat dan hasil
analisis variansi satu arah pada penetapan dosis efektif
asetosal ................................................................................. 108
Lampiran 9. Data jumlah geliat hewan uji setelah pemberian asam asetat
dan hasil analisis variansi satu arah pada semua kelompok
perlakuan .............................................................................. 110
xvii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Lampiran 10. Data % penghambatan terhadap jumlah geliat dan hasil
analisis statistik pada semua kelompok perlakuan ............... 114
Lampiran 11. Data % perubahan daya analgesik terhadap kontrol positif . 117
Lampiran 12. Cara perhitungan % penghambatan jumlah geliat terhadap
kontrol negatif dan % perubahan daya analgesik terhadap
kontrol positif ....................................................................... 121
xviii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
INTISARI
Tumbuhan senggani merupakan salah satu tumbuhan obat yang sering dimanfaatkan masyarakat sebagai pereda demam (antipiretik), penghilang nyeri (analgesik), peluruh kencing (diuretik), menghilangkan pembengkakan, dan lain-lain. Penelitian yang dilakukan bertujuan untuk mengetahui khasiat dan besarnya prosentase daya analgesik ekstrak etanol daun senggani.
Penelitian ini termasuk dalam penelitian eksperimental murni dengan rancangan penelitian acak, lengkap, pola satu arah. Metode yang digunakan adalah metode induksi kimia. Tiga puluh ekor mencit betina, galur Swiss, berat badan antara 20-30 gram, umur 2-3 bulan, dibagi secara acak dalam 6 kelompok yaitu: I) kontrol negatif diberi CMC-Na 1%, II) kontrol positif diberi asetosal dosis 91 mg/kg BB, III) sampai VI) diberi perlakuan ekstrak etanol daun senggani secara per oral dalam 4 peringkat dosis berturut-turut sebesar 850 mg/kgBB; 1000 mg/kgBB; 1330 mg/kgBB; dan 1670 mg/kgBB. Sepuluh menit kemudian mencit diinduksi asam asetat 1% dosis 50 mg/kg BB secara intraperitonial. Geliat yang timbul diamati dan dicatat tiap 5 menit selama 60 menit. Jumlah kumulatif geliat diubah ke dalam bentuk prosentase penghambatan terhadap geliat. Data yang diperoleh dianalisis secara statistik dengan One-way ANOVA dilanjutkan dengan uji Scheffe dengan taraf kepercayaan 95%.
Hasil penelitian yang diperoleh berupa % penghambatan terhadap geliat ekstrak etanol daun senggani dosis 850 mg/kgBB; 1000 mg/kgBB; 1330 mg/kgBB; dan 1670 mg/kgBB berturut-turut sebesar 88,06 %; 83,42 %, 68,26 %, dan 44,56 %. Kata kunci: analgesik, ekstrak etanol daun senggani
xix
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ABSTRACT
Senggani plants is one of medicinal plants which often used by people to decrease fever (antipyretic) and pain (analgesic), urinate shedding (diuretic), to lose udema, etc. The aim of the research that was done is to know the effect and percentage of amount analgesic potency from ethanol extract of senggani’s leaves.
The genre of this research is pure experimental in which the program of this research is random research plan, complete, and one-direction pattern. The method used in this research is chemical induction method. The research uses 30 female mice of Swiss groove, it weights 20-30 grams, and the age is 2-3 months. The 30 mices are divided into 6 groups based on its treatment, i.e.: I) the group of negative control is given CMC-Na 1%; II) the group of positive control is given acetyl salicylic acid dosage 91 mg/kg BB; III) trough VI) the treatment is given extract ethanol of senggani leaves per orally in four different various dosage respectively, i.e.: 850 mg/kgBB; 1000 mg/kgBB; 1330 mg/kgBB; and 1670 mg/kgBB. Ten minutes after the treatment, the mice is induced by acetate acid 1% with dosage 50 mg/kg BB intra peritoneally. The wriggles are watched closely and booked every 5 minutes in 60 minutes. The accumulation numbers of the wriggles are transferred into the form of resistance percentage toward the wriggles. The data which is got from the calculation, later, is analyzed statistically with one-way ANOVA test, then, the step is continued with Shceffe with interval 95%.
The result showing that ethanolic extract of senggani’s leaves at 850 mg/kgBW; 1000 mg/kgBW; 1330 mg/kgBW; and 1670 mg/kgBW, respectively, 88,06 %; 83,42 %, 68,26 %, and 44,56 %.
Key words : analgesic, ethanolic exstract of senggani’s leaves
xx
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Sejak zaman dahulu tumbuh-tumbuhan sudah banyak dikenal sebagai sumber
pengobatan yang ampuh. Mulai dari akar tumbuhan, berbagai umbi-umbian, batang
dan kulit pohon, daun, bahkan bunga dan biji suatu tumbuhan yang sederhana pun
dapat digunakan sebagai obat. Indonesia merupakan negara yang kaya akan hasil
alam salah satunya adalah tumbuh-tumbuhan.
Budaya bangsa Indonesia yang berkaitan dengan pemanfaatan alam,
khususnya untuk pemeliharaan kesehatan dan pengobatan penyakit dilaksanakan
berdasarkan pengalaman secara turun-temurun. Pengalaman tersebut dikembangkan
dan diwariskan, sehingga obat tradisional dapat dimanfaatkan sampai sekarang
sebagai sarana perawatan kesehatan masyarakat (Soedibyo, 1998).
Dalam Undang-Undang No. 23 tahun 1992 tentang kesehatan, Departemen
Kesehatan Republik Indonesia (Depkes RI) mendefinisikan obat tradisional sebagai
bahan atau ramuan bahan yang berupa bahan-bahan tumbuhan, bahan hewan, bahan
mineral, sediaan galenik, atau campuran dari bahan tersebut yang secara turun-
temurun telah digunakan untuk pengobatan berdasarkan pengalaman (Anonim, 1992).
Nyeri merupakan suatu gejala yang umum dan sering terjadi mengikuti salah
satu atau lebih penyakit. Hampir sebagian besar penyakit memberi gejala nyeri yang
dimanifestasikan dalam bentuk rasa sakit pada organ atau jaringan pada tubuh
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
(Anonim, 1991). Nyeri merupakan perasaan sensoris dan emosional yang tidak enak
dan yang berkaitan dengan (ancaman) kerusakan jaringan.
Salah satu tumbuhan yang dapat digunakan sebagai obat tradisional yaitu
senggani (Melastoma polyanthum Bl.). Tumbuhan yang memiliki kandungan saponin,
flavonoid, dan tanin ini berkhasiat sebagai pereda demam (antipiretik), penghilang
nyeri (analgesik), peluruh kencing (diuretik), menghilangkan pembengkakan,
melancarkan aliran darah dan penghenti perdarahan (hemostatis).
Flavonoid berkhasiat sebagai anti-inflamasi anti alergi, antithrombolik,
vasoprotektif sebagai penghambat promotor tumor dan untuk proteksi pada mukosa
saluran cerna atau gastrik. Efek-efek tersebut berhubungan dengan pengaruh
flavonoid pada metabolisme asam arakhidonat (Trease and Evans, 2002). Di antara
senyawa flavonoid yang telah lama dikenal dan merupakan suatu kelompok
antioksidan yaitu kelompok polifenol (Sitompul, 2003).
Seberapa besar prosentase efek analgesik tumbuhan senggani sampai
sekarang belum diketahui. Untuk itu dalam penelitian ini akan dilakukan uji efek
analgesik dari ekstrak etanol daun senggani pada mencit betina. Penggunaam
tanaman senggani biasanya diseduh atau dilarutkan dalam air. Menurut literatur,
flavonoid umumnya larut dalam air dan dapat diekstraksi dengan etanol 70%
(Harborne, 1984). Oleh karena itu pada penelitian ini akan dilihat khasiat tumbuhan
senggani sebagai analgetika jika dilarutkan dalam pelarut polar selain air, yaitu
etanol, dan juga akan dibandingkan seberapa besar efek analgesik daun senggani jika
dilarutkan dalam pelarut yang polar dan pelarut yang non polar.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
B. Permasalahan
1. Apakah ekstrak etanol daun senggani memiliki efek analgesik terhadap mencit
putih betina?
2. Seberapa besar prosentase daya analgesik yang dimiliki ekstrak etanol daun
senggani?
C. Keaslian Penelitian
Sepengetahuan penulis penelitian mengenai uji efek analgesik ekstrak etanol
daun senggani terhadap mencit betina belum pernah dilakukan di Universitas Sanata
Dharma Yogyakarta. Adapun penelitian tentang tumbuhan senggani yang pernah
dilakukan adalah sebagai berikut:
1. Daya Antifertilitas dan Efek Toksik Ekstrak Etanol Akar Senggani (Melastoma
polyanthum Bl.) pada Tikus Betina (Christina, 2000). Hasil menunjukkan
bahwa ekstrak etanol akar senggani pada dosis 54,98 mg/kg BB dan 219,92
mg/kg BB memberikan efek antifertilitas dan efek toksik pada tikus betina
timbul pada dosis 54,98 mg/kg BB.
2. Teratogenisitas Ekstrak Etanol Akar Senggani (Melastoma polyanthum Bl.)
pada Tikus Putih (Japri, 2001). Hasil menunjukkan bahwa akstrak etanol akar
senggani berpotensi memberi efek teratogenik pada dosis 34,362 mg/kg BB;
103,086 mg/kg BB; dan 309,258 mg/kg BB ditandai dengan penurunan bobot
plasenta, peningkatan jumlah resorpsi awal, kelainan tulang sternum, dan cacat
mikroskopis.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4
3. Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Akar Senggani (Melastoma polyanthum
Bl.) terhadap Jaringan Hati, Ginjal, Ovarium, dan Uterus Tikus Betina (Phin,
2001). Hasil menunjukkan bahwa ekstrak etanol akar senggani memiliki efek
toksik pada jaringan organ tersebut pada dosis 54,08 mg/kg BB; 109,62 mg/kg
BB;dan 219,92 mg/kg BB.
4. Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Akar Senggani (Melastoma Polyanthum
Bl.) terhadap Spermatogenitas Tikus Putih (Yosef, 2001). Hasil menunjukkan
bahwa ekstrak etanol akar senggani pada dosis 34,98 mg/kg BB; 103,14 mg/kg
BB; dan 309,42 mg/kg BB secara per orar selama 22 hari dapat menghambat
spermatogenesis pada lumen tubulus seminiferis, menurunkan jumlah sperma
yang motil, tidak menurunkan bobot testis, namun dapat menurunkan berat
badan tikus.
5. Toksisitas Akut Infus Daun Senggani (Melastoma polyanthum Bl.) pada Mencit
(Wiwin, 2002). Hasil menunjukkan bahwa ekstrak etanol akar senggani
memiliki LD50 semu > 15,356 g/kg BB, sehingga dapat dikatakan praktis tidak
toksik.
6. Uji Daya Antifungus Ekstrak Etanol Akar Senggani (Melastoma polyanthum
Bl.) terhadap Candida albicans secara in vitro (Katarina, 2002). Hasil
menunjukkan bahwa ekstrak etanol akar senggani mengandung flavonoid,
tanin , dan steroid serta memiliki efek antifungus Candida albicans.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
7. Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Akar Senggani (Melastoma polyanthum Bl.)
pada Tikus Jantan dan Betina (Ismirawati, 2002). Hasil menunjukkan bahwa
ekstrak etanol akar senggani memiliki LD50 semu, yaitu lebih dari 3518,72
mg/kg BB. Gejala toksik yang muncul yaitu berupa penurunan aktivitas
lokomotor, penurunan sesitivitas, serta sering menggosok hidung. Hasil
pemeriksaan histopatologi menunjukkan adanya kelainan pada hati, ginjal, usus,
lambung, sedangkan pada limpa normal.
8. Uji Daya Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Senggani (Melastoma affine D.
Don.) terhadap Bakteri Gram Positif dan Bakteri Gram Negatif (Toba, 2003).
Hasil menunjukkan bahwa ekstrak etanol akar senggani memiliki aktivitas
antibakteri Staphylococcus aureus dan Shigella dysentriae.
D. Manfaat Penelitian
1. Manfaat teoritis
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi yang berguna tentang
penggunaan tumbuhan obat tradisional sebagai analgesik.
2. Manfaat praktis
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kepada masyarakat
tentang kegunaan daun senggani sebagai analgesik.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6
E. Tujuan Penelitian
Tujuan pengujian efek analgesik ekstrak etanol daun senggani terhadap
mencit putih betina adalah sebagai berikut ini.
a. Tujuan Umum
Untuk menambah informasi mengenai khasiat daun senggani.
b. Tujuan Khusus
Untuk mengetahui kemampuan ekstrak etanol daun senggani sebagai
analgetika dan untuk mengetahui besarnya efek analgesik yang dimiliki terhadap
mencit putih betina.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Tumbuhan senggani (Melastoma polyanthum Bl.)
Senggani dapat tumbuh liar pada tempat yang cukup mendapat sinar
matahari, seperti lereng gunung, semak belukar, lapangan yang tidak terlalu gersang,
atau di daerah objek wisata sebagai tumbuhan hias. Tumbuhan ini bisa ditemukan
sampai ketinggian 1.650 m dari permukaan laut (Dalimartha, 1999).
1. Klasifikasi tumbuhan senggani
Divisio : Spermatophyta
Subdivisio : Angiospermae
Clasis : Dicotyledoneae
Subclasis : Dialypetalae
Ordo : Mytales
Familia : Melastomaceae
Genus : Melastoma
Spesies : Melastome polyathum Bl.
(Van Steenis, 1975; Tjitrosoepomo, 1989)
2. Morfologi
Senggani termasuk tumbuhan perdu, tinggi 0,5-4 m. Cabang yang muda
bersisik. Daun bertangkai, berhadapan, memanjang atau bulat telur memanjang
dengan ujung runcing, bertulang daun 3,2-20 kali 1-8 cm, kedua belah sisi berbulu.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
8
Bunga bersama-sama 5-18, pada ujung dan di ketiak daun yang tertinggi, berbilang
5 (4-6). Tabung kelopak berbentuk lonceng, bersisik, taju dengan sejumlah gigi kecil.
Daun pelindung bersisik, langsing, 5 kali 2 mm, tidak menutupi kuncup. Daun
mahkota bulat telur terbalik, panjang 2-3 cm, ungu merah, jarang putih. Benang sari
10 (8-12), memanjang dari penghubung sari di bawah ruang sari pada benang sari
yang panjang 6-16 mm, pada yang pendek 2-7 mm. Bakal buah beruang 5 (4-6),
dihubungkan oleh bingkai terhadap tabung kelopak. Buah buni berbentuk periuk,
membuka melintang secara tidak teratur, dimana terlepas bingkai biji yang merah tua.
Biji berbentuk kerang. Senggani dapat tumbuh di padang rumput, semak hutan kecil,
5-2000 m (Van Steenis, 1975).
3. Sinonim
Tumbuhan ini sering disebut tidak tepat sebagai Melastoma malabathicum
Bl. (Van Steenis, 1975). Sinonim senggani yaitu: Melastoma malabathicum L.,
Melastoma candidum D. Don. (Melastoma septemnervium Lour., non Jacq.),
Melastoma dodecandum Lour. (Melastoma repens Desr.), Melastoma sanguineum
Sims. (Melastoma decemfidum Roxb.), dan Melastoma affine D. Don. (Melastoma
polyanthum Bl.) yang umumnya paling banyak digunakan di Indonesia (Lily, 1980).
4. Nama Daerah
Nama daerah dari tumbuhan senggani antara lain: Senggani, Kluruk,
Sengganen (Jawa), Senduduk (Melayu), Harendong (Sunda), Kemaden (Madura)
(Dalimartha, 1999).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
9
5. Kandugan Kimia
Kandungan kimia tumbuhan senggani pada bagian daun adalah flavonoid,
steroid/ triterpenoid, tanin 4,3 % (Anonim, 1995). Daun mengandung saponin
(Dalimartha, 1999).
Menurut Sulaiman, et al. (2004), pada analisis phytochemical dari ekstrak
daun dan akar senggani mengandung β-sitosterol, α-amyrin, sitosterol 3-O-β-D-
glucopiranoside, kuersetin, kuersitrin, dan rutin.
a. Flavonoid
Flavonoid merupakan kandungan khas tumbuhan hijau dan sebenarnya
terdapat pada semua bagian tumbuhan termasuk daun, akar, kayu, kulit,
tepungsari, nektar, bunga, buah buni, dan biji (Markham, 1982). Kerangka dasar
flavonoid dan sistem penomoran untuk turunan flavonoid terlihat pada gambar1.
C C C
O
AB
1
2
345
6
7
81'
2' 3'
4'
5'6'
1a 1b
Gambar 1. Kerangka flavonoid (1a) dan sistem penomoran turunan flavonoid (1b) (Robinson, 1995)
Flavonoid sangat dimungkinkan dalam sejumlah pengobatan tradisional
yang substansinya belum diketahui akan tetapi menunjukkan isi zat aktifnya
flavonoid. Flavonoid berkhasiat sebagai anti-inflamasi anti alergi, anti-
thrombolik, vasoprotektif sebagai penghambat promotor tumor dan untuk
proteksi pada mukosa saluran cerna atau gastrik. Efek-efek tersebut berhubungan
dengan pengaruh flavonoid pada metabolisme asam arakhidonat (Evans, 2002).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
10
Aglikon flavonoid adalah polifenol, sehingga mempunyai sifat kimia senyawa
fenol yaitu bersifat agak asam maka dapat larut dalam basa (Markham, 1982). Di
antara senyawa flavonoid yang telah lama dikenal dan merupakan suatu
kelompok antioksidan yakni, kelompok polifenol memiliki kemampuan sebagai
scavenger superoksida, oksigen singlet, dan radikal peroksi lipid (Sitompul,
2003).
Beberapa penelitian melaporkan bahwa aktivitas antioksidan flavonoid
ditentukan oleh gugus tertentu dalam struktur flavonoid tersebut. Karakteristik
struktur flavonoid yang mampu memberikan efek antioksidan antara lain karena
adanya (1) gugus katekol (O-dihidroksi) pada cincin B yang mempunyai sifat
sebagai donor proton, (2) gugus pirogalol (trihidroksi) pada cincin B, (3) gugus
4-oxo pada cincin heterosiklik, (4) gugus 3-OH pada cincin heterosiklik, serta (5)
gugus 5-OH dan 7-OH yang potensial pada keadaan tertentu (Middleton dkk,
2000 cit Ladoangin, 2004). Ketika senyawa-senyawa ini bereaksi dengan radikal
bebas maka terbentuk radikal baru yang distabilisasi oleh efek resonansi inti
aromatik (Cuvelier, 1991 cit Hertiani, 2000).
Daun senggani mengandung kuersetin yang merupakan salah satu zat aktif
kelas flavonoid yang secara biologis memiliki manfaat yang amat kuat. Flavonol
kuersetin memiliki aktivitas antioksidan yang amat potensial (Anonim, 2005).
Kuersetin memiliki aktivitas antioksidan yang kuat karena memiliki ciri pada
strukturnya, yaitu 3’4’-dihidroksi pada cincin B; 2,3-ikatan rangkap pada cincin
C; sebuah gugus 3-hidroksil pada cincin C; dan sebuah gugus 5-hidroksil pada
cincin A (Sibuea, 2004).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
11
OHO
OH O
OH
OH
OH
A
B
C
Gambar 2. Struktur kimia kuersetin (Anonim, 1989)
Dilihat dari struktur kimianya, kuersetin memiliki aktivitas kuat sebagai
pemberi hidrogen (hidrogen donating) karena kandungan hidroksilasi cukup,
yakni 5 gugus OH dan empat diantaranya terdapat pada sisi aktif (C5, C7, C3’,
dan C4’). Selain itu kuersetin memiliki struktur yang mampu sebagai pengkelat
logam, yakni gugus karbonil pada C4 dan gugus hidroksil pada C3 dan C5
(Sibuea, 2004).
Selain untuk menghambat oksidasi dan sitotoksisitas LDL-teroksidasi,
kuersetin juga dapat menghambat siklooksigenase yang berperan pada
metabolisme asam arakhidonat, sehingga dapat menurunkan agregrasi platelet
(Sitompul, 2003).
Daun Senggani juga mengandung rutin. Rutin (kuersetin 3-rutinosida)
merupakan glikosida flavonol paling umum dan juga penting dalam bidang
farmasi karena digunakan untuk mengobati kerapuhan pembuluh kapiler pada
manusia. Struktur kimia rutin dapat dilihat pada gambar 3.
O
OH
OH
OH
HO
O
O Glk O Ram
Gambar 3. Struktur kimia rutin (Harborne, 1984)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
12
Rutin merupakan antioksidan kuat. Rutin juga memproduksi perusak
radikal oksigen. Rutin dapat membantu dalam menghentikan edema pada vena
yang mana merupakan gejala awal dari penyakit vena kronik pada kaki. Rutin
juga mempunyai efek anti-inflamasi, efek pencegahan dan penyembuhan,
menghambat kanker dan kondisi pre-kanker. Selain itu, dapat mencegah
atherosklerosis, mereduksi sitotoksisitas oksidasi LDL-kolesterol, dan
menurunkan resiko penyakit jantung.
Selain itu senggani juga mengandung kuersitrin yang juga termasuk dalam
golongan flavonoid. Kuersitrin sudah diuji mempunyai aktivitas sebagai anti-
inflamasi akut dan kronis pada tikus terinduksi trinitrobenzenesulfonic-acid.
Pemberian kuersitrin secara peroral dengan dosis 1-5 mg/kgBB dapat
menurunkan tingkat myeloperoksida dan alkalin fosfat. Peningkatan atau
penurunan dosis flavonoid ditandai dengan menurunnya efek. Efek anti-inflamasi
akut kuersetin tidak berpengaruh terhadap pengrusakan fungsi netrofil atau
penghambatan lipoksigenase. Hal ini mungkin disebabkan oleh adanya proteksi
mukosa atau peningkatan perbaikan mukosa sekunder untuk kenaikan pertahanan
melawan oksidatif berbahaya dan perbaikan fungsi usus normal. Akibatnya dapat
menurunkan resiko terjadinya kerusakan usus pada saat terjadi diare. Berikut ini
adalah struktur kimia kuersitrin.
Gambar 4. Struktur kimia quercitrin ( de Medina, Galvez,Romero, dan Zarzuelo, 1996)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
13
Flavonoid umumnya larut dalam air dan dapat diekstraksi dengan etanol
70%. Pada penyarian lebih lanjut digunakan petroleum eter, etanol 80%, dan
pelarut organik lain, tetapi flavonoid tetap berada dalam lapisan air (Harborne,
1984).
b. Tanin
Tanin merupakan substrat kompleks yang biasanya terjadi sebagai
campuran polifenol yang sulit diseparasi karena tidak dapat dikristalkan. Tanin
dapat tersebar luas dalam tumbuhan berpembuluh dalam angiospermae
khususnya dalam jaringan kayu. Dalam dunia kesehatan tanin digunakan sebagai
astringen yang mengakibatkan pengurangan bengkak (edema), radang, dan
sekresi pada gastrointestinal dan pada abrasi kulit (Harborne, 1984).
Secara kimiawi terdapat dua jenis utama tanin yaitu tanin terkondensasi
(flavolan) secara biosintesis dapat dianggap terbentuk dengan cara kondensasi
katekin tunggal yang membentuk senyawa dimer dan oligomer yang lebih tinggi
(Harborne, 1984). Tanin yang terhidrolisis dapat dihidrolisis oleh asam atau
enzim seperti tannase (Evans, 2002). Tanin terhidrolisiskan dan glikosida dapat
diekstraksi dengan air panas atau campuran etanol-air (Robinson, 1995).
c. Steroid/ triterpenoid
Steroid merupakan lemak yang dikarakteristikkan mempunyai kerangka
karbon yang dihubungkan dengan empat cincin (Anonim, 2006).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
14
A B
C D1
2
3 4 56
7
89
10
1112
13
14
15
17
18
19
20
21
22
2324
2526
27
241
242
28 29
30
16
Gambar 5. Struktur umum steroid (Anonim, 2006).
Dahulu sterol terutama dianggap sebagai senyawa satwa (sebagai hormon
kelamin, asam empedu, dan lain-lain), namun pada tahun-tahun terakhir ini
makin banyak senyawa tersebut ditemukan dalam jaringan tumbuhan. Tiga
senyawa ‘fitosterol’ yang mungkin terdapat dalam tiap tumbuhan tinggi tersebut
yaitu sitosterol (dahulu dikenal sebagai β-sitosterol), stigmasterol, dan
kampestrol.
HO
Et
Gambar 6. Struktur kimia β-sitosterol (Harborne, 1984).
Triterpenoid adalah senyawa yang kerangka karbonnya berasal dari 6
satuan isoprena. Triterpenoid dapat dibagi menjadi 4 golongan senyawa yaitu
triterpenoid sebenanya, steroid, saponin, dan glikosida jantung. Banyak triterpena
yang dikenal dalam tumbuhan. Sampai saat ini hanya beberapa saja yang
diketahui tersebar luas. Senyawa tersebut adalah triterpena pentasiklik α-amyrin
dan β-amyrin serta asam turunannya, yaitu asam ursolat dan asam oleanolat.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
15
HOMe
Me Me Me
H
Me
Me
H Me
Me
Gambar 7. Struktur kimia α-amyrin (Harborne, 1984).
Sebagian besar senyawa steroid dan terpenoid adalah senyawa non polar,
karena itu dapat dipisahkan dari komponen tumbuhan yang polar dengan
mengekstraksi menggunakan pelarut seperti benzena atau eter (Robinson, 1995).
d. Saponin
Saponin adalah glikosida triterpena dan sterol dan telah terdeteksi dalam
lebih dari 90 suku tumbuhan. Saponin merupakan senyawa aktif permukaan dan
bersifat seperti sabun, serta dapat dideteksi berdasarkan kemampuannya
membentuk busa dan menghemolisis sel darah. Pencarian saponin dalam
tumbuhan telah dipicu oleh kebutuhan akan sumber sapogenin yang mudah
diperoleh dan dapat diubah di laboratorium menjadi sterol hewan yang berkhasiat
penting (misalnya, kortison, estrogen kontraseptik, dll) (Harborne, 1987).
Saponin merupakan surfaktan alami, atau detergent yang banyak ditemukan
pada beberapa jenis tumbuhan. Ekstrak dari tumbuhan ini biasa digunakan
sebagai foaming agent pada banyak minuman. Sifat biokimianya juga memiliki
aplikasi komersial di bidang industri dan banyak digunakan pada beberapa
produk kosmetik dan shampo (Anonim, 2004).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
16
Senyawa glikosida seperti saponin dan glikosida jantung tidak larut dalam
pelarut non polar. Senyawa ini paling cocok diekstraksi dari tumbuhan memakai
etanol atau metanol panas 70-95% (Robinson, 1995).
6. Khasiat dan Kegunaan
Penggunaan tumbuhan senggani sebagai obat tradisional mengalami banyak
perkembangan, sejak awalnya digunakan hanya sebagi anti diare tetapi sekarang
berbagai macam khasiat. Adanya rasa pahit dari senggani dapat berkhasiat sebagai
pereda demam (antipiretik), penghilang nyeri (analgesik), peluruh kencing (diuretik),
menghilangkan pembengkakan, melancarkan aliran darah, dan penghentian
pendarahan (hemostatis). Umumnya senggani digunakan masyarakat untuk
mengobati keputihan, gangguan pencernaan makanan, disentri, diare, sariawan, dan
pendarahan rahim (Dalimartha, 1999). Menurut Sudibyo (1998), tumbuhan senggani
berkhasiat untuk astringen, desentri, keputihan, mencret, wasir, obat kumur, sakit
perut, dan borok (obat luar).
B. Metode Penyarian
Penyarian merupakan peristiwa pemindahan massa. Zat aktif yang semula
berada di dalam sel ditarik oleh cairan penyari, sehingga terjadi larutan zat aktif
dalam cairan penyari tersebut. Secara umum penyarian dapat dibedakan menjadi
infudasi, maserasi, dan perkolasi (Anonim, 1986).
Infudasi merupakan proses penyarian yang umumnya digunakan untuk
menyari zat kandungan aktif larut dalam air dari bahan-bahan nabati. Penyarian
dengan cara ini menghasilkan sari yang tidak stabil dan mudah terserang oleh kuman
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
17
dan kapang. Oleh sebab itu, sari yang diperoleh tidak boleh disimpan lebih dari 24
jam. Cara ini sangat sangat sederhana dan sering digunakan oleh perusahaan obat
tradisional. Infus adalah sediaan cair yang dibuat dengan mengekstraksi simplisia
nabati dengan air pada suhu 90° C selama 15 menit (Anonim, 1986).
Maserasi merupakan cara penyarian sederhana. Maserasi dilakukan dengan
cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari. Cairan penyari akan
menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat aktif,
zat aktif akan larut dan karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan zat aktif
di dalam sel dengan yang di luar sel, maka larutan yang terpekat didesak ke luar.
Peristiwa tersebut berulang, sehingga terjadi keseimbangan konsentrasi antara larutan
di luar sel dan di dalam sel. Maserasi digunakan untuk penyarian simplisia yang
mengandung zat aktif yang mudah larut dalam cairan penyari. Cairan penyari yang
digunakan dapat berupa air, etanol, air-etanol atau pelarut lain (Anonim, 1986).
Perkolasi adalah cara penyarian yang dilakukan dengan mengalirkan melalui
serbuk simplisia yang telah dibasahi. Prinsip perkolasi adalah sebagai berikut: serbuk
simplisia ditempatkan dalam suatu bejana silinder yang bagian bawahnya diberi
sekat berpori. Cairan penyari dialirkan dari atas ke bawah melalui serbuk tersebut,
sehingga cairan penyari akan melarutkan zat aktif sel-sel yang dilalui sampai
mencapai keadaan jenuh. Gerak ke bawah disebabkan oleh kekuatan gaya beratnya
sendiri dan cairan di atasnya, dikurangi dengan daya kapiler yang cenderung untuk
menahan (Anonim, 1986).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
18
Cara perkolasi lebih baik daripada dengan cara maserasi karena:
1. aliran cairan penyari menyebabkan adanya pergantian larutan yang terjadi dengan
larutan yang konsentrasinya lebih rendah, sehingga meningkatkan derajat
perbedaan konsentrasi,
2. ruangan di antara butir-butir serbuk simplisia membentuk saluran tempat
mengalir cairan penyari. Karena kecilnya saluran kapiler tersebut maka kecepatan
pelarut cukup untuk mengurangi lapisan batas sehingga dapat meningkatkan
perbedaan konsentrasi (Anonim,1986).
Alat yang digunakan untuk perkolasi disebut perkolator, cairan yang
digunakan untuk menyari disebut cairan penyari atau menstrum, larutan zat aktif
yang keluar dari perkolator disebut perkolat atau sari, sedangkan sisa setelah
penyarian disebut ampas atau sisa perkolasi (Anonim, 1986).
Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode perkolasi. Cairan
penyari yang digunakan dalam penelitian ini adalah etanol 70%. Etanol digunakan
sebagai penyari karena lebih selektif, kapang/kuman sulit tumbuh dalam etanol di
atas 20%, tidak beracun, bersifat netral, absorpsinya baik, dapat bercampur dengan
air, panas yang digunakan untuk pemekatan lebih sedikit, selain itu etanol mudah
diperoleh dan hanya untuk meningkatkan kemampuan penyariannya hanya perlu
ditambah air dengan perbandingan tergantung bahan yang disari (Anonim, 1986).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
C. Radikal Bebas dan Antioksidan
1. Radikal Bebas
Radikal bebas adalah suatu spesies yang mempunyai jumlah elektron ganjil
atau elektron yang tidak berpasangan tunggal pada lingkaran luarnya. Elektron tidak
berpasangan tersebut menyebabkan instabilasi dan bersifat reaktif. Radikal bebas
akan merusak molekul yang elektronnya ditarik oleh radikal bebas tersebut sehingga
menyebabkan kerusakan sel, gangguan fungsi sel, bahkan kematian sel. Molekul
utama di dalam tubuh yang dirusak oleh radikal bebas yaitu DNA, lemak, dan
protein (Setiati, 2003).
Radikal bebas diproduksi secara eksogen dan secara endogen. Secara endogen,
radikal bebas diproduksi oleh mitokondria, membran plasma, lisosom, retikulum
endoplasma, dan intisel. Sedangkan secara eksogen, radikal bebas berasal dari asap
rokok, polutan radiasi, obat-obatan, dan pestisida sumber utama reaksi radikal bebas
pada mamalia adalah pada rantai pernafasan, fagositosis, sintesis prostaglandin,
sistem sitokrom P-450, reaksi enzimatik O2, dan radiasi ion (Setiati, 2003). Radikal
bebas yang berlebihan akan menyebabkan kerusakan jaringan sehingga
menimbulkan nyeri. Dalam proses peradangan, radikal bebas terbentuk ketika asam
arakhidonat dikonversikan menjadi peroksida baik melalui jalur siklooksigenase
maupun lipoksigenase. Ketika terjadi kerusakan jaringan organ, jumlah radikal bebas
meningkat seiring dengan peningkatan produksi peroksida, padahal tubuh
memproduksi antioksidan endogen yang terbatas contohnya yaitu superoksida
dismutase (SOD), katalase, dan glutation peroksidase (GSH Px) yang bekerja
menstabilkan radikal bebas. Apabila jumlah radikal bebas makin banyak, antioksidan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
20
endogen tak mampu lagi melumpuhkannya secara efektif sehingga harus ada
tambahan antioksidan dari luar (eksogen) yang berasal dari bahan makanan (Sibuea,
2004).
Pengrusakan radikal bebas reaktif didahului oleh kerja kerusakan membran
sel, dengan terjadinya rangkaian proses sebagai berikut:
a. terjadi ikatan kovalen antara radikal bebas dengan komponen-komponen
membran (enzim-enzim membran, komponen karbohidrat membran plasma),
sehingga terjadi perubahan struktur dan fungsi reseptor;
b. oksidasi gugus tiol pada komponen membran oleh radikal bebas yang
menyebabkan proses transpor lintas membran terganggu;
c. reaksi peroksidasi lipid dan kolesterol membran yang mengandung asam lemak
tak jenuh. Hasil peroksidasi lipid membran oleh radikal bebas berefek langsung
terhadap kerusakan membran sel, antara lain dengan mengubah fluiditas, cross-
linking, struktur dan fungsi membran; dalam keadaan yang lebih ekstrim
akhirnya akan menyebabkan kematian sel.
(Gitawati, 1995).
Kerusakan struktur subseluler secara langsung mempengaruhi pengaturan
metabolisme. Sebagai contoh yaitu disrupsi/kerusakan membran lisosom
menyebabkan pelepasan enzim-enzim hidrolitik lisosom yang selanjutnya mampu
memperantarai pengrusakan intraseluler, dan memperkuat kemampuan radikal bebas
dalam menginduksi kerusakan sel (Gitawati, 1995).
Dengan bertambahnya usia, radikal bebas yang terbentuk selama
metabolisme normal dapat merusak DNA dan makromolekul lain sehingga terjadi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
21
penyakit-penyakit degeneratif, keganasan kematian sel-sel vital tertentu, yang pada
akhirnya akan menyebabkan proses penuaan dan kematian bagi individu tersebut
(Gitawati, 1995).
Ada beberapa zat yang dapat mengurangi reaksi radikal bebas dengan
memutuskan rantai reaksi, yaitu antara lain (1) enzim antioksidan (superoksid
dimutase (SOD), katalase, glutation peroksidase, dan SOD mimics), (2) spin trap, dan
(3) komponen yang memutuskan rantai (Setiati, 2003).
2. Antioksidan
Antioksidan adalah senyawa yang dalam kadar lebih rendah dibanding
bahan yang dapat dioksidasi, sangat memperlambat atau menghambat oksidasi dari
bahan tersebut. Antioksidan dapat berperan sebagai spesies oksigen reaktif radikal
bebas bergabung dengan zat lain untuk menimbulkan kerusakan pada sel-sel tubuh.
Secara alamiah tubuh memproduksi antioksidan yang mampu melindungi sel dari
radikal bebas (Sibuea, 2004). Peningkatan spesies oksigen reaktif ini juga dapat
menimbulkan berbagai bentuk kerusakan jaringan, padahal spesies oksigen reaktif ini
bertanggung jawab terhadap aksi xenobiotik tubuh (Middleton dkk, 2000 cit
Ladoangin, 2004).
Beberapa efek merugikan yang ditimbulkan akibat peningkatan spesies
oksigen reaktif yaitu pada sistem biologi meliputi peroksidasi membran lipid, bahaya
oksidasi asam nukleat dan karbohidrat, serta oksidasi sulfhidril dan bagian lain dari
protein. Pertahanan terhadap spesies oksigen reaktif dilakukan secara enzimatik
maupun non enzimatik. Antioksidan enzimatik meliputi superoksid dismutase (SOD),
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
22
catalase, dan glutation peroksidase. Antioksidan non enzimatik umumnya dapat
menangkap radikal bebas, baik organik maupun anorganik (Middleton dkk, 2000 cit
Ladoangin, 2004).
Menurut Setiati (2003), antioksidan dibedakan menjadi antioksidan eksogen
dan antioksidan endogen. Antioksidan endogen atau sering disebut antioksidan
primer terdiri atas enzim-enzim dan berbagai senyawa yang disintesis dalam tubuh
yang bekerja dengan cara mencegah pembentukan radikal bebas baru. Antioksidan
eksogen atau yang dikenal juga sebagai antioksidan sekunder karena menangkap
radikal dan mencegah reaksi berantai. Contohnya adalah vitamin E (tokoferol),
vitamin C (askorbat), karoten, asam urat bilirubin, dan albumin. Selain itu terdapat
juga antioksidan tersier yang memperbaiki kerusakan biomolekuler yang disebabkan
oleh radikal bebas, contohnya enzim yang memperbaiki DNA dan metionin
sulfoksida reduktase.
Menurut tempat aksinya pada fase air ataupun lipofil dari membran,
antioksidan dibagi menjadi water-soluble dan lipid-soluble. Vitamin C dan urate
termasuk dalam antioksidan hidrofil. Sedangkan retinoid, karotenoid, flavonoid, dan
vitamin A termasuk dalam antioksidan lipofil (Middleton dkk, 2000 cit Ladoangin,
2004).
Flavonoid telah dikenal dan merupakan suatu kelompok antioksidan
polifenol yang banyak terdapat pada sayuran, buah-buahan, dan beberapa minuman
seperti teh hijau dan anggur merah. Di dalam keluarga polifenol, flavonoid ternyata
mempunyai sifat antioksidan yang amat kuat yang mencapai 20 kali sifat antioksidan
vitamin E (Sitompul, 2003).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
23
Secara umum dapat dikatakan bahwa senyawa turunan flavonoid mampu
memberikan efek antioksidan antara lain karena adanya gugus fenolik dalam struktur
molekulnya. Ketika senyawa-senyawa ini bereaksi dengan radikal bebas maka
terbentuk radikal baru yang distabilisasi oleh efek resonanasi inti aromatik (Cuvelier,
1991 cit Hertiani, 2000).
D. Nyeri
Nyeri (pain) merupakan suatu gejala yang umum dan sering terjadi
mengikuti salah satu atau lebih penyakit. Hampir sebagian besar penyakit memberi
gejala nyeri yang dimanifestasikan dalam bentuk rasa sakit pada organ atau jaringan
pada tubuh (Anonim, 1991). Nyeri merupakan respon langsung terhadap kejadian/
peristiwa yang tidak menyenangkan yang berhubungan dengan kerusakan jaringan,
seperti, luka, inflamasi, atau kanker (Rang, et al, 2003)
Menurut Tjay dan Raharja (2002), nyeri adalah perasaan sensoris dan
emosional yang tidak enak dan yang berkaitan dengan (ancaman) kerusakan jaringan.
Keadaan psikis sangat mempengaruhi nyeri, misalnya emosi dapat menimbulkan rasa
sakit (kepala) atau memperhebatnya, tetapi dapat pula menghindarkan sensasi
rangsangan nyeri. Nyeri dikatakan pula sebagai suatu perasaan pribadi dimana
ambang toleransi nyeri berbeda-beda bagi setiap orang. Ambang nyeri didefinisikan
sebagai tingkat (level) dimana nyeri dirasakan untuk pertama kali. Sedangkan
menurut Guyton dan Hall (1996), nyeri merupakan suatu mekanisme pertahanan
tubuh, yang timbul bila ada jaringan yang rusak. Hal ini menyebabkan individu
bereaksi dengan cara memindahkan stimulus nyeri.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
24
Menurut tempat terjadinya, nyeri terbagi atas nyeri somatik dan nyeri
dalaman (viseral). Dikatakan nyeri somatik apabila rasa nyeri berasal dari kulit, otot,
persendian, tulang, atau dari jaringan ikat. Nyeri somatik dibagi atas 2 (dua) kualitas
yaitu nyeri permukaan dan nyeri dalam. Disebut nyeri permukaan apabila rangsang
bertempat di dalam kulit, sedangakan disebut nyeri dalam apabila rangsang berasal
dari otot, prsendian tulang dan jaringan ikat. Nyeri dalam (viseral) atau nyeri perut
mirip dengan nyeri dalam sifat menekannya dan reaksi vegetatif yang menyertainya.
Nyeri ini terjadi antara lain pada tegangan organ perut, kejang otot polos, aliran
darah kurang dan penyakit yang disertai radang (Mutschler, 1986). Pembagian
kualitas nyeri berdasarkan lokalisasi dapat dilihat pada gambar 8.
Nyeri permukaan
Nyeri I
Nyeri II
kulit Contoh Tusukan jarum, cubitan
Contoh Kejang otot, Sakit kepala
Nyeri dalaman
Otot Jaringan ikat Tulang Sendi
Contoh Kolik kantung empedu, Nyeri luka lambung
perut Nyeri viseral
Nyeri somatik
Gambar 8. Pembagian kualitas nyeri berdasarkan lokalisasi (Mutschler, 1986)
Bedasarkan perjalanannya, nyeri dapat dibedakan menjadi nyeri yang
sifatnya akut dan kronis. Pada nyeri yang sifatnya akut umumnya terjadi beberapa
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
25
saat setelah terjadinya lesi atau trauma jaringan, berlangsung singkat dan biasanya
cepat membaik bila diberi obat pengurang rasa nyeri (analgetika). Bila diberikan
stimulus nyeri, maka rasa nyeri akan timbul dalam waktu kira-kira 0,1 detik. Rasa
sakit akut juga digambarkan dengan banyak nama pengganti, seperti rasa sakit tajam,
rasa tertusuk, rasa sakit cepat, rasa sakit elektrik, dan sebagainya (Anonim, 1991;
Guyton dan Hall, 1996). Nyeri yang kronik umumnya berhubungan dengan
terjadinya lesi jaringan yang bersifat permanen, atau dapat sebagai kelanjutan dari
nyeri akut yang tidak ditangani dengan baik. Nyeri kronik ini biasanya berlangsung
lama, atau biasanya terjadi selama lebih dari 6 bulan. Rasa sakit kronik timbul
setelah satu detik atau lebih dan kemudian rasa sakit ini secara perlahan bertambah
untuk selama beberapa detik dan kadang kala sampai beberapa menit. Rasa sakit
kronik diberi banyak nama tambahan seperti rasa sakit terbakar, rasa sakit pegal, rasa
sakit berdenyut-denyut, rasa sakit mual, dan rasa sakit lambat. (Anonim, 1991;
Guyton dan Hall, 1996).
Nyeri timbul jika rangsang mekanik, termal, kimia, atau listrik melampaui
suatu nilai ambang tertentu (nilai ambang nyeri) dan karena itu menyebabkan
kerusakan jaringan dengan pembebasan yang disebut senyawa nyeri. Seperti telah
disebutkan, rangsang yang cukup untuk menimbulkan rasa nyeri ialah kerusakan
jaringan atau gangguan metabolisme jaringan. Di sini senyawa tubuh sendiri
dibebaskan dari sel-sel yang rusak, yang disebut zat nyeri (mediator nyeri), yang
menyebabkan perangsangan reseptor nyeri (Mutschler, 1986).
Mediator nyeri yang kini juga disebut autacoida, terdiri dari antara lain
histamin, serotonin, bradikinin, leukotrien, dan prostaglandin. Bradikinin adalah
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
26
polipeptida (rangkaian asam amino) yang dibentuk dari protein plasma.
Prostaglandin mirip strukturnya dengan asam lemak dari protein plasma. Struktur
prostaglandin mirip dengan asam lemak dan terbentuk dari asam arakhidonat.
Menurut perkiraan, zat-zat ini meningkatkan kepekaan ujung saraf sensoris bagi
rangsangan nyeri yang diakibatkan oleh mediator lainnya. Berhubung kerja dan
inaktivasinya pesat dan bersifat lokal, maka juga dinamakan hormon lokal (Tjay dan
Raharja, 2002).
Yang termasuk “zat nyeri” yang potensinya kecil adalah ion hidrogen. Pada
penurunan nilai pH di bawah 6 selalu terjadi rasa nyeri yang meningkat pada
kenaikan konsentrasi ion H+ lebih lanjut. Kerja lemah yang mirip dimiliki juga oleh
ion kalium yang keluar dari ruang intrasel setelah terjadi kerusakan jaringan dan
dalam interstisium pada konsentrasi >20 mmol/L menimbulkan rasa nyeri. Demikian
pula berbagai neurotransmiter bekerja sebagai zat nyeri pada kerusakan jaringan.
Histamin pada konsentrasi relatif tinggi (10-8 gram/L) terbukti sebagai zat nyeri.
Asetilkolin pada konsentrasi rendah mensensibilisasi reseptor nyeri terhadap zat
nyeri lain sehingga senyawa ini bersama-sama dengan senyawa yang dalam
konsentrasi yang sesuai secara sendiri tidak berkhasiat dapat menimbulkan nyeri.
Pada konsentrasi tinggi, asetilkolin bekerja sebagai zat nyeri yang berdiri sendiri.
Serotonin merupakan senyawa yang menimbulkan nyeri yang paling efektif dari
kelompok transmiter. Sebagai kelompok senyawa penting lain dalam hubungan ini
adalah kinin, khususnya bradikinin yang termasuk penyebab nyeri terkuat.
Prostaglandin yang dibentuk lebih banyak dalam peristiwa nyeri mensensibilitas
reseptor nyeri dan di samping itu menjadi penentu dalam nyeri lama (Mutschler,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
27
1986). Prostaglandin merupakan turunan asam lemak yang dibentuk endogen dengan
efek fisiologi yang besar. Biosintesisnya telah dibuktikan dalam setiap organ utama
tubuh manusia, walaupun dalam tingkat bervariasi.
Rangsangan atau noksius
Kerusakan jaringan
Pembentukan Kinin (misalnya: bradikinin)
Prostaglandin
Sensibilitas reseptor
Pembebasan: H+(pH < 6) K+ (> 20 mmol/L) Asetikolin Serotonin Histamine
Nyeri lama Nyeri pertama
Gambar 9. Mediator yang dapat menimbulkan rangsang nyeri setelah kerusakan jaringan (Mutschler, 1986)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
28
Rasa nyeri Penilaian nyeri Lokalisasi nyeri
korteks
Otak kecil
Reaksi pertahanan terkoordinasi
Sistem Limbik
Thalamus optikus
Formatio reticularis Reaksi vegetatif
Sumsum tulang Refleks pertahanan
Reseptor nyeri
Pembebasan zat mediator
Rangsang nyeri
Impuls penghantar nyeri yang meningkatReaksi nyeri Inhibisi nyeri endogen
Gambar 10. Terjadinya nyeri; penghantaran impuls; lokalisasi dan rasa nyeri serta inhibisi nyeri endogen (Mutschler, 1986)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
29
E. Analgetika
Analgetika adalah senyawa yang dalam dosis terapeutik dapat meringankan
atau menekan rasa nyeri, tanpa memiliki kerja anestesi umum (Mutschler, 1986).
Sedangkan Djamhuri (1996) mengatakan behwa analgetika adalah obat yang dapat
menghilangkan rasa nyeri dengan cara meningkatkan nilai ambang nyeri di sistem
saraf pusat (SSP) tanpa menekan kesadaran.
Obat-obat analgetika adalah kelompok obat yang memiliki aktivitas
menekan atau mengurangi rasa nyeri. Efek ini dapat dicapai dengan berbagai cara,
seperti menekan kepekaan reseptor terhadap rangsang nyeri mekanik, termik, listrik,
atau kimiawi di pusat atau dengan cara menghambat pembentukan prostalglandin
sebagai mediator nyeri (Anonim, 1991).
Pengobatan atau terapi untuk nyeri juga dapat dilakukan secara non
farmakologi yaitu antara lain dengan pengompresan dengan air panas, megalihkan
perhatian pasien dari penyakit atau rasa nyeri yang dideritanya, atau bisa juga
dilakukan terapi stimulasi. Transcutaneus electrical nerve stimulation (TENS) telah
terbukti berhasil dalam terapi nyeri akibat pembedahan atau sesudah operasi,
traumatik, nyeri oral-facial.
Selain itu juga dapat dilakukan pendekatan psikologi. Namun teknik
psikologi untuk treatment nyeri akut tidak digunakan secara luas. Teknik psikologi
lain yang berhasil meliputi latihan relaksasi, imagery, dan hipnotis (Dipiro, et al,
2005).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30
Secara umum analgetika dibagi menjadi tiga tipe (Turner, 1965), yaitu:
1. analgetika perifer, seperti asam salisilat digunakan sebagai analgetika untuk
radang jaringan, obat ini menekan suhu dan edema.
2. analgetika hipotalamus, seperti aminopirin, digunakan sebagai analgetika
normal dan radang jaringan, obat ini menekan suhu dan edema.
3. analgetika narkotika, digunakan sebagai analgetika normal dan radang
jaringan, obat ini mungkin mempunyai pengaruh yang kuat pada
penghilangan nyeri dan pada kejiwaan. Obat ini tidak mempunyai efek pada
suhu dan kejiwaan.
Menurur Mutschler (1986), berdasarkan potensi kerja, mekanisme kerja dan
efek samping analgetika dibedakan dalam dua kelompok, yaitu:
1. analgetika yang berkhasiat kuat, bekerja pada pusat (hipnoanalgetika,
‘kelompok Opiat’),
2. analgetika yang berkhasiat lemah (sampai sedang), bekerja terutama pada
perifer dengan sifat antipiretika kebanyakan juga mempunyai sifat
antiinflamasi dan antireumatik.
Berdasarkan kerja farmakologisnya, Tjay dan Rahardja (2002) membagi
analgetika dalam dua kelompok besar, yakni:
1. analgetika perifer (non-narkotik), yang terdiri dari obat-obat yang tidak
bersifat narkotik dan tidak bekerja sentral.
2. analgetika narkotik khusus digunakan untuk menghalau rasa nyeri hebat,
seperti pada fractura dan kanker.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
1. Analgetika narkotik
Analgetika narkotik, kini disebut juga opioida (= mirip opiat), adalah zat
yang bekerja terhadap reseptor opiod khas di SSP, hingga persepsi nyeri dan
respons emosional terhadap nyeri berubah (dikurangi) (Tjay dan Rahardja, 2002).
Analgetika kuat diindikasi pada kondisi nyeri yang sangat kuat yang jika
tidak, tak cukup untuk dipengaruhi. Di sini terutama nyeri akibat kecelakaan,
nyeri setelah operasi, dan nyeri tumor (Mutschler, 1986).
2. Analgetika non narkotika
Analgetika jenis ini, yang juga disebut analgetika yang bekerja perifer atau
‘kecil’, memiliki spektrum kerja farmakologi yang mirip walaupun struktur
kimianya berbeda. Di samping kerja analgetika, senyawa-senyawa ini
menunjukkan kerja antipiretika dan juga komponen kerja antiflogistika dengan
kekecualian turunan asetilanilida. Sebaliknya senyawa-senyawa ini tidak
mempunyai sifat-sifat psikotropik dan sifat sedasi dari hipnoanalgetika. Akibat
spektrum kerja ini, pemakaian luas dan karena itu termasuk pada bahan-bahan
obat yang paling banyak digunakan (Mutschler, 1986).
Istilah ‘analgetika berkhasiat lemah’ tidak benar untuk sifat-sifat dari
kelompok obat ini karena beberapa senyawa ini memiliki efek analgetik lebih
kuat jika dibandingkan hipnoanalgetika lemah. Walaupun demikian, untuk
membedakan dari hipnoanalgetika, pengertian ini telah diambil (Mutschler,
1986).
Obat ini mampu meringankan atau menghalau rasa nyeri, tanpa
mempengaruhi SSP atau menurunkan kesadaran, juga tidak menimbulkan
ketagihan. Kebanyakan zat ini juga berdaya antipiretis dan/ atau antiradang. Oleh
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
32
karena itu, obat ini tidak hanya digunakan sebagai obat antinyeri, melainkan juga
pada gangguan demam (infeksi virus/kuman, selesma, pilek) dan peradangan,
seperti rema dan encok. Obat ini banyak digunakan pada nyeri ringan sampai
sedang, yang penyebabnya beraneka ragam, misalnya nyeri kepala, gigi, otot atau
sendi (rema dan encok), perut, nyeri haid (dysmenorroe), nyeri akibat benturan,
atau kecelakaan (trauma) ( Tjay dan Rahardja, 2002).
Obat analgetika antipiretika serta obat anti-inflamasi nonsteroid (AINS)
merupakan suatu kelompok obat yang heterogen, bahkan beberapa obat sangat
berbeda secara kimia. Walaupun demikian obat-obat ini ternyata memiliki banyak
persamaan dalam efek terapi maupun efek samping. Prototip obat golongan ini
adalah aspirin (Wilmana, 1995).
Kemajuan penelitian dalam dasawarsa terakhir ini memberi penjelasan
mengapa kelompok heterogen tersebut memiliki kesamaan efek terapi dan efek
samping. Ternyata sebagian besar efek terapi dan efek sampingnya berdasarkan atas
penghambatan biosintesis prostaglandin (PG) (Wilmana, 1995).
Untuk mengerti kerja dan efek samping analgetika berkhasiat lemah,
penemuan Vane bahwa senyawa ini bekerja mempengaruhi proses sintesis
prostaglandin terbukti bermanfaat. Senyawa-senyawa ini menghambat sistem
siklooksigenase yang menyebabkan asam arakhidonat dan asam-asam C20 tak jenuh
lain menjadi endoperoksida siklik. Endoperoksida siklik merupakan prazat dari
prostaglandin, serta prazat dari tromboksan A2 dan prostasiklin (Mutschler, 1986).
Perombakan asam arakidonat dapat dilihat pada gambar 11.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
33
Gangguan membran sel
Fosfolipida
Asam arakhidonat
Lyso-glyseril fosforilkolin
PAF
leukotrien prostaglandin tromboksanprostasiklin
Vasodilatasi, kemotaksis Penghambat
lipoksigenase
OAINS
Rangsangan
Antagonis PAF
Lipooksigenase
siklooksigenase
Fosfolipase A2
Glukokortikoid (menginduksi
terbentuknya lipocortin)
mediator nyeri
nyeri
Gambar 11. Perombakan Asam Arakhidonat (Rang, et al, 2003)
Keterangan:
: menghambat : proses pembentukan
Kerusakan sel yang terkait dengan inflamasi berpengaruh pada selaput
membran sel yang menyebabkan leukosit mengeluarkan enzim-enzim liposomal,
arachidonic acid kemudian dilepaskan dari persenyawaan-persenyawaan terdahulu,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
dan berbagai eicosanoid disintesis. Pada jalur cyclooxygenase (COX) dari
metabolisme arakhidonat menghasilkan prostaglandin-prostaglandin, yang
mempunyai berbagai efek pada pembuluh darah, ujung saraf, dan pada sel-sel yang
terlibat dalam inflamasi. Penemuan isoform-isoform COX (COX-1 dan COX-2)
menjurus pada konsep bahwa isoform COX-1 yang konstitutif cenderung menjadi
homeostatis dalam fungsinya, sedangkan COX-2 diinduksi selama inflamasi dan
digunakan untuk memfasilitasi respons inflamasi (Katzung, 2002).
Jalur lipoxygenase dari metabolisme arakhidonat menghasilkan leukotrine
yang mempunyai efek kemotaksis yang kuat pada eosinofil, neutrofil, dan makrofag
serta meningkatkan bronkokonstriksi dan perubahan-perubahan dalam permeabilitas
dalam pembuluh darah (Katzung, 2002).
F. Asetosal
COOH
COOCH3
Gambar 12. Struktur molekul Asetosal
Asetosal memiliki pemerian hablur putih, umumnya seperti jarum atau
lempengan tersusun, atau serbuk hablur putih, tidak berbau atau berbau lemah.
Asetosal stabil di udara kering, di dalam udara lembab secara bertahap terhidrolisa
menjadi asam salisilat dan asam asetat. Asetosal sukar larut dalam air, mudah larut
dalam etanol, larut dalam kloroform dan eter, agak sukar larut dalam eter mutlak
(Anonim, 1995).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
35
Asetosal adalah obat anti-nyeri tertua yang hingga kini paling banyak
digunakan di seluruh dunia (Tjay dan Rahardja, 2002). Asam salisilat yang lebih
dikenal sebagai asetosal atau aspirin adalah analgetika antipiretika dan anti-inflamasi
yang sangat luas banyak digunakan dan digolongkan dalam obat bebas. Selain
sebagai prototip, obat ini merupakan standar dalam menilai efek obat sejenis
(Wilmana, 1995).
Salisilat bermanfaat untuk mengobati nyeri yang tidak spesifik misalnya
sakit kepala, nyerisendi, nyeri haid, neuralgia dan mialgia. Aspirin dosis terapi
bekerja cepat dan efektif sebagai antipiretik (Wilmana, 1995).
Asetosal bekerja dengan menghambat aktivitas prostaglandin G/H sintetase
atau yang dikenal lazim sebagai enzim siklooksigenase. Enzim siklooksigenase
merupakan katalisator pada tahap pertama pembentukan prostaglandin dan
tromboksan dari asam arakhidonat. Enzim siklooksigenase terdiri dari isoenzim yaitu
siklooksigenase I dan siklooksigenase II. Asetosal relatif lebih selektif terhadap
enzim siklooksigenase tipe I. Pada enzim siklooksigenase tipe I, asetosal bekerja
dengan mengasetilasi gugus hidroksil serin pada posisi 529 dari rantai polipeptida
sehingga dapat menghambat masuknya substrat dari sisi enzim akibat rintangan
sterik sehingga menyebabkan hilangnya aktivitas enzim secara irreversibel. Dengan
hilangnya aktivitas enzim sklooksigenase maka pembentukan mediator nyeri dapat
dihambat sehingga nyeri yang dirasakan dapat berkurang. Asetosal juga dapat
menghambat aktivitas enzim siklooksigenase tipe II dengan cara berbeda yaitu
dengan cara mengubah produk asam arakhidonat yang seharusnya Prostaglandin G1
menjadi asam 15 hidroksieisosatetraenoik (Dollery, 1999).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
G. Metode Pengujian Efek Analgesik
Metode-metode pengujian aktivitas analgetika dilakukan dengan menilai
kemampuan zat uji untuk menekan atau menghilangkan rasa nyeri yang diinduksi
pada hewan percobaan (mencit, tikus, marmot), yang meliputi induksi secara
makanik, termik, elektrik dan secara kimia. Metode pengujian dengan induksi nyeri
secara mekanik atau termik lebih sesuai untuk mengevaluasi obat-obat analgetika
kuat. Pada umumnya daya kerja analgetika dinilai pada hewan dengan mengukur
besarnya peningkatan stimulus nyeri yang harus diberikan sampai ada respon nyeri
atau jangka waktu ketahanan hewan terhadap stimulus nyeri atau jtga peranan
frekuensi respon nyeri (Anonim, 1991).
Secara umum, pengujian aktivitas analgetika dilakukan secara in vitro dan
in vivo. Uji in vitro lebih banyak dilakukan untuk menguji aktivitas analgetika sentral
yaitu dengan menguji kemampuan suatu zat uji dalam menduduki atau berikatan
dengan reseptor (Vogel, 2002).
Berdasarkan jenis analgetika, metode pengujian efek analgesik dibagi
menjadi 2 (Turner, 1965), yaitu:
1. golongan analgetika narkotika
a. metode jepitan ekor
Metode ini dilakukan dengan cara meletakkan mencit yang sudah diberi
senyawa uji dengan dosis tertentu secara subkutan atau intravena 30 menit
sebelumnya pada jepitan arteri yang dilapisi karet tipis selama 30 detik.
Mencit yang tidak diberi analgetika akan berusaha terus untuk melepaskan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
37
diri dari kekangan tersebut, sedangkan mencit yang diberi analgetika akan
mengabaikan kekangan tersebut.
b. metode rangsang panas
Metode ini dilakukan dengan cara menempatkan mencit yang sudah diberi
senyawa uji di atas pelat panas (hot plate) yang bersuhu 50º-55º C. Mencit
memberikan respon berupa mengangkat, menjilat telapak kakinya, melompat.
Hewan uji yang dibutuhkan tiap kelompok yaitu 5 ekor. Metode ini paling
sederhana dan efisien.
Evaluasi: efek analgesik dinyatakan positif jika waktu reaksi setelah
pemberian obat lebih besar dari 30 detik yang tejadi paling sedikitnya satu
kali, atau apabila paling sedikitnya tiga kali pembacaan memperlihatkan
waktu reaksi yang sama dengan atau lebih besar dari 3 kali rata-rata waktu
reaksi kelompok kontrol negatif (Anonim, 1991).
c. metode pengukuran tekanan
Alat yang digunakan pada metode ini menggunakan dua buah syringe yang
dihubungkan pada kedua ujungnya, bersifat elastis, fleksibel, serta terdapat
pipa plastik yang diisi dengan cairan. Sisi dari pipa dihubungkan dengan
manometer. Syringe yang pertama diletakkan dengan posisi vertikal dengan
ujungnya menghadap ke atas. Ekor tikus diletakkan di bawah penghisap
syringe. Ketika tekanan diberikan pada syringe kedua, maka tekanan akan
terhubung pada sistem hidrolik pada syringe yang pertama lalu pada ekor
tikus. Tekanan sama pada syringe kedua akan meningkatkan tekanan pada
ekor tikus, sehingga akan menimbulkan respon dan akan terbaca pada
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
38
manometer. Respon tikus yang pertama adalah meronta-ronta kemudian akan
mengeluarkan suara (mencicit) sebagai tanda kesakitan.
d. metode potensi petidin
Metode ini dilakukan dengan cara menyuntikkan petidin dengan dosis 2,4
mg/kg BB dan 8 mg/kg BB secara berturut-turut pada suatu kelompok hewan
uji dan petidin dosis tunggal, senyawa lain dan substansi lain yang akan
diteliti dengan dosis 25% dari LD50 pada kelompok hewan uji yang lain.
Persen daya analgesik dihitung dengan metode rangsang panas. Metode ini
memerlukan hewan uji yang cukup banyak.
e. metode antagonis nalorfin
Metode ini dilakukan dengan cara memberikan senyawa uji dengan dosis
toksik dan diikuti pemberian nalorpin dengan dosis 0,5-10,0 mg/kg BB secara
intravena pada hewan uji berupa mencit, tikus, atau anjing. Segera setelah itu
efek puncak dapat diamati. Nalorpin dapat menggantikan ikatan morfin
dengan reseptornya sehingga meniadakan efek analgesik morfin dan obat
analgesik lain yang mempunyai makanisme karja yang sama.
f. metode kejang oksitosin
Oksitosin merupakan hormon yang dihasilkan oleh kelenjar pituitori posterior,
yang dapat menyebabkan kontraksi uterin sehingga menimbulkan kejang
pada tikus. Hewan uji yang digunakan yaitu tikus betina dengan berat badan
120-140 mg, diberi estrogen dengan penanaman 15 mg dietilstilbestrol secara
subkutan pada paha hewan uji. Setelah 10 minggu, hewan uji siap untuk tes
daya analgesik. Senyawa yang akan diuji diberikan secara subkutan 15 menit
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
39
sebelum pemberian secara intraperitonial 2 unit oksitosin (dosis ED50).
Persen penurunan kejang dideterminasi dan ED50 dapat diperkirakan.
g. metode pencelupan pada air panas
Metode ini dilakukan dengan cara mencelupkan ekor mencit pada air
bertemperatur 580C, dimulai 15 menit setelah diinjeksikan substansi yang
diuji secara intraperitonial. Pencelupan diulang setiap 30 menit. Respon
mencit terlihat pada sentakan ekornya untuk menghindari air panas.
2. golongan analgetika non narkotika
a. metode induksi kimia
Pada metode ini digunakan rangsang kimia berupa zat kimia yang secara
intraperitonial pada mencit yang sudah diberi senyawa uji secara oral pada
selang waktu tertentu. Zat kimia yang biasa digunakan untuk memberikan
respon berupa nyeri yaitu fenilkuinon. Respon nyeri pada mencit adalah
geliat berupa kontraksi perut disertai tarikan kedua kaki belakang dan perut
menempel pada lantai. Geliat diamati setiap 5 menit selama 1 jam. Pemberian
analgesik akan mengurangi rasa nyeri sehingga jumlah geliat yang terjadi
berkurang. Penelitian ini menggunakan metode rangsang kimia sebagai
mentode pengujian efek analgesik karena metode ini sederhana, mudah
dilakukan, dan cukup peka untuk pengujian senyawa-senyawa yang memiliki
daya analgesik lemah. Daya analgesik dapat dievaluasi menggunakan persen
penghambatan terhadap geliat, yaitu:
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
40
% penghambatan terhadap geliat = 100 – [(P/K) x 100]
Keterangan: P = jumlah kumulatif geliat hewan uji setelah pmberian obat yang telah
ditetapkan K = jumlah rata-rata geliat hewn uji kelompok kontrol
b. metode pedolorimeter
Metode ini dilakukan dengan cara menempatkan mencit yang sudah diberi
senyawa uji pada tempat yang sudah berarus listrik dengan tegangan 20 volt.
Respon mencit yang ditimbulkn berupa suara mencicit. Pengukuran
dialkukan setiap 10 menit selama 1 jam. Senyawa uji yang mempunyai daya
analgesik dapat menaikkan tegangan untuk dapat menimbulkan teriakan
mencit.
c. metode rektodolometer
Pada metode ini hewan uji tikus diletakkan dalam sebuah kandang yang
dibuat khusus dengan menggunakan alas tembaga yang kemudian
dihubungkan dengan sebuah gulungan yang berfungsi sebagai penginduksi.
Ujung lain dari gulungan tersebut dihubungkan dengan silinder elektroda
tembaga. Pada gulungan bagian atas terdapat suatu konduktor yang
dihubungkan dengan suatu voltmeter yang sensitif untuk dapat mengubah 0,1
volt. Respon berupa suara teriakan tikus dapat ditimbulkan dengan pemberian
teganagn sebesar 1 sampai 2 volt.
H. Landasan Teori
Menurut Tjay dan Raharja (2002), nyeri adalah perasaan sensoris dan
emosional yang tidak enak dan yang berkaitan dengan (ancaman) kerusakan jaringan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
41
Hampir sebagian besar penyakit memberi gejala nyeri yang dimanifestasikan dalam
bentuk rasa sakit pada organ atau jaringan pada tubuh (Anonim, 1991).
Kandungan kimia tumbuhan senggani pada bagian daun adalah flavonoid,
steroid/ triterpenoid, tanin 4,3 % (Anonim, 1995). Daun mengandung saponin
(Dalimartha, 1999). Sedangkan menurut Sulaiman, et al. (2004), pada analisis
fitokimia dari ekstrak daun dan akar senggani mengandung β-sitosterol, α-amyrin,
sitosterol 3-O-β-D-glucopiranoside, kuersetin, kuersitrin, dan rutin.
Radikal bebas adalah suatu spesies yang mempunyai jumlah elektron ganjil
atau elektron yang tidak berpasangan tunggal pada lingkaran luarnya. Elektron tidak
berpasangan tersebut menyebabkan instabilasi dan bersifat reaktif. Radikal bebas
akan merusak molekul yang elektronnya ditarik oleh radikal bebas tersebut sehingga
menyebabkan kerusakan sel, gangguan fungsi sel, bahkan kematian sel (Setiati,
2003).
Antioksidan adalah senyawa yang dalam kadar lebih rendah dibanding
bahan yang dapat dioksidasi, sangat memperlambat atau menghambat oksidasi dari
bahan tersebut (Sibuea, 2004). Flavonoid telah dikenal dan merupakan suatu
kelompok antioksidan polifenol yang mempunyai sifat antioksidan yang amat kuat
mencapai 20 kali sifat antioksidan vitamin E (Sitompul, 2003).
Flavonoid umumnya larut dalam air dan dapat diekstraksi dengan etanol
70%. Selain flavonoid, zat kimia dalam tumbuhan yang dapat larut dalam etanol
yaitu saponin dan tanin (Harborne, 1984). Sehingga pada penelitian ini diharapkan
senyawa aktif yang terkandung dalam daun senggani dapat terekstraksi dengan baik
dan dapat memberi efek analgesik.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
42
I. Hipotesis
Ekstrak etanol daun senggani memiliki efek analgesik terhadap mencit putih
betina.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
43
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini merupakan jenis penelitian eksperimental murni dengan
menggunakan rancangan acak lengkap pola satu arah.
B. Metode Penelitian
Metode pengujian efek analgesik yang digunakan pada penelitian ini
yaitu metode rangsang kimia. Pada metode ini digunakan rangsang kimia berupa
asam asetat yang diberikan secara intraperitoneal pada mencit yang sudah diberi
senyawa uji secara per oral pada selang waktu tertentu. Respon nyeri pada mencit
adalah geliat berupa kontraksi perut disertai tarikan kedua kaki belakang dan perut
menempel pada lantai. Geliat diamati setiap 5 menit selama 1 jam. Pemberian
analgesik akan mengurangi rasa nyeri sehingga jumlah geliat yang terjadi
berkurang. Daya analgesik dapat dievaluasi menggunakan persen penghambatan
terhadap geliat, yaitu:
% penghambatan terhadap geliat = 100 – [(P/K) x 100]
Keterangan: P = jumlah kumulatif geliat hewan uji setelah pemberian obat
yang telah ditetapkan K = jumlah rata-rata geliat hewn uji kelompok kontrol
Metode ini dipilih karena metode ini sederhana, mudah dilakukan, serta
peka untuk pengujian senyawa-senyawa yang memiliki daya analgesik lemah.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
44
C. Variabel Operasional
1. variabel
Variabel penelitian ini meliputi:
a. variabel bebas : dosis ekstrak etanol daun senggani per kg berat
badan mencit putih betina.
b. variabel tergantung : prosentase daya analgesik ekstrak etanol daun
senggani terhadap mencit putih betina.
c. variabel pengacau terkendali :
1) subyek uji : mencit betina galur Swiss
2) umur subyek : 2-3 bulan
3) berat badan : 20-30 gram
4) keadan subyek uji : sehat
5) asal tanaman senggani : BPTO Tawangmangu, Solo, Jawa Tengah
6) proses isolasi senyawa kimia daun senggani menggunakan penyari
etanol 70% dengan metode perkolasi dimana proses ekstraksi
dihentikan sampai ekstrak yang keluar berwarna putih bening
d. variabel pengacau tak terkendali :
1) suhu pemanasan saat proses penguapan ekstrak etanol daun senggani
2) kemampuan absorbsi mencit terhadap ekstrak etanol daun senggani
2. definisi operasional
a. dosis ekstrak etanol daun senggani
Dosis diperoleh dengan cara mencari konsentrasi maksimum ekstrak
etanol daun senggani dalam CMC-Na 1% yaitu sebesar 5%, sehingga
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
45
didapat dosis maksimum. Kemudian dibuat empat peringkat dosis dengan
mengalikan dengan satu bilangan tertentu sehingga didapat suatu deret
ukur.
b. daya analgesik
daya analgesik menunjukkan seberapa besar suatu zat tertentu dalam
memberi efek analgesik, yang ditunjukkan dengan besarnya nilai persen
penghambatan terhadap respon (geliat).
c. uji daya analgesik
uji daya analgesik menggunakan metode rangsang kimia yaitu suatu
metode uji analgesik yang menggunakan rangsang kimia berupa zat kimia
yang diberikan secara intraperitoneal pada mencit yang sudah diberi
senyawa uji secara oral pada selang waktu tertentu. Respon nyeri pada
mencit adalah geliat berupa kontraksi perut disertai tarikan kedua kaki
belakang dan perut menempel pada lantai. Geliat diamati setiap 5 menit
selama 1 jam.
d. ekstrak etanol
ekstrak etanol diperoleh dengan cara mengekstraksi bahan, yaitu daun
senggani, dalam pelarut etanol dengan menggunakan metode perkolasi.
Sehingga didapat ekstrak etanol daun senggani.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
46
D. Bahan Penelitian
1. Bahan
a. Hewan uji
Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini berupa mencit betina,
galur Swiss, berat 20-30 gram, umur 2-3 bulan, yang diperoleh dari
Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta.
b. Daun Senggani
Bahan uji yang digunakan berupa daun senggani (Melastoma polyanthum,
Bl.) yang diperoleh dari Badan Penelitian Tanaman Obat, Tawangmangu,
Kabupaten Karang Anyar, Jawa Tengah pada bulan Mei 2006.
2. Bahan Kimia
a. Asetosal : berupa hablur tidak berwarna atau serbuk hablur putih;
tidak berbau atau hampir tidak berbau; rasa asam. Khasiat dan penggunaan
sebagai analgetikum, antipiretikum (Anonim, 1979). Asetosal yang
digunakan dalam penelitian diproduksi oleh Brataco Chemika dengan
kualitas farmasetis.
b. CMC Na : berupa serbuk halus atau berbentuk granul berwarna putih,
bersifat higroskopis (Anonim, 1995), diproduksi oleh Brataco Chemika
dengan kualitas farmasetis.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
47
c. Asam asetat : berupa cairan jernih; tidak berwarna; bau khas, tajam jika
diencerkan dengan air; rasa asam (Anonim, 1979), diproduksi oleh Merck
dengan kualitas teknis.
E. Alat atau Instrumen Penelitian
Peralatan yang digunakan seperti di bawah ini:
1. Alat Ekstraksi
a. Seperangkat alat gelas berupa bekker glass, erlenmeyer, gelas ukur, labu
ukur, cawan porselen, pipet tetes, batang pengaduk.
b. Perkolator
c. Waterbath
d. Neraca merek mettler Toledo
2. Alat Uji Geliat
a. kotak kaca tempat pengamatan geliat
b. stopwatch
c. jarum yang digunakan untuk pemberian per oral, berupa jarum yang
ujungnya berbentuk bulat dan berlubang di bagian tengah
d. spuit injeksi yang memiliki ujung runcing dan digunakan untuk pemberian
secara intraperitoneal dengan merek Terumo
3. Lain-lain
a. neraca analitik merek Mettler Toledo
b. timbangan merek Mettler Toledo
c. pemanas merek Ika Combimag Net
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
48
F. Tata Cara Penelitian
Penelitian ini dilakukan menurut tata cara sebagai berikut:
1. Pengumpulan bahan
a. bahan uji yang digunakan yaitu daun senggani yang diperoleh dari Badan
Penelitian Tanaman Obat, Tawangmangu, Kabupaten Karanganyar, Jawa
Tengah pada bulan Mei 2006.
b. Bahan kimia yang digunakan yaitu: etanol, asetosal, CMC Na, dan asam
asetat yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi,
aquadest yang diproduksi oleh Laboratorium Kimia Organik, Fakultas
Farmasi, Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
2. Pembuatan ekstrak etanol daun senggani
Daun senggani yang sudah dikeringkan, diblender sampai halus. Seratus
lima puluh gram serbuk daun senggani yang telah dibasahi terlebih dahulu
dengan etanol 70% dimasukkan ke dalam perkolator, kemudian direndam
dengan etanol 70% sampai mencapai ketinggian 1,5 cm di atas permukaan
serbuk selama 24 jam. Kran perkolator dibuka dan kecepatan aliran diatur
sehingga tiap 1 menit didapat perkolat sebanyak 20 tetes. Selama proses
perkolasi berlangsung tinggi etanol di atas permukaan serbuk harus tetap 1-1,5
cm. Perkolat ditampung dalam erlenmeyer. Ekstraksi dihentikan jika perkolat
yang keluar berwarna bening. Perkolat yang diperoleh diuapkan di atas
waterbath hingga diperoleh perkolat yang kental (pekat). Ekstrak pekat
kemudian disimpan di dalam lemari pendingin (kulkas).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
49
3. Pembuatan larutan CMC Na 1%
Larutan CMC Na 1% dibuat dengan cara menimbang dengan seksama
250 mg serbuk CMC Na kemudian ditaburkan di atas air panas sedikit demi
sedikit hingga mengembang sambil diaduk. Setelah terbentuk larutan
kemudian dimasukkan dalam labu ukur 25 mL dan ditambah aquadest hingga
25 mL lalu digojog.
4. Pembuatan suspensi asetosal 0,5% dalam CMC Na 1%
Asetosal yang digunakan sebagai kontrol positif ditimbang seksama
sebanyak 125 mg dan disuspensikan ke dalam suspensi CMC Na 1% volume
25 mL.
5. Pembuatan asam asetat 1%
Larutan asam asetat ini dibuat dari larutan asam asetat glasial 100% v/v
dengan pengenceran menggunakan rumus volume1 x konsentrasi1 = volume2 x
konsentrasi2. Sebanyak 0,25 mL asam asetat 100% diencerkan dengan
aquadest hingga volume 25,0 mL menggunakan labu ukur 25 mL.
6. Pembuatan suspensi ekstrak etanol daun senggani 4% dalam CMC Na
1%
Ekstrak etanol daun senggani ditimbang seberat 400,0 mg kemudian
dilarutkan dalam CMC Na 1%. Setelah itu, ditambahkan larutan CMC Na 1%
sampai volume 10,0 mL.
7. Penetapan kriteria geliat
Respon yang diamati pada uji daya analgesik ini berupa geliat. Kriteria
geliat perlu ditetapkan untuk mendapatkan geliat yang hampir sama. Pedoman
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
50
gerakan mencit yang dianggap sebagai geliat adalah apabila mencit menarik
kedua kaki belakang ke belakang dengan mengempiskan perutnya sehingga
permukaan perut menempel pada alas tempat berpijak mencit itu, yaitu alas
pada kotak kaca tempat pengamatan. Respon geliat yang timbul merupakan
akibat dari pemberian asam asetat yang bersifat mengiritasi jaringan dan
diberikan secara intraperitoneal. Adanya jaringan yang rusak mengakibatkan
timbulnya rasa sakit dan mencit memberikan respon geliat.
8. Penetapan kadar dan dosis asam asetat
Menurut Williamson (1996) asam asetat kadar 1-3 % digunakan sebagai
iritant yang menyebabkan nyeri pada pengujian daya analgesik dengan
metode geliat. Sumber lain menyebutkan bahwa asam asetat 1% sudah dapat
menimbulkan geliat yang cukup banyak selama pengamatan (Putra, 2004).
Penetapan dosis asam asetat menggunakan tiga peringkat dosis, yaitiu 25
mg/kg BB, 50 mg/kg BB, dan 100 mg/kg BB. Sebanyak sembilan ekor hewan
uji, mencit betina, galur Swiss, berat 20-30 gram, umur 2-3 bulan yang telah
dipuasakan ± 18-22 jam dibagi ke dalam 3 kelompok. Masing-masing
kelompok terdiri dari 3 ekor mencit diinjeksi secara intraperitoneal dengan
asam asetat 1% berturut-turut dengan dosis 25 mg/kg BB, 50 mg/kg BB, dan
100 mg/kg BB untuk tiap kelompoknya. Setelah itu diamati geliatnya selama
60 menit dan dicatat jumlah geliat tiap 5 menit. Kelompok dosis yang
menunjukkan jumlah geliat paling banyak digunakan sebagai kontrol negatif,
yaitu yang memberikan jumlah geliat yang tidak terlalu sedikit dan tidak
terlalu banyak akan menyulitkan pengamatan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
51
9. Penetapan kontrol negatif
Penetapan kontrol negatif ini bertujuan untuk mengetahui zat yang tidak
memiliki daya analgesik, sehingga dapat digunakan untuk membandingkan
dengan zat uji. Kontrol negatif yang digunakan untuk pembanding yaitu
aquadest dan CMC Na 1%. Dua senyawa tersebut diberikan pada hewan uji
dengan menghitung volume pemberian sesuai dengan berat badan hewan uji.
Jika kedua kelompok tersebut tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna
maka digunakan kelompok CMC Na% untuk perhitungan daya analgesik,
yang pada penelitian ini digunakan sebagai pensuspensi zat uji.
10. Penetapan selang waktu pemberian rangsang
Penetapan selang waktu pemberian rangsang bertujuan untuk
mengetahui waktu zat uji memberikan efek analgesik secara optimal. Rentang
waktu yang diujikan adalah 5, 10, dan 15 menit. Sebanyak sembilan ekor
hewan uji, mencit betina, galur Swiss, berat 20-30 gram, umur 2-3 bulan yang
telah dipuasakan ± 18-22 jam dibagi ke dalam 3 kelompok. Masing-masing
kelompok terdiri dari 3 ekor mencit diinjeksi secara intraperitoneal dengan
asam asetat 1% menggunakan dosis efektif asam asetat yang diperoleh dari
penetapan dosis asam asetat dengan selang waktu 5, 10, dan 15 menit.
11. Penetapan dosis dan kadar asetosal
Dosis asetosal yang digunakan dalam penelitian ini adalah dosis lazim
0,5 g. Jika dikonversikan pada mencit maka dosisnya dihitung sebagai berikut:
Berat badan manusia Indonesia adalah 50 kg. Faktor konversi dengan
pedoman manusia Eropa 70 kg adalah 70/50 kg = 0,7 g atau 700 mg. Konversi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
52
dari manusia ke mencit adalah 0,0026 x 700 mg = 1,82 mg. Maka dosis
asetosal adalah:
1000/ 20 x 1,82 mg/kg BB yaitu 91 mg/kg BB. Untuk menetapkan dosis
asetosal digunakan tiga peringkat dosis yaitu 68,25 mg/kg BB, 91 mg/kg BB,
dan 113,75 mg/kg BB.
Dalam penetapan dosis asetosal digunakan 9 ekor mencit yang dibagi
dalam tiga kelompok. Masing-masing kelompok terdiri dari 3 ekor mencit,
galur Swiss, berat 20-30 gram, umur 2-3 bulan yang telah dipuasakan ± 18-22
jam sebelumnya. Tiap- tiap kelompok diberi suspensi asetosal dengan tiga
peringkat dosis. Kemudian mencit diinjeksi dengan asam asetat secara
intraperitoneal dengan selang waktu yang paling efektif dari penetapan waktu
waktu pemberian asam asetat yaitu 10 menit dan menggunakan dosis yang
paling efektif dari penetapan dosis asam asetat yaitu 50 mg/kg BB. Geliat
mencit yang timbul diamati selama 60 menit dengan dicatat jumlah geliatnya
tiap 5 menit. Kelompok dosis yang paling efektif digunakan sebagai kontrol
positif.
Kadar asetosal yang digunakan sebesar 0,5% dengan mengikuti
penelitian terlebih dahulu yang telah melakukan orientasi menggunakan
berbagai kadar tertentu.
12. Penetapan dosis dan kadar ekstrak etanol daun senggani
Penetapan dosis dan kadar berdasarkan orientasi dimulai dari dosis
1 g/kg BB (Williamson et al., 1996). Kadar ekstrak etanol daun senggani
dibuat 5 % agar dalam pemberiannya tidak melebihi volume pemberian
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
53
maksimum mencit per oral, yaitu 1 mL. Dari hasil orientasi dosis dan kadar
tersebut ternyata memberikan efek analgesik sehingga dari dosis awal tersebut
kemudian ditetapkan tiga peringkat dosis dengan cara menentukan
kelipatannya. Dalam penelitian ini digunakan angka kelipatan sebesar 1,26
kalinya, sehingga didapatkan 3 peringkat dosis lainnya yaitu : 1330 mg/kg BB
(1,26 x dosis 1000 mg/kg BB), 1670 mg/kg BB (1,26 x dosis 1330 mg/kg
BB), 850 mg/kg BB (dosis 1000 mg/kg BB dibagi 1,26).
13. Seleksi hewan uji
Hewan uji yang digunakan yaitu mencit putih betina galur Swiss, berat
20-30 gram, umur 2-3 bulan. Semua hewan uji dipelihara dengan kondisi
perlakuan yang sama meliputi: pakan, minum, kandang, dan alasnya. Sebelum
digunakan dalam percobaan, semu hewan uji diadaptasikan terlebih dahulu
dengan kondisi yang sama. Bila akan digunakan dalam perlakuan, hewan uji
dipuasakan terlebih dahulu selama ± 18-22 jam tanpa diberi makan, tetapi
tetap diberi minum. Hal ini bertujuan untuk mengurangi variasi akibat adanya
makanan.
14. Perlakuan hewan uji
Hewan uji yang digunakan dalan penelitian ini dibagi menjadi dua
kelompok, yaitu kelompok orientasi dan kelompok perlakuan. Pada kelompok
perlakuan, hewan uji dibagi secara acak menjadi enam kelompok meliputi:
kelompok I yaitu kelompok kontrol negatif diberi CMC Na 1%, kelompok II
yaitu kelompok kontrol positif diberi asetosal 91 mg/kg BB, kelompok III-VI
yaitu kelompok perlakuan diberi ekstrak etanol daun senggani dengan empat
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
54
peringkat dosis berturut-turut yaitu 850 mg/kg BB, 1000 mg/kg BB, 1330
mg/kg BB, dan 1670 mg/kg BB secara per oral. Sepuluh menit sesudah
perlakuan, hewan uji diinjeksi dengan asam asetat 1% dosis 50 mg/kg BB
secara intraperitoneal. Penentuan daya analgesik atau penghambatan terhadap
geliat dilakukan dengan pengamatan respon nyeri berupa geliat pada hewan
uji akibat pemberian asam asetat tersebut. Pengamatan dilakukan tiap 5 menit
selama 60 menit. Data yang diperoleh berupa jumlah kumulatif geliat
kemudian dihitung persen penghambatan terhadap geliat, yaitu:
% penghambatan terhadap rangsang = 100 – [(P/K) x 100]
Keterangan:
P = jumlah kumulatif geliat hewan uji setelah pmberian obat yang telah ditetapkan K = jumlah rata-rata geliat hewn uji kelompok kontrol
Perubahan persen penghambatan geliat terhadap asetosal dosis 91
mg/kg BB sebagai kontrol positif pada tiap kelompok perlakuan dihitung
dengan rumus:
% perubahan penghambatan rangsang = 100)( xKp
KpP−
Keterangan:
P = % penghambatan terhadap geliat pada setiap kelompok perlakuan Kp = rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada kelompok kontrol positif
G. Analisis Hasil
Data awal dianalisis dengan uji distribusi Kolmogorof-Smirnov. Setelah
diketahui distribusi normal dilanjutkan dengan analisis statistik ANOVA satu arah
untuk melihat adanya perbedaab antar kelompok perlakuan. Untuk menguji
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
55
adanya perbedaan nyata antara kelompok satu dengan yang lain dilakukan uji
Scheffe dengan taraf kepercayaan 95%. Pada penetapan kontrol negatif digunakan
analisis Independent-Samples T-test dengan taraf kepercayaan 95% untuk
mengetahui adanya perbedaan di antara kedua perlakuan. Skema kerja penelitian
dapat dilihat pada gambar 13.
Hewan uji (5 ekor/ kelompok) Diberi perlakuan secara oral
Kontrol negatif
(CMC Na 1%)
Kontrol positif
(Asetosal 19 mg/kg
BB)
Ekstrak Senggani
850 mg/kg BB
Ekstrak Senggani
1000 mg/kg BB
Ekstrak Senggani
1330 mg/kg BB
Ekstrak Senggani
1670 mg/kg BB
↓
Injeksi dengan asam asetat 1% dosis 50 mg/kg BB secara intraperitoneal
↓
Hitung jumlah geliat tiap 5 menit selama 60 menit
↓
Hitung % penghambatan terhadap geliat
↓
Hitung analisis statistik ANOVA satu arah dilanjutkan dengan uji Scheffe dengan taraf kepercayaan 95%
Gambar 13. Skema kerja penelitian
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Senggani
Pembuatan ekstrak etanol daun senggani dilakukan dengan metode
perkolasi. Metode perkolasi dipilih sebagai metode penyarian karena dengan
metode ini senyawa lebih mudah terekstrak, sehingga diharapkan senyawa yang
terekstrak lebih banyak. Pelarut yang digunakan dalam proses penyarian yaitu
etanol 70%.
Sebelum dilakukan ekstraksi, daun senggani diserbuk terlebih dahulu. Hal
ini bertujuan agar kandungan fitokimia yang terkandung dalam daun Senggani
lebih mudah terekstrak karena luas permukaan serbuk yang kontak dengan pelarut
semakin besar. Serbuk daun senggani sebanyak 300 gram direndam dengan
menggunakan pelarut etanol 70% di dalam erlenmeyer selama 24 jam.
Perendaman ini bertujuan agar senyawa kimia yang terkandung dalam tumbuhan
dapat larut dalam pelarut.
Setelah perendaman selama 24 jam, campuran serbuk daun senggani dan
petroleum eter dimasukkan ke dalam perkolator. Kran perkolator dibuka dan
kecepatan penetesan larutan penyari adalah 3 ml permenit. Selama proses
perkolasi berlangsung, tinggi pelarut harus tetap 1-2 cm di atas permukaan serbuk.
Perkolat ditampung dalam erlenmeyer. Perkolasi dihentikan jika perkolat yang
diperoleh sudah tidak berwarna lagi (bening). Perkolat yang diperoleh diuapkan di
atas waterbath hingga diperoleh perkolat yang kental (pekat).
56
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Ekstrak etanol daun senggani yang didapat memberikan ciri organoleptis
sebagai berikut ini.
Bentuk : ekstrak kental
Warna : coklat kehitaman
Bau : khas
Rasa : pahit
Untuk uji-uji selanjutnya ekstrak etanol daun senggani ini disuspensikan
dalam larutan CMC-Na1%. Dari hasil orientasi dipilih konsentrasi ekstrak etanol
daun senggani dalam CMC-Na sebesar 5%, karena konsentrasi ini merupakan
konsentrasi maksimum suspensi ini dapat dimasukkan dan dikeluarkan dari spuit
oral 1 mL.
B. Uji Pendahuluan
Sebelum dilakukan pengujian efek analgesik dari ekstrak etanol daun
senggani, sebelumnya dilakukan terlebih dahulu uji pendahuluan. Uji
pendahuluan ini bertujuan untuk menetapkan hal-hal yang akan dilakukan pada
pengujian sebenarnya, agar didapat hasil yang lebih valid dan akurat. Adapun uji
pendahuluan tersebut meliputi penetapan kriteria geliat, penetapan dosis asam
asetat, penentuan kontrol negatif, penetapan selang waktu pemberian rangsang,
dan penentuan dosis asetosal. Pada uji pendahuluan ini digunakan subyek uji
dengan ketentuan yang sama dengan subyek uji yang digunakan pada uji yang
sebenarnya yaitu mencit betina, galur Swiss, umur 2-3 bulan, dan berat badan 20-
57
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30 gram. Semua hewan uji dipuasakan terlebih dahulu ± 18-22 jam, tidak diberi
pakan namun tetap diberi minum.
1. Penentuan kriteria geliat
Penentuan kriteria geliat perlu dilakukan agar geliat yang diamati dapat
sama atau seragam sehingga pengamatan menjadi lebih mudah dan spesifik serta
data yang didapat menjadi lebih valid. Pedoman gerakan mencit yang dianggap
sebagai geliat adalah apabila mencit menarik kedua kaki belakang ke belakang
dengan mengempiskan perutnya sehingga permukaan perut menempel pada alas
tempat berpijak mencit itu, yaitu alas pada kotak kaca tempat pengamatan. Respon
geliat yang timbul merupakan akibat dari pemberian asam asetat 1% dengan dosis
50 mg/kg BB yang bersifat mengiritasi jaringan dan diberikan secara
intraperitonial. Adanya jaringan yang rusak mengakibatkan timbulnya rasa sakit
dan mencit memberikan respon geliat.
2. Penetapan dosis asam asetat
Penelitian ini menggunakan metode induksi kimia, dimana hewan uji diberi
zat kimia berupa asam asetat yang dapat menimbulkan rasa nyeri. Adanya ion H+
akan mengiritasi jaringan lokal sehingga muncul rasa nyeri. Asam asetat diberikan
pada subyek uji secara intraperitonial. Penentuan dosis asam asetat ini bertujuan
untuk mengetahui dosis efektif asam asetat yang dapat memberikan geliat pada
mencit, sehingga geliat yang teramati tidak terlalu banyak dan tidak terlalu sedikit.
Jika geliat yang muncul terlalu banyak dapat menyulitkan dalam pengamatan,
namun juga tidak terlalu sedikit supaya cukup untuk diamati selama 1 jam.
58
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Pada penetapan dosis asam asetat digunakan tiga peringkat dosis yaitu 25
mg/kgBB; 50 mg/kgBB; dan 100 mg/kgBB, sedangkan konsentrasi asam asetat
yang digunakan yaitu 1% karena pada penelitian-penelitian terdahulu dakatakan
bahwa konsentrasi 1% asam asetat sudah dapat memnberikan rangsang nyeri pada
mencit (subyek uji). Masing-masing dosis diujikan pada 3 ekor hewan uji dengan
rute pemberian intraperitoneal kemudian respon geliat diamati tiap 5 menit selama
60 menit. Data jumlah geliat pada penetapan dosis asam asetat serta hasil analisis
statistiknya dapat dilihat pada lampiran 2 serta ringkasannya dapat dilihat pada
tabel I.
Tabel I. Rata-rata jumlah kumulatif geliat hewan uji pada penetapan dosis efektif asam asetat
Dosis asam asetat (mg/kgBB)
Rata-rata jumlah kumulatif geliat (X ± SE)
25 45,67 ± 10,67 50 124 ± 7,77
100 145 ± 11,72 Rata-rata kumulatif geliat yang muncul pada penetapan dosis efektif asam
asetat dapat pula disajikan dalam bentuk diagram batang seperti pada gambar 14.
0
20
40
60
80
100
120
140
160
rata
-rata
jum
lah
kum
ulat
if ge
liat
25 50 100
dosis asam asetat (mg/kgBB)
Gambar 14. Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat pada penetapan dosis efektif asam asetat
59
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Ringkasan data statistik analisis variansi satu arah pada penetapan dosis
efektif asam asetat dapat dilihat pada tabel II.
Tabel II. Ringkasan analisis variansi satu arah pada penetapan dosis efektif asam asetat
Sumber variansi
Jumlah kuadrat
Derajat bebas
Rata-rata kuadrat
F hitung Probabilitas
Antar perlakuan
16444,222
2 8222,111
Error percobaan
(dalam kelompok)
1868,67 6 311,444
26,400
0,001
Dari hasil statistik tersebut diperoleh probabilitasnya lebih kecil dari 0,05
(p < 0,05) yaitu 0,001, yang menunjukkan bahwa terdapat perbedaan antara ketiga
kelompok tersebut. Selanjutnya data diuji lagi dengan menggunakan uji Scheffe
dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui ada tidaknya perbedaan yang
bermakna di antara ketiganya. Hasil analisisnya dapat dilihat pada tabel III.
Tabel III. Hasil analisis uji Scheffe pada penetapan dosis efektif asam asetat Dosis asam asetat
(mg/kgBB) 25 50 100
25 - bb bb
50 bb - tb
100 bb tb -
Keterangan :
bb : Berbeda bermakna ( p< 0,05 ) tb : Berbeda tidak bermakna ( p> 0,05 )
Hasil pengujian menunjukkan bahwa asam asetat dosis 25 mg/kgBB
berbeda bermakna dengan dosis 50 mg/kgBB dan 100 mg/kgBB, sedangkan dosis
50 mg/kg berbeda tidak bermakna dengan dosis 100 mg/kgBB. Dari hasil tersebut
dapat disimpulkan bahwa asam asetat dosis 50 mg/kgBB sudah dapat memberikan
rangsang nyeri yang cukup baik, yang ditunjukkan dari respon geliat yang
60
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
dihasilkan. Geliat yang dihasilkan pada dosis ini tidak terlalu banyak dan tidak
terlalu sedikit. Oleh karena itu, asam asetat dosis 50 mg/kgBB dipilih sebagai
rangsang nyeri untuk percobaan selanjutnya.
3. Penetapan kontrol negatif
Uji pendahuluan yang selanjutnya yaitu penetapan kontrol negatif.
Penetapan kontrol negatif bertujuan untuk mengetahui zat pembanding yang tidak
memberikan efek terhadap daya analgesik zat uji. Uji ini juga bertujuan
membuktikan bahwa pelarut yang digunakan benar-benar tidak memiliki efek
farmakologis, khususnya efek analgesik, sehingga jika terdapat efek analgesik
pada suspensi zat uji benar-benar merupakan efek dari zat uji. Penetapan ini
dilakukan dengan membandingkan jumlah geliat yang timbul setelah pemberian
aquadest dan CMC-Na 1%.
Jumlah geliat yang dihasilkan pada kedua perlakuan dianalisis
menggunakan t-test untuk mengetahui adanya perbedaan antara dua kelompok
tersebut. Data jumlah geliat pada penetapan kontrol negatif serta hasil analisis
statistiknya dapat dilihat pada lampiran 4 serta ringkasannya dapat dilihat pada
tabel IV.
Tabel IV. Rata-rata jumlah kumulatif geliat hewan uji pada penetapan kontrol negatif
Kelompok perlakuan Jumlah kumulatif geliat (X ± SE)
Probabilitas
Aquadest 118,00 ± 4,53 CMC Na 1% 112,20 ± 6,89
0,208
Dari hasil statistik tersebut diperoleh probabilitasnya lebih besar dari 0,05
(p > 0,05), yaitu 0.208, yang menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan yang
61
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
bermakna antara kedua kelompok tersebut. Probabilitas yang lebih besar berarti
Ho diterima, sehingga diasumsikan bahwa kedua zat tersebut tidak memiliki efek
analgesik. Jumlah geliat yang ditimbulkan pada kedua kelompok tersebut cukup
besar karena hewan uji tidak diberi analgetika yang dapat menekan nyeri akibat
pemberian asam asetat. Aquadest merupakan senyawa yang tidak memiliki efek
farmakologi sehingga diasumsikan tidak mempengaruhi daya analgesik zat uji,
sehingga dapat disimpulkan bahwa CMC-Na 1% juga tidak memiliki efek
analgesik. CMC-Na 1% digunakan sebagai suspending agent pada pembuatan
suspensi zat uji karena zat uji tidak larut dalam aquadest. Pada penelitian
selanjutnya, CMC-Na 1% dipilih sebagai kontrol negatif.
Rata-rata jumlah kumulatif geliat pada penetapan kontrol negatif dapat
pula disajikan dalam bentuk diagram batang seperti pada gambar 15.
118
112,2
109110111112113114115116117118
rata
-rat
a ju
mla
h ku
mul
atif
gelia
t
aquadest CMC-Na 1%
Gambar 15. Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat pada penetapan kontrol negatif
62
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4. Penetapan selang waktu pemberian rangsang
Selang waktu pemberian rangsang adalah selang waktu antara pemberian
zat uji secara per oral dengan pemberian asam asetat sebagai rangsang nyeri
secara intraperitoneal. Penetapan selang waktu pemberian asam asetat bertujuan
mengetahui berapa lama waktu zat uji memberikan efek analgesik secara optimal.
Zat uji yang digunakan dalam orientasi penetapan selang waktu pemberian asam
asetat adalah asetosal dosis 91 mg/kgBB. Rentang waktu yang diujikan adalah 5,
10, dan 15 menit. Data jumlah geliat pada penetapan selang waktu pemberian
rangsang serta hasil analisis statistiknya dapat dilihat pada lampiran 5 dan 6 serta
ringkasannya dapat dilihat pada tabel V.
Tabel V. Rata-rata jumlah kumulatif geliat hewan uji dan % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian rangsang
Selang waktu pemberian (menit)
Rata-rata jumlah kumulatif geliat
(X ± SE)
Rata-rata % penghambatan terhadap geliat (X ± SE)
5 80,33 ± 6,98 28.4 ± 6,23 10 57,67 ± 6,17 48,29 ± 6,08 15 96 ± 6,36 14,44 ± 5,66
Rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu
pemberian rangsang dapat pula disajikan dalam bentuk diagram batang seperti
pada gambar 16.
63
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
0
10
20
30
40
50
60
5 10 15
selang waktu (menit)
rata
-rat
a %
pen
gham
bata
n
Gambar 16. Diagram batang rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian rangsang
Ringkasan analisis variansi satu arah % penghambatan terhadap geliat
pada penetapan selang waktu pemberian rangsang dapat dilihat pada tabel VI.
Tabel VI. Ringkasan analisis variansi satu arah % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian rangsang
Sumber variansi
Jumlah kuadrat
Derajat bebas
Rata-rata kuadrat
F hitung Probabilitas
Antar perlakuan
1736,316 2 868,158
Error percobaan
(dalam kelompok)
646,560 6 107,760
8,056
0,020
Data % penghambatan terhadap geliat pada setiap selang waktu diuji
secara statistik variansi satu arah untuk mengetahui terdapat perbedaan atau tidak.
Ringkasan data statistik analisis variansi satu arah pada penetapan selang waktu
pemberian rangsang dapat dilihat pada tabel VII.
64
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Tabel VII. Hasil analisis uji Scheffe % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian rangsang
Selang waktu pemberian (menit) 5 10 15
5 - tb tb
10 tb - bb
15 tb bb -
Keterangan :
bb : Berbeda bermakna ( p< 0,05 ) tb : Berbeda tidak bermakna ( p> 0,05 )
Hasil pengujian menunjukkan bahwa terdapat perbedaan bermakna pada
tiap-tiap kelompok selang waktu. Dari hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa
adanya perbedaan selang waktu pemberian asam asetat memberikan perbedaan
yang bermakna pada kemampuan penghambatan geliat. Selang waktu yang dipilih
adalah 10 menit karena pada selang waktu ini respon geliat yang diperoleh paling
sedikit, sehingga diasumsikan bahwa pada selang waktu ini zat uji memberikan
efek analgesik secara optimal. Selain itu, pemilihan selang waktu 10 menit ini
bertujuan untuk efisiensi waktu pengamatan.
5. Penetapan dosis asetosal
Pada penelitian ini, asetosal digunakan sebagai kontrol positif karena uji
daya analgesik dengan metode rangsang kimia ini termasuk dalam uji golongan
analgesik non-narkotika, sehingga kontrol positif yang digunakan juga harus obat
paten yang mempunyai daya analgesik dan termasuk dalam golongan obat
analgesik non-narkotika. Kontrol positif berfungsi sebagai pembanding terhadap
kelompok perlakuan dengan zat uji sehingga dapat diketahui pada dosis berapa zat
uji memiliki efek analgesik yang setara dengan asetosal biasa digunakan sebagai
standar dalam menilai efek obat sejenis.
65
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Dosis asetosal yang digunakan dalam penelitian ini adalah dosis terapi
yang biasa digunakan manusia yaitu 500 mg. Pada orientasi dosis asetosal
digunakan tiga peringkat dosis yang diperoleh dengan menaikkan dan
menurunkan dosis tersebut ¼ kalinya. Jadi, peringkat dosis yang digunakan adalah
375 mg, 500 mg, dan 625 mg. Ketiga dosis tersebut dikonversikan ke mencit
sehingga diperoleh dosis 68,25 mg/kg BB, 91 mg/kg BB, dan 113,75 mg/kg BB.
Secara teoritis, semakin tinggi dosis analgetika yang digunakan, maka
kemampuan untuk menekan nyeri juga semakin besar, respon geliat yang
ditimbulkan semakin sedikit. Data jumlah geliat pada penetapan dosis asetosal
serta hasil analisis statistiknya dapat dilihat pada lampiran 7 dan 8 serta
ringkasannya dapat dilihat pada tabel VIII.
Tabel VIII. Rata-rata jumlah kumulatif geliat hewan uji dan % penghambatan terhadap geliat pada penetapan dosis asetosal
Dosis asetosal ( mg/kgBB)
Rata-rata jumlah kumulatif geliat
(X ± SE)
Rata-rata % penghambatan terhadap geliat
(X ± SE) 68,25 74,67 ± 9,21 32,12 ± 8,23
91 34,00 ± 3,06 69,69 ± 1,86 113,75 20,33 ± 2,40 81,88 ± 1,97
Data % penghambatan terhadap geliat pada setiap dosis diuji secara
statistik variansi satu arah untuk mengetahui terdapat perbedaan yang bermakna
atau tidak antar dosis asetosal tersebut. Ringkasan data statistik analisis variansi
satu arah pada penetapan dosis asetosal dapat dilihat pada tabel IX.
66
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Tabel IX. Ringkasan analisis variansi satu arah % penghambatan terhadap geliat pada penetapan dosis asetosal
Sumber variansi
Jumlah kuadrat
Derajat bebas
Rata-rata kuadrat
F hitung Probabilitas
Antar perlakuan
3780,438 2
1890,219
Error percobaan
(dalam kelompok)
474,162 6 79,027
23,919 0,001
Dari hasil statistik tersebut diperoleh probabilitasnya lebih kecil dari 0,05
(p < 0,05), yaitu 0.001, yang menunjukkan bahwa terdapat perbedaan antara
ketiga kelompok tersebut. Selanjutnya data diuji lagi dengan uji Scheffe dengan
taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui ada tidaknya perbedaan yang bermakna
di antara ketiganya. Hasil analisisnya dapat dilihat pada tabel X.
Tabel X. Hasil analisis uji Scheffe % penghambatan terhadap geliat pada penetapan dosis asetosal
Dosis asetosal (mg/kgBB) 68,25 91 113,75
68,25 - bb bb 91 bb - tb
113,75 bb tb - Keterangan :
bb : Berbeda bermakna ( p< 0,05 ) tb : Berbeda tidak bermakna ( p> 0,05)
Hasil pengujian menunjukkan bahwa dosis 68,25 mg/kgBB berbeda
bermakna dengan dosis 91 mg/kgBB dan 113,75 mg/kgBB, sedangkan dosis 91
mg/kgBB berbeda tidak bermakna dengan dosis 113,75 mg/kgBB. Dari hasil
analisis tersebut dipilih asetosal dosis 91 mg/kgBB karena pada dosis tersebut %
daya analgesik yang diperoleh sudah cukup tinggi yaitu sebesar 69,69%. Persen
daya analgesik pada dosis ini juga memenuhi syarat aktivitas analgetika menurut
67
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Anonim (1991) yaitu adanya aktivitas analgetika dinyatakan oleh jumlah
terjadinya geliat pada hewan uji lebih sedikitnya ≥ 50% dari kelompok kontrol.
Rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada penetapan dosis asetosal
dapat pula disajikan dalam bentuk diagram batang seperti pada gambar 17.
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
68,25 91 113,75
dosis asetosal (mg/kg BB)
rata
-rat
a %
pen
gham
bata
n
Gambar 17. Diagram batang rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada penetapan
dosis asetosal
C. Pegujian Efek Analgesik Ekstrak Etanol Daun Senggani
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya efek analgesik
pada ekstrak etanol daun senggani dan seberapa besar daya analgesik tersebut.
Metode yang digunakan dalam penelitian adalah metode rangsang kimia. Metode
ini dipilih dari beberapa metode pengujian daya analgesik yang lain karena
metode ini cukup sederhana dan mudah dilakukan.
Subyek uji berupa mencit betina yang diinjeksi dengan zat kimia yang
berfungsi sebagai perangsang nyeri yaitu asam asetat. Asam asetat dapat
menyebabkan nyeri karena menurunkan pH jaringan akibat pembebasan ion H+.
Penurunan pH inilah yang menimbulkan iritasi pada jaringan lokal. Respon yang
68
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
timbul berupa geliat menunjukkan bahwa mencit merasakan nyeri. Pemberian
senyawa yang mempunyai efek analgesik akan menekan atau mengurangi rasa
nyeri yang timbul sehingga gerakan geliat yang muncul semakin sedikit. Respon
geliat diamati tiap 5 menit selama 60 menit setelah pemberian asam asetat. Data
yang diperoleh berupa jumlah kumulatif geliat pada tiap kelompok perlakuan.
Jumlah kumulatif geliat diubah ke dalam bentuk % penghambatan terhadap geliat
menurut persamaan Handerson-Forsaith dan dianalisis secara statistik dengan
variansi satu arah (Oneway-ANOVA) kemudian dilanjutkan uji Scheffe dengan
taraf kepercayaan 95%.
Pengujian efek analgesik zat uji yaitu ekstrak etanol daun senggani
dilakukan sesuai ketentuan yang diperoleh saat uji pendahuluan. Asam asetat
sebagai perangsang nyeri yang digunakan yaitu dosis 50 mg/kgBB konsentrasi
1%. Menurut Williamson et al (1996) asam asetat konsentrasi 1-3 % digunakan
sebagai iritant yang menyebabkan nyeri pada pengujian daya analgesik dengan
metode geliat. Sumber lain menyebutkan bahwa asam asetat 1% sudah dapat
menimbulkan geliat yang cukup banyak selama pengamatan (Putra, 2004).
Kontrol negatif yang digunakan adalah CMC-Na 1%, sedangkan kontrol positif
adalah asetosal dosis 91 mg/kgBB konsentrasi 0,5 %. Dosis zat uji yang
digunakan berturut-turut 850, 1000, 1330, dan 1670 mg/kgBB dengan konsentrasi
5 %. Kadar zat uji dibuat 5 % agar dalam pemberiannya tidak melebihi volume
pemberian maksimum mencit per oral, yaitu 1 ml, dan memungkinkan untuk
dapat dimasukkan dalam spuit injeksi.
69
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Data jumlah kumulatif geliat semua kelompok perlakuan dan %
penghambatan terhadap geliat serta hasil analisis statistiknya dapat dilihat pada
lampiran 9 dan 10 serta ringkasannya dapat dilihat pada tabel XI.
Tabel XI. Rata-rata jumlah kumulatif geliat hewan uji dan % penghambatan terhadap geliat pada kelompok perlakuan
Kelompok perlakuan Rata-rata jumlah kumulatif geliat (X ± SE)
Rata-rata % penghambatan terhadap geliat
(X ± SE) I 112,20 ± 6,89 0,00 ± 6.14 II 32,8 ± 1,86 70,76 ± 1,65 III 13,4 ± 1,12 88,06 ± 1,00 IV 18,6 ± 1,72 83,42 ± 1,53 V 35,6 ± 3,83 68,26 ± 3,41 VI 62,2 ± 4,31 44,56 ± 3,84
Keterangan :
X : rata-rata SE : standard error I : kontrol negatif (CMC Na 1%) II : kontrol positif (asetosal 91 mg/kgBB) III : ekstrak etanol daun senggani 850 mg/kgBB IV : ekstrak etanol daun senggani 1000 mg/kgBB V : ekstrak etanol daun senggani 1330 mg/kgBB VI : ekstrak etanol daun senggani 1670 mg/kgBB
Rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada kelompok perlakuan dapat
pula disajikan dalam bentuk diagram batang seperti pada gambar 18.
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
% h
amba
t ter
hada
p ge
liat
I II III IV V VI
kelompok perlakuan
Gambar 18. Diagram batang rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada kelompok perlakuan
70
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Keterangan :
I : kontrol negatif (CMC Na 1%) II : kontrol positif (asetosal 91 mg/kgBB) III : ekstrak etanol daun senggani 850 mg/kgBB IV : ekstrak etanol daun senggani 1000 mg/kgBB V : ekstrak etanol daun senggani 1330 mg/kgBB VI : ekstrak etanol daun senggani 1670 mg/kgBB
Dari data tersebut dapat terlihat bahwa jumlah geliat berbanding terbalik
dengan % penghambatan terhadap geliat. Semakin banyak geliat berarti semakin
kecil daya penghambatan terhadap geliat atau daya analgesiknya. Pada kelompok
kontrol negatif memiliki jumlah geliat paling banyak dibandingkan kelompok
lainnya. Pada kelompok kontrol positif dan kelompok yang diberi zat uji
mengalami penurunan jumlah geliat dibandingkan kelompok kontrol negatif.
Data % penghambatan terhadap geliat pada setiap kelompok perlakuan
diuji secara statistik variansi satu arah untuk mengetahui terdapat perbedaan atau
tidak. Ringkasan data statistik analisis variansi satu arah pada kelompok perlakuan
dapat dilihat pada tabel XII.
Tabel XII. Ringkasan analisis variansi satu arah % penghambatan terhadap geliat pada kelompok perlakuan
Sumber variansi
Jumlah kuadrat
Derajat bebas
Kuadrat rata-rata
F hitung Probabilitas
Antar perlakuan
29493.469 5
5898.694
Error percobaan
(dalam kelompok)
1401.742 24 58.406
100.995 0,000
Dari hasil statistik tersebut diperoleh probabilitasnya lebih kecil dari 0,05
(p < 0,05) yang menunjukkan bahwa terdapat perbedaan antar kelompok tersebut.
Selanjutnya data diuji lagi dengan uji Scheffe dengan taraf kepercayaan 95%
71
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
untuk mengetahui ada tidaknya perbedaan yang bermakna di antara ketiganya.
Hasil analisisnya dapat dilihat pada tabel XIII.
Tabel XIII. Hasil analisis uji Scheffe % penghambatan terhadap geliat pada kelompok perlakuan
Kelompok perlakuan I II III IV V VI
I - bb bb bb bb bb
II bb - tb tb tb bb
III bb tb - tb b b
IV bb tb tb - tb bb
V bb tb bb tb - bb
VI bb bb bb bb bb -
Keterangan : bb : Berbeda bermakna ( p< 0,05 ) tb : Berbeda tidak bermakna ( p> 0,05 ) I : kontrol negatif (CMC Na 1%) II : kontrol positif (asetosal 91 mg/kgBB) III : ekstrak etanol daun senggani 850 mg/kgBB IV : ekstrak etanol daun senggani 1000 mg/kgBB V : ekstrak etanol daun senggani 1330 mg/kgBB VI : ekstrak etanol daun senggani 1670 mg/kgBB
Hasil pengujian menunjukkan bahwa kelompok kontrol negatif berbeda
bermakna dengan kelompok kontrol positif, kelompok perlakuan ekstrak etanol
daun senggani dosis 850 mg/kgBB, 1000 mg/kgBB, 1330 mg/kgBB, dan 1670
mg/kgBB. Sehingga dapat dikatakan bahwa kelompok kontrol positif dan
kelompok perlakuan ekstrak etanol daun senggani pada keempat peringkat dosis
betul-betul memiliki daya analgesik, karena % penghambatannya jauh lebih besar
dibanding kontrol negatif.
Sementara itu kelompok perlakuan ekstrak etanol daun senggani dosis 850
mg/kgBB, 1000 mg/kgBB, dan 1330 mg/kgBB berbeda tidak bermakna dengan
kelompok kontrol positif. Hal ini berarti kelompok perlakuan ekstrak etanol daun
72
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
senggani pada dosis tersebut diasumsikan memiliki daya penghambatan terhadap
jumlah geliat dan memberikan proteksi yang sama besar dengan asetosal dosis 91
mg/kgBB. Sedangkan pada kelompok perlakuan ekstrak etanol daun senggani
dosis 1670 mg/kgBB berbeda bermakna dengan kelompok kontrol negatif maupun
kelompok kontrol positif, sehingga dapat diasumsikan bahwa ekstrak etanol daun
senggani pada dosis ini berpotensi dalam menghambat jumlah geliat yang muncul
namun tidak sebesar asetosal dosis 91 mg/kgBB.
Kelompok perlakuan ekstrak etanol daun senggani dosis 850 mg/kgBB,
1000 mg/kgBB, 1330 mg/kgBB, dan 1670 mg/kgBB masing-masing memiliki %
penghambatan terhadap geliat berturut-turut sebesar 88,06 %; 83,42 %, 68,26 %,
dan 44,56 %. Asetosal telah lama digunakan sebagai analgesik sehingga jumlah
geliat pada kelompok ini mengalami penurunan yang bermakna dan hasil %
penghambatan terhadap geliatnya yaitu sebesar 70,76 %.
Hasil analisis statistik menunjukkan bahwa kelompok perlakuan ekstrak
etanol daun senggani dosis 850 mg/kgBB, 1000 mg/kgBB, dan 1330 mg/kgBB
berbeda tidak bermakna dengan kelompok kontrol positif. Hal ini berarti bahwa
ekstrak etanol daun senggani pada dosis tersebut memiliki kemampuan
menghambat geliat. Sedangkan kelompok perlakuan ekstrak etanol daun senggani
dosis 1670 mg/kgBB berbeda bermakna dengan kelompok kontrol positif dan
nilai % hambatnya di lebih kecil daripada kelompok kntrol positif, sehingga dapat
dikatakan bahwa ekstrak etanol daun senggani dosis 1670 mg/kgBB kurang
mampu dalam menghambat geliat.
73
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Menurut prosedur evaluasi Anonim (1991) mengenai aktivitas analgetika
pada metode rangsang kimia, dikatakan bahwa adanya aktivitas analgetika
dinyatakan oleh jumlah terjadinya geliat pada hewan uji lebih sedikitnya ≥ 50%
dari kelompok kontrol negatif. Kelompok perlakuan ekstrak etanol daun senggani
dosis 850 mg/kgBB, 1000 mg/kgBB, dan 1330 mg/kgBB memiliki aktivitas
analgetika karena jumlah terjadinya geliat pada hewan uji > 50% dari kelompok
kontrol negatif. Sedangkan kelompok perlakuan ekstrak etanol daun senggani
dosis 1670 mg/kgBB ini tidak memiliki aktivitas analgetika karena jumlah
terjadinya geliat pada hewan uji < 50% dari kelompok kontrol negatif.
Sumber lain menyatakan bahwa pada metode rangsang kimia, suatu zat
dikatakan mempunyai aktivitas analgetika maksimal jika dapat menghambat
jumlah geliat pada hewan uji > 70%, sedangkan zat yang dapat menghambat
jumlah geliat < 70% dikatakan mempunyai aktivitas analgesik minimal (Vogel,
2002). Jika berdasarkan prosedur evaluasi ini, maka ekstrak etanol daun senggani
dosis 850 mg/kgBB dan 1000 mg/kgBB dinyatakan mempunyai aktivitas
analgesik maksimal, sedangkan ekstrak etanol daun senggani dosis 1330
mg/kgBB dinyatakan memiliki aktivitas analgesik minimal.
Secara alamiah tubuh memproduksi antioksidan yang mampu melindungi sel
dari radikal bebas (Sibuea, 2004). Radikal bebas yang berlebihan akan
menyebabkan kerusakan jaringan sehingga menimbulkan nyeri. Dalam proses
peradangan, radikal bebas terbentuk ketika asam arakhidonat dikonversikan
menjadi peroksida baik melalui jalur siklooksigenase maupun lipoksigenase.
Ketika terjadi kerusakan jaringan organ produksi peroksida meningkat seiring
74
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
dengan peningkatan jumlah radikal bebas, padahal tubuh memproduksi
antioksidan endogen yang terbatas. Apabila jumlah radikal bebas makin banyak,
antioksidan endogen tak mampu lagi melumpuhkannya secara efektif sehingga
harus ada tambahan antioksidan dari luar (eksogen) yang berasal dari bahan
makanan (Sibuea, 2004).
Pada penelitian ini diharapkan antioksidan eksogen dapat berasal dari
ekstrak etanol daun senggani, karena ekstrak etanol daun senggani mengandung
kuersetin yang merupakan salah satu zat aktif kelas flavonoid. Kuersetin memiliki
aktivitas kuat sebagai peberi hidrogen (hidrogen donating) karena kandungan
hidroksilasi cukup, yakni 5 gugus OH dan empat diantaranya terdapat pada sisi
aktif (C5, C7, C3’, dan C4’) (Sibuea, 2004).
Berdasarkan hal tersebut, efek analgesik yang ditimbulkan oleh ekstrak
etanol daun senggani diduga disebabkan karena adanya flavonoid yaitu kuersetin.
Kemungkinan flavonoid ini dapat menghambat enzim siklooksigenase pada
pembentukan prostaglandin. Dengan terhambatnya pembentukan prostaglandin,
respon nyeri yang muncul dapat dikurangi.
Dari hasil penelitian dapat dilihat bahwa daya analgesik menurun seiring
dengan meningkatnya dosis. Hal ini diduga karena peringkat dosis yang
digunakan dalam penelitian ini sudah melampaui dosis efektif ekstrak etanol daun
senggani sebagai analgetika. Perlu diingat, bahwa reaksi penangkapan radikal
bebas oleh flavonoid tetap menghasilkan radikal bebas walaupun aktivitasnya
rendah. Keberadaan radikal bebas yang berlebihan serta reaktivitas flavonoid yang
berlebihan inilah yang mungkin menyebabkan ekstrak etanol daun senggani
75
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
menjadi bersifat prooksidan sehingga aktivitasnya sebagai analgetika justru
menjadi berkurang.
Berdasarkan hasil perhitungan % penghambatan terhadap geliat dapat
dihitung % perubahan daya analgesik zat uji terhadap kontrol positif yaitu asetosal
dosis 91 mg/kgBB. Data % daya analgesik zat uji terhadap kontrol positif serta
hasil analisis statistiknya dapat dilihat pada lampiran 11 serta ringkasannya dapat
dilihat pada tabel XIV.
Tabel XIV. Persen perubahan daya analgesik kelompok perlakuan dibandingkan asetosal dosis 91 mg/kgBB
Kelompok perlakuan % Perubahan daya analgesik (X ± SE)
I -106,30 ± 8,68 II 0,006 ± 2,34 III 24,45 ± 1,42 IV 17,77 ± 2,08 V -3,52 ± 4,82 VI -37,02 ± 5,42
Keterangan : I : kontrol negatif (CMC Na 1%) II : kontrol positif (asetosal 91 mg/kgBB) III : ekstrak etanol daun senggani 850 mg/kgBB IV : ekstrak etanol daun senggani 1000 mg/kgBB V : ekstrak etanol daun senggani 1330 mg/kgBB VI : ekstrak etanol daun senggani 1670 mg/kgBB
-120
-100
-80
-60
-40
-20
0
20
40
% p
erub
ahan
day
a an
alge
sik
I II III IV V VI
kelompok perlakuan
Gambar 19. Diagram batang rata-rata % perubahan daya analgesik terhadap kontrol positif
76
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Keterangan :
I : kontrol negatif (CMC Na 1%) II : kontrol positif (asetosal 91 mg/kgBB) III : ekstrak etanol daun senggani 850 mg/kgBB IV : ekstrak etanol daun senggani 1000 mg/kgBB V : ekstrak etanol daun senggani 1330 mg/kgBB VI : ekstrak etanol daun senggani 1670 mg/kgBB
Data % perubahan daya analgesik diuji secara statistik variansi satu arah
untuk mengetahui terdapat perbedaan atau tidak. Ringkasan data statistik analisis
variansi satu arah pada % perubahan daya analgesik dapat dilihat pada tabel XV.
Tabel XV. Ringkasan analisis variansi satu arah % perubahan daya analgesik Sumber variansi
Jumlah kuadrat
Derajat bebas
Rata-rata kuadrat
F hitung Probabilitas
Antar perlakuan
58862,608
5
11772,522
Error percobaan
(dalam kelompok)
2794.435 24 116,435
101,108 0,000
Dari hasil statistik tersebut diperoleh probabilitasnya lebih kecil dari 0,05
(p < 0,05) yang menunjukkan bahwa terdapat perbedaan antar kelompok tersebut.
Selanjutnya data diuji lagi dengan uji Scheffe dengan taraf kepercayaan 95%
untuk mengetahui ada tidaknya perbedaan yang bermakna di antara kelompok-
kelompok tersebut. Hasil analisisnya dapat dilihat pada tabel XVI.
Tabel XVI. Hasil analisis uji Scheffe % perubahan daya analgesik Kelompok perlakuan
I II III IV V VI
I - bb bb bb bb bb II bb - tb tb tb bb III bb tb - tb bb bb IV bb tb tb - tb bb V bb tb bb tb - bb VI bb bb bb bb bb -
77
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Keterangan :
bb : Berbeda bermakna ( p< 0,05 ) tb : Berbeda tidak bermakna ( p> 0,05 ) I : kontrol negatif (CMC Na 1%) II : kontrol positif (asetosal 91 mg/kgBB) III : ekstrak etanol daun senggani 850mg/kgBB IV : ekstrak etanol daun senggani 1000 mg/kgBB V : ekstrak etanol daun senggani 1330 mg/kgBB VI : ekstrak etanol daun senggani 1670 mg/kgBB
Dari data terlihat bahwa % perubahan daya analgesik ekstrak etanol daun
senggani terhadap kontrol positif pada keempat peringkat dosis berturut-turut
adalah 24,45 %; 17,77 %; -3,52 %; dan -37,02 %. Pada kelompok kontrol negatif
dibandingkan dengan kontrol positif menunjukkan adanya perbedaan yang
bermakna. Hal ini menunjukkan tidak terjadinya perubahan daya analgesik
terhadap kontrol positif, ditunjukkan dengan perubahan yang bernilai negatif dan
sangat jauh selisihnya dengan kontrol positif. Pada ekstrak etanol daun senggani
dosis 1330 mg/kgBB berbeda tidak bermakna dengan kontrol positif namun
nilainya lebih kecil dibandingkan kontrol positif. Hal ini menunjukkan bahwa
ekstrak dosis 1330 mg/kgBB kurang efektif dibandingkan kontrol positif.
Sedangkan ekstrak etanol daun senggani dosis 850 mg/kgBB dan 1000 mg/kgBB
juga berbeda tidak bermakna dengan kontrol positif tetapi nilainya lebih besar
dibandingkan dengan kontrol positif. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol
daun senggani pada dosis 850 mg/kgBB dan 1000mg/kgBB lebih efektif sebagai
analgetika dibanding kontrol positif.
Selain pengujian efek analgesik, juga dilakukan uji efek anti inflamasi
ekstrak etanol daun senggani. Perbandingan efek analgesik dan efek anti-inflamasi
ekstrak etanol daun senggani dapat dilihat dalam gambar 20.
78
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
% e
fek
I II III IV
kelompok perlakuan
% efek analgesik EEDS
% efek anti-inflamasiEEDS
Gambar 20. Diagram batang perbandingan efek analgesik dengan efek anti-inflamasi ekstrak etanol daun senggani.
Keterangan :
I : ekstrak etanol daun senggani 850 mg/kgBB II : ekstrak etanol daun senggani 1000 mg/kgBB III : ekstrak etanol daun senggani 1330 mg/kgBB IV : ekstrak etanol daun senggani 1670 mg/kgBB
Hasil pengujian potensi daya anti-inflamasi menunjukkan bahwa ekstrak
etanol daun senggani dosis 850 mg/kgBB; 1000 mg/kgBB; 1330 mg/kgBB; dan
1670 mg/kgBB menghasilkan potensi daya antiinflamasi berturut-turut sebesar
10,75%; 11,57%; 32,67%; dan 25,07%. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak
etanol daun senggani mempunyai potensi daya antiinflamasi, khususnya pada
dosis 1330 mg/kgBB (Prianingrum, 2006).
Jika dibandingkan dengan daya anti-inflamasi ekstrak etanol daun
senggani, daya analgesik ekstrak etanol daun senggani nilainya jauh lebih besar.
Hal ini diduga karena peringkat dosis yang digunakan tidak mencukupi untuk
memberi efek anti-inflamasi, sehingga efek yang muncul kecil dan daya anti-
inflamasi yang didapatkan semakin sedikit. Terkadang ada beberapa obat yang
membutuhkan dosis lebih besar dari normal untuk dapat memberi efek anti-
79
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
inflamasi, seperti pada asetosal. Untuk berfungsi sebagai analgetika dibutuhkan
dosis 300-900 mg tiap 4-6 jam atau maksimum 4 gram/hari (Anonim, 2000).
Namun sebagai anti radang akibat gagalnya sintesa Prostaglandin-E (PgE2)
dibutuhkan dosis di atas 5 gram/hari (Tjay dan Raharja, 2002).
Jika dilihat dari diagram, seiring dengan peningkatan dosis daya anti-
inflamasi yang diberikan semakin besar. Namun pada dosis 1670 mg/kg BB daya
anti-inflamasi yang ditimbulkan sedikit menurun. Sehingga perlu dilakukan
penelitian lebih lanjut efek anti-inflamasi pada dosis 1000 mg/kg BB sampai
1330 mg/kg BB untuk melihat adanya fenomena efek tidak tergantung dosis.
Pada penelitian ini juga dibandingkan daya analgesik dan anti-inflamasi
dari daun senggani jika dilarutkan atau diekstrak dalam pelarut lain yang lebih
non polar yaitu pelarut petroleum eter (PE). Perbandingan daya analgesik dari
ekstrak etanol daun senggani dengan ekstrak petroleum eter daun senggani dapat
dilihat dalam gambar 21.
-60
-40
-20
0
20
40
60
80
100
% e
fek
anal
gesi
k
I II III IV
kelompok perlakuan
% efek analgesik EEDS
% efek analgesikEPEDS
Gambar 21. Diagram batang perbandingan efek analgesik ekstrak etanol daun
sengganidengan efek analgesik ekstrak petroleum eter daun senggani pada mencit putih betina.
80
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Keterangan : I : ekstrak etanol/petroleum eter daun senggani 850 mg/kgBB II : ekstrak etanol/petroleum eter daun senggani 1000 mg/kgBB III : ekstrak etanol/petroleum eter daun senggani 1330 mg/kgBB IV : ekstrak etanol/petroleum eter daun senggani 1670 mg/kgBB
Hasil pengujian potensi daya analgesik ekstrak petroleum eter daun
senggani dosis 850 mg/kgBB; 1000 mg/kgBB; 1330 mg/kgBB; dan 1670
mg/kgBB berturut-turut sebesar -32,75%; -44,72%; -0,35%; dan 80,28%
(Riadiani, 2006). Dari diagram tersebut dapat dilihat bahwa pada dosis 850
mg/kgBB; 1000 mg/kgBB; dan 1330 mg/kgBB ekstrak petroleum daun senggani
tidak memberi efek analgesik ditunjukkan dengan nilai negatif pada %
penghambatan terhadap geliat. Hal ini diduga karena pada dosis tersebut
kandungan zat aktif yang terdapat pada ekstrak belum cukup memberi efek
analgesik. Dari diagram juga dapat dilihat bahwa terjadi perubahan daya analgesik
yang sangat besar antara dosis 1330 mg/kgBB dan 1670 mg/kgBB. Diduga pada
rentang dosis tersebut terdapat dosis efektif ekstrak petroleum eter, sehingga
diperlukan penelitian lebih lanjut tentang daya analgesik ekstrak petroleum eter
pada rentang dosis tersebut. Selain itu diduga ekstrak petroleum daun senggani
sebagai analgetika memiliki rentang dosis atau jendela terapi yang sempit.
Pada penelitian daya anti-inflamasi ekstrak petroleum eter daun senggani
didapat % daya anti-inflamasi ekstrak petroleum eter daun senggani pada dosis
850 mg/kgBB; 1000 mg/kgBB; 1330 mg/kgBB; dan 1670 mg/kgBB berturut-turut
sebesar 16,03%; 19,39%; 29,36%; dan 43,34% (Sudarto, 2006). Daya anti-
inflamasi yang dihasilkan ekstrak petroleum eter daun senggani lebih besar
dibandingkan dengan daya anti-inflamasi ekstrak etanol daun senggani. Efek yang
81
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
lebih besar ini diduga juga dipicu karena pelarut yang digunakan untuk membuat
sediaan suspensi, yaitu minyak goreng, sudah memberi efek anti-inflamasi
terlebih dahulu yaitu sebesar kurang lebih 7%. Sehingga efek anti-inflamasi yang
muncul tidak hanya berasal dari ekstrak petroleum eter tetapi juga berasal dari
minyak goreng.
Rangkuman daya analgesik dan daya anti-inflamasi ekstrak etanol daun
senggani dan ekstrak petroleum eter daun senggani ditunjukkan pada gambar 22.
-60
-40
-20
0
20
40
60
80
100
% e
fek
I II III IV
kelompok perlakuan
% efek analgesik EEDS
% efek anti-inflamasi EEDS
% efek analgesik EPEDS
% efek anti-inflamasiEPEDS
Gambar 22. Diagram batang rangkuman efek analgesik dan efek anti-inflamasi ekstrak etanol daun senggani dan ekstrak petroleum eter daun senggani.
Keterangan :
I : ekstrak etanol/petroleum eter daun senggani 850 mg/kgBB II : ekstrak etanol/petroleum eter daun senggani 1000 mg/kgBB III : ekstrak etanol/petroleum eter daun senggani 1330 mg/kgBB IV : ekstrak etanol/petroleum eter daun senggani 1670 mg/kgBB
Pada ekstrak etanol daun senggani, kandungan kimia yang diduga larut
dan dapat memberi efek analgesik dan anti-inflamasi adalah flavonoid yang
berfungsi sebagai antioksidan (Sitompul, 2003) yang dapat menangkap radikal
82
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
bebas. Radikal bebas akan merusak molekul yang elektronnya ditarik oleh radikal
bebas tersebut sehingga menyebabkan kerusakan sel, gangguan fungsi sel, bahkan
kematian sel.
Sedangkan pada ekstrak petroleum eter daun senggani, kandungan kimia
yang diduga larut dan dapat memberi efek analgesik dan anti-inflamasi adalah
steroid. Peran utama steroid dalam sistem kehidupan sebagai hormon (Anonim,
2006). Pada umumnya steroid dapat bermanfaat untuk mengurangi inflamasi dan
sebagai obat kontrasepsi oral.
Berdasarkan hal tersebut diduga mekanisme ekstrak etanol daun senggani
dan ekstrak petroleum eter daun senggani sebagai analgetika dan anti-inflamasi
memiliki jalur yang berbeda, sehingga efek analgesik dan anti-inflamasi yang
dihasilkan juga berbeda.
83
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
85
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Dari hasil uji efek analgesik ekstrak etanol daun senggani secara per oral
pada mencit betina dapat disimpulkan bahwa:
1. ekstrak etanol daun senggani mempunyai efek analgesik terhadap mencit
betina.
2. daya analgesik ekstrak etanol daun senggani pada dosis dosis 850 mg/kg BB,
1000 mg/kg BB, 1330 mg/kg BB, dan 1670 mg/kg BB berturut-turut adalah
88,06%; 83,42%, 68,26%, dan 44,56%.
B. Saran
1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai senyawa apa yang
bertanggung jawab terhadap daya analgesik dari ekstrak etanol daun senggani
ini.
2. Perlu dilakukan penelitian daya analgesik pada dosis di bawah 850 mg/kg
BB.
3. Perlu dilakukan uji daya analgesik ektrak etanol daun senggani dengan metode
lain.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
86
DAFTAR PUSTAKA
Anonim, 1986, Sediaan Galenik, 8-25, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Anonim, 1991, Penapisan Farmakologi Pengujian Fitokimia dan Pengujian
Klinik, 49, Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alami Pyitomedika, Jakarta.
Anonim, 1992, Undang-Undang Republik Indonesia No. 23 Tahun 1992 Tentang
Kesehatan, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Anonim, 1995, Farmakope Indonesia, edisi IV, 31, Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta Anonim, 2000, Informatorium Obat Nasional Indonesia, 184, 357, Departemen
Kesehatan Republik Indonesia Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta.
Anonim, 2004, Saponin, http://www.molecullarexpressionsphytochemicalgalley-saponin.htm
Anonim, 2005, Kuersetin ,http://www.pikiran-rakyat.com/cetak/0904/23/utama 02.htm
Anonim, 2006, Steroid, http://en.wikipedia.org/wiki/Steroid, diakses pada tanggal 25 Juli 2006.
Christina, 2000, Daya Antifertilitas dan Efek Toksik Ekstrak Etanol Akar
Senggani (Melastoma polyanthum Bl.) pada Tikus Betina, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Dalimartha, S, 1999, Atlas Tanaman Obat Indonesia, Jilid I, 130-132, Trubus
Agriwidya, Jakarta. De Medina, F.S., Galvez, J., Romero, J.A., Zarzuelo, A., 1996, Effect of
Quersitrin on Acute and Chronic Experimental in the Rat, http://www.JournalOfPharmacologyAndExperimentalTherapeutics.htm
Djamhuri, 1996, Sinopsis Farmakologi, 45, Penerbit Hipokratis, Jakarta. Dollery, C., 1999, Therapeutic Drugs, 2nd Edition, A216-A218, Churchill
Livingstone, London.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
87
Evans, W.C., 2002, Trease and Evans Pharmacognosy, 15th Edition, 214-252, ELBS, Oxford.
Gitawati, R., 1995, Radikal Bebas-Sifat dan Peran dalam Menimbulkan
Kerusakan atau Kematian Sel, Cermin Dunia Kedokteran, No. 102, 33-35.
Guyton, A.C., and Hall, 1996, Text book of Medical Phsycology, diterjemahkan
oleh Tengadi, I., Santosa, A., Edisi 9, Bagian II, 76, Penerbit Buku Kedoteran EGC, Jakarta.
Harborne, J.B., 1984, Phytochemical Methods, diterjemahkan oleh Padmawinata,
K.dan Soediro, (1987), Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan, terbitan kedua, 84-92, 147-151, Penerbit ITB, Bandung.
Hertiani, T., 2000, Isolasi dan Identifikasi Senyawa Flavonoid dari Daun Plantago
mayor L., Tesis, Universitas Gajah Mada, Yogyakarta. Irwan,Y.D.P.S., 2001, Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Akar Senggani
(Melastoma Polyanthum Bl.) terhadap Spermatogenitas Tikus Putih, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Ismirawati,Y., 2002, Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Akar Senggani (Melastoma
polyanthum Bl.) pada Tikus Jantan dan Betina, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Japri, A., 2001, Uji Teratogenisitas Ekstrak Etanol Akar Senggani (Melastoma
polyanthum Bl.) pada Tikus Putih, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Katarina, S. K., 2002, Uji Daya Antifungus Ekstrak Etanol Akar Senggani
(Melastoma polyanthum Bl.) terhadap Candida albicans secara in vitro, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Katzung, B.G., 2002, Basic and Clinical Pharmacology, diterjemahkan oleh
Bagian Farmasi Kedokteran UNAIR edisi VIII, Jilid 2, Penerbit Salemba Medika, Jakarta.
Ladoangin, A., 2004, Efek Hepatoprotektif Jus Buah Apel Hijau (Pyrus malus L.)
pada Mencit Jantan (Mus muscullus) Terinduksi Parasetamol, Skripsi, Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Lily, M.P., 1980, Medical Plant of East and Southeast Asia, 258-259, The MIT
Press, Cambridge, Massachusetts, and London, England.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
88
Markham, K.R., 1982, Techniques of Flavonoid Identification, diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata, (1988), Cara Mengidentifikasi Flavonoid, 1-34, Penerbit ITB, Bandung.
Mutschler, E.,1986, Arieneimittelwirkungen, Edisi V, diterjemahkan oleh
Mathilda B., Widyanto dan Ranti, A.S., Dinamika Obat, 177-180, ITB, Bandung.
Phin, K, 2001, Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Akar Senggani (Melastoma
polyanthum Bl.) terhadap Jaringan Hati, Ginjal, Ovarium, dan Uterus Tikus Betina, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Prianingrum, E.D., 2006, Daya Anti-inflamasi Ekstrak Etanol Daun Senggani
(Melastoma polyanthum Bl.) pada Mencit Putih Betina, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Putra, A.D.K., 2004, Daya Analgesik Air Perasan Umbi Wortel (Daucus carota
L.) pada Mencit Putih Betina, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Rang, H.P., Dale, M.M., Ritter, J.M., Moore, P.K., 2003, Pharmacology, edisi V,
232, Churchill Livingstone Riadiani, R.P., 2006, Daya Analgesik Ekstrak Petroleum Eter Daun Senggani
(Melastoma polyanthum Bl.) pada Mencit Putih Betina, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta
Robinson, Trevor, 1995, Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi, terjemahkan
oleh Kosasi Padmawinata, 192, ITB, Bandung Setiati, 2003, Radikal Bebas, Antioksidan, dan Proses Menua, Medika, No. 6,
366-369, Jakarta. Sibuea, P., 2004, Kuersetin, Senjata Pemusnah Radikal Bebas,
http://www.kompas.com/kompas.cetak/0402/10/humaniora/840926.htm Sitompul, B., 2003, Antioksidan dan Penyakit Aterosklerosis, Medika, No. 6, 373-
377, Jakarta. Soedibyo, M.B.R.A., 1998, Alam Sumber Kesehatan, Mnfaat dan Kegunaan,
Cetakan ke-1, 148, Balai Pustaka, Jakarta. Sudarto, A., 2006, Daya Anti-inflamasi Ekstrak Petroleum Eter Daun Senggani
(Melastoma polyanthum Bl.) pada Mencit Putih Betina, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
89
Sulaiman, M.R., Somchit, M.N., Israf, D.A., ahmad, Z., moin, S., Antinociceptive effect of Melastoma malabathricum ethanolic extract in mice, http://www.elsevier.com/locate/fitote
Tjay, T.H., dan Rahardja,K, 2002, Obat-Obat Penting : Khasiat penggunaan dan
Efek-Efek Sampingnya, Edisi V, Cetakan ke-2, 295-310, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Tjitrosoepomo, G., 1989, Taksonomi Tumbuhan Spermatophyta, Gadjah Mada
University Press, Yogyakarta. Toba, M.S., 2003, Uji Daya Antibakteri Ekastrak Etanol Akar Senggani
(Melastoma affine D. Don.) terhadap Bakteri Gram Positif dan Bakteri Gram Negatif , Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Turner, R.A., 1965, Screening Method in Pharmacology, Vol I, 160, Academic
Press, New York. Van Steenis, C.G.G.J, 1975, Flora Untuk Sekolah di Indonesia, 328-330, PT.
Pradya Paramita, Jakarta. Vogel, H.G., 2002, Drug Discovery and Evaluation : Pharmacological Assays,
Second Edition , 726-769, Spinger Verlag Berlin Heidelberg, New York.
Wilmana, P.F., 1995, Analgesik Anti inflamasi Non Steroid dan Obat Pirai dalam
Ganiswara, S.G., 1995, Farmakologi dan Terapi, Edisi IV, 210-212, Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta.
Williamson, E. M., 1996, Selection Preparation and Pharmacological Evaluation
of Plant Material, 131, 142-145, John Willey and Sons, England. Wiwin, F., 2002, Toksisitas Akut Infus Daun Senggani (Melastoma polyanthum
BL.) pada Mencit, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
90
Lampiran 1. Surat determinasi simplisia senggani (Melastoma polyanthum Bl.)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
91
Lampiran 2. Foto tumbuhan, daun, serbuk daun senggani dan ekstrak etanol daun senggani
Gambar 23. Tumbuhan Senggani
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
92
Gambar 24. Daun senggani
Gambar 25. Serbuk daun senggani
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
93
a
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
94
b
Gambar 26. Ekstrak etanol daun senggani, (a) ekstrak cair, (b) ekstrak kental
Lampiran 3. Data jumlah geliat hewan uji dan hasil analisis variansi satu arah pada penetapan dosis efektif asam asetat
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
95
Tabel XVII. Jumlah geliat hewan uji pada penetapan dosis efektif asam asetat
Dosis 25 mg/kg BB Dosis 50 mg/kg BB Dosis 100 mg/kg BB Waktu (mnt) A B C A B C A B C
5 13 12 2 20 12 0 1 10 2 10 7 13 9 20 19 16 15 27 21 15 8 8 3 13 12 17 29 20 14 20 3 15 3 14 13 19 21 15 13 25 3 10 7 17 14 13 18 17 9 30 0 3 3 12 12 12 12 17 10 35 0 1 2 10 9 13 20 8 9 40 0 2 1 10 7 9 16 27 21 45 0 0 0 9 5 6 10 10 15 50 0 0 0 5 5 5 4 4 5 55 0 0 0 5 4 5 0 3 2 60 0 3 5 4 1 5 3 5 2
Total 35 67 35 139 113 120 149 163 123 X ± SE 45,67 ± 10,67 124 ± 7,77 145 ± 11,72
Asam Asetat NPar Tests
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
9104,888947,84466
,234,150
-,234,702,708
NMeanStd. Deviation
Normal Parametersa,b
AbsolutePositiveNegative
Most ExtremeDifferences
Kolmogorov-Smirnov ZAsymp. Sig. (2-tailed)
geliat
Test distribution is Normal.a.
Calculated from data.b.
Oneway
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
96
Descriptives
geliat
3 45.6667 18.47521 10.66667 -.2283 91.5616 35.00 67.003 124.0000 13.45362 7.76745 90.5793 157.4207 113.00 139.003 145.0000 20.29778 11.71893 94.5775 195.4225 123.00 163.009 104.8889 47.84466 15.94822 68.1122 141.6655 35.00 163.00
dosis 25 mg/kg BBdosis 50 mg/kg BBdosis 100 mg/kg BBTotal
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval forMean
Minimum Maximum
Test of Homogeneity of Variances
geliat
.377 2 6 .701
LeveneStatistic df1 df2 Sig.
ANOVA
geliat
16444.222 2 8222.111 26.400 .0011868.667 6 311.444
18312.889 8
Between GroupsWithin GroupsTotal
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Post Hoc Tests Multiple Comparisons
Dependent Variable: geliatScheffe
-78.33333* 14.40936 .005 -124.5479 -32.1188-99.33333* 14.40936 .001 -145.5479 -53.118878.33333* 14.40936 .005 32.1188 124.5479
-21.00000 14.40936 .403 -67.2145 25.214599.33333* 14.40936 .001 53.1188 145.547921.00000 14.40936 .403 -25.2145 67.2145
(J) dosisdosis 50 mg/kg BBdosis 100 mg/kg BBdosis 25 mg/kg BBdosis 100 mg/kg BBdosis 25 mg/kg BBdosis 50 mg/kg BB
(I) dosisdosis 25 mg/kg BB
dosis 50 mg/kg BB
dosis 100 mg/kg BB
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level.*.
Homogeneous Subsets
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
97
geliat
Scheffea
3 45.66673 124.00003 145.0000
1.000 .403
dosisdosis 25 mg/kg BBdosis 50 mg/kg BBdosis 100 mg/kg BBSig.
N 1 2Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.a.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
98
Lampiran 4. Data jumlah geliat hewan uji dan hasil analisis variansi satu arah pada penetapan kontrol negatif
Tabel XVIII. Jumlah geliat hewan uji pada penetapan kontrol negatif
Aquadest CMC-Na 1% Waktu (mnt) A B C D E A B C D E
5 0 0 1 1 3 3 4 5 0 9 10 9 6 11 10 15 9 27 23 17 21 15 14 11 13 21 15 10 23 17 11 10 20 15 20 17 24 13 8 17 17 15 13 25 17 13 9 15 15 8 19 17 11 14 30 18 15 9 10 17 9 10 13 10 9 35 11 12 8 9 9 8 10 15 13 8 40 15 14 10 6 7 13 6 10 9 5 45 17 11 13 8 9 12 5 5 7 13 50 5 7 7 5 6 6 7 4 2 7 55 4 5 5 3 2 10 3 6 3 3 60 9 7 5 3 1 8 0 3 3 3
Total 134 121 108 115 112 104 131 135 101 115 X ± SE 118,00 ± 4,53 112,20 ± 6,89
KONTROL NEGATIF NPar Tests
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
101,5000,52705
,329,329
-,3291,039
,230
NMeanStd. Deviation
Normal Parametersa,b
AbsolutePositiveNegative
Most ExtremeDifferences
Kolmogorov-Smirnov ZAsymp. Sig. (2-tailed)
negatif
Test distribution is Normal.a.
Calculated from data.b.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
99
T-Test
Group Statistics
5 118.0000 10.12423 4.527695 117.2000 15.40130 6.88767
negatifaquadestCMC-Na 1%
geliatN Mean Std. Deviation
Std. ErrorMean
Independent Samples Test
1.874 .208 .097 8 .925 .80000 8.24257 -18.20741 19.80741
.097 6.913 .925 .80000 8.24257 -18.74040 20.34040
Equal variancesassumedEqual variancesnot assumed
geliatF Sig.
Levene's Test forEquality of Variances
t df Sig. (2-tailed)Mean
DifferenceStd. ErrorDifference Lower Upper
95% ConfidenceInterval of the
Difference
t-test for Equality of Means
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
100
Lampiran 5. Data jumlah geliat hewan uji dan hasil analisis statistik pada penetapan selang waktu pemberian
Tabel XIX. Jumlah geliat hewan uji pada penetapan selang waktu pemberian
5 menit 10 menit 15 menit Waktu (mnt) A B C A B C A B C
5 0 1 2 0 0 1 7 8 6 10 10 13 16 14 13 23 14 21 20 15 14 10 15 8 11 14 12 18 18 20 10 10 15 9 4 8 15 16 10 25 11 4 11 5 6 5 12 18 15 30 13 12 9 0 6 0 7 8 9 35 5 3 4 3 6 4 8 7 7 40 4 1 3 4 1 1 0 4 5 45 1 7 9 0 4 7 2 6 6 50 2 3 2 3 1 1 4 3 5 55 4 4 5 1 1 4 0 3 3 60 2 3 3 1 2 1 4 2 3
Total 76 71 94 48 55 69 85 96 107 X ± SE 80,33 ± 6,98 57,67 ± 6,17 96 ± 6,36
SELANG WAKTU NPar Tests
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
92,0000,86603
,209,209
-,209,628,826
NMeanStd. Deviation
Normal Parametersa,b
AbsolutePositiveNegative
Most ExtremeDifferences
Kolmogorov-Smirnov ZAsymp. Sig. (2-tailed)
waktu
Test distribution is Normal.a.
Calculated from data.b.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
101
Oneway Descriptives
geliat
3 80.3333 12.09683 6.98411 50.2831 110.3835 71.00 94.003 57.3333 10.69268 6.17342 30.7713 83.8954 48.00 69.003 96.3333 11.01514 6.35959 68.9702 123.6965 85.00 107.009 78.0000 19.58954 6.52985 62.9421 93.0579 48.00 107.00
5 menit10 menit15 menitTotal
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval forMean
Minimum Maximum
Test of Homogeneity of Variances
geliat
.079 2 6 .925
LeveneStatistic df1 df2 Sig.
ANOVA
geliat
2306.000 2 1153.000 9.055 .015764.000 6 127.333
3070.000 8
Between GroupsWithin GroupsTotal
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: geliatScheffe
23.00000 9.21352 .118 -6.5501 52.5501-16.00000 9.21352 .295 -45.5501 13.5501-23.00000 9.21352 .118 -52.5501 6.5501-39.00000* 9.21352 .016 -68.5501 -9.449916.00000 9.21352 .295 -13.5501 45.550139.00000* 9.21352 .016 9.4499 68.5501
(J) waktu10 menit15 menit5 menit15 menit5 menit10 menit
(I) waktu5 menit
10 menit
15 menit
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level.*.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
102
Homogeneous Subsets
geliat
Scheffea
3 57.33333 80.3333 80.33333 96.3333
.118 .295
waktu10 menit5 menit15 menitSig.
N 1 2Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.a.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
103
Lampiran 6. Data % penghambatan terhadap jumlah geliat dan hasil analisis statistik pada penetapan selang waktu pemberian
Tabel XX. Data % penghambatan terhadap jumlah geliat pada penetapan selang
waktu pemberian Selang waktu Kelompok
perlakuan 5 menit 10 menit 15 menit 1 32,26 57,22 24,24 2 36,72 50,98 14,44 3 16,22 36,67 4,64
X ± SE 28.4 ± 6,23 48,29 ± 6,08 14,44 ± 5,66
% DA SELANG WAKTU Oneway
Descriptives
DA
3 28.4000 10.78134 6.22461 1.6177 55.1823 16.22 36.723 48.2900 10.53578 6.08284 22.1177 74.4623 36.67 57.223 14.4400 9.80000 5.65803 -9.9045 38.7845 4.64 24.249 30.3767 17.25861 5.75287 17.1105 43.6428 4.64 57.22
5 menit10 menit15 menitTotal
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval forMean
Minimum Maximum
Test of Homogeneity of Variances
DA
.088 2 6 .917
LeveneStatistic df1 df2 Sig.
ANOVA
DA
1736.316 2 868.158 8.056 .020646.560 6 107.760
2382.876 8
Between GroupsWithin GroupsTotal
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
104
Post Hoc Tests Multiple Comparisons
Dependent Variable: DAScheffe
-19.89000 8.47585 .142 -47.0742 7.294213.96000 8.47585 .327 -13.2242 41.144219.89000 8.47585 .142 -7.2942 47.074233.85000* 8.47585 .020 6.6658 61.0342
-13.96000 8.47585 .327 -41.1442 13.2242-33.85000* 8.47585 .020 -61.0342 -6.6658
(J) waktu10 menit15 menit5 menit15 menit5 menit10 menit
(I) waktu5 menit
10 menit
15 menit
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level.*.
Homogeneous Subsets
DA
Scheffea
3 14.44003 28.4000 28.40003 48.2900
.327 .142
waktu15 menit5 menit10 menitSig.
N 1 2Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.a.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
105
Lampiran 7. Data jumlah geliat hewan uji dan hasil analisis variansi satu arah pada penetapan dosis efektif asetosal
Tabel XXI. Jumlah geliat hewan uji pada penetapan dosis efektif asetosal
Dosis 68,25 mg/kg BB Dosis 91 mg/kg BB Dosis 113,75 mg/kg
BB Waktu (menit) A B C A B C A B C
5 13 6 0 0 0 7 0 4 4 10 10 14 12 0 0 3 4 4 5 15 5 10 15 10 10 3 1 3 4 20 9 8 15 7 7 2 0 3 2 25 5 7 11 0 2 4 0 0 1 30 4 7 8 4 5 5 4 0 1 35 5 2 5 3 4 4 2 1 3 40 11 3 1 0 5 4 0 0 3 45 7 0 0 0 0 1 1 2 1 50 8 0 7 3 3 4 0 1 1 55 9 0 5 0 0 3 5 0 0 60 2 0 0 1 0 2 0 1 0
Total 88 57 79 28 36 38 17 19 25 X ± SE 74,67 ± 9,21 34,00 ± 3,06 20,33 ± 2,40
ASETOSAL NPar Tests
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
92,0000,86603
,209,209
-,209,628,826
NMeanStd. Deviation
Normal Parametersa,b
AbsolutePositiveNegative
Most ExtremeDifferences
Kolmogorov-Smirnov ZAsymp. Sig. (2-tailed)
asetosal
Test distribution is Normal.a.
Calculated from data.b.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
106
Oneway Descriptives
geliat
3 74.6667 15.94783 9.20748 35.0501 114.2833 57.00 88.003 34.0000 5.29150 3.05505 20.8552 47.1448 28.00 38.00
3 20.3333 4.16333 2.40370 9.9910 30.6756 17.00 25.00
9 43.0000 25.96151 8.65384 23.0442 62.9558 17.00 88.00
asetosal 68,25 mg/kg BBasetosal 91 mg/kg BBasetosal 113,75 mg/kgBBTotal
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval forMean
Minimum Maximum
Test of Homogeneity of Variances
geliat
3.855 2 6 .084
LeveneStatistic df1 df2 Sig.
ANOVA
geliat
4792.667 2 2396.333 23.990 .001599.333 6 99.889
5392.000 8
Between GroupsWithin GroupsTotal
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: geliatScheffe
40.66667* 8.16043 .007 14.4941 66.8393
54.33333* 8.16043 .002 28.1607 80.5059
-40.66667* 8.16043 .007 -66.8393 -14.4941
13.66667 8.16043 .316 -12.5059 39.8393
-54.33333* 8.16043 .002 -80.5059 -28.1607-13.66667 8.16043 .316 -39.8393 12.5059
(J) dosisasetosal 91 mg/kg BBasetosal 113,75 mg/kgBBasetosal 68,25 mg/kg BBasetosal 113,75 mg/kgBBasetosal 68,25 mg/kg BBasetosal 91 mg/kg BB
(I) dosisasetosal 68,25 mg/kg BB
asetosal 91 mg/kg BB
asetosal 113,75 mg/kgBB
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level.*.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
107
Homogeneous Subsets geliat
Scheffea
3 20.3333
3 34.00003 74.6667
.316 1.000
dosisasetosal 113,75 mg/kgBBasetosal 91 mg/kg BBasetosal 68,25 mg/kg BBSig.
N 1 2Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.a.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
108
Lampiran 8. Data % penghambatan terhadap jumlah geliat dan hasil analisis variansi satu arah pada penetapan dosis efektif asetosal
Tabel XXII. Data % penghambatan terhadap jumlah geliat pada penetapan dosis
efektif asetosal Dosis asetosal Kelompok
perlakuan 68,25 mg/kg BB 91 mg/kg BB 113,75 mg/kg BB 1 21,57 75,04 84,85 2 49,20 67,91 83,07 3 29,59 66.13 77,72
X ± SE 32,12 ± 8,23 69,69 ± 1,86 81,88 ± 1,97 % DA ASETOSAL Oneway
Descriptives
DA
3 33.4533 14.21437 8.20667 -1.8571 68.7638 21.57 49.203 69.6933 4.71511 2.72227 57.9804 81.4063 66.13 75.04
3 81.8800 3.71097 2.14253 72.6614 91.0986 77.72 84.85
9 61.6756 23.13844 7.71281 43.8898 79.4613 21.57 84.85
asetosal 68,25 mg/kg Basetosal 91 mg/kg BBasetosal 113,75 mg/kgBBTotal
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval forMean
Minimum Maximum
Test of Homogeneity of Variances
DA
3.856 2 6 .084
LeveneStatistic df1 df2 Sig.
ANOVA
DA
3806.994 2 1903.497 23.988 .001476.104 6 79.351
4283.098 8
Between GroupsWithin GroupsTotal
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
109
Post Hoc Tests Multiple Comparisons
Dependent Variable: DAScheffe
-36.24000* 7.27327 .007 -59.5672 -12.9128
-48.42667* 7.27327 .002 -71.7539 -25.0994
36.24000* 7.27327 .007 12.9128 59.5672
-12.18667 7.27327 .316 -35.5139 11.1406
48.42667* 7.27327 .002 25.0994 71.753912.18667 7.27327 .316 -11.1406 35.5139
(J) asetosalasetosal 91 mg/kg BBasetosal 113,75 mg/kgBBasetosal 68,25 mg/kg Basetosal 113,75 mg/kgBBasetosal 68,25 mg/kg Basetosal 91 mg/kg BB
(I) asetosalasetosal 68,25 mg/kg B
asetosal 91 mg/kg BB
asetosal 113,75 mg/kgBB
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level.*.
Homogeneous Subsets
DA
Scheffea
3 33.45333 69.6933
3 81.8800
1.000 .316
asetosalasetosal 68,25 mg/kg BBasetosal 91 mg/kg BBasetosal 113,75 mg/kgBBSig.
N 1 2Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.a.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
110
Lampiran 9. Data jumlah geliat hewan uji setelah pemberian asam asetat dan hasil analisis variansi satu arah pada semua kelompok perlakuan
Tabel XXIII. Data jumlah geliat hewan uji setelah pemberian asam asetat pada semua kelompok perlakuan
CMC Na 1% Asetosal 91 mg/kg BB
Senggani 850 mg/kg BB
Senggani 1000 mg/kg BB
Senggani 1330 mg/kg BB
Senggani 1670 mg/kg BB Waktu
(menit) 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 5 3 4 5 0 9 0 0 7 0 0 0 0 0 1 2 4 0 1 0 0 5 1 0 3 0 4 10 0 5 0 10 9 27 23 17 21 0 0 3 6 4 3 2 4 1 2 14 6 14 0 4 5 6 6 3 3 10 10 2 10 15 15 10 23 17 11 10 10 10 3 4 3 9 4 2 0 4 2 4 4 4 3 3 5 6 6 2 8 7 8 8 8 20 8 17 17 15 13 7 7 2 3 5 1 2 2 4 2 0 3 0 4 4 7 8 4 7 7 8 11 7 15 7 25 8 19 17 11 14 0 2 4 2 3 0 1 1 5 0 0 1 0 3 8 5 6 4 7 11 9 3 5 5 7 30 9 10 13 10 9 4 5 5 7 5 0 0 3 3 0 0 2 0 3 1 9 9 0 2 6 8 2 7 4 13 35 8 10 15 13 8 3 4 4 1 2 0 0 0 0 1 0 0 1 0 2 7 0 0 6 2 2 2 4 3 2 40 13 6 10 9 5 0 5 4 7 2 0 0 0 0 3 0 0 1 0 2 0 0 0 0 7 5 1 3 4 5 45 12 5 5 7 13 0 0 1 0 4 0 0 1 0 1 0 0 0 0 0 1 4 0 1 0 5 2 2 1 6 50 6 7 4 2 7 3 3 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 1 0 0 8 1 1 0 4 55 10 3 6 3 3 0 0 3 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 2 3 3 0 6 60 8 0 3 3 3 1 0 2 1 2 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 1 0 0 0 0 3 2 1 2
Total 104 131 135 101 115 28 36 38 32 30 13 10 13 14 17 20 16 19 14 24 43 40 21 36 38 69 55 52 60 75 X ± SE 112,20 ± 6,89 32,8 ± 1,86 13,4 ± 1,12 18,6 ± 1,72 35,6 ± 3,83 62,2 ± 4,31
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
111
PERLAKUAN NPar Tests
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
303,5000
1,73702,139,139
-,139,764,604
NMeanStd. Deviation
Normal Parametersa,b
AbsolutePositiveNegative
Most ExtremeDifferences
Kolmogorov-Smirnov ZAsymp. Sig. (2-tailed)
perlakuan
Test distribution is Normal.a.
Calculated from data.b.
Oneway
Descriptives
geliat
5 117.2000 15.40130 6.88767 98.0768 136.3232 101.00 135.005 32.8000 4.14729 1.85472 27.6505 37.9495 28.00 38.005 13.4000 2.50998 1.12250 10.2834 16.5166 10.00 17.005 18.6000 3.84708 1.72047 13.8232 23.3768 14.00 24.005 35.6000 8.56154 3.82884 24.9694 46.2306 21.00 43.005 62.2000 9.62808 4.30581 50.2452 74.1548 52.00 75.00
30 46.6333 36.62153 6.68615 32.9586 60.3080 10.00 135.00
CMC-Na 1%asetosal 91 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg Bsenggani 1330 mg/kg Bsenggani 1670 mg/kg BTotal
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval forMean
Minimum Maximum
Test of Homogeneity of Variances
geliat
5.239 5 24 .002
LeveneStatistic df1 df2 Sig.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
112
ANOVA
geliat
37126.967 5 7425.393 100.911 .0001766.000 24 73.583
38892.967 29
Between GroupsWithin GroupsTotal
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: geliatScheffe
84.40000* 5.42525 .000 64.7614 104.0386103.80000* 5.42525 .000 84.1614 123.438698.60000* 5.42525 .000 78.9614 118.238681.60000* 5.42525 .000 61.9614 101.238655.00000* 5.42525 .000 35.3614 74.6386
-84.40000* 5.42525 .000 -104.0386 -64.761419.40000 5.42525 .054 -.2386 39.038614.20000 5.42525 .270 -5.4386 33.8386-2.80000 5.42525 .998 -22.4386 16.8386
-29.40000* 5.42525 .001 -49.0386 -9.7614-103.80000* 5.42525 .000 -123.4386 -84.1614-19.40000 5.42525 .054 -39.0386 .2386-5.20000 5.42525 .966 -24.8386 14.4386
-22.20000* 5.42525 .020 -41.8386 -2.5614-48.80000* 5.42525 .000 -68.4386 -29.1614-98.60000* 5.42525 .000 -118.2386 -78.9614-14.20000 5.42525 .270 -33.8386 5.4386
5.20000 5.42525 .966 -14.4386 24.8386-17.00000 5.42525 .121 -36.6386 2.6386-43.60000* 5.42525 .000 -63.2386 -23.9614-81.60000* 5.42525 .000 -101.2386 -61.9614
2.80000 5.42525 .998 -16.8386 22.438622.20000* 5.42525 .020 2.5614 41.838617.00000 5.42525 .121 -2.6386 36.6386
-26.60000* 5.42525 .003 -46.2386 -6.9614-55.00000* 5.42525 .000 -74.6386 -35.361429.40000* 5.42525 .001 9.7614 49.038648.80000* 5.42525 .000 29.1614 68.438643.60000* 5.42525 .000 23.9614 63.238626.60000* 5.42525 .003 6.9614 46.2386
(J) perlakuanasetosal 91 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BBsenggani 1670 mg/kg BBCMC-Na 1%senggani 850 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BBsenggani 1670 mg/kg BBCMC-Na 1%asetosal 91 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BBsenggani 1670 mg/kg BBCMC-Na 1%asetosal 91 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BBsenggani 1670 mg/kg BBCMC-Na 1%asetosal 91 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 1670 mg/kg BBCMC-Na 1%asetosal 91 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BB
(I) perlakuanCMC-Na 1%
asetosal 91 mg/kg BB
senggani 850 mg/kg BB
senggani 1000 mg/kg BB
senggani 1330 mg/kg BB
senggani 1670 mg/kg BB
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level.*.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
113
Homogeneous Subsets geliat
Scheffea
5 13.40005 18.6000 18.60005 32.8000 32.80005 35.60005 62.20005 117.2000
.054 .121 1.000 1.000
perlakuansenggani 850 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBasetosal 91 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BBsenggani 1670 mg/kg BBCMC-Na 1%Sig.
N 1 2 3 4Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.a.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
114
Lampiran 10. Data % penghambatan terhadap jumlah geliat dan hasil analisis statistik pada semua kelompok perlakuan Tabel XXIV. Data % penghambatan terhadap jumlah geliat pada semua kelompok perlakuan
% penghambatan terhadap jumlah geliat Kelompok
perlakuan CMC Na 1% Asetosal 91 mg/kg BB
Senggani 850 mg/kg BB
Senggani 1000 mg/kg BB
Senggani 1330 mg/kg BB
Senggani 1670 mg/kg BB
1 7,31 75,04 88,41 82,18 61,68 38,50 2 -16,76 67,91 91,09 85,74 64,35 50,98 3 -20,32 66,13 88,43 83,07 81,28 53,65 4 9,98 71,48 87,52 87,52 67,91 46,52 5 -2,50 73,26 84,85 78,61 66,13 33,16
X ± SE 0,00 ± 6.14 70,76 ± 1,65 88,06 ± 1,00 83,42 ± 1,53 68,26 ± 3,41 44,56 ± 3,84
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
115
% DA PERLAKUAN Oneway
Descriptives
DA
5 -4.4580 13.72696 6.13888 -21.5023 12.5863 -20.32 9.985 70.7640 3.69615 1.65297 66.1746 75.3534 66.13 75.045 88.0600 2.23808 1.00090 85.2811 90.8389 84.85 91.095 83.4240 3.42741 1.53278 79.1683 87.6797 78.61 87.525 68.2640 7.61551 3.40576 58.8081 77.7199 61.68 81.255 44.5620 8.57860 3.83647 33.9103 55.2137 33.16 53.65
30 58.4360 32.63973 5.95917 46.2481 70.6239 -20.32 91.09
CMC-Na 1%asetosal 91 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg Bsenggani 1330 mg/kg Bsenggani 1670 mg/kg BTotal
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval forMean
Minimum Maximum
Test of Homogeneity of Variances
DA
5.244 5 24 .002
LeveneStatistic df1 df2 Sig.
ANOVA
DA
29493.469 5 5898.694 100.995 .0001401.742 24 58.406
30895.211 29
Between GroupsWithin GroupsTotal
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
116
Post Hoc Tests Multiple Comparisons
Dependent Variable: DAScheffe
-75.22200* 4.83346 .000 -92.7184 -57.7256-92.51800* 4.83346 .000 -110.0144 -75.0216-87.88200* 4.83346 .000 -105.3784 -70.3856-72.72200* 4.83346 .000 -90.2184 -55.2256-49.02000* 4.83346 .000 -66.5164 -31.523675.22200* 4.83346 .000 57.7256 92.7184
-17.29600 4.83346 .054 -34.7924 .2004-12.66000 4.83346 .270 -30.1564 4.8364
2.50000 4.83346 .998 -14.9964 19.996426.20200* 4.83346 .001 8.7056 43.698492.51800* 4.83346 .000 75.0216 110.014417.29600 4.83346 .054 -.2004 34.79244.63600 4.83346 .966 -12.8604 22.1324
19.79600* 4.83346 .019 2.2996 37.292443.49800* 4.83346 .000 26.0016 60.994487.88200* 4.83346 .000 70.3856 105.378412.66000 4.83346 .270 -4.8364 30.1564-4.63600 4.83346 .966 -22.1324 12.860415.16000 4.83346 .120 -2.3364 32.656438.86200* 4.83346 .000 21.3656 56.358472.72200* 4.83346 .000 55.2256 90.2184-2.50000 4.83346 .998 -19.9964 14.9964
-19.79600* 4.83346 .019 -37.2924 -2.2996-15.16000 4.83346 .120 -32.6564 2.336423.70200* 4.83346 .003 6.2056 41.198449.02000* 4.83346 .000 31.5236 66.5164
-26.20200* 4.83346 .001 -43.6984 -8.7056-43.49800* 4.83346 .000 -60.9944 -26.0016-38.86200* 4.83346 .000 -56.3584 -21.3656-23.70200* 4.83346 .003 -41.1984 -6.2056
(J) perlakuanasetosal 91 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BBsenggani 1670 mg/kg BBCMC-Na 1%senggani 850 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BBsenggani 1670 mg/kg BBCMC-Na 1%asetosal 91 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BBsenggani 1670 mg/kg BBCMC-Na 1%asetosal 91 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BBsenggani 1670 mg/kg BBCMC-Na 1%asetosal 91 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 1670 mg/kg BBCMC-Na 1%asetosal 91 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BB
(I) perlakuanCMC-Na 1%
asetosal 91 mg/kg BB
senggani 850 mg/kg BB
senggani 1000 mg/kg BB
senggani 1330 mg/kg BB
senggani 1670 mg/kg BB
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level.*.
Homogeneous Subsets
DA
Scheffe a
5 -4.45805 44.56205 68.26405 70.7640 70.76405 83.4240 83.42405 88.0600
1.000 1.000 .120 .054
perlakuanCMC-Na 1%senggani 1670 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BBasetosal 91 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg BBSig.
N 1 2 3 4Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.a.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
117
Lampiran 11. Data % perubahan daya analgesik terhadap kontrol positif
Tabel XXV. Data % Perubahan daya analgesik terhadap kontrol positif
Perubahan % daya analgesik terhadap kontrol positif Kelompok
perlakuan CMC Na 1% Asetosal 91 mg/kg BB
Senggani 850 mg/kg BB
Senggani 1000 mg/kg BB
Senggani 1330 mg/kg BB
Senggani 1670 mg/kg BB
1 -89,67 6,05 24,94 16,14 -12,83 -45,59 2 -123,69 -4,03 28,73 21,17 -9,06 -27,95 3 -128,72 -6,54 24,97 17,40 14,87 -24,18 4 -85,90 1,02 23,69 23,05 -4,03 -34,26 5 -103,53 3,53 19,91 11,09 -6,54 -53,14
X ± SE -106,30 ± 8,68 0,006 ± 2,34 24,45 ± 1,42 17,77 ± 2,08 -3,52 ± 4,82 -37,02 ± 5,42
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
118
% PERUBAHAN DA Oneway
Descriptives
perubahan
5 106.3020 19.40012 8.67600 -130.3904 -82.2136 -128.72 -85.905 .0060 5.22293 2.33577 -6.4791 6.4911 -6.54 6.055 24.4480 3.16299 1.41453 20.5206 28.3754 19.91 28.735 17.7700 4.65979 2.08392 11.9841 23.5559 11.09 23.055 -3.5180 10.78124 4.82152 -16.9047 9.8687 -12.83 14.875 -37.0240 12.12484 5.42239 -52.0790 -21.9690 -53.14 -24.18
30 -17.4367 46.10971 8.41844 -34.6543 -.2190 -128.72 28.73
CMC-Na 1%asetosal 91 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg senggani 1000 mg/kgsenggani 1330 mg/kgsenggani 1670 mg/kgTotal
N Mean Std. DeviationStd. ErrorLower BoundUpper Bound
5% Confidence Interval foMean
Minimum Maximum
Test of Homogeneity of Variances
perubahan
5.300 5 24 .002
LeveneStatistic df1 df2 Sig.
ANOVA
perubahan
58862.608 5 11772.522 101.108 .0002794.435 24 116.435
61657.043 29
Between GroupsWithin GroupsTotal
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
119
Post Hoc Tests Multiple Comparisons
Dependent Variable: perubahanScheffe
-106.30800* 6.82451 .000 -131.0117 -81.6043-130.75000* 6.82451 .000 -155.4537 -106.0463-124.07200* 6.82451 .000 -148.7757 -99.3683-102.78400* 6.82451 .000 -127.4877 -78.0803
-69.27800* 6.82451 .000 -93.9817 -44.5743106.30800* 6.82451 .000 81.6043 131.0117-24.44200 6.82451 .054 -49.1457 .2617-17.76400 6.82451 .276 -42.4677 6.9397
3.52400 6.82451 .998 -21.1797 28.227737.03000* 6.82451 .001 12.3263 61.7337
130.75000* 6.82451 .000 106.0463 155.453724.44200 6.82451 .054 -.2617 49.1457
6.67800 6.82451 .963 -18.0257 31.381727.96600* 6.82451 .019 3.2623 52.669761.47200* 6.82451 .000 36.7683 86.1757
124.07200* 6.82451 .000 99.3683 148.775717.76400 6.82451 .276 -6.9397 42.4677-6.67800 6.82451 .963 -31.3817 18.025721.28800 6.82451 .124 -3.4157 45.991754.79400* 6.82451 .000 30.0903 79.4977
102.78400* 6.82451 .000 78.0803 127.4877-3.52400 6.82451 .998 -28.2277 21.1797
-27.96600* 6.82451 .019 -52.6697 -3.2623-21.28800 6.82451 .124 -45.9917 3.415733.50600* 6.82451 .003 8.8023 58.209769.27800* 6.82451 .000 44.5743 93.9817
-37.03000* 6.82451 .001 -61.7337 -12.3263-61.47200* 6.82451 .000 -86.1757 -36.7683-54.79400* 6.82451 .000 -79.4977 -30.0903-33.50600* 6.82451 .003 -58.2097 -8.8023
(J) perlakuanasetosal 91 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BBsenggani 1670 mg/kg BBCMC-Na 1%senggani 850 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BBsenggani 1670 mg/kg BBCMC-Na 1%asetosal 91 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BBsenggani 1670 mg/kg BBCMC-Na 1%asetosal 91 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BBsenggani 1670 mg/kg BBCMC-Na 1%asetosal 91 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 1670 mg/kg BBCMC-Na 1%asetosal 91 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BB
(I) perlakuanCMC-Na 1%
asetosal 91 mg/kg BB
senggani 850 mg/kg BB
senggani 1000 mg/kg BB
senggani 1330 mg/kg BB
senggani 1670 mg/kg BB
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level.*.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
120
Homogeneous Subsets perubahan
Scheffea
5 -106.30205 -37.02405 -3.51805 .0060 .00605 17.7700 17.77005 24.4480
1.000 1.000 .124 .054
perlakuanCMC-Na 1%senggani 1670 mg/kg BBsenggani 1330 mg/kg BBasetosal 91 mg/kg BBsenggani 1000 mg/kg BBsenggani 850 mg/kg BBSig.
N 1 2 3 4Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.a.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
121
Lampiran 12. Cara perhitungan % penghambatan jumlah geliat terhadap kontrol negatif dan % perubahan daya analgesik terhadap kontrol positif
Contoh :
1. Perhitungan % penghambatan jumlah geliat terhadap kontrol negatif pada
kelompok perlakuan ekstrak etanol daun senggani dosis 850 mg/kg BB
(subyek uji no.1)
% penghambatan jumlah geliat = 100 - [ (P/K) x 100 ]
Jumlah geliat subyek uji (P) = 76
Rata-rata jumlah geliat kelompok kontrol negatif (K) = 112,20
Cara :
% penghambatan jumlah geliat = 100 - [ ( 76 / 112,20 ) x 100 = 32,26 %
2. Perhitungan % perubahan daya analgesik terhadap kontrol positif pada
kelompok perlakuan ekstrak etanol daun senggani dosis 850 mg/kg BB
(subyek uji no.1)
% perubahan penghambatan terhadap geliat = x 100 ( P − Kp )
Kp % penghambatan jumlah geliat perlakuan (P) = 88,41
Rata- rata % penghambatan jumlah geliat kontrol positif (Kp) = 70,76
Cara :
% perubahan daya analgesik terhadap kontrol positif =
( ) 10076,70
76,7041,88×
− = 24,94 %
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
122 122
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI