Download - Pengantar imunoasai
![Page 1: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/1.jpg)
KULIAH PENGANTAR DASAR2 IMUNOASAI
Jusak Nugraha2015
![Page 2: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/2.jpg)
PENGANTAR IMUNOASAI (SEROLOGI) DASAR Imunologi mempelajari reaksi tubuh terhadap masuknya Ag & efek dari Ab yang terbentuk / telah ada pd Ag tsb. Perkembangan Imunologi membutuhkan sarana untuk mengukur derajat imunitas / [Ab] dalam tubuh.
Reverse Serologi : Bila Ab diket untuk menentukan Ag yang tak diketahui.
Uji serologi (Imunoasai).
IMUNOASAI: UJI SEROLOGI + Reverse Serologi
![Page 3: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/3.jpg)
1. Konsep Dasar Imunoasai
Reaksi Ag dan Ab ; terdiri dari beberapa tahap
a. Tahap awal : Ag + Ab Ag-Ab
b. Tahap Desosiasi : Ag-Ab Ag + Ab
c. Tahap keseimbangan ( equilibrium ): Ag + Ab <=> Ag- Ab
Afinitas Ab thd Ag ukuran kekuatan ikatan Ag-Ab Makin besar afinitasnya, makin banyak ikatan Ag-Ab pada saat equilibrium.
![Page 4: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/4.jpg)
-S-S--S-S--S-S-
Regio variabel
L H L H
Fc
Fab
Gambar 1. Struktur dasar dari molekul antibodi L = Light Chain H = Heavy chain
2. Komponen yg terpenting dalam serologi yaitu ANTIBODI
![Page 5: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/5.jpg)
Beberapa Istilah penting dlm Imunoasai
Ikatan Ab-Ag adalah spesifik seperti kunci-anak kunci. Reaksi silang dapat terjadi dengan struktur mol Ag lain yang mirip dengan Ag pasangannya tergantung dari :
- profil spesifitas Ab-nya &- kemurnian Ag-nya
Ab yang amat spes. = Ab dengan binding sites yang hanya dapat mengikat Ag dengan struktur molekul yang unik saja.
a. Spesifitas dari Ab
![Page 6: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/6.jpg)
x
y
z
x
y
z
Antigen I Antibodi I
Antigen II
v
w
x v
w
x
X
Y
Z
X
Y
Z
V
W
X
X
Y
Z
Gambar 2. Kompleks dua antigen yang memiliki satu epitop yang sama (X) dan berbagai macam antibodi
yang mungkin terbentuk
Antibodi II
![Page 7: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/7.jpg)
b. Ukuran kuantitas Ab
Ada beberapa cara tentukan konsentrasi Ab dalam serum.
- Kualitatif pos. /neg. adanya perubahan fisik dari bahan pemeriksaan.
- Semi kuantitatif ; ditentukan dengan pengenceran serum secara progresif Titer
- Kuantitatif ; ditentukan dengan menggunakan beberapa sera baku kurva baku. Akurasi dicek dengan serum kontrol. Hasilnya diinterpolasi ke dalam kurva baku.
![Page 8: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/8.jpg)
Gambar 3. Kurva baku uji ELISA
0Kadar Bahan
X
OD
5 g/dl
![Page 9: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/9.jpg)
VALIDITAS KLINIS (NILAI DIAGNOSTIK) IMUNOASAI.
SENSITIVITAS Dx = FN TP
TP
Pd. Pend. Peny. TTT
SPESIFISITAS Dx = FP TN
TN
Pd. Bukan Pend. Peny. Tsb.
EFISIENSI Dx = N
TN TP N = Pend. + Bukan Pend.
NRN Dx =
NRP Dx =
FN TN
TN
FP TP
TP
![Page 10: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/10.jpg)
FAKTOR-2 DASAR YG MEMPENGARUHI IMUNOASAI
Sifat dari Ag. Ab diberi nama sesuai dengan cara penentuan yang paling sens. Mis : aglutinin, presipitin dll
Elektrolit dan pH2
1
Waktu dan suhu. Reaksi Ag-Ab terjadi dalam 2 tahapa. Ikatan spesifik Ab dg Ag/Hapten yang sesuaib. Terjadi reaksi yg dapat dilihat (presipitasi dll)
3
Mekanisme Daya Tahan NonspesifikBahan yg normal/abnormal terdapat dalam sekret/cairan tubuh.
4
Rasio Ag dan Ab5
![Page 11: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/11.jpg)
Prozone,Tak ada presipitasi
Equivalent zone,Presipitasi
Post zone,Tak ada presipitasi
Gambar 4. Berbagai macam rasio Ag – Ab dan implikasinya
= ANTIBODI
= ANTIGEN
![Page 12: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/12.jpg)
BAHAN PEMERIKSAAN UTK IMUNOASAI
MACAM BAHAN : serum , plasma, css Usahakan jangan hemolisis
Inaktivasi C 56°C, 30 menit
Ag untuk Imunoasai. Sebaiknya dibuat sendiri dari strain lokal, lebih baik yang multistrains.
![Page 13: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/13.jpg)
IMUNOASAI
KADAR BAHANKADAR BAHAN
RENDAH ( ng/ml, pg/ml ) TINGGI (mg/ml,ug/ml)
Hasil reaksi tak tampak
FAKTOR PENGUAT (LABEL)
IF RIA EIA
Homogen Heterogen = ELISA
Hasil reaksi DAPAT DILIHAT
RID
UJI AGLUTINASI
ICA
![Page 14: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/14.jpg)
UJI PRESIPTASI UJI AGLUTINASI UJI FIKSASI KOMPLEMEN UJI NETRALISASI TOKSIN
I. IMUNOASAI TAK BERLABEL
Ada 2 jenis imunoasai.I. IMUNOASAI TAK BERLABELII. IMUNOASAI BERLABEL
JENIS IMUNOASAI
![Page 15: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/15.jpg)
Ag yang larut Antibodi
PRESIPITASI
Gambar 5. Prinsip dasar uji presipitasi
UJI PRESIPITASI
![Page 16: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/16.jpg)
Ag.
Serum dengan Ab
Inkubasi
Presipitasi
Gambar 6. Uji presipitasi tabung
![Page 17: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/17.jpg)
Serum dengan Ab
Ag
Aplikasi : Uji VDRL Mikro
Rotasi
(dengan rotator)
Presipitasi (+)
Tak ada Presipitasi (-)
Gambar 7. Uji presipitasi lempeng (Slide)
![Page 18: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/18.jpg)
1 2Agar
Ag. dlm sumur 1
Ab. dlm sumur 2
Gambar 8 . DIFUSI GANDA SEDERHANA
1 2
Garis presipitasi
Ag. dlm sumur 1
Ab. dlm sumur 2
![Page 19: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/19.jpg)
GAMBAR 9. Uji ELEK
![Page 20: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/20.jpg)
Antisera dalam agar
GAMBAR 10. R.I.D
1
3
4
5
6
7
8 2
Sera baku
Tes serum
Tes serum
Tes serum
Tes serum
Tes serum
![Page 21: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/21.jpg)
APLIKASI KLINIS UJI PRESIPITASI
Uji Tabung : VDRL - Makro
Uji Slide : VDRL - Mikro
Uji Tabung Kapiler : Penentuan CRP
Uji Difusi Ganda Sederhana : Uji ELEK
RID : Penentuan kelas Ig
![Page 22: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/22.jpg)
Ag. pada permukaan sel
Ab.Aglutinasi
Gambar 11. Prinsip dasar reaksi aglutinasi
UJI AGLUTINASI
Tak larut
![Page 23: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/23.jpg)
+ -Gambar 12. Uji Aglutinasi Slide
![Page 24: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/24.jpg)
Gambar 13. Uji Aglutinasi tabung
Serum ( Ab )
Susp. Ag
Inkubasi
Aglutinasi
![Page 25: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/25.jpg)
AGLUTINASI TAK LANGSUNG
A. AGLUTINASI PASIF
B. Ab TAK LENGKAP
a. Ab Monovalen
b. Lokasi Tersembunyi / Ukuran Terlalu Kecil ( Ig. G )
![Page 26: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/26.jpg)
+ +Ag Larut
PartikelPartikel disalut Ag
Ab dalam serum
AglutinasiGambar 14. Uji aglutinasi pasif
![Page 27: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/27.jpg)
APLIKASI KLINIS UJI AGLUTINASI
¨ Uji Slide (lempeng): uji Widal slide
Uji Tabung : uji Widal tabung
Aglutinasi Tak Langsung: uji Rose-Waaler
III. UJI HEMAGLUTINASI : KULIAH Bank Drh
IV. UJI LISIS IMUN & FIKSASI KOMPLEMEN
Hampir sama dengan uji aglut. tak langsung,
Hanya Anti – Ig diganti C Lisis Imun
![Page 28: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/28.jpg)
Komplemen
Sensitized cell
AbAg pada permukaan sel
= Komplemen
Gambar 15 . Prinsip dasar uji lisis imun
Uji Lisis Imun
![Page 29: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/29.jpg)
Gambar 16 . Uji Fiksasi Komplemen
A.
C CTak ada
Lisis
Komplemen Komplemen
Terikat
Sensitized SDM
B.
C C Lisis
Komplemen Komplemen
Bebas
Serum dgn. Ab
Serum tanpa Ab
Uji Positif
Uji Negatif
![Page 30: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/30.jpg)
A.
Gambar 17. Uji Netralisasi Toksin Contoh : Uji ASO
Tak hemolisisSDM
Kompleks SO-ASO
SO ASO
SOB.
Reaksi Positif
Serum tanpa ASO
SOSDM
Reaksi Negatif
Hemolisis
![Page 31: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/31.jpg)
II. IMUNOASAI BERLABEL
1. CAT FLUORESENS: IF
2. RADIOISOTOP: RIA
3. ENZIM: IMUNOASAI ENZIM ( EIA )
A. EIA HOMOGEN
B. EIA HETEROGEN (ELISA)
C. UJI IMUNO-PEROKSIDASE
4. EMAS KOLOIDAL:ASAI IMUNOKROMATOGRAFIK (ICA)
![Page 32: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/32.jpg)
CUCI
Mikroskop Fluoresens
Ab diket berlabel cat fluoresensAg tak diket.
Fiksasi pada slide
Kompleks Ag-Ab Berfluoresensi
Gambar 18. Prinsip dasar uji imunofluoresens langsung.
1. IMUNOASAI FLUORESENS (IF)
![Page 33: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/33.jpg)
CuciAg diket.
Ab tak diket
Cuci
Mikroskop Fluoresens
Kompleks Ag – Ab tak tampak
AHG dilabel Fluorescein
Kompleks Ag – Ab – AHG berfluoresensi
Gambar 19. Prinsip dasar uji imunofluoresens tak langsung.
![Page 34: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/34.jpg)
KELEMAHAN UJI IF
Peralatan canggih dan mahal
Perlu tenaga terlatih
Per hari maks 25 slide / analis
Sukar dibuat otomatis
Pelaksanaan agak kompleks & membosankan
![Page 35: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/35.jpg)
Gambar 20. Prinsip dasar Uji RIA R = label radioisotop
R
RRR
RR
R
R
R
Radiation Counter
2. Uji RIA
![Page 36: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/36.jpg)
PEMISAHAN Ag / Ab BERLABEL yg TERIKAT drp yg BEBAS
Paper Electrophoresis
Presipitasi
Adsorbsi
IMOBILISASI pd FASE PADAT
![Page 37: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/37.jpg)
Gambar 21. Prinsip dasar Uji RIA kompetitif
R
R
R
R
R
R R
RADIATION COUNTER
Cuci
![Page 38: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/38.jpg)
KELEMAHAN UJI RIA
Butuh alat mahal & tenaga terlatih
Waktu paruh reagens amat pendek ( 1,5 – 2 bln )
Perlu perlindungan khusus pd petugas lab.
Perlu tempat pembuangan reagens yang khusus
![Page 39: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/39.jpg)
BERBAGAI MACAM EIA :
A. EIA yang HOMOGEN; label berbeda sifat tergantung pada keadaan reagensianya TERIKAT/TIDAK pada lawan reaksinya TAK MEMBUTUHKAN PEMISAHAAN
B. EIA yang HETEROGEN; label TAK berbeda sifat baik reagensinya dalam keadaan terikat maupun BEBAS pada lawan reaksinya PERLU PEMISAHAAN bag. terikat dari yang bebas
3. Imunoasai Enzim (EIA)
![Page 40: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/40.jpg)
SUBSTRAT BERKROMOGEN
PRODUK berwarna
Ab pada Fase padat
Ag berlabel enzim
Gambar 22. Prinsip dasar uji ELISA kompetitif
Uji ELISA
Ag dlm serum
![Page 41: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/41.jpg)
SUBSTRAT berkromogen
PRODUK berwarna
Ag
Ab I pada Fase padat
Ab II berlabel enzim
Gambar 23. Prinsip dasar double antibody sandwich ELISA
![Page 42: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/42.jpg)
Gambar 24. Prinsip dasar uji ELISA tak langsung
Ab
PRODUK berwarna
SUBSTRAT berkromogen
Ag pada Fase padat
Anti –Ig berlabel enzim
![Page 43: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/43.jpg)
4. ICA / Uji Aliran Samping ( lateral flow test ) atau uji strip Asai Berlabel Spt IFA, RIA & EIA
BEDA DENGAN IFA & RIATak perlu alat canggih Dibaca dg mata
telanjang Amat praktis
BEDA DENGAN EIA / DOT EIA Tak perlu substrat berkromogen* Waktu pemeriksaan <
* Konjugat dg label colloidal gold Amat sensitif
Waktu pemeriksaan << 90 det – 15 men
* Bantalan Abs Aliran reagen ke lateral > cepat
![Page 44: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/44.jpg)
Jadi : ICA Sarana lab yang Praktis
Andal
Amat dibutuhkan di negara sedang berkembang
DASARNYA : Tiap legan yang dapat diikat pada partikel padat berwarna (mikrosfer) dapat dipakai untuk uji ICA
Contoh : tes kehamilan, Strepthroat, Chlamydia & ICT-TB
![Page 45: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/45.jpg)
PRINSIP DASAR ICA (UJI STRIP)
Dapat dipakai untuk melacak analit maupun Ab.
I. ICA untuk melacak analit.
Ada 2 cara pendekatan utama yaitu :
• NON- KOMPETITIF (Langsung) &
• KOMPETITIF / HAMBATAN KOMPETITIF
![Page 46: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/46.jpg)
GAMBAR 25
Bila sampel berisi analit ikatan analit-konjugat ikut aliran lateral ditangkap oleh Ab ke 2 pd grs pengikat
warna. Syarat: 1. Mol. analit cukup besar ( 2 epitope)
2. [analit] < [Ab pengikat] atau [Ab pelacak]
![Page 47: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/47.jpg)
Sisa konjugat bergerak terus ( diisap oleh bantalan Abs)
ditangkap oleh Ab spec. spes. pada garis kontrol warna
Gambar 26
= emas koloidal= Ag/analit= Ab pelacak (konjugat)= Ab pengikat (Ab ke 2)= Ab spesies spesifik pd grs kontrol
Sample Flow
![Page 48: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/48.jpg)
II. ICA untuk melacak antibodi
Dipakai 2 prinsip dasar asai tak langsung (indirect assay)
1. Ab (serum) Ag (capture line) kompleks Ag-Ab konjugat Ag-Ab-Konj (di garis pengikat)
2. Ab konjugat diikat Ag pada garis pengikat (capture line) sisa konjugat dihisap oleh absorben pad diikat oleh antikonjugat (contol line)
![Page 49: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/49.jpg)
AbAH Glob berlabel coloidal gold Ag Antikonjugat
Gambar 28
![Page 50: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/50.jpg)
Sample pad(bantalan sampel)
Conjugate pad(bantalan konjugat)
Capture line (garis pengikat)Mengandung Ag1 epitop protektif2 epitop infeksi berat
Garis kontrol/control line(mengikat sisa konjugat)
Absorbance pad(bantalan absorban)
1 2
1 2 Kontrol
TB aktif
1 2 Kontrol
1 2 Kontrol
Tertular tidak sakit
Teknik salah/reagens rusak
Contoh aplikasi ICT-TB.
![Page 51: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/51.jpg)
Session I selesai..!!
![Page 52: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/52.jpg)
PENENTUAN C-REAKTIF PROTEIN
(CRP)
Dr. Jusak Nugraha, dr, MS, SpPK (KGH,K-Im,KT-I)
Dr. Jusak Nugraha, dr, MS, SpPK (KGH,K-Im,KT-I)
Bagian Patologi KlinikFK UNAIR / RSUD Dr. Soetomo, Surabaya
![Page 53: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/53.jpg)
APA ??? - Tergolong dalam Protein Fase Akut - Serum normal; jumlah kecil
- Radang /nekrosis ; dapat sampai 1000 X
INDIKASI PEMERIKSAAN.
1. Membantu menegakkan Dx kead. penyakit radang/ nekrosis
2. Mengikuti hasil Tx peny. radang akut/nekrosis.
![Page 54: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/54.jpg)
Gambar 43. Sintesis dan aktivitas biologis dari CRP
HEPAR
IL-1, IL-6 PGE1
CRP
Mengikat bakteria presipitasi
Aktivitas & motilitas fagosit
Aktivasi C ( klasik & alternatif )
Menghambat agregasi trombosit (Adrenalin, ADP maupun kolagen)
Mempunyai daya ikat selektif terhadap Limfosit T.
COLCHICIN
NEKROSIS JARINGAN
![Page 55: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/55.jpg)
Gambar 44. Perubahan kadar CRP-serum setelah suatu operasi tanpa penyulit
Jam setelah operasi
![Page 56: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/56.jpg)
PRINSIP DASAR PENENTUAN CRP
Merupakan reverse serology.Ada 2 prinsip dasar dari berbagai cara yg dipakai
1. UJI PRESIPITASI
CRP Ag yang akan ditentukan, dg anti – CRP yang diketahui.
2. UJI AGLUTINASI PASIF
Merupakan reverse passive agglutination test
![Page 57: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/57.jpg)
Anti – CRP pada partikel
CRP dalam serum
AGLUTINASI
Gambar 45. Prinsip dasar REVERSE PASSIVE AGGLUTINATION TEST
![Page 58: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/58.jpg)
CARA PEMERIKSAAN.
1. CARA PRESIPITASI KAPILER
Tinggi presipitat diukur dalam mm; 1 mm = + , 2 mm=++.
2. CARA AGLUTINASI LATEKSPos. 0,5 mg/dl. Neg encerkan 1:10
3. R.I.D : Ukur diameter cincin presipitasi. Tentukan kadar CRP dg kurva baku.
HARGA NORMAL : RIA 1,3 mg/1 ( 0,068-8,2 mg/1 )
4. Nephelometris : Amat sensitif. (Tes hs-. CRP)
![Page 59: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/59.jpg)
Positif
NegatifGambar 47. Uji aglutinasi slide / lempeng
![Page 60: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/60.jpg)
NILAI KLINIS/FISIOPATOLOGIS.
Liniaritas & aselaritasnya amat baik .
PENGGUNAAN KLINIS.
1. Uji penyaring peny. organik ; pada radang / nekrosis CRP
2. Penentuan aktivitas peny. radang ; punya kelebihan daripada indikator nonspesifik lain ( LED, pyrexia dll ).3. Membantu Dx & evaluasi hasil Tx dr peny. infeksi. ( Septikemis pada anak, SLE disertai infeksi )
![Page 61: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/61.jpg)
Session II Selesai..!!
![Page 62: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/62.jpg)
PENENTUAN FAKTOR RHEMATOID( RHEUMATOID FACTOR )
UJI ROSE – WAALER DAN MODIFIKASINYA
Dr. Jusak Nugraha, dr, MS SpPK
(KGH, K-Im,KT-I)
Dr. Jusak Nugraha, dr, MS SpPK
(KGH, K-Im,KT-I)
Bagian Patologi KlinikFK UNAIR / RSUD Dr. Soetomo, Surabaya
![Page 63: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/63.jpg)
Apa ???Faktor rhematoid ( RF )= otoantibodi (Ig M, Ig G, Ig A ) yang ditujukan thd Ig G (anti-Ig G) & terbentuk dalam stadia agak lanjut dari penyakit artritis rhematoid ( RA )UJI ROSE-WAALER / AGLUT. LATEKS.Hanya Ig M anti-Ig G yg dapat ditentukan.INDIKASI PEMERIKSAAN.Membantu menegakkan Dx & menentukan prognosis penyakit RA
![Page 64: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/64.jpg)
Ag X ( EBV ) SENDI
SEL-2 IMUNOKOMPETEN Limfosit -- B
T- Suppressor ( terganggu )
T-Helper
Sel Plasma
RF ( Anti-Ig G ) Ig M, Ig G & Ig A
Anti X – Ab (terut. Ig G)
IMUNOPATOGENESIS ARTRITIS REMATOID
Gangguan glikosilasi
IgG
![Page 65: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/65.jpg)
+ +Ag Larut
Partikel
Partikel disalut Ag
Ab dalam serum
AglutinasiGambar 48. Aglutinasi pasif
![Page 66: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/66.jpg)
UJI ROSE-WAALER.
SERUM * Waterbath 50°C, ½ jam
Encerkan secara serial ( 1/32 – 1/1792 )
Tambahkan susp SDM ( 5 % ) yg sensitized
INKUBASI 4°C 18 jam
Baca adanya aglutinasi (HN 1:32)
* Untuk hilangkan aglutinin nonspesifik (Ab heterofil), serum & SDM domba yang dipadatkan ( 4 : 1 ), inkubasi 40 men, 2 kali.
![Page 67: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/67.jpg)
Gambar 49. Uji Rose-Waaler
![Page 68: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/68.jpg)
Gambar 50. Uji Rose-Waaler. Untuk memastikan hasil positif atau negatif
![Page 69: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/69.jpg)
NILAI KLINIS/FISIOPATOLOGIS .
Tidak begitu baik. Faktor2 yang perlu diperhatikan 1. Pos pada 70 – 80 % pend RA ( 6 – 12 bl )
2. Pos. stad dini/titer amat tinggi prog. jelek3. 20 – 30% kasus RA tes tetap neg prog. baik4. Korelasi pos. dg nod subcutan, arthritis pergelangan tangan asimetris dg deformitas & manifestasi viseral RA
![Page 70: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/70.jpg)
5. Hasil pos terdapat juga pada :a. SLE ( 30 – 50 % )b. Scleroderma ( 30% )c. Sjörgen’s syndrome ( 75% )d. Endocarditis lentae. Hepatitis menahun & agresiff. Beberapa peny. virus (Herpes zoster,
influenza A, Viral hepatitis)g. Orang normal : 4 - 6%
6. Peny. Sendi dg hasil tes yg negatif :Gout, Artrosis, Demam rhematik, Ankylosing spondylitis, Reiter’s disease & psoriatic arthritis
![Page 71: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/71.jpg)
Session V selesai…!!
![Page 72: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/72.jpg)
PENENTUAN ANTISTREPTOLISIN O (ASO)
Dr. JusakNugraha, dr, MS, SpPK (KGH,KIm,KT-I)
Dr. JusakNugraha, dr, MS, SpPK (KGH,KIm,KT-I)
Bagian Patologi KlinikFK UNAIR / RSUD Dr. Soetomo, Surabaya
![Page 73: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/73.jpg)
ASO ??? Ab thd enzim proteolitik SO.
SO ??? Produk ekstra-seluler dr -hemolitik streptococcus group A,C humanus & G dari Lancefield
Aktivitas biologik ; merusak dinding SDM
INDIKASI PEMERIKSAAN.
1. Bantu menegakkan Dx demam rhematik & glomerulonephritis akut.
2. Meramalkan, relapse pada demam rhematik
![Page 74: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/74.jpg)
Streptolisin O, S Streptokinase
Hyaluronidase Diphosphopyridine nucleotidase
Desoxyribonuclease A, B, C, a
b
c
d
Gambar 56. Struktur antigen -hemolitik streptococcus group A dari Lancefield. a = kapsul, b= komponen permukaan dari dinding sel (CSMA) , c= dinding sel, d= komponen intraseluler.
![Page 75: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/75.jpg)
-hemolitik streptococcus group A
CSMA
SO SS STREPTOKINASEHyaluronidase
DNAse
SEL - SEL IMUNOKOMPETEN
Anti
CSMAASO (Spesifik)
ASS (tak spesifik)
REAKSI SILANG DG ENDOCARD & GBM DEMAM RHEMATIK
ANTIBODI
![Page 76: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/76.jpg)
A. Tak ada hemolisisSDM
Kompleks SO-ASOSO ASO
SOB.
Reaksi Positif
Serum tanpa ASO
SOSDM
Reaksi Negatif
Hemolisis
Gambar 57. Prinsip dasar uji Antistreptolisin O
![Page 77: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/77.jpg)
Gambar 58. Prinsip dasar uji aglutinasi lateks ASO
AGLUTINASI (POSITIF)
SO, JUMLAH TERTENTU ASO
SO pd LATEKS
Serum pend. (ASO > 200 iu)
![Page 78: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/78.jpg)
HARGA NORMAL :
Batas atas ; 200 iu/ml. Pd 20 % orang normal>200 iu/ml
Dipengaruhi usia & geografi/iklim.
- Bayi baru lahir ; > tinggi daripada Ibunya dengan tajam dalam beberapa minggu
- Usia sekolah ; titer mulai sp titer usia dewasa
- Usia lanjut ; titer lagi.
- Titer normal bila makin dekat katulistiwa
![Page 79: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/79.jpg)
NILAI KLINIS/ FISIOPATOLOGIS .
- Kurang baik ; 20 % orang normal ASO 200 iu- Periksa 1X tak punya arti DX yang penting.- ASO pos ada/pernah infeksi dengan Streptococcus, dan tak berarti penderita suatu peny. tertentu ( demam rhematik ). - Penyakit-2 hepar, ginjal & hyperlipidemia pos. semu o.k. inhibator nonspesifik absorbsi/LAT
![Page 80: Pengantar imunoasai](https://reader037.vdokumen.com/reader037/viewer/2022102807/55c46707bb61eba3478b470c/html5/thumbnails/80.jpg)
TERIMA KASIH ATAS PERHATIAN ANDA