wiwi anggraeni universitas brawijaya pkmp

i

USULAN PROGRAM KREATIVITAS MAHASISWA

JUDUL PROGRAM

LG-SIMON (Leaky Gut Syndrome Immunotherapy Intravenous) :

Pemanfaatan Immunoglobulin (IgG) pada Kolostrum Sapi untuk Terapi

Imun Sindrom Kebocoran Usus Secara Intravenous

BIDANG KEGIATAN

PKM PENELITIAN

Diusulkan oleh :

Wiwi Anggraeni NIM. 13505010111192 / Angkatan 2013

Yuli Fitria Sari NIM. 13505010111197 / Angkatan 2013

Triana Fakuwita NIM. 135100200111009 / Angkatan 2013

Miftahul Munir NIM. 125050100111125 / Angkatan 2012

Ashri Almiahsari NIM. 135070501111024 / Angkatan 2013

UNIVERSITAS BRAWIJAYA

MALANG

2014

iii

DAFTAR ISI

HALAMAN SAMPUL ................................................................................... i

HALAMAN PENGESAHAN .............................................................. ii

DAFTAR ISI .................................................................................................. iii

DAFTAR TABEL ............................................................................................ iv

DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... v

DAFTAR LAMPIRAN. vi

RINGKASAN .................................................................................................. vii

BAB 1 PENDAHULUAN ............................................................................. 1

1.1 Latar Belakang Masalah ....................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah ............................................................................. 2

1.3 Tujuan ......................................................................................... 2

1.4 Luaran ............................................................................................. 2

1.5 Manfaat ............................................................................. 2

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ..................................................................... 3

2.1 Leaky Gut Syndrome ........................................................................ 3

2.2 Kolostrum ............................................................................................ 3

2.3 Immunoglobulin .............................................................................. 4

2.4 Intravena ...................................................................................... 4

BAB 3 METODE PENELITIAN .................................................................... 5

3.1 Tahapan Penelitian ....................................................................... 5

3.1.1 Lokasi Penelitian ........................................................................ 5

3.1.2 Pengambilan Sampel dan Pemisahan Whey Kolostrum ............ 5

3.1.3 Pemisahan IgG ............................................................................ 5

3.1.4 Pemeliharaan Tikus .................................................................... 6

3.2.4 Pemberian antibiotik dan IgG .................................................... 6

3.2.5 Uji urin ....................................................................................... 6

3.2 Indikator Capaian ............................................................................. 6

3.3 Variabel yang Diamati ......................................................................... 7

3.4 Teknik Pengambilan Data .................................................................... 7

3.5 Analisis Data ...................................................................................... 8

BAB 4 BIAYA DAN JADWAL KEGIATAN ............................................... 8

4.1 Anggaran Biaya .............................................................................. 8

4.2 Jadwal Kegiatan .................................................................................. 8

DAFTAR PUSTAKA .................................................................................... 9

iv

DAFTAR TABEL

Tabel 2.1 Ringkasan Anggaran Biaya PKM-P ................................................ 8

v

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Intravena pada tikus ...................................................................... 4

Gambar 2. Cara memegang tikus .................................................................. 4

Gambar 3. Cara menghandel tikus untuk pemberian obat baik injeksi maupun

peroral ............................................................................................................ 5

Gambar 4.Alat untuk penghandel hewan laboratorium khusus hewan pengerat

(rodensia). ...................................................................................................... 5

Gambar 5. Diagram Penelitian Pendahuluan .................................................. 7

Gambar 6. Diagram Penelitian Utama ............................................................ 8

vi

DAFTAR LAMPIRAN

LAMIRAN-LAMPIRAN .............................................................................. 11

Lampiran 1. Biodata Ketua dan Anggota, Biodata Dosen Pembimbing

yang ditandatangani (Lampiran 3.2) .......................................................... 11

Lampiran 2. Justifikasi Anggaran Kegiatan (Lampiran 3.3) .................... 20

Lampiran 3. Susunan Organisasi Tim Peneliti dan Pembagian Tugas

(Lampiran 3.4)............................................................................................ 22

Lampiran 4. Surat Pernyataan Ketua Peneliti (Lampiran 3.5)................ 24

vii

LG-SIMON (Leaky Gut Syndrome Immunotherapy Intravenous) :

Pemanfaatan Immunoglobulin (IgG) pada Kolostrum Sapi untuk Terapi

Imun Sindrom Kebocoran Usus Secara Intravenous Wiwi Anggraeni,Yuli Fitria S,Triana Fakuwita, Miftahul Munir,Ashri Almiahsari

Ringkasan

Leaky Gut Syndrome adalah kerusakan tubuh utama (berupa goresan) yang

terdapat pada lapisan-lapisan usus yang lebih mudah menipis (keropos).

Immunoglobulin yang terdapat dalam kolostrum sapi merupakan pilihan utama

untuk mencegah penyakit ini. Kolostrum pada sapi mengandung immunoglobulin

yang tinggi dibanding ASI. Immunoglobulin (IgG) hanya ada sebanyak 2% pada

kolostrum manusia sedang pada sapi mengandung IgG 80% atau 40x IgG

kolostrum manusia. Kolostrum bisa didapatkan dalam jumlah banyak karena

kebutuhan anak sapi lebih sedikit dari jumlah kolostrum yang dikeluarkan induk

sapi, akan tetapi pemanfaatan kolostrum untuk kesehatan masih dalam bentuk

susu, oleh karena itu dibutuhkan alternative lain untuk penggantinya. Penelitian

ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian immunoglobulin (IgG)

terhadap Leaky Gut Syndrome.

Penelitian ini akan menggunakan 30 ekor tikus putih( Rattus norvegicus)

jenis Strain wistar yang berusia 3 bulan dengan berat 200-300 g.Penelitian ini

akan dilakukan di Universitas Brawijaya. Pengambilan IgG akan dilakukan di

Laboratorium Teknologi Hasil Ternak, pemeliharaan dan intravena tikus

dilakukan di Laboratorium Farmakologi, tes urin dilakukan di Poliklinik

Universitas Brawijaya

Metode pemurnian immunoglobulin (IgG) dengan sentrifugasi. Metode

penelitian menggunakan 5 perlakuan. Perlakuan dilakukan pada 30 ekor tikus

putih jantan jenis Strain wistar berusia 3 bulan yang ditempatkan dalam kandang

metabolit dan terbagi menjadi 5 kelompok, yaitu: kelompok 1 merupakan

pemberian 20 mg/kg bb antibiotik ,kelompok 2 merupakan pemberian 20 mg/kg

bb IgG, kelompok 3 merupakan pemberian 30 mg/kg bb antibiotik selama 1 bulan

kemudian 40 mg/kg bb IgG selama 1 bulan, kelompok 4 merupakan pemberian

40 mg/kg bb antibiotik selama 1 bulan kemudian 30 mg/kg bb IgG selama 1

bulan, kelompok 5 merupakan pemberian 40 mg/kg bb antibiotik selama 1 bulan

kemudian 40 mg/kg bb IgG. Variabel yang diamati adalah jumlah laktulose dan

mannitol yang ada di urine, intravenous IgG pada tikus, reaksi antibiotik terhadap

usus dan pengaruh IgG terhadap kebocoran usus. Data yang diperoleh dalam

penelitian ini dianalisa secara statistika deskriptif.

Kata Kunci :Leaky Gut Syndrome, Kolostrum, Immunoglobulin

1

BAB 1. PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Masalah

Sekitar 70% penduduk diperkirakan menderita Leaky Gut Syndrome data

dari International Center for Nutritional Research (http://www.icnr,org).

Sekitar 90% penyakit masuk melalui gastrointestinal (usus) terutama pada

anak yang baru lahir (neonatus) sehingga dibutuhkan suatu perlindungan yang

mampu mencegah hal tersebut. Kondisi ini memerlukan faktor kekebalan yang

dapat menghalangi kuman patogen masuk ke dalam saluran gastrointestinal

(usus). Faktor kekebalan ini dapat diperoleh dalam bentuk kolostrum dari induk

sapi.

Sindrom Kebocoran Usus adalah nama yang diberikan kepada gangguan

kesehatan yang sangat umum, yaitu kerusakan tubuh utama (berupa goresan)

terdapat pada lapisan-lapisan usus yang lebih mudah menipis (keropos). Ada

ruang yang tidak normal antara sel-sel dinding usus yang memungkinkan

masuknya bahan-bahan beracun ke dalam aliran darah yang dalam kondisi sehat

bahan-bahan beracun tersebut akan dibersihkan dan dibuang. Jika usus menjadi

bocor akan mengakibatkan bakteri, jamur, parasit, toksin, protein yang tidak

tercerna, lemak dan kotoran masuk melewati usus yang rusak, menipis, keropos,

atau bocor. Padahal dalam kondisi usus sehat bahan-bahan tersebut biasanya tidak

terserap masuk ke dalam aliran darah. Kolostrum adalah satu-satunya zat yang

dapat menutup lubang dilapisan usus (Wyatt, 2014).

Penderita sindrom kebocoran usus kurang kuat melawan virus, bakteri,

parasit, dan infeksi jamur. Sindrom kebocoran usus tidak dapat diatasi secara

medik konvensional dengan penggunaan antibiotik atau obat-obatan kimia karena

akan semakin membuat kebocoran usus bertambah parah,sehingga satu-satunya

solusi pertimbangan hanya menggunakan pendekatan-pendekatan alami non obat-

obatan kimia, dan pendekatan makanan yang menyehatkan. Kolostrum kaya akan

sel aktif imunitas (kekebalan) tubuh, antibodi, dan protein protektif lainnya.

Kolostrum mengandung zat antibodi immunoglobulin yang berperan sebagai

pelindung area yang mudah terserang bakteri, seperti selaput paru-paru, usus dan

tenggorokan. Immunoglobulin yang terkandung dalam kolostrum akan diserap

oleh jaringan epitel pada usus dan menghasilkan lapisan lendir yang berfungsi

untuk melindungi usus pada saat mencerna (Rahmayanti, 2010).

Immunoglobulin (IgG) merupakan komponen terpenting dalam kolostrum

sejenis protein khusus yang dihasilkan tubuh (oleh sel limposit B) sebagai respons

spesifik mikroba. Kolostrum sapi mengandung semua kelompok immunoglobulin

yang ditemukan dalam kolostrum manusia yaitu IgG, IgA, IgE, IgD dan paling

berlimpah adalah IgG sekitar 2%, sedangkan kolostrum sapi mengandung IgG

hingga 80% atau 40 kali dari jumlah IgG kolostrum manusia (Bruce, C.E. 1969).

Menurut Esfandiari et al. (2003) induk sapi perah rata-rata menghasilkan

6-8 liter kolostrum dihari pertama setelah melahirkan, sedangkan anak sapi hanya

2

mengkonsumsi 4-5 liter/hari. Pada hari kedua dan selanjutnya produksi kolostrum

akan meningkat dengan kenaikan antara 1-2 liter/hari/ekor induk sapi. Oleh

karena itu dalam tiga hari akan ada kelebihan kolostrum sekitar 9-12 liter/ekor

induk sapi yang dapat dimanfaatkan untuk konsumsi manusia.

Statistik menunjukkan bahwa sekitar 75-90% dari populasi telah

dipengaruhi oleh intoleransi makanan dan kepekaan. Penelitian menunjukkan

bahwa Leaky Gut Syndrome mempengaruhi jutaan orang di seluruh dunia. Leaky

Gut Syndrome adalah suatu kondisi lemah kronis yang sering tidak terdiagnosis

oleh profesional medis. Banyak yang tidak mengakui tentang kondisi yang ada

ini. Akibatnya, banyak orang tidak mengetahui sehingga mereka saat ini

berurusan dengan gejala yang disebabkan oleh usus bocor yang telah berkembang

dari waktu ke waktu. Kita perlu menekankan masalah ini sangat nyata dan bahkan

lebih penting, kemudian kita perlu memahami bagaimana untuk menghentikan

perkembangan itu

1.2 Rumusan Masalah

1. Bagaimana cara mencegah penyakit Leaky Gut Syndrome?

2. Bagaimana pengobatan Leaky Gut Syndrome tanpa medic konvensional?

3. Bagaimana pemanfaatan kolostrum sapi yang mengandung

Immunoglobulin (IgG) lebih tinggi daripada kolostrum manusia?

1.3 Tujuan

Tujuan yang ingin dicapai dalam penulisan ini adalah untuk memberikan

suatu cara pencegahan penyakit Leaky Gut Syndrome. Pengobatan alternative

yang ditawarkan dengan memanfaatkan kolostrum sapi yang sebelumnya kurang

optimal pemanfaatannya, sehingga penyakit yang pengobatannya tidak bisa

dilakukan dengan cara medik konvensional dapat dilakukan dengan alternative

lain.

1.4 Luaran

Menggunakan kolostrum sebagai obat injeksi penyakit Sindrom

Kebocoran Usus yang bermanfaat, artikel ilmiah penelitian,dan dipublikasi dalam

seminar.

1.5 Manfaat

Hasil penelitian ini diharapkan akan memberikan solusi alternative untuk

pengobatan Leaky Gut Syndrome bagi industri farmasi secara global. Penggunaan

immunoglobulin (IgG) yang tardapat dalam kolostrum sapi berpotensi

menetralisir bakteri, racun, virus, jamur dan beberapa parasit sehingga akan

mencegah Leaky Gut Syndrome dan dapat memberikan keuntungan ekonomis

bagi peternak ataupun dunia farmasi berupa peningkatan produksi. Hasil

penelitian ini diharapkan dapat memberikan sumbangan inovatif bagi

perkembangan ilmu Teknologi Hasil Ternak, terutama penggunaan kolostrum sapi

untuk mencegah penyakit.

3

BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Leaky Gut Syndrome

Pemberian antibiotik yang terlalu sering menyebabkan terbunuhnya

lactobacillus di usus, akibatnya terjadilah yeast overgrowth di saluran pencernaan.

Bentuk mycelium dan chlamydospore dari jamur candida albicans bisa melakukan

invasi ke dalam jaringan, sedangkan bentuk yeast biasanya berkelompok dalam

crypta intestin sehingga sulit dideteksi. Jamur dan yeast ini menempel pada

dinding usus sambil mengeluarkan toxin yaitu gliotoxins dan immunotoxins

lainnya yaitu mannan yang dapat melemahkan sistem imunitas tubuh. Akhirnya

terjadi lagi reinfeksi dan diberi lagi antibiotik yang akan membunuh bakteri

komensal dalam usus, terjadilah vicious cycle. Yeast juga memproduksi suatu

enzim seperti phospholipase ( phospholipid breakdown ) dan protease ( protein

breakdown ). Enzim ini dapat merusak mukosa usus sehingga timbul lubang-

lubang kecil di mukosa usus, ditambah dengan adanya hipermeabilitas dinding

usus maka terjadilah Leaky Gut Syndrome ( Ratnawati, 2003 ).

Diagnosis Leaky Gut Syndrome dapat dilakukan dengan metode

memonitor permeabilitas intestinal, permebilitas intestinalnya diukur dengan cara

mengukur kemampuan dua molekul gula non metabolit yaitu mannitol dan

lactulose . Mannitol mudah diabsorpsi dan dipakai sebagai marker/petanda dari

uptake transcellular, sedangkan lactulose hanya sedikit diabsorpsi dan dipakai

sebagai marker/petanda integritas mukosa. Mannitol (monosakarida) secara pasif

ditransport melalui epitel usus, rata-rata yang diabsorpsi yaitu 14 % dari dosis

yang diberikan dengan range 5% - 25%. Sebaliknya intestin impermeabel

terhadap laktulose (disakarida), yang diabsorpsi hanya < 1 %. Perbedaan ekskresi

lactulose dan mannitol di urin kemudian diukur. Ratio normal lactulose / mannitol

di urin yaitu < 0,03. Ratio yang lebih tinggi menandakan adanya Leaky Gut akibat

rusaknya tight junction. Test lactulose / mannitol ini dilakukan dalam keadan

puasa dan dilakukan dua kali ( Ratnawati, 2003 ).

2.2 Kolostrum

Dr.C.E.Bruce menunjukkan bahwa kolostrum manusia hanya

mengandung 2% IgG (immunoglobulin yang terpenting untuk tubuh), sementara

dalam kolostrum sapi mengandung IgG 40x lebih banyak. Berita baiknya,

kolostrum sapi mudah untuk didapatkan dalam jumlah yang besar (Bruce, C.E.

1969).

Selain kaya nutrisi, kolostrum mengandung komponen bioaktif dalam

jumlah besar, di antaranya immunoglobulin. Hasil penelitian menunjukkan

bahwa konsentrasi IgG total hasil pemerahan pertama cukup tinggi, dengan

konsentrasi sebesar 25.753,13mg.ml. Imunoglobulin utama yang terkandung di

dalam kolostrum sapi adalah immunoglobulin gamma (IgG), oleh karena itu,

kolostrum merupakan sumber lgG yang sangat bermanfaat (Esfandiari, 2008).

4

2.3 Immunoglobulin

Imunoglobulin seperti protein lain dapat mengalami kerusakan bila

terpapar temperatur tinggi. Green et al. (2003) melakukan pasteurisasi kolostrum

dengan pendekatan High Temperature Short Time (HTST). Kolostrum

dipasteurisasi dengan suhu 72 C selama 15 detik. Perlakuan tersebut menurunkan

konsentrasi IgG rata-rata sebesar 28,4%. Penelitian lain menunjukkan bahwa IgG

dalam kolostrum yang dipasteurisasi dengan suhu 71,7 C selama 15 detik

menurunkan konsentrasi IgG sampai 25% (Stabel et al. 2004). Penelitian

McMartin et al. (2006) memperlihatkan bahwa pemanasan kolostrum dengan

suhu 60 C dalam waktu 120 menit tidak mempengaruh konsentrasi IgG. Selain

itu, perlakuan tersebut juga tidak mengubah viskositasnya. Pasteurisasi

konvensional pada suhu 63 C selama 30 menit hanya menurunkan 12,3% IgG

(Melyan et al. 1995).

2.4 Intravena

Antibodi jika diberikan secara oral akan melewati proses pencernaan

sebelum dapat menimbulkan efek, pH rendah pada lambung akan menurunkan

konsentrasi imunoglobulin secara signifikan. Imunoglobulin susu juga didegradasi

dalam saluran pencernaan oleh enzim proteolitik seperti pepsin, tripsin,

kemotripsin, karboksipeptidase, dan elastase. Imunoglobulin dipecah menjadi

fragmen F(ab)2, Fab, dan Fc ( Mehra et al 2006 ).

Injeksi adrenalin dilakukan secara intra vena pada ekor tikus, yang

dilakukan dengan cara; 1)masukkan tikus ke dalam kotak berlobang, sehingga

ekor bisa ditarik keluar, 2) kompres ekor tikus dengan kapas yang dibasahi air

hangat selama sekitar 5 menit agar terjadi vasodilatasi vena, 3) injeksi vena

dengan kemiringan 15 derajat, lalu diaspirasi. Apabila telah yakin jarum sudah

masuk ke dalam vena (spuit terdapat darah saat diaspirasi), maka injeksi perlahan

dilakukan (Maliya,2008).

Gambar 1. Intravena pada tikus Gambar 2. Cara memegang tikus

5

Gambar 3. Cara menghandel tikus untuk pemberian obat baik injeksi maupun

peroral.

Gambar 4. Alat untuk penghandel hewan laboratorium khusus hewan pengerat

(rodensia).

BAB 3. METODE PENELITIAN

3.1 Tahap Penelitian

3.1.1 Lokasi Penelitian

Pengambilan sampel akan dilakukan di daerah Pujon sebagai sentra sapi

perah tertinggi di Malang. Perawatan dan intravena tikus putih akan dilakukan di

Laboratorium Farmakologi, ekstraksi immunoglobulin (IgG) dilakukan di

Laboratorium Teknologi Hasil Ternak, uji urine dilakukan di Poliklinik

Universitas Brawijaya.

3.1.2 Pengambilan Sampel dan Pemisahan Whey Kolostrum

Sampel kolostrum dari hasil pemerahan pertama sapi setelah melahirkan

diambil sebanyak 800 ml dipanaskan pada suhu 60C selama 120 menit agar

konsentrasi IgG tidak berkurang. Skim kolostrum dipisahkan dari kolostrum

dengan cara sentrifugasi (12.000 rpm) selam 30 menit pada suhu 4C. Skim

kolostrum yang didapatkan ditambah dengan HCL 2 N hingga pH 4,6. Endapan

kasein yang terbentuk dipisahkan dari whey dengan menggunakan sentrifugasi

(12.000 rpm) selama 30 menit pada suhu 4C. Whey asam ini dinetralkan ke pH

6,8 dengan NaOH 2 N dan disentrifugasi kembali (I2.000 rpm) selama 30 menit

pada suhu 4C. Supernatan diambil untuk pemisahan immunoglobulinnya.

3.1.3 Pemisahan IgG

Pemisahan immunoglobulin (IgG) dari whey kolostrum dilakukan dengan

metode ekstraksi misel terbalik. Whey kolostrum diencerkan sampai 5 kali

6

volume awalnya dengan 50 mM phosphate buffer pH 6.35 yang mengandung 100

mM sodium klorida. Larutan tersebut kemudian dicampur dengan isooctane yang

mengandung 50 mM bis-(2-ethylhexyl) natrium sulfosuccinate (AOT) dengan

volume yang sama, dan disentrifugasi pada 200 rpm pada 25 C selama 10 menit.

Setelah ekstraksi, campuran dipisahkan ke fase air dan fase misel terbalik dengan

sentrifugasi.

3.1.4 Pemeliharaan Tikus

Tikus yang digunakan adalah tikus putih jantan (Rattus norvegicus) jenis

strain wistar yang berusia 3 bulan dengan berat 200-300 g yang diperoleh dari

BPOM Surabaya. Tikus yang digunakan berjumlah 30 ekor dan ditempatkan pada

kandang metabolit dimana 1 kandang berisi 6 tikus. Tikus diadaptasikan selama 5

hari dengan pemberian ransum standar BPOM. Setelah 5 hari tikus diberi

perlakuan.

3.1.5 Pemberian antibiotik dan IgG

Pemberian antibiotik dilakukan secara oral dengan menggunakan sonde

lambung. Pemberian antibiotik jenis tetracycline sesuai dengan Farmakope

Indonesia III 20 mg/kg bb, 30mg/kg bb dan 40 mg/kg bb 4 kali sehari Sementara

pemberian IgG dilakukan secara Intravena/intravenous melalui pembuluh darah

tikus dengan dosis yang sama dengan dosis antibiotik 2 kali seminggu. Perlakuan

dilakukan pada 30 ekor tikus jantan jenis Strain wistar yang terbagi menjadi

beberapa kelompok,yaitu:

1. Kelompok 1 merupakan pemberian 20 mg/kg bb antibiotik.

2. Kelompok 2 merupakan pemberian 20 mg/kg bb IgG.

3. Kelompok 3 merupakan pemberian 30 mg/kg bb antibiotik selama 1 bulan,

kemudian 40 mg/kg bb IgG selama 1 bulan.


kemudian 30 mg/kg bb IgG selama 1 bulan.


kemudian 40 mg/kg bb IgG.

3.1.6 Uji Urin

Sebelum perlakuan tikus dipuasakan selama 18-24 jam lalu diberi louding

dose dengan air hangat dosis 50 ml/kg bb secara oral. Lalu diberi minuman berupa

campuran 5 gr mannitol dan 5 gr lactulose dengan menggunakan sonde lambung

Setelah 6 jam diukur jumlah laktulose dan mannitol yang ada di urine. Urine

ditampung dalam gelas piala. Jika di urine didapatkan lactulose berarti usus telah

mengabsorpsinya. Pada keadaan normal lactulose yang diabsorpsi < 215 mg, tapi

pada Leaky Gut Syndrome dapat mengabsorpsi sampai 500 mg.

3.2 Indikator Capaian

1. Lokasi Penelitian : Pada tahap ini ditentukan tempat yang akan dijadikan

tempat penelitian.

2. Pengambilan Sampel dan Pemisahan Whey Kolostrum : Pada tahap ini

diperoleh sampel yang akan diuji.

7

3. Pemisahan IgG : Tahap ini merupakan perkembangan tahap pemisahan

whey sehingga diperoleh IgG secara murni.

4. Pemeliharaan Tikus : Pada tahap ini diperoleh hewan coba yang sesuai

standar penelitian.

5. Pemberian antibiotik dan IgG : Tahap ini merupakan tahap awal untuk

memperoleh dan menyusun data.

6. Tes urin : Tahap ini merupakan perkembangan tahap pemberian antibiotik

dan IgG sehingga diperoleh perbandingan data penelitian.

3.3 Variabel yang Diamati

1. Jumlah laktulose dan mannitol yang ada di urine.

2. Intravenous IgG pada tikus.

3. Reaksi antibiotic terhadap usus.

4. Pengaruh IgG terhadap kebocoran usus.

3.4 Teknik Pengumpulan Data

Penelitian ini terdiri dari 2 tahap. Tahap pertama merupakan penelitian

pendahuluan serta tahap kedua merupakan penelitian utama. Penelitian

pendahuluan meliputi (1) persiapan kolsotrum untuk pengekstraan (2) pemurnian

IgG. Penelitian utama meliputi (1) pemeliharaan tikus dikandang metabolit (2)

pemberian antibiotik dan IgG (3) pengujian urin tikus.

Penelitian Pendahuluan

Gambar 5. Diagram Penelitian Pendahuluan

Kolostrum di pasteurisasi di suhu 60C selama 120 menit

Sentrifugasi 12000 rpm 30 menit suhu 4C

HCL 2n pH 4,6( sentrifugasi 12000 rpm 30 menit 4C

NaOH 2 N pH 6,8 (sentrifugasi 12000 rpm 30 menit 4C)

= Whey

Pengenceran whey 5 kali volume awal dengan 50mM phosphate buffer pH 6,35(100 mM sodium klorida)

Larutan dicampur dengan isooctane(50 mM bis-(2-ethylhexyl) natrium sulfosuccinate (AOT) ) pada volume yang sama

Sentrifugasi 200 rpm 25C 10 menit

Pemishan ke fase cair dan fase misel terbalik dengan sentrifugasi sampai terbentuk supernatan

8

Penelitian Utama

Gambar 6. Diagram Penelitian Utama

3.5 Analisis Data

Data yang diperoleh dalam penelitian ini dianalisa secara statistika

deskriptif. Statistika deskriptif adalah bidang statistika yang membicarakan cara

atau metode mengumpulkan, menyederhanakan, dan menyajikan data sehingga

bisa memberikan informasi.

BAB 4. BIAYA DAN JADWAL KEGIATAN

4.1 Anggaran Biaya

Tabel 2.1 Ringkasan Anggaran Biaya PKM-P

No Jenis pengeluaran Biaya (Rp)

1 Peralatan Penunjang 3.068.000

2 Bahan Habis Pakai 4.150.000

3 Perjalanan 2.480.000

4 Lain-lain 1.625.000

Jumlah(Rp) 11.323.000

4.2 Jadwal Kegiatan

Lampiran 3.1 Jadwal Kegiatan

No Bulan 1 2 3 4

Minggu 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4

Jenis Kegiatan

1 Persiapan bahan

2 Persiapan

laboratorium

3 Adaptasi tikus

4 Pengekstakan dan

Tikus dalam kandang metabolit diadaptasikan selama 5 hari dengan ransum standar BPOM

Tikus diberi Antibiotik selama 1 bulan dengan dosis dan perlakuan yang sudah ditentukan

Tikus dites urinnya

Tikus diberi Ekstrak IgG selama satu bulan dengan dosis dan perlakuanyang sudah ditentukan

Tikusdites urinnya

9

koleksi

Immunoglobulin

5 Pemberian

antibiotik

6 Tes urin

7 Pemberian

immunoglobulin

8 Tes urin

9 Tabulasi dan

analisis data

10 Pembuatan paper

11 Pembuatan

laporan akhir

Daftar Pustaka

Bruce, CE. 1969 Natural History, , Feb. Dr. C. E. Bruce demonstrates that human

contains only 2% IgG (the bodys most important immunoglobulin) while

contained a phenomenal up to 20 times that amount.

Esfandiari A, Widhyari SD, Wibawan IWT, Sajuthi D, Sutama IK. 2003.

Pemanfaatan Keterlimpahan Kolostrum Sapi sebagai Sumber

ImunoglobulinPengganti dalam Rangka Transfer Kekebalan Pasif pada

Anak Kambing Neonatus. Laporan Penelitian Hibah Bersaing XVI.

Lembaga Penelitian danPemberdayaan Masyarakat, Institut Pertanian

Bogor

Esfandiari A, Wibawan IWT, Murtini S, Widhyari SD, Prasetyo BF. 2008.

Produksi Kolostrum Antivirus Avian Influenza Dalam Rangka

Pengendalian Inveksi Virus Fluburung. Jurnal Ilmu Pertanian Indonesia.

13(2): 69-79.

Maheswari RRA, Setiawan J, Mulyanto S. Batubara I, Sumantri C, Farajallah A.

2007. Lactoferrinn Identification on Kacang Goat Milk Using Single

Radial Immunodifusion and Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamyde

Gel Electrophoresis Methods. Jurnal Ilmu Pertanian Indonesia.

12(3):163-172.

Maliya A, Pratiwi A. 2008. Pengaruh Pemberian Perasan Pare Terhadap Profil

Lipid Serum Tikus Wistar. Jurnal Kesehatan.1(2): 91-96.

10

McMartin S, Godden S, Metzqer L, Feirtaq J, Bey R, Stabel J, Goyal S, Fetrow

J,Meylan M, Rings M, Shulaw WP, Kowalski JJ, Bech-Nielsen S, Hoffsis

GF. 1995. Survival of Mycobacterium paratubercolosis and Preservation

ofImmunoglobulin G In Bovine Colostrum Under Experimental Condition

Simulation Pasteurization. Am J Vet Res.57:1580-1585.

Mehra R, Marnila P, Korhonen H. 2006.Milk Immunoglobulins for Health

Promotion. Int Dairy J.16(11): 1262-1271.

Ratnawati, H.2003.Leaky Gut sebagai Penyebab Gangguan Gastrointestinal

pada ASD JKM. 2(2): 42-55

Stabel JR, Hurd S, Calvente L, Rosenbusch RF. 2004. Destruction of

Mycobacterium Paratuberculosis, salmonella spp., and Mycoplasma

spp.in Raw Milk by A Commercial onfarm high-temperature, short-time

Pasteurizer. J Dairy Sci. 87: 21772183.

Su CK, Chiang BH. 2003. Extraction of Immunoglobulin-G from Colostral Whey

by Reverse Micelles. J Dairy Sci. 86:16391645.

Wells S, Jones HC. 2006. Heat treatment of bovine colostrum. I: effect of

temperature on viscosity and immunoglobulin G level. J Dairy Sci.

89(6):2110-2118.

Wu M, Wang X, Zhang Z, Wang R. 2014. Isolation and Purification of Bioactive

Proteins from Bovine Colostrum.www.intechopen.com: di akses pada 23

september 2014 pukul 9:53 am WIB

Wyatt, DA.2014. Leaky Gut Syndrome & Bovine Colostrum. Director of Research

Center for Nutritional Research. www.centerfornutritionalresearch.org:

diakses pada 19 september 2014 pukul 11:02 am W

16

3.2.3 Biodata Dosen Pembimbing

A. IdentitasDiri

1 Nama lengkap (dengan

gelar)

Firman Jaya,S.Pt.,MP

2 Jabatan Fungsional Asisten Ahli

3 Jabatan Struktural -

4 Golongan/ Pangkat III-B/ Penata Muda Tk. II

5 NIP/NIK/Identitas

lainnya

19820308 201012 1 001

6 NIDN 0008038205

7 Tempat dan Tanggal

Lahir

Bandung, 8 Maret 1982

8 Alamat Kantor Bagian Teknologi Hasil Ternak Fakultas

Peternakan Universitas Brawijaya

Jl. Veteran Malang 65145

9 Nomor Telepon/Faks 0341-575852, 553513/ 0341-584727

10 Alamat email/ website [email protected]/www.fapet.ub.ac.id

11 Alamat Rumah Jl. Watu Gilang 17 A Malang 65145

12 Nomor Telepon/Faks/

HP

- / Hp. 081 334656604

13 Alamat e-mail/ blog [email protected]

[email protected]

www.firmanjaya.lecture.ub.ac.id

14 Lulusan yang Telah

Dihasilkan

-

15 Keahlian Senyawa bioaktif madu, susu dan

mikrobiologi

16 Mata Kuliah yang

Diampu

1. Agribisnis Aneka Ternak

2. Ilmu dan Teknologi Pengolahan Susu

3. Mikrobiologi

4. Peralatan dan Teknik Analisis

Laboratorium

5. Biokimia

6. Penanganan Hasil Ternak

B. Riwayat Pendidikan

S1 S2 S3

Nama

Perguruan

Tinggi

Universitas

Brawijaya

Universitas

Brawijaya

Bidang Ilmu Teknologi Hasil

Ternak

Teknologi Pangan

17

Tahun Masuk-

Lulus

2000-2006 2006-2008

Judul

Penelitian

Pengaruh

Pemberian Ekstrak

Propolis terhadap

Sistem Kekebalan

Seluler

pada Tikus Putih

(Rattus norvegicus)

Strain Wistar

Efek Proses

Pemanasan pada

Aktifitas Antioksidan

Rimpang Jahe Gajah

(Zingiber officinale

roscoe) dan

Pemanfaatan Madu

sebagai Antioksidan

Alami untuk

Minuman Fungsional

Pembimbing - Dr.Ir.Lilik Eka

Radiati,MS

- Khotibul Umam

Al Awaly, S.Pt.,

M.Si

- Dr. Umi Kalsum

- Prof.Dr.Ir.Hari

Purnomo, M.App.Sc

- Prof.Dr.Ir.Simon B.

Widjanarko,M.App.S

c

C. Pengalaman Penelitian dalam 5 Tahun Terkahir

No Tahun Judul Penelitian (sebagai)

Sumber Dana

Sumber Jumlah

(Juta Rp)

1 2011 Kajian Penggunaan Carboxy

Methyl Celulosa (CMC) sebagai

Bahan Penstabil Ditinjau dari

Kualitas Fisikokimia dan

Organoleptik Es Mambo

Probiotik (Anggota)

DPP/SPP

FPt-UB

3.000.000

2 2012 Kajian Kefir Susu Kambing

dengan Faktor

Penambahan Madu dan Lama

Fermentasi (Ketua)

DPP/SPP

FPt-UB

3.000.000

3 2012-

2014

Peningkatan Agroindustrin Susu

Melalui Harmonisasi

Implementasi Good Farming

Practices, Diversifikasi Produk

dan Traceability di Kabupaten

Probolinggo (Anggota)

Riset

Andalan

Perguruan

Tinggi dan

Industri

(RAPID)

195.000.000

18

D. Pengalaman Pengabdian kepada Masyarakat dalam 5 Tahun

Terakhir

No Tahun Judul Pengabdian kepada

Masyarakat

Sumber Dana

Sumber Jumlah

(Juta Rp)

1 2011 Penyusunan dan Pelatihan

Pemanfaatan Daging Ayam Petelur

Afkir sebagai Produk Nugget

(Anggota)

DPP/SPP

FPt-UB

1.500.000

2 2012 Penyuluhan dan Pelatihan

Pembuatan Bakso Ayam di Desa

Sumberejo Kecamatan

Poncokusumo Kabupaten Malang

(Ketua)

DPP/SPP

FPt-UB

1.500.000

3 2013 IbM Kelompok Usaha Unggas Kota

Batu

DIKTI

4 2014 IbM Kelompok Usaha Es Krim

Nabati (Mellorine) Kota Batu

DIKTI

E. Pengalaman Penulisan Artikel Ilmiah dalam Jurnal dalam 5 Tahun

Terakhir

No Judul Artikel Ilmiah

Volume,

Nomor,

Halaman

dan Tahun

Nama Jurnal

1. Pengaruh Pemberian Propolis terhadap

Sistem Kekebalan Seluler pada Tikus

Putih (Rattus norvegicus) Strain Wistar.

9 (1): 1-9,

2008

Jurnal

Teknologi

Pertanian

2. Pengaruh Substitusi Susu Sapi dengan

Susu Kedelai serta Besarnya Konsentrasi

Penambahan Ekstrak Nenas (Ananas

comosus) terhadap Kualitas Fisik dan

Kimia Keju Cottage

4 (1): 46-54,

2009

Jurnal Ilmu

dan

Teknologi

Hasil Ternak

3. Peningkatan Kinerja Inseminator dalam

Pengembangan Budidaya Peternakan Era

Otonomi Daerah.

9 (2): 147-

152,2009

Jurnal Buana

Sains

4. The Effects of Type and Time of Thermal

Processing on Ginger (Zingiber

officinaleRosc.) Rhizome Antioxidant

17: 335-347,

2010

International

Food

Research

19

Compounds and Its Quality. Journal

5. Pembuatan Minuman Probiotik (yoghurt)

dari Proporsi Susu Sapi

dan Kedelai dengan Isolat Lactobacillus

casei dan Lactobacillus plantarum

16 (1): 13-

17, 2011

Jurnal Ilmu

dan

Teknologi

Hasil Ternak

6 Sifat Fisiko-Kimia Mayonnaise dengan

Berbagai Tingkat Konsentrasi Minyak

Nabati dan Kuning Telur Ayam Buras

21 (1): 1-6,

2011

Jurnal Ilmu-

ilmu

Peternakan

F. Pengalaman Penyampaian Makalah secara Oral pada Pertemuan/

Seminar Ilmiah dalam 5 Tahun Terakhir

No Nama Pertemuan

Ilmiah/ Seminar

Judul Artikel Ilmiah Waktu dan

Tempat

1. 11th ASEAN FOOD

CONFERENCE

2009

The Extracts of Thermal

Processed Ginger (Zingiber

officinale Rosc.) Rhizome

Combined with Honey as

Natural Antioxidant to Produce

Functional Drink

Brunei

Darussalam 21-

23, Oktober

2009

2 The 4th

SAADC 2013 Natural Antioxidant Properties

of Functional Drink Prepared

by Combination of Local

Honey and Red Ginger Extract

Lanzhou, 26-31

Juli 2013

Semua data yang saya isikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar

dan dapat dipertanggungjawabkan secara hukum. Apabila di kemudian hari

ternyata dijumpai ketidaksesuaian dengan kenyataan, saya sanggup menerima

risikony

Demikian biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah

satu persyaratan sebagai Dosen Pembimbing PKM.

Malang, 22 September 2014

Dosen Pembimbing,

Firman Jaya, S.Pt.,MP

NIP. 19820308 201012 1 0

20

Lampiran 3.3 Justifikasi Anggaran Kegiatan

1.Peralatan Penunjang

Material Justifikasi

Pemakaian

Kuantitas Harga

Satuan (Rp)

Jumlah (RP)

Sewa

Laboratorium

Teknologi

Hasil Ternak

Untuk ekstraksi

immunoglobulin

dari kolostrum

1 200.000 200.000

Laboratorium

Farmakologi

Fakultas

Kedokteran

Untuk intravena

tikus putih

1 300.000 300.000

Alat

penghandel

hewan

pengerat

Untuk intravena

tikus

5 75.000 375.000

Sewa alat

pasteurisasi

Untuk

pasteurisasi

kolostrum

1 100.000 100.000

Sewa alat

sentrifugasi

(sentrifugator)

Untuk proses

ekstraksi

immunoglobulin

1 100.000 100.000

PH meter Untuk

mengukur PH

1 175..000 175..000

Sewa gelas

piala

Untuk

menampung

urin

30 15.000 450.000

Tes urin di

Poliklinik UB

Untuk tes urin 60 10.000 600.000

Spuit Untuk intravena 240 3.200 768.000

Sub Total (Rp) 3.068.000

2.Bahan Habis Pakai


Pemakaian

Kuantitas Harga

Satuan

(Rp)

Jumlah

(RP)

Tikus putih Hewan

coba

30 35.000 1.050.000

HCL 2 N Ekstraksi

IgG

1 100.000 100.000

NaOH 2 N Ekstraksi 1 100.000 100.000

21

IgG

Kolostrum Sampel 8 20.000 160.000

Antibiotik (Tetracyclin) Sampel 10 64.000 640.000

Sodium klorida Ekstraksi

IgG

10 3.500 35.000

AOT(BIS(2-

ETHYLHEXYL)SODIUM

SULFOSUCCINATE)

Ekstraksi

IgG

1 185.000 185.000

Posohate Buffered Ekstraksi

IgG

1 150.000 150.000

Mannitol Tes urine 1 135.000 135.000

Lactulose Tes urine 1 120.000 120.000

Ransum tikus Makanan

tikus

5 95.000 475.000

Kandang dan peralatan Untuk

memelihara

tikus

5 200.000 1.000.000


3.Perjalanan


Perjalanan

Kuantitas Harga

Satuan (Rp)

Jumlah (RP)

Perjalanan

survey ke

Batu,

Malang

Survei tempat

pengambilan

sampel

3 100.000 300.000

Perjalanan

pengambilan

sampel

Membeli sampel 8 100.000 800.000

Perjalan ke

Poliklinik

UB

Tes urine 6 30.000 180.000

Perjalanan

ke BPOM

Surabaya

Membeli tikus

putih dan

ransum standart

BPOM

5 80.000 400.000

Perjalanan

ke Malang

Membeli

kandang dan

perlengkapan

4 100.000 400.000

Perjalanan

ke malang

Membeli bahan

kimia,spuit,gelas

piala,dan sonde

4 100.000 400.000

22

lambung


4.Lain-lain

Material Justifikasi Perjalanan Kuantitas Harga

Satuan

(Rp)

Jumlah

(RP)

Dokumentasi Sewa kamera 1 50.000 50.000

Proposal Kertas,print,dll 1 50.000 50.000

Laporan

kemajuan

Kertas,print,dll 1 75.000 75.000

Laporan

akhir

Kertas,print,dll 1 100.000 100.000

Artikel

ilmiah

Kertas,print,publikasi,dll 1 150.000 150.000

Seminar Pendaftaran 2 600.000 1.200.000


Total Keseluruhan (Rp) 11.323.000

Lampiran 3.4 Susunan Organisasi Tim Kegiatan dan Pembagian Tugas

No Nama / NIM Program

Studi

Bidang

Ilmu

Alokasi

Waku

(Jam /

Minggu )

Uraian

Tugas

1 Wiwi Anggraeni

/135050101111192

Peternakan Peternakan 28 PJ

Pengambi

lan Bahan

dan

Pengekstr

aan Whey

Kolostru

m

2 Yuli Fitria S

/135050101111197


Perizinan

dan

Logbook

3 Triana Fakuwita

/135100200111009

Teknologi

Pertanian

Keteknikan

Pertanian

28 PJ

Analisa

Data dan

Melakuka

n Tes

23

Urin

4 Miftahul Munir

/125050100111125


Perlengka

pan dan

Pengekstr

aan IgG

5 Ashri Almiahsari

/135070501111024

Kedoktera

n

Farmasi 28 PJ

Keuangan

dan

Memberi

Perlakuan

Pada

Tikus

wiwi anggraeni universitas brawijaya pkmp

Documents