wiwi anggraeni_universitas brawijaya_laporan akhir

29
i LAPORAN AKHIR PROGRAM KREATIVITAS MAHASISWA JUDUL PROGRAM LG-SIMON (Leaky Gut Syndrome Immunotherapy Intravenous) : Pemanfaatan Immunoglobulin (IgG) pada Kolostrum Sapi untuk Terapi Imun Sindrom Kebocoran Usus Secara Intravenous BIDANG KEGIATAN PKM PENELITIAN Diusulkan oleh : Wiwi Anggraeni 135050101111192 2013 Yuli Fitria Sari 135050101111197 2013 Triana Fakuwita 135100200111009 2013 Miftahul Munir 125050100111125 2012 Ashri Almiahsari 135070501111024 2013 UNIVERSITAS BRAWIJAYA MALANG 2015

Upload: wiwi-anggraeni

Post on 23-Jan-2016

22 views

Category:

Documents


0 download

DESCRIPTION

peternakan

TRANSCRIPT

Page 1: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

i

LAPORAN AKHIR

PROGRAM KREATIVITAS MAHASISWA

JUDUL PROGRAM

LG-SIMON (Leaky Gut Syndrome Immunotherapy Intravenous) :

Pemanfaatan Immunoglobulin (IgG) pada Kolostrum Sapi untuk Terapi

Imun Sindrom Kebocoran Usus Secara Intravenous

BIDANG KEGIATAN

PKM PENELITIAN

Diusulkan oleh :

Wiwi Anggraeni 135050101111192 2013

Yuli Fitria Sari 135050101111197 2013

Triana Fakuwita 135100200111009 2013

Miftahul Munir 125050100111125 2012

Ashri Almiahsari 135070501111024 2013

UNIVERSITAS BRAWIJAYA

MALANG

2015

Page 2: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

ii

Page 3: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

iii

LG-SIMON (Leaky Gut Syndrome Immunotherapy Intravenous) :

Pemanfaatan Immunoglobulin (IgG) pada Kolostrum Sapi untuk Terapi

Imun Sindrom Kebocoran Usus Secara Intravenous

Wiwi Anggraeni,Yuli Fitria S,Triana Fakuwita, Miftahul Munir,Ashri Almiahsari

Fakultas Peternakan Universitas Brawijaya

Fakultas Teknologi Pangan Universitas Brawijaya

Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya

Abstrak

Leaky Gut Syndrome merupakan suatu kondisi peningkatan permeabilitas usus

dimana jaringan dalam saluran pencernaan rusak yang memungkinkan protein

seperti gluten, bakteri jahat, dan partikel yang tidak tercerna masuk kedalam aliran

darah. Meningkatnya permeabilitas mukosa intestin merupakan salah satu kunci

dari berbagai teori penyebab Autism Spectrum Disorder (ASD). Immunoglobulin

yang terdapat dalam kolostrum sapi merupakan pilihan utama untuk mengurangi

gejala leaky gut. Banyak studi yang menjelaskan bahwa kolostrum sapi

mengandung immunoglobulin yang lebih tinggi dibanding ASI.Banyak studi

yang menjelaskan bahwa probiotik merupakan salah satu pilihan untuk

memperbaiki sistem pencernaan yang rusak. Dengan membuat kolostrum sebagai

kefir akan menambah kualitas dari kolostrum tersebut. Penelitian ini didesain

untuk mengetahui pengaruh pemberian probiotik kefir kolostrum sebagai terapi

Leaky Gut Syndrome pada penderita ASD sehingga mencegah peningkatan

permeabilitas small intestine dan stomach serta mengembalikan flora normal usus.

Penelitian ini merupakan penelitian experimental laboratorik. Penelitian ini

menggunakan 6 tikus betina Rattus norvegitus strain wistar yang dibuntingkan.

Tikus dibagi menjadi 2 kelompok dimana terdapat kontrol negatif dan kontrol

positif (pemberiian VPA). Setelah tikus melahirkan dan anaknya berusia 2 bulan,

anak tikus dibagi menjadi 3 kelompok dengan perlakuan kontrol negatif, kontrol

positif dan terapi kefir kolostrum.Setelah terapi kefir tikus ditest menggunakan

test fisik dan kemudian tikus dibedah lalu diambil organ stomach dan small

intestinnya untuk pengukuran permeabilitasnya dengan metode spesimen jaringan

stomach dan small intestine untuk pembuatan preparat histopatologi dengan

pengecatan eosis dan hematoxlyn untuk pengecekan ketebalan mukosa dan

muscle organ. Analisa statistik menunjukkan bahwa pemberian probiotik kefir

kolostrum pada kelompok perlakuan secara signifikan menunjukkan bahwa

terdapat pengaruh terhadap berat badan dan skor berenagnya (p,0,05). Analisa

statistik juga menunjukkan bahwa pemberian probiotik kefir kolostrum pada

kelompok perlakuan secara signifikan dapat meningkatkan ketebalan dari muscle

stomach(p<0,05), sedangkan tidak memberikan perbedann terhadap mukosa

stomach (p>0,05) dan secara signifikan dapat meningkatkan ketebalan mukosa

dan muscle ileum serta duodenum (p,0,05). Pemberian kefir kolostrum belum

dapat meningkatkan ketebalan jejenum namun secara significan memberikan

perbedaan terhadap ketebalan mukosaa dan muscle jejenum (p,0,05). Kesimpulan

penelitian ini adalah bahwa pemberian kefir kolostrum berpotensi dalam

mengurangi gejala Leaky Gut Syndrome pada ASD melalui peningkatan

ketebalan mukosa dan muscle stomah dan small intestine.

Kata Kunci : Leaky Gut, Kolostrum, Probiotik, Permeabilitas

Page 4: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

iv

DAFTAR ISI

Halaman Sampul ................................................................................................................ i

Halaman Pengesahan .......................................................................................................... ii

Abstrak ............................................................................................................................... iii

Daftar Isi ............................................................................................................................ iv

Daftar Gambar ..................................................................................................................... v

Daftar Tabel ....................................................................................................................... v

Daftar Lampiran .................................................................................................................. v

BAB 1 PENDAHULUAN ................................................................................................ 1

1.1 Latar Belakang Masalah ...................................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah ................................................................................................ 1

1.3 Tujuan ................................................................................................................ 1

1.4 Luaran ................................................................................................................ 1

1.5 Manfaat .............................................................................................................. 1

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................................... 2

2.1 Leaky Gut Syndrome dan ASD ........................................................................... 2

2.2 Antibiotik dan Probiotik ...................................................................................... 2

2.3 Kolostrum ......................................................................................................... 2

BAB 3 METODE PENELITIAN........................................................................................ 3

3.1 Rancangan Penelitian........................................................................................... 3

3.2 Waktu dan Tempat Pelaksanaan .......................................................................... 3

3.3 Variabel yang Diamati ......................................................................................... 4

3.4 Objek dan Sampel Penelitian ............................................................................... 4

3.5 Metode Penelitian ................................................................................................ 4

3.6 Analisis Data ....................................................................................................... 5

BAB 4 HASIL YANG DICAPAI dan POTENSI KHUSUS .............................................. 5

4.1 Hasil dan Pembahasan ......................................................................................... 5

Page 5: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

v

4.1.1 Kadar IgG pada Kefir Kolostrum ..................................................................... 6

4.1.2 Hasil Uji berat badan, olfactorius offspring dan berenang ............................... 7

4.1.3 Hasil Uji Ketebalan Mukosa dan Muscle ......................................................... 8

4.2 Potensi Khusus .................................................................................................... 10

BAB 5 PENUTUP .............................................................................................................. 10

5.1 Kesimpulan ......................................................................................................... 10

5.2 Saran ................................................................................................................... 10

DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................................... 10

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Rancangan Penelitian .................................................................................... 3

Gambar 2. Diagram Hasil Uji IgG ............................................................................... 6

Gambar 3. Diagram Tes Berat Badan ................................................................................. 7

Gambar 4. Diagram Skor Berenang ...................................................................... 8

Gambar 5. Diagram Ketebalan Muscle Organ .................................................................... 9

Gambar 6. Diagram Ketebalan Mukosa Organ ................................................................... 9

Gambar 7. Diadram Prosentase .......................................................................................... 12

DAFTAR TABEL

Tabel 1. Data Tes Berat Badan, Olfactorius dan Berenang ................................................ 5

Tabel 2. Data Tes Ketebalan Mukosa dan Muscle Organ ................................................... 6

Tabel 3. Indeks Keberhasilan Program ............................................................................... 11

Tabel 4. Rincian Biaya .................................................................................................. 12

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Indeks Keberhasilan Program ......................................................................... 11

Lampiran 2. Rincian Biaya ................................................................................................. 12

Lampiran 3. Data Pendukung Kegiatan ........................................................................... 14

Page 6: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

1

BAB 1. PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Masalah

Sekitar 70% penduduk diperkirakan menderita Leaky Gut Syndrome /

Sindrom Kebocoran Usus data dari International Center for Nutritional Research

(http://www.icnr,org). Penelitian menunjukkan bahwa Leaky Gut Syndrome

mempengaruhi jutaan orang di seluruh dunia. LGS adalah suatu kondisi lemah

kronis yang sering tidak terdiagnosis oleh profesional medis. Banyak yang tidak

mengakui tentang kondisi ini. Akibatnya, banyak orang tidak mengetahui,

sehingga mereka saat ini berurusan dengan gejala yang disebabkan oleh usus

bocor yang telah berkembang dari waktu ke waktu.

LGS adalah suatu kondisi peningkatan permeabilitas usus dimana jaringan

dalam saluran pencernaan rusak yang memungkinkan protein seperti gluten,

bakteri jahat, dan partikel yang tidak tercerna masuk kedalam aliran darah.

Meningkatnya permeabilitas mukosa intestin merupakan salah satu kunci dari

berbagai teori penyebab Autism Spectrum Disorder (ASD). Sindrom kebocoran

usus tidak dapat diatasi secara medik konvensional dengan penggunaan antibiotik

atau obat-obatan kimia karena akan semakin membuat kebocoran usus bertambah

parah.

Kolostrum sapi mengandung IgG hingga 80% atau 40 kali dari jumlah IgG

kolostrum manusia. Kolostrum meminimalisir jumlah bakteri pathogen di dalam

usus karena kandungan immunoglobulin, lactoferrin dan proline rich polypeptides

(PRP)-nya mampu menghambat pertumbuhan koloni bakteri pathogen sebelum

mereka merusak fungsi epithel usus dan masuk ke dalam tubuh lewat lapisan

terluar usus tersebut . Nutrisi dan Epithelial Growth Factor yang terdapat di dalam

kolostrum akan memacu pertumbuhan sel epithel usus sehingga mempercepat

perbaikan lapisan usus yang telah rusak untuk berfungsi kembali secara normal.

Sehingga kolostrum sapi merupakan pilihan utama untuk mengurangi gejala

sindrom kebocoran usus.

1.2 Rumusan Masalah

1. Bagaimana cara mengatasi Leaky Gut Syndrome yang evektif?

2. Bagaimana pemanfaatan kolostrum sapi agar tepat guna?

1.3 Tujuan

Tujuan yang ingin dicapai dalam penulisan ini adalah untuk mengatasi

penyakit Leaky Gut Syndrome dengan memanfaatkan kolostrum sapi yang

memiliki banyak manfaat namun belum optimal pemanfaatannya di masyarakat.

1.4 Luaran

Membuat sebuah probiotik dalam bentuk kefir kolostrum untuk mengatasi

LGS, artikel ilmiah penelitian, hak paten dan dipublikasi dalam seminar.

1.5 Manfaat

Memberikan solusi alternative untuk mengatasi Leaky Gut Syndrome bagi

industri farmasi secara global dan memberikan sumbangan inovatif bagi

perkembangan ilmu Teknologi Hasil Ternak, terutama penggunaan kolostrum sapi

Page 7: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

2

untuk kesehatan.

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Leaky Gut Syndrome dan ASD

Leaky gut adalah suatu kondisi peningkatan permeabilitas usus dimana

jaringan dalam saluran pencernaan rusak yang memungkinkan protein seperti

gluten, bakteri jahat, dan partikel yang tidak tercerna masuk kedalam aliran

darah (Fasano, 2012). Kelainan yang dapat ditemukan pada mukosa usus anak

dengan ASD yaitu timbulnya lubang-lubang kecil pada mukosa usus dan

meningkatnya permeabilitas usus yang dikenal sebagai leaky gut

(Ratnawati,2003). Umumnya, bahkan hampir semua anak dengan ASD

mengalami gangguan fungsi ( malfunction ) pada sistem imunnya. Gangguan

fungsi ini dapat berupa : salah mengidentifikasi sel pada dirinya sendiri sebagai

sel asing, sehingga akan menyerang terhadap sel dirinya sendiri. Hal ini

menyebabkan terjadinya reaksi radang pada saluran gastrointestinal, dan

selanjutnya akan menyebabkan berbagai gangguan gastrointestinal yang sering

didapatkan pada anak dengan ASD (Camilleri,2012)

2.2 Antibiotik dan Probiotik

Pemberian antibiotik yang terlalu sering menyebabkan terbunuhnya

lactobacillus di usus, akibatnya terjadilah yeast overgrowth di saluran pencernaan.

Bentuk mycelium dan chlamydospore dari jamur candida albicans bisa melakukan

invasi ke dalam jaringan, sedangkan bentuk yeast biasanya berkelompok dalam

crypta intestin sehingga sulit dideteksi. Jamur dan yeast ini menempel pada

dinding usus sambil mengeluarkan toxin yaitu gliotoxins dan immunotoxins

lainnya yaitu mannan yang dapat melemahkan sistem imunitas tubuh. Akhirnya

terjadi lagi reinfeksi dan diberi lagi antibiotik yang akan membunuh bakteri

komensal dalam usus, terjadilah vicious cycle. Yeast juga memproduksi suatu

enzim seperti phospholipase ( phospholipid breakdown ) dan protease ( protein

breakdown ). Enzim ini dapat merusak mukosa usus sehingga timbul

lubanglubang kecil di mukosa usus, ditambah dengan adanya hipermeabilitas

dinding usus maka terjadilah Leaky Gut Syndrome ( Ratnawati, 2003 ).

Bakteri probiotik mampu menstimulasi sistem imun antara lain

meningkatkan fungsi fagositosis makrofag, monosit dan neutrofil, serta mampu

merangsang sekresi IgM. Probiotik juga memiliki kemampuan memperbaiki

keseimbangan mikroflora usus, sehingga dapat mempertahankan kesehatan host

(Resnick, 2010)

2.3 Kolostrum

Dr.C.E.Bruce menunjukkan bahwa kolostrum manusia hanya mengandung

2% IgG (immunoglobulin yang terpenting untuk tubuh), sementara dalam

kolostrum sapi mengandung IgG 40x lebih banyak. Berita baiknya, kolostrum sapi

mudah untuk didapatkan dalam jumlah yang besar (Bruce, C.E. 1969).

Page 8: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

3

Hasil penelitian menunjukkan bahwa konsentrasi IgG total hasil

pemerahan pertama cukup tinggi, dengan konsentrasi sebesar 25.75±3,13mg.mlˉ¹.

Imunoglobulin utama yang terkandung di dalam kolostrum sapi adalah

immunoglobulin gamma (IgG), oleh karena itu, kolostrum merupakan sumber lgG

yang sangat bermanfaat (Esfandiari, 2008).

Since colostrum can decrease Leaky Gut Syndrome i.e. intestinal

permeability and enhance the assimilation of nutrients, using colostrum as a

foundation supplement can enhance the bioavailability of nutrients and protect the

digestive tract from toxins and pathogenic invaders. This effect can also be

increased when combined with probiotics (Pamela, 1998)

BAB 3. METODE PENELITIAN

3.1 Rancangan Penelitian

Gambar 1. Rancangan Penelitian

3.2 Waktu dan Tempat Pelaksanaan

Penelitian dilakukan selama 4 bulan. Pengambilan kolostrum akan

dilakukan di daerah Pujon sebagai sentra sapi perah tertinggi di Malang.

Pembuatan kefir dilakukan di Laboratorium Teknologi Hasil Ternak. Pengecekan

IgG dilakukan di Laboratorium Kimia Fakultas MIPA, pemeliharaan tikus putih (

Rattus norvegicus) jenis Strain wistar dilakukan di Laboratorium Farmakologi,

Page 9: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

4

test berat badan, test renang dan test perilaku dilakukan di Laboratorium

Farmakologi Universitas brawijaya dan uji Histologi dilakukan di Laboratorium

Anatomi Mikroskopis Universitas Brawijaya.

3.3 Variabel yang Diamati

Variabel bebas penelitian ini adalah pemberian kefir kolostrum dengan

lama fermentasi 48 jam. Variabel tergantung adalah berat badan, olfactorius

offspring, renag dan dan histologi organ stomach, duodenum, jejenum, ielun,

colon.

3.4 Objek dan Sampel Penelitian

Sampel penelitian adalah model tikus putih (Rattus novergicus) strain

Wistar betina siap reproduksi yang dibuntingkan sebanyak 6 ekor, dalam

penelitian ini menggunakan anak tikus dari induk yang dibuntingkan yang

berumur 4 minggu.

3.5 Metode Penelitian

3.5.1 Pembuatan Kefir Kolostrum

Kolostrum yang diambil dari pemerahan pertama setelah melahirkan

dikondisikan dengan suhu 30 ͦ C dan diaduk secara terus menerus agar tidak

menggumpal. Grain kefir sebanyak 5 gram/100 ml kolstrum ditaruh diwadah

tupperware. Kolostrum yang telah dikondisikan dimasukkan dalam wadah

kemudian difermentasi selama 18 jam. 24 jam, 36 jam dan 48 jam

3.5.2 Pengukuran kadar IgG

Untuk mengetahui konsentrasi IgG pada sampel kefir kolostrum

digunakan alat brix refraktrometer. Cara kerja refraktometers mengukur

pembiasan cahaya dalam larutan cair. Konsentrasi yang lebih tinggi dari protein

(termasuk IgG) akan menghasilkan pembiasan cahaya yang lebih besar melalui

sampel. Caranya sampel kolostrum dan kefir kolostrum yang sudah diberi

perlakuan tadi diteteskan sebanyak 2-3 tetes dalam prisma dan penutup sampel

diturunkan. Instrumen akan menampilkan pembacaan digital pada skala Brix.

Setiap menggunakan refraktometer, prisma dan sampel penutup harus dibersihkan

setelah menguji sampel untuk menghindari residu yang dapat mempengaruhi

pengukuran berikutnya. Pembacaan brix refraktrometer didasarkan pada nilai

ambang 22. Nilai di atas 22 baik sedangkan nilai di bawah 22 tidak begitu baik.

3.5.3 Pembuntingan tikus

Tikus betina yang siap kawin dikandangkan dengan tikus jantan dengan

perbandingan 1:1. Hari pertama setelah pencampuran dihitung sebagai hari

pertama tikus betina bunting.

3.5.4 Pemberian valproic acid dan Kefir kolostrum

Valproic acid diberikan dengan dosis 800 mg/kg bb dengan cara oral

menggunakan sonde lambung diberikan pada saat kehamilan ke-9. Kefir

kolostrum diberikan pada anak tikus, anak tikus yang berusia 4 miggu selama 1

bulan diberikan kefir kolostrum secara oral menggunakan sonde laambung dengan

dosis 1 cc/100 g BB.

Page 10: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

5

3.5.5 Test leaky Gut Syndrome

3.5.5.1 Tes Berat Badan, Tes Ollfactorius, dan Tes Berenang

Semua tes dilakukan diatas jam 2. Sebelum tes anak tikus dari masing-

masing perlakuan yang berumur 4 minggu dikondisikan, tes berat badan

dilakukan dengan cara menimbang anak tikus dengan timbangan digital, tes

olfactorius dilakukan dengan menggunakan kandang yang dipojok kanan dan

pojok kiri ditaruh cawan petri yang berisi sekam bersih dan sekam kotor,

kemudian waktu kaki pertama mencapai cawan petri dihitung sebagai waktu tikus

telah selesai melakukan tes, kandang dan cawan petri yang digunakan dibersihkan

dengan etanol 5 %, tes renang dilakukan dengan menggunakan tabung berenang,

tikus direnagkan selama 10 detik, kemudian dilihat bagaimana keadaan tikus

selama berenang dan dicocokan dengan skor sebagai berikut, 0: kepala dan hidung

dibawah permukaan air, 1:Hidung dibawah permukaan air, 2:Hidung dan kepala

diatas permukaan tapi telinga dibawah permukaan air, 3:Sama dengan no 2 tapi

sebagian telinga ada yang dibawah dan diatas permukaan air dan 4: Sama dengan

no 3 tapi telinga diatas permukaan air

3.5.5.2 Uji Histologi

Sebelum diambil organnya, anak tikus dianestesikan dengan ether dan.

Diambil organ stomach, duodenum, jejenum, ileum, dan colon kemudian

direndam pada formalin 10 % dan dibiarkan selama 18 jam pada suhu 4 ͦ C.

Sampel yang sudah siap dibagi menjadi 4 bagian yaitu, stomach, duodenum,

jejenum, ileum, keempat bagian diiris dengan ukuran 5 µm dan diwarnai dengan

hemstoxylin dan eosin kemudian diamati dengan perbesaran mikroskop untuk

melihat profil morfologi organ tikus apakah terdapat pengaruh pemberian Vpa dan

kefir kolostrum pada kesehatan organ pencernaan . .

3.6 Analisis Data

Data yang diperoleh dalam penelitian ini dianalisa secara

statistikamenggunakan SPSS.Data berat badan, dan data skor renang diuji dengan

Kruskal Wallis dan Mann Whitney. Data Histology untuk analisis statitik dengan

analysis of variance (ANOVA). Apabila berbeda nyata dilakukan uji lanjut

duncan.

BAB 4 HASIL YANG DICAPAI DAN POTENSI KHUSUS

4.1 Hasil dan Pembahasan

Pada penelitian ini diperoleh data hasil uji IgG pada kolostrum dan data

dari tes berat badan, tes olfactorius offspring, tes renang dan tes histology.

Tabel 1. Data Tes Berat Badan, Tes Olfactorius Offspring, Tes Renang

Sampel Berat

Badan

Olfactorius Offspring Berenang

(S) Bersih (S) Kotor (S)

Kn 54 7 4

Kn 50 8 4

Kn 50 3 4

Page 11: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

6

P1 30 5 3

P1 31 8 0

P1 31 6 2

P2 39 5 4

P2 49 7 4

P2 44 8 3

Tabel 2. Data Ketebalan Mukosa dan Muscle Organ

Sampel Ketebalan Mukosa (Pixel) Ketebalan Muscle (Pixel)

TMuL TmuD TmuJ TMuI TmsL TMsD TMsJ TMsI

Kn 725.50 529.06 799.81 657.89 184.47 54.23 73.76 68.38

Kn 763.47 523.35 774.40 640.73 178.79 60.41 75.56 67.15

Kn 783.41 510.88 783.10 659.10 175.96 61.01 71.24 62.17

P1 701.78 299.77 558.08 578.46 143.59 47.07 68.44 42.15

P1 751.68 251.56 526.16 563.94 146.14 35.35 65.91 44.89

P1 766.18 258.50 530.19 545.77 152.18 20.00 63.85 48.91

P2 786.17 679.03 490.72 613.49 181.89 84.15 61,47 60.81

P2 743.96 674.89 487.67 624.44 165.08 83.55 60.12 65.01

P2 769.98 670.17 476.83 635.91 194.76 81.01 59.46 61.96

Keterangan Kn= Kontrol negatif tanpa perlakuan ; P1= Perlakuan pemberian VPA

tanpa terapi kefir kolostrum ; P2=Perlakuan pemberian VPA dengan terapi kefir

kolostrum.TMu=Tebal Mukosa;TMs=Tebal Muscle;L=Lambung;D=Duodenum ;

J=Jejenum;I=Ileum.

4.1.1 Kadar IgG pada kefir kolostrum

Kegiatan ini dilakukan untuk menetukan kdar IgG yang paling banyak

terdapat dalam kefir. Kegiatan ini dapat digunakan sebagai acuan untuk membuat

kefir yang diberikan pada tikus. Pada kegiatan ini didapatkan hasil fermentasi

yang memiliki konsentrasi IgG paling tinggi.Pada pembuatan kefir berikutnya

akan digunakan perlakuan yang memiliki konsentrasi IgG paling tinggi yaitu

fermentasi 48 jam

14

14,1

14,2

14,3

14,4

14,5

14,6

14,7

14,8

14,9

15

48 36 24 18

IgG 1

IgG 2

IgG rata rata

Page 12: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

7

Gambar 2. Diagram Hasil Uji IgG

Gambar 5 menunjukkan hasil dari test IgG.Biru merupakan uji IgG pada

ulangan pertama, merah merupakan uji IgG ulangan kedua dan hijau adalah rata-

rata nilai IgG pada uji pertama dan kedua.

4.1.2 Hasil Uji berat badan, olfactorius offspring dan berenang

Pada Tabel 1 terlihat bahwa berat badan tertinggi terdapat pada tikus

kontrol negatif(sehat) sedang terendah pada tikus P1(sakit). Hal ini sesuai dengan

(Vemale com) yang menyatakan bahwa bayi yang lahir dengan bobot di bawah

normal beresiko 63 persen lebih tinggi untuk mengalami autisme. Sedangkan pada

anak-anak yang lahir dengan bobot berlebih resikonya mencapai 60 persen. Pada

gambar juga terlihat skor berenag tertinggi terdapat pada tikus kontrol negatif dan

skor berenag terendah pada tikus P1. Pada tikus P2(terapi) mulai menunjukkan hal

yang positif yaitu kenaikan berat badan dan kenaikan skor berenag. Hal ini terjadi

mungkin karena pemberian kefir kolostrum pada tikus autis mengurangi keadaan

leaky gut syndrome yang diderita. Hal ini sesuai dengan Resnick, 2010 yang

menyatakan bahwa bakteri probiotik mampu menstimulasi sistem imun antara lain

meningkatkan fungsi fagositosis makrofag, monosit dan neutrofil, serta mampu

merangsang sekresi IgM. Probiotik juga memiliki kemampuan memperbaiki

keseimbangan mikroflora usus, sehingga dapat mempertahankan kesehatan host).

Pada Gambar 2 terlihat bahwa tikus kontrol negatif cenderung memilih sekam

yang kotor . Tikus P1 cenderung memilih sekam yang bersih kemudian pada tikus

P2 tikus mulai memilih sekam yang kotor meskipun waktunya tidak secepat

dengan tikus kontrol negatif. Pada tes offspring olfactory tikus yang sehat akan

cenderung memilih sekam yang kotor karena pada tikus terdapat syaraf

olfactorius, yaitu kemampuan syaraf hewan untuk membaui rumahnya, apabila

tikus autis pertumbuhan syaraf ini akan lambat

Dari hasil uji Kruskal Wallis dapat diketahui bahwa “ Nilai p-value

sebesar 0,027 < nilai kritik 0,05, karena itu Ho ditolak, bahwa terdapat cukup

bukti dimana terdapat perbedaan dari ketiga kelompok perlakuan terhadap berat

badan” dan dari hasil uji Kruskal Wallis dapat diketahui bahwa “ Nilai p-value

sebesar 0,046 < nilai kritik 0,05, karena itu H0 ditolak, bahwa terdapat cukup

bukti dimana terdapat perbedaan dari ketiga kelompok perlakuan terhadap tingkat

kemampuan berenang”. Pada gambar telihat bahwa

0

10

20

30

40

50

60

Sehat Sakit Terapi

BB 1

BB 2

BB 3

Page 13: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

8

Gambar 3. Diagram Tes Berat Badan

Gambar 4. Diagram Skor Berenang

4.1.3 Hasil Uji Ketebalan Mukosa dan Muscle

Pada tabel 2 terlihat bahwa tikus kontrol negatif menunjukkan

ketebalan mukosa dan muscle pada ileum, lambung dan duodenum yang lebih

tebal dibandingkan dengan tikus P1, kemudian tikus yang diberikan kefir

kolostrum ketebalan mukosa dan muscle pada lambung, ileum dan duodenumnya

meningkat. Penurunan ketebalan mukosa dan muscle pada lambung, ileum dan

duodenum tikus yang diberikan VPA tanpa pemberian kefir disebabkan karena

tikus mengalami penyakit leaky gut syndrome. Hal ini sesuai dengan Kim (2013),

yang menyatakan bahwa di stomach dan ileum, ketebalam mukosa dan muscle

menurun secara dengan signifikat, penurunan ketebalan ini mungkin hasil dari

peningkatan permeabilitas dan vulnerability to external attacs. Tikus yang

diberikan kefir kolostrum memiliki ketebalan mukosa dan muscle pada lambung,

ileum dan duodenum mendekati tikus normal, hal ini menunjukkan bahwa kefir

kolostrum dapat munurunkan peningkatan permeabilitas yang artinya mengurangi

kondisi leaky gut syndrome.

Dari hasil uji ANOVA dapat diketahui bahwa “ Nilai p-value sebesar

0,027 < nilai kritik 0,05, karena itu Ho ditolak, bahwa terdapat cukup bukti

dimana terdapat perbedaan dari ketiga kelompok perlakuan terhadap ketebalan

muscle lambung” dan dari hasil uji ANOVA dapat diketahui bahwa “ Nilai p-

value sebesar 0,549 > nilai kritik 0,05, karena itu H0 diterima, bahwa terdapat

cukup bukti dimana tidak terdapat perbedaan dari ketiga kelompok perlakuan

terhadap ketebalan mukosa lambung”. Dari hasil uji ANOVA antar ketebalan

mukosa dan muscle pada ileum dan duodenumtikus dapat diketahui bahwa” Nilai

p-value sebesar 0,000 < nilai kritis 0,05, karena itu Ho ditolak, bahwa terdapat

cukup bukti dimana terdapat perbedaan dari ketiga kelompok perlakuan terhadap

ketebalan mukosa dan muscle pada ileum tikus

Pada tabel 2 terlihat bahwa tikus kontrol negatif menunjukkan

ketebalann mukosa dan muscle pada jejenuum yang lebih tebal dibandingkan

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

3,5

4

4,5

Sehat Sakit Terapi

Skor 1

Skor 2

Skor 3

Page 14: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

9

dengan tikus P1, kemudian tikus yang diberikan kefir kolostrum ketebalan

mukosa dan musclenya sangat rendah, pemberian kefir kolostrum belum dapat

meningkatkan ketebalan jejenum. Hal ini sesuai dengan Wresdiyati (2013) yang

menyatakan bahwa ukuran jejenum yang lebih panjang sehingga paparan bakteri

cenderung lebih lama didalam jejenum selain itu, jejenum memiliki regenerasi sel

epitel vili yang lebih lambat bila dibandingkanduodenum dan ileumsehingga

eliminasi bakteri cenderung lebih lambat dalam jejenum.

Dari hasil uji ANOVA antar ketebalan mukosa dan muscle pada

jejenum tikus dapat diketahui bahwa” Nilai p-value sebesar 0,000 < nilai kritis

0,05, karena itu Ho ditolak, bahwa terdapat cukup bukti dimana terdapat

perbedaan dari ketiga kelompok perlakuan terhadap ketebalan mukosa jejenum

tikus”

Gambar 5. Diagram Ketebalan Muscle Organ

Keterangan TMsL;Tebal Muscle Lambung TMsD;Tebal Muscle Duodenum

TMsJ;Tebal Muscle Jejenum TMsI ;Tebal Muscle Ileum. Biru merupakan

Perlakuan Kontrol Negatif (sehat);Merah merupakan perlakuan kontrol psitif

(sakit);hijau merupakan perlakuan terapi kefir kolostrum.

0

20

40

60

80

100

120

140

160

180

200

TMsL TMsD TMsJ TMsI

Sehat

Sakit

Terapi

0

100

200

300

400

500

600

700

800

900

TMuL TMuD TMuJ TMuI

Sehat

Sakit

Terapi

Page 15: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

10

Gambar 6. Grafik Ketebalan Mukosa Organ

Keterangan TMuL;Tebal Mukosa Lambung TMuD;Tebal Mukosa Duodenum

TMuJ;Tebal Mukosa Jejenum TMuI ;Tebal Mukosa Ileum. Biru merupakan

Perlakuan Kontrol Negatif (sehat);Merah merupakan perlakuan kontrol psitif

(sakit);hijau merupakan perlakuan terapi kefir kolostrum.

4.2 Potensi Khusus

Dengan adanya kefir kolostrum maka masalah yang berkaitan dengan

Leaky Gut Syndrome dan ASD dapat diatasi, Jurnal Ilmiah, Seminar Nasional dan

Hak Paten.

BAB 5 PENUTUP

5.1 Kesimpulan

1. Pemberian valproic acid berpengaruh terhadap leaky gut syndrome

2. Pemberian kefir kolostrum berpengaruh terhadap leaky gut syndrome

3. Penyimpanan kolostrum yang terlalu lama berpengaruh terhadap kadar

IgG

5.2 Saran

Untuk penelitian selanjutnya digunakan variable yang lebih banyak untuk

diagnosa leaky gut syndrome.

DAFTAR PUSTAKA

Bruce, CE. 1969 Natural History, , Feb. Dr. C. E. Bruce demonstrates that

humancontains only 2% IgG (the body’s most important immunoglobulin)

whilecontained a phenomenal up to 20 times that amount.

Camilleri, M., et al. “Intestinal barrier function in health and gastrointestinal

disease”. Neurogastroenterology and Motility Vol. 24, No. 6 (2012): 503–

512.

Esfandiari A, Wibawan IWT, Murtini S, Widhyari SD, Prasetyo BF.

2008.Produksi Kolostrum Antivirus Avian Influenza Dalam

RangkaPengendalian Inveksi Virus Fluburung. Jurnal Ilmu Pertanian

Indonesia.13(2): 69-79.

Fasano, A. “Leaky gut and autoimmune diseases”. Clinical Reviews in Allergy &

Immunology Vol. 42, No. 1 (2012): 71–78

Ratnawati, H.2003.Leaky Gut sebagai Penyebab Gangguan Gastrointestinalpada

ASD JKM. 2(2): 42-55

Resnick, C. 2010. Nutritional Protocol for the Treatment of Intestinal

Permeability Defects and Related Conditions. Natural Medicine Journal

2(3) :14-23.

Research Center for Nutritional Research. www.centerfornutritionalresearch.org:

diakses pada 19 september 2014 pukul 11:02 am.

Page 16: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

11

LAMPIRAN

Lampiran 1 Keberhasilan Program

Tabel 3. Indeks keberhasilan program

Kegiatan Proporsi Tercapai Belum Tercapai

Persiapan 5 % 5 % 0

Membuat

kandang tikus

5 % 5 % 0

Membuntingk

an tikus

10 % 10 % 0

Memberikan

obat valproic acid

10 % 10 % 0

Membuat

kefir

10 % 10 % 0

Menganalisa

konsentrasi IgG

10 % 10 % 0

Membuat

laporan kemajuan

5 % 5 % 0

Memberikan

kefir kolostrum pada

anak tikus

10 % 10 % 0

Menganalisa

pengaruh VPA

10% 10 % 0

Menganalisa

pengaruh kefir

kolostrum

10 % 10 % 0

Tabulasi data 6 % 6 % 0

Hak paten 5 % 5 % 0

Publikasi

ARtikel

2 % 2 %

Membuat

laporan akhir

2 % 2 % 0

Page 17: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

12

Jumlah 100 % 100 % 0

Gambar 7. Diagram Prosentase

100 % sudah terlaksana 0 % belum terlaksana

Lampiran 2 Penggunaan Dana

Tabel 4. Rincian Biaya

No Tanggal Uraian Pemasukan Pengeluaran Saldo

1 24 Februari

2015

Dana

Universitas

9.652.000. 9.652.000

29 Februari

2015

Pembelian

pulsa modem

35.000 9.617.000

2 26 Februari

2015

Pembelian

logbook

100.000 9.517.000

8 April 2015 Foto kopi +

print dan

penjilidan

proposal

18.000 9.499.000

3 10 April 2015 Pembelian

bahan kandang

300.000 9.199.000

4 13 April 2015 Pembelian

tikus

300.000 8.899.000

5 14 April 2015 Pembelian

tupperwaare

128.000 8.771.000

6 14 April 2015 bensin 31.000 8.740.000

7 14 April 2015 Pembelian

kolostrum

50.000 8.690.000

8 14 April 2015 Pembuatan

kefir

50.000 8.640.000

9 15 April 2015 Pembelian 67.000 8.573.000

Belum terlaksana

Terlaksana

Page 18: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

13

valproic acid

ke 1

10 16 April 2015 Test IgG 50.000 8.523.000

11 22 April 2015 Pembelian

valproic acid

ke 2

200.000 8.323.000

12 23 April 2015 Print+fotocopy

proposal dan

jurnal

33.600 8.289.400

14 4 Mei 2015 Pembuatan

etik

250.000 8.039.400

15 8 Mei 2015 Membeli kue

untuk rapat

monev univ

30.000 8.009.400

16 9 Mei 2015 Membeli nasi

bungkus

sebelum

monev univ

40.000 7.969.400

17 10 Mei 2015 Pembelian

handspon dan

masker

87.000 7.882.400

18 10 Mei 2015 Konsumsi

anggota

31.500 7.850.900

19 20 Mei 2015 Prin dan

fotocopy

laporann

kemajuan

48.000 7.802.900

20 20 Mei 2015 Membeli

kolostrum

100.000 7.702.900

21 23 Mei 2015 Membeli

peralatan

kandang

penampung

urine

45.000 7.657.900

22 04 juni 2015 Membeli

mannitol

16.000 7.641.900

23 05 juni 2015 Konsumsi

anggota

22.000 7.619.900

24 06 juni 2015 Transportasi

survey lab

untuk test

23.000 7.596.900

Page 19: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

14

urine

25 06 juni 2015 Beli

lampu,handuk,

sabun

75.000 7.521.900

26 07 juni Beli etanol 30.000 7.491.900

27 08 juni Beli etanol 30.000 7.461.900

28 09 Juni Beli etanol 30.000 7.431.900

29 10 juni Scan nota 25.000 7.406.900

30 10 juni Transportasi 50.000 7.356.900

31 10 juni Konsumsi 50.000 7.306.900

15 juni Print Jurnal

dan Fotocopy

54.000 7.252.900

16 juni Beli kolostrum 100.000 7.152.900

13 juli Tes Histologi 2.500.000 4.652.900

10 juli Sewa Lab 3.500.000 1.152.900

11 juli Beli ojek glas 500.000 652.900

13 juli Pengamatan

preparat

300.000 352.900

13 juli Pengukuran 300.000 52.900

12 juli Transportasi 50.000 2.900

Jumlah 9.649.100 2.900

Lampiran 3 Data Pendukung Kegiatan

Diskusi Anggota Membuat Kandang

Page 20: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

15

Pembelian bahan-bahan kefir Pembuatan Kefir

Menganalisa IgG

Pembuntingan

Page 21: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

16

Memberi makan tikus Menimbang tikus

Membeli valproic acid di RSSA Pemberian valproic acid

Laboratorium kimia analisis Pembuatan Etik

POLINEMA menanyakan isolasi IgG

Toko bahan kimia membeli botol fil Ke apotik menanyakan obat valproic acid

Page 22: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

17

Membuat kandang penampung urin

Memberikan kolostrum

Page 23: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

18

Melakukan tes offspring

Melakukan tes renang

Melakukan bimbingan

Page 24: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

19

Stomach

Sehat Sakit

Terapi

Duodenum

Sehat Sakit

Terapi

Page 25: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

20

Jejenum

Sehat Sakit

Terapi

Ileum

Sehat Sakit

Terapi

Page 26: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

21

Kruskal-Wallis Test “Skor Renang”

Ranks

PERL

AKU

AN N Mean Rank

SKOR 1 3 2.17

2 3 7.00

3 3 5.83

Total 9

Test Statisticsa,b

SKOR

Chi-Square 6.168

df 2

Asymp.

Sig. .046

a. Kruskal Wallis Test

b. Grouping Variable:

PERLAKUAN

Kruskal-Wallis Test “Berat Badan”

Ranks

PERLAKU

AN N Mean Rank

BB PEMBERIA

N 3 2.00

TANPA 3 8.00

TERAPI 3 5.00

Total 9

Test Statisticsa,b

BB

Chi-Square 7.261

Page 27: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

22

df 2

Asymp.

Sig. .027

a. Kruskal Wallis Test

b. Grouping Variable:

PERLAKUAN

One Way ANOVA Ketebalan Muscle

Oneway

Descriptives

N Mean

Std.

Deviation Std. Error

95% Confidence Interval

for Mean

Minimum Maximum

Lower Bound

Upper

Bound

TMsL sehat 3 1.7974E2 4.33381 2.50213 168.9742 190.5058 175.96 184.47

sakit 3 1.4730E2 4.41158 2.54703 136.3444 158.2623 143.59 152.18

terapi 3 1.8058E2 14.88352 8.59301 143.6039 217.5494 165.08 194.76

Total 9 1.6921E2 18.30122 6.10041 155.1391 183.2742 143.59 194.76

TMsD sehat 3 58.5500 3.75324 2.16693 49.2264 67.8736 54.23 61.01

sakit 3 34.1400 13.57550 7.83782 .4166 67.8634 20.00 47.07

terapi 3 82.9033 1.66689 .96238 78.7625 87.0441 81.01 84.15

Total 9 58.5311 22.27419 7.42473 41.4097 75.6526 20.00 84.15

TMsJ sehat 3 73.5200 2.16998 1.25284 68.1295 78.9105 71.24 75.56

sakit 3 66.0667 2.29901 1.32733 60.3556 71.7777 63.85 68.44

terapi 3 60.1933 .77261 .44607 58.2741 62.1126 59.46 61.00

Total 9 66.5933 6.00865 2.00288 61.9747 71.2120 59.46 75.56

TMsI sehat 3 65.9000 3.28830 1.89850 57.7314 74.0686 62.17 68.38

sakit 3 45.3167 3.40014 1.96307 36.8703 53.7631 42.15 48.91

terapi 3 62.5933 2.17045 1.25311 57.2016 67.9850 60.81 65.01

Total 9 57.9367 9.92006 3.30669 50.3114 65.5619 42.15 68.38

Page 28: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

23

Test of Homogeneity of Variances

Levene Statistic df1 df2 Sig.

TMsL 2.213 2 6 .191

TMsD 3.172 2 6 .115

TMsJ 1.052 2 6 .406

TMsI .393 2 6 .691

ANOVA

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

TMsL Between Groups 2159.952 2 1079.976 12.473 .007

Within Groups 519.526 6 86.588

Total 2679.478 8

TMsD Between Groups 3566.796 2 1783.398 26.597 .001

Within Groups 402.319 6 67.053

Total 3969.115 8

TMsJ Between Groups 267.648 2 133.824 37.906 .000

Within Groups 21.182 6 3.530

Total 288.831 8

TMsI Between Groups 733.091 2 366.545 40.600 .000

Within Groups 54.169 6 9.028

Total 787.260 8

Oneway ANOVA Ketebalan Mukosa

Oneway

Descriptives

N Mean

Std.

Deviation Std. Error

95% Confidence Interval

for Mean

Minimum Maximum

Lower Bound

Upper

Bound

TMuL sehat 3 7.5746E2 29.41908 16.98511 684.3790 830.5410 725.50 783.41

sakit 3 7.3988E2 33.78269 19.50444 655.9592 823.8008 701.78 766.18

terapi 3 7.6670E2 21.29492 12.29463 713.8038 819.6028 743.96 786.17

Total 9 7.5468E2 27.46461 9.15487 733.5699 775.7923 701.78 786.17

TMuD sehat 3 5.2110E2 9.29711 5.36769 498.0014 544.1920 510.88 529.06

sakit 3 2.6994E2 26.06268 15.04730 205.2000 334.6866 251.56 299.77

Page 29: Wiwi Anggraeni_Universitas Brawijaya_Laporan Akhir

24

terapi 3 6.7470E2 4.43316 2.55949 663.6841 685.7093 670.17 679.03

Total 9 4.8858E2 177.50596 59.16865 352.1357 625.0220 251.56 679.03

TMuJ sehat 3 7.8577E2 12.91370 7.45573 753.6906 817.8494 774.40 799.81

sakit 3 5.3814E2 17.38284 10.03599 494.9620 581.3247 526.16 558.08

terapi 3 4.8507E2 7.30000 4.21466 466.9391 503.2075 476.83 490.72

Total 9 6.0300E2 139.46250 46.48750 495.7952 710.1959 476.83 799.81

TMuI sehat 3 6.5257E2 10.27446 5.93196 627.0502 678.0965 640.73 659.10

sakit 3 5.6272E2 16.37893 9.45638 522.0358 603.4108 545.77 578.46

terapi 3 6.2461E2 11.21101 6.47268 596.7637 652.4630 613.49 635.91

Total 9 6.1330E2 41.35849 13.78616 581.5124 645.0943 545.77 659.10

Test of Homogeneity of Variances

Levene Statistic df1 df2 Sig.

TMuL .512 2 6 .623

TMuD 6.464 2 6 .032

TMuJ 1.698 2 6 .260

TMuI .301 2 6 .751

ANOVA

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

TMuL Between Groups 1113.987 2 556.993 .679 .542

Within Groups 4920.451 6 820.075

Total 6034.438 8

TMuD Between Groups 250496.218 2 125248.109 478.440 .000

Within Groups 1570.705 6 261.784

Total 252066.923 8

TMuJ Between Groups 154553.876 2 77276.938 443.936 .000

Within Groups 1044.434 6 174.072

Total 155598.310 8

TMuI Between Groups 12685.156 2 6342.578 38.092 .000

Within Groups 999.041 6 166.507

Total 13684.197 8