09 jul 1902 - repository.unair.ac.idrepository.unair.ac.id/10326/2/fulltext.pdf · pemantauan kadar...

PEMANTAUAN KADAR TUNAK FENXTOIN DALAM SERUM PADA REBERAPA PENDERITA EPILEPSJ TIPE GRAND MAL DEKGAN *TERAPI FENITOIN SALAH SATU PRODUK DALAM NEGERI

SKRIPSIDIBUAT UNTUK SYAR AT MENCAPAl

GELAR SARJANA FARM^ST PADA FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS AiKLANGGA

19S8

~F

olelo

S E P T I A N I 0 5 8 2 1 0 5 7 0

Disetujui oleh Perabimbing

—

r.

M I t l f c FERPUSTAKAAK

VNITBRSITAS AIRLANOttA'

S U R A B A Y A

0 9 JUL 1902

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi PEMANTAUAN KADAR TUNAK... SEPTIANI

KATA PENGANTAR

Puji eyukur bagi Allah Yang Maha Kuasa yang telah me- llmpahkan berkatNya dan memperkenankan saya untuk dapat me* nyelesaikan skripei guna memenuhl syarat-syarat dalam mencapal gelar sarjana Farmasl pada FaJkultas Farmasi Universitae Airlangga. Tidak sediklt hambatan dan kesukaran yang saya alaml dalam menyeleeaikan skripai ini, namun berkat rahmatNya sehingga akhirnya saya fiapat menelesaikannya.

Pada kesempatan ini, saya ingin mengucapkan rasa teri- ma kasih yang sebesar-besarnya kepada i- Ibu Dra. Ny. Siti SJamsiah H# pembimbing dan pendiflik yang

telah memberlkan dorongan dan bimbingan, mulai dari pembuatan proposal hlngga eelesainya tugas akhir ini.

- Bapak Dr* Margono I. S., pembimbing dan pendidik yang tidak Jemu-jemu memberlkan bimbingan, dorongan dan earan- earan Berta menyodiakan faailitas kliniknya selaaa penelitian ini.

- Dr* Bambang Subagio, pembimbing kami yang telah memberlkan bimbingan, dorongan serta menyedlakan fasilitas alat eela- ma panel!tlan ini.

- Ibu Rahayu Anggraini dan Bapak Ko«enindar yang telah banyak membantu dan mendamping! kami selama penelitian ini.

- Kepala Poliklinik bagian Syaraf di RSUD Dr. Soetomo, Ke- pala Laboratorium Biokimia Fakultae Kedokteran Vniversitae Airlangga, Kepala Laboratorium Patologi Klinik RSUD IDr. Soetomo, yang telah menyediakan fasilitas dalam melakA-



kan penelitlan ini «**Para BUkarelawan yang telah ikut betpartiaipasi dal am

penelitlan ini•- Para karyawan di Bagian Neurologif Pollkllnlk Bagian

Syaraf RSUD Dr* Soetomo/^Laboratorium Blofarmaaetika- Farmakokinetika Fakultae Farmasi Universttaa Airlangga, yang telah membantu dalam penelitlan ini.

- Kedua orang tua, saudara-saudara tercinta serta rekan-re- yang selalu memberlkan dorongan semangat agar penelitlan ini dapat selesai dengan balk*

Juga rasa terlma kaath yang eebesar-besarnya kepada semua aemua pihak yang tidak dapat kami sebut satu per satu*

Semoga semua bantuandarl berbagai pihak di *tas, menda- dapat balasan darl Allah Yang Maha Kuasa dan mudah-mudahan skriped. ini yang masih Jauh darl eempuma bormanfaat bag! perkembangan llmu kefarmaslan dan llmu kedokteran di masa sendatang*



DAFTAR ISIHalaman

KATA PENGANTAR ................................. iiDAFTAR ISI ..................................... ivDAFTAR TABEL ................................... viiDAFTAR GAMBAR .................................. viiiBABI. PENDAHULUAN ................................ 1

1. Latar belakang masalah ................12. Tujuan penelitxan ...................... k

II. TINJAUAN PUSTAKA......... '................. 51. Epilepsi .................■.............. 52. Prinsip pengobatan epilepsi ............. 53. Obat-obat anti epilepsi ....... . ........ 7

Fenitoin ................................ 94.1. Hubungan struktur dan aktifitas ’ ’

Fenitoin .............................. 105. Farmakokinetika ......................... 12,5.1. Absorbs! .............................. 125.2. Distribusi .......................... . 155.3. Metabolisme dan ekskresi .............. 156. Farraakologi .............................. 176.1. Mekanisrne kerja Fenitoin sebagai anti

kejang ................................ 17'6.2. Do sis ................................. 176.3* Indikasi .............................. 18'



Halaman6.^. Efek samping dan toksisitas ........... 187. Pemantauan kadar Fenitoin dalam serum ... 198. Analisis kadar Fenitoin dalam serum .... 228*1* Metode Radioimmunoassay .............. 22

III. ALAT;. BAHAN DAN METODE P E NEUTIAN........ 251. Alat ...............,................... . 252. Bahan ........ . , . . . - - -............ 253. Metode penelitian .................... 263.1. Analisis kualitatif ................... 263.2. Analisis kuantitatif...... ........... 263.3. Kriteria subyek ....................... 273*4. Protokol .............................. 283.5* Tahapan kerja ......................... 293.5.1- Bahan ............................... 293,5,2. Pembuatan kurva kalibrasi .......... 293.5.3- Kontrol ............................. 303.5,/+. penentuan kadar Fenitoin dalam

sampel serum ............. '.......... 303*6. Pengolahan data ...................... . 313.6.1. Kurva kalibrasi .......... '.......... 313.6.2 Kontrol ............................. 313.6.3* Kadar Fenitoin dalam serum.... . 31

DAFTAR ISI(lanjutan)

v



HalamanIV. HASIL PENELITIAN ........................... .33

1. Analisis kualitatif .332. Analisis kuantitatif .333. Kurva kalibrasi .3A-4. Penentuan kadar Fenitoin dalam serum .... '3k

V\ . PEMBAHASAN ................................. .39VI. KESIMPULAN ................................. .43VII. SARAN - SARAN .............................. .44

RINGKASAN .43VIII. DAFTAR PUSTAKA ............................. .47

LAMPIRANI. Perhitungan regresi kurva kalibrasi .... 51II. Perhitungan harga % terikat .52III.Perhitungan kesetaraan % terikat .53

Perhitungan kadar Fenitoin dlalam serum . 53IV. Hasil serapan sinar Infra raerah serbuk

murni yang didispersikan dalam KBr P ... 5̂ fV. Hasil serapan sinar Infra merah dari

ekstraksi Fenitoin Natrium yang didispersikan dalam KBr P .55

VI. Harga-harga koefisien korelasi (r) pada derajat kepercayaan 5$ dan 1 % .56

DAFTAR ISI(lanjutan)

vi



TABEL HalamanI. Nilai % terikat larutan kalibrasi Feni

toin untuk penetapan kurva kalibrasi..... 3 5.II* Nilai' % terikat Fenitoin dalam serum c

dan kadar yang diperoleh setelah diintfapo'-' .lasikan pada kurva kalibrasi.............. 37

III. Hubungan antara dosis, keadaan klinis pende- ritan dan kadar Fenitoin dalam serum-.....

DAFTAR TABEL

vii



GAMBAR " Halaman1. Kurva % obat terlarut vs waktu dari

beberapa produk kapsul Fenitoin. « . . . ........1^2. Kurva kalibrasi logit log fraksi .terikat

terhadap log kadar Fenitoin ................ 363. Profil kadar rata-rata Fenitoin dalam

serum (p g/ml ) vs waktu (jam) pada pemakaian kapsul produk A dan produk B dari. lima subyek... k2

DAFTAR GAMBAR

viii



PENDAHULUAN

1. Latar belakang masalahEpilepsi merupakan suatu penyakit kronik susunan sya-

raf yang tirabul secara spontan dengan waktu singkat, dengan gejala menghilangnya atau menurunnya. kesadaran (1). Penyakit ini telah lama dikenal, mungkin sama lamanya dengan peradaban manusia, tetapi sampai kini masih banyak pendapat yang salah men_genai penyakit ini (2). Ada yang beranggapan bahwa penyakit epilepsi merupakan gangguan syaraf. Anggapan ini timbul karena kurangnya penerangan

mengenai penyakit ini.Epilepsi tidak akan menyebabkan penderita menjadi

i 1cacat atau nyeri terus menerus dan bukanlah suatu penyakit menulai?, oleh karena itu penderita epilepsi tidak perlu diasingkan. Di Indonesia terdapat 1.650.000 jiwa penderita epilepsi (2). .

Dewasa ini telah banyak ditemukan bermacam-macara o- bat anti epilepsi. Salah satu diantaranya adalah Fenitoin yang ditemukan pada tahun 1938 dan merupakah salah satu obat pilihan untuk epilepsi tipe grand mal (1,3*^)•

Selama ini telah beredar lima produk kapsul Fenitoin N$. Dari daftar Informasi Spesialite Obat'88 ( ISO'88 ) produk-produk tersebut mempunyai harga yang bervariasi yaitu dari 'A+ Rp 150 - Rp 320 setiap kapsul (5).

Adanya perbedaan harga ini kemungkinan disebabkan proses . pabrikasi dan pemilihan bahan baku yang berbeda.

BAB I

1



2

Dari penelitian uji pelarutan beberapa produk Fenitoin yang beredar di Indonesia menunjukkan bahwa ada perbedaan yang bermakna antara pelarutan produk tersebut terhadap produk standard "innovator" (6). Hal ini terlihat dari 50 % obat terlarut untuk standard ( Dilantin - Parke Davis ) memerlukan waktu + 2 0 - 2 5 menit sedang produk yang lain memerlukan waktu + 5 - 1 0 menit (6)*

Dalam USP XX tahun 1980 disebutkan ada dua macam sediaan kapsul Fenitoin Na yaitu sediaan lepas cepat ("prompt") dan sediaan lepas lambat ("extended") (7). Kedua bentuk ini mempunyai perbedaan dalam kecepatan pelarutan, Untuk bentuk "prompt" disyaratkan tolcransi kecepatan melarut tidak boleh lebih kecil dari 85 % dalam 30 menit, sedang bentuk "extended" toleransi kecepatan melarut dalam 30 menit tidak lebih dari 35 %> 60 menit antara 30 - 70 % dan dalam waktu 120 menit tidak lebih dari 85 % (7»8).Tujuan formulasi sediaan "prompt" supaya obat cepat terlarut sehingga cepat diabsorbsi dan dalam waktu singkat dapat memberikan efi'ek, sedang untuk sediaan "extended" obat dilepas secara perlahan sejumlah tertentu selama selang waktu tertentu yang telah diperhitungkan dengan dasar konsep kinetika dosis ganda (9)* Waktu yang diperlukan untuk mencapai kadar maksimum obat dari sediaan "prompt" ialah l£ - 3 jam sedang untuk bentuk "extended" 4 - 1 2 jam (10). Secara kinetika bentuk "prompt" dan "extended" memberikan profil kinetik yang berbeda pada pemakaian dosis ganda (10). Oleh karena itu !perlji dila-



3

kukan penelitian apakah pemakaian bentuk "prompt" akanimenghasilkan rentang kadar tunak aeperti yang dihasilkan oleh sediaan "innovator" pada beberapa penderita epilepsi yang telah dilakukan oleh peneliti terdahulu ( 11, 12) .

Pemakaian bentuk "prompt" diperkirakan merapunyai puncak dan lewibah dari kadar tunak yang seharusnya ti - dak boleh terjadi untuk raaksud terapi kronik dan profi- laksi kejaug. Oleh karena itu bentuk "prompt" secara • .. teoritik memerlukan proses pembuatan yang lebih seder - hana dari pada bentuk "extended". Suatu hal yang sangat mungkins perbedaan harga tersebut salah Satu penyebabi * riya ad&lah perbedaan formulasi dan proses pabrikasi tersebut.

Dari salah satu produk Fenitoin yang beredar di Indonesia adalah produk pabrik PMDN yang menurut keterangan merupakan bentuk "prompt", demikian juga innovator yang ada. Adanya perbedaan harga yang cukup besar dari kedua bentuk tersebut maka peneliti ingin mengetahui kadar tunak yang terjadi dan respon terapeutik yang ditimbulk^n apabila digunakan produk Fenitoin dari pabrik PMDN.

Permasalahan tersebut di atas mendorong peneliti untuk melakukan pengamatan terhadap sejumlah penderita e- pilepsi tipe "grand mal" di RSUD Dr. Soetomo Surabaya dengan terapi tunggal kapsul Fenitoin salah satu produk dalam negeri dan diikuti pengamatan klinik respon yang terjadi.



Dari penelitian ini dih,arapkan dapat memberikan data tentang kadar tunak Fenitoin yang terjadi pada pemakaian Fenitoin dengan produk yang relatif murah.

Tu.juanMencari rentang kadar tunak dan mengamati respon te-

rapeutik yang terjadi pada penderita epilepsi tipe grand mal dengan terapi Fenitoin salah satu produk dalam negeri ( PMDN ).



BAB IT TINJAUAN PUSTAKA

1. Epile?;;!Epilepsi adalah susr'm keadaari dimana yang beru-

lang-ulang terjadi perubahan psroksismal, baik dalam sistSm motoris atau sistem sensoris a tan dalam tingkah laku penderita yang disebabkan oleh perubahan yang men- dadak, berlebihan dan cepat dalam "discharge'1 dari bagian kelabu dari otak (1,13)* Pada beberapa penderita epilepsi dapat dijumpai beberapa bentuk kejang yang antar penderita tidak sama.

Ditinjau dari bentuk kejang maka epilepsi dibagi dalam tiga kelompok : (1,13)1. Kejang fokal ( partial epilepsy )

Bentuk kejang ini ada dua yaitu "simple focal" dan "'complex focal".

2. Epilepsi umum ( generalized epilepsy )Pada kelompok ini dapat dibagi dalam petit mal (absence), mioklonik, klonik, tonik, tonik klonik (grand mal), atonik.

3. Kejang yang tidak diklasifi kasikan.

2. Prindlt) pengobatan epilepsi

Tujuan pengobatan epilepsi adalah membebaskan penderita dari serangan epilepsi bentuk apapun. tanpa meng-

ganggu fmngsi normal eueunan syaraf pusat- sehingga penderita dapat menjalankan tugasnya tanpa gangguan (1,3>.4.)«

5 R i n aFERPUSTAKAAW

"WMITERSITAS A lR LA H O O A 'S U R A B A Y A



6

Untuk dapat berhasil dalam pengobatan epilepsi makai

beberapa batasan perlu diperhatikan yaitu : (1 4 )1 . Menentukan jenis epilepsi dan memilih salah satu ma-

cam obat yang sesuai.2. Dosisnya disesuaikan sampai diperoleh hasil yang op

timal .3. Dilakukan pemantauan kadar obat dalam darah.4. Bila obat yang dipilih tidak didapat hasil yang opti

mal sedang gejala intoksikasi raulai ada maka dosis dikurangi dan ditambah anti epilepsi kedua lainnya.

5. Bila dengan gabungan kedua obat memberi hasil yang baik baik maka dicoba untuk menurunkan dosis obat yang pertama secara bertahap kemudian dihentikan.Terapi kombinasi dari dua atau lebih .\macam obat mungkin diperlukan namun dianjurkan untuk memulai dengan satu macam obat saja. Bila tidak berhasil barulah ** digunakan dua atau lebih obat.Dalam memilih obat anti epilepsi perlu diperhatikan

syarat obat yang ideal sehingga dapat mencapai hasilfarmakoterapi yang maksimal. Syarat obat anti epilepsiyang ideal ialah : (3 )1. Dapat menekan serangan sesempurna mungkin tanpa menira-

bulkan efek samping yang mengganggu,2. Mempunyai batas keamanan ( margin of safety ) yang

lebar.3. Satu jenis ob^t dapat menguasai semua tipe epilepsi

dan bekerja langsung pada fokus serangan.



t

4. Dapat diberikan per oral serta mempunyai raasa kerja yang panjang dan aman untuk pengobatan jangkavpanjang.

5. Harganya murs.h.

3. Obat-obat anti epilepsiBeberapa obat anti epilepsi yang sering digunakan

di klinik ialah :a, Fenobarbital ( 1 , 1 4 , )

Fenobarbital sering digunakan pada epilepsi karena merupakan obat anti epilepsi yang cukup ampuh, murah, aman dan dapat digunakan pada epilepsi jenis grand mal dan fokal. Dosis efektif telatif rendah. Adapun efek sampingnya ialah mengantuk, pada anak- anak sering didapatkan hiperakti.vitas. Pada dosis yang lebih tinggi dapat dijumpai ataksia dan nis - tagmus. Reaksi alergik ialah rash pada kulit.

b. Fenitoin C 1,k,15 )Fenitoin efektif terhadap epilepsi jenis grand

mal, fokal dan psikomotor, namun tidak efektif pada petit mal dan kejang demam. Fenitoin sebagai o- bat epilepsi, sekalipun relatif yang paling aman dari kelompoknya namun. dapat raenimbulkan efek samping dan toksisitas. Gejala toksik. yang sering timbul ialah ataksia, nistagmus, tremor dan -su&ar .berJ

bicara ( slurred spnech ) dapat juga timbul gangguan mental. Efek sampingnya berupa nyeri ulu hati, mual, muntah, ruam morbiliform serta anemia megaloblastik. Pada penggunaan obat dengan jangka panjang kadang

7ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga


8

dijumpai hiperplasi£-ginggiva*■C. Carbamazepin <( 1,14,15 )

Obat ini dapat digunakan untuk epilepsi jenis psikomotor, fokal dan grand mal, Toksisitas yang berhubungan dengan dosis ialah nistagmus, ataksia, vertigo dan diplopia. Dapat juga terjadi agranulocytosis, trombocytopenia serta leukopenia. Efek samping yang timbul pusing, mual,dan muntah. Carbamazepin lebih toksis daripada Fenitoin karena menyebabkan gangguan kardiovaskuler, fungsi hati dan fungsi ginjal.

d. Diazepam ( 1,14 )Diazepam biasanya digunakan untuk status epilep

si, dapat pula digunakan pada epilepsi jenis psikomotor, petit mal dan infantile spasm. Pada dosis yang tinggi menyebabkan rasa mengantuk dan lemas. Efek samping yang berbahaya pada ponggunaan Diazepam ialah obstruksi saluran nafas oleh lidah, akibat relaksasi otot, hipotensi dan jantung berhenti berdenyut.

e* Clonazepam ( 1,Obat ini berkhasiat baik pada status epilepsi dan

masa kerjanya panjang. Juga dapat digunakan pada petit mal, mioklonik dan akinetik* Efek samping yang ditimbulkan adalah rasa mengantuk, lemas, ataksia dan perubahan tingkah laku.

f. Nitrazepam ( l^fj) '■Nitrazepam tcrutama digunakan pada.infantile spasm

dan epilepsi jenis mioklonik. Efek samping yang sering



9

dijumpai pada bayi dan dan anak ialah hyperss&ivasi dan bertambahnya sekresi dari bronchus. Disamping itu anak menjadi lemah.

g. Fenasemid ( 1,4, .llj. ;)Fenasemid merupakan derivat asetilurea dan efek-*

tif. terhadap epilepsi tipe grand mal, p.etit mal dan psikomotor. Toksisitas yang ditimbulkan adalah nekro- sis hati, anemia aplastik dan neutrppenia, Efek samping yang ditimbulkan gangguan daluran cerna, gang - guan fungsi ginjal dan hati serta ruam kulit.

h.‘ Valproat ( 1J.L& 1,5 }Valproat terutama efektif terhadap epilepsi je

nis grand mal, petit mal dan psikomotor namun tidak efektif terhadap epilepsi fokal* Toksisitas mengenai

Lsaluran cerna, sistem syaraf pusat dan darah. Ada- pun gejalanya rasa mual, iritasi sa&uran cerna, kan- tuk, perdarahan dan ataksia, Pada percobaan ‘dengan hewan terungkap bahwa Valproat bersifat teratogenik.

4. Fenitoin

J C=0C6H5

----- .ir-H

5*5 - difenil hidantoin ( Fenitoin )Fenitoin disintesa pertama kali tahun 1908 oleh

Blitz, namun aktivitas anti konvulsi baru diilaporkan tahun 1938 oleh Merrit .dan Putnam ( 3>4>13>15 )•

R I M BFB R H JSTAK AA *

■ '■W YBRS1TAS A IR L A N D # * " ____ g U R A B A Y A _



10

Adanya penemuan ini merupakan tanda kemajuan dari pengobatan epilepsi. Karena obat ini mempunyai beberapa kelebihan dibanding anti epilepsi lain yaitu dapat digunakan untuk semua tipe epilepsi kecuali petit mal dan kejang demam, juga tidak mempunyai efek sad^si^sehingga merupakan anti epilepsi pilihan untuk anak sekolah dan orang dewasa dengan tipe grand mal ( )• Selainitu kadar tunak Fenitoin dapat dicapai dalam waktu yang relatif singkat yaitu 7 - 1 0 hari ( 1,3,^ 15 )•

Fenitoin merupakan asam organik lemah dengan pKa +9, sukar larut dalam air tetapi larut dalam media alkali* Kelarutan yang kecil ini disebabkan adanya gugus fenil pada posisi atom yang berstfat hidrofobik (if).

k• 1 • Hubunflan struktur dan aktivitas Fenitoin (L\)Bila ditinjau dari struktur Fenitoin maka terda-

pat hubungan antara struktur dengan aktivitas farmakologik. Adanya gugus fenil atau aromatik lain pada atom penting untuk khasiat anti konvulsi sedangkan gugus alkil bertalian dengan efek sedasi, si fat ini tidak terdapat pada Fenitoin ( 1,3>^ )•

Untuk dapat melihat adanya hubungan struktur dan aktivitas anti konvulsan maka digunakan model " Maximal Electro Shock" ( MES ) untuk serangan tonik klonik umum sedangkan model " Subcutanneous Metrazol"( scMet/Met/pentylen metrazol ) untuk eerangan petit mal. Obat-ofeatan yang efektif pada MES menunjukkan efektivitas obat terhadap serangan tonik-klonik umum



11

(grand mal) sedang obat yang efektif. terhadap Met menunjukkan efektivitas obat pada serangan petit mal(if).

Hubungan struktur dan aktivitas Fenitoin adalah sebagai berikut : (L+)

a. Pada cincin hidantoin paling sedikit harus ada satu gugus fenil yang terikat pada atom C^, untuk menunjukkan aktivitas MES. Fenitoin mempunyai dua gugus fenil yang terikat pada atom menunjukkan aktivitas MES yang maksimal.

b. Bila satu gugus fenil diganti dengan gugus alkil : rantai pendek akan memberikan aktivitas yang sedang untuk Met, dan sedikit penurunan pada aktivitas MES.

c. Penggantian dua gugus fenil pada Fenitoin dengan gugus isobutil menyebabkan aktivitas MES turun.Bila diganti dengan gugus alkil lainnya menyebabkan hilangnya aktivitas MES namun menaikkan akti- vj.tas Met dan jika diganti gugus benzil menyebah- kan hilangnya aktivitas MES.

d. Adanya substitusi gugus alkil rantai pendek akan meningkatkan aktivitas Met, terutama dengan gugus metil pada atom Nitrogen nomer satu dan tiga pada cincin hidantoin.

e* Semua substitusi pada gugus fenil dari Fenitoin a- kan menekan aktivitas MES.

f. Aktivitas MES dari Fenitoin menurun dengan :- substitusi H2 pada 0 menjadi “ difenilimidazo-



12

lidina-4-on ( doksenitoin ).- substitusi S pada 0 atom C~, menjadi 5>

2-thiohi dan toin. .- pemecahan hidrolitik cincin hidantoin menjadi 2-

amino-2,2 - difenilasetamida.g, Pada hasil hidrolisa Fenitoin yaitu asam 2,2-difenil

2-ureidoasetat d'an asam 2~amino~2,2-flifenilasetat serta hasil metabolit utama 5~phidrokei fenil -5- fenilhidantoin ini akan hilang sempurna aktivltas MES»ya.

h. Substitusi gugus hidroksi pada tidak menunjukkan aktivitas antikonvulsan pada binatang percobaan,

5* Farmakokinetik % 1 .Absorbsi

Fenitoin mempunyai kelarutan yang kecil sehingga■ mempengaruhi kecepatan absorbsi pada saluran pencernaan* Kecepatan absorbsi tergantung pada pH, pKa, dosis, kelarutan, formulasi, ca.ra pemberian dan ada tidaknjra makanan (16). Kecepatan absorbsi ini dapat diperbaiki dengan pemakaian bentuk garamnypf yang mudah larut dalam .air. Meskipun dalam lamMftf &kan mengendap .§§.bagai bentuk asamnya namun endapan ini terbagi halus dan absorbsinya sebaik sediaan mikrokristal dengan ukuran partikel yang telah diperkecil menunjukkan kecepatan melarut yang lebih baik sehingga absorbsinya lebih baik dibanding befl#stfk amorf Aaxx asamnya (4317)* Disamping^

j M i 1. flL ^ ip s r p o s t a k a a *

'WNlYERSiTAS A1RLAKKM4*_ S U R A B A Y A



13

itu adanya perubahan bahan pengisi dalam suatu for-, raulasi akan merapengaruhi bioavailabilitas Fenitoin. Suatu kasus di Australia ketika bahan pengisi sediaan kapsul Fenitoin diganti dari CaSO^ menjadi lakto-se, biaavailabilitas Fenitoin meningkat ( 4,16,19, 20).

f

Selain itu faktor fo^mulasi tecsebut, absorbs! obatdipengaruhi oleh sistem "delivery" yang pada bentuk sediaan kapsul Fenitoin bentuk "prompt" berbeda dari bentuk "extended". Bentuk "prompt" ini mempunyai sifat pelepasan obat secara cepat dan kadar puncak tercapai If - 3 jam setelah pemberian obat. Pada bentuk "extended" pelepasan obat terjadi perlahan dan kadar puncak tercapai 4 - 1 2 jam (8,10). Sediaan Fenitoin bentuk "extended" termasuk bentuk sediaan dengan pelepasan relatif terkendali, yang dirancang secara khusus dengan menggunakan beberapa bahan dan tehnik tertentu sehingga menghasilkan kadar obat tertentu yang dilepaskan dari sediaan dan pada waktu yang di- inginkan (9)*

Dari produk-produk fenitoin yang beredar di Indonesia telah dilakukan studi perbandingan kecepatan melarut dari 5 macam produk kapsul Fenitoin Na dan satu dalam bentuk racikan. Hasilnya menunjukkan bahw wa produk ( B,C,D,E,F ) memberikan > 85 % obat terlarut dalam waktu 60 menit, sedang produk ( A ) dalam waktu 60 menit memberikan 85 % obat terlarut *( Gambar I ). Dari hasil tersebut produk ( B,C,D,E,F )



14

memenuhi persyaratan kecepatan melarut USP XX untuk bentuk "prompt" namum produk ( A ) tidak memenuhi persyaratan USP XX untuk bentuk "prompt" dan "extended" (?).

Gambar 1 : Kurva % obat terlarut Vs waktu dari bebe-*}rapa produk kapsul Fenitoin '

*) Disalin, dengan ijin dari Suharjono (6) • Perban- dingan kecepatan dissolusi kapsul Fenitoin dalam bentuk racikan dan produk Fenitoin lain : 1986; 33*



15

• 5• 2*- DistribusiDi dalam tubuh, Fenitoin berikatan dengan protein

plasma 90 % terutama oleh albumin dan alpha globulin, hanya 10 % di dalam bentuk bebas (3,4,16). Fraksi yang tidak terikat dalam serum sebenarnya konstan pada konsentrasi terapi (4). Sedang pada penderita dengan kelainan fungsi ginjal dan hati menunjukkan adanya penurunan dalam pengikatan dengan protein plasma sehingga fraksi Fenitoin yang bebas lebih besar dari pada penderita dengan fungsi ginjal dan hati normal (1,4, . 1 3 , 1 6 ) .

5*3* Metabolisme dan ekskresiFenitoin dimetabolisme oleh enzim mikrosom hati

dengan hasil metabolit utama 5 (p-hidroksi fenil) - 5 fenilhidantoin 5 (p-HPPH) dan sejumlah kecil metabolit lain ( 4,13)15,16). Hasil metabolit lain dapat diidentifikasikan sebagai 5 (m-hidroksi fenil)- 5 fenil hidantoin (m-HPPH)., 5-(3,4 dihidroksi-1,5 siklo- hexadin-l-il)-5-fenilhidantoin ( dihi'drodiol ), asam difenil hidantoin ( DPAH ) serta derivat katekol dan N- glukuronida (4,32). Hasil metabolit ini sedikit atau tidak mempunyai aktivitas sebagai anti epilepsi (4,13,16). Sebagian besar hasil metabolisme yang ter- hidroksilasi berikatan dengan asam glukuronat dan sebagian diekskresi dalam urine (13,15,16), sebagian • lagi diekskresi melalui empedu dan mengalami sirkula- si enterohepatik (4)*



16

Pada penderita epilepsi, konsentrasi dalam serumyang berikatan p-HPPH + i - 1/20 tetapi akan mening-ikat sepuluh kali dengan kelainan fungsi ginjal (4). Sedangkan konsentrasi dalam serum yang tidak terkon- jugasi dengan p-HPPH hanya 2 - 6 % dan meningkat dua kali pada keadaan uremia (4). Sebagian besar dari dosis yang diberikan didapatkan kembali dalam urine sebagai bentuk hasil transformasi dan sebagian kecil dalam bentuk tidak berubah (4). Dengan meningkatnya dosis maka jumlah obat yang diekskresi sebagai metafeo - lit para hidroksi ' ak’an menurun. Hal ini disebabkan adanya kejenuhan metabolisme Fenitoin, sedang jumlah obat diekskresi dalam bentuk tidak berubah meningkat sesuai dengan meningkatnya konsentrasi dalam serum (4,13sl6). Dengan demikian metabolisme Fenitoin mengikuti farmakokinetik non linier. Adapun ciri-ciri farmakokinetik non linier adalah elimienasi obat tidak mengikuti order satu, hubungan peningkatan kadar obat dalam darah tidak proposional dan adanya proses kejenuhan yang dipengaruhi obat lain yang menggunakan sistem enzim yang sama ( 9>10 ).

Waktu paruh eliminasi ( t-J ) sangat menentukan lama kerja obat dalam tubuh. Makin panjang t-J- makin lama obat dieliminasi. Waktu paruh Fenitoin antar-‘individu 'bervariasi tergantung pada dosis d£n umur. Pada pemberian dengan dosis besar waktu paruhnya lebih panjang dari pada dosis rendah. Hal ini disebabkan



17

adanya kejenuhan sistem enzim metabolik (4,16). Pada anak-anak waktu paruhnya lebih pendek sehingga memerlukan pcmberian yang lebih sering (16).

6; Farmakologi6.1. Mekanisme ker.ia Fenitoin sebagai anti kejang

Sifat Fenitoin sebagai anti kejang didasarkan pada penghambatan penjalaran rangsang dari fokus ke bagian lain di otak. Berbagai mekanisme yang diperkirakan turut berperan dalam hal ini yaitu memulih- kan ekstabilitas yang meningkat secara abnormal menjadi normal, menstabilkan membran neuron, merangsang otak kecil yang berperan sebagai inhibitor pasca si- naps di kortex otak dan mencegah PTP ( Post Tetanic Potention ) (1,3S21). Stabilisasi membran dan pence- gahan PTP, secara langsung ataupun tidak merupakan hasil efek Fenitoin terhajkap perpindahan ion melin- tasi membran, dalam hal ini akan menggiatkan pompa Na neuron. Sehingga akan terjadi depresi prasinaps yang menggagalkan transminasi rangsang berulang dan serangan kejang dapat teratasi ( 1,21 ).

6.2. DosisDosis lazim sebagai anti kejang untuk orang dewa-

sa 100 mg/kali dan 400 mg/hari, dosis maksimum 400 mg/kali dan 800 mg/hari (22). Untuk anak-anak di- atas sama dengan 6 tahun diberikan 100 mg, tiga kali sehari sedang anak-anak di bawah 6 tahun diberikan 30 - 60 mg tiga kali sehari (23).



18

6.3* IndikasiPenggunaan Fenitoin ‘terutama untuk epilepsi tipe

grand mal, kegunaan yang lain untuk neuralgia-trige- minal, aritmia jantung, serta adanya kelainan ekstra piramidaliatrogenik ( 1,3 )•

6.4* Efek samping dan toksisitasPada umumnya semua obat anti kejang dapat menim-

bulkan efek samping dan gejala toksik. Gejala efek samping yang timbul dari penggunaan Fenitoin ialah reaksi alergik, lyphadenopathy, ruam morbiliform pa da k^'lit sedang pada saluran pencernaan timbul rasa mual dan muntah, pada gusi terjadi hiperplasia ginggiva. Juga dapat raenirabulkan kelainan darah, anemia megaloblastik dan osteomalacia. Akhir-akhir ini di- curigai adanya efek teratogenik pada janin (1,3,1^).

Gejala toksik yang ditimbulkan oleh Fenitoin berhubungan dengan dosis dan kadar obat dalam serum • Tanda-tanda ini tampak pada kadar lebih dari 20//g/ml akan terjadi nistagmus (15,24,28,29)• Sedang ataksia dan somnolence akan timbul pada kadara lebih dari 30//g/ml (3,13,24,28), pada kadar lebih dari 40 //s/ml dapat terjadi perubahan mental, drowsiness dan lethargy ( 13^32 ).

Efek samping dan toksisitas ini tergantung pada masing-masing individu dan efek ini dapat dihilangkan dengan cara penurunan dosis ( 23 ).



19

7. Pemantauan kadar Fenitoin dalam serumMeskipun Fenitoin merupakan pilihan utama untuk pen

derita epilepsi namun Fenitoin mempunyai beberapa ke- lemahan dalam penggunaannya. Adapun kelemahannya itu ialah obat ini mempunyai rentang terapeutik yang sem - pit dan adanya auto induksi serta kadar dalam ; serum yang bervariasi antar individu. Juga terdapat hubungan non linier antara dosis dan kadar dalam serum (4,5,6t'. 17,18). Oleh karena hal tersebut maka selama pemakaian Fenitoin diperlukan suatu pemantauan kadar.

Pemantauan kadar Fenitoin dalam serum perlu dila - kukan pada keadaan kegagalan terapi karena dosis tidak sesuai, frekwensi kejang meningkat pada penderita yang sebelumnya bebas dari serangan, kemungkinan disebabkan adanya ketidak patuhan dalam minum obat, metabolisme cepat atau malabsorption (24,25,35). Dapat juga terjadi pada status epilepticus dengan terapi Fenitoin, Pemantauan juga dilakukan bila ingin mengganti '. dengan anti konvulsi lain atau menerima obat anti i.konvrllBi lebih dari satu, serta diduga gejala intoksikasi, dalam fase pubertas, dan juga dalam keadaan hamil (4,16,17, 18,24).

Pemantauan kadar obat dalam serum mempunyai manfaatyang utama dalam pengaturan dosis yang sesuai sehingga mendapatkan efek terapi yang optimal. Selain itu dapat untuk mengetahui sebab-sebab kegagalan terapi dan kepatuhan penderita dalam minum obat (1,3,16,28), Kegunaan yang lain dari pengukuran kadar Fenitoin dalam serum



20

adalah meningkatkan kepatuhan penderita, dan hasil pemantauan yang sudah diperoleh dapat menunjang keberha- silan terapi yang diharapkan (6).

Pemantauan kadar Fenitoin dalam serum dilakukan setelah obat mencapai keadaan tunak dalam darah yaitu 7 - 1 0 hari setelah pemakaian obat dengan dosis tertentu (4,13,15,16,17,24). Waktu paruh Fenitoin cukup panjang yaitu + 22 jam, Oleh karena itu pemberian obat dalam dosis terbagi atau tunggal tidak akan mempengaruhi fluktuasi konsentrasi obat dalam serum (4 ,13>15>16).

Dengan mengetahui kadar obat dalam serum maka dapat diketahui apakah dosis yang diberikan telah sesuai a- tau belum. Bila dosis obat yang diberikan belum sesuai maka perlu dilakukan pengaturan dosis sehingga keadaan terapeutik tercapai (25). Pengaturan dosis yang lazim dilakukan di klinik ialah berdasarkan pengalaman kli- nife fllah respon' farmakologik yang ditimbulkan, Adapun cara tersebut ialah dengan menaikkan dosis secara perlahan sehingga keadaan kejang teratasi dan bila timbul gejala intoksikasi maka dosis obat diturunkan secara bertahap sampai keadaan terapeutik tercapai (6). Penye- suaian dosis dilakukan berdasarkan respon farmakologik yang ditimbulkan dan ditunggu sampai kadar obat dalam darah mencapai keadaan tunak (2 4).

Pada suatu terapi, ada kalanya Fenitoin tidak diberikan sebagai obat tunggal melainkan bersama-sama obat anti kejang lain. Pemberian bersama dengan obat anti kejang lain akan mempengaruhi kadar Fenitoin,



21

Mekanisme dari interaksi Fenitoin dengan obat kejang lain diduga sebagai berikut : (4,33)- Fenobarbital : dapat meningkatkan atau menurunkan kon-

sentrasi dalam serum secara inhibisi kompetitif metabolisme Fenitoin atau dengan melalui induksi enzjrm mikrosomal hati.

- Asam Valproate : dapat meningkatkan atau menurunkan konsentrasi Fenitoin dalam serum dengan mekanisme menurunkan ikatan Fenitoin dengan protein plasma sehingga kadar Fenitoin dalam darah rendah dan juga dapat menghambat metabolisme Fenitoin sehingga kadar Fenitoin bebas dalam darah meningkat dan terjadi intok - sikasi.

- Carbamazepin : menurunkan kadar Fenitoin dalam serum dengan menstimulasi metabolisme Fenitoin.

- Benzodiazepin ( Clonazepam, Diazepam ) : dapat mei - ; ningkatkan atau menurunkan kadar Fenitoin dalam darah dengan cara menghambat atau meningkatkan metabolisme Fenitoin.

Obat-obat lain yang sering digunakan bersama Fenitoin seperti Chloramphenicol, Isoniazid ( INH ), Disul- firam dan antasida. Adanya Chloramphenicol, Isoniazid dan Disulfiram akan menghambat metabolisme Fenitoin sehingga terjadi akumulasi Fenitoin dan timbul intoksi - kasi (4,16,33). Adanya antasida akan menurunkan absorbsi sehingga kadar Fenitoin dalam serum akan turun (16, 23).



22

8. Analisis kadar Fenitoin dalam serumAda beberapa metode yang dipakai untuk analisis ka

dar Fenitoin dalam cairan biologik antara lain Spektro- fotometri, Kromatografi Lapisan Tipis ( KLT ), kromatografi gas, High Pressure Liquid Chramatography ( HPLC ), Homogenous Enzym Immunoassay ( EMIT ) dan Radioimmuno - assay ( RIA ) (4,26,27,32).

Pada penel.itian ini analisis penetapan kadar Feni - toin dilakukan dengan metode RIA ( Radioimmunoassay ). Metode ini mempunyai beberapa kelebihan antara lain mempunyai spesifisitas dan kepekaannya tinggi dapat untuk menentukan kadar yang sangat kecil ( ng/ml ) dari hor - raon atau substansi lain dalam cairan biologis. Selain itu diperlukan hanya 10 J] 1 sampel serum, dan pengerjaan metode ihi sederhana dan cepat, tidak memerlukan eks - traksi, sehingga sangat sesuai untuk pemantauan kadar

■ obat dalam klinik ( 4,27,30 ).

8.1, Metode RadioimmunoassayPrinsip metode ini adalah kompetisi antara Feni -

toin dalam serum ( ligand atau analyte ) yang berpe -125ran sebagai antigen dan Fenitoin '1 (’’tracer atau

radioligand") yang berperan sebagai antigen yang dilabel radioaktif, terhadap sejumlah "binding sites" (reseptor) sebagai antibodi yang mengikat kedua antigem tersebut. Jumlah antibodi mempunyai kapasitas i- katan yang mendekati jumlah "tracer" yang ada, dan antibodi ini sifatnya spesifik ( 4>27 ). Adapun prinsip tersebut dapat digambarkan sebagai berikut :



23

K 4- oo t

K*KoOE

— *yang dicacah

— »antibib di

— >antigen

— >antigen yang dilabel

Tahap-tahap penentuan dengan metode ini dapat dilihat dan dijelaskan pada gambar berikut ini : (2 7)

o

:<?-a \ /

I.'c-3•0-3<*•2o-

0 0

l

&

!•—/>/'IM l

•ci.2■<»• a•o- 2 \ /

JIM.

Penambahan "radioligand" dan reseptor

Konsentrasi relatif dari ligand yang ditentukan

Inkubasi

Penambahan "reseptor precipitating'- reagent"Radioaktifitas relatif yang terikat pada reseptor

Inkubasi

Pemisahan fraksi terikat dan bebas 125dari Fenitoin yl dengan pemusingan

125Pencacahan Fenitoin yang terikat

Harga cacahan yang terekam

M I M E r a *P » S T A K A A *

•M TB R SITAS A IR L A B O ** '

I U R a b a v a



24

Untuk tercapainya reaksi yang sempurna, diperlu-diperlukan inkubasi. Selama inkubasi akan terjadi ke-seimbangan antara antigen dan antibodi* Setelah kese-

125imbangan terjadi, fraksi Fenitoin yang fcerikatpada reseptor.dipisahkan dengan jalan dipusingkan.

125Fenitoin •'i yang terikat pada reseptor akan melekatpada dasar fcabungr sedang yang bebas pada supernatan.

125Kemudian Fenitoin I yang melekat pada dasar tabung'dicacah pada pencacah gamma (27 )•; 125Prinsip pencacah gamma adalah I memancarkangelombang pendek dari sinar gamma dengan energi tinggi, sinar gamma dideteksi oleh "scintillation counter” yang berisi kristal Nal dengan Thallium sebagai akti- vator. Kristal berhubungan langsung dengan "photomul-e . tiflier" dan bila radiasi gaama dipancarkan membentur kristal Nal, maka akan dihasilkan energi eahaya foton. Energi ini ditangkap dan diperbesar oleh tabung "photomultiflier" dan diubah menjadi gelombang energi listrik sebanding den£an radioaktif bahan dalam sampel (22).

Pada perhitungan Radioimmunoassay dengan menggunakan pencacah gamma pada sediaan pereaksi spesifik, diperlukan pembuatan kurva kalibrasi. Kurva ini menun^- jukkan hubungan antara jumlah cacahan terhadap kadar larutan baku yang tersedia. Selanjutnya kurva kalibrasi dipakai untuk membaca cacahan sampel serum sehingga kadar Fenitoin dapat diketahui dengan cara intrapo- lasi (27).



ALAT, BAHAN DAN METODE PENELITIAN\

Alat- Gamma counter scintilition, Aloka, Thyronet- Vortex mixer, Sybrone Thremolyne- Refrigerator centrifuge, Damon/IEC Division, Needham

Heights Massachusetts, USA- Tabung polistiren 75 mm x 12 mm- Clinipette 20 Ul, 500 Ul, 1000 U1- Multipette ( Eppendorf repeater )- Yellow tips dan blue tips- Disposable syringej 5 ml Bahan- Phenytoin RIA kit ex Amersham dengan Lot 221, Code IM

IM 90, Expired date 21 Juni 1988, yang berisi :*a. Baku Fenitoin dalam serum manusia ( freeze dried ),

yang terdiri dari enam konsentrasi yaitu 0; 3*5 ;

9,5 ; 18,5 ; 42,5 ; 72,5 /'g/ml.-126b. Fenitoin yang dilabel dengan I, terdiri dari dua

vial masing-masing mengandung tidak lebih dari 3//cl ( 111 K Bq ) I dalam 30 ml larutan yang dista- bilkan dengan dapar fosfat. Larutan ini digunakansebagai "tracer".t

c. Pereaksi pengikat Fenitoin ( freeze dried ) sebanyak dua vial.

- Serbuk murni Fenitoin Natrium- Kapsul Fenitoin Natrium ( Prafa ).



'26

3. Metode penelitian3.1. Analisis! kualitati'f

Analisis kualitatif dilakukan untuk serbuk murnidan sediaan kapsul sesuai dengan Farmakope IndonesiaEdisi III :- dengan Asam Klormda encer- dengan larutan tembaga ( II ) sulfat piridin- dengan titik lebur- dengan serapan sinar infra merah.

3-2. Analisis kuantitatif ( 3& )- I si dari 20 kapsul dimasukkan ke gelas pi&la <dan

cangkang dicuci dengan alkohol selama 20 menit sam- bil diaduk.

i- Larutan alkohol idisaring, dimasukkan ke gelas. pia-

la yang berisi serbuk dan cangkang dicuci lagi dengan alkohol.

- Alkohol diuapkan di atas penangas air dan residu ditambahkan dengan 45 ml air suling dan 5 nil larutan NaOH 1 N.

- Kemudian larutan tersebut dipindah ke labu ukur 200 ml dan ditambah air suling sampai garis tanda,

- Jika larutan tampak keruh disaring, filtrat pertama *dibuang.

- Filtrat yang didapat, dipipet setara dengan 300 mg Fenitoin Na.

- Kemudian dimasukkan ke corong pisah dan ditambah 50 ml air suling serta 10 ml larutan HC1 10 %.



2.7

- Larutan tersebut diekstraksi dengan 100 ml eter sebanyak 4 kali.

- Hasil ekstraksi diuapkan dalam cawan porselin padg- suhu 105° C selama 4 jam. Berat Fenitoin Natrium yang dipipet = Berat residu X 1,087.

3.5.- 'Kriteria subyekSubyek pada penelitian ini adalah penderita epi

lepsi tipe grand mal, pria dan wanita dengan umur 14 - 30 tahun serta berat badan 30 - 60 kg. Pengobatan rawat jalan pada poliklinik bagian Syaraf RSUD Dr. Soetomo Surabaya. Penderita adalah mereka yang baru pertama kali menerima Fenitoin dan tidak menggunakan obat lain mengganggu metabolisme Fenitoin yaitu Fenilbutazon, Fenobarbital, Antikoagulan, Karbamazepin, Sulfonamida, Benzodiazepin, Kloramfenikol, Isoniazid dan Diazepam ( 15,16 ).

Respon terapeutik pendexita dikelompokkan dalam 3 keadaan :- sub-terapeutik ialah secara klinik masih menunjukkan

kejang tonik-klonik umum dan hilangnya kesadaran., - terapeutik ialah gejala sub-terapeutik sudah tera -

tasi.- toksik ialah adanya ataksia, nistagmus, penglihatan

ganda, sukar bicara dan tremor.Terhadap penderita tersebut dilakukan pemeriksaan

klinik faal hati yaitu SGOT ( Serum Glutamic Oxaloacetic Transaminase ) dan SGPT C Serum Glutamic Pyruvic



28

Transaminase ) serta faal ginjal yaitu Kreatinin serum dan BUN ( Blood Ureum Nitrogen ) dengan hasil dalam batas harga normal,

3.4. ProtokolPenderita sejumlah 10 orang yang memenuhi krite -

ria di atas diikut sertakan dalam penelitian ini. Penderita diberi obat dengan dosis atas dasar pengalaman klinik menurut keperluan penderita. Pemberian obat dalam jangka waktu sekurangnya 3 minggu, dan setelah itu dilakukan pengamatan respon klinik yang terjadi. Bila penderita selama dosis tersebut mengalami kejang lebih dari satu kali maka penderita digolongkan sub-terapeutik. Dan pengobatan dilanjutkan dengan kenaikkan dosis 30 - 100 mg. Sekurang-kurangnya tiga minggu setelah peningkatan dosis, perkembangan klinik diamati lagi. Bila kejang sudah teratasi maka penderita digolongkan terapeutik dan pengobatan dilanjutkan dengan dosis tetap. Bila terjadi intoksika^i maka penderita digolongkan toksik dan dilakukan penurunan dosis secara perlahan sampai dicapai keadaan terapeutik.

Pengambilan sampel sebanyak 5 ml pada keadaan tunak yaitu setelah tiga minggu untuk keadaan sub-terapeutik dan terapeutik sedang untuk kelomplok toksik. diambil saat terjadi intoksikasi. Waktu pengambilan sampel 2-/+ jam setelah obat diminum (10). Serum dipi - sahkan dan disirapan pada -20°C sampai dilakukan penetapan kadar secara RIA (4jl5).



29

3* 5« Taha-oan ker.ia3.5.1. Bahan

a. Serum penderitaSerum diambil dari penyimpanan, didiamkan pacia suhu kamar dan dihomogenkan dengan "vortex mixer", sebelum dilakukan jaiiali/ais

b. Larutan baku Fenitoin- Larutan baku yang telah tersedia ditambah 500//1

aqua bidestilata dan dihomogenkan secara perlahan dengan dikocok.

- Pereaksi pengikat FenitoinMasing-masing pereaksi pengikat dilarutkan dengan 2? + 1 ml dan keduanya dicampue homogen#

- Fenitoin yang dilabelIsi kedua vial sediaan dicampur homogen dalam gelas piala.

3.5*2. Pembuatan kurva kalibrasi- Disiapkan tabung untuk keenam larutan . baku

dan tabung untuk "Total Count" ( TC ) dan untuk ikatan non spesifik ( NSB ).

- Dari larutan baku dengan konsentrasi (0; 3,5 ;9,5 ; 18,5 ; 42,5 ; 72,5^ g/ml ) dipipet masing- masing 10 1, dimasukkan ke tabung, Untuk tabung NSB dipipet larutan baku.- .Fenitoim 0 /'g/ml dan untuk tabung TC tanpa larutan baku.

- Tiap-tiap tabung di atas ditambahkan 500 JJ1 larutan Fenitoin yang dilabel 12^I.



30

- Ke dalam tiap-tiap larutan baku di atas ( kecuali

ikat Fenitoin.- Semua isi tabung kecuali tabung TC dihomogenkan dan

- Tabung-tabung dipusingkan dalam "Refrigerated centrifuge" ( kecuali tabung TC ) selama 30 menit.Pada akhir pemusingan penghentian dilakukan secara perlahan-lahan.

- Tabung-tabung kecuali tabung TC dipindah ke rak de- kantasi dengan goncangan seminimal mungkin.

- Tabung-tabung berisi larutan di atas dibalik secara perlahan-lahan agar filtr.at mengalir dan meninggal- kan endapan di dasar tabung.

- Tiap-tiap tabung dengan endapan di dasarnya dicacah pada pencacah gamma selama satu menit.

3^5.3* Kontrol- Sebagai kontrol digunakan larutan ̂baku 3»5 5,

18,5 ; 72,5/g/ml.- Kontrol dilakukan pada awal dan pada akhir sampel.- Masing-masing larutan baku tereebutL dipipet

- Selanjutnya pengerjaannya sama seperti pembuatan kurva kalibrasi.

3.5.if. Penentuan kadar Fenitoin dalam sampel serum- Dari masing-masing sampel serum dipipet 10 j) 1

dan dimasukkan ke tabung*

TC ) ditambahkan larutan pereaksi peng-

diinkubasi selama 1 jam pada suhu 15°C - 30°C

10 /a.



31

- Selanjutnya pengerjaannya sama seperti kurva ka-- librasi.

3.6. Pengolahan data3.6*1. Kurva kalibrasi

- Sebelum pencacahan "tracer", terlebih dahulu dilakukan pengecekan "back ground" dengan rnemakai tabung polistiren kosong,

- Harga Count Per Minute ( CPM ) dari masing-masing larutan baku dikoreksi dengan harga CPM dari NSB.'

- Kemudian dilakukan perhitungan harga % terikat untuk larutan baku lainnya.

- Dibuat kurva kalibrasi antara kadar Fenitoin dalam serum ( fJg/ml ) terhadap % terikat.

3.6.2. Kontrol- Harga CPM dari masing-masing kontrol dilakukan ko-

reksi terhadap CPM, NSB.- Masing-masing kontrol dihitung dengan harga % ter

ikat.- Kemudian harga kesetarasn dihitung dengan memban-

dingkan % terikat kontrol I dengan % terikat kontrol II.

3.6*3* Kadar Fenitoin dalam serum- Dilakukan harga koreksi dari harga CPM masing-ma

sing sampel terhadap harga CPM dari NSB.- Dari masing-masing sampel dihitung % terikat.- Kemudian dihitung kesetaraan % terikat dari hasil



32

pcrkalian % terikat dengan harga kesetaraan.- Dengan mengintrapolasikan harga kesetaraan % ter

ikat pada kurva kalibrasi akan didapatkan kadar Fenitoin dalam sampel serum.



BAB IV HASIL PENELITIAN

Dari i^an^litian yang telah dilakukan diperoleh hasil sebagai berikut :1- Analisis kualitatif

Analisis kualitatif Fenitoin dilakukan untuk serbuk murni dan sediaan kapsul sesuai dengan Farmakope Indonesia Edisi III dan hasil positif. untuk reaksi berikut,- larutan s§mpel dalam aqua dengan Asam Klorida encer

terjadi endapan putih*- larutan sampel dalam larutan piridin ditambah larut

an tembaga ( II ■) sulfat piridin tenbentuk endapan biru,

- Hasil ekstraksi berupa serbuk putih dengan titik lebur 295°C - 297°C.

- Serapan sinar infra merah dari serbuk hasil ekstraksi dalam dispersi KBr. Hasil pada Lampiran IV dan V

2. Analisisl.kuantitatifDengan persamaan berikut diperoleh kadar Fenitoin

dalam sediaan kapsul :

■ % kadar = a x 1 iQ8?x 100 %b

jyjn&Pj?- a = berat Fenitoin dari hasil ekstraksi b = berat Fenitoin Natrium dalam kapsul

33



34

Kadar Fenitoin Natrium rata-rata = 101,30 + 3>82 % yang masih memenuhi ketentuan Farmakope Indonesia Edisi III.

J3#' Kurva' kalibrasiKurva ini dibuat untuk suatu rangkaian analisis

dan dikerjakan sekaligus bersamaan dengan penetapan kadar Fenitoin dalam sampel serum. Kurva kalibrasi dibuat dari enam macam larutan baku dengan hasil pengamatan seperti tercantum pada Tabel I dan Gambar kurva kalibrasi dapat dilihat jlada Gambar I dengan perssu maan Y = ^1’,07I6_X + 0,8344. ..

4• Penetapan kadar Fenitoin dalam serumMelalui perhitungan seperti pada Tabel II yang kemu

mudian diintrapolasikan ke dalam kurva kalibrasi Gambar I maka didapat kadar Fenitoin dalam serum seperti tertera pada Tabel III. Adapun cara perhitungan dapat dilihat pada Lampiran III,

Nilai kesetaraan % terikat diperoleh dari perkali- an % terikat yang diperoleh dari pencacahan gamma dengan harga kesetaraan. Harga kesetaraan tersebut diperoleh dengan membandingkan % terikat kontrol I dengan % terikat kontrol II. Dan cara perhitungan’ harga kesetaraan dapat dilihat pada Lampiran III.Hubungan antara dosis, keadaan klinis pendei*±ta dan

kadar Fenitoin dalam sampel serum tertera pada Tabel III.



35

TABEL INILAI % TERIKAT LARUTAN KALIBRASI FENITOIN

UNTUK'PENETAPAN KURVA KALIBRASI

Tabung DuplikatCPM

Rata-rata CPM

Hasil CPM Netto

% terikat Kadar (p g/ml)

TC

NSB

1.

2.

3.

4.

5.

6.

3563735604

350422

34712

343752304724184122161195775757282

4111401328163030

35620*, 5

386

34543.5

23615.5

12086.5

7428,5

4062

2923

34157.5

23229.5

11700.5

7042,5

3676

2537

100

68,01

34,25

20 ,62

10,76

7,43

0

3.5

9.5

18.5

42.5

72.5

Kurva kalibrasi seperti gambar I.



36

Gambar 1. Garis regresi kurva kalibrasiLogit fraksi terikat (t) vs log Kadar Fenitoina (ug/ml)



37

TABEL IINILAI % TERIKAT FENITOIN DALAM SERUM DAN KADAR YANG DIPEROLEH SETELAH DIINTRAPOLA*

SIKAN PADA KURVA KALIBRASI

SUBYEK■

CPM HASIL CPM NETTO

% TERIKAT KESETARAAN % TERIKAT

't -

KADAR (/J Ig/ml )

AGS1 23472 23086 ’ 67,59 68,26 2,94a g s2 6824 6438 18,85 19,04 23,19ap r-l 12732 12346 36,14 36,50 10,07a p r2 6024 5638 16,50 16,66 26,98WINX 16200 15814 46,30 46,76 6,78WIN2 13502 13H6 38,40 38,78 9,20

DIK1 30265 29879 87,47 88,34 0,91DIK2 12983 12597 36,88 37,25 9,76

M0C1 832^ 7940 23,24 23,47 18,10m o c2 4666 4280 12,53 12,66 36,42TUTX 4240 3854 11,28 11,39 40,74t u t2 4448 4062 11,89 12,01 38,52YtiLx 16161 15775 46,18 4 6,64 6,81YUL2 7100 6714 19 , 6 6 19,86 22,08MAH-̂ 21961 21575 63,16 63,79 3,54m a h 2 10954 10568 30,94 31,25 12,54GATX 4743 4357 12,76 12,89 35,73GAT2 3721 3335 9,76 9,86 47,37GAT3 3921 3535 10,35 10,45 44,59SDTX 14062 13676 40,04 40,44 8,62SDT~

............

6551i

6165 18,05 18,23 24,37



TABEL IIIHUBONGAN ANTA2A DOSIS, KEADAAN KLINIS PENDERI^A'-DAlt KADAR FENITOIN -JpALAM SERUM

■SUBYES P^W UMUR BB Dt

OSTS T DOSIS TT • Dosis t t t ! KADAR TTINAK KEADAAN KT.TNTS 1

(th ) (k g ) mR/24.1an: nK/24.1am 'mK/kR/2Mam mR/24.1aa me/kff/241am SUBTERAPEUTIK TERAPEUTIK TOKSIK i; I I I I I

AGS P 20 50 250 5,00 275 5,50 2,94 23,19

'

Subterapeutik: kejang waktu tiduri kali/bulan, hilang kesadaran 1 kali

Terapeutik gejala sub-terapeutik sudah teratasi

-

APR W 14 31 300 9,68 375 12,10 10,07. 26,98 — Subterapeutik: kejang 3 kali/bulan Terapeutik : gejala sib-terapeutik sudah teratasi

WIN W 15 37 200 5,41 250 6,76 6,78 9,20 Subterapeutik: kejang 2 kali/bulan Terapeutik : geoaia sub-terapeutik sudah teratasi

DIK P 18 38 200 5,26 250 6,58 0,91 9,77 • Subterapeutik: kejang 2 kali/3 bulan Terapeutik : gejala sub-terapeutik sudah teratasi

-

KOC P 17 55 300 5,45 350 6,36'

18,10 36,42 — Subterapeutik: seperti akan kejang Terapeutik : gejala sub-terapeutik sudah teratasi

-

TUT w 18 37 375 10,14 325 8,78 •* — 38,52 40,74t loksik : : ataksia,oistagnus Terapeutik : gejala toksik sudah teratasi

-

YUL p 14 50 200 4,00 300 6,00 6,81 22,08 — Subterapeutik: kejang 2 kali/bulan Terapeutik : gejala sub-terapeutik sudah teratasi

-

MAH p lb 42 200 4,76 250 5,95 3,54 12,54 Subterapeutik: kejang 1 kali/bulan Terapeutik : gejala sub-terapeutik sudah teratasi

-

GAT p 21 50 325 6,50 350 7,00 340 r*. v 6,80 35,73 44,59 47,37' Subterapeutik: kejang 1 kali/bulan Toksik : ataksia, nistagmus Terapeutik: gejala toksik sudqh teratasi

SDT p 16 42 375 8,93 400 9,52 8 , 6 2 24,37 Subterapeutik: kejang 1 kali/bulan Terapeutik

• 1 '■

: gejala sub-terapeutik sudah teratasi

—

38



BAB V : PEMBAHASAN

Pada 10 penderita epilepsi tipe grand mal di poli Neu-i

rologi RSUD Dr. Soetomo ( lihat Tabel III ) dengan pembe - rian obat suatu produk PMDN dilakukan pemantauan kadar tunak Fenitoin. Dari jumlah pengambilan 21 sampel serum, ternyata dijumpai 9 kasus sub-terapeutik, 10 kasus terapeutik dan 2 kasus toksik. Dari hasil penelitian ini diperoleh rentang kadar sub-terapeutik 0,91 - 35,73 ̂ /g/ml, rentang kadar terapeutik 9*20 - 44,59//s/ml dan kadar toksik >40 ̂ g/ml.

*

Rentang kadar yang diperoleh pada penelitian ini bervariasi sangat lebar dan hasil ini jauh berbeda dari peneliti terdahulu dengan produk innovator pada penderita epilepsi tipe grand mal di tempat yang sama, diperoleh rentang yang sempit (11). Dengan produk innovator tersebut dihasilkan rentang sub-terapeutik 0,63 - 8,75/^g/ml, rentang kadar terapeutik 6 - 20,75/^g/ml dan rentang kadar toksik 24,13 - 50,25//g/ml (11). Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan pada orang Barat menunjukkan bahwa rentang terapeutik 10 - 20p g/ml (1,4,13,15,16), rentang terapeutik ini sesuai dengan rentang yang diperoleh produk innovator. Adanya perbedaan rentang kadar. antara produk innovator dengan produk dalam negeri ini kemungkinan disebabkan kapsul Fenitoin Na produk dalam negeri cepat terlarut. Hal tersebut didasarkan pada uji kecepatan melarut Fenitoin, dimana 50 % obat terla- produk innovator memerlukan waktu + 2 0 - 2 5 menit sedans produk dalam negeri memerlukan waktu + 5 — 10 menit (6).

39



40

Karina obat c-fipat terlarut maka keseluruhan obat akan cepat diabsorbsi dan sogera rnenimbulkan efek. Dan sncara teo- ri.tik waktu untuk mencapai kadar1 maksimurn obat * bentuk ' "extended" 4 - 12 jam sedang bentuk "prompt" li - 3 jam (10). Dengan kecepatan melarut dan absorbsi yang cepat dari produk dalam negeri ini rnenimbulkan suatu keadaan naik tu- runnya kadar obat dalam darah yang seharusnya tidak boleh terjadi dalam terapi dengan Fenitoin. Sedang produk innovator pelopacan obat nocara lambat dan teratur sehingga kadar obat dalam tubuh dapat dipertahankan konstan. Juga dari,penelitian studi profil kinetika antara produk innovator dej- ngan salah satu produk dalam negeri diperoleh gambaran pro- • fil yang’berbeda.'-Produk innovator, memberikan profil peningkatan kadar obat g ocara perlahan daiam waktu yang cukup panjang yaitu antara 8 - 3 2 jam. Sedang produk dalam negeri memberikan profil peningkatan dan penurunan kadar yang cepat} kadar puncak tercapai 7 - 8 jam setelah pemberian obat dan kemudian turun ( Gambar 3 )• Dengan adanya gambaran tersebut maka rentang kadar tunak yang dihasilkan oleh produk innovator berbeda dengan produk dalam negeri. Tetapi data ini ten- tunya masih membutuhkan penelitian lebih lanjut dengan pengambilan sampel yang lebih banyak untuk memperoleh gambaran kadar tunak produk dalam negeri ini. memang berbeda dengan produk innovator.

Dengan adanya perbedaan kecepatan melarut dan studi profil kinetika dosis tunggal maka secara "superposition" per- 'bedaan dosis tunggal akan berpengaruh pada dosis ganda, Se-



lain itu Fenitoin juga bersifat kinetika non linier dimana dengan perubahan dosis yang keci'J. akan menyebabkan perubahan kadar yang sangat besar ( keadaan sub-terapeutik menjadi keadaan toksik ) (13,16,17). Perubahan yang besar ini tidak dijumpai pada produk innovator, oleh karena itu selama pemakaian produk dalam negeri memerlukan pemantauan yang lebih sering atau merupakan suatu keharusan mengingat kadar yang dihasilkan tidak pienentu. Oleh karena itu seharusnya produser dari sediaan Fenitoin yang beredar di Indonesia me- laporkan &ecaro jelas spesifikasi formula yang djhasilk^n dan data bioavailabilitasnya. Hal ini sangat menentukan kadar tunak yang dihasilkan dan seharusnya menghasilkan kadar aman secara terapeutik.

Meskipun pada analisis kadar Fenitoin dalam serum, ka<-. dar obat di.tentukah bentuk totalnya( bebas dan terikat ) yang reHatif kurang tepat apabila dikaitkan dengan efek;. yang ditimbulkan. Karena efek tersebut lebih ditunjukkan dalam bentuk bebas namun cara ini masih digunakan mengingat pemisahan bentuk bebas sangat komplex, mahal dan sulit untuk penantuan terapi (16,32). Penentuan bentuk total secara RIA (1 2^1 ) ternyata juga menghasilkan perhitungan yang cukup teliti dengan rr.enggunakan kurva logit log. (27).



42

Gambar 3 : Profil kadar rata-rata Fenitoin dalam serum (us/ml), vs waktu (jam) pada pemakaian kapsul produfc A ( • ) dan produk R (a) .dari lima

*}r.ubyeU 1

* ) Dir.alin, dengan ijin dari YJon^kai Danny I (40). Pro-

fil Farmakokinetika Fenitoin pemakaian scdiaan kan - cul docis tunggal. pada subyek normal: 1988; 50.



KESIMPULAN

Dari hasil penelitian terhadap 10 penderita epilepsitipe grand mal dengan terapi kapsul Fenitoin Na produk dalam negeri dapat disimpulhan sebagai berikut :1. Rentang kadar yang didapat bervariasi sangat lebar pada

masing-masing kelompok respon :- sub-terapeutik : 0,93 - 35,73 Jl/e/ral.- terapeutik : 9,20 - 44,59 //g/ml.- toksik : y 40 ̂ g/ml.

2. Adanya hubungan antara kenaikkan dosis dengan kenaikkan kadar obat dalam tubuh dan respon yang ditimbulkan.



SARAN-SARAN.BAB VII

1* Perlu dilakukan penentuan bioavailabilitas pada produk Fenitoin yang beredar.

2. Perlu dilakukan pemantauan kadar tunak pada setiap perubahan dosis dengan pemakaian produk PMDN mengingat o- bat dilepaskan cepat.



RINGKASAN

Fenitoin merupakan obat pilihan untuk epilepsi tipe grand mal dan obat ini tidak memberikan efek sedasi. Dalam pemakaiannya diperlukan suatu pemantauan karena obat ini ̂mempunyai ki-netika non linier juga mempunyai rentang tera**.- peutik yang sempit yaitu 10 - 20/^g/ml. Menurut USP XX'80 terdapat dua bentuk sediaan kapsul Fenitoin yaitu bentuk "prompt” dan "extended”. Kedua bentuk ini berbeda dalam kecepatan melarutnya. Dan menurut keterangan dari pabriky-4-- yalah satu produk kapsu] Fenitoin yang beredar di Indonesia adalah bentuk "prompt”,

Telah dilakukan pemantauan kadar Fenitoin dalam serum dengan produk dalam negeri pada 10 penderita epilepsi tipe grand mal, pria dan wanita dengan usia 1 4 - 30 tahun dan berat badan 30 - 60 kg. Pada pemantauan ini diberikan dosis sesuai dengan pengalaman klinik oleh dokter ahli Neurologi di RSUD Dr. Soetomo Surabaya. Pemberian obat selama tiga minggu yang diikuti pengamatan klinik, Bila masih tifabul kejang maka dosis dinaikkan 50 - 100 mg, kemudian dilakukan pengamatan lagi. Bila terjadi keadaan toksik maka dosis diturunkan secara perlahan sampai didapat keadaan terapeutik, Sampel darah diambil dari vena cubiti sebanyak 5 ml pada keadaan tunak, 2 - 4 jam sesudah obat diminum. Sampel darah tersebut dipisahkan serumnya dan disimpan pada suhu -20°C sampai dilakukan penetapan kadar dengan metode RIA.

Hasil penelitian' ini menunjukkan bahwa dari 10 penderi-

k5



46

ta yang ikut serta dijumpai 9 kasus sub-terapeutik, 10 kasus terapeutik dan 2 kasus toksik. Rentang kadar yang didapat untuk sub-terapeutik 0 , 9 1 - 35,73/^g/ml, rentang kadar terapeutik 9)20 - 44,39 y^g/ml dan rentang kadar toksik J 40 ^g/ml. Dari penelitian ini dapat disimpulkan bahwa

dengan penggunaan produk dalam negeri didapat rentang kadar yang bervariusi pada masing-masing respon.

Oleh karena Fenitoin masih sering digunakan dan banyak- nya produk yang beredar dengan harga yang bervariasi maka pemantauan kadar selama penggunaan Fenitoin mutlak perlu dilakukan.



_ .BAB VIII DAFTAR PUSTAKA

1. Gan S. Ed. Farmakologi dan Terapi. Edisi 2. Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia,Jakarta, 1980 : 115 - 120

2. Candra B. Beberapa segi dari Epilepsi, 1986 : 2 - ’233. Goodman LS Gilman. The Pharmacological Basic of Thera

peutics. 6th ed. London : The Macmillan, 1970 : 448 - 4554. Frey HH, Janz D.Ed. Handboak 0$ Experimental Pharmacology :

Antiepileptic Drugs. Berlin-Heidelberg*New York-Tokyo : Springer verlag, 1985

5* Informasi Spesialite Obat ( ISO ) Indonesia. ISFI, Edisi Farmakoterapi. vol 10. Jakafcta, 1988 : 168

6. Suharjono, Perbandingan kecepatan dissolusi kapsul Fenitoin dalam bentuk racikan dan produk Fenitoin lain. Lem- baga Penelitian Universitas Airlangga. 1985

7. United States Pharmacopoeia. 20tla Ed. United States Pharmacopoeial Convention Inc, 1980 : 620 -622

8. Vinod P. Shah, Vadlamani K. Pras&d. In Vitro-In Vivo Bioequivalence Standard for 100 mg Phenytoin Sodium Capsules. J. Pharmaceutical Sciences, 1983 ; 72: 309 - 310

9. Shargel Leon. Applied Biopharmacemtics and Pharmacokine* .ncltics. 2 Ed. Appleton-Century-Crofts/Norwalk, Conneticut,

1985.10. Gibaldi Milo. Biopharmaceutics and Clinical Pharmacokine-* •

rdti*cs. 3 Ed. Lea and Febiger. Philadelphia, 198411. Suhud Farida* Pemantauan Kadar Fenitoin Dalam Serum Bebe

rapa Penderita Epilepsi Tipe Grand Mal di RSUD Dr. SoetomoSurabaya. Skripsi. Universitag Airlangga. Surabaya.1986

47



12. Ruslan Helda. Penantuan Tetapan Michaelis-Menten Feni-4

toin atas dasar pemantauan kadar dalam serum pada beberapa penderita epilepsi tipe grand mal di RSUD Dr* Soet6mo Surabaya. Skripsi. Universitas Airlangga. Sura

baya.1987.13* Laidlaw J, Richens A. A textbook of Epilepsy. Second Ed,

Edinburg-London-Melbourne-New York. 1982.14. Sastrodiwirjo 5, Harahap TP, Kiasumoputro S. Neurologi,

Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia, 1980: 28-47.15. Bruni J. Antiepileptic drugs. Modern Medicine of Asia,

1981; 17: 25-33.16. Richens A. Clinical pharmacokinetics of Phenytoin. Clini

cal Pharmacokinetics,1979; 4: 153-169.17. De Wolff FA, Breimer DD. Therapeutic Relevance of Drug

Assay. Leiden: Leiden University Press,1979: 30-41*18. Atkinson AJ, Shaw JM. Pharmacokinetics study ofi patient

with Diphenylhydantoin toxicity. Clinical Pharmacology

and Therapeutics,1973; 14: 521-527.19. Tyrer JH. Outbreak of Anticonvulsant Intoxication in̂ ian

Australia city. British Medical Journal, 1970;4: 271-273*20. Gibaldi M. Bioavailability of Phenytoin; Clinical Phar

macokinetics and Thrapeutic Implications. Handbook of. Clinical Pharmacokinetics. ADIS Health Science,1983:24-38.

r

21. Yaari Y, Selzer ME, Pincus JH. Phenytoin : Mechanism of its Anticonvulsant Action. Annals of Neurology,1986;20: 171-184*

22. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Farmakope Indonesia. Edisi III. Jakarta.1979: 492-494*

48ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga


49

23. The Pharmaceutical Codex. Eleventh Ed. Londoh: The Pharmaceutical Press, 1979: 697-700.

24«/Kutt H, Penry JK. Usefullness of blood levels of Antiepileptic drugs. Areh Neurol, 1974; : 283-288.

23. Penry JK, NEwmark ME. The use of Antiepileptic drugs. Annals of Internal Medicine. 1979; 90: 207-218.

26. Spiehler V, Sun L, Miyada DS, et al. Radioimmunoassay Enzym Immunoassay-Spectribphotometry anu Gas Liquid Chromatography compared foe determination of Phenobarbital and Diphenylhydantoin. Clinical Chemistry, 1976; 22:

. 749-733. ♦

27. Thorell JI, Larson SM, Radioimmunoassay and Related Techniques Metodology and Clinical Application. Saint Louis: The CV Mosby Company, 1978: 3-103,242.

28. Bernard WK. Lau. Serum Phenytoin levels in Chinese epileptic inpatients, Modern Medicine of Asia, 1981; 17:

35-39.j 1

29. Gill GV. Modern drug Therapy : Epilepsy . Medicine Digest Asia. 1985; 3: 23-30/

30. Orme ML, Borga 0, Cook CE, Sjoqvist F. Measurement of Di- phenylhidantoin in 0,1 ml plasma samples : Gas Chromatography and Radioimmunoassay compared. Clinical Chemistry, 1976; 22: 246-2^8.

31. Shah VP, Kathryn EO. Comparison of Ultraviolet and Liquid Chromatography Methods for Dissolution Testing of Sodium Phenytoin Capbules. Journal of Pharmaceutical Sciences,

1986; 75/H: 1113-1115-



50

32. Woodbury DM, J Kiffin Penry, CE. Pippenger. Antiepileptic Drugs. Second Edition. Heip York: Raven Press, 1982:

177- 281.

33. Hansten, PhilipBD. Drug Interactions, Secbnd Edition.

Philadelphia: Lea & Febiger, 1973 : 52-65*34. Higuchi T. Einar BH. Pharmaceutical Analysis. New York:

Interscience Publisher, 1961: 207*35. Kutt H. Some causes of Ineffectiveness of Diphenylhydan-

toin. Arch. Neurology, 1966; 14: 489-492.36. Ritschel WA. Handbook of Basic Pharmacokinetics. 1 Ed.

Drug Intelligence Publications, Inc. Hamilton, 1976;

343-353, 369.37* Lund L. Anticonvulsant affect of Diphenylhydantcin rela

tive to plasma levels. Arch Neurol, 1'974; 31 • 289-291*38, De'‘ Wolfi* FA, Vermeij P, Ferrari MD, Buruma OJS, Brei-

mer DD. Impairment of Phenytoin para-hydrmxylation as a cause of severe intoxication. Therapeutic Drug Monitoring, 1983; 5: 213-215.

"391 Curless RG, Walson PD, Carter DE. Phenytoin kinetics in Children. Neurology, 1976; 26: 715-720.

40, Wongkai Danny I. Studi Profil Farmakokinetika’Fenitoftma Pemakaian sediaan kapsul dosis tunggal pada subye&, „

normal, :Uftlv.ersi<tas’: Ai-rl’anggd^ Surakayst; X98’&r



51

LAMPIRAN I PERHITUNGAN REGRESI KURVA KALIBRASI

Kadar (C)(/{J g/ml )

log C % terikat tlQS 1-*

3,5 0,5441 68,01 .0,6801 0,3276

9,5 0,9777 34,25 0,3425 -0,2832

18,5 1,2672 20,62 0,2062 -0,585442,5 1,6284 10,76 0,1076 -0,918672,5 1,8603 7,43 0,0743 -1,0953

Untuk perhitungan persamaan regresi menggunakan kalkula- tor fx- 3600 P, sebagai X = log C dan Y- = log Maka didapat hasil sebagai berikut :

Koefisien relasi ( r ) = - 0,9926> 0,959 ( r lampiran untuk p 0,01 , DF = 3 )•

B = - 1,0716 A = 0,8344

Jadi persamaan garis regresi kurva kalibrasi :Y = BX + AY = - 1,0716 X + 0,8344



52

LAMPIRAN II

PERHITUNGAN HARGA % TERIKAT

Tabung I ( tabel I ) dengan harga CPM rata-rata 34543,5dan harga CPM rata»rata dari NSB = 386 , maka hasil nettoCPM adalah 34157,5- Nilai CPM ini merupakan 100 % terikat.Contoh : Tabung III dengan harga CPM rata-rata 12086,5

akan mempunyai harga % terikat :hasil CPM netto tabung X lnn ^ hasil CPM netto tabung I x *

= 12086|5 - ?86 x 10Q34157,5

= 34,25 % .-



53

I LAMPIRAN IIIPERHITUNGAN KESETARAAN % TERIKAT

% terikat kontrol I = 68,12 %% terikat kontrol II = 67,33 %

Maka untuk kesetaraan % terikat sampel dikalikan dengan 1,01.

Persamaan garis regresi logit - log kurva kalibrasi :

Contoh subyek APR^ dengan % kesetaraan' terikat adala&

Y = - 1,0716 X + 0,8344- 0,2405=,- 1,0716 X + 0,8344

x = - 0,2405 - 0,8344 - 1,0716

X = 1,003 = log CC ( kadar Fenitoin dalam serum ) = 10,07/^g/ml

Kesetaraan = --.a 12 _ 67,33

II PERHITUNGAN KADAR FENITOIN DALAM SERUM

Y = - 1,0716 X + 0,8344

36,50Y = log —

1-t



3k

LAMPIRAN IV

Hasil Serapan sinar Infra Merah Serbuk Murni Fenitoin Natrium yang didispersikan dalam KBr P.

i jL>t SPEKTRUM f-Jf-J. .

o

3?C*V

2800'

2«i0*)

2000

16D0

iOj'J

14V0

1200

ICwO



55

LAMPIRAN VHasil Serapan Sinar Infra Merah dari Ekstraksi 'Fenitoin Natrium yang didispersikan dalam KBV P.

,) NOISSIWSNVU1 4(K)0

3600

3200

2800

2*00

2000

1800

1600

1400

1200

1000

800

600

400

WEILEN

ZAHL (CM

'1)



56

LAMPIRAN VIHarga-harga koefisien korelasi (r) pada derajat kepercayaan 5 % dan 1 % (36).

DEGREES OP FREEDOM (DP)

5PERCEHT PERCEKT DEGREES OF FREEDOM (DP) 5PERCEET

1PERCEBT

1 .997 1.0 0 0 24 .338 .4962 .950 .990 25 .381 ,4873 .676 .959 26 .374 .4764 .811 .917 27 .367 .4705 .754 .874 28 .361 .463.6 .707 .834 29 .355 .4567 .6 6 6 .798 30 .349 .4498 .632 .765 35 .325 .4189 .602 .735 40 .304 .393

10 ,576 .708 45 .288 .37211 .553 .684 50 .273 .35412 .532 .6 6 1 60 .250 .32513 .514 .641 70 .232 .30214 .497 .623 60 .217 .28315 .482 .606 90 • 205 .26716 .468 .590 100 ■ .195 .25417 .456 .575 125 .174 .22818 .444 .561 150 .159 .20819 .433 .549 200 .138 .18120 .423 .537 300 .113 .14821 .413 .526 400 .098 .12822 .404 .515 500 ,088 .11523 .396 .505 1000 .062 .081



09 jul 1902 - repository.unair.ac.idrepository.unair.ac.id/10326/2/fulltext.pdf · pemantauan kadar...

Documents