i
TESIS
PERBANYAKAN SOMAKLONAL
TANAMAN ANGGREK Vanda tricolor Lindl.
var. suavis
DHIMAS NURPRATAMA
NIM 1190861004
PROGRAM MAGISTER
PROGRAM STUDI BIOTEKNOLOGI PERTANIAN
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
2015
ii
PERBANYAKAN SOMAKLONAL
TANAMAN ANGGREK Vanda tricolor Lindl.
var. suavis
Tesis untuk Memperoleh Gelar Magister
pada Program Magister, Program Studi Bioteknologi Pertanian,
Program Pascasarjana Universitas Udayana
DHIMAS NURPRATAMA
NIM 1190861004
PROGRAM MAGISTER
PROGRAM STUDI BIOTEKNOLOGI PERTANIAN
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
2015
iii
iv
PENETAPAN PANITIA PENGUJI TESIS
Tesis Ini Telah Diuji pada
Tanggal : 10 November 2015
Panitia Penguji Tesis Berdasarkan SK Rektor
Universitas Udayana, No. : 2032 / UN14.4 / HK / 2015, Tanggal 30 Juni 2015
Ketua : Prof. Dr. Ir. I Gede Rai Maya Temaja, M.P.
Anggota :
1. Dr. Ir. Rindang Dwiyani, M.Sc.
2. Prof. Dr. Ir. I Made Sudana, M.S.
3. Dr. Ir. Dewa Nyoman Nyana, M.Si.
4. I Putu Sudiarta, S.P., M.Si., Ph.D.
v
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT
Saya yang bertanda tangan di bawah ini :
Nama : Dhimas Nurpratama
NIM : 1190861004
Program Studi : Bioteknologi Pertanian
Judul Tesis : Perbanyakan Somaklonal Tanaman Anggrek Vanda tricolor
Lindl. var. suavis.
Dengan ini menyatakan bahwa karya ilmiah tesis ini bebas plagiat. Apabila
dikemudian hari terbukti plagiat dalam karya ilmiah ini, maka saya bersedia
menerima sanksi sesuai peraturan Mendiknas RI No. 17 Tahun 2010 dan
Peraturan Perundang-undangan yang berlaku.
Denpasar, 10 November 2015
Yang membuat pernyataan,
(Dhimas Nurpratama)
vi
UCAPAN TERIMA KASIH
Pertama-tama perkenankanlah penulis memanjatkan puji syukur kehadirat
ALLAH SWT, karena atas rahmat dan anugrahNYA tesis yang berjudul
“Perbanyakan Somaklonal Tanaman Anggrek Vanda tricolor Lindl. var. suavis”
dapat diselesaikan.
Dalam penyusunan tesis ini tidak lepas dari bimbingan dan bantuan dari
semua pihak, untuk itu penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya
kepada Prof. Dr. Ir. I Gede Rai Maya Temaja, M.P. sebagai Pembimbing I
sekaligus Ketua Program Studi Bioteknologi Pertanian, Program Pascasarjana
Universitas Udayana yang dengan penuh perhatian dan kesabaran telah
memberikan bimbingan, semangat, dan saran kepada penulis; Dr. Ir. Rindang
Dwiyani, M.Sc selaku Pembimbing II, yang dengan sangat sabar dan penuh
perhatian memberikan dorongan, semangat, bimbingan, saran dan arahan kepada
penulis selama proses penelitian dan penyusunan tesis ini.
Ucapan terima kasih penulis tujukan kepada Rektor Universitas Udayana
Prof. Dr. dr. Ketut Suastika, Sp. PD., KEMD, Ibu Direktur Pascasarjana
Universitas Udayana Prof. Dr. dr. A.A. Raka Sudewi, Sp. S(K) dan Prof. Dr. Ir.
I Gede Rai Maya Temaja, M.P., selaku Ketua Program Studi Bioteknologi
Pertanian Program Pascasarjana Universitas Udayana atas kesempatan yang
diberikan kepada penulis untuk menjadi mahasiswa Program Magister pada
Program Pascasarjana Universitas Udayana serta seluruh staf administrasi yang
telah banyak membantu penulis selama menempuh pendidikan.
vii
Ucapan terima kasih penulis sampaikan pula kepada para Penguji tesis,
yaitu Prof. Dr. Ir. I Made Sudana, M.S; Dr. Ir. Dewa Nyoman Nyana, M.Si;
I Putu Sudiarta, S.P., M.Si., Ph.D yang telah banyak memberikan banyak
masukan, saran, dan arahan dalam penyelesaian tesis ini sehingga tesis ini dapat
terwujud menjadi lebih baik.
Ucapan terima kasih yang tulus penulis sampaikan kepada kedua orang tua
yang selalu mendoakan, menjadi motivasi, pengingat dan penyemangat untuk
terus maju. Drs. H. Sarjono HS. selaku kakek sekaligus Ayah yang telah
memberikan suri tauladannya dan dukungan materi, moril serta menjadi
penyemangat hidup dalam perantauan di Pulau Seribu Pura hingga akhir
perjuangan meraih gelar Master. Terima kasih untuk sahabat - sahabat terbaik
Wahyu Budiyanto, Tania, Diana Rosinta, dan Taufik. Terlalu banyak kenangan
terukir indah selama di Bali.
Ungkapan terima kasih penulis sampaikan dengan tulus dan ikhlas hanya
ALLAH SWT yang mampu membalas semua kebaikan yang telah diberikan.
Semoga ALLAH SWT selalu melimpahkan rahmatNYA kepada semua pihak
yang telah membantu pelaksanaan dan penyelesaian tesis ini. Semoga tesis ini
dapat memberikan sumbangan bagi pengembangan ilmu pengetahuan dan
bermanfaat bagi semua.
Denpasar, 10 November 2015
Penulis
viii
ABSTRAK
Perbanyakan Somaklonal Tanaman Anggrek Vanda tricolor Lindl.
var. suavis
Indonesia merupakan salah satu negara yang memiliki banyak keragaman
tanaman anggrek, terutama anggrek alam yang tersebar hampir di seluruh
nusantara. Salah satu spesies anggrek alam tersebut adalah anggrek Vanda tricolor
Lindl. var. suavis. Spesies anggrek ini merupakan induk persilangan dari beberapa
anggrek V. tricolor yang memiliki nilai ekonomi tinggi di pasaran. Spesies
V. tricolor di habitat asalnya dilaporkan mulai langka disebabkan oleh kerusakan
hutan akibat overgathering dan bencana alam. Dengan alasan tersebut, maka perlu
dilakukannya usaha konservasi untuk menyelamatkan tanaman anggrek V. tricolor
dari kepunahan. Salah satu alternatif untuk melestarikan keanekaragaman anggrek
ini adalah dengan cara melakukan perbanyakan melalui mikropropagasi. Melalui
mikropropagasi akan diperoleh anakan yang seragam dan identik dengan
induknya. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh konsentrasi media
MS dan jenis irisan organ dan reaksinya terhadap pertumbuhan serta jumlah
planlet yang dihasilkan.
Penelitian ini menggunakan variasi media ½ MS dan 1 MS terhadap
macam irisan organ yaitu ujung daun, pangkal daun, ujung batang, dan pangkal
batang. Analisis data menggunakan statistik dengan metode Rancangan Acak
Lengkap faktorial yang kemudian di ekspresikan dengan menggunakan Tabel
Anova dan Uji DMRT taraf kesalahan 5%.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa perbanyakan somaklonal anggrek
V. tricolor Lindl. var. suavis dapat tumbuh dengan baik pada perlakuan media
½ MS. Perlakuan D0N1 dan D0N2 menunjukkan hasil terbaik terhadap persentase
eksplan hidup yaitu 100 %, sedangkan pada perlakuan D0N3 menunjukkan
persentase rata-rata eksplan bertunas tertinggi yaitu 40 % dan jumlah tunas per
eksplan yaitu 0,40 buah pada induksi tunas anggrek V. tricolor Lindl. var. suavis. Kata kunci: Vanda tricolor, media MS, macam organ
ix
ABSTRACT
Somaklonal Multipication Orchid of Vanda tricolor Lindl. var. suavis
Indonesia is one of the countries that have a lot of diversity, especially the
Orchids nature that spread throughout the archipelago. One of the orchid natural
species are Vanda tricolor Lindl. var. suavis. This orchid speciesis holding a cross
of several V. tricolor orchid which has high economic value in the market.
V. tricolor species in originally habitat reposted a rare start caused by the
destruction of forests due to overgathering and natural disasters. With the reasons
he had to do a conservation efforts to save the V. tricolor orchid from extinction.
One of alternative to preserve the diversity of orchid is by mikropropagasi. By
mikropropagasi will be acquired a uniform and saplings is identical to its parent.
The objectives of the research was to find out the effect of MS and type of explant
and their reaction to growth and amount of the resulting planlet. The completely
randomized design with two factorials. The first factor was combination of ½ MS and
1 MS. The second factor was explant type: N1 (leaf tip), N2 (leaf base), N3 (shoot
tip) and N4 (shoot base). Data analysis using the statistics with factorial by
completely randomized design (CRD) which later was expressed by using the
Anova Table and DMRT test with error level of 5%. The result of duplication somaklonal of Orchid of V. tricolor Lindl. var. suavis
can growt well on the treatment of the ½ MS. D0N1 and D0N2 significantly on
percentage of explant growing 100 %, while on D0N3 effected significantly on
percentage of shoot growing 40 % and shoot number 0,40 per explants at induction of
V.tricolor Lindl. var. suavis.
Key words: Vanda tricolor, MS media, explant types
x
RINGKASAN
Indonesia merupakan salah satu negara yang memiliki banyak keragaman
tanaman anggrek, terutama anggrek alam yang tersebar hampir di seluruh
nusantara. Salah satu spesies anggrek alam tersebut adalah anggrek Vanda tricolor
Lindl. var. suavis. Spesies anggrek ini merupakan induk persilangan dari beberapa
anggrek V. tricolor yang memiliki nilai ekonomi tinggi di pasaran. Spesies
V. tricolor di habitat asalnya dilaporkan mulai langka disebabkan oleh kerusakan
hutan akibat overgathering dan bencana alam. Dengan alasan tersebut, maka perlu
dilakukannya usaha konservasi untuk menyelamatkan tanaman anggrek V. tricolor
dari kepunahan. Salah satu alternatif untuk melestarikan keanekaragaman anggrek
ini adalah dengan cara melakukan perbanyakan melalui mikropropagasi. Melalui
mikropropagasi akan diperoleh anakan yang seragam dan identik dengan
induknya. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh
konsentrasi media MS dan jenis irisan organ dan interaksinya terhadap
pertumbuhan serta jumlah planlet yang dihasilkan.
Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan rancangan acak lengkap
(RAL) yang disusun secara faktorial yang terdiri dari dua faktor. Faktor pertama
adalah media yang terdiri dari dua aras yaitu : D0 (½ MS) dan D1 (1 MS). Faktor
kedua adalah jenis irisan organ yang terdiri dari 4 aras, yaitu : N1 (ujung daun),
N2 (pangkal daun), N3 (ujung batang), dan N4 (pangkal batang). Dari perlakuan
faktorial ini diperoleh 8 kombinasi perlakuan, yaitu D0N1, D0N2, D0N3, D0N4,
D1N1, D1N2, D1N3, D1N4. Setiap perlakuan diulang sebanyak 5 kali sehingga
terdapat 40 unit percobaan dan setiap unit ditanami 10 eksplan.
Berdasarkan hasil analisis sidik ragam menunjukkan bahwa secara interaksi
antara media MS terhadap macam irisan organ berpengaruh nyata terhadap semua
parameter pengamatan, yaitu persentase rata-rata eksplan hidup, persentase
eksplan browning pada umur 4 minggu setelah tanam (MST), persentase rata-rata
eksplan tumbuh tunas dan jumlah tunas pada umur 5 (MST).
Persentase eksplan hidup tertinggi terdapat pada perlakuan D0N1 yaitu
sebesar 100 %, dan persentase eksplan hidup terendah terdapat pada perlakuan
D1N4 yaitu sebesar 6 %. Sedangkan pada pengamatan persentase eksplan
browning dengan pemberian media 1 MS menunjukkan persentase browning
tertinggi yaitu sebesar 94 % pada perlakuan D1N4 dan pada perlakuan media
½ MS rata-rata browning tertinggi yaitu sebesar 52 % pada perlakuan D0N3.
Persentase tumbuh tunas tertinggi terdapat pada perlakuan D0N3 yaitu sebesar
40 %, dan pada perlakuan media 1 MS persentase rata-rata eksplan bertunas yaitu
sebesar 0 %. Sedangkan pada pengamatan jumlah tunas tertinggi diperoleh pada
perlakuan D0N3 yaitu sebesar 0,40 buah.
Kesimpulan dari penelitian ini adalah perbanyakan somaklonal anggrek
Vanda tricolor Lindl. var. suavis dapat tumbuh dengan baik pada perlakuan media
½ MS. Pada perlakuan D0N1 menunjukkan hasil terbaik terhadap persentase
eksplan hidup yaitu 100 %, dan pada perlakuan D0N3 menunjukkan persentase
rata-rata eksplan bertunas tertinggi yaitu 40 % dan jumlah tunas per eksplan yaitu
0,40 buah.
xi
DAFTAR ISI
Halaman
COVER DALAM .................................................................................................. ii
LEMBAR PENGESAHAN .................................................................................. iii
PENETAPAN PANITIA PENGUJI ..................................................................... iv
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT........................................................ v
UCAPAN TERIMA KASIH .................................................................................. vi
ABSTRAK ........................................................................................................... viii
ABSTRACT ........................................................................................................... ix
RINGKASAN ......................................................................................................... x
DAFTAR ISI .......................................................................................................... xi
DAFTAR TABEL ................................................................................................ xiii
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xiv
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xv
BAB I PENDAHULUAN ....................................................................................... 1
1. Latar Belakang ............................................................................................. 1
2. Rumusan Masalah ........................................................................................ 3
3. Tujuan Penelitian ......................................................................................... 3
4. Manfaat Penelitian ....................................................................................... 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................. 4
2.1 Klasifikasi Tanaman Anggrek Vanda tricolor Lindl. var. suavis ................ 4
2.2 Organogenesis dalam Kultur In Vitro .......................................................... 6
2.3 Media dalam Kultur In Vitro ........................................................................ 8
BAB III KERANGKA BERPIKIR, KONSEP DAN HIPOTESIS ......................... 9
3.1 Kerangka Berpikir dan Konsep Penelitian ................................................... 9
3.2 Hipotesis Penelitian .................................................................................... 10
BAB IV METODE PENELITIAN ....................................................................... 11
4.1 Tempat dan Waktu Penelitian .................................................................... 11
4.2 Alat dan Bahan Penelitian .......................................................................... 11
4.3 Rancangan Penelitian ................................................................................. 12
4.4 Pelaksanaan Penelitian ............................................................................... 12
4.4.1 Sterilisasi Bahan dan Alat ..................................................................... 12
4.4.2 Pembuatan Media MS ............................................................................ 13 4.4.3 Penanaman .............................................................................................. 14
4.5 Variabel Pengamatan ......................................................................................... 15
4.6 Analisis Data ............................................................................................. 16
xii
BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................ 17
5.1 Persentase Rata-rata Eksplan Hidup ........................................................... 17
5.2 Persentase Rata-rata Eksplan Browning ..................................................... 19
5.3 Persentase Rata-rata Eksplan Bertunas ...................................................... 24
5.4 Jumlah Tunas .............................................................................................. 26
BAB VI SIMPULAN DAN SARAN .................................................................... 29
6.1 Simpulan .................................................................................................... 29
6.2 Saran ........................................................................................................... 29
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 30
LAMPIRAN .......................................................................................................... 34
xiii
DAFTAR TABEL
Halaman
5.1 Signifikasi pengaruh media (D), jenis eksplan (N) dan interaksinya
(DxN) terhadap persentase eksplan hidup, persentase eksplan browning,
persentase eksplan bertunas dan Jumlah tunas per eksplan ........................ 17
5.2 Pengaruh media (D) dan jenis irisan organ (N) terhadap persentase
eksplan hidup (%) dan persentase eksplan browning (%) umur 4 minggu
setelah tanam (MST)................................................................................... 19
5.3 Pengaruh media (D) dan jenis irisan organ (N) terhadap persentase rata-
rata eksplan bertunas (%) dan jumlah tunas per eksplan umur 5 minggu
setelah tanam (MST)................................................................................... 26
xiv
DAFTAR GAMBAR
Halaman
2.1 Anggrek Vanda tricolor Lindl. var. suavis forma Bali ............................... 5
3.1 Diagram Kerangka Konsep Penelitian ....................................................... 10
4.1 Bahan tanam anggrek Vanda tricolor var. suavis forma Bali ..................... 11
5.1 Persentase browning A. Browning pada eksplan pangkal batang dengan
1 MS, B. Browning pada eksplan pangkal batang dengan ½ MS
C. Browning pada eksplan ujung daun dengan 1 MS, D. Browning pada
eksplan ujung daun dengan media ½ MS ................................................... 23
5.2 Pertumbuhan Tunas Pada Eksplan ½ MS A. Jumlah tunas pada eksplan
ujung batang dengan media ½ MS, B. Jumlah tunas pada eksplan
pangkal batang dengan media 1 MS ........................................................... 28
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
1. Komposisi Media MS ................................................................................. 35
2. Layout Penelitian ........................................................................................ 36
3. Perhitungan Media ...................................................................................... 37
4. Tabel Analisis Sidik Ragam ....................................................................... 38