respon tanggap kebal bebek terhadap vaksin...

RESPON TANGGAP KEBAL BEBEK TERHADAP

VAKSIN AI H5N1 MONOVALEN (CLADE 2.3.2) DAN

VAKSIN AI H5N1 BIVALEN (CLADE 2.1.3 DAN CLADE 2.3.2)

AHMAD MUSTOFA

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

BOGOR

2014

PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN

SUMBER INFORMASI SERTA PELIMPAHAN HAK CIPTA

Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi berjudul “Respon Tanggap

Kebal Bebek terhadap Vaksin AI H5N1 Monovalen (Clade 2.3.2) dan Vaksin AI

H5N1 Bivalen (Clade 2.1.3 dan Clade 2.3.2)” adalah benar karya saya dengan

arahan dari dosen pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada

perguruan tinggi mana pun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya

yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam

teks dan dicantumkan dalam daftar pustaka di bagian akhir skripsi ini.

Dengan ini saya melimpahkan hak cipta dari karya tulis saya kepada Institut

Pertanian Bogor.

Bogor, Agustus 2014

Ahmad Mustofa

NIM B04100121

ABSTRAK

AHMAD MUSTOFA. Respon Tanggap Kebal Bebek terhadap Vaksin AI H5N1

Monovalen (Clade 2.3.2) dan Vaksin AI H5N1 Bivalen (Clade 2.1.3 dan Clade

2.3.2). Dibimbing oleh RETNO DAMAYANTI SOEJOEDONO dan NI LUH

PUTU IKA MAYASARI

Bebek merupakan salah satu unggas air yang dikenal sebagai reservoir virus

Avian Influenza (AI). Bebek yang terinfeksi tidak memperlihatkan gejala klinis

dan memiliki titer antibodi yang rendah. Tujuan dari penelitian ini adalah

mengetahui titer antibodi bebek yang divaksinasi menggunakan vaksin monovalen

dan bivalen. Sembilan puluh bebek dibagi menjadi 3 kelompok dan setiap

kelompok berisi 30 ekor. Kelompok pertama adalah bebek yang divaksinasi

dengan AI H5N1 monovalen (clade 2.3.2), kelompok kedua adalah bebek yang

divaksinasi dengan AI H5N1 bivalen (clade 2.1.3 dan 2.3.2), dan ketiga adalah

kontrol. Vaksinasi dilakukan pada hari ke-10 dan 31. Sepuluh sampel serum dari

masing-masing kelompok dikoleksi pada hari ke-17, 21, 28, 31, 38 dan 42

dilanjutkan dengan uji Hemaglutinasi Inhibisi. Hasil penelitian menunjukkan

bahwa vaksin monovalen dapat menginduksi titer antibodi yang lebih tinggi dari

pada vaksin bivalen pada bebek.

Kata kunci: bebek, hemaglutinasi inhibisi, vaksin, monovalen, bivalen.

ABSTRACT

AHMAD MUSTOFA. Immune Response of Duck against AI H5N1 Monovalent

Vaccine (Clade 2.3.2.) and AI H5N1 Bivalent Vaccine (Clade 2.1.3 and Clade

2.3.2). Supervised by RETNO DAMAYANTI SOEJOEDONO and NI LUH

PUTU IKA MAYASARI

Duck is one of waterfowl which is known as a reservoir of Avian

Influenza (AI) virus. Infected ducks show asymptomatic sign of AI and low

antibody titer. The aim of this research was to determine the antibody titer of

ducks post vaccination. Ninety ducks were divided into 3 groups and each group

contains 30 ducks. The first group was AI H5N1 monovalent (clade 2.3.2)

vaccinated ducks, second group was AI H5N1 bivalent (clade 2.1.3 and 2.3.2)

vaccinated ducks, and third was control. Vaccination was performed on day 10

and 31. Ten serum samples of each group were collected on day 17, 21, 28, 31, 38

and 42 followed by Haemagglutination Inhibition Test. The result showed that

monovalent vaccine induced higher of antibody titer than bivalent vaccine in

ducks.

Keywords: duck, haemagglutination inhibition, vaccine, monovalent, bivalent.

RESPON TANGGAP KEBAL BEBEK TERHADAP

VAKSIN AI H5N1 MONOVALEN (CLADE 2.3.2) DAN

VAKSIN AI H5N1 BIVALEN (CLADE 2.1.3 DAN CLADE 2.3.2)

Skripsi

sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

Sarjana Kedokteran Hewan

pada

Fakultas Kedokteran Hewan

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

BOGOR

2014

AHMAD MUSTOFA

Judul Skripsi : Respon Tanggap Kebal Bebek terhadap Vaksin AI

H5N1 Monovalen (Clade 2.3.2) dan Vaksin AI H5N1

Bivalen (Clade 2.1.3 dan Clade 2.3.2)

Nama : Ahmad Mustofa NIM : B04100121

Diketahui oleh

Drh Agus Setiyono, MS, PhD, APVet

Wakil Dekan

Tanggal Lulus :

Disetujui oleh

Prof Dr Drh Retno D Soejoedono, MS

Dosen Pembimbing I

Dr Drh Ni Luh Putu Ika Mayasari

Dosen Pembimbing II

PRAKATA

Puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah Subhanahu Wa Ta’ala atas

segala nikmat dan karuniaNya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang

berjudul “Respon Tanggap Kebal Bebek terhadap Vaksin AI H5N1 Monovalen

(Clade 2.3.2) dan Vaksin AI H5N1 Bivalen (Clade 2.1.3 dan Clade 2.3.2)”.

Ucapan terimakasih juga penulis sampaikan kepada semua pihak yang telah

membantu baik secara langsung maupun secara tidak langsung khususnya kepada:

1. Prof Dr Drh Retno D Soejoedono MS selaku dosen pembimbing I yang selalu

memberikan pengarahan kepada penulis

2. Dr Drh Ni Luh Putu Ika Mayasari selaku dosen pembimbing II yang telah

memberikan dukungan, motivasi sarana dan prasarana penelitian, waktu, tenaga,

dan arahan selama penelitian dan penulisan.

3. Bapak Bayu Febram, M.Si. Apt selaku dosen pembimbing akademik yang telah

membimbing selama menuntut ilmu di FKH.

4. Mamak Kasmi, Bapak Sartono, Adik Sitti Nurkhasanah, beserta seluruh keluarga

tercinta atas doa, dorongan, motivasi tiada henti baik berupa material maupun

spiritual.

5. Pak Nur, Pak Lukman, Mas Wahyu, Mba Ade, dan Mba Selyn yang telah

membantu dalam penelitian.

6. Dedek Haryanto sebagai rekan kerja penelitian.

7. Saras, Laras, Rizka umi, Fahmi, Faris beserta kolega Acromion 47 yang selalu

dihati

8. Sahabat Senior Resident angkatan 49 dan 50 yang selalu menginspirasi.

Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi ilmu pengetahuan. Saran dan kritik

yang bersifat membangun sangat penulis harapkan.

Bogor, Agustus 2014

Ahmad Mustofa

DAFTAR ISI

ABSTRAK i

HALAMAN JUDUL ii

HALAMAN PENGESAHAN iii

PRAKATA iv

DAFTAR ISI v

DAFTAR TABEL, GAMBAR, DAN LAMPIRAN vi

PENDAHULUAN 1

Perumusan Masalah 2

Tujuan Penelitian 2

TINJAUAN PUSTAKA 2

Sistem Kekebalan pada Unggas 2

Avian Influenza 3

Vaksin 5

MATERI DAN METODE 5

MATERI 5

Waktu dan Tempat Penelitian 5

Bahan Uji Laboratorium 6

Hewan Percobaan 6

Pakan dan Air Minum 6

Kandang dan Perlengkapannya 6

Alat 6

METODE 6

Vaksinasi 7

Penyediaan Sel Darah Merah 5% 7

Koleksi Serum 7

Uji Hemaglutinasi 7

Uji Hemaglutinasi Inhibisi 7

Penghitungan Rataan Titer Antibodi 8

Prosedur Analisis Data 8

HASIL DAN PEMBAHASAN 9

SIMPULAN DAN SARAN 13

DAFTAR PUSTAKA 13

LAMPIRAN 17

RIWAYAT HIDUP 18

DAFTAR TABEL

1. Rataan titer antibodi bebek kelompok monovalen dan kelompok bivalen dengan

antigen AI H5N1 clade 2.1.3

9



10

DAFTAR GAMBAR



10



11

3. Rataan titer antibodi bebek kelompok monovalen dengan antigen penguji AI

H5N1 clade 2.1.3 dan clade 2.3.2

12

4. Rataan titer antibodi bebek kelompok bivalen dengan antigen penguji AI H5N1

clade 2.1.3 dan clade 2.3.2

12

DAFTAR LAMPIRAN

1. Jadwal Penelitian 17

PENDAHULUAN

Tubuh makhluk hidup mempunyai mekanisme yang berperan melakukan

perlawanan terhadap mikroorganisme asing (antigen) yang masuk ke dalam tubuh.

Peran pertahanan ini dilakukan oleh sistem imun yang memproduksi antibodi.

Antibodi merupakan protein (immunoglobulin) yang dihasilkan oleh tubuh

sebagai respon terhadap masuknya antigen. Antibodi dapat mengenali dan

mengikat antigen secara spesifik. Antigen adalah suatu senyawa atau substansi

yang dapat menggertak sistem imun pada individu. Setiap antigen memiliki

daerah spesifik yang disebut dengan determinant antigenic atau epitop. Bagian ini

dapat dikenali oleh antibodi (Radji 2010).

Virus Avian Influenza (AI) merupakan salah satu virus yang dapat

menyebabkan penyakit menular dari hewan ke manusia atau sebaliknya yang

dikenal dengan zoonosis (Dharmayanti et al. 2005). Virus Influenza terdiri atas

tiga tipe A, B, dan C. Perbedaan dari ketiga virus tersebut berdasarkan karakter

protein M dari amplop virus dan nukleoprotein virus. Salah satu dari ketiga genera

ini, tipe A, dapat menginfeksi berbagai hewan piaraan seperti ayam, itik, kalkun,

burung puyuh, babi dan kuda. Virus tipe ini menyerang unggas dengan

menginfeksi saluran pencernaan dan pernapasan (Fenner et al. 1995; Murphy et

al. 2006). Virus AI tidak menyebabkan penyakit yang nyata pada unggas air

(asymptomatic), titer antibodi sangat rendah terhadap virus AI, serta tidak

memiliki sialic acid (sialiloligosacarida) pada dinding permukaan sel tubuhnya.

Hal ini sesuai dengan Charlton (1996), Cardona (2005), WHO (2005), dan

Dharmayanti et al. (2006) yang menyatakan bahwa unggas air juga sebagai

reservoir alami virus AI.

Menurut Tumpey et al. (2003), Chen et al. (2004), dan Suarez et al. (2004),

virus AI lebih banyak dideteksi pada unggas air dibandingkan dengan ayam

kampung. Virus AI tersebut tidak menyebabkan penyakit yang nyata pada unggas

air, namun virus AI pada unggas air dapat menjadi sumber penyebaran penyakit

AI yang efektif sehingga dapat bertahan lama di alam (Stephenson dan Zanbon

2002; Kementan 2005)

Salah satu cara yang digunakan untuk melindungi tubuh terhadap paparan

penyakit adalah vaksinasi. Vaksinasi merupakan tindakan yang dengan sengaja

memasukkan agen penyakit yang berupa suspensi, substansi atau toksin

mikroorganisme yang sudah dimatikan atau dilemahkan ke dalam tubuh hewan

sehat agar merangsang pembentukan daya tahan atau daya kebal tubuh terhadap

suatu penyakit tertentu, bersifat aman, serta tidak menimbulkan penyakit (Radji

2010; Akoso 2006).

Vaksin monovalen pernah digunakan pada tahun 2009 di Amerika Serikat

untuk mencegah wabah dari virus flu babi H1N1 (Bateman et al. 2013).

Penggunaan vaksin bivalen pernah digunakan pada manusia untuk mencegah

Human Papiloma Virus (HPV). Kombinasi vaksin yang digunakan adalah vaksin

inaktif HPV 16 dengan HPV 18. Vaksin bivalen tersebut berhasil merangsang

antibodi terhadap salah satu dari ke dua antigen homolog dari tipe virus tersebut

(Safeian et al. 2013). Menurut Uraki et al. (2013) penggunaan vaksin bivalen

efektif digunakan karena mempunyai kemungkinan mendeteksi antigen homolog

yang sesuai terhadap infeksi virus.

2

Perumusan Masalah

Bebek merupakan reservoir alami virus Avian Influenza. Berdasarkan hal

tersebut ingin diketahui respon tanggap kebal bebek terhadap vaksin monovalen

dan vaksin bivalen serta perbedaan respon tanggap kebal bebek antara vaksin

monovalen dan vaksin bivalen.

Tujuan Penelitian

Penelitian ini bertujuan mengetahui respon tanggap kebal bebek terhadap

vaksin monovalen dan vaksin bivalen serta mengetahui perbedaan respon tanggap

kebal bebek terhadap pemberian vaksin monovalen dan vaksin bivalen.

Manfaat Penelitian

Penelitian yang telah dilakukan diharapkan mampu memberikan informasi

tentang respon tanggap kebal bebek terhadap pemberian vaksin AI H5N1

monovalen (clade 2.3.2) dan bivalen (clade 2.1.3 dan 2.3.2).

TINJAUAN PUSTAKA

Sistem Kekebalan pada Unggas

Bebek berasal dari kingdom animalia, filum chordata, subfilum vertebrata,

kelas aves, ordo anseriformes (Swartzentrover 2008). Bebek merupakan salah satu

ternak yang berpotensi sebagai reservoir dalam penyebaran virus AI (Laudert et

al. 1993; Sturm-Ramirez et al. 2004). Virus AI lebih banyak dideteksi pada

unggas air dibandingkan dengan ayam (Tumpey et al. 2003; Chen et al. 2004;

Suarez et al. 2004). Virus AI tersebut tidak menyebabkan penyakit yang nyata

pada unggas air, namun unggas air dapat menjadi sumber penyebaran virus AI

yang efektif sehingga dapat bertahan lama di alam (Stephenson dan Zanbon 2002;

Kementan 2005).

Secara umum sistem kekebalan pada unggas tidak berbeda jauh dengan

sistem kekebalan pada manusia dan mamalia. Unggas memiliki dua organ limfoid

primer, yaitu timus dan bursa Fabricius. Bursa Fabricius berfungsi sebagai tempat

pematangan dan diferensiasi bagi sel B (Tizard 2004). Unggas yang baru menetas

memiliki antibodi asal induk. Penghambatan respon pembentukan antibodi oleh

antibodi asal induk berlangsung sampai antibodi tersebut habis, yaitu sekitar 10

sampai 20 hari setelah menetas (Tizard 2004).

Antibodi merupakan protein (immunoglobulin) yang dihasilkan oleh tubuh

sebagai respon terhadap masuknya antigen. Antibodi dapat mengenali dan

3

mengikat antigen secara spesifik. Terdapat 5 kelas utama immunoglobulin dalam

serum, yaitu IgG, IgA, IgM, IgD dan IgE. Struktur dasar immunoglobulin terdiri

atas 2 rantai berat (H-chain) identik dan 2 rantai ringan (L-chain) yang juga

identik. Setiap rantai ringan terikat pada rantai berat melalui ikatan disulfida (S –

S). Fragmen antigen binding (Fab), berfungsi mengikat antigen, oleh karena itu

susunan asam amino di bagian ini berbeda antara molekul immunoglobulin satu

dengan yang lain dan bervariasi sesuai dengan variabilitas antigen yang

merangsang pembentukannya. Sebaliknya, constant region merupakan bagian dari

antibodi yang konstan. Bagian ini tidak mempunyai kemampuan mengikat

antigen tetapi dapat bersifat sebagai antigen (determinant antigenic). Bagian ini

merupakan efektor sekunder dan menjadi tempat untuk melekat pada sel, serta

fiksasi komplemen (Black 2011).

Antigen (antibody generating substances) adalah suatu senyawa atau

substansi yang dapat menggertak sistem imun pada inang atau individu. Antigen

dapat berupa polisakarida, protein, lemak, asam inti atau lipopolisakarida, maupun

lipoprotein (Guyton dan Hall 2007). Setiap antigen memiliki daerah spesifik yang

disebut dengan determinant antigenic atau epitop. Bagian ini dapat dikenali oleh

antibodi (Radji 2010).

Antigen yang masuk ke dalam tubuh sebagai benda asing akan

mendapatkan respon kekebalan. Materi yang telah diketahui sebagai bahan asing,

kemudian oleh makrofag disampaikan ke sel limfosit melalui pembentukan

berbagai sitokin ke sistem pembentuk antibodi atau ke sistem kebal berperantara

sel. Sistem kekebalan ini menyimpan “ingatan” sehingga pada paparan berikutnya

dengan antigen yang sama, respon yang ditimbulkan akan jauh lebih efisien

(Tizard 2004). Antibodi bekerja melalui dua cara yang berbeda untuk

mempertahankan tubuh terhadap agen penyakit yaitu: (1) dengan cara langsung

menginaktivasi agen penyebab penyakit, (2) dengan mengaktifkan sistem

komplemen yang akan menghancurkan agen penyakit tersebut (Hartati 2005).

Avian Influenza

Virus AI merupakan salah satu virus yang dapat menyebabkan penyakit

menular dari hewan ke manusia atau sebaliknya yang dikenal dengan zoonosis

(Dharmayanti et al. 2005). Virus AI merupakan virus RNA, yaitu Orthomyxovirus

tipe A dari famili Orthomyxoviridae. Virus Influenza terdiri dari tiga tipe A, B,

dan C. Perbedaan dari ketiga virus tersebut berdasarkan pada karakter protein M

dari amplop virus dan nukleoprotein virus. Ketiga genera ini, tipe A dapat

menginfeksi hewan piaraan seperti ayam, itik, kalkun, burung puyuh, babi dan

kuda. Virus tipe ini menyerang unggas dengan menginfeksi saluran pencernaan

dan pernapasan (Fener et al. 1995; Murphy et al 2006). Penyakit ini menjadi isu

global pada saat ditemukan di manusia pada 1997 di Hongkong. Penyakit ini

menyebabkan 18 orang dirawat di rumah sakit dan 6 orang diantaranya meninggal

dunia pada awal terjadinya (WHO 2005). Hingga saat ini kasus yang ada di

Indonesia mencapai 193 kasus dengan kematian mencapai 161 (WHO 2013)

Virion dari virus Influenza tipe A adalah bulat diameter 100 nm, terdapat

delapan senyawa genom, lima diantaranya merupakan genom yang berstruktur

4

sedangkan tiga lainnya merupakan protein virus struktural yang berkaitan dengan

enzim RNA polymerase. Protein terbanyak adalah protein matriks (M1). Protein

ini tersusun dari banyak monomer kecil yang serupa. Monomer ini terikat dengan

permukaan bagian dalam dari lapisan ganda lemak amplopnya (envelope). Protein

M2 adalah protein kecil yang menonjol sebagai pori-pori atau kanal ion yang

melalui membran. Virus ini mempunyai dua antigen permukaan yang disebut

haemaglutinin (HA) dan neuraminidase (NA). Antigen ini merupakan molekul

glikoprotein. Molekul HA berbentuk trimer batang, sedangkan molekul NA

tetramer bentuk seperti jamur. Kedua antigen ini digunakan sebagai penanda

dalam identifikasi subtipe virus karena membawa epitope khusus (Fenner et al.

1995).

Virus Influenza tipe A mempunyai 18 antigen H (hemaglutinin) yaitu H1–

H18 dan 11 antigen NA (neuraminidase) yaitu N1–N11 (Tong 2013). Kombinasi

antigen HA dan NA akan menghasilkan lebih dari 144 kombinasi subtipe virus

AI, seperti H5N1, H7N9 dan kombinasi lainnya. Diantara 18 subtipe virus AI

hanya H5 dan H7 yang bersifat ganas (virulen) pada unggas (Tong 2013).

Berdasar pada tingkat keganasannya virus Influenza ini digolongkan menjadi dua

yaitu Highly Pathogenic Avian Influenza (HPAI) dan Low Pathogenic Avian

Influenza (LPAI) (Dharmayanti et al. 2006; Soejoedono dan Handharyani 2005;

Akoso 2006).

Virus Influenza yang menyebar di kawasan Asia merupakan keturunan dari

virus AI tipe A (H5N1) yang dibagi menjadi dua clades antigenic. Clade satu

meliputi isolat manusia dan burung dari Vietnam, Thailand, Kamboja, Laos dan

Malaysia, sedangkan clade dua pertama kali diidentifikasi pada isolat burung dari

Cina, Indonesia, Jepang, dan Korea Selatan (WHO 2005).

Virus AI mempunyai kemampuan untuk menghindar dari respon humoral

hospes melalui fenomena antigenic drift. Mutasi protein akan mengarah pada

perubahan asam amino glikoprotein permukaan HA (Plotkin dan Dushoff 2003).

Antigenic drift adalah perubahan secara periodik akibat mutasi genetik struktur

protein permukaan virus AI sehingga antibodi yang terbentuk oleh tubuh akibat

vaksinasi sebelumnya tidak dapat mengenali keberadaan virus tersebut (Munch et

al. 2001). Selain itu virus juga mampu menghindari respon imun bawaan dan

dapatan dengan reasorsi melalui fenomena antigenic shift (Coleman 2007)

Menurut Soejoedono dan Handharyani (2005) salah satu sifat virus AI

adalah dapat mengaglutinasi sel darah merah unggas dan ditemukan pada dinding

pembuluh darah inang. Virus juga peka terhadap lingkungan panas (50 °C, 30

menit), pH yang ekstrim (pH 3), kondisi nonisotonik, udara kering, relatif tidak

tahan terhadap inaktivasi pelarut lemak seperti deterjen, selain itu virus juga dapat

diinaktivasi dengan larutan ammonium 25%, LISOL 1–2%, kresol 0.1% dan

formalin 20%. Virus Influenza mampu bertahan di lingkungan dengan suhu ruang

selama tujuh hari dan di dalam feses pada 4 °C selama 30–35 hari. Berdasarkan

analisis genetik dari virus ini terdapat tiga clade yang berbeda beserta

penyebarannya. Clade 2.1.3 beredar di Vietnam dan Kamboja, clade 2.2 beredar

di India, Bangladesh dan Mesir serta clade 2.3.2 beredar di negara-negara Asia

meliputi China, Hongkong, Korea,Vietnam dan Laos (WHO 2013; ECDGH

2012).

Gejala klinis yang bisa diamati dari unggas terinfeksi virus AI adalah

anoreksia, emisiasi, depresi, produksi telur menurun, sesak napas yang disertai

5

dengan eksudat yang keluar dari hidung, edema daerah wajah, konjungtivitis,

jengger dan pial berwarna kebiruan. Beberapa tempat di bawah kulit mengalami

perdarahan seperti tungkai dan apabila dilakukan pemeriksaan lebih lanjut terlihat

adanya peradangan pada langit-langit mulut, trakea, dan laring. Pemeriksaan

histopatologi terlihat adanya akumulasi sel-sel radang (limfosit) pada jengger

ayam yang terinfeksi (Soejoedono dan Handharyani 2005).

Vaksin

Kata vaksin berasal dari bahasa latin vacca (sapi) dan vaccinia (cacar sapi).

Vaksin merupakan bahan yang berasal dari mikroorganisme tertentu, yang dapat

merangsang pembentukan kekebalan terhadap penyakit yang disebabkan oleh

mikroorganisme tersebut (Malole 1988).

Vaksin dibedakan menjadi dua yaitu vaksin aktif dan vaksin inaktif. Vaksin

aktif merupakan vaksin hidup yang mengandung mikroorganisme yang telah

dilemahkan virulensinya (atenuasi), sedangkan vaksin inaktif adalah vaksin yang

terkandung virus yang sudah mati melalui proses inaktivasi. Virus yang

terkandung dalam vaksin inaktif telah kehilangan sifat infektifnya, namun

antigenitasnya masih dipertahankan untuk menginduksi sistem kekebalan tubuh

(Fenner et al. 1995).

Vaksin monovalen merupakan vaksin dengan antigen yang telah

dilemahkan dari strain virus Influenza yang memiliki karakteristik yang sama

untuk menanggulangi wabah serta dikombinasikan dengan adjuvan minyak dalam

air, minyak emulsi, sterol serta tocopherol. Vaksin ini terdapat satu strain virus AI

(Hanon dan Stephenne 2009). Vaksin bivalen adalah vaksin yang terdiri atas dua

strain virus AI, sebagai contoh strain pertama memiliki hemaglutinin subtipe H5

maka strain kedua menggunakan hemaglutinin subtipe H7 dan salah satunya

memiliki neuraminidase subtipe N4 atau neuraminidase N1 (Kumar dan Duran

2009).

MATERI DAN METODE

MATERI

Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan dari Juli 2013 sampai dengan Maret 2014

bertempat di kandang hewan coba Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian

Bogor (FKH IPB) dan Laboratorium Terpadu bagian Mikrobiologi Medik,

Departemen Ilmu Penyakit Hewan dan Kesehatan Masyarakat Veteriner FKH

IPB.

6

Bahan Uji di Laboratorium

Vaksin AI H5N1 monovalen (clade 2.3.2), vaksin AI H5N1 bivalen (clade

2.1.3 dan 2.3.2), antigen AI H5N1 clade 2.3.2, antigen AI H5N1 clade 2.1.3,

alkohol 70%, Phosphate Buffer Saline 1× pH 7.2 (PBS), suspensi sel darah merah

(SDM) 5%, virus antigen standar 4 HAU, serum kebal AI dan SDM 1%

Hewan Percobaan

Hewan yang digunakan dalam penelitian ini adalah bebek umur satu hari,

day old duck (DOD) sebanyak 90 ekor tanpa pemberian vaksin AI sebelumnya.

Bebek tersebut dibagi menjadi tiga kelompok. Setiap kelompok terdiri atas 30

ekor. Kelompok A diberikan vaksin monovalen, kelompok B diberikan vaksin

bivalen, serta satu kelompok lagi sebagai kontrol. Kelompok kontrol digunakan

sebagai acuan terhadap pengaruh pemberian vaksin monovalen dan vaksin

bivalen.

Pakan dan Air Minum

Pakan yang diberikan adalah pakan konsentrat komersial diberikan setiap

pagi dan sore. Air minum untuk hewan tersedia ad libitum.

Kandang dan Perlengkapannya

Penelitian ini menggunakan tiga kandang dengan ukuran 1×3 m terbuat dari

tripleks serta dibatasi dengan kawat ram yang beralaskan sekam padi. Tempat

minum dan tempat pakan dibersihkan setiap harinya. Kandang juga dilengkapi

dengan lampu listrik.

Alat

Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah pelat mikro, spuit, tabung

reaksi, sentrifus, dan tabung mikro.

METODE

Vaksinasi

Vaksinasi dalam penelitian ini dilaksanakan sesuai jadwal yang tercantum

pada Lampiran I. Vaksinasi dilakukan dua kali selama proses penelitian.

Vaksinasi pertama pada saat bebek berumur 10 hari dengan dosis 0.2 mL/ekor

secara subkutan dan vaksinasi kedua pada umur 31 hari dengan dosis 0.5 mL/ekor

secara intramuskular. Pemeriksaan titer antibodi setelah vaksinasi dilakukan pada

hari ke-17, 21, 28, 31, 38 dan 42.

7

Penyediaan Sel Darah Merah 5%

Darah utuh diambil dari ayam donor, ditambahkan antikoagulan Natrium

Sitrat 3.8% dengan perbandingan 4:1, kemudian disentrifugasi selama 10–15

menit dengan kecepatan 1500–2000 rpm. Supernatan yang terbentuk dibuang,

sedangkan endapannya dibilas dengan PBS kemudian disetrifugasi kembali.

Proses ini dilakukan sebanyak tiga kali hingga terbentuk SDM murni, selanjutnya

diencerkan menjadi 5%. Sel darah merah 5% diencerkan menjadi 1% untuk Uji

Hemaglutinasi (HA) dan Uji Hemaglutinasi Inhibisi (HI).

Koleksi Serum

Koleksi serum darah maternal antibodi dilakukan pada bebek umur 1 hari.

Koleksi serum selanjutnya dilakukan pada hari ke-17, 21, 28, 31, 38 dan 42

setelah vaksinasi (Lampiran I). Setiap 10 ekor bebek diambil secara acak pada

masing-masing kandang untuk dikoleksi serum kemudian dilanjutkan dengan uji

HI.

Pengambilan darah dari jantung untuk DOD dan dari vena brachialis atau

vena axilaris untuk bebek yang berumur lebih dari 10 hari. Spuit yang berisi darah

bebek diletakkan secara mendatar untuk memperluas bidang permukaan serta

dibiarkan pada suhu ruang hingga darah membeku secara sempurna. Serum darah

yang terbentuk dipisahkan ke dalam tabung mikro 1.5 mL dan diberi label serta

disimpan pada suhu -20 °C.

Uji Hemaglutinasi

Uji Hemaglutinasi dilakukan dengan menggunakan pelat mikro berdasar V.

Sebanyak 25 μL PBS dimasukkan ke dalam sumur A2 sampai A12. Sebanyak 50

μL antigen dimasukkan ke dalam sumur A1, kemudian 25 μL antigen dipindahkan

dari sumur A1 ke sumur A2 dan dihomogenkan. Prosedur yang sama dilakukan

pada sumur A3 sampai sumur A11. Sebanyak 25 μL SDM 1% ditambahkan ke

semua sumur dan digoyang agar semua komponen yang dimasukkan homogen.

Pelat mikro kemudian dibiarkan selama 30 menit pada suhu ruang (25 °C).

Pengamatan dilakukan ketika kontrol negatif (A12) telah mengendap. Pembacaan

dilakukan pada sumur yang menampakkan terjadinya aglutinasi sempurna. Titer

HA unit dihitung berdasarkan pengenceran tertinggi yang memperlihatkan

aglutinasi sempurna (OIE 2008).

Uji Hemaglutinasi Inhibisi

Sebanyak 25 μL PBS dimasukkan ke semua sumur pada pelat mikro

dengan dasar V. Sumur pada kolom pertama diisi 25 μL serum dan diencerkan

bertingkat kelipatan dua sampai sumur ke-12. Sebanyak 25 μL antigen (4 HAU)

dimasukkan ke dalam semua sumur, kemudian dihomogenkan 10–15 detik dan

diinkubasi pada suhu ruangan selama 15 menit atau 4 °C selama 45 menit.

Sebanyak 25 μL suspensi SDM 1% ditambahkan ke dalam semua sumur, pelat

mikro digoyang-goyangkan agar homogen kemudian diinkubasi pada suhu ruang

selama 30 menit. Hasil uji HI positif ditandai dengan adanya endapan pada dasar

8

pelat mikro, tidak ada aglutinasi. Titer HI dihitung berdasarkan pengenceran

tertinggi serum darah berikatan dengan isolat virus yang dapat mengendapkan

SDM 1% (OIE 2008).

Penghitungan Rataan Titer Antibodi

Rataan titer antibodi dapat dihitung dengan menggunakan Geometric Mean

Titre (GMT) dengan rumus:

Keterangan: N : jumlah contoh serum yang diamati t : titer antibodi pada pengenceran tertinggi (yang masih dapat

menghambat aglutinasi sel darah merah) S : jumlah contoh serum yang bertiter t n : titer antibodi pada sampel ke-n

Prosedur Analisis Data

Data yang diperoleh dianalisis secara deskriptif menggunakan perangkat

lunak MS Exel 2007 dengan metode analisis statistika Analysis of Variance

(ANOVA): single factor. dengan selang kepercayaan 95% dan dilanjutkan dengan

uji Duncan apabila nilai p<0.05.

9

HASIL DAN PEMBAHASAN

Perbandingan Rataan Titer Antibodi Bebek Kelompok Monovalen dan

Kelompok Bivalen dengan Antigen AI H5N1 Clade 2.1.3

Hasil penelitian berupa rataan titer antibodi bebek sebagai respon terhadap

vaksin monovalen dan vaksin bivalen dengan antigen uji AI H5N1 clade 2.1.3

disajikan pada Tabel 1.

Tabel 1 Rataan titer antibodi bebek kelompok monovalen dan kelompok bivalen

dengan antigen AI H5N1 clade 2.1.3 Umur

(hari ke-) Kontrol Monovalen Bivalen

1 0.625a

0.625a

0.625a

17 0a

0.6a

0a

21 0a

2.8a

2.5a

28 0a

0.33a

0a

31 0.5a

1.8a

0a

38 0a

0.6a

0a

42 0a

1.4a

0a

Huruf superscript yang berbeda (a,b) pada baris yang sama menunjukkan hasil yang berbeda

nyata (p<0.05)

Vaksin monovalen mengandung virus AI H5N1 clade 2.3.2 dan vaksin

bivalen mengandung virus AI H5N1 clade 2.1.3 dan 2.3.2. Serum yang berasal

dari kelompok bebek yang divaksinasi menggunakan vaksin monovalen diuji

dengan antigen heterolog (clade 2.1.3) menunjukkan hasil yang lebih tinggi dari

kelompok serum dengan vaksin bivalen (Tabel 1, Gambar 1). Hal ini terjadi

karena adanya reaksi silang pada vaksin yang memiliki kesamaan jenis protein H

terhadap antigen yang digunakan dalam uji HI (Lee et al. 2006). Adanya dua

antigen berbeda yang terdapat pada vaksin bivalen akan memacu reaksi imun

yang bersifat kompetitif terhadap antibodi yang dihasilkan. Berdasarkan analisis

data yang dilakukan tidak terdapat perbedaan secara nyata (p>0.05) respon titer

antibodi bebek yang divaksinasi dengan vaksin monovalen bila dibandingkan

dengan kelompok bivalen (Tabel 1) dengan menggunakan antigen penguji AI

H5N1 clade 2.1.3.

10

Gambar 1 Rataan titer antibodi bebek kelompok monovalen dan

kelompok bivalen dengan antigen AI H5N1 clade 2.1.3

Perbandingan Titer Antibodi Bebek Kelompok Monovalen dan Kelompok

Bivalen dengan Antigen AI H5N1 Clade 2.3.2

Hasil penelitian berupa rataan titer antibodi bebek sebagai respon terhadap

vaksin monovalen dan vaksin bivalen dengan antigen uji AI H5N1 clade 2.3.2

disajikan pada Tabel 2.

Tabel 2 Rataan titer antibodi bebek kelompok monovalen dan kelompok bivalen

dengan antigen AI H5N1 clade 2.3.2 Umur

(Hari ke-) Kontrol Monovalen Bivalen

1 0.75a

0.75a

0.75a

17 0b

0.9a 0.1

a

21 0b

2.8a 2.3

a

28 0b

3a 0.6

a

31 0b

4.4a 2.4

a

38 0.1b

1.4a 1.1

a

42 0b

2a 3

a

Huruf superscript yang berbeda (a,b) pada baris yang sama menunjukkan hasil yang berbeda

nyata (p<0.05)

Serum yang berasal dari kelompok bebek yang divaksinasi menggunakan

vaksin monovalen diuji dengan antigen homolognya (clade 2.3.2) menunjukkan

hasil yang lebih tinggi dari serum vaksin bivalen (clade 2.1.3 dan 2.3.2) (Tabel 2,

Gambar 2). Hal ini terjadi karena adanya kecocokan terhadap protein permukaan

antigen pada vaksin yang dimasukkan dengan protein permukaan antigen pada

pengujian yang dilakukan (homolog) (Safeian et al. 2013, Lee et al. 2006).

Respon titer antibodi vaksin bivalen lebih rendah daripada vaksin monovalen

karena adanya reaksi silang antara protein pada antibodi terhadap protein

permukaan yang terdapat pada antigen uji yang digunakan (Lee et al. 2006). Uji

11

statistik memperlihatkan bahwa vaksin monovalen dan vaksin bivalen tidak

berbeda nyata (p>0.05) pada pengujian HI dengan antigen AI H5N1 clade 2.3.2.

Perbandingan Titer Antibodi Bebek Kelompok Monovalen dengan Antigen

yang Berbeda (AI H5N1 Clade 2.1.3 dan AI H5N1 Clade 2.3.2)

Serum yang berasal dari kelompok bebek yang divaksinasi menggunakan

vaksin monovalen diuji dengan menggunakan dua antigen yang berbeda yaitu

antigen AI H5N1 clade 2.1.3 dan AI H5N1 clade 2.3.2. Hasil pengujian (Gambar

3) dengan menggunakan antigen AI H5N1 clade 2.3.2, serum dari kelompok

monovalen memiliki nilai titer antibodi yang tinggi dibandingkan dengan

menggunakan antigen AI H5N1 clade 2.1.3. Hal ini terjadi karena adanya

kecocokan (homolog) antara antibodi dengan antigen penguji yang digunakan

ketika uji HI (Uraki et al.2013). Hal ini sesuai dengan penelitian yang dilakukan

oleh Indriani et al. (2014) yang menyatakan bahwa titer antibodi yang diuji

dengan menggunakan antigen homolog mempunyai hasil yang lebih tinggi jika

dibandingkan dengan pengujian HI menggunakan antigen heterolog.

Gambar 2 Rataan titer antibodi bebek kelompok monovalen dan

kelompok bivalen dengan antigen AI H5N1 clade 2.3.2

12

Perbandingan Titer Antibodi Bebek terhadap Vaksin Bivalen dengan

Antigen yang Berbeda (AI H5N1 Clade 2.1.3 dan AI H5N1 Clade 2.3.2

Perbandingan Titer Antibodi Bebek Kelompok Bivalen dengan Antigen yang

Berbeda (AI H5N1 Clade 2.1.3 dan AI H5N1 Clade 2.3.2)

Serum kelompok bivalen diuji dengan dua antigen berbeda (Gambar 4)

menunjukkan respon titer antibodi terhadap antigen AI H5N1 clade 2.3.2 lebih

tinggi jika dibandingkan dengan antigen AI H5N1 clade 2.1.3. Hal ini terjadi

karena pada antigen 2.1.3 terjadi ketidaksesuaian antara protein permukaan yang

terdapat pada antibodi yang dihasilkan dengan antigen pengujinya (heterolog)

(Uraki et al. 2013). Menurut Uchida et al. (2008) virus AI clade 2.3.2 dapat

diisolasi dari unggas air termasuk bebek. Hal ini menunjukkan adanya antibodi

yang berkembang dengan baik pada bebek.

Gambar 4 Rataan titer antibodi bebek kelompok bivalen

dengan antigen penguji AI H5N1 clade 2.1.3 dan

clade 2.3.2

Gambar 3 Rataan titer antibodi bebek kelompok monovalen

dengan antigen penguji AI H5N1 clade 2.1.3 dan

clade 2.3.2

13

Vaksin monovalen memiliki kecenderungan lebih baik dalam menggertak

respon tanggap kebal dari bebek jika dibandingkan dengan vaksin bivalen. Hal ini

terjadi karena respon tubuh bebek yang bersifat spesifik yang disertai dengan

tidak adanya reaksi kompetisi antar antigen vaksin dalam merespon sistem

kekebalan bebek.

Apabila virus paparan lapang identik dengan virus vaksin monovalen, maka

vaksin monovalen akan lebih efektif dalam menggertak respon tanggap kebal

bebek, namun bila terjadi sebaliknya maka vaksin bivalen akan lebih baik dalam

menggertak respon tanggap kebal bebek.

SIMPULAN DAN SARAN

Simpulan

Berdasarkan data yang diperoleh dari penelitian ini dapat disimpulkan

bahwa vaksin AI H5N1 monovalen (clade 2.3.2) menghasilkan respon tanggap

kebal lebih baik dibandingkan dengan vaksin AI H5N1 bivalen (clade 2.1.3 dan

2.3.2) apabila virus paparan lapang identik dengan virus vaksin, namun apabila

terjadi sebaliknya maka vaksin bivalen akan lebih baik dalam menggertak respon

tanggap kebal bebek.

Saran

Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut terkait potensi vaksin monovalen dan

bivalen terhadap paparan virus lapang serta shedding virus dari masing-masing

vaksin setelah vaksinasi.

DAFTAR PUSTAKA

Akoso BT. 2006. Waspada Flu Burung Penyakit Menular pada Hewan dan

Manusia. Yogyakarta (ID): Kanisius.

Asmara W. 2007. Peran Biologi Molekuler dalam Pengendalian Avian Influenza

dan Flu Burung. Di dalam: Pidato Pengukuhan Guru Besar FKH

UGM[Internet].[12 Maret 2007 Yogyakarta].Yogyakarta (ID):UGM

Press[diunduh pada 2014 Juli 8]Tersedia pada:

http://www.lib.ugm.ac.id/digitasi/upload/1093_pp0911265.pdf

Bateman AC, Kieke BA, Irving SA, Meece JK, Shay DK, Belongia EA. 2013.

Effectiveness of monovalent 2009 pandemic influenza A virus subtype

H1N1 and 2010-2011 trivalent inactivated influenza vaccines in Wisconsin

during the 2010-2011 influenza season. J Infect Dis.207(8):1262-9

Black JG. 2011. Microbiology: Principles and Explorations, 7th Edition. San

Francisco (US): Willey

Cardona CJ. 2005. Low-Pathogenicity Avian Influenza A Outbreaks in

Commercial Poultry in California. Washington (US): The National

Academies Press.

14

Charlton. 1996. Avian Disease Manual. Ed IV. Pennysylvania(US): American

Association of Avian Pathologists.

Chen HG, Deng Z, Li G. Tian G, Li Y , Jiao P , Zhang L , Liu Z, Webster RG, Yu

K. 2004. The evolution of H5N1 influenza viruses in ducks in southern

China. J Virol. 101(28):10452-10457.

Coleman JR. 2007. The PB1-F2 protein of Influenza A virus: Increasing

pathogenecity by disrupting alveolar macrophages. J Virol. 4:1-5

Dharmayanti NLPI, Indriani R, Damayanti R, Wiyono A. 2005. Karakter virus

avian influenza isolat Indonesia pada wabah gelombang ke dua. JITV.

10:217-225.

Dharmayanti NLPI, Indriani R dan Adjid RMA. 2006. Identifikasi virus avian

influenza pada beberapa jenis unggas di taman margasatwa ragunan dan

upaya eradikasinya. Med Kedr Hew. 2(2):79-83.

[ECDGH] European Commission Directorate-General for Health and

Consumers (SC). Animal Disease Notification System. Annual report

2010 [Internet][diunduh pada 2014 Juli 6]. Tersedia di:

http://ec.europa.eu/food/animal/diseases/adns/adns_report2010_en.pdf.

Fenner FJ, Gibbs EPJ, Murphy FA, Root R, Studdert MJ, White DO. 1995.

Virologi Veteriner Edisi 2. Putra DKH, penerjemah. Semarang (ID): IKIP

Pr. Terjemahan dari Veterinary Virology.

Guyton AC, Hall JE. 2007. Fisiologi Kedokteran Edisi ke-11. Irawati,

penerjemah; Rachman LY, editor. Jakarta (ID): EGC. Terjemahan dari:

Textbook of Medical Physiology. Ed ke-11

Hanon EJ, Stephenne J. 2009. Influenza vaccine. Phildelphia (US): King of

Prussia

Hartati Y. 2005. Respon kekebalan vaksin avian influenza inaktif pada ayam

indukan pedaging strain Hubbard (studi kasus pada peternakan ayam

indukan pedaging) [skripsi]. Bogor (ID): Fakultas Kedokteran Hewan,

Institut Pertanian Bogor.

Indriani R, Dharmayanti NLPI, Adjid RMA. 2014. Efikasi penerapan vaksin AI

H5N1 clade 2.1.3 pada itik Mojosari terhadap tantangan virus AI H5N1

clade 2.3.2 pada kondisi laboratorium. JITV. 19(1):59-66.

[Kementan] Kementerian Pertanian (ID). 2005. Buku pedoman dan Pencegahan

Flu Burung (Avian Influenza) pada Peternakan Unggas skala kecil. Buku

Petunjuk Mengenai Avian Influenza. Jakarta (ID): Direktorat Jendral

Peternakan Kementerian Pertanian.

Kumar M, Duran JP. 2009. Multivalent Avian Influenza Vaccines and Methods.

Wyeth (US): Madison.

Laudert E, Halvorson D, Sivanandan V, Shaw D. 1993. Comparative evaluation

of tissue tropism caracterization in turkey and mallard ducks after

intravenous inoculation of type a influenza viruses. J Av Dis. 37(3):773-

780.

Lee CW, Senne DA, Suarez DL. 2006. Development and application of reference

antisera against 15 haemaglutinin subtypes of avian influenza virus by dna

vaccination of chicken. J Clin and Vac Immun.13:395-402.

Malole MB.1988. Virologi. Pusat Antar Universitas. Bogor:IPB

http://ec.europa.eu/food/animal/diseases/adns/adns_report2010_en.pdf

15

Munch M, Nielsen LP, Handberg, Jorgensen PH. 2001. Detection and

subtyping (H5 amd H7) of avian type A influenza virus by reverse

transcriptionPCR and PCR ELISA. Arch Virol 145: 87-97Murphy FA,

Gibbs EPJ, Horzinek MC, Studdert MJ. 2006. Veterinary Virology Third

Edition. London (UK): Academic Pr.

Murphy FA, Gibbs EPJ, Horzinek MC, Studdert MJ. 2006. Veterinary Virology

Third Edition. London (UK): Academic Pr.

[OIE] Office International des Epizooties World (FR). 2008. Manual OIE , Avian

Influenza Chapter 2. 7.12. 2008

Plotkin JB, Dushoff J. 2003. Codon bias and frequency-dependent selection on the

hemagglutinin epitopes of influenza A virus. Proc Natl Acad Sci USA

100:7152-7157

Radji M. 2010. Immunologi & Virologi veteriner. Jakarta (ID): ISFI

Safaeian M, Kemp TJ, Pan DY, Porras C, Rodriguez AC, Schiffman M, Cortes B,

Katki H, Wacholder S, Schiller JT. 2013. Cross-protective vaccine efficacy

of the bivalent HPV vaccine against HPV31 is associated with humoral

immune responses: Results from the Costa Rica Vaccine Trial. J.vac:

9:1399 – 1406

Soejoedono RD, Handharyani E. 2005. Flu Burung. Jakarta (ID): Penebar

Swadaya.

Stephenson I, Zambon M. 2002. The epidemoilogy of influenza. Occup. Med.

5:241-247

Sturm-Ramirez KM, Ellis T, Bousfield B, Bisset L, Dryting K, Rehg JE, Poon Y,

Guan Y, Peiris M, Webster RG. 2004. Reemerging H5N1 influenza viruses

in Hongkong in 2002 are highly pathogenic to ducks. J Virol. 78:4892-4901.

Suarez DL, Perdue ML, Cox N, Rowe, Bender C, Huang J and Swayne DE. 2004.

Comparisont of higly virulent H5N1 influenza a viruses isolated from

humans and chickens from Hongkong. J Virol 72 (8):6678-6688

Swartzentrover R. 2008. Pekin Duck[Internet]. [diunduh pada 2014 Februari 9]

tersediapada:http//www.swartzentrover.com/cotor/Photos/Hiking/Birds/Bird

Pages/PekinDuck.htm

Tizard IR. 2004. Veterinary Immunology an Introduct Sixth Edition. Philadelphia

(US): W.B Saunders Company.

Tong S, Zhu X, Yan L, Shi S, Zhang J, Bourgeois M, Yang H, Chen X, Sergio

Recuenco, et al. 2013. New world bats harbor diverse influenza a viruses. J

Ppat. 9(10):1003657

Tumpey TM, Suarez DL, Perkins LE, Senne DA, Lee YJ, Mo I, Swayne DE.

2003. Evolution of a high-pathogenicity H5N1 avian influenza a virus

isolated from duck meat. J Av dis. 47:951-955.

Uchida Y, Mase M, Yoneda K, Kimura A, Obara T, Kumagai S, et al. 2008.

Highly pathogenic avian influenza virus (H5N1) isolated from whooper

swans, Japan. Emerg Infect Dis.14(9):1427.

Uraki R, Kiso M, Horimoto KI, Fukuyama S, Takashita S, Ozawa M, Kawaokaa

Y. 2013. A novel bivalent vaccine based on a PB2-knockout influenza virus

protects mice from pandemic H1N1 and highly pathogenic H5N1 virus

challenges. J. Virol. 87(14):7874

16

[WHO]World Health Organization (IT). 2005. Measures to stop the spread of

highly pathogenic bird flu at its source.[Internet].[diunduh pada 2013

Februari 12]. Tersedia pada: http://whg/ibdoc.who.int/wpro

/2005/stopthespread_eng.pdf

[WHO]World Health Organization (IT). 2013. Cumulative number of confirmed

human cases of avian influenza (H5N1) reported to WHO.

[Internet].[diunduh pada 2013 Agustus 9]. Tersedia pada:

http//www.who.int/csr/disease/avia_influenza

http://whg/ibdoc.who.int/wpro%20/2005/stopthespread_eng.pdf



17

LAMPIRAN I

Jadwal Penelitian

Hari

ke

Keterangan perlakuan

1 B1 90 DOD tiba di kandang, kemudian diambil darah intrakardial untuk dicek antibodi maternal sejumlah 20

DOD

7 Pemisahan dan penandaan untuk masing-masing vaksin (monovalen dan bivalen)

10 Vaksinasi sejumlah 60 DOD:

1. Vaksimune AIplus A (30 DOD) 0.2 mL SC

2. Vaksimune AIplus B (30 DOD) 0.2 mL SC

11-16 Pengamatan harian Pengamatan harian

17 B2 Pengambilan darah 10 ekor setiap grup vaksin Pengambilan darah 10 ekor setiap grup vaksin



31 B5 Pengambilan darah 10 ekor setiap grup vaksin

Vaksinasi kedua:

1. Vaksimune AIplus A (30 DOD) 0.5 mL IM.

2. Vaksimune AIplus B (30 DOD) 0.5 mL IM

Pengambilan darah 10 ekor setiap grup vaksin





Penelitian ini dilakukan dengan pemberian vaksin monovalen dan vaksin

bivalen inaktif. Vaksinasi dilakukan dua kali selama proses penelitian. Vaksinasi

pertama pada saat ayam berumur 10 hari dengan dosis 0.2 mL/ekor dengan rute

pemberian subkutan dan vaksinasi kedua pada umur 31 hari dengan dosis 0.5

mL/ekor secara intramuskular. Sampel yang diambil sebanyak sepuluh ekor

secara acak pada masing-masing kelompok bebek yang divaksin monovalen,

vaksin bivalen maupun bebek kontrol. Serum diambil dan diukur titer antibodinya

terhadap virus AI dengan uji HI dengan menggunakan antigen standar AI H5N1

clade 2.3.2 dan 2.1.3.

18

RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Bantul 17 Oktober 1991 dari ayah Sartono dan ibu

Kasmi. Penulis merupakan anak pertama dari dua bersaudara. Penulis

menamatkan pendidikan di SD Negeri Sorobayan pada tahun 2007 dan SMP

Negeri 1 Sanden pada tahun 2007. Pada tahun 2010 penulis lulus dari SMA

Negeri 1 Bantul dan di tahun yang sama penulis diterima di Fakultas Kedokteran

Hewan Institut Pertanian Bogor melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB

(USMI) serta berkesempatan memperoleh Beasiswa Bidik Misi.

Selama masa perkuliahan, penulis pernah aktif di organisasi BEM TPB

Kabinet Harmoni pada tahun 2011, LDK AlHurriyah 2011, DKM An-Nahl 2013,

Himpro Satli serta Senior Resident di Asrama Putra TPB IPB hingga sekarang.

respon tanggap kebal bebek terhadap vaksin...

Documents