sonia ulfah-fkik.pdf

83
UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK DAUN RAMBUTAN (Nephelium lappaceum Linn) DENGAN METODE DPPH (2,2-DIFENIL-1-PIKRILHIDRAZIL) SKRIPSI SONIA ULFAH 1111102000116 FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN PROGRAM STUDI FARMASI JAKARTA JANUARI 2016

Upload: doankhuong

Post on 14-Jan-2017

238 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA

UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK DAUN

RAMBUTAN (Nephelium lappaceum Linn) DENGAN METODE

DPPH (2,2-DIFENIL-1-PIKRILHIDRAZIL)

SKRIPSI

SONIA ULFAH

1111102000116

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN

PROGRAM STUDI FARMASI

JAKARTA

JANUARI 2016

Page 2: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

ii

UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA

UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK DAUN

RAMBUTAN (Nephelium lappaceum Linn) DENGAN METODE

DPPH (2,2-DIFENIL-1-PIKRILHIDRAZIL)

SKRIPSI Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi

SONIA ULFAH

1111102000116

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN

PROGRAM STUDI FARMASI

JAKARTA

JANUARI 2016

Page 3: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

iii

Page 4: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

iv

Page 5: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

v

Page 6: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

vi

ABSTRAK

Nama : Sonia Ulfah

Jurusan : Farmasi

Judul : Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Rambutan

(Nephelium lappaceum Linn) dengan Metode DPPH

(2,2-Difenil-1-Pikrilhidrazil)

Penelitian ini dilakukan untuk menguji aktivitas antioksidan ekstrak

daun rambutan (Nephelium Lappaceum Linn) dengan metode DPPH. Ekstrak

daun rambutan diekstraksi secara maserasi langsung dengan etanol 70%

sehingga diperoleh ekstrak etanol total (E1) daun rambutan dan dilanjutkan

dengan pemisahan secara partisi sehingga diperoleh ekstrak fraksi

n-Heksana (NH), fraksi etil asetat (EA) dan fraksi etanol (E2). Pengujian aktivitas

antioksidan ekstrak daun rambutan ini dilakukan menggunakan metode

DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) dengan vitamin C sebagai kontrol positif.

Hasil uji aktivitas antioksidan yang dilakukan menunjukkan nilai AAI

(Antioksidant Activity Index) ekstrak etanol total (E1), fraksi n-Heksana (NH),

fraksi etil asetat (EA), fraksi etanol (E2), dan vitamin C berturut-turut

2,1488 (sangat kuat); 0,1401 (lemah); 0,8488 (sedang); 1,5767 (kuat); dan

10,6383 (sangat kuat).

Kata kunci : Nephelium lappaceum Linn, antioksidan, AAI, DPPH

Page 7: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

vii

ABSTRACT

Name : Sonia Ulfah

Departement : Pharmacy

Title : Antioxidant Activity Test of Rambutan Leave

(Nephelium lappaceum Linn) Extract Using the DPPH

(2,2-Diphenyl-1-Picryhidrazyl) Method

This study aimed to find out antioxidant activity leave extract

of rambutan (Nephelium lappaceum Linn). Leave extract of rambutan

(Nephelium lappaceum Linn) extracted by maceration with ethanol 70% to obtain

the total ethanol leave extract (E1) of rambutan and continued with

the separation partition thus obtained n-hexane fraction extract (NH), ethyl

acetate fraction (EA) and the ethanol fraction (E2). Antioxidant activity

testing was tested by DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) method

with vitamin C as a positive control. The results of antioxidant activity

showed that AAI (Antioxidant Activity Index) value of total ethanol

extract (E1), n-hexane fraction (NH), ethyl acetate fraction (EA), ethanol

fraction (E2) and vitamin C were 2,1488 (very strong); 0,1401 (weak);

0,8488 (moderate); 1,5767 (strong); and 10,6383 (very strong).

Key word : Nephelium lappaceum Linn, antioxidant activity, AAI, DPPH

Page 8: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

viii

KATA PENGANTAR

Bismillahirrahmanirrahim.

Alhamdulillahirabbil’alamin, puji syukur ke hadirat Allah SWT yang

telah melimpahkan segala rahmat dan karunia-Nya, sehingga penulis dapat

menyelesaikan penulisan skripsi dengan judul “Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak

Daun Rambutan dengan Metode DPPH (2,2-Difenil-1-Pikrilhidrazil)”. Shalawat

serta salam semoga senantiasa tercurah limpahkan pada Nabi Muhammad SAW

beserta para keluarga dan sahabatnya.

Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat kelulusan tingkat sarjana

di Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas

Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. Penelitian ini tidaklah dapat

terselesaikan tanpa dukungna dan bantuan dari berbagai pihak. Dalam kesempatan

ini, penulis ingin mengucapkan terima kasih terkhususkan kepada:

1. Prof. Dr. Atiek Soemiati, M.Si., Apt. dan Ibu Eka Putri, M.Si., Apt.

selaku pembimbing yang telah meluangkan banyak waktu untuk

memberikan bimbingan, motivasi, serta dorongan kepada penulis dari

awal hingga skripsi ini dapat terselesaikan.

2. Bapak Dr. H. Arif Sumantri, SKM., M. Kes. selaku Dekan Fakultas

Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

3. Bapak Yardi, M.Si., Ph.D., Apt. selaku Ketua Program Studi Farmasi

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta dan Ibu Nelly Suryani, Ph.D., Apt.

selaku sekretaris Program Studi Farmasi UIN Syarif Hidayatullah

Jakarta.

4. Seluruh dosen di Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan

Ilmu Kesahatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta atas ilmu

pengetahuan selama penulis menempuh pendidikan.

5. Kepada orang tuaku tercinta, Ayahanda A. Syamsuryana dan Ibunda

Nina Herlina yang tiada hentinya memberikan bantuan materil,

Page 9: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

ix

non materil, motivasi, dan juga kepada penulis untuk menyelesaikan

skripsi ini.

6. Adik-adikku tersayang Dian Mayasanti, M. Regi Saputra dan

M. Rachel Jabar Winara yang senantiasa memberikan semangat dan

keceriaan kepada penulis.

7. Untuk orang spesial Al Kahfi yang selalu memberikan semangat dan

bantuan kepada penulis.

8. Untuk kakak kelasku tersayang Ka Oni Maria Sari yang selalu

memberikan bantuan, semangat kepada penulis.

9. Teman-teman seperjuangan Farmasi Angkatan 2011 khususnya

Farmasi BD yang selalu memberikan semangat dan kekompakannya

semasa kuliah.

10. Kak Lisna, Kak Tiwi, Kak Eris, Mba Rani, Kak Yaenap, Kak Rahmadi

dan Kak Walid yang telah membantu keseharian penulis selama

penelitian di laboratorium.

11. Serta semua pihak yang telah membantu penulis selama ini yang tidak

dapat penulis sebutkan satu per satu.

Semoga Allah SWT memberikan balasan yang berlipat ganda atas segala

bantuan dan dukungannya kepada penulis. Penulis menyadari bahwa dalam

penulisan skripsi ini masih banyak kelemahan dan kekurangan. Maka dari itu,

dengan segala kerendahan hati penulis sangat mengharapkan kritik dan saran

pembaca agar lebih sempurnanya skripsi ini.

Jakarta, 14 Januari 2016

Penulis

Page 10: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

x

Page 11: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

xi

DAFTAR ISI

HALAMAN

HALAMAN JUDUL ............................................................................................. ii

HALAMAN PERNYATAAN ORISINILITAS ................................................. iii

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ................................................ iv

HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................... v

ABSTRAK ............................................................................................................ vi

ABSTRACT ......................................................................................................... vii

KATA PENGANTAR ........................................................................................ viii

HALAMAN PERNYATAAN PUBLIKASI ........................................................ x

DAFTAR ISI ......................................................................................................... xi

DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... xiv

DAFTAR TABEL ............................................................................................... xv

DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... xvi

BAB 1 PENDAHULUAN ................................................................................... 1

1.1 Latar Belakang ................................................................................ 1

1.2 Rumusan Masalah ........................................................................... 3

1.3 Tujuan Penelitian ............................................................................ 3

1.4 Manfaat Penelitian .......................................................................... 3

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................... 4

2.1 Daun Rambutan ............................................................................... 4

2.1.1Sistematika Daun Rambutan ................................................... 4

2.1.2 Uraian Tanaman ..................................................................... 5

2.1.2.1 Morfologi ................................................................... 5

2.1.2.2 Daerah Asal dan Penyebaran ..................................... 5

2.1.2.3 Kandungan Kimia ..................................................... 5

2.1.2.4 Khasiat dan Kegunaan .............................................. 6

2.2 Simplisia .......................................................................................... 6

2.3 Ekstraksi .......................................................................................... 6

2.4 Pemisahan secara Partisi ................................................................. 9

2.5 Penapisan Fitokimia ........................................................................ 9

2.6 Kromatografi Lapis Tipis .............................................................. 10

2.7 Radikal Bebas................................................................................ 12

2.8 Antioksidan ................................................................................... 13

2.9 Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH ........................ 15

2.10 Spektrofotometer UV-Vis.............................................................. 17

Page 12: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

xii

BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN ......................................................... 18

3.1 Tempat dan Waktu ........................................................................ 18

3.2 Alat dan Bahan ............................................................................. 18

3.2.1 Alat ....................................................................................... 18

3.2.2 Bahan.................................................................................... 18

3.3 Prosedur Penelitian........................................................................ 19

3.3.1 Peengambilan Bahan ............................................................ 19

3.3.2 Penyiapan Simplisia ............................................................. 19

3.3.3 Pembuatan Esktrak ............................................................... 19

3.3.4 Penapisan Fitokimia ............................................................. 19

3.3.5 Pemisahan secara Partisi Ekstrak Etanol Total (E1) Daun

Rambutan (Nephelium lappaceum Linn) dengan Pelarut

n-Heksan, Etil Asetat dan Etanol ......................................... 21

3.3.6 Pengujian Antioksidan secara Kualitatif dengan Metode

Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ......................................... 22

3.3.7 Pengujian Antioksidan secara Kuantitatif dengan Metode

DPPH ................................................................................... 22

3.3.7.1 Pembuatan Larutan DPPH 0,1 mM ........................ 22

3.3.7.2 Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum

DPPH ...................................................................... 22

3.3.7.3 Pembuatan Larutan Blanko .................................... 23

3.3.7.4 Pembuatan Larutan Pembanding Vitamin C .......... 23

3.3.7.5 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Daun Rambutan .. 23

3.3.8 Analisa Data ......................................................................... 24

BAB 4 Hasil dan Pembahasan ......................................................................... 26

4.1 Determinasi Tanaman ................................................................... 26

4.2 Penyiapan Sampel ......................................................................... 26

4.3 Ekstraksi ........................................................................................ 27

4.4 Penapisan Fitokimia Ekstrak Etanol Total (E1) Daun Rambutan . 28

4.5 Pemisahan secara Partisi Ekstrak Etanol Total (E1) Daun

Rambutan ...................................................................................... 29

4.6 Uji Aktivitas Antioksidan secara Kualitatif .................................. 30

4.7 Uji Aktivitas Antioksidan secara Kantitatif .................................. 31

BAB 5 Kesimpulan dan Saran ........................................................................ 39

5.1 Kesimpulan ............................................................................... 39

5.2 Saran ............................................................................... 39

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................... 40

LAMPIRAN ............................................................................... 43

Page 13: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

xiii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Daun Rambutan (Nephelium lappaceum Linn).................................. 4

Gambar 2.2 Reduksi DPPH dari Senyawa Peredam Radikal Bebas.................... 15

Gambar 4.1 Kurva Hubungan Konsentrasi dan % Inhibisi Ekstrak Etanol Total

(E1) Daun Rambutan........................................................................ 35

Gambar 4.2 Kurva Hubungan Konsentrasi dan % Inhibisi Ekstrak Fraksi

n-Heksana (NH) Daun Rambutan .................................................... 35

Gambar 4.3 Kurva Hubungan Konsentrasi dan % Inhibisi Ekstrak Fraksi

Etil Asetat (EA) Daun Rambutan ..................................................... 36

Gambar 4.4 Kurva Hubungan Konsentrasi dan % Inhibisi Ekstrak Fraksi

Etanol (E2) Daun Rambutan ............................................................ 36

Gambar 4.5 Kurva Hubungan Konsentrasi dan % Inhibisi Vitamin C ................ 36

Page 14: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel 4.1 Hasil Ekstraksi Daun Rambutan ........................................................... 27

Tabel 4.2 Hasil Penapisan Fitokimia Ekstrak Etanol Daun Rambutan ................ 28

Tabel 4.3 Hasil Partisi Ekstrak Etanol Total (E1) Daun Rambutaan ................... 29

Tabel 4.4 Hasil Uji Kualitatif Antioksidan Ekstrak Daun Rambutan .................. 30

Tabel 4.5 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Total (E1) Daun

Rambutan .............................................................................................. 32

Tabel 4.6 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Fraksi n-Heksan (NH) Daun

Rambutan .............................................................................................. 33

Tabel 4.7 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Fraksi Etil Asetat (EA) Daun

Rambutan .............................................................................................. 33

Tabel 4.8 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Fraksi Etanol (E2) Daun

Rambutan .............................................................................................. 33

Tabel 4.9 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Vitamin C .......................................... 34

Page 15: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 Alur Penelitian ................................................................................ 44

Lampiran 2 Hasil Determinasi Daun Rambutan ................................................ 45

Lampiran 3 Penapisan Fitokimia Ekstrak Etanol Total (E1) Daun Rambutan

(Nephelim lappaceum Linn) ........................................................... 46

Lampiran 4 Perhitungan Rendemen Ekstrak Daun Rambutan .......................... 47

Lampiran 5 Sertifikat Analisa DPPH ................................................................ 48

Lampiran 6 Panjang Gelombang Maksimum DPPH ......................................... 49

Lampiran 7 Data Absorbansi Ekstrak Etanol Total (E1) Daun Rambutan ........ 50

Lampiran 8 Data Absorbansi Ekstrak Fraksi n-Heksana (NH) Daun

Rambutan ........................................................................................ 51

Lampiran 9 Data Absorbansi Ekstrak Fraksi Etil Asetat (EA) Daun

Rambutan ........................................................................................ 52

Lampiran 10 Data Absorbansi Ekstrak Fraksi Etanol (E2) Daun Rambutan ...... 53

Lampiran 11 Data Absorbansi Vitamin C ............................................................ 54

Lampiran 12 Perhitungan dalam Uji Antioksidan ............................................... 55

Lampiran 13 Perhitungan Persen Inhibisi ............................................................ 58

Lampiran 14 Perhitungan IC50 ............................................................................. 63

Lampiran 15 Perhitungan Nilai AAI .................................................................... 65

Lampiran 16 Data Absorbansi Uji Aktivitas Antioksidan ................................... 67

Page 16: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

ii

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Penggunaan senyawa antioksidan semakin berkembang baik untuk

makanan maupun pengobatan seiring dengan bertambahnya pengetahuan

tentang radikal bebas (Boer, 2000). Radikal bebas merupakan salah satu

bentuk senyawa yang mempunyai elektron tidak berpasangan

(Winarsi, 2007). Adanya elektron tidak berpasangan menyebabkan

senyawa tersebut sangat reaktif mencari pasangan. Radikal bebas ini akan

merebut elektron dari molekul lain yang ada di sekitarnya untuk

menstabilkan diri. Radikal bebas erat kaitannya dengan kerusakan sel,

kerusakan jaringan, dan proses penuaan (Fessenden dan Fessenden, 1986).

Radikal bebas yang merusak tubuh ini dapat dinetralisir oleh

senyawa antioksidan. Antioksidan merupakan senyawa yang dapat

menghambat oksigen reaktif dan radikal bebas dalam tubuh. Senyawa

antioksidan ini akan menyerahkan satu atau lebih elektron bebas sehingga

menjadi bentuk molekul yang normal kembali dan menghentikan berbagai

kerusakan yang ditimbulkan (Sashikumar, et al., 2009). Tubuh manusia

tidak mempunyai cadangan antioksidan dalam jumlah berlebih, sehingga

jika terjadi paparan radikal bebas berlebih maka tubuh membutuhkan

antioksidan eksogen (Rohdiana, 2001).

Pemanfaatan bahan alam yang mempunyai aktivitas biologis

menjadi motivasi dilakukannya penelitian lebih lanjut, setelah

senyawa-senyawa sintetik yang mempunyai aktivitas biologis seperti

senyawa antioksidan sintetik butylated hydroxytoluen (BHT),

butylated huydroxyanisole (BHA) dan terbutylhydroxyquinone (TBHQ)

dibatasi penggunannnya karena bersifat karsinogenik. Berbagai studi

mengenai BHA dan BHT menunjukkan bahwa komponen ini dapat

menimbulkan tumor pada hewan percobaan pada penggunaan dalam

jangka panjang (Andarwulan, 1996). Adanya kekhawatiran akan

kemungkinan efek samping dari antioksidan sintetik menyebabkan

Page 17: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

2

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

antioksidan alami menjadi alternatif yang sangat dibutuhkan

(Rohdiana, 2001).

Antioksidan alami mampu melindungi tubuh terhadap kerusakan

yang disebabkan senyawa oksigen reaktif, yang mampu menghambat

terjadinya penyakit degeneratif seperti diabetes, kanker,

inflamasi jaringan, kelainan imunitas, infark jantung dan penuaan dini

(Middleton, et al., 2000).

Rambutan (Nephelium lappaceum Linn) merupakan salah satu

tanaman yang banyak terdapat di Indonesia. Secara tradisional tanaman

rambutan digunakan untuk pengobatan berbagai penyakit, antara lain kulit

buahnya untuk mengatasi sariawan, daun untuk mengatasi diare dan

menghitamkan rambut, akar untuk mengatasi demam dan serat bijinya

untuk mengatasi diabetes mellitus (Tjandra, et al., 2011).

Kulit dan biji rambutan yang tumbuh di Thailand memiliki sifat

antioksidan dan antibakteri (Thitilertdecha, et al., 2008). Kulit buah

rambutan mengandung senyawa golongan tanin, polifenol, dan saponin

(Tjandra, et al., 2011). Daun rambutan (Naphelium lappaceum Linn)

mengandung senyawa saponin, tanin (Dalimarta, 2003).

Ekstrak etanol daun rambutan (Nephelium lappaceum Linn)

efektif untuk membunuh larva Aedes aegypti instar III (Asiah, 2008).

Menurut Maradona (2013) ekstrak etanol daun rambutan

(Nephelium lappaceum Linn) yang tumbuh di taman Fakultas Kedokteran

dan Ilmu Kesehatan memiliki aktivitas antibaketri terhadap bakteri

Staphylococcus aureus ATCC 25925 serta mengandung metabolit

sekunder yaitu flavonoid, saponin, tanin dan hidrokuinon.

Berdasarkan laporan penelitian-penelitian tersebut, maka

dilakukan pengujian aktivitas antioksidan ekstrak daun rambutan yang

diekstraksi secara maserasi langsung dengan pelarut etanol 70% dan

pemisahan secara partisi dengan pelarut n-Heksana, etil asetat, dan etanol

menggunakan metode DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil). Metode DPPH

dipilih karena metode ini sederhana, mudah, cepat, peka, hanya

Page 18: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

3

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

memerlukan sedikit sampel dan dapat mengukur aktivitas total antioksidan

baik dalam pelarut polar maupun nonpolar (Prakash, 2001).

1.2 Rumusan Masalah

a. Apakah ekstrak daun rambutan (Nephelium lappaceum Linn) memiliki

aktivitas antioksidan?

b. Berapakah nilai IC50 (Inhibitory Concentration) dan nilai AAI

(Antioxidant Activity Index) dari masing masing ekstrak daun

rambutan (Nephelium lappaceum Linn)?

1.3 Tujuan Penelitian

Untuk menguji aktivitas antioksidan dari ekstrak daun

rambutan (Nephelium lappaceum Linn) dengan metode DPPH

(2,2-difenil-1-pikrilhidrazil).

1.4 Manfaat Penelitian

Untuk memberikan informasi yang dapat dipertanggungjawabkan

secara ilmiah kepada masyarakat mengenai aktivitas antioksidan dari

ekstrak daun rambutan (Nephelium lappaceum Linn), sehingga daun ini

dapat digunakan sebagai antioksidan alami.

.

Page 19: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

4 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

BAB 2

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Daun Rambutan

2.1.1 Sistematika Daun Rambutan

Daun rambutan (Nephelium lappaceum Linn) memiliki sistematika

tanaman sebagai berikut:

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Subdivisi : Angiospermae

Kelas : Dicotyledonae

Ordo : Sapindales

Famili : Sapindaceae

Genus : Nephelium

Spesies : Nephelium lappaceum Linn

(Rukmana, et al., 2002)

Gambar 2.1 Daun Rambutan (Nephelium lappaceum Linn)

[sumber : koleksi pribadi]

Page 20: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

5

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2.1.2 Uraian Tanaman

2.1.2.1Morfologi

Rambutan merupakan tanaman tahunan. Secara alami, pohon

rambutan dapat mencapai ketinggian 5m-9m. Batang rambutan berkayu

keras, berbentuk gilig, tumbuh kokoh dan berwarna kecoklat-coklatan

sampai putih kecoklatan. Percabangan tumbuh secara horizontal, namun

kadang-kadang sedikit miring ke arah atas. Daun rambutan berbentuk

bulat panjang dengan ujung tumpul atau meruncing, dan pada umumnya

berwarna hijau tua sampai hijau muda, tergantung varietasnya

(Rukmana, 2002).

2.1.2.2 Daerah Asal dan Penyebaran

Rambutan merupakan tanaman buah-buahan tropika basah

yang berasal dari Asia Tenggara. Menurut seorang ahli botani Soviet,

Nikolai Ivanovich Vavulov, sentrum utama asal tanaman rambutan adalah

daerah Indo-Malaya, yang meliputi Indo-Cina, Malaysia, Indonesia dan

Filipina. Di wilayah ini ditemukan sumber genetik rambutan. Para ahli

botani kemudian memastikan bahwa daerah asal tanaman rambutan adalah

Malaysia dan Indonesia. Di Indonesia, tanaman rambutan tersebar di

berbagai wilayah, terutama di Jawa, Kalimantan, dan Sumatera

(Rukmana, 2002).

2.1.2.3 Kandungan Kimia

Daun rambutan (Naphelium lappaceum Linn) mengandung

senyawa saponin, tannin (Dalimarta, 2003). Kulit buah rambutan

mengandung senyawa senyawa golongan tanin, polifenol, dan saponin

(Tjandra, et al., 2011). Kulit batang rambutan mengandung tanin, saponin,

flavonoid, dan zat besi. Buahnya mengandung karbohidrat, protein,

lemak, fosfor, besi, kalsium dan vitamin C. Kulit buah rambutan

mengandung tanin dan saponin. Ekstrak etanol daun rambutan

(Nephelium lappaceum Linn) memiliki kandungan kimia flavonoid,

saponin, tanin dan hidrokuinon (Maradona, 2013).

Page 21: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

6

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2.1.2.4 Khasiat dan Kegunaan

Tanaman rambutan digunakan untuk pengobatan berbagai

penyakit, antara lain kulit buahnya untuk mengatasi sariawan, daun untuk

mengatasi diare dan menghitamkan rambut, akar untuk mengatasi demam

dan serat bijinya untuk mengatasi Diabetes mellitus (Tjandra, et al., 2011).

Kulit dan biji rambutan yang tumbuh di Thailand memiliki sifat

antioksidan dan antibakteri (Thitilertdecha, et al., 2008). Ekstrak etanol

daun rambutan (Nephelium lappaceum Linn) efektif untuk membunuh

larva Aedes aegypti instar III (Asiah, 2008) serta memiliki aktivitas

antibaketri terhadap bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25925

(Maradona, 2013).

2.2 Simplisia

Simplisia adalah bahan alamiah yang dipergunakan sebagai bahan

obat yang belum mengalamai pengolahan apapun kecuali dinyatakan lain,

berupa bahan yang telah dikeringkan. Simplisia dibedakan menjadi tiga,

yaitu simplisia nabati, simplisia hewani, dan simplisia pelikan (mineral).

Simplisia nabati adalah simplisia yang berupa tanaman utuh, bagian

tanaman atau eksudat tanaman. Eksudat tumbuhan ialah isi sel yang secara

spontan keluar dari tumbuhan atau isi sel yang dengan cara tertentu

dipisahkan dari tumbuhannya dan belum berupa senyawa kimia murni

(Anonim, 2000).

2.3 Ekstrak dan Ekstraksi

Ekstrak adalah sediaan kental yang diperoleh dengan

mengekstraksi zat aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani

menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua

pelarut dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sehingga

memenuhi baku yang telah ditetapkan (Soesilo, 1995). Ekstrak adalah

sediaan kering, kental atau cair dibuat dengan menyari simplisia nabati

atau hewani menurut cara yang sesuai, diluar pengaruh cahaya matahari

langsung (Tiwari, et al., 2011).

Page 22: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

7

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Parameter yang mempengaruhi kualitas dari ekstrak adalah bagian

dari tumbuhan yang digunakan, pelarut yang digunakan untuk ekstraksi,

dan prosedur ekstraksi (Tiwari, et al., 2011).

Ekstraksi adalah pemisahan bagian aktif sebagai obat dari jaringan

tumbuhan ataupun hewan menggunakan pelarut yang sesuai melalui

prosedur yang telah ditetapkan (Tiwari, et al., 2011). Selama proses

ekstraksi, pelarut akan berdifusi sampai ke material padat dari tumbuhan

dan akan melarutkan senyawa dengan polaritas yang sesuai dengan

pelarutnya (Tiwari, et al., 2011).

Beberapa metode ekstraksi dengan menggunakan pelarut dibagi

menjadi dua cara, yaitu cara panas dan cara dingin (Ditjen POM, 2000).

Ekstraksi cara dingin dapat dibedakan sebagai berikut:

1. Maserasi

Maserasi adalah proses penyarian simplisia menggunakan pelarut

dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur

kamar (Ditjen POM, 2000). Keuntungan ekstraksi dengan cara

maserasi adalah pengerjaan dan peralatan yang digunakan sederhana,

sedangkan kerugiannya yakni cara pengerjaannya lama, membutuhkan

pelarut yang banyak dan penyarian kurang sempurna. Dalam maserasi

(untuk ekstrak cairan), serbuk halus atau kasar dari tumbuhan obat

yang kontak dengan pelarut disimpan dalam wadah tertutup untuk

periode tertentu dengan pengadukan yang sering, sampai zat tertentu

dapat terlarut. Metode ini cocok digunakan untuk senyawa yang

termolabil (Tiwari, et al., 2011).

2. Perkolasi

Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai

terjadi penyarian sempurna yang umumnya dilakukan pada temperatur

kamar. Proses perkolasi terdiri dari tahap pengembangan bahan, tahap

perendaman, tahap perkolasi antara, tahap perkolasi sebenarnya

(penampungan ekstrak) secara terus menerus sampai diperoleh

ekstrak (perkolat). Untuk menentukan akhir dari pada perkolasi dapat

dilakukan pemeriksaan zat secara kualitatif pada perkolat

Page 23: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

8

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

akhir. Ini adalah prosedur yang paling sering digunakan untuk

mengekstrak bahan aktif dalam penyusunan tincture dan ekstrak cairan

(Tiwari, et al., 2011).

Ekstraksi cara panas dapat dibedakan sebagai berikut:

1. Sokletasi

Sokletasi adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru,

dengan menggunakan alat soklet sehingga terjadi ekstraksi continue

dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik

(Ditjen POM, 2000).

2. Refluks

Refluks adalah ekstraksi dengan menggunakan pelarut pada

temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah

pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik

(Ditjen POM, 2000).

3. Infus

Infus adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur 900C selama

15 menit. Infus adalah ekstraksi menggunakan pelarut air pada

temperatur penangas air dimana bejana infus tercelup dalam penangas

air mendidih, temperatur yang digunakan (96-980C) selama waktu

tertentu (15-20 menit) (Ditjen POM, 2000). Cara ini menghasilkan

larutan encer dari komponen yang mudah larut dari simplisia

(Tiwari, et al., 2011).

4. Dekok

Dekok adalah infus pada waktu yang lebih lama (≥300C) dan

temperatur sampai titik didih air (Ditjen POM, 2000). Dekok adalah

ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur 900C selama 30 menit.

Metode ini digunakan untuk ekstraksi konstituen yang larut dalam

air dan konstituen yang stabil terhadap panas (Tiwari, et al., 2011).

5. Digesti

Digesti adalah maserasi kinetik pada temperatur lebih tinggi dari

temperatur suhu kamar, yaitu secara umum dilakukan pada temperatur

40-500C (Ditjen POM, 2000). Digesti adalah maserasi dengan

Page 24: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

9

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

pengadukan continue pada temperatur lebih tinggi dari temperatur

ruang (umumnya 25-300C). Ini adalah jenis ekstraksi maserasi di mana

suhu sedang digunakan selama proses ekstraksi (Tiwari, et al., 2011).

2.4 Pemisahan secara Partisi (Pemisahan Cair-cair)

Pemisahan dengan cara partisi atau dikenal juga dengan pemisahan

cair-cair pelarut merupakan metode pemisahan suatu senyawa berdasarkan

tingkat kelarutannya di dalam campuran dua pelarut yang tidak bercampur.

Dalam proses isolasi kandungan kimia dari bahan alam, penggunaan

metode partisi dimaksudkan untuk memisahkan campuran komponen

kimia yang terdapat dalam ekstrak dengan menggunakan dua pelarut yang

tidak saling bercampur. Komponen kimia yang ada pada ekstrak tumbuhan

akan larut ke dalam pelarut yang sesuai dengan tingkat kepolaran yang

dimiliki oleh senyawa tersebut (Hostettmann, 2007).

Satu hal yang penting dalam proses memisahkan senyawa dengan

menggunakan metode partisi ini adalah langkah dalam pemilihan

pelarutnya. Dimana pelarut yang dipilih merupakan campuran dua

pelarut yang tidak saling bercampur. Beberapa contoh campuran pelarut

yang digunakan adalah air-diklorometana, air-eter, air-heksana

(Hostettmann, 2007).

2.5 Penapisan Fitokimia

Penapisan fitokimia merupakan tahap pendahuluan dalam suatu

penelitiain fitokimia yang bertujuan untuk memberikan gambaran tentang

golongan senyawa yang terkandung dalam tanaman yang sedang diteliti.

Metode skrining fitokimia dilakukan untuk melihat reaksi pengujian warna

dengan menggunakan suatu pereaksi warna. Hal yang paling berperan

penting dalam penapisan fitokimia adalah pemilihan pelarut dan

metode ekstraksi (Kristianti et al., 2008).

Page 25: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

10

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2.6 Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

Kromatografi lapis tipis (KLT) merupakan salah satu metode

pilihan kromatografi secara fisikokimia (Gandjar dan Rohman, 2007).

Kromatografi lapis tipis (KLT) merupakan bentuk kromatografi planar,

selain kromatografi kertas dan elektroforesis. Pada KLT fase diamnya

berupa lapisan yang seragam (uniform) pada permukaan bidang datar yang

didukung oleh lempeng kaca, plat aluminium atau plat plastik. Meskipun

demikian, kromatografi planar ini merupakan bentuk terbuka dari

kromatografi kolom (Gritter, et al., 1991).

Kromatografi lapis tipis (KLT) dapat dipakai dengan dua

tujuan. Pertama, dipakai untuk mencapai hasil kualitatif, kuantitatif

atau preparatif. Kedua dipakai untuk menjajaki sistem pelarut dan

sistem penyangga yang akan dipakai dalam kromatografi kolom

(Gritter, et al., 1991).

Kromatografi lapis tipis (KLT) dapat digunakan untuk tujuan

analitik dan preparatif. KLT analitik digunakan untuk menganalisa

senyawa-senyawa organik dalam jumlah kecil misalnya, menentukan

jumlah komponen dalam campuran dan menentukan pelarut yang tepat

untuk pemisahan dengan KLT preparatif sedangkan KLT preparatif

digunakan untuk memisahkan campuran senyawa dari sampel dalam

jumlah besar berdasarkan fraksinya, yang selanjutnya fraksi-fraksi

tersebut dikumpulkan dan digunakan untuk analisa berikutnya

(Townshend, 1995).

Kromatografi lapis tipis (KLT) merupakan teknik yang benar-benar

menguntungkan karena tingkat sensitivitasnya sangat besar dan

konsekuensinya jumlah sampel lebih sedikit. Fase gerak yang dikenal

sebagai pelarut pengembang atau cairan pengelusi akan bergerak

sepanjang fase diam karena pengaruh kapiler pada pengembangan secara

mekanik (ascending), atau karena pengaruh gravitasi pada pengembangan

menurun (descending) (Gritter, et al., 1991).

Jumlah volume fase gerak harus mampu mengelusi lempeng

sampai ketinggian lempeng yang telah ditentukan. Setelah lempeng

Page 26: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

11

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

terelusi, dilakukan deteksi bercak (Gandjar dan Rohman, 2007).

Laju pergerakan fase gerak terhadap fase diam dihitung sebagai

retardation farctor (Rf). Nilai Rf diperoleh dengan membandingkan jarak

yang ditempuh oleh zat terlarut dengan jarak yang ditempuh oleh fase

gerak (Gandjar dan Rohman, 2007).

Fase gerak harus memiliki kemurnian yang tinggi. Fase gerak yang

digunakan adalah pelarut organik yang memiliki tingkat polaritas

tersendiri, melarutkan senyawa contoh, dan tidak bereaksi dengan

penjerap. Adsorben umumnya digunakan dalam KLT meliputi partikel

silika gel ukuran 12 µm, alumina, mineral oksida, silika gel dengan

ikatan kimia, selulosa, poliamida, polimer penukar ion, silika gel, dan

fase kiral (Gritter, et al., 1991).

Ada beberapa cara untuk mendeteksi senyawa yang tidak berwarna

pada kromatogram. Deteksi paling sederhana adalah jika senyawa

menunjukkan penyerapan di daerah UV gelombang pendek

(radiasi utama kira-kira 254 nm) atau jika senyawa itu dapat dieksitasi

pada radiasi UV gelombang pendek dan gelombang panjang (365 nm).

Pada senyawa yang mempunyai dua ikatan rangkap atau lebih dan

senyawa aromatik seperti turunan benzena, mempunyai serapan

kuat ± di daerah 230-300 nm (Stahl, 1985).

Identifikasi dari senyawa-senyawa yang terpisah dari lapisan tipis

menggunakan nilai Rf. Polaritas fase gerak perlu diperhatikan pada analisa

dengan KLT, sebaiknya digunakan campuran pelarut organik yang

mempunyai polaritas serendah mungkin. Campuran pelarut yang baik

memberikan fase gerak yang mempunyai kekuatan bergerak sedang.

Secara umum dikatakan bahwa fase diam yang polar akan mengikat

senyawa polar dengan kuat sehingga bahan yang kurang sifat

kepolarannya akan bergerak lebih cepat dibandingkan bahan-bahan polar

(Gritter, et al., 1991).

Page 27: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

12

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2.7 Radikal Bebas

Radikal bebas merupakan salah satu bentuk senyawa yang

mempunyai elektron tidak berpasangan (Winarsi, 2007). Adanya elektron

tidak berpasangan menyebabkan senyawa tersebut sangat reaktif mencari

pasangan. Radikal bebas ini akan merebut elektron dari molekul lain yang

ada di sekitarnya untuk menstabilkan diri. Radikal bebas erat kaitannya

dengan kerusakan sel, kerusakan jaringan, dan proses penuaan

(Fessenden dan Fessenden, 1986). Radikal bebas juga dapat mengubah

suatu molekul menjadi suatu radikal (Winarsi, 2007).

Radikal bebas akan menyerang biomakromolekul penting dalam

tubuh seperti komponen penyusun sel, yaitu protein, asam nukleat, lipid

dan polisakarida. Target utama radikal bebas adalah protein, asam lemak

tak jenuh dan lipoprotein serta DNA termasuk polisakaridanya. Asam

lemak tak jenuh adalah yang paling rentan. Radikal bebas akan merusak

lemak tak jenuh ganda pada membran sel sehingga dinding sel menjadi

rapuh, merusak pembuluh darah dan menimbulkan aterosklerosis. Radikal

bebas juga merusak basa DNA sehingga mengacaukan sistem informasi

genetika dan membentuk sel kanker. Jaringan lipid juga akan dirusak oleh

senyawa radikal bebas sehingga terbentuk peroksida dan menimbulkan

penyakit degeneratif (Winarsi, 2007).

Serangan radikal bebas terhadap molekul sekelilingnya dapat

menyebabkan reaksi berantai dan kemudian menghasilkan senyawa radikal

baru. Hal ini akan menimbulkan kerusakan sel atau jaringan, penyakit

degeneratif hingga kanker. Berbagai gangguan akibat kerja radikal bebas

adalah gangguan fungsi sel, kerusakan struktur sel, molekul yang tidak

teridentifikasi oleh sistem imun bahkan mutasi. Semua gangguan tersebut

memicu timbulnya berbagai macam penyakit (Winarsi, 2007).

Secara umum, tahapan reaksi pembentukan reaksi radikal bebas

melalui 3 tahapan reaksi yaitu inisiasi, propagasi dan terminasi. Tahap

inisiasi merupakan awal pembentukan radikal bebas, tahap propagasi

merupakan pemanjangan rantai dan tahap terminasi merupakan

bereaksinya senyawa radikal dengan radikal lain atau dengan penangkap

Page 28: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

13

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

radikal sehingga potensi propagasinya rendah. Reaktivitas radikal bebas

dapat dihambat dengan cara (Winarsi, 2007):

a. Mencegah (prevention) atau menghambat (inhibition)

pembentukan radikal bebas baru.

b. Menginaktivasi (inactivation) atau menangkap radikal

bebas (free radical scavenger) dan memotong propagasi

(pemutusan rantai).

c. Memperbaiki (repaire) kerusakan yang diakibatkan oleh

radikal bebas.

2.8 Antioksidan

Antioksidan merupakan substansi penting yang mampu melindungi

tubuh dari serangan radikal bebas dan meredamnya. Konsumsi antioksidan

dalam jumlah memadai mampu menurunkan resiko terkena penyakit

degeneratif seperti kardiovaskuler, kanker, aterosklerosis, osteoporosis dan

lain-lain. Konsumsi makanan yang mengandung antioksidan dapat

meningkatkan status imunologi dan menghambat timbulnya penyakit

degeneratif akibat penuaan. Kecukupan antioksidan secara optimal

dibutuhkan oleh semua kelompok umur (Winarsi, 2007).

Antioksidan merupakan substansi nutrisi maupun non-nutrisi yang

terkandung dalam bahan pangan, yang mampu mencegah atau

memperlambat terjadinya kerusakan oksidatif dalam tubuh. Antioksidan

merupakan senyawa pemberi elektron (elektron donor) atau

reduktan/reduktor. Antioksidan mampu menghambat reaksi oksidasi

dengan cara mengikat radikal bebas dan molekul yang sangat reaktif

sehingga kerusakan sel dapat dicegah. Senyawa ini mempunyai berat

molekul kecil tapi mampu menginaktivasi reaksi oksidasi dengan

mencegah terbentuknya radikal (Winarsi, 2007).

Tubuh manusia mempunyai sistem antioksidan yang diproduksi

secara continue untuk menangkal atau meredam radikal bebas, seperti

enzim superoksida dismutase (SOD), katalase dan glutation peroksidase.

Bila jumlah senyawa radikal bebas melebihi jumlah antioksidan alami

Page 29: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

14

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

dalam tubuh maka radikal bebas akan menyerang komponen lipid, protein

dan DNA. Sehingga tubuh kita membutuhkan asupan antioksidan yang

mampu melindungi tubuh dari serangan radikal bebas tersebut

(Winarsi, 2007).

Antioksidan penting untuk kesehatan dan kecantikan serta

mempertahankan mutu produk pangan. Di bidang kesehatan dan

kecantikan, antioksidan berfungsi untuk mencegah penyakit kanker dan

tumor, penyempitan pembuluh darah, penuaan dini, dan lain-lain

(Tamat, et al. 2007). Antioksidan juga mampu menghambat reaksi

oksidasi dengan cara mengikat radikal bebas dan molekul yang sangat

reaktif sehingga kerusakan sel dapat dicegah. Reaksi oksidasi dengan

radikal bebas sering terjadi pada molekul protein, asam nukleat, lipid dan

polisakarida (Winarsi, 2007).

Konsumsi antioksidan dalam jumlah memadai mampu menurunkan

resiko terkena penyakit degeneratif seperti kardiovaskuler, kanker,

aterosklerosis, osteoporosis, dan lain-lain. Konsumsi makanan yang

mengandung antioksidan dapat meningkatkan status imunologi dan

menghambat timbulnya penyakit degeneratif akibat penuaan. Kecukupan

antioksidan secara optimal dibutuhkan oleh semua kelompok umur

(Winarsi, 2007).

Antioksidan dapat berupa enzim (misalnya superoksida dismutase

atau SOD, katalase dan glutation peroksidase), vitamin (misalnya

vitamin E, C, A dan beta-karoten), dan senyawa non enzim (misalnya

flavanoid, albumin, bilirubin, seruloplasmin dan lain-lain) (Winarsi, 2007).

Menurut Winarsi (2007) antioksidan berdasarkan fungsinya

dibedakan menjadi tiga macam yaitu :

a. Antioksidan primer

Berfungsi untuk mencegah terbentuknya radikal bebas baru.

yang ada dalam tubuh yang sangat terkenal adalah enzim

superoksida dismutase (SOD) yang dapat melindungi

hancurnya sel-sel dalam tubuh akibat serangan radikal bebas.

Page 30: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

15

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

b. Antioksidan sekunder

Berfungsi untuk menangkal radikal bebas serta mencegah

terjadinya reaksi berantai sehingga tidak terjadi kerusakan yang

lebih besar, misalnya vitamin E, vitamin C, Cod Liver Oil,

Virgin Coconut Oil dan betakaroten.

c. Antioksidan tersier

Berfungsi untuk memperbaiki sel-sel dan jaringan yang rusak

karena serangan radikal bebas, yang termasuk dalam kelompok

ini adalah jenis enzim, misalnya metionin sulfoksida reduktase

yang dapat memperbaiki DNA pada penderita kanker.

2.9 Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH

Metode DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) digunakan secara luas

untuk menguji kemampuan senyawa yang berperan sebagai pendonor

elektron atau atom hidrogen. Metode DPPH merupakan metode yang

dapat mengukur aktivitas total antioksidan baik dalam pelarut polar

maupun nonpolar. Beberapa metode lain terbatas mengukur komponen

yang larut dalam pelarut yang digunakan dalam analisa. Metode DPPH

mengukur semua komponen antioksidan, baik yang larut dalam lemak

maupun dalam air (Prakash, 2001).

DPPH DPPH-H

(2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) (2,2-difenil-1-pikrilhidrazin)

Gambar 2.2

Reduksi DPPH dari senyawa peredam radikal bebas

(Praksah, et al., 2001)

Page 31: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

16

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Metode DPPH (2,2-diefnil-1-pikrilhidrazil) merupakan metode

yang sederhana, mudah, cepat peka, serta hanya memerlukan sedikit

sampel. DPPH adalah senyawa radikal bebas stabil kelompok nitrit oksida.

Senyawa ini mempunyai ciri-ciri padatan berwarna ungu kehitaman, larut

dalam pelarut DMF atau etanol/metanol 394,3 g/mol, rumus molekul

C18H12N5O6 (Prakash, 2001).

Radikal bebas DPPH yang memiliki elektron tidak berpasangan

memberikan warna ungu dan menghasilkan absorbansi maksimum pada

panjang gelombang 517 nm. Warna akan berubah menjadi kuning saat

elektronnya berpasangan. Pengurangan intensitas warna yang terjadi

berhubungan dengan jumlah elektron DPPH yang menangkap atom

hidrogen. Sehingga pengurangan intensitas warna mengindikasikan

peningkatan kemampuan antioksidan untuk menangkap radikal bebas

(Prakash, 2001).

Aktivitas antioksidan dapat dinyatakan dengan satuan % aktivitas.

Nilai ini diperoleh dengan rumus sebagai berikut (Molyneux, 2004).

% Inhibisi =

x 100%

Berdasarkan rumus tersebut, semakin tinggi tingkat diskolorisasi

(absorbansi semakin kecil) maka semakin tinggi nilai aktivitas

penangkapan radikal bebas (Molyneux, 2004).

Aktivitas antioksidan pada metode DPPH dinyatakan dengan

IC50 (Inhibition Concentration). IC50 adalah bilangan yang menunjukkan

konsentrasi ekstrak yang mampu menghambat aktivitas DPPH sebesar

50%. Semakin kecil nilai IC50 berarti semakin tinggi aktivitas antioksidan

(Blois, 1958).

AAI (Antioxidant Activity Index) adalah nilai yang menunjukkan

besarnya aktivitas antioksidan yang dimiliki suatu ekstrak atau bahan uji.

Nilai AAI dapat ditentukan dengan cara menghitung konsentrasi

DPPH yang digunakan dalam uji (ppm) dibagi dengan nilai IC50 yang

diperoleh (ppm). Penggolongan nilai AAI ini dilakukan oleh Scherer dan

Godoy (2009). Nilai AAI <0,5 menandakan antioksidan lemah,

AAI >0,5-1 menandakan antioksidan sedang, AAI >1-2 menandakan

Page 32: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

17

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

antioksidan kuat, dan AAI >2 menandakan antioksidan yang sangat kuat

(Vasic, et al., 2011).

2.10 Spektrofotometer UV-Vis

Spektrum UV-Vis merupakan hasil interaksi antara radiasi

elektromagnetik (REM) dengan molekul. Radiasi elektromagnetik

merupakan bentuk energi radiasi yang mempunyai sifat gelombang dan

partikel (foton). Karena bersifat sebagai gelombang, maka ada

parameter-parameter yang perlu diketahui, antara lain panjang

gelombang (λ), frekuensi (υ), bilangan gelombang (v), dan serapan (A).

REM memiliki vektor listrik dan magnet yang bergetar dalam bidang yang

tegak lurus satu sama lain dan masing-masing tegak lurus pada arah

perambatan radiasi (Harmita, 2006).

Spektrofotometer dapat digunakan untuk mengukur besarnya

energi yang diabsorpsi atau diteruskan. Jika radiasi monokromatik

melewati larutan yang mengandung zat yang dapat menyerap, maka

radiasi ini akan dipantulkan, diabsorpsi oleh zatnya, dan sisanya akan

ditransmisikan. Lambert dan Beer telah menurunkan secara empiris

hubungan antara intensitas cahaya yang ditransmisikan dengan tebalnya

larutan dan hubungan antara intensitas dengan konsentrasi zat.

Hukum Lambert-Beer (Harmita, 2006):

Keterangan : A = serapan

Io = intensitas sinar yang dating

It = intensitas sinar yang diteruskan

= absorbtivitas molekuler (mol.cm.It-1)

a = daya serap (g.cm. It-1)

b = tebal larutan/kuvet

Page 33: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

18 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

BAB 3

METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Tempat dan Waktu

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Penelitian I dan

Laboratorium Farmakognosi dan Fitokimia Fakultas Kedokteran dan Ilmu

Kesehatan UIN Jakarta, Ciputat. Penelitian ini dilakukan pada bulan

April 2015 sampai dengan Desember 2015.

3.2 Alat dan Bahan

3.2.1 Alat

Blender (Philips), vacuum rotary evaporator (Eyela), pipet volum

(Iwaki Pyrex), mikropipet (Metler Toledo), batang pengaduk, gelas beker

(Pyrex), corong pisah (Iwaki), cawan penguap, kapas, timbangan digital

(GH-202), timbangan kasar (Wiggen Haser), vortex (Thermolyne),

pipa kapiler, chamber, tabung reaksi, spatula, gelas ukur (Pyrex),

labu ukur (Pyrex), Erlenmeyer, penangas air, lampu ultraviolet

(Parkin Elmer), dan spektrofotometer UV-Vis (Hitachi U-2900).

3.2.3 Bahan

Daun rambutan (Nephelium lappaceum Linn) yang diambil dari

taman Fakultas kedokteran dan Ilmu Kesehatan, UIN Syarif Hidayatullah

Jakarta, Etanol 70%, n-Heksana, etil asetat, aluminium foil, kertas saring,

plat KLT, asam klorida, reagen Mayer, reagen Dragendorff, asam sulfat

pekat, asam asetat anhidrat, NaOH, asam sulfat, asam klorida,

ammonia 30%, eter, FeCl3, natrium klorida, metanol p.a (Merck),

DPPH (2,2-diefnil-1-pikrilhidrazil) (Sigma Aldrich), kloroform, asam

askorbat (Prolabo), dan aquadest.

Page 34: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

19

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

3.3 Prosedur Penelitian

3.3.1 Pengambilan Bahan

Daun rambutan diambil dari taman Fakultas Kedokteran dan Ilmu

Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta.

Selanjutnya daun dideterminasi di Lembaga Ilmu Penelitian Indonesia

(LIPI) Cibinong, Bogor.

3.3.2 Penyiapan Simplisia

Sampel daun rambutan (Nephelium lappaceum Linn) yang

diperoleh disortasi basah kemudian ditimbang. Sampel daun rambutan

selanjutnya dicuci bersih dengan air mengalir lalu dikeringkan pada

suhu ruangan dengan cara dikering-anginkan. Sampel daun rambutan

yang telah kering disortasi kering dan ditimbang kemudian

dihaluskan menggunakan blender hingga diperoleh serbuk daun rambutan

(Nephelium lappaceum Linn). Serbuk daun rambutan kemudian disimpan

dalam wadah yang bersih untuk dilakukan langkah selanjutnya.

3.3.3 Pembuatan Ekstrak Etanol

Serbuk simplisia daun rambutan (Nephelium lappaceum Linn)

dimaserasi dengan etanol 70% selama 2 sampai 3 hari dengan beberapa

kali pengadukan kemudian disaring. Maserasi dilakukan sampai filtrat

terakhir mendekati jernih. Filtrat yang terkumpul kemudian dipekatkan

dengan vacuum rotary evaporator pada suhu 45-500C hingga diperoleh

ekstrak kental etanol.

Rendemen ekstrak =

x 100%

3.3.4 Penapisan Fitokimia

a. Identifikasi alkaloid

Sebanyak satu gram serbuk simplisia dibasakan dalam 5 mL

ammonia 30%. Dikocok kuat kemudian ditambahkan 20 mL kloroform

dan dikocok kembali dengan kuat (larutan A). Setengah larutan A

tersebut diekstraksi dengan 10 mL asam klorida (1:10) sehingga

Page 35: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

20

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

diperoleh larutan B. Larutan B dibagi dalam dua tabung reaksi,

ditambahkan masing masing pereaksi Dragendorff dan Mayer. Bila

terbentuk endapan merah bata dengan pereaksi Dragendorff dan

endapan putih dengan pereaksi Mayer menunjukkan adanya senyawa

alkaloid (Farnsworth, 1996).

b. Identifikasi Flavonoid

Sebanyak 0,5 gram ekstrak dilarutkan dengan 2 mL etanol 70%

dan ditambahkan 3 tetes larutan NaOH. Terjadinya perubahan

intensitas warna pada penambahan asam sulfat mengindikasikan

adanya senyawa flavonoid (Tiwari, et al., 2011).

c. Identifikasi Saponin

Sebanyak 0,5 gram ekstrak kental ditambahkan 2 mL

aquadest, kemudian dikocok selama 10 detik. Hasil positif

ditunjukkan dengan terbentuknya buih yang stabil selama tidak

kurang dari 10 menit (Tiwari, et al., 2011).

d. Identifikasi Triterpenoid dan Steroid

Sebanyak satu gram ekstrak kental dimasukkan dengan

20 mL eter selama dua jam (dalam wadah tertutup rapat). Disaring

dan diambil filtratnya. Kemudain 5 mL dari filtrat diuapkan dalam

cawan penguap hingga diperoleh residu atau sisa. Ke dalam residu

ditambahakan 2 tetes asam asetat anhidrat dan 2 tetes asam sulfat

pekat. Terbentuknya warna hijau atau merah menunjukkan adanya

senyawa golongan steroid dan triterpenoid (Farnsworth, 1996).

e. Tanin

Sebanyak 0,5 gram ekstrak kental diekstraksi dengan etanol.

Diuapkan sampai kering diatas penangas air. Selah kering dilarutkan

dengan 20 mL air panas dan didinginkan. Ditambahkan 10 tetes

natrium klorida 10% dan disaring. Larutan yang diperoleh

merupakan larutan percobaan. Pada larutan percoban ditambahkan

3 tetes FeCl3 1%. Bila terjadi perubahan warna biru hitam atau

hijau coklat menunjukkan adanya senyawa golongan tanin

(Farnsworth, 1996).

Page 36: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

21

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

3.3.5 Pemisahan secara Partisi Ekstrak Etanol Total (E1) Daun

Rambutan (Nephelium lappaceum Linn) dengan Pelarut n-Heksana,

Etil Asetat dan Etanol

Sebanyak 10 gram ekstrak etanol total (E1) daun rambutan

(Nephelium lappaceum Linn) dilarutkan dengan 100 mL etanol

kemudian dimasukkan ke dalam corong pisah. Ke dalam corong

tersebut kemudian dimasukann pelarut n-Heksana sebanyak 100 mL

untuk dilakukan proses pemisahan secara partisi. Corong pisah

tersebut kemudian dikocok dengan kuat sehingga tercampur dan

didiamkan hingga memisah menjadi dua fraksi, yaitu fraksi etanol dan

fraksi n-Heksana. Fraksi n-Heksana kemudian dikeluarkan dari corong

pisah sedangkan fraksi etanol dipartisi kembali dengan pelarut

n-Heksana. Partisi dengan pelarut n-Heksana dilakukan berulang kali

hingga fraksi n-Heksana mendekati berwarna bening. Fraksi etanol

selanjutnya dipartisi kembali menggunakan pelarut etil asetat sebanyak

100 mL lalu dikocok dengan kuat sehingga tercampur dan didiamkan

hingga memisah menjadi dua fraksi, yaitu fraksi etanol dan fraksi etil

asetat. Fraksi etil asetat kemudian dikeluarkan dari corong pisah

sedangkan fraksi etanol dipartisi kembali dengan etil asetat. Partisi

dengan pelarut etil asetat dilakukan berulang kali hingga fraksi etil

asetat mendekati berwarna bening. Dari proses partisi ini didapatkan

tiga fraksi yaitu fraksi n-Heksana, fraksi etil asetat dan fraksi air. Ketiga

fraksi ini masing-masing diuapkan dengan vacuum rotary evaporator

sampai didapatkan ekstrak kental fraksi n-Heksana (NH), fraksi

etil asetat (EA) dan fraksi etanol (E2). Masing-masing ekstrak kental

yang diperoleh diuji aktivitas antioksidannya dengan metode

DPPH (2,2-difenil-1-pikrihidrazil).

Page 37: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

22

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

3.3.6 Pengujian Antioksidan secara Kualitatif dengan Metode

Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

Ekstrak daun rambutan [ekstrak etanol total (E1), ekstrak fraksi

n-Heksana (NH), ekstrak fraksi etil asetat (EA), dan ekstrak fraksi

etanol (E2)] masing-masing ditimbang 50 mg dilarutkan dengan

etanol 50 mL (1000 ppm). Silika gel pada lempeng aluminium

digunakan sebagai fase diam. Setelah itu chamber yang berisi eluen

dijenuhkan (Ghasal dan Mandal, 2012).

Ekstrak daun rambutan (Nephelium lappaceum Linn) ditotolkan

pada plat KLT menggunakan pipa kapiler. Proses elusi dilakukan

dengan cara plat KLT dimasukkan ke dalam chamber yang berisi eluen

dan telah dijenuhkan. Eluen dibiarkan terelusi hingga mencapai batas

plat yang telah ditandai sebelumnya. Setelah selesai, plat KLT

dikeluarkan dari chamber, plat KLT kemudian dikeringkan dan

disemprot dengan larutan DPPH 0,1 mM (Ghasal dan Mandal, 2012).

Bercak pada plat KLT yang memiliki aktivitas antioksidan akan

berubah menjadi warna kuning dengan latar belakang ungu

(Kuntorini dan Astuti, 2010).

3.3.7 Pengujian Antioksidan secara Kuantitatif dengan Metode DPPH

3.3.7.1 Pembuatan Larutan DPPH 0,1 mM

Sebanyak 1,98 mg DPPH (BM 394,32) dilarutkan dengan

metanol p.a dan dimasukkan kedalam labu ukur 50 mL. Volume

dicukupkan dengan metanol p.a hingga tanda batas, kemudian

ditempatkan dalam botol gelap (Molyneux, 2004)

3.3.7.2 Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum DPPH

Sebanyak 2 mL larutan DPPH 0,1 mM dimasukkan ke dalam

tabung reaksi lalu ditambahkan metanol p.a sebanyak 2 mL, tutup

dengan aluminium foil, dihomogenkan dengan vortex lalu dituang ke

dalam kuvet dan diukur pada panjang gelombang 400-700 nm

menggunakan spektrofotometer UV-Vis (Musfiroh dan Syarief, 2009).

Page 38: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

23

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

3.3.7.3 Pembuatan Larutan Blanko

Dipipet 2 mL larutan DPPH (0,1 mM) ke dalam tabung

reaksi dan ditambahkan metanol p.a sebanyak 2 mL. Tutup dengan

aluminium foil. Kemudian dihomogenkan dengan vortex dan diinkubasi

dalam ruangan gelap selama 30 menit (Molyneux, 2004). Serapan

larutan blanko diukur dengan spektrofometer UV-Vis pada panjang

gelombang maksimum.

3.3.7.4 Pembuatan Larutan Pembanding Vitamin C

a. Pembuatan larutan pembanding vitamin C

Sebanyak 50 mg serbuk vitamin C dilarutkan dengan metanol

p.a dan dimasukkan ke dalam labu ukur 50 mL sehingga diperoleh

larutan induk vitamin C dengan konsentrasi 1000 ppm. Kemudian

dari larutan induk dibuat seri konsentrasi 2 ppm, 4 ppm, 6 ppm,

8 ppm, dan 10 ppm.

b. Pengukuran serapan dengan menggunakan spekrofotometer UV-Vis

Masing-masing konsentrasi larutan pembanding vitamin C

sebanyak 2 mL dimasukkan kedalam tabung reaksi. Ditambahkan

larutan DPPH 0,1 mM sebanyak 2 mL, dihomogenkan dengan

vortex. Selanjutnya diinkubasi dalam ruangan gelap selama 30 menit

(Molyneux, 2004). Serapan diukur pada panjang gelombang

maksimum.

3.3.7.5 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Daun Rambutan

a. Pembuatan larutan uji ekstrak daun rambutan

Ekstrak etanol daun rambutan etanol total (E1), ekstrak

fraksi n-Heksana (NH), ekstrak fraksi etil asetat (EA), dan ekstrak

fraksi etanol (E2) masing-masing ditimbang 50 mg, kemudian

dilarutkan dengan metanol p.a. Larutan dimasukkan ke dalam labu

ukur 50 mL. Volume dicukupkan dengan metanol p.a sampai

tanda batas (1000 ppm). Dari larutan induk dibuat seri konsentrasi

10 ppm, 20 ppm, 30 ppm, 40 ppm, dan 50 ppm.

Page 39: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

24

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

b. Pengukuran serapan dengan menggunakan spekrofotometer

UV-Vis

Masing-masing konsentrasi larutan uji sebanyak 2 mL

dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Ditambahkan larutan DPPH

0,1 mM sebanyak 2 mL, dihomogenkan dengan vortex. Selanjutnya

diinkubasi dalam ruangan gelap selama 30 menit (Molyneux, 2004).

Lalu diukur absorbansinya pada panjang gelombang maksimum

(λ maks) DPPH 0,1 mM.

3.3.8 Analisis Data

a. Penentuan Nilai IC50 (Inhibitory Concentration)

Parameter yang biasa digunakan untuk menginterpretasikan

hasil dari uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH adalah

dengan nilai efficient concentration (EC50) atau sering disebut nilai

IC50, yaitu konsentrasi yang menyebabkan hilangnya 50% aktivitas

DPPH (Molyneux, 2004). Untuk menghitung nilai IC50 diperlukan

data persen inhibisi dari pengujian yang dilakukan. Persen inhibisi

dapat dihitung dengan menggunakan rumus sebagai berikut:

% inhibisi =

x 100%

(Ghosal dan Mandal, 2012)

Konsentrasi sampel dan persen inhibisi yang diperoleh diplot

masing-masing pada sumbu x dan y pada persamaan regresi linear.

Persamaan tersebut digunakan untuk menentukan nilai IC50 dari

masing-masing sampel dinyatakan dengan nilai y sebesar 50 dan

nilai x yang akan diperoleh sebagai IC50 (Nurjanah, et al., 2011).

b. Penentuan nilai AAI (Antioxidant Activity Index)

Nilai AAI dapat ditentukan dengan cara konsentrasi

DPPH yang digunakan dalam uji (ppm) dibagi dengan nilai

IC50 yang diperoleh (ppm). Nilai AAI yang <0,5 menandakan

Page 40: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

25

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

aktivitas antioksidan lemah, AAI >0,5-1 menandakan aktivitas

antioksidan sedang, AAI >1-2 menandakan aktivitas antioksidan

kuat, dan AAI >2 menandakan aktivitas antioksidan sangat kuat

(Faustino, et al., 2010).

Page 41: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

26 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

BAB 4

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Determinasi Tanaman

Determinasi tanaman terlebih dahulu dilakukan untuk

mengetahui identitas tanaman yang digunakan. Determinasi tanaman ini

dilakukan di Herbarium Bogoriense, Pusat Penelitian Biologi LIPI

(Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia) Cibinong, Bogor. Hasil

determinasi menunjukkan bahwa sampel yang digunakan merupakan

Nephelium lappaceum Linn dari famili Sapindaceae (lampiran 2).

4.2 Penyiapan Sampel

Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah daun rambutan

(Nephelium lappaceum Linn) yang diambil dari taman Fakultas

Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

Daun yang diambil merupakan daun muda dan daun tua. Pengambilan

daun dilakukan pada bulan Januari 2015.

Sebanyak 2 kg daun rambutan yang telah di sortasi basah dicuci

dengan air bersih. Sortasi basah dilakukan untuk memisahkan pengotor

dan bagian tanaman yang tidak digunakan dalam penelitian dan

terbawa pada saat proses pengambilan daun rambutan. Pencucian daun

rambutan menggunkan air mengalir untuk membersihkan kotoran yang

menempel pada daun. Daun yang telah dicuci kemudian dikeringkan

selama 6 hari sehingga didapatkan sampel kering daun rambutan

(Nephelium lappaceum Linn) dengan bobot 618 gram. Pengeringan

dilakukan dengan cara dikering-anginkan pada suhu ruangan. Pengeringan

dilakukan untuk menghentikan reaksi enzimatik yang dapat menyebabkan

penguraian atau perubahan kandungan kimia yang terdapat pada daun.

Selain itu, pengeringan dilakukan di tempat yang terlindung dari cahaya

matahari langsung. Hal ini dilakukan untuk menghindari kemungkinan

terjadinya kerusakan pada kandungan kimia daun akibat pemanasan. Daun

yang telah kering selanjutnya disortasi kering untuk dipisahkan dari

Page 42: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

27

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

pengotor-pengotor yang masih terbawa pada saat proses pengeringan.

Daun yang telah disortasi kering kemudian dihaluskan dengan blender

hingga diperoleh serbuk simplisia kering dengan bobot 600 gram.

4.3 Ekstraksi

Proses ekstraksi daun rambutan dilakukan dengan metode

maserasi. Maserasi langsung dilakukan dengan mengekstraksi langsung

simplisia daun rambutan dengan etanol 70%. Maserasi dipilih karena

proses pengerjaan yang mudah dan peralatan yang cukup sederhana. Pada

maserasi ini, digunakan simplisia sebanyak 600 gram. Proses maserasi

dilakukan selama 2 sampai 3 hari. Prosedur diulangi hingga 15 kali proses

maserasi. Total pelarut etanol yang digunakan sebanyak 12 L yang

sebelumnya telah didestilasi terlebih dahulu. Filtrat hasil maserasi disaring

dengan kapas dan kertas saring yang kemudian dipekatkan dengan

vacuum rotary evaporator pada suhu 45-500C hingga diperoleh ekstrak

kental sebanyak 110 gram dengan rendemen 18,33%.

Tabel 4.1 Hasil ekstraksi daun rambutan

Bobot

Serbuk

Bobot

Ekstrak Rendemen

Karakteristik

Bentuk Warna Bau

600 gram 110 gram 18.33% Kental Coklat Khas

Prinsip maserasi adalah pelarut yang digunakan dalam proses

maserasi akan masuk ke dalam sel tanaman melewati dinding sel, isi sel

akan larut karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan didalam

dengan di luar sel melalui proses difusi hingga terjadi keseimbangan

antara larutan di dalam sel dan larutan di luar sel (Ansel, 1989). Maserasi

merupakan metode ekstraksi dingin yang banyak digunakan dan paling

sederhana diantara metode lain, yaitu hanya dengan merendam sampel

dalam pelarut yang sesuai. Sampel dibuat dalam serbuk dengan tujuan

memperluas permukaan bidang sentuh antara etanol dan serbuk simplisia,

dengan demikian penyarian dapat lebih efektif. Pada saat maserasi,

konsentrasi lingkungan luar sel lebih tinggi daripada konsentrasi dalam

Page 43: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

28

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

sel, sehingga isi sel termasuk zat aktifnya akan keluar dan terlarut dalam

pelarut (Anonim, 1993 dalam Yulianty, 2011).

4.4 Penapisan Fitokimia Ekstrak Etanol Total (E1) Daun Rambutan

Penapisan fitokimia dilakukan untuk mengidentifikasi kandungan

metabolit sekunder yang tersari di dalam ekstrak etanol daun rambutan

sehingga dapat diketahui metabolit sekunder yang berpotensi memiliki

aktivitas antioksidan. Hasil penapisan fitokimia yang dilakukan dapat

dilihat pada tabel berikut ini.

Tabel 4.2 Hasil penapisan fitokimia ekstrak etanol total (E1) daun

rambutan (Nephelium lappaceum Linn)

Pengujian Ekstrak Ekstrak Etanol

Alkaloid -

Flavonoid +

Saponin +

Triterpenoid dan Steroid -

Tanin +

Hasil penapisan fitokimia yang dilakukan pada ekstrak etanol daun

rambutan (Nephelium lappaceum Linn) menunjukkan adanya kandungan

senyawa metabolit sekunder diantaranya flavonoid, saponin, dan tanin.

(Lampiran 3).

Page 44: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

29

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

4.5 Pemisahan secara Partisi Ekstrak Etanol Total (E1) Daun Rambutan

Tabel 4.3 Hasil partisi ekstrak etanol total (E1) daun rambutan

(Nephelium lappaceum Linn)

Bobot

Ekstrak

Etanol

Total

(E1)

Fraksi

Ekstrak

Bobot

Ekstrak

(gram)

Rendemen

Ekstrak

(%)

Karakteristik Ekstrak

Bentuk Warna Bau

10 gram

n-Heksana 1,306 13,06 Kental dan

berminyak

Hijau

kecoklatan Khas

Etil Asetat 1,101 11,01 Kental Hijau

kecoklatan Khas

Etanol 1,692 16,92 Kental Coklat Khas

Sebanyak 10 gram ekstrak etanol total (E1) yang diperoleh

dipisahkan secara partisi menggunakan corong pisah. Proses pemisahan

secara partisi ekstrak etanol total (E1) ini menggunkaan pelarut

n-Heksana, etil asetat dan etanol. Metode partisi dimaksudkan untuk

memisahkan campuran komponen kimia yang terdapat dalam ekstrak

dengan menggunakan dua pelarut yang tidak saling bercampur. Komponen

kimia yang ada pada ekstrak tumbuhan akan larut ke dalam pelarut yang

sesuai dengan tingkat kepolaran yang dimiliki oleh senyawa tersebut

(Hostettmann, 2007).

Satu hal yang penting dalam proses memisahkan senyawa dengan

menggunakan metode partisi ini adalah langkah dalam pemilihan

pelarutnya. Dimana pelarut yang dipilih merupakan campuran dua

pelarut yang tidak saling bercampur (Hostettmann, 2007). Pelarut yang

digunakan dalam proses partisi ini yaitu etanol sebagai pelarut polar,

n-heksan sebagai pelarut semipolar dan etil asetat sebagai pelarut

nonpolar. Adapun campuran pelarut yang digunakan dalam proses partisi

ini yaitu (etanol:n-Heksana) dan (etanol:etil asetat). Jumlah pelarut etanol

yang digunakan pada proses partisi ini yaitu etanol 100 mL, n-Heksana

800 mL dan etil asetat 600 mL.

Page 45: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

30

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

4.4 Uji Aktivitas Antioksidan secara Kualitatif

Tabel 4.4 Hasil uji aktivitas antioksidan secara kualitatif

Eluen n-Heksana : Etil Asetat (3:7)

Sinar Biasa Sinar UV366 Sinar UV254

Sebelum disemprot DPPH

Sinar Biasa Sinar UV366 Sinar UV254

Setelah disemprot DPPH

Pengujian kualitatif antioksidan ekstrak daun rambutan dilakukan

dengan metode kromatografi lapis tipis (KLT). Uji antiksidan secara

kualitatif ini dilakukan untuk mengetahui ada atau tidaknya aktivitas

antioksidan dari ekstrak daun rambutan (Nephelium lappaceum Linn).

Ekstrak daun rambutan [Ekstrak etanol total (E1), fraksi n-Heksana (NH),

fraksi etil asetat (EA), dan fraksi etanol (E2) dengan konsentrasi

1000 ppm ditotolkan pada plat KLT kemudian dielusi dengan eluen

n-Heksana:etil asetat (3:7) dan disemprot dengan larutan DPPH kemudian

diiamkan selama 30 menit. Berdasarkan hasil uji antioksidan secara

kualitatif dapat diketahui bahwa ekstrak ekstrak etanol (E1), fraksi

n-Heksana (NH), ekstrak fraksi etil asetat (EA), dan ekstrak fraksi

etanol (E2) memiliki aktivitas antioksidan karena pada keempat ekstrak ini

terlihat bercak berwarna kuning dengan latar belakang ungu.

E1 NH EA E2

E1 NH EA E2

E1 NH EA E2

E1 NH EA E2 E1 NH EA E2

E1 NH EA E2

Page 46: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

31

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

4.7 Uji Aktivitas Antioksidan secara Kuantitatif

Uji aktivitas antioksidan ekstrak daun rambutan

(Nephelium lappaceum Linn) dilakukan dengan menggunakan metode

penangkapan radikal bebas DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil). Metode

DPPH dipilih karena merupakan metode sederhana, mudah, cepat dan

peka serta hanya memerlukan sedikit sampel untuk mengevaluasi aktivitas

antioksidan dari senyawa bahan alam (Molyneux, 2004).

Prinsip pengukuran aktivitas antioksidan secara kuantitatif

menggunakan metode DPPH ini adalah adanya perubahan intensitas warna

ungu DPPH yang sebanding dengan konsentrasi larutan DPPH tersebut.

Radikal bebas DPPH yang memiliki elektron tidak berpasangan akan

memberikan warna ungu. Warna akan berubah menjadi kuning saat

elektronnya berpasangan. Perubahan intensitas warna ungu ini terjadi

karena adanya peredaman radikal bebas yang dihasilkan oleh bereaksinya

molekul DPPH dengan atom hidrogen yang dilepaskan oleh molekul

senyawa sampel sehingga terbentuk senyawa difenil pikrilhidrazin

dan menyebabkan terjadinya peluruhan warna DPPH dari ungu menjadi

kuning. Perubahan warna ini akan memberikan perubahan absorbansi

pada panjang gelombang maksimum DPPH menggunakan

spektrofotometer UV-Vis sehingga akan diketahui nilai aktivitas

peredaman radikal bebas yang dinyatakan dengan nilai IC50

(Inhibitory Concentration) (Molyneux, 2004).

Nilai IC50 didefinisikan sebagai besarnya konsentrasi senyawa uji

yang dapat meredam radikal bebas sebanyak 50%. Semakin kecil nilai IC50

maka aktivitas peredaman radikal bebas semakin tinggi (Molyneux, 2004).

AAI (Antioxidant Activity Index) adalah nilai yang menunjukkan besarnya

aktivitas antioksidan yang dimiliki suatu ekstrak atau bahan uji. Nilai AAI

(Antioxidant Activity Index) ditentukan untuk menggolongkan sifat

antioksidan ekstrak sebagaimana yang dilakukan oleh Scherer dan

Godoy (2009). Nilai AAI diperoleh dengan membandingkan konsentrasi

DPPH yang digunakan dalam uji dengan nilai IC50 yang diperoleh.

Page 47: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

32

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Pengujian aktivitas antioksidan secara kuantitatif ekstrak ekstrak

etanol total (E1), ekstrak fraksi n-Heksana (NH), ekstrak fraksi etil asetat

(EA), ekstrak fraksi etanol (E2), beserta kontrol positif vitamin C

dilakukan dengan berbagai seri konsentrasi menggunakan metode DPPH

yang selanjutnya absorbansinya diukur menggunakan spektrofotometer

UV-Vis.

Pengukuran absorbansi ekstrak dengan DPPH menggunakan

spektrofotometer UV-Vis sebelumnya dilakukan penentuan panjang

gelombang maksimum DPPH. Panjang gelombang maksimum DPPH yang

digunakan berada pada panjang gelombang 516 nm (Lampiran 9). Panjang

gelombang maksimum ini memberikan serapan paling maksimal dari

larutan uji dan memberikan kepekaan paling besar. Selanjutnya, besarnya

aktivitas antioksidan dari ekstrak dan kontrol positif yang digunakan

diukur pada panjang gelombang maksimum.

Pengukuran absorbansi sampel uji maupun kontrol postif dilakukan

dengan 3 kali pengulangan (triplo). Dari hasil pengulangan triplo diambil

nilai rata-rata absorbansinya. Hasil uji aktivitas antioksidan yang diperoleh

dapat dilihat pada tabel berikut:

Tabel 4.5 Hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol total (E1) daun

rambutan (Nephelium lappaceum Linn)

Konsentrasi

(ppm)

Absorbansi

Rata rata

Standar

Deviasi

Aktivitas

Peredaman

(%)

IC50

(ppm) AAI

10 0.2660 0.0015 36.0576

184.285

2.1488

(AAI>2.0

atau

sangat

kuat)

20 0.1966 0.0015 52.7404

30 0.1306 0.0015 68.6058

40 0.0696 0.0015 83.2692

50 0.0260 0.0010 93.75

Blanko 0.4160

Page 48: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

33

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Tabel 4.6 Hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak fraksi n-Heksana (NH)

daun rambutan (Nephelium lappaceum Linn)

Konsentrasi

(ppm)

Absorbansi

Rata rata

Standar

Deviasi

Aktivitas

Peredaman

(%)

IC50

(ppm) AAI

10 0.4150 0 0.883

282.712

0.1401

(AAI<

0.5

atau

lemah)

20 0.4093 0.0068 2.315

30 0.4010 0.0035 4.2959

40 0.3930 0.0035 6.2052

50 0.3856 0.0029 7.9717

Blanko 0.4190

Tabel 4.7 . Hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak fraksi etil asetat (EA)

daun rambutan (Nephelium lappaceum Linn)

Konsentrasi

(ppm)

Absorbansi

Rata rata

Standar

Deviasi

Aktivitas

Peredaman

(%)

IC50

(ppm) AAI

10 0.3634 0.0020 15.8796

466.539

0.8488

(0.5

<AAI<

0.1 atau

sedang)

20 0.3253 0.0015 24.6991

30 0.2956 0.0015 31.5741

40 0.2423 0.0023 43.912

50 0.1980 0 54.1666

Blanko 0.4320

Tabel 4.8 Hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak fraksi etanol (E2) daun

rambutan (Nephelium lappaceum Linn)

Konsentrasi

(ppm)

Absorbansi

Rata-rata

Standar

Deviasi

Aktivitas

Peredaman

(%)

IC50

(ppm) AAI

10 0.3146 0.0006 23.0776

25.1148

1.5767

(1.0<A

A1<2.0

atau

kuat)

20 0.2383 0.0015 41.5215

30 0.1636 0.0015 60

40 0.0933 0.0015 77.1883

50 0.0440 0.0010 89.2420

Blanko 0.4090

Page 49: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

34

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Tabel 4.9 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Vitamin C

Konsentrasi

(ppm)

Absorbansi

Rata-rata

Standar

Deviasi

Aktivitas

Peredaman

(%)

IC50

(ppm) AAI

2 0.2896 0.0025 33.8813

37.224

10.6383

(AAI>2.0

atau

sangat

kuat)

4 0.2023 0.0071 53.8128

6 0.1353 0.0045 69.1096

8 0.0550 0.0043 87.4429

10 0.0053 0.0006 98.7899

Blanko 0.4380

Pengujian aktivitas antioksidan yang dilakukan terhadap ekstrak

etanol total (E1) diperoleh nilai IC50 18,4285 ppm dengan nilai AAI

2,1488. Ekstrak fraksi n-heksan (NH) memiliki nilai IC50 282,7122 ppm

dengan nilai AAI 0,1401. Ekstrak fraksi etil asetat (EA) memiliki nilai

IC50 46,6539 ppm dengan nilai AAI 0,8488. Ekstrak fraksi etanol (E2)

memiliki nilai IC50 25.1148 ppm dengan nilai AAI 1,5767. Vitamin C

sebagai kontrol positif memiliki nilai IC50 3,7224 ppm dengan nilai AAI

10,6383.

Nilai AAI (Antioxidant Activity Index) menggambarkan aktivitas

antioksidan. Nilai AAI yang kurang dari 0,5 menandakan antioksidan

lemah, nilai AAI diantara 0,5 sampai 1 menandakan antioksidan sedang,

nilai AAI diantara 1 sampai 2 menandakan antioksidan kuat, dan nilai AAI

lebih dari 2 menandakan antioksidan yang sangat kuat (Vasic et al., 2012).

Berdasarkan penggolongan tersebut, ekstrak etanol total (E1)

memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat, ekstrak fraksi

n-Heksana (NH) memiliki aktivitas antioksidan yang lemah, ekstrak fraksi

etil asetat (EA) memiliki aktivitas antioksidan yang sedang, dan ekstrak

fraksi etanol (E2) memiliki aktivitas antioksidan yang kuat. Sedangkan

vitamin C sebagai kontrol positif memiliki aktivitas antioksidan yang

sangat kuat.

Vitamin C merupakan antikosidan yang bekerja sebagai oxygen

scavengers, yaitu mengikat oksigen sehingga tidak mendukung reaksi

oksidasi. Dalam hal ini, vitamin C akan mengadakan reaksi dengan

Page 50: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

35

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

oksigen yang berada dalam sistem sehingga jumlah oksigen

akan berkurang. Selain vitamin C, senyawa yang bekerja sebagai

oxygen scavengers diantaranya askorbil palminat, asam eritorbat, dan

sulfit (Gordon, 1990).

Peningkatan konsentrasi senyawa mempengaruhi aktivitas

antioksidannya. Kurva hubungan konsentrasi ekstrak terhadap persen

inhibisi sebagai persen penghambatan radikal bebas DPPH dari

ekstrak etanol total (E1), ekstrak fraksi n-Heksana (NH), ekstrak fraksi

etil asetat (EA), ekstrak fraksi etanol (E2), dan kontrol positif vitamin C

dapat dilihat pada gambar berikut:

Gambar 4.1. Kurva hubungan konsentrasi dan % inhibisi ekstrak etanol

total (E1) daun rambutan (Nephelium lappaceum Linn)

Gambar 4.2. Kurva hubungan konsentrasi dan % inhibisi

ekstrak fraksi n-Heksana (NH) daun rambutan

(Nephelium lappaceum Linn)

y = 1.4591x + 23.111

R² = 0.9933

0

50

100

150

0 5 10 15

% I

nh

ibis

i

Konsentrasi (ppm)

Hubungan Konsentrasi dan %

Inhibisi Ekstrak Etanol Total (E1)

y = 0.1807x - 1.0861

R² = 0.9976

0

50

100

150

0 5 10 15

% I

nh

ibis

i

Konsentrasi (ppm)

Hubungan Konsentrasi dan %

Inhibisi Fraksi n-Heksana

Page 51: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

36

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Gambar 4.1. Kurva hubungan konsentrasi dan % inhibisi

ekstrak fraksi etil asetat (EA) daun rambutan

(Nephelium lappaceum Linn)

Gambar 4.1. Kurva hubungan konsentrasi dan % inhibisi

ekstrak fraksi etanol (E2) daun rambutan

(Nephelium lappaceum Linn)

Gambar 4.5. Kurva hubungan konsentrasi dan % inhibisi vitamin C

y = 0.9579x + 5.3102

R² = 0.9912

0

50

100

150

0 5 10 15

% I

nh

ibis

i

Konsentrasi (ppm)

Hubungan Konsentrasi dan %

Inhibisi Fraksi Etil Asetat

y = 1.68x + 7.8072

R² = 0.994

0

50

100

150

0 5 10 15

% I

nh

ibis

i

Konsentrasi (ppm)

Hubungan Konsentrasi dan %

Inhibisi Fraksi Etanol (E1)

y = 8.2724x + 18.373

R² = 0.9913

0

50

100

150

0 5 10 15

% I

nh

ibis

i

Konsentrasi (ppm)

Hubungan Konsentrasi dan %

Inhibisi Vitamin C

Page 52: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

37

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Kurva di atas diperoleh dengan menggunakan regresi linier pada

aplikasi pengolah data microsoft excel 2010. Koefisien y pada persamaan

linier bernilai 50 merupakan koefisien IC50, sedangkan koefisien x pada

persamaan linier ini merupakan konsentrasi ekstrak yang akan dicari

nilainya, dimana x yang diperoleh merupakan besarnya konsentrasi yang

diperlukan untuk dapat meredam 50% aktivitas radikal DPPH. Nilai R2

menggambarkan linieritas konsentrasi terhadap % inhibisi. Nilai R2

yang

mendekati +1 (bernilai positif) menandakan bahwa dengan semakin

meningkatnya konsentrasi ekstrak, semakin meningkat pula aktivitas

antioksidannya. Hal ini berkaitan dengan jumlah senyawa metabolit

sekunder yang terlarut di dalam ekstrak dan memiliki aktivitas

antioksidan.

Perbedaan nilai IC50 dan AAI antara senyawa pembanding

vitamin C dengan ekstrak daun rambutan (Nephelium lappaceum Linn)

dapat diakibatkan oleh kemampuan masing-masing senyawa dalam

memberikan elektron kepada DPPH, semakin banyak elektron yang

diberikan kepada DPPH akan mengakibatkan penurunan nilai

absorbansinya yang berarti meningkatnya persen inihibsi dan menurunnya

nilai IC50 (Syukur, et al., 2011).

Ekstrak etanol total daun rambutan (E1) yaitu ekstrak yang

diperoleh dari hasil maserasi langsung dengan pelarut etanol 70%,

memiliki nilai IC50 yang lebih rendah dibandingkan dengan ekstrak fraksi

n-Heksana (NH), etil asetat (EA) dan etanol (E2), yaitu ekstrak yang

diperoleh dari proses pemisahan secara partisi ekstrak etanol total (E1).

Hal ini diduga karena adanya pengaruh dari senyawa-senyawa yang

terkandung dalam ekstrak etanol total (E1). Senyawa-senyawa yang

terkandung dalam ekstrak etanol 70% merupakan akumulasi dari senyawa

polar, semipolar dan nonpolar. Ketika ekstrak dipisahkan secara partisi,

maka pengaruh dari senyawa-senyawanya akan berkurang karena

komponen-komponen yang terdapat pada ekstrak telah dipisahkan, yaitu

komponen kimia yang bersifat nonpolar akan tersari dalam pelarut

Page 53: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

38

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

n-Heksana, komponen kimia semipolar akan tersari dalam pelarut etil

asetat dan komponen polar akan tersari dalam pelarut etanol.

Aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol (E1) yang tergolong

sangat kuat berhubungan dengan kandungan metabolit sekunder yang

dikandungnya. Flavonoid merupakan antioksidan eksogen yang

mengandung gugus fenolik dan telah dibuktikan bermanfaat dalam

mencegah kerusakan sel akibat stress oksidatif. Mekanisme kerja dari

flavonoid sebagai antioksidan dapat secara langsung maupun secara

tidak langsung. Flavonoid sebagai antioksidan secara langsung adalah

dengan mendonorkan ion hidrogen sehingga dapat menstabilkan

radikal bebas yang reaktif (Arora, et al.,1998) dan bertindak sebagai

scavenger/penangkal radikal bebas secara langsung (Arora, et al., 1998).

Flavonoid sebagai antioksidan secara tidak langsung bekerja di dalam

tubuh dengan meningkatkan ekspresi gen antioksidan endogen melalui

beberapa mekanisme seperti peningkatan ekspresi gen antioksidan melalui

aktivasi nuclear factor eryhtrid 2 related factor 2 (Nrf2) sehingga terjadi

peningkatan gen yang berperan dalam sintesis enzim antioksidan endogen

seperti SOD (superoxide dismutase) (Sumardika, Jawi, 2012).

Page 54: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

39 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

BAB 5

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil yang diperoleh pada penelitian ini, dapat

disimpulkan beberapa hal sebagai berikut :

Berdasarkan hasil yang diperoleh pada penelitian ini, dapat

disimpulkan beberapa hal sebagai berikut :

1. Ekstrak daun rambutan (Nephelium lappaceum Linn) memiliki

aktivitas antioksidan. Ekstrak etanol total (E1) memiliki aktivitas

antioksidan sangat kuat (AAI = 2,1449), ekstrak fraksi n-heksan

(NH) memiliki aktivitas antioksidan yang lemah (AAI = 0,1415),

ekstrak fraksi etil asetat (EA) memiliki aktivitas antioksidan

sedang (AAI = 0,8483), ekstrak fraksi etanol (E2) memiliki

aktivitas antioksidan kuat (AAI = 1,5789) sedangkan vitamin C

sebagai pembanding memiliki aktivitas antioksidan yang sangat

kuat (AAI = 10,6383).

2. Ekstrak daun rambutan (Nephelium lappaceum Linn) yang

memiliki aktivitas antioksidan paling kuat yaitu ekstrak

etanol total (E1) sedangkan yang memiliki aktivitas antioksidan

lemah yaitu ekstrak fraksi n-Heksana (NH).

5.2 Saran

Disarankan supaya penelitian ini dilanjutkan untuk mengisolasi

senyawa bioaktif dari fraksi yang memiliki aktivitas sebagai antioksidan

paling kuat.

Page 55: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

40

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

DAFTAR PUSTAKA

Andarwulan, N., H. Wijaya, dan D.T. Cahyono. 1996. Aktivitas Antioksidan dari

Daun Sirih (Piper betle L ). Teknologi dan Industri Pangan VII.

Anonim. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta:

Departeman Kesehatan RI.

Ansel, H.C. 1989. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi. Edisi keempat. Jakarta:

UI Press.

Arora, A., M.G. Nair, and G.M. Strasburg. 1998. Structure-Activity

Relationshipsfor Antioxidant Activities of A Series of Flavonoids In A

Liposomal System. Free Radic. Biol.& Med. 24(9): 1355-1363.

Asiah, Siti . 2008. Efektivitas Ekstrak Etanol Daun Rambutan

(Nephelium Lappaceum Linn) Terhadap Kematian Larva Nyamuk Aedes

aegypti Instar III. Skripsi thesis, Universitas Muhammadiyah Surakarta.

Blois, M.S. 1958. Antioxidant Determinations by The Use of A Stable Free

Radical. Journal nature. 181 (4617) : 1199-1200.

Boer, Y. 2000.Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kulit Buah Kandis (Garcinia

parvifolia Miq), Jurnal Matematika dan IPA 1, (1) hal 26-33.

Dalimarta, S. 2003. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Jilid 3. Jakarta.

Ditjem POM. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta:

Departemen Kesehatan RI.

Droge, Wulf. 2002. Free Radicals in The Physiological Control of Cell function.

Physiol Rev.82,47-95.

Faustino, Helio, Nuno Gil, Cecília Baptista and Ana Paula Duarte. 2010.

Antioxidant Activity of Lignin Phenolic Compounds Extracted from Kraft

and Sulphite Black Liquors. Molecules ISSN 1420-3049 ,9308-9322.

Fessenden, R. J. dan J. S. Fessenden. 1986. Kimia Organik. Jakarta: Erlangga.

Farnworth, N. R. 1966. Biological and Phytochemical Screening of Plants.

Journal of Pharmaceutical Sciences.

Gandjar, Rohman. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar

Ghosal, M. Mandal;, P. 2012. Phytochemical Screening and Antioxcidant

Activites of Two Selected”Bihi” fruits Used as Vegetabies in Darjeeling

Page 56: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

41

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Himalaya. Internatonal Journal od Pharmacy and Pharmaceutical Science.

ISSN: 0975-1491.4 (2).

Gordon, M.H. 1990. The Mechanism of Antioxidants Action In Vitro. In B.J.F.

Hudson, editor. Food Antioxidants. London Elvesier Applied Science.

Gritter Roy J., James M. Bobbit, Arthur E. S.1991. Pengantar Kromatografi.

Bandung: Penerbit ITB.

Harmita. 2006. Buku Ajar Analisis Fisikokimia. Depok : Departemen Farmasi

Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Indonesia.

Hal : 15-22.

Hostettmann, K., Marisron A. and Hostetmann, M., 1997. Preparative

Chromatography Techniques, Application in Natural Product Isolation,

Berlin: Springer.

Kristanti, Alfinda Novi. 2008. Buku Ajar Fitokimia. Surabaya: Airlangga

University Press.

Kuntorini,E. Astuti, M. D. 2010. Penentuan Aktivitas Antioksidan Ekstrak

Etanol Bulbus Bawang Dayak (Eleutherine Americana Merr.). Jurnal

Sains dan Terapan Kimia.

Maradona, Doni. 2013. Uji Aktivitas Ekstrak Etanol Daun Durian

(Durio zibethinus L.), Daun Lengkeng (Dimocarous longan Lour), Daun

Rambutan (Nephelium lappaceum L) Terhadap Bakteri Stertococcus

Aureus ATCC 25925 dan Escherichia Coli ATCC 25922. Skripsi. Fakultas

Kedoketarna dan Ilmu Kesehatan, UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

Middleton E., Kaswandi C., Theoharides T.C. 2000. The Effects of Plants

Flavonoids on mammalian Cells: Implications For Inflammation, Heart

Disease, and Cancer. The Americans Society for Pharmacology and

Experimental Therapeutics, Pharmacol Rev 52:673-751.

Molyneux, P. 2004. The Use of Stable Free Radical Diphenyl Picrylhydrazil

(DPPH) For Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin J. Scu.

Technol,26 (2) 211-219.

Musfiroh, E dan Syarief, S. H., 2012, Uji Aktivitas Peredaman Radikal Bebas

Nanopartikel Emas Dengan Berbagai Konsentrasi Sebagai Material

Antiaging Dalam Kosmetik, UNESA. J. Chem, 1 (2) 18-25.

Page 57: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

42

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Nurjanah, Izzati, Abdullah. 2011. Aktivitas Antioksidan dan Komponen Bioaktif

Kerang Pisau (Solen sp.). Jurnal Ilmu Kelautan Vol 16 (3): 119-124. ISSN

0853-7291.

Prakash, A., Rigelhof, F., Miller, E. 2001, Antioxidant Activity, Medalliaon

Laboratories Analitycal Progress, vol 10, No.2.

Rohdiana, D. 2001. Aktivitas Daya Tangkap Radikal Polifenol dalam Daun Teh.

Majalah Jurnal Indonesia,12 (1),53-58.

Rukmana, Rahmat., Yuniarsih,Oesman. 2002. Rambutan Komoditas Unggulan

dan Prospek Agribisnis Yogyakarta: Kanisius.

Saija, A., et al. 1995. Flavonoids as antioxidant agents : importance of their

interaction with biomembranes. Free Radic. Biol. & Med. 19(4): 481-486.

Sashikumar, J. M. Maheshu, V.Jayadev, R. (200(). In vitro antioxidant activity of

methanolic Extract of berberis tinctoria lesch. Root and root bark. India

journal oh herbal medicine and taxycology,3 (2), 53-58.

Scherer, R., dan A. T. Godoy. 2009. Antioxidant Activity Index (AAI) by the 2,2-

diphenyl-1-picrylhydrazyl Method. Food Chemistry, 112, 654-658.

Elsevier.

Soesilo, Slamet. 1995. Farmakope Indonesia Edisi IV. Jakarta: Departemen

Kesehatan Republik Indonesia

Stahl, E. 1995. Analisis Obat secara Kromatografi Dan Mikroskopi. Bandung:

Penerbit ITB.

Sumardika, Jawi. 2012. Water Extract of Sweet Potato Leaf Improved Lipid

Profile and Blood SOD Cntent of Rats with High Cholesterol Diet.

Medicina vol. 43:2.

Syukur, R., G. Alam, Mufidah, A.Rahim, R. Tayeb. 2011. Aktivitas Antiradikal

Bebas Beberapa Ekstrak Tanaman Familia Fabaceae. JST Kesehatan,

vol.1, no. 1, 61 – 67.

Tamat, S. R., T. Wikanta, dan L. S. Maulina. 2007. Aktivitas Antioksidan dan

Toksisitas Senyawa Bioaktif dari Ekstrak Rumput Laut Hijau

(Ulva reticulata Forsskal). Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia. 5: 31-36

Page 58: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

43

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Thitilertdecha, N., Teerawutgulrag, A., Rakariyatham, N. 2008. Antioxidant and

Antibacterial Activities of Nephelium lappaceum L.extracts., Food Science

and Technology. Elsevier.

Tiwari, Prashant., Kumar, Bimlesh., Kaur, Mandepp., Kaur, Gurpreet., Kaur,

Harleen. 2011. Phytochemical Screening and Extraction: A Review.

Department of Pharmaceutical Sciences, Lovely School of Pharmaceutical

Sciences. Punjab.

Tjandra, Oentarini, Rusliati Tati, Zulhipri. 2011. Uji Aktivitas Antioksidan Dan

Profil Fitokimia Kulit Rambutan Rapiah (Nephelium Lappaceum). Jakarta;

Universitas Negeri Jakarta.

Townshend, A. 1995. Ancyclopedia of Analytical Science, Vol 2. London:

Academic Press Inc.

Vasic, S. M., Stefanovic, O. D., Licina, B. Z., Radojevic, I. D.,and Comic, L. R.

2012. Biological Activities of Extracts from Cultivated Granadilla

Passifloraalata. Excli Journal. ISSN: 1611 -2156.

Winarsi, H, 2007. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Yogyakarta: Kanisius.

Yulianty. 2011. Skrining dan Analisis KLT-Bioautografi Senyawa Antimikronba

Beberapa Ekstrak Spons Asal Perairan Laut Pulau Barrang Lompo,

Sulawesi Selatan. Majalah Obat Tradisional, 16 (02), 88-94.

Page 59: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

44

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

LAMPIRAN

Lampiran 1. Alur Penelitian

Sortasi basah, pencucian, pengeringan dalam

dalam suhu ruangan, sortasi kering, perajangan

dan penghalusan

Maserasi dengan pelarut etanol 70 %

kemudian disaring, filtrat yang diperoleh

diuapkan dengan vakum rotary evaporator

Partisi dengan etanol:n-Heksana

Partisi dengan etil asetat

Daun rambutan

(Nephelium lappaceum Linn)

Serbuk daun rambutan

( Nephelium lappaceum Linn)

Ekstrak etanol total (E1) daun

rambutan (Nephelium lappaceum

Linn)

Ekstraksi

Determinasi di Lembaga Ilmu

dan Penelitian Indonesia

(LIPI) Cibinong, Bogor

Ekstrak kental

fraksi n-Heksana

(NH) Ekstrak kental fraksi

etil asetat (EA)

Ekstrak kental

fraksi etanol (E2)

Pengujian aktivitas antioksidan

dengan metode DPPH

Analisis Data

Fraksi

n-Heksana

Fraksi etanol

Fraksi etil asetat Fraksi etanol

Evaporasi

Evaporasi

Skrining

fitokimia

Page 60: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

45

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 2. Hasil Determinasi Daun Rambutan (Nephelium Lappaceum Linn)

Page 61: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

46

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 3. Penapisan Fitokimia Ekstrak Etanol Total (E1) Daun Rambutan

No Golongan

Senyawa Gambar Keterangan (Hasil Uji)

1 Alkaloid

Tidak terbentuk endapan

kuning (Mayer)

Hasil (-) alkaloid

Tidak terbentuk endapan

merah bata (Dragendorff)

(Dragendorff) (Mayer) Hasil (-) alkaloid

2 Flavonoid

Sebelum Setelah

Terjadinya perubahan

intensitas warna coklat

menjadi kuning pada

penambahan asam sulfat

Hasil (+) flavonoid

3 Saponin

Terbentuk busa setinggi

1 cm yang stabil

Hasil (+) saponin

4 Triterpenoid

dan Steroid

Tidak terbentuk warna

hijau atau merah

Hasil (-) triterpenoid dan

steroid

5 Tanin

Terbentuk warna biru

hitam

Hasil (+) fenol

Page 62: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

47

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 4. Perhitungan Rendemen Ekstrak Daun Rambutan

1. Perhitungan rendemen ekstrak etanol total (E1)

Rendemen ekstrak etanol Total (E1) =

100%

= 18,33 %

2. Perhitungan rendemen ekstrak hasil partisi

Rendemen ekstrak fraksi n-Heksana (NH) =

= 13,06 %

Rendemen ekstrak fraksi etil asetat (EA) =

=11,01 %

Rendemen ekstrak fraksi etanol (E2) =

= 16,92 %

Rendemen Ekstrak =

x 100%

Rendemen ekstrak =

x 100%

Page 63: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

48

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 5 Sertifikat Analisa DPPH

Page 64: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

49

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 6. Panjang Gelombang Maksimum DPPH

Page 65: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

50

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 7. Data Absorbansi Ekstrak Etanol Total (E1) Daun Rambutan

Page 66: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

51

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 8. Data Absorbansi Ekstrak Fraksi n-Heksana (NH) Daun Rambutan

Page 67: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

52

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 9. Data Absorbansi Ekstrak Fraksi Etil Asetat (EA) Daun Rambutan

Page 68: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

53

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 10. Data Absorbansi Ekstrak Fraksi Etanol (E2) Daun Rambutan

Page 69: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

54

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 11. Data Absorbansi Vitamin C

Page 70: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

55

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 12. Perhitungan dalam Uji Antioksidan

1. Pembuatan larutan DPPH (0.1 mM)

Banyaknya DPPH yang ditimbang :

0.1 mM =

x

0.1 mM =

x

X = 1.98 mg

Jadi, ditimbang 1.98 mg DPHH dan dilarutkan dengan metanol p.a serta

dicukupkan volumenya hingga 50 mL

2. Pembuatan larutan induk ekstrak etanol (E1), ekstrak fraksi

n-Heksana (NH), ekstrak fraksi etil asetat (EA), dan fraksi etanol (E2)

Konsentrasi 1 ppm setara dengan 1 g/ml, sehingga untuk membuat

konsentrasi 1000 ppm dapat dilakukan dengan menimbang 50 mg ekstrak dan

dicukupkan dengan metanol p.a hingga volumenya 50 ml.

=

= 1000

= 1000 ppm

3. Pembuatan larutan induk vitamin C

Konsentrasi 1 ppm setara dengan 1 g/ml, sehingga untuk membuat

konsentrasi 1000 ppm dapat dilakukan dengan menimbang 50 mg vitamin C

dan dicukupkan dengan metanol p.a hingga volumenya 50 ml.

=

= 1000

= 1000 ppm

4. Perhitungan larutan uji

Pembuatan larutan uji ekstrak daun rambutan dari larutan induk 1000 ppm

menggunakan labu ukur 10 ml.

a. Konsentrasi 10 ppm

N1 x V1 = N2 x V2

1000 ppm x V1 = 10 ppm x 10 ml

V1 = 0.1 L, atau 100 L (jumlah yang dipipet dari larutan induk)

Page 71: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

56

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

b. Konsentrasi 20 ppm

N1 x V1 = N2 x V2

1000 ppm x V1 = 20 ppm x 10 ml

V1 = 0.2 L, atau 200 L (jumlah yang dipipet dari larutan induk)

c. Konsentrasi 30 ppm

N1 x V1 = N2 x V2

1000 ppm x V1 = 30 ppm x 10 ml

V1 = 0.3 L, atau 300 L (jumlah yang dipipet dari larutan induk)

d. Konsentrasi 40 ppm

N1 x V1 = N2 x V2

1000 ppm x V1 = 40 ppm x 10 ml

V1 = 0.4 L, atau 400 L (jumlah yang dipipet dari larutan induk)

e. Konsentrasi 50 ppm

N1 x V1 = N2 x V2

1000 ppm x V1 = 50 ppm x 10 ml

V1 = 0.5 L, atau 500 L (jumlah yang dipipet dari larutan induk)

5. Perhitungan larutan kontrol positif (vitamin C)

Pembuatan larutan kontrol positif dari larutan induk 1000 ppm

menggunakan labu ukur 10 ml.

a. Konsentrasi 2 ppm

N1 x V1 = N2 x V2

1000 x V1 = 2 ppm x 10 ml

V1 = 0.02 L, atau 20 L (jumlah yang dipipet dari larutan induk)

b. Konsentrasi 4 ppm

N1 x V1 = N2 x V2

1000 x V1 = 4 ppm x 10 ml

V1 = 0.04 L, atau 40 L (jumlah yang dipipet dari larutan induk)

c. Konsentrasi 6 ppm

N1 x V1 = N2 x V2

1000 x V1 = 6 ppm x 10 ml

V1 = 0.06 L, atau 60 L (jumlah yang dipipet dari larutan induk)

Page 72: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

57

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

d. Konsentrasi 8 ppm

N1 x V1 = N2 x V2

1000 x V1 = 8 ppm x 10 ml

V1 = 0.08 L, atau 80 L (jumlah yang dipipet dari larutan induk)

e. Konsentrasi 10 ppm

N1 x V1 = N2 x V2

1000 ppm x V1 = 10 ppm x 10 ml

V1 = 0.1 L, atau 100 L (jumlah yang dipipet dari larutan induk)

Page 73: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

58

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 13. Perhitungan Persen Inhibisi

1. Perhitungan % inhibisi ekstrak etanol (E1)

a. Konsentrasi 10 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 36,0817 %

b. Konsentrasi 20 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 52,5961 %

c. Konsentrasi 30 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 68,5576 %

d. Konsentrasi 40 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 83,2451 %

e. Konsentrasi 50 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 93,8461 %

2. Perhitungan % inhibisi ekstrak fraksi n-Heksana (NH)

a. Konsentrasi 10 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 0,8341 %

Page 74: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

59

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

b. Konsentrasi 20 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 2,3832 %

c. Konsentrasi 30 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 4,3136 %

d. Konsentrasi 40 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 6,1725 %

e. Konsentrasi 50 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 8,0791 %

3. Perhitungan % inhibisi ekstrak fraksi etil asetat (EA)

a. Konsentrasi 10 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 15,7480 %

b. Konsentrasi 20 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 24,6641 %

Page 75: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

60

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

c. Konsentrasi 30 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 31,5655 %

d. Konsentrasi 40 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 43,9092 %

e. Konsentrasi 50 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 54,0991 %

4. Perhitungan % inhibisi ekstrak fraksi etanol (E2)

a. Konsentrasi 10 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 23,0938 %

b. Konsentrasi 20 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 41,5444 %

c. Konsentrasi 30 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 60,0195 %

Page 76: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

61

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

d. Konsentrasi 40 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 77,6148 %

e. Konsentrasi 50 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 89,0518 %

5. Perhitungan % inhibisi vitamin C

a. Konsentrasi 2 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 33,9041 %

b. Konsentrasi 4 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 53,8356 %

c. Konsentrasi 6 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 68,9954 %

d. Konsentrasi 8 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 87,5799 %

Page 77: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

62

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

e. Konsentrasi 10 ppm

% inhibisi =

x 100%

% inhibisi = –

x 100%

% inhibisi = 98,7899 %

Page 78: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

63

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 14. Perhitungan IC50

1. Perhitungan IC50 ekstrak etanol (E1)

Sebelumnya konsentrasi (x) dan % inhibisi (y) dari ekstrak etanol (E1) dibuat

persamaan regresi linearnya menggunakan aplikasi pengolah data

microsoft excel 2007 hingga diperoleh persamaan y = 1.4591x + 23.111.

Dari persamaan inilah dihitung nilai IC50 nya.

Y = 1.4591x + 23.111

50 = 1.4591x + 23.111

X =

X = 18.4285 ppm

2. Perhitungan IC50 ekstrak fraksi n-Heksana (NH)

Sebelumnya konsentrasi (x) dan % inhibisi (y) dari ekstrak fraksi n-Heksana

(NH) dibuat persamaan regresi linearnya menggunakan aplikasi pengolah data

microsoft excel 2007 hingga diperoleh persamaan y = 0.1807x - 1.0861.

Dari persamaan inilah dihitung nilai IC50 nya.

Y = 0.1807x - 1.0861

50 = 0.1807x - 1.0861

X =

X = 282.7122 ppm

3. Perhitungan IC50 ekstrak fraksi etil asetat (EA)

Sebelumnya konsentrasi (x) dan % inhibisi (y) dari ekstrak fraksi etil asetat

(EA) dibuat persamaan regresi linearnya menggunakan aplikasi pengolah data

microsoft excel 2007 hingga diperoleh persamaan y = 0.9579x + 5.3102.

Dari persamaan inilah dihitung nilai IC50 nya.

Y = 0.9579x + 5.3102

50 = 0.9579x + 5.3102

X =

X = 46.6539 ppm

Page 79: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

64

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

4. Perhitungan IC50 ekstrak fraksi etanol (E2)

Sebelumnya konsentrasi (x) dan % inhibisi (y) dari ekstrak fraksi etanol (E2)

dibuat persamaan regresi linearnya menggunakan aplikasi pengolah data

microsoft excel 2007 hingga diperoleh persamaan y = 1.68x + 7.8072.

Dari persamaan inilah dihitung nilai IC50 nya.

Y = 1.68x + 7.8072

50 = 1.68x + 7.8072

X =

X = 25.1148 ppm

5. Perhitungan IC50 vitamin C

Sebelumnya konsentrasi (x) dan % inhibisi (y) dari vitamin C dibuat

persamaan regresi linearnya menggunakan aplikasi pengolah data

microsoft excel 2007 hingga diperoleh persamaan y = 8.2724x + 18.373.

Dari persamaan inilah dihitung nilai IC50 nya.

Y = 8.2724x + 18.373

50 = 8.2724x + 18.373

X =

X = 3.4109 ppm

Page 80: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

65

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 15. Perhitungan Nilai AAI (Antioxidant Activity Index)

1. Perhitungan nilai AAI dari ekstrak etanol (E1)

Konsentrasi DPPH yang digunakan adalah 1.98 mg/50 ml = 39.6 ppm serta

nilai IC50 ekstrak etanol (E1) yang diperoleh sebesar 18.4285 ppm.

AAI =

AAI =

AAI = 2.1488

Jadi nilai AAI dari ekstrak etanol adalah 2,1488 dan tergolong sangat kuat.

2. Perhitungan nilai AAI dari ekstrak fraksi n-Heksana (NH)

Konsentrasi DPPH yang digunakan adalah 1.98 mg/50 ml = 39.6 ppm serta

nilai IC50 ekstrak fraksi n-heksan (NH) yang diperoleh sebesar 282.7122 ppm.

AAI =

AAI =

AAI = 0.1401

Jadi nilai AAI dari ekstrak fraksi n-Heksana (NH) adalah 0.1401 dan

tergolong lemah.

3. Perhitungan nilai AAI dari ekstrak fraksi etil asetat (EA)

Konsentrasi DPPH yang digunakan adalah 1.98 mg/50 ml = 39.6 ppm serta

nilai IC50 ekstrak fraksi etil asetat (EA) yang diperoleh sebesar 46,6539 ppm.

AAI =

AAI =

AAI = 0.8488

Jadi nilai AAI dari ekstrak fraksi n-heksan(NH) adalah 0.8488 dan tergolong

sedang.

Page 81: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

66

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

4. Perhitungan nilai AAI dari ekstrak fraksi etanol (E2)

Konsentrasi DPPH yang digunakan adalah 1.98 mg/50 ml = 39.6 ppm serta

nilai IC50 ekstrak fraksi etanol (E2) yang diperoleh sebesar 46.6774 ppm.

AAI =

AAI =

AAI = 1.5767

Jadi nilai AAI dari ekstrak fraksi etanol (E2) adalah 1.5767 dan tergolong

kuat.

5. Perhitungan nilai AAI dari vitamin C

Konsentrasi DPPH yang digunakan adalah 1.98 mg/50 ml = 39.6 ppm serta

nilai IC50 vitamin C yang diperoleh sebesar 3.4109 ppm.

AAI =

AAI =

AAI = 11.6098

Jadi nilai AAI dari ekstrak fraksi etanol (E2) adalah 11.6098 dan tergolong

sangat kuat.

Page 82: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

67

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 16. Data Absorbansi Uji Aktivitas Antioksidan

- Data absorbansi antioksidan ekstrak etanol total (E1)

Konsentrasi

(ppm)

Absorbansi pada Pengulangan ke- Absorbansi

Rata-rata

%

Inhibisi 1 2 3

10 0.265 0.264 0.267 0.2660 36.0576

20 0.198 0.197 0.195 0.1966 52.7404

30 0.129 0.131 0.132 0.1306 68.6058

40 0.071 0.070 0.068 0.0696 83.2692

50 0.026 0.027 0.025 0.0260 93.7500

- Data absorbansi antioksidan ekstrak fraksi n-Heksana (NH)

Konsentrasi

(ppm)

Absorbansi pada Pengulangan ke- Absorbansi

Rata-rata

%

Inhibisi 1 2 3

10 0.415 0.415 0.415 0.4150 0.8830

20 0.404 0.407 0.417 0.4093 2.3150

30 0.399 0.405 0.399 0.4010 4.2959

40 0.391 0.391 0.397 0.3930 6.2052

50 0.384 0.388 0.385 0.3856 7.9717

- Data absorbansi antioksidan ekstrak etil asetat (EA)

Konsentrasi

(ppm)

Absorbansi pada Pengulangan ke- Absorbansi

Rata-rata

%

Inhibisi 1 2 3

10 0.366 0.364 0.362 0.3634 15.8796

20 0.325 0.327 0.324 0.3253 24.6991

30 0.297 0.294 0.296 0.2956 31.5741

40 0.241 0.245 0.241 0.2423 43.9120

50 0.198 0.198 0.198 0.1980 54.1666

Page 83: SONIA ULFAH-FKIK.pdf

68

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

- Data absorbansi antioksidan ekstrak fraksi etanol (E2)

Konsentrasi

(ppm)

Absorbansi pada Pengulangan ke- Absorbansi

Rata-rata

%

Inhibisi 1 2 3

10 0.315 0.314 0.315 0.3146 23.0776

20 0.237 0.238 0.240 0.2383 41.5215

30 0.164 0.162 0.165 0.1636 60

40 0.095 0.093 0.092 0.0933 77.1883

50 0.044 0.045 0.043 0.0440 89.2420

- Data absorbansi antioksidan vitamin C

Konsentrasi

(ppm)

Absorbansi pada Pengulangan ke- Absorbansi

Rata-rata

%

Inhibisi 1 2 3

2 0.292 0.287 0.290 0.2896 33.8813

4 0.210 0.201 0.196 0.2023 53.8128

6 0.140 0.135 0.131 0.1353 69.1096

8 0.060 0.053 0.052 0.0550 87.4429

10 0.006 0.005 0.005 0.0053 98.7899