teknik pengawetan sampel organik
TRANSCRIPT
TEKNIK PENGAWETAN SAMPEL ORGANIK
Pengawetan sampel dilakukan dengan tujuan :
1. Melakukan identifikasi menyeluruh terhadap biota2. Mendapatkan koleksi biota
Biota yang dapat dijadikan preparat :
1. Hewan laut - Mamalia laut- Ikan- Mollusca- Crustacea- Sponge- Karang lunak, dll
2. Tumbuhan Laut :- Makroalgae- Mangrove
Alat dan Bahan :
1. Pisau anti karat → Biasanya terbuat dari baja (selain tahan karat, saat digunakan tidak mengambang diatas air laut)
2. Gunting anti karat → Biasanya digunakan gunting bedah, yang
terbuat dari baja.3. Jaring → tempat koleksi biota4. Tali 5. Kamera atau kamera underwater
Metode Sampling :
1. Pengambilan sample2. Identifikasi sample3. Dokumentasi4. Penanganan sample
Point penting Identifikasi sample
Beberapa hal yang perlu diidentifikasi saat sampling antara lain :1. Identifikasi Lokasi : Catat koordinat atau nama daerah2. Identifikasi habitat : Deskripsikan kondisi lingkungan
3. Identifikasi Morfologi :- Hewan → Memegang biota secara langsung; kasar/halus,
terdapat mucus/tidak, warna, penyusun tubuh, sifat biota dialam, dll
- Tumbuhan → amati daun. Akar, batang, daun, buah, biota asosiasi, jika perlu lakukan sampling terhadap seluruh komponen tersebut.
4. Informasi penting : Mencakup Taksonomi, nama ilmiah, nama
popular, nama local, sifat khas dari biota
Dokumentasi
Dokumentasi dilakukan setelah melakukan identifikasi, setiap melakukan sampling harus didokumentasikan. Secara optional dokumentasi dapat dilakukan sebelum atau setelah identifikasi. Hal tersebut dimaksudkan karena terdapat beberapa biota yang biasanya mengalami perubahan secara signifikan saat berada diluar habitatnya. Prosedur dokumentasi cukup sederhana, yaitu :
1. Persiapkan media (alas) yang memiliki warna kontras dengan
biota. Biasanya digunakan alas triplek ujian dimana praktikan
menyediakan beberapa mika berwarna2. Persiapkan pembanding, biasanya digunakan alat ukur atau alat
tulis. Tetapi usahakan agar praktikan menyiapkan penggaris
Penanganan Sample
Metode pengawetan yang akan dibahas pada praktikum kali ini, yaitu :
1. Pengawetan kering2. Pengawetan basah
Prosedur metode Pengawetan Kering :
1. bersihkan sampel, cek kondisinya, kemudian keringkan2. ada baiknya, sebelum dikeringkan, rendam sampel dalam 3-5%
buffered Formalin seawater selama sekitar sehari untukmenjaga warna aslinya.
3. Untuk calcareous specimens di rendam dalam 3-5% formalin +
40% gliserin untuk beberapa hari, keringkan, simpan dalam kotak (tanpa pressing), dan dapat direkatkan menggunakan lem bila perlu.
4. Pengeringan dapat menggunakan metode pemipihan (press)
dengan menekan atau menimpa sampel menggunakan benda berat
yang datar. Gunakan alas yang menyerap air seperti kertas atau
koran.5. Persiapan herbarium sheet. Letakan sampel yang telah pipih pada
suatu dasaran (bisa kertas karton, papan, atau potongan kardus)
6. Biji-bijian disimpan dengan cara dibungkus
7. Pelabelan dengan kertas label
Salah satu contoh dari pengawetan kering adalah herbarium. Pelabelan herbarium terdiri dari :
Nama Koleksi / Sample biota Genus, species, dilengkapi dengan nama lokal Family name
Tanggal dikoleksi Lokasi Vegetasi atau habitat Deskripsi singkat Nama Kolektor
Contoh :
Prosedur Pengawetan Basah :
1. Menggunakan 3-5% formalin-sea water/buffer = 37%formaldehid (100% alkohol) + air laut (untuk membuat 3-
5% larutan formalin), kemudian ditambahkan baking soda (40
gr/liter) sebagai buffer2. Menggunakan Transeau solution = 6 bagian air + 3 bagian ethyl alkohol 95% + 1 bagian formalin3. Menggunakan alkohol (70% EtOH) ; disarankan direndam dulu
dalam 3-5% formalin selama 24 jam, setelah itu dapat
dipindahkan ke dalam alkohol 70% untuk penyimpanan jangka
panjang.4. Menggunakan F.A.A (formalin-acetic acid-alcohol) = EtOH
(50%), 100 ml + commercial Formalin, 6.5 ml + glacial acetic acid,
2.5 ml
Penanganan Sampel Hewan Laut
Berikut ini adalah metode pengawetan biota yang lazim digunakan pada laboratorium Biologi makro Menurut Affandi et. al (1992)
1) Biota yang akan diawetkan sebaiknya telah mati tapi masih segar, atau jika biota yang akan digunakan masih hidup kita dapat bius dengan perendaman dengan air es. Pada biota dengan ukuran kecil sebaiknya dengan formalin 4-5 %, dan pada biota denagn ukuran besar menggunakan formalin konsentrasi 10%.
2) Sebelum dimasukan kedalam formalin biota-biota yang berukuran besar dengan panjang lebih dari 150 mm, sebaikny dituris dibagian sisi perut sebelah kanan sepsnjang kurang lebih 30mm. penurisan dimaksudkan agar bahan bahan pengawet ( formalin) dapat terserap kedalam rongga otot, supaya organ-organ dalam usus tidak membusuk. Diantara bagian tibuh biota, bagian rongga perut merupakan bagian yang paling mudah membusuk. Bagian yang dituris pada metode ini adalah bagian kanan tubuh biota, karna bagian kiri digunakan untuk melihat cirri-ciri morfologi biota. jika biota yang diawetkan cukup tebal, missal biota tongkol ( Euthynus sp), maka otot daging dbiotaan tulang kiri harus dituris.
3) Setelah biota direndam dalam formalin selama lebih kurang satu minggu, kemudian dicuci dalam air atau dalam air mengalir atau direndam dalam air mengalir selama kurang dua hari.
4) Biota biota yang telah dicuci ( dibersihkan dari formalin), diawetkan dalam alcohol 70% untuk selamanya. Jika biota akan tetap disimpan dalam formalin, maka formalin harus diganti secara periodic ddalam waktu-waktu tertentu.
5) Tiap specimen biota yang diawetkan harus disimpan dalam wadah yang dibubuhi label pada wadahnya.
Untuk menghilangkan bau formalin pada biota yang akan diperiksa biota tersebut terlabih dahulau direndam selama beberapa menit dalam NaOHSO3 dan Na2SO3 dalam perbandingan 60 gr NaHSO3 dan 90 gr Na2SO3 untuk tiap satu liter air ( Saanin, 1968).
CARA MEMPERTAHANKAN WARNA BIOTA
Warna asli biota sering berubah karna formalin. Untuk menghindari hal tersebut dapat digunakan cara pengawetan sebagai berikut. Mula-mula biota direndam dalam spiritus selama sehari, kemudian dimasukan kedalam larutan yang terdiri dari 100 gr garam dapur murni, 5 gr garam glauber murni, 50 gr gliserin dan satu liter air suling murni ( Akuades) kedalam larutan tersebut ditambahkan pula 10-15 tetes kamfer spiritus dan kemmudian wadahnya ditutup rapat sehingga udara tidak dapat masuk. Dengan cara ini, warna dan kilap sisik tidak akan berububah.
Pembuatan larutan formalin 4-5%
Pertama dilakukan pengenceran terhadap formalin yang diperdagangkan yang berkadar 100% ( formaldehida 40%) tersebut. Pada prakteknya pengenceran dapat dihitung dengan rumus:
V1 x N1 = V2 x N2
Keterangan :
V1 = Volume formalin yang tersedia (cc)
N1 = konsenterasi formalin yang tersedia (%)
V2 = volume formalin setelah pengenceran (cc)
N2 = konsentrasi formalin yang dikehendaki (%)
Selamat Belajar