UJI AKTIVITAS PENANGKAP RADIKAL BEBAS FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU MANGGA (Dendrophthoe pentandra (L.) Miq.) DENGAN METODE DPPH

SKRIPSI

Oleh:

ANISA NINDYANING TYAS K100070158

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA 2011

i

2

UJI AKTIVITAS PENANGKAP RADIKAL BEBAS FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU MANGGA (Dendrophthoe pentandra (L.) Miq.) DENGAN METODE DPPH

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai

derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

di Surakarta

Oleh:

ANISA NINDYANING TYAS K100070158

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA 2011

ii

3

iii

4

MOTTO

“Barangsiapa yang membawa kebaikan, maka ia akan memperoleh (balasan)

yang lebih baik daripadanya, sedang mereka itu adalah orang-orang yang aman

tentram daripada kejutan yang dasyat pada hari itu.“

(Q.S. An-Naml: 89)

“Dan di atas tiap-tiap yang berpengetahuan ada lagi Yang Maha Mengetahui.”

(Q.S. Yusuf: 76)

“Pikiran kita ibarat sebuah parasut, berfungsi apabila terbuka.“

(Tri Yunasmoro)

“Detik ini cerminan esok hari

Waktu tercepat adalah milidetik yang akan datang

dan waktu terlama, kemarin.“

Sapa SEMUT

Sapa dunia, Senyum optimis kesuksesan di depan mata,

“Semangatku kan hidupkan sekitarku“

Sapa Senyum untuk Semangat!!!

iv

5

PERSEMBAHAN

lt TÄÄt{?

WtÄtÅ wÉt ~â{tàâÜ~tÇ áxÅut{ áâ}âw ~xÑtwt@`â?

^tÜçt ~xv|Ä~â |Ç| ~âÑxÜáxut{~tÇ àxÜâÇàâ~

Ñt{ÄtãtÇ çtÇz áÄtÄâ ÅxÇz|ÇáÑ|Ütá|~â

\uâÇwt~â? fÜ| fâÑtÜÇ|?

fxutzt| àtÇwt ut~à| ~xÑtwt tçt{~â? ;TÄÅA<cÜtç|àÇÉ?

^t~t~~â çtÇz {xutà ctÇ}| cÜtáxàçt axztÜt wtÇ

gÜ| lâÇtáÅÉÜÉ çtÇz áÄtÄâ ~âÜ|Çwâ~tÇ?

UtÑt~ fxàâ `tÜ}ÉÇÉ?

ft{tutà@át{tutà~â?

TÄÅtÅtàxÜ~âA

v

6

DEKLARASI

Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya

ilmiah yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu

perguruan tinggi dan sepanjang pengetahuan saya tidak terdapat karya atau

pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan orang lain, kecuali yang secara

tertulis diacu dalam naskah ini dan yang dicantumkan dalam daftar pustaka.

Apabila dalam penelitian skripsi ini merupakan jiplakan penelitian/karya

ilmiah/skripsi orang lain, maka saya siap menerima sanksi baik secara akademis

atau hukum.

Surakarta, 25 Juni 2011

Peneliti

Anisa Nindyaning Tyas

vi

7

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum warahmatullahi wabarakatuh.

Alhamdulillah, segala puji syukur dipanjatkan kepada Allah SWT yang

telah melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya bagi kita semua dan senantiasa

memberikan petunjuk dan kekuatan sehingga dapat terselesaikannya dengan baik

Tugas Akhir yang berjudul “UJI AKTIVITAS PENANGKAP RADIKAL BEBAS

FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU MANGGA

(Dendrophthoe pentandra (L.) Miq.)”. Skripsi ini diajukan untuk memenuhi salah

satu syarat mencapai derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta.

Penyusunan skripsi ini tidak lepas dari bantuan berbagai pihak, dengan

penghargaan yang tulus, penulis mengucapkan terima kasih kepada:

1. Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt., selaku dekan Fakultas Farmasi dan dosen

penguji yang telah memberikan saran dan masukan perbaikan skripsi.

2. Dr. Haryoto, M.Sc., selaku pembimbing utama yang dengan penuh kesabaran

memberikan bimbingan, pengarahan, masukan, nasehat, serta ilmu yang

berguna selama penelitian dan dalam penyusunan skripsi ini hingga selesai.

3. Ika Trisharyanti D.K., M.Farm., Apt., selaku pembimbing pendamping yang

dengan penuh ikhlas telah meluangkan waktu dan kesempatan untuk

memberikan bimbingan, pengarahan, masukan, serta ilmu yang bermanfaat

selama penelitian dan penyusunan skripsi.

vii

8

4. Broto Santoso, M.Sc., Apt., selaku dosen penguji yang telah bersedia

meluangkan waktu untuk menguji skripsi ini, serta memberikan saran dan

masukan yang membangun demi perbaikan skripsi.

5. Bapak Ahwan, S.Farm., Apt., dan segenap dosen Fakultas Farmasi yang telah

memberikan ilmu dan bantuan selama penelitian.

6. Staf laboran bagian Kimia Farmasi Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Surakarta, diantaranya Bapak Rahmad dan Bapak Toni atas

bantuan selama penelitian.

7. Ibunda dan ayahku tersayang, yang selalu memberikan nasihat, doa, motivasi,

inspirasi serta kasih sayang tulus tiada pernah tergantikan.

8. Teman seperjuangan (tim fraksinasi benalu mangga), Fairus Zabadi dan Noor

Fitriana, telah berjuang dalam suka duka, berbagi ilmu dan kekompakannya.

9. Atina, Didiek, Endah, Febti, Tessa dan Risa, sebagai sahabat sekaligus rival

belajar yang selalu menyemangati untuk bangkit dan bersemangat.

Akhir kata, penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih banyak

kekurangan dan kesalahan sehingga kritik dan saran sangat penulis harapkan.

Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi penulis pada khususnya dan

pembaca pada umumnya.

Wassalamu’alaikum warahmatullahi wabarokatuh.

Surakarta, 25 Juni 2011

Penulis

viii

9

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ..…………………………………………………....

HALAMAN PENGESAHAN …..…………………………......................

HALAMAN MOTTO ..................................................................................

HALAMAN PERSEMBAHAN …..……………………...........................

HALAMAN DEKLARASI ...…..………………………………………...

KATA PENGANTAR ............…..………………………..........................

DAFTAR ISI .............……………………………………………………..

DAFTAR GAMBAR …..............…………………………………………

DAFTAR TABEL .................…..………………………………………....

DAFTAR LAMPIRAN ..........…..………………………………………..

DAFTAR SINGKATAN ......…..………………………………………...

INTISARI ...............................…..………………………………………..

BAB I. PENDAHULUAN..........................................................................

A. Latar Belakang Masalah ..........................……................................

B. Perumusan Masalah .................………...……......................……...

C. Tujuan Penelitian ......………………………….....………..............

D. Tinjauan Pustaka .....………………....…......……....………...........

1. Tanaman Daun Benalu Mangga ....………...........………...........

a. Klasifikasi …...................................................…………….......

b. Kandungan kimia ...………………………….…………….......

c. Kegunaan ...............................…......……………………....

i

ii

iv

v

vi

vii

ix

xii

xiii

xiv

xv

xvi

1

1

3

4

4

4

4

4

5

ix

10

2. Ekstrak .................................……………………………..........

3. Fraksinasi ...................................................................................

4. Radikal Bebas ............................................................................

5. Antioksidan ................................................................................

6. Kuersetin ....................................................................................

7. DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil) ...........................................

E. Landasan Teori .....................................................................................

F. Hipotesis ...............................................................................................

BAB II. METODE PENELITIAN ……...…........………..........................

A. Kategori Penelitian ...............................................................................

B. Variabel Penelitian ...............................................................................

C. Alat dan Bahan .....................................................................................

1. Alat yang digunakan .......................................................................

2. Bahan yang digunakan .....................................................................

D. Jalannya Penelitian ...............................................................................

1. Determinasi tanaman .......................................................................

2. Persiapan simplisia ..........................................................................

3. Ekstraksi ..........................................................................................

4. Destilasi pelarut …...........................................................................

5. Fraksinasi …….................................................................................

6. Uji kromatografi lapis tipis ………….….........................................

7. Uji kualitatif aktivitas penangkap radikal DPPH .............................

8. Pembuatan larutan pereaksi DPPH ..................................................

5

6

7

8

10

11

12

13

14

14

14

14

14

15

15

15

15

16

16

16

17

18

18

x

11

9. Pembuatan larutan stok vitamin E ...................................................

10. Pembuatan larutan stok sampel ....................................................

11. Penentuan panjang gelombang maksimum (λmaks) DPPH ………..

12. Penentuan waktu inkubasi ……......................................................

13. Penentuan aktivitas antiradikal dengan metode DPPH ...................

14. Tempat penelitian ............................................................................

E. Analisis Hasil .......................................................................................

BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ..................................................

A. Determinasi Tanaman ..........................................................................

B. Ekstraksi dan Fraksinasi .......................................................................

C. Uji Identifikasi Senyawa dengan KLT .................................................

D. Penentuan Aktivitas Antioksidan .........................................................

BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ..................................................

A. Kesimpulan ……..................................................................................

B. Saran …………………..…...................................................................

DAFTAR PUSTAKA .................................................................................

LAMPIRAN ....................…........................................................................

18

19

19

19

19

20

20

22

22

22

27

35

39

39

39

40

44

xi

12

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Kromatografi Cair Vakum ........................................................

Gambar 2. Senyawa kuersetin (3,3’,4’,5,7-pentahydroxyflavone) .............

Gambar 3. Mekanisme reaksi penangkapan radikal DPPH ........................

Gambar 4. KLT Optimasi Fase Gerak ........................................................

Gambar 5. Hasil Optimasi Fase Gerak n-Heksan: Etil Asetat (6,5:3,5) .....

Gambar 6. Hasil Optimasi Fase Gerak n-Heksan: Etil Asetat (5,5:4,5) .....

Gambar 7. Hasil Analisis KLT Senyawa Flavonoid ..................................

Gambar 8. Hasil Analisis KLT Senyawa Fenolik dan Alkaloid .................

Gambar 9. Hasil Analisis KLT Senyawa Saponin …................................

Gambar 10. Uji Kualitatif Aktivitas Penangkap Radikal DPPH .................

7

10

11

23

25

26

28

29

31

35

xii

13

DAFTAR TABEL

Tabel 1. Hasil optimasi fase gerak ...............................................................

Tabel 2. Penentuan Rf hasil fraksinasi ........................................................

Tabel 3. Hasil perkiraan golongan senyawa pada fraksi nonpolar ..............

Tabel 4. Hasil perkiraan golongan senyawa pada fraksi polar ....................

Tabel 5. Hasil perkiraan golongan senyawa pada fraksi semipolar ............

Tabel 6. Hasil prediksi golongan senyawa pada fraksi ...............................

Tabel 7. Penetapan IC50, EC50 dan ARP ......................................................

24

27

32

32

33

33

36

xiii

14

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Determinasi daun benalu Dendrophthoe pentandra (L.) Miq.

Lampiran 2. Perhitungan rendemen ekstrak etanol daun benalu mangga

(Dendrophthoe petandra (L.) Miq) ........................................

Lampiran 3. Hasil fraksinasi KVC ..............................................................

Lampiran 4. Hasil kromatografi Lapis Tipis ...............................................

Lampiran 5. Panjang gelombang maksimal DPPH .....................................

Lampiran 6. Penetapan waktu inkubasi ………………………...................

Lampiran 7. Hasil percobaan uji aktivitas penangkap radikal bebas ..........

45

47

48

49

50

51

52

xiv

15

DAFTAR SINGKATAN

ARP Antiradical Power DPPH 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil EC50 Efficiency Concentration Eks Ekstrak etanol daun benalu mangga IC50 Inhibitory Concentration KCV Kromatografi Cair Vakum KLT Kromatografi Lapis Tipis LB Pereaksi Liebermann-Burchard nm Nanometer p.a. Pro analisis ppm Part per million Q Kuersetin Rf Retardation factor UV Ultraviolet

xv

16

INTISARI

Angka kejadian kanker setiap tahunnya semakin meningkat. Salah satu

penyebab kanker yakni adanya radikal bebas yang menyerang DNA sehingga mengakibatkan mutasi sel. Benalu merupakan parasit yang awalnya tidak bermanfaat, ternyata dapat berkhasiat sebagai obat. Salah satu benalu yang dapat dimanfaatkan sebagai obat adalah benalu mangga (Dendrophthoe petandra (L.) Miq.). Tujuan dari penelitian ini adalah mengkaji aktivitas penangkap radikal bebas fraksi semipolar ekstrak etanol daun benalu mangga (Dendrophthoe pentandra (L.) Miq.).

Ekstrak etanol daun benalu mangga dibuat dengan metode maserasi, dengan penyari etanol 70% dan dilanjutkan dengan fraksinasi dengan menggunakan metode Kromatografi Cair Vakum (KCV). Elusi dilakukan dengan pelarut yang memiliki tingkat kepolaran semakin meningkat yaitu heksan: etil asetat (4:6), heksan: etil asetat (3:7), heksan: etil asetat (2:8), heksan: etil asetat (1:9), etil asetat 100% dan metanol. Fraksi semipolar diuji antiradikal dengan metode DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil) pada panjang gelombang 517,5 nm.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa fraksi semipolar ekstrak etanol daun benalu mangga (Dendrophthoe pentandra (L.) Miq.) memiliki aktivitas sebagai penangkap radikal DPPH dengan IC50 sebesar 37,088 µg/mL, tetapi aktivitas penangkap radikalnya lebih kecil dibandingkan dengan ekstrak etanol daun benalu mangga (IC50 10,558 µg/mL) dan vitamin E (IC50 6,906 µg/mL). Kata kunci : Dendrophthoe petandra (L.) Miq., fraksi semipolar, antiradikal,

1,1-difenil-2-pikrilhidrazil.

xvi