oleh - core.ac.ukkedudukan tumbuhan meranti kuning dalam sistematika tumbuhan yaitu tumbuhan meranti...
Post on 03-Mar-2020
11 Views
Preview:
TRANSCRIPT
UJI AKTIVITAS ANTIINFLAMASI EKSTRAK ASETON KULIT BATANG KAYU Shorea accuminatissima SYM. TERHADAP TIKUS PUTIH JANTAN
GALUR Wistar
SKRIPSI
Oleh:
HARI WIRIA LIKI
K.100 030 238
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA 2007
ii
UJI AKTIVITAS ANTIINFLAMASI EKSTRAK ASETON KULIT BATANG KAYU Shorea accuminatissim SYM. TERHADAP TIKUS PUTIH JANTAN GALUR Wistar
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai Derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta Di Surakarta
Oleh:
HARI WIRIA LIKI
K.100030238
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA 2007
iii
PENGESAHAN SKRIPSI
Berjudul:
UJI AKTIVITAS ANTIINFLAMASI EKSTRAK ASETON KULIT BATANG KAYU Shorea accuminatissima SYM. TERHADAP TIKUS
PUTIH JANTAN GALUR Wistar
Oleh: HARI WIRIA LIKI
K.100030238
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta
Pada Tanggal:
Penguji : 1. dr. EM. Sutrisna, M.Kes 1. ____________
2. Purwantiningsih, M.Si., Apt 2. __________
3. Drs. Haryoto Saroyobudiyono, M.Sc 3. ____________
4. Broto Santoso, SF., Apt 4. __________
Mengetahui Fakulltras Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta Dekan,
Dra. Nurul Mutmainah, M.Si., Apt. Pembimbing Utama
Drs. Haryoto Saroyobudiyono., M.Sc.
Pembimbing Pendamping
Broto Santoso, S.F., Apt.
iv
MOTTO DAN PERSEMBAHAN
“Sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan” (Q.S 94:6)
”VIRTUE IS NOT KNOWING BUT DOING”
“PROOF BETTER THAN DISCUSSION”
Karya kecil ini kupersembahkan untuk kedua orang tuaku Harmawis S.Pd & Wildawati yang telah mencurahkan segenap cinta kasihnya, kepada kedua adik-adikku Andika & Ilham, sahabat-sahabatku Ambar, Susanto, Ferri, Marta, Imam, Topan, Fuad, Hafidh, Sugi, Adi, Agus, Isur, Dawud & special untuk Annoura yang bersedia mendengar dan menerima segala keluh kesahku, serta almamaterku tercinta
v
DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya
yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan
Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat
yang pernah ditulis atau diterbitkan orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu
dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta, Desember 2007
Peneliti
(HARI WIRIA LIKI)
vi
KATA PENGANTAR
Segala puji syukur kita panjatkan kehadirat Allah SWT, pemiliki segala
ketentuan, pemilik semesta alam. Shollawat dan salam semoga senantiasa tercurah
kepada Nabi Muhammad SAW, rasul junjungan alam. Shollawat dan salam
semoga dilimpahkan kepada para keluarga, sahabat-sahabat serta para pngikut
beliau yang senantiasa selalu menjunjung tinggi sunnahnya hingga akhir zaman
nanti. ’amma ba,du.
Alhamdulillah dengan segala rahmat, petunjuk dan ketentuan dari allah,
penulis bisa menyelesaikan skripsi yang berjudul “Uji Aktivitas Antiinflamasi
Ekstrak Aseton Kulit Batang Kayu Shorea accuminatissima SYM. Terhadap
Tikus Putih Jantan Galur Wistar”
Skripsi ini disusun guna memenuhi syarat dalam memperoleh Sarjana
Farmasi (S. Farm) pada Program Studi Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
Dalam kesempatan ini penulis mengucapkan banyak terima kasih kepada
pihak-pihak yang telah berperan baik secara langsung maupun secara tidak
langsung hingga selesainya penyusunan skripsi ini. Dengan ini penulis
mengucapkan terima kasih kepada:
1. Ibu Dra. Nurul Mutmainah, M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2. Bapak Drs. Haryoto Saroyobudiyono,M.Sc, selaku pembimbing utama
yang telah banyak memberikan bimbingan, bantuan dan arahan selama
dilakukannya penelitian ini, serta waktu yang telah diluangkan sehingga
selesainya skripsi ini.
vii
3. Broto Santoso, SF.,Apt selaku pembimbing pendamping yang telah
meluangkan waktunya untuk memberikan bimbingan, arahan serta saran
selama penulisan skripsi ini.
4. Bapak dr. EM Sutrisna, M.KES sebagai penguji yang telah bersedia untuk
meluangkan waktunya dan memberikan kritik serta saran dalam penulisan
skripsi ini..
5. Ibu Purwantiningsih, M.Si.,Apt, selaku penguji yang telah bersedia untuk
meluangkan waktunya dan memberikan kritik serta saran dalam penulisan
skripsi ini.
6. Dosen-dosen Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
7. Laboran dan karyawan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Surakarta.
8. Teman-teman seperjuangan penulis di Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta dan diluar Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta serta Semua pihak yang telah membantu, yang
tidak dapat disebutkan satu persatu dalam skripsi ini.
Besar harapan penulis semoga sumbangsih yang kecil ini dapat bermanfaat
untuk kemajuan Ilmu Pengetahuan pada umumnya dan Ilmu Farmasi pada
khususnya.
Surakarta, Desember 2007
Penulis
viii
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .......................................................................................... ii
HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................. iii
HALAMAN MOTTO DAN PERSEMBAHAN ................................................. iv
HALAMAN DEKLARASI ................................................................................. v
KATA PENGANTAR ....................................................................................... vi
DAFTAR ISI ...................................................................................................... viii
DAFTAR TABEL ............................................................................................... xi
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... xii
DAFTAR SINGKATAN .................................................................................. xiii
DAFTAR PERSAMAAN ................................................................................... xiv
DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xv
BAB I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang ............................................................................ 1
B. Perumusan Masalah .................................................................... 3
C. Tujuan Penelitian ....................................................................... 3
D. Tinjauan Pustaka ......................................................................... 3
1. Tumbuhan Meranti Kuning (Shorea accuminatissma.SYM) 3
a. Sistematika Tumbuhan ................................................... 4
b. Kandungan Kimia ........................................................... 4
2. Inflamasi ................................................................................ 8
3. Simplisia ............................................................................... 12
ix
4. Penyarian .................................. ............................................ 13
5. Ekstrak ................................................................................. 15
6. Diklofenak ............................................................................ 16
E. Landasan Teori ............................................................................ 17
F. Hipotesis ...................................................................................... 17
BAB II. METODE PENELITIAN
A. Rancangan Penelitian .................................................................. 18
1. Jenis Penelitian ..................................................................... 18
2. Variabel Penelitian ............................................................... 18
B. Bahan dan Alat ............................................................................ 19
1. Bahan Penelitian.................................................................... 19
2. Alat Peneletian ...................................................................... 19
C. Jalannya Penelitian ..................................................................... 19
1. Determinasi Tanaman ........................................................... 19
2. Pengumpulan Bahan Baku.............................. ...................... 20
3. Pengeringan dan Pembuatan Serbuk ..................................... 20
4. Pembuatan Ekstrak ............................................................... 20
5. Uji Antiinflamasi .................................................................. 22
a. Pembuatan Larutan Stok Ekstrak Aseton dan Karagenin 22
b. Penetapan Dosis Natrium Diklofenak .............................. 22
c. Penetapan Dosis Ekstrak aseton ...................................... 23
d. Perlakuan Hewan Uji ........................................................ 23
x
D. Tempat Penelitian …………………………………………... 24
E. Cara Analisis ………………………………………………… 25
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Determinasi Tanaman ................................................................. 27
B. Pengumpulan Bahan Baku dan Pembuatan serbuk ..................... 27
C. Hasil Penyarian dan Pembuatan Ekstrak aseton........................... 28
D. Penentuan Konsentrasi dan Volume Pemberian Karagenin ........ 30
E. Uji Daya Antiinflamasi ............................................................... 30
1. Kontrol Negatif ............................................................... 30
2. Kontrol Positif ................................................................ 32
3. Uji Antiinflamasi Ekstrak Aseton .................................. 34
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ......................................................... 41
A. Kesimpulan ................................................................................. 41
B. Saran ............................................................................................ 41
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 42
LAMPIRAN ........................................................................................................ 46
xi
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Hasil Uji Kelarutan Ekstrak dengan Beberapa
pelarut Tabel 2. Volume udem rata-rata pada kontrol positif Tabel 3. Volume udem rata-rata pada tikus yang diinduksi
karagenin 1% dengan berbagai perlakuan Tabel 4. Nilai AUC dan % penghambatan inflamasi Tabel 5. Nilai probabilitas dari hasil uji LSD
31
32
35
36
40
xii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Biosintesis prostaglandin Gambar 2. Skema pembuatan ekstrak aseton kulit batang meranti
kuning (shorea accuminatissima SYM.) Gambar 3. Skema Kerja Uji Antiinflamasi Ekstrak Aseton terhadap
Tikus putih Jantan Yang Diinduksi Karagenin 1%. Gambar 4. Profil kromatogram elusi ekstrak aseton dengan
perbandingan etil asetat dan n-heksana berturut turut 5:5(a); 6:4(b); 8:2(c); 9:1(d)
. Gambar 5. Grafik hasil pengukuran volume udem kontrol negatif Gambar 6. Grafik volume udem rata-rata (mL) terhadap waktu (Menit)
Gambar 7. Grafik volume udem rata-rata (mL) Vs Waktu (Menit) Gambar 8. Histogram daya antiinflamasi
11
21
24
29
31
33
36
37
xiii
DAFTAR SINGKATAN
DAI = Daya AntiInflamasi
AUC = Area Under the Curve
AINS = Antiinflamasi Non Steroid
SEM = Standard Error of Mean
xiv
DAFTAR PERSAMAAN
Halaman
Persamaan 1.
VaVtVu −= .
26
Persamaan 2.
)(2 12
2121 ttVtVtAUC −
+=
26
Persamaan3.
Persen Daya Antiinflamasi = %100xAUCk
AUCpAUCk −
26
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman Lampiran 1. Lampiran 2. Lampiran 3. Lampiran 4. Lampiran 5. Lampiran 6 . Lampiran 7
Hasil uji daya antiinflamasi ekstrak aseton kulit batang meranti kuning Proses ekstraksi Keterangan Hasil Determinasi Hasil analisis statistik dengan one way ANOVA dan Kolmogorov -Smirnov Hasil analisis SEM Perhitungan dosis Gambar Pletismometer
46
47
49
50
52
53
54
1
BAB I
PENDAHULUAN
A. LATAR BELAKANG
Radang atau bisa juga disebut dengan nyeri sering kali menimbulkan suatu
keadaan yang tidak nyaman dan menyiksa bagi penderitanya. Terbentuknya radang
dapat digunakan sebagai tanda terjadinya kerusakan jaringan. Radang dapat terbentuk
karena terjadinya pelepasan mediator oleh jaringan yang rusak dan adanya
migrasi sel (Mycek et al., 2001).
Terjadinya peradangan dapat ditandai dengan timbulnya warna kemerahan,
bengkak, nyeri, dan disertai panas (Anonim, 1998). Rasa sakit atau nyeri yang sering
menjadi penghambat dalam beraktivitas, mengundang penderita untuk segera
mengobatinya baik secara farmakoterapi, fisioterapi ataupun pembedahan. Pada
kebanyakan penderita dengan analgetik sederhana belum mampu mengontrol rasa
sakit akibat artritis. Obat anti-inflamasi non-steroid (AINS) ternyata efektif
mengontrol rasa sakit akibat inflamasi rematik. Akan tetapi sediaan analgetik ini
dikhawatirkan dapat memberikan efek samping yang kadangkala dapat berakibat
fatal. AINS merupakan iritan mukosa lambung. Selain itu juga dapat memberikan
efek toksik terhadap ginjal (Anonim, 2002). Salah satu contoh obat antiinflamasi non
steroid (AINS) yang banyak digunakan selama ini adalah aspirin.
namun pada kenyataannya 15% penderita yang menggunakan aspirin menunjukkan
tidak toleran bila menggunakan aspirin (Mycek et al., 2001)
2
Telah diketahui bahwa radang bukan merupakan suatu penyakit, melainkan
suatu manifestasi dari adanya kerusakan jaringan. Kerusakan jaringan dapat terjadi
karena tubuh menerima rangsangan, yang dapat berupa rangsangan mekanik seperti
trauma, terpukul, teriris, cubitan. Panas yang dapat disebabkan karena terkena api
atau listrik. Ataupun oleh rangsangan kimia seperti makanan atau minuman yang
terlalu asam (Puspitasari, 2006).
Dengan demikian, radang dapat terjadi dengan mudah sekali. Namun
walaupun radang bukan merupakan suatu penyakit, keberadaannya dapat menjadi
sangat mengganggu karena dapat mengurangi aktivitas penderitanya. Karena radang
dipandang sangat merugikan maka diperlukan obat untuk mengendalikannya.
Salah satu contoh tanaman yang banyak tumbuh di Indonesia adalah meranti
kuning. Tumbuhan ini merupakan salah satu jenis tanaman dari genus
dipterocarpaceae. Meranti kuning diyakini memiliki kandungan senyawa fenolik
kelompok oligomer resveratrol selain juga mengandung senyawa fenolik lainnya
seperti senyawa kelompok flavonoid dan senyawa turunan fenolat, dan juga senyawa
non fenolik yaitu senyawa terpenoid (Takaya et al., 2002 ; Ito et al., 2005; Commun
et al., 2003). Aktivitas biologi dari senyawa-senyawa oligomer resveratrol yang telah
dilaporkan salah satunya adalah sebagai antiinflamasi (Kitanaka, et al., 1990).
Aseton merupakan pelarut yang bersifat semi polar, sehingga dapat menarik
senyawa senyawa metabolit sekunder yang dihasilkan oleh Shorea yaitu senyawa
oligomer resveratrol yang termasuk dalam golongan polifenol (Noviany, 2003;
Kim & Lee, 2002).
3
Dengan melihat latar belakang di atas, maka penulis tertarik untuk meneliti
pemanfaatan tumbuhan S. accuminatissima SYM. sebagai antiinflamasi. Penulis
berharap hasil penelitian tentang antiinflamasi dari tumbuhan
S. Accuminatissima SYM. dapat menjadi masukan yang berguna bagi perkembangan
obat alam Indonesia.
B. PERUMUSAN MASALAH
Apakah ekstrak aseton kulit batang meranti kuning memiliki efek sebagai
antiinflamasi?
C. TUJUAN PENELITIAN
Tujuan dilakukannya penelitian ini adalah:
Untuk mengetahui efektivitas S. accuminatissima SYM. sebagai antiinflamasi.
D. TINJAUAN PUSTAKA
1. Tumbuhan Meranti
Dalam famili Dipterocarpaceae, Shorea merupakan genus terbesar
(Symington, 1974). Genus yang tersebar di Sri Langka, India, Myanmar
hingga Indocina ini terdiri atas 194 spesies sedangkan di Malesia yang
meliputi daerah Sumatra, Kalimantan, Jawa, Maluku dan Filipina terdapat 163
spesies (Ashton, 1983).
Genus ini dibagi ke dalam 10 seksi yaitu seksi Shorea, Pentacme,
Neohopea, Richetioides, Anthoshorea, Rubella, Brachypterae, Pachycarpae,
4
Mutica dan Ovalis pembagian ini berdasarkan pada morfologi tumbuhan
(Ashton, 1983).
Berdasarkan pada warna kayu, genus ini dibagi ke dalam empat sub
genus yaitu Eushorea (selangan batu), Anthspherea (Meranti kuning),
Richetia (Meranti putih) dan Brachyptera (Meranti merah) (Newman, 1999).
Perbedaan warna dan berat kayu dari tumbuhan genus ini memiliki implikasi
penggunaan yang berbeda, sebagai contoh Brachyptera (Meranti merah) dapat
digunakan untuk semua kegunaan kayu di masyarakat sedangkan
Merantiputih hanya digunakan sebagai kayu lapis (Newman, 1999).
a. Sistematika Tumbuhan
Kedudukan tumbuhan meranti kuning dalam sistematika tumbuhan
yaitu tumbuhan meranti kuning barada dalam divisi Magnoliophyta
dengan sub divisi Angiospermae. Termasuk pada kelas Magnoliopsida
dengan sub kelas Dillenidae. Meranti kuning masuk pada suku
Dipterocarpaceae dengan marga Shorea. Meranti kuning merupakan
tumbuhan dengan jenis Shorea accuminatissima SYM. (Ashton, 1983).
b. Kandungan Kimia
Penggunaan Shorea secara tradisional berkaitan dengan kandungan
metabolit sekunder didalamnya. Hasil penelusuran pustaka mengenai ilmu
kimia tumbuhan Shorea, menunjukkan bahwa metabolit sekunder yang
dikandung tumbuhan ini kaya akan senyawa fenolik kelompok oligomer
resveratrol selain juga mengandung senyawa fenolik lainnya seperti
5
senyawa kelompok flavonoid dan senyawa turunan fenolat,
dan juga senyawa non fenolik yaitu senyawa terpenoid (Takaya et al.,
2002 ; Ito et al., 2005 ; Commun et al., 2003).
1) Senyawa Flavonoid
Senyawa flavonoid yang ditemukan pada genus Shorea
sebagian besar merupakan jenis flavonol, juga ditemukan
jenis flavan-3-ol dan calkon. Senyawa dari jenis flavonol yang telah
berhasil diisolasi diantaranya adalah kaemferol, kuersetin, mirisetin,
dan 3-hidroksi-8-metoksiflavon-7-O-α-L-ramnopiranosil-(1,4)-α-L-
ramnopiranosil-(1,6)-β-D-glukopiranosida dari jenis flavan
diantaranya adalah leukosinidin dan leukodelfinidin.
Sedangkan dari jenis calkon adalah 4’-hidroksicalkon-4-O-β-D-
glukosida (Sotheeswaran dan Pasuphaty, 1993).
2) Senyawa Oligomer Resveratrol
Oligomer resveratrol adalah senyawa fenolik yang tersusun
atas unit-unit resveratrol (3,5,4’-trihidroksistilben) (Ito et al, 2004)
yang terbentuk melalui reaksi kopling oksidatif. Senyawa kelompok
ini banyak ditemukan pada berbagai genus dalam famili
Dipterocarpaceae seperti Shorea, Hopea, Vatica dan Dipterocarpus
selain juga ditemukan pada beberapa famili lain seperti Vitaceae,
6
Cyperaceae, Gnetaceae, dan Leguminosae (Sotheeswaran dan
Pasuphaty, 1993).
Senyawa oligomer resveratrol yang telah berhasil diisolasi,
dilaporkan memiliki keragaman tingkat oligomerisasi, keragaman
kerangka, termasuk sistem heterosiklik, dan kompleksitas
dari konfigurasi (Ito et al., 2004).
Berdasarkan tingkat oligomerisasi, senyawa oligomer
resveratrol dari genus Shorea ditemukan dalam bentuk monomer,
dimer, trimer dan tetramer. Berdasarkan penelusuran pustaka
didapatkan informasi bahwa dari sekitar 45 senyawa oligomer
resveratrol yang telah dilaporkan berhasil diisolasi dari genus Shorea,
hanya satu jenis senyawa yang merupakan monomer resveratrol,
12 jenis senyawa merupakan dimer resveratrol, 17 jenis senyawa
merupakan trimer resveratrol, dan hanya 6 jenis senyawa
yang merupakan tetramer resveratrol. Berdasarkan keragaman
kerangka yang dibentuk, senyawa oligomer resveratrol dari genus
Shorea dapat dibedakan berdasarkan keberadaan unit-unit trans-2,3-
diaril-2,3-dihidrobenzofuran (Sotheeswaran dan Pasuphaty, 1993),
termasuk keragaman sistem heterosiklik yang dibentuk
dan berdasarkan perbedaan pembentukan ikatan karbon-karbon
melalui reaksi kopling oksidatif radikal. Sementara itu adanya atom
karbon asimetris pada senyawa oligomer resveratrol, mengakibatkan
7
adanya keragaman stereokimia dari senyawa kelompok ini.
Sehingga dapat ditemukan senyawa-senyawa yang merupakan
stereoisomer antara senyawa satu dengan senyawa
yang lainnya (Sotheeswaran dan Pasuphaty, 1993).
3) Senyawa Terpenoid
Pada genus Shorea ditemukan Senyawa non fenolik yang
merupakan senyawa turunan terpenoid terutama dari kelompok
senyawa triterpen. Secara umum, senyawa triterpen merupakan
komponen utama dari resin yang dihasilkan tumbuhan genus Shorea.
Senyawa triterpen memiliki kerangka yang beragam meliputi jenis
sikloartan, damaran, hopan, lupan, ursan, oleanan, friedelan dan
taraksastan (Sotheeswaran dan Pasuphaty, 1993).
4) Senyawa Turunan Fenolat
Senyawa fenolik turunan fenolat juga dilaporkan diisolasi dari
genus Shorea. Senyawa turunan fenolat yang ditemukan pada genus
ini memiliki kerangka yang cukup beragam diantaranya kerangka
C6-C1, C6-C3 dan C6-C2-C6 (Ito et al.,2004).
Aktifitas biologis dari senyawa-senyawa oligomer resveratrol yang
telah dilaporkan diantaranya adalah sebagai antijamur (Pryce and Langcake,
1977), antibakteri (Sultanbawa et al., 1987), antikanker dan antioksidan
(Tukiran et al., 2001), antiinflamasi (Kitanaka et al., 1990), dan menghambat
kerja enzim asetilkolinesterase (Sung et al., 2002).
8
2. Inflamasi
Menurut Stephenson radang merupakan respon fisiologi lokal terhadap
cedera jaringan. Radang bukan suatu penyakit, melainkan suatu manifestasi
suatu penyakit. Sedangkan Rukmono menerangkan bahwa bila jaringan
cedera misalnya karena terbakar, teriris atau terkena infeksi oleh kuman, maka
pada jaringan ini akan terjadi serangkaian reaksi yang menyebabkan
musnahnya mediator yang membahayakan jaringan atau yang mencegah
mediator ini menyebar lebih luas. Reaksi–reaksi ini kemudian juga
menyebabkan jaringan cedera diperbaiki atau diganti dengan jaringan baru.
Reaksi yang terjadi pada tempat jaringan cedera ini disebut
radang (Anonim, 1998).
Mediator yang dapat menyebabkan cedera pada jaringan dan
kemudian diikuti oleh radang, ialah kuman, benda (pisau, peluru, dan
sebagainya), suhu (panas atau dingin), berbagai jenis sinar (sinar X, sinar
ultra–violet), listrik, zat-zat kimia (Anonim, 1998). Mediator antiinflamasi
mempunyai khasiat tambahan, seperti meredakan nyeri (analgesik) dan
menghambat agregasi platelet (Kee & Hayes, 1996).
Pengaruh menguntungkan yang dimiliki oleh radang, seperti
penghancuran mikroorganisme yang masuk dan pembuatan dinding pada
rongga abses, sehingga akan mencegah penyebaran infeksi. Secara seimbang
radang juga memproduksi penyakit, misalnya, abses otak akan bertindak
sebagai lesi ruangan yang menekan bangunan vital di sekitarnya, atau fibrosis
9
akibat radang kronis dapat mengakibatkan terjadinya distorsi jaringan yang
permanen dan menyebabkan gangguan fungsinya (Underwood, 1999).
Radang biasanya diklasifikasikan berdasarkan waktu kejadiannya,
yaitu:
a. Radang akut, merupakan reaksi jaringan yang segera dan hanya dalam
waktu tidak lama terhadap cedera jaringan.
b. Radang kronis, merupakan reaksi jaringan selanjutnya yang diperlama
mengikuti respon awal (Underwood, 1999).
Dua tahap inflamasi adalah tahap vaskular, yang terjadi 10–15 menit
setelah terjadinya cedera dan tahap lambat. Tahap vaskular berkaitan
dengan vasodilatasi dan bertambahnya permeabilitas kapiler dimana substansi
darah dan cairan meninggalkan plasma dan pergi menuju ke tempat cedera.
Tahap lambat terjadi ketika leukosit menginfiltrasi jaringan
inflamasi (Kee & Hayes, 1996).
Sebagai contoh dari jaringan yang meradang adalah jari yang tertusuk
jarum yang kotor, kemudian akan membengkak (tumor), berwarna
kemerahan (rubor), nyeri (dolor), menjadi panas (kalor) dan daya gerak
menjadi berkurang (functio laesa). Tanda–tanda radang ini oleh Celcus, sudah
lama dikenal dan disebut tanda–tanda radang utama (Anonim, 1998).
a. Warna kemerahan (rubor)
Jaringan yang mengalami radang akut tampak merah, sebagai contoh kulit
terkena sengatan matahari, selulitas karena infeksi bakteri,
10
atau konjungtivitas akut. Warna kemerahan ini akibat adanya dilatasi
pembuluh darah kecil dalam daerah yang mengalami
kerusakan (Underwood, 1999).
b. Panas (kalor)
Peningkatan suhu hanya tampak pada bagian perifer (tepi) tubuh, seperti
pada kulit. Peningkatan suhu ini diakibatkan oleh meningkatnya aliran darah
melalui daerah tersebut, mengakibatkan sistem vaskuler dilatasi
dan mengalirkan darah yang hangat pada daerah tersebut. Demam sistemik
sebagai hasil dari beberapa mediator kimiawi proses radang juga ikut
meningkatkan temperatur lokal (Underwood, 1999).
c. Bengkak (tumor)
Pembengkakan sebagai hasil adanya udem merupakan suatu akumulasi
cairan dalam rongga ekstaravaskuler yang merupakan bagian dari cairan
eksudat dan dalam jumlah sedikit, kelompok sel radang yang masuk dalam
daerah tersebut (Underwood, 1999).
d. Rasa sakit (dolor)
Pada radang akut, rasa sakit merupakan salah satu gambaran yang
dikenal dengan baik oleh penderita. Rasa sakit sebagian disebabkan oleh
regangan dan distorsi jaringan akibat udem dan terutama karena tekanan
didalam rongga abses. Beberapa mediator kimiawi pada radang akut termasuk
bradikinin, prostaglandin dan serotonin, diketahui juga dapat mengakibatkan
rasa sakit (Underwood, 1999).
11
Trauma / luka pada sel
Gangguan pada membran sel
Fosfolipid
Dihambat kortikosteroid
Asam arakidonat
Hidroperoksida Endoperoksida Leukotrien prostaglandin prostasiklin PgE2 / PgE2 PgI2 Tromboksan A2
Gambar 1. Biosintesis Prostaglandin (Anonim, 2002).
Enzim fosfolipase
Enzim siklooksigenase Enzim lipoksigenase
e. Hilangnya fungsi
Kehilangan fungsi yang diketahui merupakan konsekuensi dari suatu
proses radang dikemukakan oleh Virchow (1821-1902),
merupakan tambahan gejala pada daftar gejala yang dikemukakan Celcus.
Gerakan yang terjadi pada daerah radang, baik yang dilakukan secara sadar
12
ataupun reflek akan mengalami hambatan rasa sakit. pembengkakan yang
hebat secara fisik mengakibatkan berkurangnya gerak
jaringan (Underwood, 1999). Skema pembentukan prostaglandin dapat dilihat
pada Gambar 1.
3. Simplisia
a) Pengertian simplisia
Simplisia adalah bentuk jamak dari kata simpleks yang berasal
dari kata simple, berarti satu atau sederhana. Simplisia ialah bahan
alamiah yang dipergunakan sebagai obat yang belum mengalami
pengolahan apapun juga dan kecuali dinyatakan lain, berupa bahan
yang telah dikeringkan (Anonim, 1983).
b) Pencucian
Pencucian simplisia dilakukan untuk membersihkan kotoran
yang melekat terutama bahan–bahan yang berasal dari dalam tanah
dan juga bahan–bahan yang tercemar pestisida. Pencucian bisa
dilakukan dengan menggunakan air (Gunawan & Mulyani, 2004).
c) Pengeringan
Pengeringan simplisia bertujuan sebagai berikut:
1. Menurunkan kadar air sehingga bahan tersebut tidak mudah
ditumbuhi kapang dan bakteri.
2. Menghilangkan aktivitas enzim yang bisa menguraikan lebih
lanjut kandungan zat aktif.
13
3. Memudahkan dalam hal pengelolaan proses selanjutnya ringkas,
mudah disimpan, tahan lama, dan sebagainya) (Gunawan &
Mulyani, 2004 ).
Cara pengeringan yang paling sederhana adalah pengeringan
dengan udara. Untuk tujuan farmasetik tentu saja bahan yang akan
dikeringkan jarang ditempatkan secara langsung dibawah sinar
matahari. Sebaliknya cara pengeringan di tempat teduh, dimana bahan
disebarkan rata diatas nampan, lemari atau kontak memegang peranan
penting, misalnya pada pengeringan tumbuhan (Voight, 1995).
4. Penyarian
Penyarian merupakan peristiwa perpindahan masa zat aktif yang
semula berada didalam sel, ditarik oleh cairan penyari sehingga zat aktif larut
dalam cairan penyari. Pada umumnya akan lebih baik apabila permukaan
serbuk yang bersentuhan dengan cairan penyari semakin luas (Ansel, 2005).
Zat-zat yang tersari terdapat dalam sel-sel bagian tumbuhan yang
umumnya dalam bentuk kering. Cairan penyari masuk dalam sel-sel dari
bahan-bahan dan zat yang tersari larut dalam cairan penyari, setelah itu
larutan yang mengandung zar tersari dipisahkan dari simplisia yang disari.
Penyarian akan lebih cepat terjadi bila bahan dasar dalam
keadaan halus (Anief, 2000).
Metode dasar penyarian adalah maserasi, perkolasi, soxhletasi
(Harbourne, 1987). Istilah maserasi berasal dari bahasa latin macerare,
14
yang artinya merendam (Ansel, 2005). Maserasi adalah cara ekstraksi yang
paling sederhana. Simplisia yang digunakan dihaluskan dan disatukan dengan
bahan pengekstraksi (Voight, 1995). Maserasi dilakukan dengan cara
merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari. Cairan penyari akan
menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat
aktif. Zat aktif akan larut di dalam dan karena adanya perbedaan konsentrasi
antara larutan zat aktif didalam sel dengan yang diluar sel, maka larutan yang
terpekat terdesak keluar (Anonim, 1986).
Kecuali dinyatakan lain, maserasi dilakukan sebagai berikut :
sepuluh bagian simplisia atau campuran simplisia dengan derajat halus yang
cocok dimasukkan dalam sebuah bejana, lalu dituangi 75 bagian cairan
penyari, ditutup dan dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil
sering-sering diaduk. Setelah 5 hari campuran tersebut diserkai, diperas,
dicuci ampasnya dengan cairan penyari secukupnya hingga diperoleh
100 bagian. Lalu maserat dipindahkan dalam bejana tertutup dan dibiarkan
ditempat sejuk, terlindung dari cahaya selama 2 hari, maserat diendapkan atau
disaring. Kemudian maserat disuling atau diuapkan pada tekanan rendah pada
suhu tidak lebih dari 500C hingga konsentrasi yang dikehendaki (Anief, 2000).
Rendaman disimpan terlindung cahaya langsung (mencegah reaksi
katalisis atau perubahan warna). Rendaman harus dikocok berulang-ulang
karena dalam keadaan diam selama maserasi menyebabkan turunnya
perpindahan bahan aktif pada simplisia (Voight, 1995).
15
5. Ekstrak
Ekstrak adalah sediaan kering, kental atau cair dibuat dengan menyari
simplisia nabati atau hewani menurut cara yang cocok, diluar pengaruh
cahaya matahari langsung (Anonim, 1979).
Jika ekstrak tumbuhan (umumnya konsentrasi etanolnya
berbeda–beda) bahan ekstraksi sebagian atau seluruhnya diuapkan,
maka akan diperoleh ekstrak, yang kemudian dapat dikelompokkan atas dasar
sifatnya menjadi:
a) Ekstrak encer (extractum tenue). Sediaan ini memiliki konsistensi
semacam madu dan dapat dituang. Akan tetapi pada saat ini sudah
tidak tampak lagi (Voight, 1995).
b) Ekstrak kental (extractum spissium). Sediaan ini liat dalam keadaan
dingin atau tidak dapat dituang. Kandungan airnya berjumlah sampai
30%. sediaan ini pada umumnya juga tidak sesuai lagi dengan
persyaratan masa kini. Tingginya kandungan air menyebabkan
ketidakstabilan sediaan obat (cemaran bakteri) dan bahan aktifnya
(penguraian secara kimia). Ekstrak kental sulit di takar (Voight, 1995).
c) Ekstrak kering (extractum siccum). Sediaan ini memiliki konsistensi
kering dan mudah digosokkan. Melalui penguapan cairan
pengekstraksi dan pengeringan sisanya akan terbentuk suatu produk,
yang sebaiknya memiliki kandungan lembab tidak
lebih dari 5% (Voight, 1995).
16
d) Ekstrak cair (extractum fluidum). Dalam hal ini diartikan sebagai
ekstrak cair, yang dibuat sedemikian rupa sehingga satu bagian
simplisia sesuai dengan dua bagian (kadang–kadang juga satu bagian)
ekstrak cair (Voight, 1995).
Ekstraksi dapat dilakukan dengan cara tumbuhan segar yang telah
dihaluskan atau material tumbuhan yang dikeringkan diproses dengan cairan
pengekstraksi. Jenis ekstraksi dan bahan ekstraksi (cairan ekstraksi,
menstruum) yang sebaiknya digunakan sangat tergantung dari kelarutan bahan
kandungan serta stabilitasnya (Voight, 1995).
6. Diklofenak
Diklofenak adalah derivat sederhana dari asam fenilasetat yang
menyerupai flurbiprofen dan meklofenamat. Obat ini adalah penghambat
siklooksigenase yang relatif non selektif dan kuat, serta mengurangi
bioavailabilitas asam arakhidonat. Obat ini mempunyai waktu paruh 1-3 jam
(Katzung, 2002). Walaupun waktu paruhnya singkat, diklofenak
diakumulasikan di cairan sinovia yang menjelaskan efek terapi di sendi jauh
lebih panjang dari waktu paruh obat tersebut (Wilmana, 1985).
Natrium diklofenak diabsorbsi di usus dengan lengkap dan cepat,
efeknya mulai terlihat setelah 1 jam (Tjay dan Raharja, 2002).
Obat ini digunakan untuk mengurangi peradangan pada berbagai keadaan
rematik disebabkan karena penghambatan pembentukan prostaglandin dari
17
asam arakidonat melalui aksinya pada enzim siklooksigenase (Siswandono
dan Sukardjo, 1995).
F. Landasan Teori
Hasil penelusuran pustaka mengenai ilmu kimia tumbuhan Shorea,
menunjukkan bahwa metabolit sekunder yang dikandung tumbuhan ini kaya akan
senyawa fenolik kelompok oligomer resveratrol selain juga mengandung
senyawa fenolik lainnya seperti senyawa kelompok flavonoid dan senyawa
turunan fenolat, dan juga senyawa non fenolik yaitu senyawa terpenoid (Takaya
et al., 2002 ; Ito et al., 2005 ; Commun et al., 2003).
Pemilihan pelarut aseton karena dengan pelarut aseton senyawa metabolit
sekunder yang terlarut pada pelarut semi polar akan tersari dan aseton merupakan
pelarut yang dapat menarik senyawa senyawa metabolit sekunder yang dihasilkan
oleh Shorea yaitu senyawa polifenol (Noviany, 2003; Kim & Lee, 2002).
Genus Shorea memiliki senyawa polifenol, khususnya golongan senyawa
oligomer resveratrol. Aktivitas biologi dari senyawa-senyawa oligomer
resveratrol yang telah dilaporkan salah satunya adalah sebagai antiinflamasi
(Kitanaka, et al., 1990).
G. HIPOTESIS
Ekstrak aseton dari kulit batang meranti kuning (S. accuminatissima SYM.)
diduga mempunyai efek sebagai antiinflamasi.
18
BAB II
METODE PENELITIAN
A. Rancangan Penelitian
1. Jenis Penelitian
Penelitian ini termasuk dalam penelitian eksperimental semu dengan rancangan
acak lengkap pola searah.
2. Variabel Penelitian
Variabel yang masuk dalam penelitian ini adalah sebagai berikut:
1) Variabel bebas
Perlakuan ekstrak aseton dari S. accuminatissima SYM. dalam berbagai
peringkat dosis pada tikus putih yang diinduksi karagenin 1% secara
subplantar.
2) Variabel tergantung
Daya penghambatan udema yang dihasilkan oleh ekstrak aseton dari kulit
batang meranti kuning (S. accuminatissima SYM.).
3) Variabel terkendali
Kondisi fisik hewan uji yang meliputi berat badan, umur, jenis kelamin, galur
dan lingkungan hidup hewan uji, waktu panen tumbuhan, bagian tumbuhan,
tempat panen tumbuhan.
19
B. Bahan dan Alat
1. Bahan Penelitian
Serbuk dari kulit batang tumbuhan meranti kuning
(S. accuminatissima SYM.) yang dikumpulkan dari wilayah HPH PT Aya Yayang
Indonesia Camp 63, Tanjung, Tabalong, Kalimantan Selatan pada bulan juli 2004.
Bahan kimia yang digunakan untuk ekstraksi yaitu Aseton teknis yang telah
didesestilasi (Merck). Bahan uji antiinflamasi: karagenin 1 %, CMC Na, Natrium
diklofenak (Phapros). Dan hewan uji yang di gunakan adalah tikus putih jantan
galur wistar berumur 2-3 bulan.
2. Alat-alat yang digunakan
Alat untuk pembuatan ekstrak terdiri dari kain flanel, kertas saring, hair dryer,
kipas angin, seperangkat rotary evaporator, pompa vakum, corong buchner.
Sedangkan alat-alat yang digunakan untuk uji antiinflamasi diantaranya spuit
injeksi 1mL, spuit injeksi oral 3mL, alat timbang, pletismometer.
C. Jalannya Penelitian
1. Determinasi Tanaman
Determinasi dan identifikasi tanaman dilakukan di herbarium Bogoriense,
balai penelitian dan pengembangan biologi, LIPI, Bogor, Indonesia, dan spesimen
disimpan di herbarium tersebut.
20
2. Pengumpulan Bahan Baku
Bahan baku yang digunakan dalam penelitian ini adalah Shorea
accuminatissima SYM. yang dikumpulkan dari wilayah HPH PT Aya Yayang
Indonesia Camp 63, Tanjung, Tabalong, Kalimantan Selatan pada bulan Juli
2004.
3. Pengeringan Bahan Dan Pembuatan Serbuk
Kulit batang meranti kuning dibersihkan dari pengotor dan dicuci dengan air
mengalir, serta dirajang. Kemudian dikeringkan dibawah sinar matahari secara
tidak langsung. Kulit batang yang telah dikeringkan kemudian diserbuk.
4. Pembuatan Ekstrak
Sebanyak 3 kg serbuk kulit batang meranti kuning ditempatkan dalam ember,
kemudian dituang pelarut aseton teknis yang telah didesestilasi
sebanyak ± 8 L sampai seluruh permukaan terendam, dan didiamkan selama
24 jam dan ditutup rapat. Kemudian disaring dengan menggunakan corong
Buchner hingga diperoleh maserat/ filtrat. Ampas simplisia kemudian
di remaserasi. Maserasi dilakukan selama 3 X 24 jam dalam wadah tertutup rapat.
Maserat yang didapat dikentalkan dengan menggunakan alat rotary
evaporator. Kemudian maserat kental dikeringkan dengan metode konvensional,
yaitu dengan cara diangin–anginkan hingga didapat ekstrak kering. Skema kerja
dapat dilihat pada Gambar 2.
21
3 kg serbuk kulit batang meranti kuning (S. accuminatissima SYM.) direndam dalam 8 liter aseton selama 24 jam
Campuran disaring menggunakan corong buchner
Ampas Filtrat Aseton (I)
diaduk
diaduk
diaduk
Di maserasi kembali, direndam dalam aseton selama 24 jam
Campuran disaring menggunakan corong buchner
Ampas Filtrat Aseton (II)
Di maserasi kembali, direndam dalam aseton selama 24 jam Campuran disaring menggunakan corong buchner
Ampas Filtrat Aseton (III) Filtrat aseton I, II, III, dikumpulkan Dilakukan evaporasi Ekstrak aseton
Gambar 2. Skema Pembuatan Ekstrak Aseton Kulit Batang Meranti kuning
(S. accuminatissima SYM.).
22
5. Uji Antiinflamasi
a. Pembuatan Larutan Stok Ekstrak Aseton dan karagenin 1%
Ekstrak aseton ditimbang seksama, kemudian ditambah CMC Na
sebagai pelarut dan digojok hingga larut dalam labu takar 100 mL.
Larutan karagenin yang digunakan adalah larutan karagenin 1%
dalam NaCl fisiologis 0,9%. NaCl fisiologis dibuat dengan cara
menimbang seksama sejumlah NaCl dan dilarutkan ke dalam aquadest
sampai volume tertentu, hingga diperoleh konsentrasi NaCl 0,9%.
Larutan karagenin 1% dibuat dengan cara menimbang seksama
sejumlah karagenin yang dilarutkan ke dalam larutan NaCl fisiologis
sampai volume tertentu, hingga diperoleh konsentrasi
karagenin 1% (Sawitri, 2003).
b. Penetapan dosis Natrium Diklofenak
Dosis natrium diklofenak yang diberikan pada hewan uji diperoleh
dari dosis natrium diklofenak dalam sehari untuk manusia (50 kg) sebesar
100-150 mg. dalam penelitian ini dosis yang digunakan adalah sebesar
150 mg, kemudian dikonversikan ke tikus (200 g) dengan mengalikan
faktor konversi tikus 0,018. Hasil dari konversi tersebut adalah sebesar
13,5 mg/kgBB.
23
c. Penetapan dosis ekstrak aseton kulit batang Meranti kuning
Dosis ekstrak diperoleh dengan melakukan oreintasi terlebih
dahulu pada dosis 150 mg/KgBB. Kemudian dibuat peringkat dosis
100 dan 200 mg/KgBB.
d. Perlakuan hewan uji
Dua puluh lima ekor tikus putih jantan dipelihara dalam kondisi
yang sama. Sebelum digunakan tikus percobaan terlebih dahulu
diaklimatisasi dengan lingkungan penelitian dan dipuasakan
selama 18 jam dengan air minum tetap diberikan. Dua puluh lima ekor
tikus di kelompokkan menjadi 5 kelompok perlakuan. Perlakuan yang
diberikan pada masing-masing kelompok adalah sebagai berikut: 1) Satu
kelompok kontrol negatif diberi CMC Na secara peroral. 2) Satu
kelompok kontrol positif diberi larutan natrium diklofenak secara peroral
dengan dosis 13,5 mg/KgBB. 3) Tiga kelompok dosis uji diberi ekstrak
aseton secara peroral dengan masing-masing dosis sebesar 100, 150 dan
200 mg/KgBB.
Pemberian larutan karagenin 1% secara subplantar pada telapak
kaki tikus, sedangkan CMC Na, Natrium diklofenak dan bahan uji
diberikan peroral. Kaki belakang tikus ditandai sebatas mata kaki
dan diukur volumenya dengan alat pletismometer. Volume udem adalah
24
selisih volume kaki tikus setelah diinjeksi karagenin 1% dengan volume
kaki tikus sebelum diradangkan dengan karagenin 1%.
25 ekor hewan uji
Dipuasakan ± 18 jam
Kaki tikus ditandai sebatas siku
Setelah satu jam kaki tikus diinduksi dengan karagenin 1% secara subplantar
Volume udem diukur dengan alat pletismometer
Gambar 3. Skema Kerja Uji Antiinflamasi Ekstrak Aseton terhadap Tikus putih Jantan Yang Diinduksi Karagenin 1%.
Kontrol negatif
CMC Na
Ekstrak aseton 200 mg/KgBB
Ekstrak aseton
150 mg/KgBB
Ekstrak aseton 100 mg/KgBB
Kontrol positif
Na diklofenak (13,5 mg/KgBB)
D. Tempat penelitian
Pembuatan ekstrak dilakukan di Laboratorium Kimia Analisis dan
untuk uji antiinflamasi dilakukan di Laboratorium Farmakologi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
25
E. Cara Analisis
Data hasil penelitian yang diperoleh berupa volume udem kaki tikus.
Volume udem (Vu) dinyatakan dengan persamaan 1.
VaVtVu −= .........................................................................(1)
Dalam persamaan (1), volume udem disimbolkan dengan Vu, volume
kaki tikus setelah diinjeksi dengan karagenin 1% pada jam tertentu
disimbolkan dengan Vt, volume kaki tikus sebelum diradangkan dengan
karagenin 1% disimbolkan dengan Va.
Efek antiinflamasi dari bahan uji dengan menghitung AUC (Area
Under the Curve) kurva antara volume udem dengan waktu, kemudian
dianalisis dengan uji Kolmogorov-Smirnov dan leven statistik dilanjutkan one
way ANOVA dan uji LSD (Least Significant Difference). AUC dapat dihitung
dengan menggunakan persamaan 2.
)(2 12
2121 ttVtVtAUC −
+= …………................................. .(2)
Dimana Vt1 merupakan rata-rata volume udem pada t1, dan Vt2
rata-rata volume udem pada t2. Daya antiinflamasi dari bahan uji dinilai
dengan menghitung prosentase penghambatan volume udem berdasarkan
persamaan 3.
Persen Daya Antiinflamasi = %100xAUCk
AUCpAUCk − …..(3)
26
dalam persamaan (3) AUCK adalah AUC kontrol negatif yaitu yang diinduksi
dengan karagenin yang merupakan rata-rata AUC kontrol, sedang AUCP
adalah AUC dari perlakuan ekstrak aseton kulit batang meranti kuning dan
kontrol positif. AUCP tersebut merupakan AUC per individu.
27
BAB III
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
A. Determinasi Tumbuhan
Serbuk dari kulit batang tumbuhan meranti kuning
yang dikumpulkan dari wilayah HPH Aya Yayang Indonesia Camp 63, Tanjung,
Tabalong, Kalimantan Selatan pada bulan Juli 2004, sebelum digunakan terlebih
dahulu dilakukan determinasi. Determinasi dilakukan dengan tujuan agar
diperoleh kepastian akan genus dan spesies dari tumbuhan yang akan digunakan.
Determinasi dan identifikasi tumbuhan dilakukan di herbarium
Bogoriense, balai penelitian dan pengembangan biologi, LIPI, Bogor, Indonesia,
dan specimen disimpan di herbarium tersebut.
Hasil dari determinasi tersebut menunjukkan bahwa tumbuhan yang
digunakan merupakan famili dipterocarpaceae dan merupakan spesies
Shorea accuminatissima SYM.
B. Pengumpulan Bahan dan Pembuatan serbuk
Simplisia yang dikumpulkan dari wilayah Aya Yayang Indonesia
Camp 63, tanjung, Tabalong, Kalimantan Selatan pada bulan juli 2004 berupa
kulit batang dari tumbuhan meranti kuning. Kulit batang yang diperoleh
dibersihkan dari pengotor yang kemudian dicuci dengan air bersih yang mengalir.
Maksud dari digunakannya air yang mengalir adalah untuk membersihkan
sisa-sisa pengotor yang mungkin masih menempel. Kulit batang yang telah dicuci
28
kemudian dikeringkan, pengeringan dilakukan di bawah sinar matahari secara
tidak langsung dengan ditutup dengan kain hitam agar tidak merusak kandungan
senyawa yang terdapat dalam simplisia. Untuk mempermudah pengeringan, dapat
dilakukan dengan merajang simplisia
Tujuan dari dilakukannya pengeringan adalah untuk mencegah tumbuhnya
jamur pada simplisia, terutama untuk waktu penyimpanan yang lama. Simplisia
yang telah kering kemudian diserbuk untuk memperluas permukaan area yang
dapat bersentuhan dengan cairan penyari sehingga penyarian dapat berlangsung
dengan optimal. Karena dengan luas permukaan simplisia yang dapat bersentuhan
dengan cairan penyari besar, maka diharapkan terjadinya perpindahan massa dari
serbuk ke dalam cairan penyari dapat berlangsung dengan cepat dan optimal.
C. Hasil Penyarian dan Pembuatan Ekstrak Aseton Kulit Batang
Meranti kuning (S.accuminatissim SYM.)
Penyarian kandungan senyawa dari tumbuhan meranti kuning dilakukan
dengan metode maserasi, metode maserasi adalah metode yang sederhana dan
cocok untuk penyarian dengan jumlah simplisia yang banyak. Selain itu, maserasi
sangat cocok digunakan untuk menyari kandungan senyawa yang tidak tahan
pemanasan, karena dalam proses pengerjaanya tidak memerlukan pemanasan.
Namun kekurangan menggunakan metode ini adalah dalam proses penyarian
membutuhkan pelarut yang banyak. Penyarian dengan metode maserasi digunakan
dengan alasan karena bahan baku/ simplisia yang digunakan dalam jumlah
banyak, yaitu sebanyak ± 3 kg selain itu alat serta cara pengerjaan sangat
29
sederhana. Sedangkan pelarut yang digunakan untuk maserasi adalah pelarut
aseton teknis yang telah didestilasi sebanyak 8 liter.
Maserasi dilakukan selama 24 jam dalam wadah tertutup rapat, dengan
tujuan mengurangi terjadinya penguapan yang dapat menyebabkan terjadinya
pengurangan jumlah pelarut. Untuk mengoptimalkan penyarian, sesekali dapat
dilakuan pengadukan.
Maserat yang didapat kemudian dikentalkan dengan menggunakan alat
vacum rotary evaporator. Ampas dari penyarian sebelumnya di remaserasi.
Remaserasi dilakukan sebanyak dua kali. Kemudian maserat kental dikeringkan
dengan metode konvensional, yaitu dengan cara diangin–anginkan hingga didapat
ekstrak kering dengan bobot 0,125 Kg dan rendemen sebesar 4,17 %.
1 2
3
4
5
6
7
8
a b c d Gambar 4. Profil kromatogram elusi ekstrak aseton dengan perbandingan
etil asetat dan n-heksana berturut turut 5:5(a); 6:4(b); 8:2(c); 9:1(d).
Pemilihan pelarut aseton karena dengan pelarut aseton senyawa metabolit
sekunder yang terlarut pada pelarut semi polar akan tersari dan aseton merupakan
pelarut yang dapat menarik senyawa senyawa metabolit sekunder yang dihasilkan
oleh Shorea yaitu senyawa polifenol (Noviany, 2003; Kim & Lee, 2002).
30
D. Penentuan Konsentrasi dan Volume Pemberian Karagenin
Subplantar
Konsentrasi karagenin yang digunakan dalam penelitian ini adalah sebesar
1% yang diberikan secara subplantar yang diberikan sebanyak 0,1 ml. Hal ini
berdasarkan pada jurnal hasil penelitian yang dilakukan oleh Salasia, dkk (2002).
Karagenin dipilih sebagai senyawa iritan karena memiliki keuntungan seperti
tidak menyebabkan kerusakan jaringan, tidak menimbulkan bekas serta
memberikan respon yang lebih peka terhadap obat antiinflamasi dibanding
senyawa iritan lainnya (Maryanto, 1997).
E. Uji Daya Antiinflamasi
1. Kontrol negatif
Ekstrak aseton mempunyai sifat yang sukar larut dalam air. Maka
untuk melarutkannya diperlukan pelarut hingga dapat membentuk suatu
suspensi yang baik. Oleh karena itu dipilih CMC Na sebagai pelarut pemilihan
CMC Na didasarkan pada kemampuan CMC Na untuk melarutkan ekstrak
aseton. Sebagaimana orientasi yang dilakukan oleh Zainuddin (2007), bahwa
CMC Na mampu melarutkan ekstrak dengan baik. Hasil uji kelarutan ekstrak
aseton dengan beberapa pelarut DMSO 5%, PEG 400, Tween 80 dan CMC Na
1% dapat dilihat pada Tabel 1.
31
Tabel 1. Hasil Uji Kelarutan Ekstrak dengan Beberapa pelarut
Jumlah ml Pelarut Dibutuhkan Melarutkan
100 mg Ekstrak No Pelarut
Aseton Metanol
Pengamatan
1. 2. 3. 4.
DMSO 5% PEG 400 Tween 80 Span 30 CMC 1%
5 ml >100 ml >100 ml >100 ml 2,5 ml
4,5 ml >100 ml >100 ml >100 ml
2 ml
Agak sukar larut Sukar larut Sukar larut Sukar larut
Larut 5.
CMC Na diinjeksikan secara peroral kepada sekelompok tikus yang
telah dipuasakan selama 18 jam dan sebelumnya telah diaklimatisasi dengan
lingkungan percobaan. Setelah satu jam, karagenin 1% diinjeksikan secara
subplantar pada kaki tikus. Kaki tikus ditandai sebatas siku sebagai batas
pengukuran. Pengukuran udem dilakukan dengan menggunakan alat
pletismometer. Hasil pengukuran volume udem pada kontrol negatif dapat
dilihat pada Gambar 5.
Vol
ume
udem
(ml)
Gambar 5. Grafik hasil pengukuran volume udem kontrol negatif.
32
2. Kontrol positif
Kontrol positif digunakan pada penelitian ini adalah natrium
diklofenak, pemilihan natrium diklofenak adalah dengan alasan bahwa
natrium diklofenak mampu menghambat pembentukan prostaglandin dari
asam arakhidonat melalui aksinya pada enzim
siklooksigenase (Siswandono dan sukardjo, 1995).
Metode yang digunakan sama dengan metode yang dilakukan pada
kontrol negatif, yakni natrium diklofenak yang dilarutkan dengan CMC Na
kemudian diinjeksikan secara peroral dengan menggunakan spuit injeksi oral.
Volume udem rata-rata hasil pengukuran dengan menggunakan pletismometer
dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Volume udem rata-rata pada kontrol positif. Kontrol Waktu
(menit) kontrol(-) kontrol (+)
0 0,908 0,836
30 1,072 0,856
60 1,12 0,878
90 1,176 0,904
120 1,208 0,966
150 1,28 1,028
180 1,264 1,008
210 1,236 0,968
240 1,192 0,948
270 1,172 0,9
300 1,156 0,9
33
Data tersebut kemudian di aplikasikan dalam bentuk kurva Dosis Vs Waktu,
maka diperoleh kurva yang dapat dilihat pada Gambar 6.
kontrol (-)
kontrol (+)
Gambar 6. Kurva volume udem rata-rata (ml) terhadap waktu (menit)
Dapat dilihat pada grafik bahwa natrium diklofenak mampu
memberikan penghambatan terhadap pembentukan udem pada tikus yang
telah diinduksi dengan menggunakan karagenin 1%. Hal ini terjadi karena
peran natrium diklofenak yang mampu menghambat pembentukan
prostaglandin. Prostaglandin merupakan produk dari asam arakidonat yang
terbentuk karena adanya pembentukan asam arakidonat yang dilepaskan ke
dalam darah. Pembetukan prostaglandin terjadi karena adanya pengaruh enzim
siklooksigenase dalam tubuh.
Pengukuran volume udem dilakukan pada menit ke-0 hingga menit
ke-300 (5 jam). Pengukuran volume udem dihentikan pada jam ke-5 karena
pada waktu tersebut natrium telah melewati waktu paruh (2,5 jam). Natrium
diklofenak memiliki waktu paruh 1-3 jam.
34
3. Uji antiinflamasi ekstrak aseton
Uji antiinflamasi menggunakan 3 kelompok uji yang menggunakan
tikus putih galur wistar. Sebagaimana pada yang dilakukan pada kontrol
positif maupun kontrol negatif, sebelum tikus digunakan terlebih dahulu
dipuasakan selama 18 jam dengan tetap diberi minum. Pengujian dilakukan
pada dosis 100; 150; 200 mg/ KgBB. Dosis ekstrak diperoleh dengan
melakukan orientasi terlebih dahulu pada dosis 150 mg/ KgBB. Kemudian
dibuat peringkat dosis: 100 dan 200 mg/ KgBB.
Dalam preparasi, ekstrak ditimbang sesuai dosis yang digunakan,
kemudian dilarutkan dengan menggunakan CMC Na 0,1%. Pembuatan stok
adalah sebanyak 25 ml, oleh karena itu penambahan CMC Na adalah hingga
25 ml. Penambahan CMC Na dilakukan sedikit demi sedikit untuk
memperoleh kelarutan yang sempurna. Alasan pemilihan CMC Na telah
dijabarkan pada sub bahasan sebelumnya.
Masing- masing dosis diinjeksikan kepada masing-masing kelompok
tikus uji dengan menggunakan spuit injeksi oral. Posisi tikus saat dilakukan
injeksi oral akan lebih mudah bila dalam keadaan tegak.
Sebelum dilakukan injeksi karagenin, maka volume kaki tikus diukur
terlebih dahulu. Setelah satu jam, maka karagenin 1% diinjeksikan secara
subplantar pada telapak kaki tikus. Volume udem langsung diukur atau
disebut sebagai waktu ke-0. Pengukuran volume udem dilakukan tiap
30 menit selama 5 jam. Pada kontrol positif dan negatif diketahui bahwa
waktu maksimal (t Max) pada waktu 2,5 jam. Artinya pada waktu tersebut
35
volume udem mencapai ukuran terbesar yang kemudian akan mengalami
penurunan.
Hasil dari pengukuran volume udem kaki tikus yang diinduksi
karagenin 1% secara subplantar dengan atau tanpa perlakuan dengan
pemberian ekstrak aseton meranti kuning dengan berbagai peringkat dosis
dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Volume udem rata-rata pada tikus yang diinduksi karagenin 1% dengan berbagai perlakuan pada tikus dengan berat badan 200 g.
VOLUME UDEM RATA-RATA Waktu (menit) positif negatif ekstrak 100
mg / KgBB ekstrak 150 mg/ KgBB
ekstrak 200 mg/ KgBB
0 0,836 0,908 0,84 0,848 0,892
30 0,856 1,072 0,86 0,86 0,936
60 0,878 1,12 0,9 0,916 0,976
90 0,904 1,176 0,94 0,956 1,004
120 0,966 1,208 1,028 0,984 1,068
150 1,028 1,28 1,06 0,988 1,068
180 1,008 1,264 1,096 0,972 1,032
210 0,968 1,236 1,064 0,932 1,072
240 0,948 1,192 1,008 0,968 1,076
270 0,9 1,172 1,076 0,964 1,08
300 0,9 1,156 1,004 0,94 1,024
Dari tabel tersebut dapat dibuat grafik hubungan antara waktu (menit)
terhadap volume udem rata-rata yang dapat dilihat pada Gambar 7.
36
0,7
0,8
0,9
1
1,1
1,2
1,3
0 30 60 90 120 150 180 210 240 270 300
Waktu (menit)
Kontrol Negatif
Ekstrak aseton 100mg/ KgBBEkstrak aseton 150mg/ KgBBEkstrak aseton 200mg/ KgBBKontrol positif
Vol
ume
udem
(ml)
Gambar 7. Grafik volume udem rata-rata (ml) terhadap waktu (menit)
Untuk menentukan prosentase daya antiinflamasi terlebih dahulu perlu
dicari nilai AUC (Area Under the Curve). AUC dapat dicari dengan
menggunakan persamaan 2. Kemudian AUC tersebut dapat digunakan untuk
menentukan persen daya antiinflamasi, yang diaplikasikan dalam persamaan
3. Hasil perhitungan AUC dan persen daya penghambatan inflamasi dapat
dilihat pada Tabel 4.
Tabel 4. Nilai AUC dan Persen Daya Antiinflamasi (DAI) perlakuan AUC (ml.menit) % penghambatan kontrol (-) 352,56 0 kontrol (+) 279,72 20,66 ekst.100 mg/ KgBB 298,62 15,3 ekst.150 mg/ KgBB 283,02 19,72 ekst.200 mg/ KgBB 308,10 12,61
Dengan demikian diketahui bahwa semakin besar nilai AUC maka
semakin kecil persen daya antiinflamasi yang diperoleh jika dibandingkan
dengan kontrol negatif.
37
0
20,66 15,3
19,72
12,61
0
5
10
15
20
25
Daya antiinflamasi
Perlakuan
A B C D E
KET: A = Kontrol negative B = Kontrol positif C = Eks.100 mg/ KgBB D = Eks.150 mg/ KgBB E = Eks. 200mg/ KgBB
Day
a A
ntiin
flam
asi (
%)
Gambar 8. Histogram daya antiinflamasi
Dengan melihat histogram tersebut diatas, dapat dilihat bahwa ekstrak
aseton meranti kuning dengan konsentrasi 150 mg/ KgBB memiliki daya
penghambatan antiinflamasi hampir setara dengan nilai daya penghambatan
pada kontrol positif Natrium diklofenak. Dengan demikian ekstrak aseton
Meranti kuning 150 mg/ KgBB memiliki potensi penghambatan yang hampir
setara dengan daya penghambatn natrium diklofenak. Namum dalam suatu
penelitian, khususnya pada penelitian antiinflamasi yang menggunakan
sampel dengan pemberian secara oral, masih dipengaruhi oleh adanya
absorbsi, distribusi, metabolisme dan ekskresi (ADME) dalam tubuh. Dari
tabel tesebut diketahui bahwa dengan dosis pemberian kecil (100 mg/ KgBB)
dan dengan dosis besar (200 mg/ KgBB), memberikan penghambatan
inflamasi yang kurang optimal bila dibandingkan dengan dosis
150 mg/ KgBB. Hal tersebut dapat disebakan oleh faktor absorbsi, distribusi,
metabolisme dan ekskresi (ADME). Karena tikus putih yang digunakan
sebagai hewan uji mudah sekali mengalami stress. maka hewan uji akan
38
mengeluarkan feses dan urin. Sehingga akan mempercepat terjadinya
eliminasi ekstrak dari sirkulasi sistemik tikus. Selain itu, ekstrak yang
digunakan berupa ekstrak murni (crude extract) yang mengandung banyak
senyawa. Sehingga dimungkinkan senyawa-senyawa yang tidak memiliki efek
sebagai antiinflamasi dapat mempengaruhi senyawa-senyawa yang memiliki
efek sebagai antiinflamasi.
Untuk melihat adanya perbedaan secara nyata pada efek antiinflamasi
antar kelompok perlakuan, dapat dilakukan uji statistik. Dengan dilakukannya
uji statistik tersebut maka dapat digambarkan keadaan yang sebenarnya.
Uji statistik tahap awal yang perlu dilakukan adalah uji Kolmogorov-Smirnov.
Uji ini dilakukan untuk mengetahui apakah data yang diperoleh terdistribusi
secara normal (parametrik) atau tidak terdistribusi normal (non parametrik).
Hasil yang diperoleh adalah 0,584. dimana signifikansi (p) > 0,05 yang artinya
terdapat perbedaan yang tidak signifikan. Sehingga secara statistik data
tersebut dapat dikatakan terdistribusi normal. Dari hasil uji homogenitas
diketahui bahwa nilai signifikansi = 0,179. sehingga Ho diterima ( p > 0,05),
artinya varian dalam kelompok homogen. Sehingga analisis dapat dilanjutkan
menggunakan uji ANOVA. Hasil uji statistik dengan kolmogorov-smirnov
dapat dilihat pada lampiran 4.
Untuk uji one way ANOVA. Yang digunakan untuk mengetahui
apakah ada perbedaan yang signifikan atau tidak antar kelompok perlakuan,
yaitu perbedaan antar masing-masing kelompok ekstrak maupun dengan
kelompok natrium diklofenak yang memang sudah terbukti memiliki efek
39
antiinflamasi. Adanya perbedaan yang signifikan dapat ditunjukkan dengan
melihat perbedaan antara nilai F hitung dan F tabel. Bila F hitung > F tabel
maka terdapat pebedaan yang signifikan. Nilai F hitung yang diperoleh adalah
sebesar 21.624, lebih besar dari pada F tabel. Nilai F tabel adalah sebesar 2,
7587. sehingga dapat disimpulkan bahwa terdapat pebedaan yang signifikan
antar kelompok perlakuan. Hasil uji dengan menggunakan one way ANOVA
dapat dilihat pada lampiran 4.
Untuk mengetahui perbedaan antar kelompok perlakuan, uji statistik dapat
dilanjutkan dengan uji LSD. Uji ini berdasarkan pada probabilitas, jika
probabilitas > 0,05 maka H0 diterima, sedangkan jika probabilitasnya < 0,05
maka H0 ditolak. Untuk menganalisanya dilakukan uji LSD. Hasil uji dapat
dilihat pada Tabel 5.
Dari data tersebut diketahui bahwa terdapat perbedaaan efek
antiinflamasi yang bermakna antar kelompok perlakuan. Namun ada beberapa
perlakuan yang tidak memiliki perbedaan yang bermakna antar kelompok
perlakuan. Ekstrak aseton meranti kuning 150 mg/ KgBB tidak memiliki
perbedaaan efek antiinflamasi yang bermakana dengan kontrol positif Natrium
diklofenak (p=0,713>0,05) dan juga dengan ekstrak aseton meranti kuning
100 mg/ KgBB (p=0,087>0,05). Dapat dilihat pada gambar 8 bahwa daya
antiinflamasi dari Ekstrak aseton meranti kuning 150 mg/ KgBB tidak jauh
berbeda dengan kontrol positif maupun dengan ekstrak aseton meranti kuning
100 mg/ KgBB, namun sangat jauh berbeda dengan daya antiinflamasi ekstrak
aseton meranti kuning 200 mg/ KgBB (p=0,007<0,05). Sedangkan ekstrak
40
aseton meranti kuning 200 mg/ KgBB juga tidak memiliki perbedaaan
yang bermakna terhadap ekstrak aseton meranti kuning 100 mg/ KgBB
(p=0,293>0,05).
Tabel 5. Nilai probabilitas dari hasil uji LSD Pasangan kelomok perlakuan Nilai signifikasi (p) Ket
Kontrol negatif: kontrol positif 0,000<0,05 BB kontrol negatif: ekstrak aseton 100 Mg/ KgBB
0,000<0,05 BB kontrol negatif: ekstrak aseton 150 Mg/ KgBB
0,000<0,05 BB kontrol negatif: ekstrak aseton 200 Mg/ KgBB
0,000<0,05 BB kontrol positif : Kontrol negatif 0,000<0,05 BB kontrol positif : ekstrak aseton 100 Mg/ KgBB
0,039<0,05 BB kontrol positif : ekstrak aseton 150 Mg/ KgBB
0,713>0,05 TBB kontrol positif : ekstrak aseton 200 Mg/ KgBB
0,003<0,05 BB ekstrak aseton 100 Mg/ KgBB : kontrol negatif
0,000<0,05 BB ekstrak aseton 100 Mg/ KgBB : kontrol positif
0,039<0,05 BB ekstrak aseton 100 Mg/ KgBB : ekstrak aseton 150 Mg/ KgBB
0,087>0,05 TBB ekstrak aseton 100 Mg/ KgBB : ekstrak aseton 200 Mg/ KgBB
0,293>0,05 TBB ekstrak aseton 150 Mg/ KgBB : kontrol negatif
0,000<0,05 BB ekstrak aseton 150 Mg/ KgBB : kontrol positif
0,713>0,05 TBB ekstrak aseton 150 Mg/ KgBB : ekstrak aseton 100 Mg/ KgBB
0,087>0,05 TBB ekstrak aseton 150 Mg/ KgBB : ekstrak aseton 200 Mg/ KgBB
0,007<0,05 BB ekstrak aseton 200 Mg/ KgBB : kontrol negatif
0,000<0,05 BB ekstrak aseton 200 Mg/ KgBB : kontrol positif
0,003<0,05 BB ekstrak aseton 200 Mg/ KgBB : ekstrak aseton 100 Mg/ KgBB
0,293>0,05 TBB ekstrak aseton 200 Mg/ KgBB : ekstrak aseton 150 Mg/ KgBB
0,007<0,05 BB
Keterangan: BB = berbeda bermakna TBB = tidak berbeda bermakna
BAB IV
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa ekstrak aseton kulit
batang meranti kuning memiliki efek sebagai antiinflamasi, pada dosis
150 Mg/ KgBB efek antiinflamasi yang dihasilkan tidak jauh berbeda dengan efek
Natrium diklofenak.
B. Saran
Perlu dilakukan penelitian lanjutan untuk mengetahui senyawa-senyawa yang
terkandung dalam ekstrak aseton meranti kuning (Shorea accuminatissima SYM.)
yang memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi.
41
DAFTAR PUSTAKA
Anief, 2000. Ilmu Meracik Obat : Teori dan Praktek, cetakan ke- 9,174, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta.
Anonim,1979. Farmakope Indonesia,Edisi III. Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta.
Anonim,1983. Pemanfaatan Tanaman Obat, Edisi III, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Anonim, 1986. Sediaan Galenik , 4 – 6, 25 – 27, Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta.
Anonim,1998. Patologi. Bagian patologi anatomik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta.
Anonim, 2002. Farmakologi dan Terapan, Edisi 4, departemen
Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Gaya Baru, Jakarta.
Anonim, 2004, Penelitian Antiinflamasi dan Antipiretik Ekstrak Etanol
Rimpang Dringgo (Acorus calamus.L) pada tikus putih, http://digilib.litbang.depkes.go.id/go.php?id=jkpkbppk-gdi-grey-2003-sa 2382173 broni-1662, (Online). Diakses tanggal 17 mei 2007.
Ansel, H.C, 2005. Pengantar Sediaan Farmasi, Universitas Indonesia
Press, Jakarta, 605-612. Ashton, P.S., 1983, Flora Malesiana, Series 1. Spermatophyta. 9, Martinus
Nijhoff, London, 436-552. Commun, K,. Claude M, M., Chupeau, Y., Boulay, M., Burrus, Monique.,
Jeandet, P., 2003, “Phytoalexin Production in Grapevine Protoplast during Isolation and Culture”, Plant Physiology and Biochemistry, 41 : 317-323.
Dalimartha. 2003. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Jilid 3, Cetakan I, v,
Puspa Swara. Jakarta. Gunawan, D dan Mulyani, S, 2004. Farmakognosi, cetakan I, 51-53, Tugu
publisher, Yogyakarta. Harbourne, J.B., 1987. Metode Fitokimia : Penentuan Cara Modern
Tumbuhan, Edisi II , ITB, Bandung.
42
Ito, Tetsuro., Furusawa, Miyuki., Iliya, Ibrahim., Tanaka, Toshiyuki., Ichi
Nakaya, Ken., Sawa Ryuichi., Kubota, Yumiko., Takahashi, Yoshikazu., Riswan, Soedarsono., Iinuma, Munekazu., 2005, “Rotational Isomerism of a Resveratrol Tetramer, Shoreaketone, in Shorea uliginosa”, Tetrahedron Letters, 46 : 3111-3114.
Ito,T., Tanaka,T., limuna, M., Nakaya, K.I., Takahashi, Y., dan Sawa, R.,
Murata, J., Dedi D., 2004, Two new resveratrol tetramers with a tetrahydrofuran ring from Dipterocarpus grandiflorus, Helvetica Chimica Acta, 87, 479-494.
Katzung, 2002, Farmakologi Dasar dan Klinik, 112-116, Edisi VIII,
Penerbit Salemba Medika, Jakarta. Kee,J.K., dan Hayes, E.R., 1996. Farmakologi Pendekatan Proses
Keperawatan, Diterjemahkan Oleh Anugrah,P., EGC. Jakarta. Kim, Dae ok dan Lee, Chang Y, 2002, Extraction and Isolation of
Polyphenolics, Current Protocol in Analytical Chemistry, I1.2.1-I1.2.12
Kitanaka S., Ikezawa T., Yamanauchi S., Takido M., Sung H.K., Kim I.H.,
1990, (+)-α-viniferin, an Anti-inflamatory Compound from Caragana chamlague Root, Chem. Pharm. Bull., 38 : 432-435.
Klopenberg-Versteegh, J.,1983, Petunjuk lengkap mengenai tanaman-
tanaman di Indonesia dan khasiatnya sebagai obat-obatan tradisional,jilid II, Bagian medis,CD R.S.Bethesda dan Andi offset, Yogyakarta,188,191-224.
Mycek, Mary J.,Richard A. Harvey., Pamela C.Champe.2001.
Farmakologi : ulasan bergambar. Alih bahasa Azwar Agoes. Widya Medika. Jakarta.
Maryanto, 1997, Daya Atiinflamasi Infus Sosor Bebek (Kalanchoe
pinnata) Pada Tikus Putih Jantan, Skripsi. Fakultas Farmasi. Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Newman, M.F, Burges, P.F dan Whitmore.T.C.,1999, Pedoman
Identifikasi Pohon-Pohon Dipterocarpacea Kalimantan, PROSEA, Bogor, 216-217.
Noviany, Hakim,E.H., Ahmad,S.A., Syah,Y.M., Juliawaty,L.D., Aimi ,N,
Glisalberty,E.L., Choudary,I.M., 2003. Beberapa oligomer
43
stilbenoid dari tumbuhan Shorea multiflora (Bruck), Bulletin Society Natural Product Chemical (Indonesia), ITB. Bandung.
Pryce R.J. and Langcake P., 1977, α-viniferin : an Antifungal Resveratrol
Trimer from Grapevines, Phytochemistry, 16 : 1452-1454. Puspitasari,Ika, 2006, Cerdas Mengenali Penyakit dan Obat,B-first,
Yogyakarta. Salasia, Siti Isriani Oktavia., Rohmadiyanto., Fatimah, Oktarina.,
Setyawati, Wiwit, 2002. Daya Anti Radang Cinnamyl Tiglate Yang Terkandung Dalam Minyak Atsiri Kunyit (Curcuma domestica.Val), Majalah Farmasi Indonesia,13, 162-168.
Sawitri,2003,D.E., 2003, Efek Antiinflamasi Jamu Encok Rematik Pada
Tikus Putih Jantan, skripsi, Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Siswandono dan Sukardjo,B., 1995, Kimia Medisinal,251, Airlangga
University Press, Surabaya. Smith, J dan Mangkoewidjojo, S, 1998. Pemeliharan, Pembiakan dan
Penggunaan Hewan Percobaan di Daerah Tropis, 10 – 11, Universitas Indonesia Press, Jakarta.
Sotheeswaran, S. dan Pasuphaty. V.,1993. Distribution of Resveratrol
Oligomer in Plants, Phytochemistry,32, 1083-1092.
Sultanbawa, M.U.S., Surendrakumar, S., dan Bladon, P., 1987, Distichol, An Antibacterial Polyphenol From Shorea disticha, Phytochemistry, 26, 799-801.
Sung S. H., Kang S. Y., Lee K. Y., Park M.J., Kim J.H., Park J.H.,
Kim Y. C., Kim J.W., Kim Y. C., 2002, (+)-α-viniferin, a Stilbene Trimer from Caragina chamlague, Inhibits Acetylcholin Esterase, Biol. Pharm. Bull., 25(1) : 125-127.
Symington, C.F., 1974, Foresters manual of Dipterocarpus , malayan
forest record.16. Universiti Malaya, Kuala Lumpur, Malaysia. Takaya, Yoshiaki., Xu Yuan, Ke., Terashima, Kenji., Ito, Junko., Niwa,
Masatake., 2002, “Chemical Determination of the Absolute Structures of Resveratrol Dimers, Ampelopsins A, B, D and F”, Tetrahedron, 58 : 7259-7265.
44
Tjay T,H.,dan Raharja, K., 2002, Obat-Obat Penting, edisi V, Elex Media Komputindo,Jakarta.
Tukiran, Achmad S. A., Hakim E. H., Syah Y. M., Makmur L., Mujahidin
D., Takeya K., 2001, Hopeaphenol, a Dehydroresveratrol tetramer from Indonesian Shorea selanica Blume (Dipterocarpaceae), International Seminar on Natural Products Chemistry and Utilization of Natural Resources, Jakarta, Indonesia, 221-224.
Underwood, J.C.E. 1999. Patologi Umum Dan Sistemik.Vol I. EGC.
Jakarta. Wilmana, P,F.,1985, Obat Antiinflamasi Non Steroid Pemilihan dan
Keterbatasan, Cermin Dunia Kedokteran,38, Jakarta. Voight, R, 1995. Buku Pelajaran Teknologi Farmasi, Diterjemahkan oleh
Soendani Noerono, Edisi kelima,33, 392, 559, 570 – 571, 577 – 578, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta.
45
46
Lampiran 1.Hasil uji daya antiinflamasi ekstrak aseton kulit batang meranti kuning DOSIS KARAGENIN 1% (KONTROL NEGATIF) TIKUS 0 30 60 90 120 150 180 210 240 270 300I 0.76 0.84 0.98 1.1 1.14 1.18 1.26 1.24 1.18 1.12 1.12 1.1II 0.74 0.86 0.98 1.16 1.2 1.18 1.3 1.28 1.3 1.24 1.2 1.2III 0.88 0.98 1.24 1.2 1.26 1.3 1.34 1.32 1.26 1.24 1.24 1.24IV 0.82 0.96 1.04 1 1.1 1.14 1.2 1.18 1.18 1.1 1.08 1.04V 0.82 0.9 1.12 1.14 1.18 1.24 1.3 1.3 1.26 1.26 1.22 1.2 0.804 0.908 1.072 1.12 1.176 1.208 1.28 1.264 1.236 1.192 1.172 1.156 27.3 31.2 33.6 34.8 36.6 37.5 36.3 34.5 33.6 33.3 338.7 27.6 32.1 35.4 35.7 37.2 38.7 38.7 38.1 36.6 36 356.1 33.3 36.6 36.9 38.4 39.6 39.9 38.7 37.5 37.2 37.2 375.3 30 30.6 31.5 33.6 35.1 35.7 35.4 34.2 32.7 31.8 330.6 30.3 33.9 34.8 36.3 38.1 39 38.4 37.8 37.2 36.3 362.1 AUC 352.56
Ekstrak aseton 100 mg/ KgBB TIKUS 0 30 60 90 120 150 180 210 240 270 300I 0.68 0.82 0.82 0.84 0.84 0.9 0.96 0.98 0.96 0.92 0.92 0.86II 0.74 0.84 0.84 0.9 0.96 1.1 1.16 1.2 1.14 0.92 1.18 1.1III 0.82 0.86 0.86 0.98 0.98 1.08 1.1 1.14 1.14 1.12 1.16 1.08IV 0.74 0.82 0.9 0.9 1 1.02 1.02 1.04 0.96 1 1.02 0.94V 0.84 0.86 0.88 0.88 0.92 1.04 1.06 1.12 1.12 1.08 1.1 1.04rerata 0.764 0.84 0.86 0.9 0.94 1.028 1.06 1.096 1.064 1.008 1.076 1.004 24.6 24.9 25.2 26.1 27.9 29.1 29.1 28.2 27.6 26.7 269.4 25.2 26.1 27.9 30.9 33.9 35.4 35.1 30.9 31.5 34.2 311.1 25.8 27.6 29.4 30.9 32.7 33.6 34.2 33.9 34.2 33.6 315.9 25.8 27 28.5 30.3 30.6 30.9 30 29.4 30.3 29.4 292.2 26.1 26.4 27 29.4 31.5 32.7 33.6 33 32.7 32.1 304.5 AUC 298.62 %DAI 15.3 Ekstrak aseton 150 mg/ KgBB TIKUS 0 30 60 90 120 150 180 210 240 270 300I 0.8 0.88 0.9 0.96 0.98 1 1.02 0.98 0.98 0.98 0.94 0.9II 0.76 0.8 0.74 0.86 0.9 0.92 0.94 0.86 0.84 0.92 0.92 0.9III 0.76 0.84 0.9 0.88 0.94 1 0.98 0.98 0.92 0.9 0.9 0.88IV 0.74 0.84 0.88 0.92 0.96 1 1.02 1.04 0.96 1.06 1.06 1.04V 0.78 0.88 0.88 0.96 1 1 0.98 1 0.96 0.98 1 0.98 0.848 0.86 0.916 0.956 0.984 0.988 0.972 0.932 0.968 0.964 0.94 26.7 27.9 29.1 29.7 30.3 30 29.4 29.4 28.8 27.6 288.9 23.1 24 26.4 27.3 27.9 27 25.5 26.4 27.6 27.3 262.5 26.1 26.7 27.3 29.1 29.7 29.4 28.5 27.3 27 26.7 277.8 25.8 27 28.2 29.4 30.3 30.9 30 30.3 31.8 31.5 295.2 26.4 27.6 29.4 30 29.7 29.7 29.4 29.1 29.7 29.7 290.7 AUC 283.02
47 %DAI 19.724 Ekstrak aseton 200 mg/ KgBB TIKUS 0 30 60 90 120 150 180 210 240 270 300I 0.9 1 1.02 1.06 1.08 1.1 1.12 1.1 1.16 1.18 1.16 1.12II 0.78 0.86 0.88 0.96 0.9 0.96 0.96 0.92 0.98 0.98 1.02 0.92III 0.8 0.9 0.98 1 1.02 1.16 1.14 1.06 1.16 1.14 1.1 1.06IV 0.8 0.86 0.92 0.98 1.06 1.06 1.1 1.08 1.06 1.1 1.06 1.04V 0.74 0.84 0.88 0.88 0.96 1.06 1.02 1 1 0.98 1.06 0.98 0.892 0.936 0.976 1.004 1.068 1.068 1.032 1.072 1.076 1.08 1.024 30.3 31.2 32.1 32.7 33.3 33.3 33.9 35.1 35.1 34.2 331.2 26.1 27.6 27.9 27.9 28.8 28.2 28.5 29.4 30 29.1 283.5 28.2 29.7 30.3 32.7 34.5 33 33.3 34.5 33.6 32.4 322.2 26.7 28.5 30.6 31.8 32.4 32.7 32.1 32.4 32.4 31.5 311.1 25.8 26.4 27.6 30.3 31.2 30.3 30 29.7 30.6 30.6 292.5 AUC 308.1 %DAI 12.611
Lampiran 2. Proses ekstraksi
1. Destilasi pelarut aseton 2. Pelarut aseton yang telah di destilasi
48
3. Maserasi dengan pelarut aseton 4. Destilasi maserat
5. Ekstrak aseton
49
Lampiran 3. Keterangan Hasil Determinasi
50
Lampiran 4. Hasil analisis statistik dengan one way ANOVA dan kolmogorov-smirnov
NPar Tests One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
PERLAKUAN AUC N 50 50
Normal Parameters(a,b) Mean 3.0000 30.4404Std. Deviation 1.42857 3.26347
Most Extreme Differences Absolute .158 .110Positive .158 .110Negative -.158 -.060
Kolmogorov-Smirnov Z 1.117 .776Asymp. Sig. (2-tailed) .164 .584
a Test distribution is Normal. b Calculated from data.
Oneway Descriptives AUC
N Mean Std.
Deviation Std. Error 95% Confidence Interval for
Mean Minimum Maximum
Lower Bound Upper Bound KONTROL NEGATIF 10 35.2560 2.50937 .79353 33.4609 37.0511 29.70 38.16KONTROL POSITIF 10 27.9720 1.72715 .54617 26.7365 29.2075 25.38 30.54EKSTRAK ASETON 100 mg/ KgBB 10 29.8620 2.49849 .79009 28.0747 31.6493 25.50 32.40
EKSTRAK ASETON 150 mg/ KgBB 10 28.3020 1.25221 .39598 27.4062 29.1978 25.62 29.58
EKSTRTAK ASETON 200 mg/ KgBB 10 30.8100 1.65922 .52469 29.6231 31.9969 27.42 32.34
Total 50 30.4404 3.26347 .46152 29.5129 31.3679 25.38 38.16 Test of Homogeneity of Variances AUC
Levene Statistic df1 df2 Sig.
1.647 4 45 .179 ANOVA AUC
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 343.269 4 85.817 21.624 .000Within Groups 178.591 45 3.969 Total 521.860 49
51 Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: AUC LSD
(I) PERLAKUAN (J) PERLAKUAN Mean Difference
(I-J) Std.
Error Sig. 95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound KONTROL NEGATIF KONTROL POSITIF 7.28400(*) .89092 .000 5.4896 9.0784 EKSTRAK ASETON 100
mg/ KgBB 5.39400(*) .89092 .000 3.5996 7.1884
EKSTRAK ASETON 150 mg/ KgBB 6.95400(*) .89092 .000 5.1596 8.7484
EKSTRTAK ASETON 200 mg/ KgBB 4.44600(*) .89092 .000 2.6516 6.2404
KONTROL POSITIF KONTROL NEGATIF -7.28400(*) .89092 .000 -9.0784 -5.4896
EKSTRAK ASETON 100 mg/ KgBB -1.89000(*) .89092 .039 -3.6844 -.0956
EKSTRAK ASETON 150 mg/ KgBB -.33000 .89092 .713 -2.1244 1.4644
EKSTRTAK ASETON 200 mg/ KgBB -2.83800(*) .89092 .003 -4.6324 -1.0436
EKSTRAK ASETON 100 mg/ KgBB
KONTROL NEGATIF -5.39400(*) .89092 .000 -7.1884 -3.5996
KONTROL POSITIF 1.89000(*) .89092 .039 .0956 3.6844
EKSTRAK ASETON 150 mg/ KgBB 1.56000 .89092 .087 -.2344 3.3544
EKSTRTAK ASETON 200 mg/ KgBB -.94800 .89092 .293 -2.7424 .8464
EKSTRAK ASETON 150 mg/ KgBB
KONTROL NEGATIF -6.95400(*) .89092 .000 -8.7484 -5.1596
KONTROL POSITIF .33000 .89092 .713 -1.4644 2.1244 EKSTRAK ASETON 100
mg/ KgBB -1.56000 .89092 .087 -3.3544 .2344
EKSTRTAK ASETON 200 mg/ KgBB -2.50800(*) .89092 .007 -4.3024 -.7136
EKSTRTAK ASETON 200 mg/ KgBB
KONTROL NEGATIF -4.44600(*) .89092 .000 -6.2404 -2.6516
KONTROL POSITIF 2.83800(*) .89092 .003 1.0436 4.6324 EKSTRAK ASETON 100
mg/ KgBB .94800 .89092 .293 -.8464 2.7424
EKSTRAK ASETON 150 mg/ KgBB 2.50800(*) .89092 .007 .7136 4.3024
* The mean difference is significant at the .05 level.
52
Lampiran 5. Hasil analisis SEM Means
Case Processing Summary
50 100.0% 0 .0% 50 100.0%AUC * PerlakuanN Percent N Percent N Percent
Included Excluded TotalCases
Means
Case Processing Summary
50 96.2% 2 3.8% 52 100.0%DAI * PerlakuanN Percent N Percent N Percent
Included Excluded TotalCases
Report AUC
35.2560 2.50937 .7935327.9720 1.72715 .5461729.8620 2.49849 .7900928.3020 1.25221 .3959830.8100 1.65922 .5246930.4404 3.26347 .46152
Perlakuan Kontrol (-) Kontrol (+) AUC 100 AUC 150AUC 200Total
Mean Std. DeviationStd. Errorof Mean
Report
DAI
.0000 .00000 .0000020.5766 2.30960 .7303615.3248 3.04827 .9639519.5576 2.90215 .9177412.4694 3.10181 .9808813.5857 7.86078 1.11168
Perlakuan Kontrol (-)%DAI kontrol (+) %DAI 100 %DAI 150 %DAI 200 Total
Mean Std. DeviationStd. Errorof Mean
53
Lampiran 6. Perhitungan dosis
1. Dosis kontrol positif Na diklofenak : Dosis Natrium diklofenak = 150 mg X 0,018 = 2, 7 mg / 200 gBB = 13, 5 mg/ kgBB
= 2, 7 mg/ 2, 5 ml = 54 mg / 50 ml
2. Perhitungan nilai AUC
AUC eks.aseton 100mg/KgBB = )030(2
)82,082,0(−
+ X
= 24,6 ml.menit
stok
54
Lampiran 7. Gambar Pletismometer
top related