TEKNOLOGI PEMURNIANENZIM

OLEH :

DELLA FAJAR PUSPITASARI (1331410013) MUHAMMAD EFFENDI RIA A.(1331410132)

ENZIM

KENAPA ENZIM PERLU DIMURNIKAN? Tujuan dari pemurnian enzim adalah

mengisolasi enzim spesifikasi dan ekstra sel “Mentah” (crude) yang mengandung banyak komponen lain.

Menurut Harris danAngal (1989), ada tiga strategi yang harus diperhatikan dalam pemurnian enzim :

Kualitas

Kuantitas

Ekonomi

PROSES PEMURNIAN ENZIM

Proses pemurnian

enzim

intraseluler

ekstraseluler

Pemurnian enzim intraseluler

Pemecahan Sel

Ekstraksi FisikEkstraksi

Kimia

Alat Homogeniz

er

Pembekuan &

Pencairan

Wairing blender /

hammer mill

Enzim Litik

Pemurnian Enzim

Ekstraseluler

Sentrifugasi

Koagulasi Flokulasi Filtrasi

Kromatografi

Osmosa balik

Ultrafiltrasi Pengendap

an

Pemisahan enzim berdasarkan :a. metode

b.

UkuranSentrifugasi

gradien densitas

Kromatografi penyaringan

molekul dan gel

Kelarutan pH

Kelarutan ion

dielektrik

Pelarut

Suhu

c.

Berdasarkan jumlah muatan kation dan anion Muatan / kekuatan ion >> protein mengendap

→salting outContoh Amunium Sulfat.

Kekuatan ion Penambahan garam netral

Menurut Scopes,(1987). Pemurnian enzim umumnya dilakukan dalam beberapa tahapan yaitu: fraksinasi dengan garam atau pelarut organik, sentrifugasi, dialisis, dan pemisahan dengan kromatografi kolom

1. PENGENDAPAN DENGAN AMMONIUM SULFAT

Gambar 6. Proses pengendapan protein (Koelman dan Roehm, 2005)

Awal dari proses

pemurnian enzim.

Meningkatkan

konsentrasi enzim

2. DIALISISGambar 7.  Proses pemisahan protein dengan dialisis

(koelman dan Roehm, 2005)

Mengatasi adan y a kelebihan garam dengan menghilangkan molekul-

moleku pengganggu

3.KROMATOGRAFI KOLOMprinsip kerja pemisahan protein berdasarkan sifat fisik dan kimiawi. Stanburry dan Whitaker (1984),membagi kromatografi menjadi:

a. Kromatografi penukar ion

b. Kromatografi Interaksi Hidrofobik

c. Kromatografi Filtrasi Gel

A.KROMATOGRAFI PENUKAR ION

Gambar 8. Prinsip kerja kromatografi penukar ion (Anonim,

2005)

B. KROMATOGRAFI INTERAKSI HIDROFOBIK

Prinsip kerja Kromatografi interaksi hidrofobik (Koelman dan Roehm, 2005)

C. KROMATOGRAFI FILTRASI GEL

Prinsip kerja kromatografi filtrasi gel (Anonim, 2005)

SEKIAN DAN

TERIMA KASIH