SKRIPSI

AFINA NAUFAL

UJI SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL

Swietenia mahagoni TERHADAP SEL KANKER

PAYUDARA MCF-7 SECARA IN VITRO

DENGAN METODE MTT ASSAY

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2018

ii

iii

iv

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum Warahmatullahi Wabarakatuh

Alhamdulillah puji syukur kehadirat Allah Subhanallahu Wa Ta’ala yang senantiasa memberikan rahmat, hidayah, serta karunia-Nya. Hanya kepada-Nya lah kita memohon pertolongan dan memohon ampunan. Dan kepada-Nya lah tempat berlindung dari kejahatan jiwa dan keburukan perbuatan. Sholawat serta salam tak lupa mari kita haturkan kepada junjungan kita nabi Muhammad SAW, semoga kita semua mendapat syafa’atnya di yaumul kiyamah nanti.

Skripsi dengan judul “UJI SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL Swietenia mahagoni TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA MCF-7 SECARA IN VITRO DENGAN METODE MTT ASSAY” ini diajukan untuk memenuhi syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang. Dalam penyusunan skripsi ini penulis tidak terlepas dari peranan pembimbing dan bantuan dari seluruh pihak. Oleh karena itu, dengan segala kerendahan hati, penulis ingin mengucapkan banyak terimakasih kepada:

1. Faqih Ruhyanudin, M. Kep., Sp. Kep. MB, selaku Dekan Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan kesempatan penulis belajar di Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.

2. Hj. Dian Ermawati, S.Farm., Apt., M.Farm., selaku Ketua Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan motivasi dan kesempatan penulis belajar di Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang.

3. Ibu Siti Rofida, S.Si., M.Farm., Apt. selaku Dosen Pembimbing I dan Bapak Ahmad Shobrun Jamil, S.Si., MP. selaku Dosen Pembimbing II atas saran, bimbingan dan arahannya yang dengan sabar telah meluangkan waktunya untuk membimbing dan mengarahkan penulis sampai terselesaikannya skripsi ini.

4. Ibu Engrid Juni Astuti, M.Farm, Apt. selaku Dosen Penguji I dan Ibu Raditya Weka Nugraheni, M.Farm., Apt. selaku Dosen Penguji II yang telah banyak memberikan saran dan masukan demi kesempurnaan skripsi ini.

5. Bapak Dr. Haryoto, M.Sc., selaku Kepala Laboratorium Fakultas Farmasi dan mbak Rela selaku Laboran Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta yang telah bersedia meluangkan waktu dan memberikan tempat agar penulis dapat melaksanakan penelitiannya dengan baik.

v

x

DAFTAR ISI

Halaman

Lembar Pengesahan .............................................................................................. ii

Lembar Pengujian ................................................................................................ iii

KATA PENGANTAR .......................................................................................... iv

RINGKASAN ....................................................................................................... vi

ABSTRACT ........................................................................................................ viii

ABSTRAK ............................................................................................................ ix

DAFTAR ISI .......................................................................................................... x

DAFTAR TABEL .............................................................................................. xiv

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xv

DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................... xvii

DAFTAR SINGKATAN .................................................................................. xviii

BAB I PENDAHULUAN ...................................................................................... 1

1.1 Latar Belakang ................................................................................................ 1

1.2 Rumusan Masalah ........................................................................................... 5

1.3 Tujuan Penelitian ............................................................................................ 5

1.4 Hipotesis ......................................................................................................... 5

1.5 Manfaat Penelitian .......................................................................................... 5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ........................................................................... 6

2.1 Tinjauan Tentang Mahoni (Swietenia mahagoni Jacq.) ................................. 6

2.1.1 Klasifikasi Tanaman ............................................................................... 6

2.1.2 Nama Daerah .......................................................................................... 6

2.1.3 Morfologi Tanaman ................................................................................ 7

2.1.4 Ekologi dan Penyebaran ......................................................................... 7

2.1.5 Manfaat dan Aktifitas Biologi ................................................................ 7

2.1.6 Kandungan Kimia Tanaman ................................................................... 8

2.2 Tinjauan Tentang Ekstraksi .......................................................................... 14

2.3 Tinjauan Tentang Kanker ............................................................................. 16

2.3.1 Definisi.................................................................................................. 16

2.3.2 Sifat dan Karakteristik Sel Kanker ....................................................... 17

2.3.3 Gejala Kanker ....................................................................................... 19

xi

2.3.4 Karsinogen ............................................................................................ 19

2.3.5 Karsinogenesis ...................................................................................... 21

2.3.6 Siklus Pembelahan Sel Kanker ............................................................. 22

2.4 Tinjauan Tentang Kanker Payudara ............................................................. 23

2.4.1 Definisi.................................................................................................. 23

2.4.2 Epidemiologi ......................................................................................... 24

2.4.3 Faktor Resiko ........................................................................................ 24

2.4.4 Tanda dan Gejala .................................................................................. 26

2.4.5 Stadium Kanker Payudara .................................................................... 27

2.5 Tinjauan Tentang Pengobatan Kanker .......................................................... 29

2.6 Tinjauan Tentang Senyawa Antikanker ........................................................ 31

2.7 Tinjauan Tentang Doksorubisin ................................................................... 32

2.7 Tinjauan Sel Kanker Payudara MCF-7 ......................................................... 34

2.8 Perbedaan Sel MCF-7 dan Sel T47D ............................................................ 35

2.9 Tinjauan Tentang Kultur Sel ........................................................................ 36

2.10 Tinjauan Tentang Uji Sitotoksik .................................................................. 37

2.11 Tinjauan Tentang Metode MTT Assay ....................................................... 38

BAB III KERANGKA KONSEPTUAL ............................................................ 39

3.1 Skema Kerangka Konseptual ........................................................................ 39

3.2 Uraian Kerangka Konseptual ........................................................................ 40

BAB IV METODE PENELITIAN .................................................................... 43

4.1 Bahan Uji ...................................................................................................... 43

4.1.1 Bahan Tanaman .................................................................................... 43

4.1.2 Objek Penelitian dan Tempat Penelitian ............................................... 43

4.2 Bahan Penelitian ........................................................................................... 43

4.2.1 Bahan untuk Kontrol Positif ................................................................. 43

4.2.2 Bahan Kimia dan Bahan Lain ............................................................... 43

4.3 Alat Penelitian .............................................................................................. 44

4.4 Variabel Penelitian ........................................................................................ 44

4.4.1 Variabel Bebas ...................................................................................... 44

4.4.2 Variabel Tergantung ............................................................................. 45

4.5 Metode Penelitian ......................................................................................... 45

xii

4.5.1 Rancangan Penelitian ............................................................................ 45

4.5.2 Kerangka Operasional........................................................................... 46

4.6 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji ...................................................................... 47

4.6.1 Penyiapan Simplisia .............................................................................. 47

4.6.2 Pembuatan Ekstrak Bahan .................................................................... 47

4.7 Pembuatan Media ......................................................................................... 48

4.7.1 Pembuatan Media Cair.......................................................................... 48

4.7.2 Pembuatan Media Kultur ........................................................................... 49

4.7.3 Penumbuhan Sel ................................................................................... 50

4.7.4 Penggantian Media ............................................................................... 52

4.7.5 Panen Sel............................................................................................... 53

4.7.6 Perhitungan Sel ..................................................................................... 54

4.8 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji Sampel ..................................... 56

4.8.1 Pembuatan Larutan Induk ..................................................................... 56

4.8.2 Pembuatan Larutan Uji ......................................................................... 56

4.9 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji Kontrol Positif .......................... 56

4.10 Uji Aktivitas Antikanker secara In Vitro dengan Metode MTT Assay ...... 57

4.11 Analisis Data ............................................................................................... 60

4.12 Uji Kromatografi Lapis Tipis ..................................................................... 60

4.12.1 Skrining Alkaloid ................................................................................ 60

4.12.2 Skrining Steroid dan Triterpenoid ...................................................... 61

4.12.3 Skrining Flavonoid ............................................................................. 61

4.12.3 Skrining Polifenol dan Tanin .............................................................. 61

4.12.3 Skrining Antrakuinon ......................................................................... 62

BAB V HASIL PENELITIAN ........................................................................... 63

5.1 Pembuatan Simplisia Serbuk ........................................................................ 63

5.2 Hasil Ekstrak Etanol Biji Mahoni (Swietenia mahagoni) ............................. 63

5.3 Profil Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ........................................................ 63

5.3.1 Identifikasi Senyawa Alkaloid dengan KLT ........................................ 63

5.3.2 Identifikasi Senyawa Terpenoid dengan KLT ...................................... 64

5.3.3 Identifikasi Senyawa Flavonoid dengan KLT ...................................... 65

5.3.4 Identifikasi Senyawa Antrakuinon dengan KLT .................................. 66

xiii

5.3.5 Identifikasi Senyawa Polifenol dan Tanin dengan KLT ...................... 67

5.4 Perhitungan Sel Kanker Payudara MCF-7 dan Volume Panen Sel yang

Ditransfer ..................................................................................................... 68

5.5 DataUji Sitotoksisitas dari Ekstrak Etanol Biji Mahoni (Swietenia mahagoni)

Terhadap Sel Kanker Payudara MCF-7 dengan Metode MTT Assay. ........ 68

5.6 Analisis Data ................................................................................................. 73

BAB VI PEMBAHASAN .................................................................................... 74

BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................... 79

7.1 Kesimpulan ................................................................................................... 79

7.2 Saran ............................................................................................................. 79

DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 80

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

Tabel II.1 Klasifikasi Terpenoid berdasarkan Jumlah Unit Isopren ................... 10

Tabel IV.1 Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara MCF-7 dalam

Setiap Percobaan 45

Tabel V.1 Hasil Identifikasi KLT Golongan Senyawa Ekstrak Biji Mahoni

(Swietenia mahagoni) 67

Tabel V.2 Hasil Absorbansi Kontrol Sel, Kontrol Media dan Kontrol Pelarut .. 69

Tabel V.3 Hasil Absorbansi Kontrol Positif Doksorubisin ................................. 70

Tabel V.4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Etanol Biji Mahoni (Swietenia

mahagoni) Terhadap Sel Kanker Payudara MCF-7 dengan Metode

MTT Assay ......................................................................................... 71

xv

9

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

Gambar 2.1 Mahoni (Swietenia Mahagoni Jacq.) ................................................. 6

Gambar 2.2 Jenis Alkaloid berdasarkan Cincin Heterosiklik .............................. 10

Gambar 2.3 Struktur Dasar Triterpen .................................................................. 11

Gambar 2.4 Struktur Flavonoid ........................................................................... 12

Gambar 2.5 Struktur Dasar Antrakuinon ............................................................. 13

Gambar 2.6 Proses Karsinogenesis ...................................................................... 21

Gambar 2.7 Skema Pembelahan Sel pada Sel Kanker ........................................ 23

Gambar 2.8 Anatomi Payudara Normal .............................................................. 23

Gambar 2.9 Stadium 0 (Karsinoma In Situ) ........................................................ 27

Gambar 2.10 Stadium I Kanker Payudara............................................................. 27

Gambar 2.11 Stadium IIA dan IIB Kanker Payudara ........................................... 28

Gambar 2.12 Stadium IIIA dan IIIB Kanker Payudara......................................... 28

Gambar 2.13 Stadium IV Kanker Payudara .......................................................... 29

Gambar 2.14 Struktur Kimia Doksorubisin .......................................................... 33

Gambar 2.15 Morfologi Sel MCF-7...................................................................... 35

Gambar 2.16 Reaksi Reduksi MTT menjadi Formazan........................................ 38

Gambar 3.1 Skema Kerangka Konseptual 39

Gambar 4.1 Skema Kerangka Operasional 46

Gambar 4.2 Skema Ekstraksi (Swietenia mahagoni (L) Jacq) ............................ 47

Gambar 4.3 Skema Pembuatan Media Cair ......................................................... 48

Gambar 4.4 Skema Pembuatan Media Kultur Lengkap ....................................... 9

Gambar 4.5 Skema Penumbuhan Sel ................................................................... 51

Gambar 4.6 Skema Penggantian Media ............................................................... 52

Gambar 4.7 Skema Panen Sel .............................................................................. 53

Gambar 4.8 Perhitungan Sel ................................................................................ 54

Gambar 4.9 Skema Perhitungan Sel .................................................................... 55

Gambar 4.10 Skema Uji Aktivitas Antikanker secara In Vitro dengan Metode

MTT Assay ....................................................................................... 59

49

xvi

Gambar 5.1 Ekstrak Etanol Biji Mahoni (Swietenia mahagoni)........................... 63

Gambar 5.2 Hasil Identifikasi Senyawa Alkaloid dengan KLT ........................... 64

Gambar 5.3 Hasil Identifikasi Senyawa Terpenoid dengan KLT ......................... 65

Gambar 5.4 Hasil Identifikasi Senyawa Flavonoid dengan KLT ......................... 66

Gambar 5.5 Hasil Identifikasi Senyawa Antrakuinon dengan KLT ..................... 67

Gambar 5.6 Foto Mikrografi Perbesaran 100x Lensa Objektif pada Mikroskop

Inverted. (A) Kontrol Sel yang berisi media kultur lengkap dan sel

kanker payudara MCF-7 dengan ditunjukkan sel berbentuk bulat, (B)

Kontrol Media (media kultur lengkap) yang tidak berisi sel ........... 69

Gambar 5.7 Foto Mikrografi Kontrol Positif Perbesaran 100x Lensa Objektif pada

Mikroskop Inverted. (A) Kondisi sel sebelum ditambahkan reagen

MTT berbentuk bulat (B) Kondisi sel setelah ditambahkan reagen

MTT menunjukkan sel yang masih hidup membentuk kristal

formazan yang berwarna gelap dan berserabut ................................ 70

Gambar 5.8 Kurva Hubungan Antara Konsentrasi Doksorubisin (Swietenia

Mahagoni) Terhadap Persentase Sel Hidup Kanker Payudara

MCF-7 .............................................................................................. 71

Gambar 5.9 Foto Mikrografi Kondisi Sel (A) Sebelum ditambahkan larutan uji

menunjukkan bahwa sel masih hidup dan aktif (B) Sesudah

ditambahkan larutan uji (ekstrak etanol biji mahoni) menunjukkan

sel mati ditandai dengan berwana gelap .......................................... 72

Gambar 5. 10 Kurva Hubungan Antara Konsentrasi Ekstrak Etanol Biji Mahoni

(Swietenia Mahagoni) terhadap Persentase Sel Hidup Kanker

Payudara MCF-7 .............................................................................. 73

xvii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Daftar Riwayat Hidup ....................................................................................... 89

2. Surat Pernyataan................................................................................................ 90

3. Hasil Deteksi Plagiasi ....................................................................................... 91

4. Surat Tugas ....................................................................................................... 94

5. Surat Determinasi Tanaman .............................................................................. 95

6. Proses Pembuatan Simplisia ............................................................................. 96

7. Hasil Optimasi Fase Gerak................................................................................ 97

8. Hasil Perhitungan Konsentrasi Ekstrak Etanol Biji Swietenia mahagoni dan

Doksorubisin .................................................................................................... 98

9. Perhitungan Persentase Sel Hidup .................................................................. 100

10. Gambar Kondisi Sel Setelah Penambahan Larutan Uji dan Doksorubisin ... 101

11. Data Hasil Pembacaan Elisa Reader ............................................................. 104

12. Analisa Probit Doksorubisin terhadap Sel Kanker Payudara MCF-7 ........... 105

13. Analisa Probit Ekstrak Etanol Biji Swietenia mahagoni terhadap Sel Kanker

Payudara MCF-7 ............................................................................................ 107

14. Alat dan Bahan .............................................................................................. 109

xviii

DAFTAR SINGKATAN

BSLT : Brine Shrimp Lethality Test

CO2 : Karbon dioksida

DMEM: Dulbecco’s Modified Eangle Medium

DMSO : Dimethyl Sulfoxide

DNA : Deoxyribose Nucleic Acid

FBS : Fetal Bovine Serum

IARC : International Agency for Research of Cancer

IC50 : Inhibition Concentration

KLT : Kromatografi Lapis Tipis

MCF-7 : Michigan Cancer Foundation type 7

MK : Media Kultur

MTT : Microculture Tetrazolium Salt

PBS : Phosphat Buffer Saline

ROS : Reactive Oxygen Species (ROS)

RPMI : Roswell Memorial Park Institute

SDS : Sodium Dedosil Sulfat

WHO : World Health Organization

80

DAFTAR PUSTAKA

Al Hasan SMM M, Khan MI, Umar BU. 2011. Effect Of Ethanolic Extract Of Swietenia mahagony Seeds on Experimentally Induced Diabetes Mellitus in Rats. Faridpur Med. Coll. J.6(2): 70-73.

Aliyan, H. 2012. Uji Penghambatan Aktivitas Alfa-Glukosidase dan Identifikasi Golongan Senyawa Kimia dari Fraksi Aktif Ekstrak Biji Mahoni. Jakarta: Universitas Indonesia.

Amundson, SA, Myers, TG, Scudiero, D., Kitada, S., Reed, JC, dan Fornace, AJ, 2000, Pendekatan Informatika yang Mengidentifikasi Penanda Chemosensitivity pada Sel Kanker Manusia, Cancer Res, 60: 6101-6110.

Anggraini, Polis Novita, 2008, Aktivitas Campuuran Ekstrak Etanol Herba Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT, Surabaya: Sripsi, Fakultas Farmasi Universitas Airlangga.

Anggrianti, P., 2008, Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70% Buah Kemukus (Piper cubeba L.) terhadap Sel HeLa, Surakarta: Universitas Muhammadiyah Surakarta.

Anonim, 2001, Fighting Cancer with Angiogenesis Inhibitor, http://www.ultranet.com, diakses pada 16 Maret 2017.

Anonim, 2007, ATCC Cell Biology, tersedia dari http://www.atcc.org/common/catalog/numSearch/numResults.cfm?atcc Num = HTB-22, diakses pada 25 Juni 2007.

Anonymous, 1974. Dyeing Reagents For Thin Layer And Paper Chromatography. Merc, Germany.

Aouali, N., Morjani, H., Trussardi, A., Soma, E., Giroux, B., dan Manfait, M., 2003, Peningkatan Sitotoksisitas dan Akumulasi Nuklir Nanospheres yang mengandung Doksorubisin pada Kanker Payudara Manusia MCF-7 Sel Mengekspresikan MRP1, Jurnal Onkologi Internasional, 23: 1195-1201.

Ashton, P, S dan Arnold Arboretum. 2008. Flora malesiana :Spermatophyta I, The Hague, pp. 391-436.

Assidqi, K., Tjahjaningsih, W., Sigit, S., 2012, Potensi Ekstrak Daun Patikan Kebo (Euphorbia hirta) Sebagai Antibakteri Terhadap Aeromonas hydrophila Secara In Vitro, Journal of Marine and Coastal Science, 1 (2), pp. 134-124.

ATCC, 2008, Biologi Sel, ATCC® Nomor: HTB-22TM, Penunjukan: MCF-7, http://www.atcc.org/ATCCAdvancedCatalogSearch/ProductDetails/tabid/452/Default.aspx?ATCCNum=HTB-22&Template=cellBiologi , 19 Juli 2008.

81

Aziz, M.Y.A., Omar, AR., Subramani, T.S., Yeap, S.K., Ho, W.Y., Ismail, N.H., Ahmad, S., dan Alitheen, N.B., 2014, Damnacanthal is a Potent Inducer of Apoptosis with Anticancer Activity by Stimulating p53 and p1 Genes in MCF-7 Breast Cancer Cells, Oncoll Lett, 7 (5): 1479-1484.

Balmer, CM., Valley, A.w., and Iannuci, A., 2005. Cancer Treatment and Chemotherapy. In: Dipiro, J.T., Talbert. R,L., Matzke G.R., Wells, B.G., and Posey, L.M. (Eds). Pharmachotherapy A Patofisiologic Approach, 6th Edition, New York: The McGraw-Hill Co., Inc.

Batra, P., dan Sharma A.K., 2013, Anti-cancer Potential of Flavonoids: Recent Trends and Future Perspectives: Review Article, 3 Biotech 3(6):439-459.

Bera, T.K., Chatterjee, K., Jana, K., Ali, K.M., De, D., Maiti, S., and Ghosh, D., 2013, Antihyperglycemic and Antioxidative Effect of Hdyro-Methanolic (2:3) Extract of the Seed of Swietenia mahagoni (L.) Jacq. in Streptozocininduced Diabetic Male Albino Rat: An Approach Through Pancreas, Genomic, Medicine, Biomarkers, and Heatlh Sciences 4; 107-117.

Bertomi, R.P., 2011, Uji Toksisitas Akut Ekstrak Kulit Batang Pulasari (Alyxiae cortex) dengan metode Brine Shrimp Lethality Test (BST), Skripsi sarjana, Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta, pp.6.

Bhattacharjee, C., Laxmaiah.Ch, Gouda, T.S., Kumar, S., and Debnath, S., 2011, Antimicrobial Activity of Swietenia mahagoni L(Leaf) Against Various Human Pathogenic Microbes, Indo American Journal of Pharm Research. 2011;1(4) 257-261.

Bhurat, M.R., Bavaskar, S.R., Agrawal, A.D., and Bagad., Y.M., 2011, Swietenia mahagoni Linn. – A Phytopharmacological Review, Asian Journal of Pharmaceutical Research, Vol 1, Issue 1, 1-4, 2011.

Breast cancer. 2018. Invasive Ductal Carcinoma (IDC). www.breastcancer.org. Diakses tanggal 13 Juni 2018.

Bruton, L., Lazo, J. S., and Parker, K. L., 2005, Goodman & Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics, 11th Edition, McGrawHill, Lange.

Burger, A., 1970, Medical Chemistry, Thrid EditionWilley, Interscience, New York-London-Sydney-Toronto.

Butt, AJ, Firth, SM, King, MA, dan Baxter, RC, 2000, Protein-Protein Berkemampuan Insulin seperti Protease-3 Memodifikasi Ekspresi Bax dan Bcl-2 dan Memotensialkan Apoptosis Akibat Radiasi P53-Independen pada Kanker Payudara Manusia Sel, J. Biol Chem, 275 (50): 39174-39181.

82

Chaveli-López B. 2014. Oral toxicity produced by chemotherapy: A systematic review. J. Clin. Exp. Dent. 6. doi:10.4317/jced.51337.

Chen, Y.Y., Wang, X.N., Fan, C.Q., Yin, S. and Yue, J.M. (2007). Swietenia mahogins A and B, two novel Limnoids from Swietenia mahogany. Tetrahedron Letters, 48: 7480-7484.

Childs, A.C., Phaneuf, S.L., Dirks, A.J., Phillips, T., and Leeuwenburgh, 2002, Doksorubisin Treatment in Vivo Causes Cytochrome c Release and Cardiomyocyte Apoptosis, As Well As Increased Mitochondrial Efficiency, Superoxide Dismutase Activity, and Bcl-2:Bax Ratio, Cancer Research, 62:4592-4598.

Cancer Chemoprevention Research Center (CCRC), 2009. Prosedur Uji MTT in

vitro. Yogyakarta: Universitas Gajah Mada.

Dalimartha, Setiawan, 2004. Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker, Penebar Swadaya, Jakarta.

De D, Chatterjee K, Ali KM, Bera TK, Ghosh D. 2011. Antidiabetic Potentially of Aqueous-Methanolic Extract of Seed of Swietenia mahagoni (L.) Jacq. in Streptozotocin Induced Diabetic Male Albino Rat: A Correlative and Evidence 14 Based Approach With Antioxidative and Antihyperlipidemic Activities. Evidence Based Complementary and Altenative Medicine. 2011(1):1-4.

Diananda, Rina, 2007. Mengenal Seluk-Beluk Kanker, Katahati, Jogjakarta

Doyle, A., and Griffiths, J. B., 2000, Cell and Tissue Culture for Medical Research, John Willey and Sons, Ltd., New York.

Freshney, R.I., 1987, Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique, Fourth Ed. A John Wiley and Sons, Inc.Publication, New York, USA.

Gewirtz, D.A., 1999, A Critical Evaluation of The Mechanisms of Action Proposed for The Antitumor Effects of The Anthracycline Antibiotics Adriamycin and Daunorubicin, Biochem. Pharmacol., 57:727-741.

Ghosh, S., Besra, S.E., Roy, K., Gupta, J.K., and Vedasiromoni, J.R., 2009, Pharmacological Effects of Methanolic Extract of Swietenia mahagoni Jacq (Meliaceae) Seeds, International Journal of Green Pharmacy; 3:206- 10.

Goh, B.H., dan Kadir, H.A., 2011, In Vitro Cytotoxic Potential of Swietenia macrophylla King Seeds Against Human Carcinoma Cells. Journal of Medicinal Plants Research, Vol. 5 (8), pp. 1395-1404.

Haldar, P.K., Adhikari, S., Bera, S., Bhattacharya, S., Panda, S.P., and Kandar, C.C., 2010, Hepatoprotective Efficacy of Swietenia mahagoni L. Jacq. (Meliaceae) Bark against Paracetamol-induced Hepatic Damage in Rats, Indian Journal of Pharmaceutical Education and Research, India.

83

Han, X., Pan, J., Ren, D., Cheng, Y., Fan, P., and Lou, H., 2008, Naringenin-7-O-Glucoside Protects Against Doksorubisin-Induced Toxicity in H9c2 Cardiomyocytes by Induction of Endogenous Antioxidant Enzymes, Food and Chemical Toxicology, 46:3140-3146.

Hanahan, D., and Weinberg, R.A., 2000, The Hallmarks of Cancer, Celm, Cell Press., hal 57-70.

Harbone, J.B. (1987). Metoda Fitokimia Penuntun Cara Menganalisa Tumbuhan. Diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 13, 234-236.

Harris ED, Poulose SM, Patil B. 2009. Impact of citrus limonoids on human health. http://www.actahort.org/books/744/744_12.htm Diakses pada 25 Nowember 2017.

Harsal, A., Rachman, A., 2016, Mengenal Lebih Dalam Tentang Kanker, Medicinus, Vol. 29, No. 1, p. 10-15.

Hartati, Salleh, L.Md., Azis, A.A., Yunos, M.A.C., 2013, Pengaruh Jenis Pelarut Ekstraksi Biji Mahoni (Swietenia mahagoni Jacq) Terhadap Aktivitas Antioksidan dan Antibakteri, Jurnal Bionature, Vol. 14 No. 1, pp. 11-15.

Haryadi, D., (2012) Senyawa Fitokimia dan Sitotoksisitas Ekstrak Daun Surian (Toona sinensis) Terhadap Sel Vero dan MCF-7. Bogor: Departemen Biokimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Institut Pertanian Bogor.

Hernani, Wijanarko, R.W., Hayani, E., 1990. Identifikasi Komponen dari Bangle (Zingiber cassumunar Roxb) Secara Kromatografi Lapis Tipis. Buletin Penelitian Tanaman Rempah dan Obat, Vol.V, No.2.

International Agency for Research on Cancer (IARC) / WHO. (2012). GLOBOCAN 2012: Estimated Cancer Incidence, Mortality, and Prevalence Worldwide in 2012. Diakses melalui http://www.globocan.iarc.fr/Pages/fact_sheets_population.aspx pada tanggal 16 April 2017.

IUCN, 2017. Swietenia mahagoni. http://www.iucnredlist.org/details?32519/0 Diakses pada tanggal 5 Januari 2018.

Jamalzadeh, L., Ghafoori, H., Sariri, R., Rabuti, H., Nasirzade, J., Hasani, H., Aghamaali, M.R., 2016. Cytotoxic Effects of Some Common Organic Solvents on MCF-7, RAW-264.7 and Human Umbilical Vein Endothelial Cells. Avicenna J Med Biochem, 4(1):e33453.

Juneidi, S., 2005, Isolasi dan Uji Sitotoksisitas Senyawa Alkaloid dari Spon Koleksi No MD-02c yang Diambil dari Taman Laut Bunaken terhadap Sel HeLa dan Sel Vero, Fakultas Farmasi, UGM, Yogyakarta.

84

Kementerian Kesehatan RI. 2015. InfoDATIN: STOP KANKER. Jakarta: Pusat Data dan Informasi Kementerian Kesehatan RI.

Kementerian Kesehatan RI. (2013). Riset Kesehatan Dasar (RISKESDAS). Jakarta: Badan Litbang Kemenkes RI.

Kristanti, A.N., Aminah, N.S., Tanjung, M., dan Kurniadi, B., 2008. Buku Ajar Fitokimia. Surabaya: Airlangga University Press.

Lantriyadi, Alimuddin, A.H., Rudiyansyah, 2017. Sintesis Senyawa Antrakuinon dari Eugenol dan Ftalat. Jurnal Kimia Khatulistiwa, 6(2):64-69.

Liu, P.X., Gao, J., Chen, Y.J., Long, W., Shen, X., Tang, W.S., 2011, Anticancer Activity of Flavonoids Isolated From Xianhe Yanling Recipe. Chin J Integr Med, 17(6):459-463.

Leba, M.A.U., 2017. Buku Ajar: Ekstraksi dan Real Komatografi. Penerbit Deepublish (Grup Penerbitan CV Budi Utama), Yogyakarta.

Lenny, S., 2006. Senyawa Flavonoida, Fenil Propanoida dan Alkaloida. Medan: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam.

Ma’at, S. 2004. Obat Tradisional Untuk Pelayanan Kesehatan Formal. Prosiding Seminar Nasional. Tanggal 5 September 2004 di Surabaya. 45-49

Maryati dan Sutrisna, E. M., Potensi Sitotoksik Tanaman Ceplukan (Phyliasis angulata L.) Terhadap Sel HeLa, Pharmacon, 8 (1), 1-5.

Melannisa, R., 2004, Pengaruh PGV-1 pada Sel Kanker Payudara T47D yang diinduksi 17β-Estradiol: Kajian Antiproliferasi, Pemacuan Apoptosis dan Antiangiogenesis, Tesis, Program Pasca Sarjana Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.

Meyer BN, Ferigni NR, Putnam JE, Jacobsen RE, Nicholas, McLaughin JL. 1982. Brine shrimp: A Convenient General Bioassay for Active Plant Constituent. Planta med, 45:3134.

Mindawati, N. dan Megawati. 2013. Manual Budidaya Mahoni (Swietenia

macrophylla King.). Pusat Penelitian dan Pengembangan Peningkatan Produktivitas Hutan, Badan Penelitian dan Pengembangan Kehutanan, Bogor.

Minotti, G., Menna, P., Salvatorelli, E., Cairo,G., and Gianni, L. 2004. Anthracyclins: Molecular Advances and Pharmacologic Developments in Antitumor Activity and Cardiotoxicity. Pharmacol Rev., 56:185-228.

Mursiti, S. 2004. Identifikasi Senyawa Alkaloid dalam Biji Mahoni Bebas Minyak (Swietenia macrophylla King) dan Efek Biji Mahoni Terhadap Penurunan Kadar Glukosa Darah Tikus Putih (Rattus novergicus). Yogyakarta:UGM.

85

Muti, Annisa Farida, 2010. Uji Aktivitas Antikanker Ekstrak Etanol Rimpang Kunyit (Curcuma domestica) Terhadap Kanker Kolon Mencit Yang Diinduksi DMBA, Fakultas Farmasi Universitas Airlangga.

Mutiah R., 2015, Evidence Based Kurkumin dari Tanaman Kunyit (Curcuma Longa) sebagai Terapi Kanker Pada Pengobatan Modern, Jurnal Farma Sains, Vol. 1, pp. 28.

Nafrialdi dan Ganiswara, 1995, Farmakologi dan Terapi, Ed.IV, Ganiswara, S. G. (Ed) Bagian Farmakologi Kedokteran Fakultas, Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta.

Nafrialdi dan Sulistia, G., Antikanker, Farmakologi dan Terapi, Edisi 5, Jakarta.

Naveen, Y.P., Rupini, G.K., Ahmed, F., Urooj, A., 2014. Pharmacological effects and active phytoconstituents of Swietenia mahagoni: a review. J. Integr Med. 12 (2): 86-93.

Nogrady T. 1992. Kimia Medisinal. Rasyid R, Musadad A, penerjemah; Niksolihin SM, editor. Bandung: ITB Pr. Terjemahan dari: Medicinal Chemistry.

Nurhayati, A.P.D., Nurlita, A., dan Rachmat F., 2006. Uji Toksisitas Ekstrak Euchema Alvarezii terhadap Artemia Salina sebagai Studi Pendahuluan Potensi Antikanker. Akta kimindo, 2 (1): 118.

Onuki, R., Kawasaki, H., Baba, T., dan Taira, K., 2003, Analisis Jalur Apoptosis Mitokondria Menggunakan Ribozim Tawaran-Target di Sel MCF7 Manusia Tanpa Patroli Jalur Caspase-3-Dependent, Pengembangan Obat Antisense dan Asam Nukleat, 13 (2): 75-82.

Pasaribu, S. (2009). Uji Bioakivitas Metabolit Sekunder Dari Daun Tumbuhan Bandotan. Jurnal Kimia Mulawarman.

Penz, E., Watt, KN., Hergott, CA., Rahman, NM., Psalidas I., 2017. Management of Malignant Pleural Effusion: Challenges and Solutions. Dovepress, 9: 229-241.

Prunet, C., Lemaire-Ewing, S., Ménétrier, F., Néel, D., dan Kadal, G., 2005, Aktivasi Caspase-3-Dependent and -Independent Pathways Selama 7-Ketocholesterol- dan 7β-Hydroxycholesterol Kematian Sel Terinduksi: Studi Morfologi dan Biokimia, Jurnal Toksikologi Biokimia dan Molekuler, 19 (5): 311-326.

Rahardian, M.R.R., Utami, D., 2018. Uji Sitotoksik dan Antiproliferasi Ekstrak Eter daun Binahong (Andredera cordifolia (Tenore) Steen.). Media Farmasi Indonesia 13 (1): 1284-1292.

86

Rasjidi, 2010, Epidemiologi Kanker Pada Wanita, Sagung Seto, Jakarta.

Rasyad, A. 2012. Uji Nefrotoksik dari Ekstrak Etanol Biji Mahoni (Swietenia

mahagoni, Jacq.) Terhadap Tikus Putih Jantan Galur Wistar. Sumatera Selatan: Universitas Bakti Pertiwi.

Robinson, T. (1995). Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Edisi VI. Diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 281.

Rohanova, D., Boccaccini, A.R., Horkavcova, D., Bozdechova, P., Bezdicka, P., Castoralova, M. 2014. Is Non-buffered DMEM solution a suitable medium fot in vitro bioactivity tests?. Journal of Materials Chemistry B, 2: 5068- 5076.

Sahgal G, Ramanathan S, Sasidharan S, Mordi MN, Ismail S, Mansor SM. 2010. Brine Shrimp Lethality and Acute Oral Toxycity Studies on Swietenia mahagoni (Linn.) Jacq. seed methanolic extract. Pharmacognosy Res. 2(4):215-220.doi: 10.4103/0974-8490.69107.

Saifudin, A., 2014. Senyawa Alam Metabolit Sekunder, Deepublish, Sleman.

Schafer, J.M., Lee, E.S., O’Regan, R.M., Yao, K., dan Jordan, V.C., 2000, Rapid Development of Tamoxifen-stimulated Mutant p53 Breast Tumors (T47D) in Athymic Mice, Clinical Cancer Research, 6, 4373-4380.

Schneider, 1997, K. A. , Cancer Genetics, Encyclopedia of Human Biology, 2nd edition, 312-314, Academic Press, New York.

Setiani, R.F.C., 2009. Sitotoksisitas Fraksi Aktif Biji Mahoni (Swietenia

mahagoni) Pada Sel Kanker Payudara T47D. Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor

Shahidur R, Azad C, HusneAra A, Sheikh ZR, Mohammad SA, Lutfun N, Satyajit DS. 2009. Antibacterial actifity of two limonoids from Swietenia mahagoni against multipledrugresistant (MDR) bacterial strains. J Nat Med 63:4145.

Setiawati, A., Susidarti, R.A., Meiyanto, E., 2011. Peningkatan Efek Sitotoksik Doksorubisin Oleh Hesperidin Pada Sel T47D. Bionatura- Jurnal Ilmu-Ilmu Hayati dan Fisik. Vol. 13, No. 2, pp. 85-92.

Setiawati A, Endah P.S, Titi R.W, Rifki M.R. 2014. Sambung Nyawa (Gynura

procumbens (Lour.) Merr.) Sebagai Agen Kemopreventif. http://www.researchgate.net/publication/238106419 Diakses tanggal 28 Januari 2018.

Sianturi AHM. 2001. Isolasi dan Fraksinasi Senyawa Bioaktif dari Biji Mahoni (Swietenia mahagoni Jacq.). Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor.

87

Sisodiya, P.S., 2013. Plant Derived Anticancer Agents: A Review, International Journal of Research and Development in Pharmacy and Life Sciences, No.2, Vol.2, pp 294.

Siswandono dan Bambang, 2008. Kimia Medisinal, Edisi Kedua, Surabaya: Airlangga University Press.

Sofyan, R.., 2000, Terapi Kanker pada Tingkat Molekuler, Cermin Dunia Kedokteran, No. 127,5-10.

Sukardiman. 2000. Isolasi dan Sitotoksik Senyawa Triterpen dari Kulit Batang Swietenia mahagoni Jacq. Surabaya: Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga.

Sukadirman, Pegin, N., Studiawan H., dan Arifiranti, L., 2017, Antidiabetic Activity of Dry Extracts of Swietenia Mahagoni Seeds in Alloxan-Induced Antidiabetic Balb/C, World Journal of Pharmaceutical Research, Vol. 6, Issue 2, p. 1334-13339.

Sukardja, I.D.G., 2000. Onkologi Klinik, Edisi 2, Airlangga University Press, Surabaya.

Sumarni, S., Priyatin, C., Ulfiana, E., 2013. Faktor Risiko yang Berpengaruh terhadap Kejadian Kanker Payudara di RSUP Dr. Kariadi Semarang. Jurnal Kebidanan Vol. 2. pp. 9.

Suryo, J., 2009. Herbal Henny, KP. I. Penyembuh Kanker Pada Perempuan. PT. Bentang Pustaka, Yogyakarta. pp.49-58.

Tjay, T. H., dan Rahardja, K., 2007, Obat-Obat Penting dan Khasiat, Penggunaan, dan Efek-Efek Samping, Penerbit PT. Elex Media Kumpotindo Kelompok Gramedia, Jakarta.

Underwood, J. C. E., 1999, General and Systematic Pathology, Vol. 1, Editor: Sarjadi Ed. 2, EGC Buku Kedokteran, Jakarta.

Vanitha, S., Thiagarajan., V.R.K., Muthuraman, A., Krishnan, S., Aruna, A., and Tharabai, R., 2012, Pharmacological Evaluation of Methanolic Leaf Extract of Swietenia mahagoni on Acrylamide-Induced Neurophatic Pain in Rats, Toxicology and Industrial Health: 1-10.

Verma, S.P., Goldin, B.R., and Lin, P.S., 1998, The Inhibition of the Estrogenic Effects of Pesticides dan Enviromental Chemicals by Curcumin and Isoflavonoids, Envir. Health Presp, 106 (12), 807-812.

WHO, 2014. Cancer Mortality Profile: Indonesia [WWW Document]. World Heal. Organ. URL http://www.who.int/cancer/country-profiles/idn_en.pdf Diakses tanggal 30 Juli 2017.

Wardhani, Kusuma, L., Sulistyani, Nanik, 2012. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etil Asetat Daun Binahong (Anredera scandes (L.) Moq.)

88

Terhadap Shigella flexneri Beserta Profil Kromatografi Lapis Tipis. Yogyakarta: Fakultas Farmasi Universitas Ahmad Dahlan.

Widyaningsih, W., Pramono, S., Widyarini, S., Sugiyanto., 2016, Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Ulva lacuta L. Dengan Metode Kromatografi Lapis Tipis. Media Farmasi, 13: 199-211.

Wilson, L.M., 2005. Gangguan Pertumbuhan Proliferasi dan Diferensiasi Sel. In: Price, S.A., dan Wilson, L.M. Patofisiologi Konsep Dasar Klinis Proses-Proses Penyakit, 6th Edition, Volume 1, Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC, pp. 139-16.

Zampieri, L., Bianchi, P., Ruff, P., dan Arbuthnot, P., 2002, Differential Modulation by Estradiol of P-Glycoprotein Drug Resistance Protein Expression in Cultured MCF7 and T47D Breast Cancer Cells, Anticancer Res, 22(4):2253-9.