uji sitotoksik (brine shrimp lethality test) senyawa

14
UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA ASAM 3-KLOROBENZOIL SALISILAT DAN ASAM O-(4-METOKSIBENZOIL) SALISILAT MENGGUNAKAN LARVA UDANG Artemia salina Leach ANGELIA WULANSARI BUDIMAN 2443007056 FAKULTAS FARMASI UNIKA WIDYA MANDALASURABAYA 2011

Upload: trinhdiep

Post on 16-Jan-2017

240 views

Category:

Documents


6 download

TRANSCRIPT

Page 1: UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA

UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA ASAM 3-KLOROBENZOIL SALISILAT

DAN ASAM O-(4-METOKSIBENZOIL) SALISILAT MENGGUNAKAN LARVA UDANG Artemia salina Leach

ANGELIA WULANSARI BUDIMAN 2443007056

FAKULTAS FARMASI

UNIKA WIDYA MANDALASURABAYA

2011

Page 2: UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA
Page 3: UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA
Page 4: UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA
Page 5: UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA

ABSTRAK

UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA ASAM 3-KLOROBENZOIL SALISILAT DAN

ASAM O-(4-METOKSIBENZOIL) SALISILAT MENGGUNAKAN LARVA UDANG Artemia salina Leach

Angelia Wulansari Budiman

2443007056

Pada penelitian sebelumnya dilakukan modifikasi asam salisilat untuk mendapatkan aktivitas yang lebih baik daripada asam asetilsalisilat, namun belum diketahui sitotoksisitas dari senyawa baru tersebut. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui sitotoksisitas dari asam 3-klorobenzoil salisilat dan asam O-(4-metoksibenzoil) salisilat terhadap larva Artemia salina Leach dibandingkan dengan asam asetilsalisilat serta mengetahui LC50 dari senyawa asam 3-klorobenzoil salisilat, asam O-(4-metoksibenzoil) salisilat dan asam asetil salisilat. Dalam penelitian ini setiap senyawa dibuat 5 konsentrasi berbeda yang diperoleh dari uji pendahuluan asam 3-klorobenzoil salisilat dan asam O-(4-metoksibenzoil) salisilat dibuat 250, 300, 350, 400 dan 450 ppm. Sedangkan asam asetilsalisilat dibuat 150 ppm, 200 ppm, 250 ppm, 300 ppm dan 350 ppm. Tiap senyawa tersebut diujikan pada larva Artemia salina Leach dengan waktu pengamatan selama 24 jam. Data yang diperoleh dihitung dengan menggunakan Probit Analysis Program. Dari program ini akan didapatkan nilai LC50. Parameter yang digunakan dalam penelitian ini adalah untuk ekstrak tumbuhan yang diuji dikatakan mempunyai efek toksik apabila nilai LC50 kurang dari 1000 mg/ml dan untuk senyawa murni bila senyawa tersebut mempunyai nilai LC50 kurang dari 30 g/ml. Dari Probit Analysis Program didapatkan LC50 asam 3-klorobenzoil salisilat adalah 349,87 ppm, asam O-(4-metoksibenzoil) salisilat adalah 374,61 ppm sedangkan asam asetilsalisilat adalah 255,60 ppm. Berdasarkan harga LC50 menunjukkan bahwa asam 3-klorobenzoil salisilat, asam O-(4-metoksibenzoil) salisilat dan asam asetilsalisilat tidak toksik. Kesimpulan ini sesuai dengan parameter yang digunakan yaitu suatu senyawa aktif dikatakan toksik jika nilai LC50-nya kurang dari 30 ppm. Kata kunci : asam 3-klorobenzoil salisilat, asam O-(4-metoksibenzoil)

salisilat, toksisitas, larva Artemia salina Leach, LC50

i

Page 6: UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA

ABSTRACT

CYTOTOXICITY ASSAY (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST ) OF 3-CHLOROBENZOYL SALICYLIC ACID AND

O-(4-METHOXYBENZOYL)SALICYLIC ACID USING Artemia salina Leach SHRIMP LARVAE

Angelia Wulansari Budiman

2443007056 In the previous research, salicylic acid modification was conducted to achieve a better activity than acetyl salicylic acid, but the cytotoxicity of the new compounds were still unknown. This research was conducted to determine the cytotoxicity of the 3-chlorobenzoyl salicylic acid and O-(4-methoxybenzoyl) salicylic acid against larvae of Artemia salina Leach compared with acetyl salicylic acid, by determining the LC50 of the acid compound 3-chlorobenzoyl salicylic acid, O-(4-methoxybenzoyl) salicylic acid and acetyl salicylic acid. In this study each compound was made into five different concentrations which were obtained from the preliminary assay. Three-chlorobenzoyl salicylic acid and O-(4-methoxybenzoyl) salicylic acid were made into 250, 300, 350, 400 and 450 ppm. Acetyl salicylic acid was made into 150, 200, 250, 300 and 350 ppm. Each compound was tested on larvae of Artemia salina Leach for 24 hours. The data obtained was calculated by Probit Analysis Program. The value obtained was LC50. The parameters used in this study was based on the LC50 values, which was categorized as having toxic effects if LC50 value of the plant extract was less than 1000/ml and less than 30/ml for pure compound. The LC50 values obtained from Probit Analysis Program of 3-chlorobenzoyl salicylic acid, O-(4-methoxybenzoyl) salicylic acid and acetylsalicylic acid were 349.87, 374.61 and 255.60 ppm respectively. Based on the LC50 obtained, it can be concluded that 3-chlorobenzoyl salicylic acid, O-(4-methoxybenzoyl) salicylic acid and acetylsalicylic acid were not toxic. Key words : 3-chlorobenzoyl salicylic acid, O-(4-methoxybenzoyl)

salicylic acid, cytotoxicity, Artemia salina Leach, larvae, LC50

ii

Page 7: UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA

KATA PENGANTAR

Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas segala rahmat dan

karuniaNya penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Uji

Toksisitas (Brine Shrimp Letality Test) Senyawa Asam 3-Klorobenzoil

Salisilat dan Asam O-(4-Metoksibenzoil) Salisilat Menggunakan Larva

Udang Artemia salina Leach” ini, yang disusun dan diajukan untuk

memenuhi persyaratan guna memperoleh gelar Sarjana Farmasi Universitas

Katolik Widya Mandala Surabaya.

Telah diselesaikannya skripsi ini tidak mungkin terlepas dari

dukungan, bantuan dan bimbingan baik secara langsung maupun tidak

langsung dari berbagai pihak. Oleh karena itu, dalam kesempatan ini dengan

segala ketulusan dan kerendahan hati, ucapan terima kasih disampaikan

kepada :

1. Prof. Dr. Bambang Soekardjo, SU., Apt., sebagai pembimbing I dan

Catherina Caroline, S.Si., M.Si., Apt., sebagai pembimbing II, yang

telah meluangkan banyak waktu, tenaga, pikiran, dan dengan penuh

kesabaran mengarahkan serta memberikan petunjuk yang amat

berharga bagi penulisan skripsi ini.

2. Prof. Dr. Siswandono, MS., Apt., dan DR. Ratna Megawati

Widharna, SKG, MFT., sebagai tim penguji, yang telah memberikan

kritik dan saran yang sangat berguna bagi penulisan skripsi ini.

3. Prof. Dr. Ami Soewandi, Apt, selaku Rektor Universitas Katolik

Widya Mandala Surabaya yang telah memberikan kesempatan dan

fasilitas kepada penulis selama mengikuti dan menyelesaikan

pendidikan program sarjana.

iii

Page 8: UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA

4. Martha Ervina, S.Si., M.Si., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi

Universitas Katolik Widya Mandala yang telah memberikan fasilitas

dan bantuan dalam penyusunan skripsi ini.

5. Catherina Caroline, S.Si., M.Si., Apt., selaku Sekretaris Dekan FF

UKWMS yang telah memberikan bantuan serta dukungan hingga

diselesaikannya naskah skripsi ini.

6. Dra. Hj. Liliek S. Hermanu, MS., Apt. selaku dosen wali studi yang

telah banyak memberikan bimbingan dan nasehat dalam kepada

penulis selama melaksanakan studi.

7. Henry Kurnia S., S.Si., MSi., Apt. selaku koordinator Laboratorium

Ilmu Instrumen dan staf Laboratorium Ilmu Instrumen yang telah

banyak memberikan bantuan.

8. Laboran – laboran : mbak Mega, pak Samsul, bu Nina, mas Didik

yang telah banyak membantu kelancaran proses penelitian, serta doa

dan dukungannya.

9. Bapak Abror selaku staf pelaksana stasiun lapangan praktek

pembenihan, Akademi Perikanan Sidoarjo, atas pemberian ijin untuk

melaksanakan penelitian di Pembenihan Akademi Perikanan

Sidoarjo, Lamongan.

10. Bapak Azis selaku karyawan di Pembenihan Akademi Perikanan

Sidoarjo, Lamongan atas bantuan dan bimbingan selama penelitian

ini berlangsung.

11. Orang tua tercinta, Papa Sugianto Budiman dan Mama Nurina

Damayanti yang tiada henti memberikan dukungan moral, spiritual

dan material, tiada hentinya memberikan perhatian, doa, dan

semangat kepada penulis dengan penuh kasih sayang dan kesabaran.

iv

Page 9: UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA

12. Adikku Rahmad Darmawan yang telah memberikan doa, dukungan,

dan bantuannya selama ini.

13. Sahabat-sahabat Silfiana, Merry, Senny, Savitri, Devy, Anthony,

Riwok, Beby, dan semua sahabat serta teman-teman yang tidak bisa

disebutkan satu-persatu yang telah menemani dan memberikan

dukungan moral serta mengajarkan arti persahabatan dan teman yang

telah menemani dalam suka dan duka.

14. Teman-teman seperjuangan FARMASI angkatan 2007 yang telah

memberikan kebersamaan yang baik selama ini dan semua pihak

yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu dan telah memberikan

kelancaran dalam penelitian dan penyelesaian skripsi ini.

15. Semua staf maupun karyawan yang ada di Unika Widya Mandala

Surabaya yang telah mendukung penulisan skripsi ini.

Skripsi ini masih jauh dari sempurna. Akhir kata dengan segala

kerendahan hati, semoga hasil penelitian ini dapat memberikan sumbangan

yang bermanfaat bagi kepentingan masyarakat luas pada umumnya dan bagi

perkembangan ilmu pengetahuan pada khususnya.

Surabaya, 11 April 2011

v

Page 10: UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA

DAFTAR ISI

Halaman

ABSTRAK………………………………………………………….......

ABSTRACT……………………………...……………………………....

KATA PENGANTAR……………………………….………………....

DAFTAR ISI………………………………………….…………….......

DAFTAR LAMPIRAN……………………………………..………......

DAFTAR TABEL………………………………………….……….......

DAFTAR GAMBAR…………………………………….....………......

BAB

1 PENDAHULUAN………………………………………...........

2 TINJAUAN PUSTAKA……………………………………......

2.1. Tinjauan tentang Asam Asetilsalisilat………………........

2.2. Tinjauan tentang Asam 3-Klorobenzoil Salisilat................

2.3. Tinjauan tentang Asam O-(4-Metoksibenzoil) Salisilat.....

2.4. Tinjauan tentang Hewan Coba………………...................

2.5. Tinjauan tentang Sitotoksisitas.........………….................

2.6. Tinjauan mengenai Metode Uji Kematian Larva Artemia salina Leach atau Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT)..............................................................................

2.7. Tinjauan tentang Uji Kemurnian Hasil Sintesis………….

3 METODOLOGI PENELITIAN..…………………………….....

3.1. Bahan dan Alat ……………..…………………………....

3.2. Hewan Coba………………………...................................

3.3. Tahapan Penelitian.............................................................

3.4. Variabel Penelitian…...…………………………………..

3.5. Analisis Data……………………………………………...

i

ii

iii

vi

viii

ix

x

1

5

5

6

7

7

13

14

14

16

16

16

17

19

20

vi

Page 11: UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA

3.6. Skema Kerja……………………………………………...

4 HASIL PERCOBAAN DAN BAHASAN………...…………....

4.1. Pemeriksaan Organoleptis……..…………........................

4.2. Uji Kemurnian………..…………......................................

4.3. Hasil Uji Pendahuluan....…....….......................................

4.4. Uji Sitotoksisitas………………………………………….

5 SIMPULAN DAN ALUR PENELITIAN…………………....

5.1. Simpulan.............................................................................

5.2. Alur Penelitian Selanjutnya................................................

DAFTAR PUSTAKA…………………………….....……………….....

LAMPIRAN.............................................................................................

21

26

26

26

30

35

40

40

40

41

44

vii

Page 12: UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA

DAFTAR LAMPIRAN

A Contoh Perhitungan Pembuatan Larutan Uji.....................

B Analisis Probit..............……………………………….....

44

45

viii

Page 13: UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

4.1. Hasil KLT Senyawa Asam 3-klorobenzoil Salisilat dan Asam O-(4-metoksibenzoil) Salisilat ................................... 27

4.2. Hasil Pemeriksaan Titik Leleh Senyawa Asam 3-klorobenzoil Salisilat .......................................................... 30

4.3. Hasil Pemeriksaan Titik Leleh Senyawa Asam O-(4-metoksibenzoil) Salisilat ..................................................... 30

4.4. Hasil Pengamatan Kontrol Negatif ...................................... 31

4.5. Hasil Pengamatan Faktor - faktor Luar ................................ 31

4.6. Hasil Pengamatan Pengaruh dari Keasaman Media Air pada Senyawa Asam 3-klorobenzoil Salisilat dan Asam O-(4-metoksibenzoil) Salisilat ..................................................... 32

4.7. Hasil Uji Pendahuluan LC50 Asam Asetilsalisilat terhadap Larva Udang Artemia salina Leach (n=10) .......................... 33

4.8. Hasil Uji Pendahuluan LC50 Asam 3-klorobenzoil Salisilat terhadap Larva Udang Artemia salina Leach (n=10) ............ 34

4.9. Hasil Uji Pendahuluan LC50 Asam O-(4-metoksibenzoil) Salisilat terhadap Larva Udang Artemia salina Leach (n=10) ................................................................................ 35

4.10. Hasil Uji Sitotoksisitas Senyawa Asam Asetilsalisilat (n=10) ................................................................................ 36

4.11. Hasil Uji Sitotoksisitas Senyawa Asam 3-klorobenzoil Salisilat (n=10) ................................................................... 36

4.12. Hasil Uji Sitotoksisitas Senyawa Asam O-(4-metoksibenzoil) Salisilat (n=10).......................................... 37

ix

Page 14: UJI SITOTOKSIK (BRINE SHRIMP LETHALITY TEST) SENYAWA

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1.1. Struktur molekul asam salisilat dan asam asetilsalisilat ........ 1

1.2. Struktur molekul asam O-(4-Metoksibenzoil) salisilat ......... 2

1.3. Struktur molekul asam 3-Klorobenzoil salisilat .................. 2

2.1. Artemia salina Leach……………………………….. .......... 8

2.2. Morfologi Artemia salina Leach ......................................... 9

2.3. Kista Artemia salina Leach ................................................. 10

2.4. Siklus hidup Artemia salina Leach ...................................... 11

4.1. Hasil KLT senyawa asam 3-klorobenzoil salisilat dan asam O-(4-metoksibenzoil) salisilat di bawah sinar UV 254 nm ... 28

4.2. Hasil KLT senyawa asam 3-klorobenzoil salisilat dan asam O-(4-metoksibenzoil) salisilat di bawah sinar UV 254 nm dengan perbandingan yang baru .......................................... 29

x