PEMERIKSAAN GOLONGAN DARAH

OLEH :

EVY DIAH W, SSi, MKes

Oktober 2013

1. Menentukan adanya antigen A; B; pada sel darah merah

2. Menentukan adanya anti-A dan anti-B pada serum atau plasma

3. Memastikan tidak adanya antibodi-antibodi pada darah pasien yang akan bereaksi dengan darah donor

TUJUAN PEMERIKSAAN GOLONGAN DARAH

ABO

Penentuan Golongan Darah ABO :

Forward /Slide / Direct

Reverse / Tube / Indirect

1. Forward /Slide/Directmenentukan antigen golongan darah penderita (sel darah) menggunakan sera anti-A , anti-B dan anti-A,B

2. Reverse/Tube/Indirectmenentukan antibodi golongan darah penderita (serum) dengan menggunakan suspensi sel A dan suspensi sel B

3. Auto kontrolMemeriksa antibodi dalam serum dengan cara mereaksikannya dengan sel darah merahnya sendiri

Antigen dan Antibodi ABO pada individu

5

Penentuan Golongan Darah ABO :Penentuan Golongan Darah ABO :

Penentuan golongan darah ABO dikerjakan dengan cara Forward(Slide)- grouping

Tujuan : menentukan antigen golongan darah pasien (sel darah) dengan menggunakan sera anti-A , anti-B dan anti-A,B .

Antisera Color Source

Anti-A Blue Group B donor

Anti-B Yellow Group A donor

Anti-A,B Clear Group O donor

Penentuan Golongan darah ABO

Foward / Slide / direct

Blood group Agglutination with Anti-A

Agglutination with Anti-B

A + -

B - +

AB + +

O - -

Blood Grouping testsBlood Grouping tests

Slide test untuk menentukan jenis golongan darah pada eritrosit

Tube test untuk menentukan jenis golongan darah pada eritrosit dan plasma

Tube test untuk menentukan golongan darah

Forward and reverse typingForward and reverse typingPemeriksaan golongan darah ABO harus

dilakukan sebelum dilakukan transfusi

Tujuan pemeriksaan ini untuk mendpatkan kecocokan darah donor (menghindari inkompatibel )

Pemeriksaan dilakukan dua cara :1- Forward typing

2- Reverse typing

Penentuan Gol.Darah ABO cara Direk-Tabung

Penentuan Gol.Darah ABO cara Direk-Tabung

13

Anti A Anti B Anti A Anti B

Anti A Anti B Anti A Anti B

A B

OAB

1- Forward typing

PEMERIKSAAN GOLONGAN DARAH PEMERIKSAAN GOLONGAN DARAH ABOABO

PEMISAHAN SERUM / PLASMA DARI SEL DARAH MERAHPEMISAHAN SERUM / PLASMA DARI SEL DARAH MERAH

Prinsip : Darah dengan pemutaran akan terjadi pemisahan Prinsip : Darah dengan pemutaran akan terjadi pemisahan antara plasma dan sel-sel darah antara plasma dan sel-sel darah

Tujuan : memisahkan plasma dari sel-sel darahTujuan : memisahkan plasma dari sel-sel darah

Kegunaan : - persiapan pembuatan suspensi sel darah merahKegunaan : - persiapan pembuatan suspensi sel darah merah

- persiapan penentuan antigen golongan darah- persiapan penentuan antigen golongan darah

Cara kerja :

1. Darah dimasukkan ke dalam tabung sentrifus2. Putar 3300 rpm selama 1,5-2 menit3. Supernatan diambil dengan pipet tetes dan

pindahkan ke dalam tabung lain dan sel darah merah terdapat di bagian bawah tabung

4. Sel darah merah dan plasma diberi label kemudian disimpan

1 2 3

PENCUCIAN SEL DARAH MERAHPENCUCIAN SEL DARAH MERAH

Prinsip : Sel darah merah dengan penambahan larutan Prinsip : Sel darah merah dengan penambahan larutan saline dan pemutaran maka antibodi di sekitar saline dan pemutaran maka antibodi di sekitar

sel sel darah merah akan hilang darah merah akan hilang

Tujuan : menghilangkan antibodi yg ada di sekitar sel darahTujuan : menghilangkan antibodi yg ada di sekitar sel darah

Kegunaan : - persiapan pembuatan suspensi sel darah Kegunaan : - persiapan pembuatan suspensi sel darah merahmerah

- persiapan penentuan antigen golongan darah- persiapan penentuan antigen golongan darah

Cara kerja :

1. Sel darah yg telah dipisahkan ditambahkan larutan salin sebanyak plasma yg dibuang

2. Putar 3300 rpm selama 1,5-2 menit3. Supernatan dibuang4. Lakukan pencucian sebanyak 3x5. Endapan sel darh merah yg telah dicuci

merupakan suspensi sel 100%

Diputar 3000 rpm selama 1,5-2 menit

Buang supernatan

Lakukan pencucian 3x

Packed cells

Pembuatan Suspensi Sel Darah Merah A,B,O

1. Suspensi sel 100% dicek ulang golongan darah dengan antiA dan anti B

2. Buat suspensi 10%, 5%3. Berikan label

Suspensi sel 100%

Suspensi sel 10%

Suspensi sel 5%

Pembuatan Suspensi Sel darah MerahPembuatan Suspensi Sel darah Merah

Suspensi Endapan sel

Medium (lart.

Saline)

Kegunaan

5% 1 bagian 19 bagian -Pemeriksaan gol.darah-Pemeriksaan silang reaksi

10% 1 bagian 9 bagian - Pemeriksaan gol.darah (slide test)

40% 2 bagian 3 bagian - Pemeriksaan gol.darah rhesus

Pemeriksaan Gol. Darah Serum Grouping / Pemeriksaan Gol. Darah Serum Grouping / typingtyping

1. Serum / plasma diteteskan pada bloodgrouping plate masing-masing satu tetes pada 4 tempat

2. Pada tetes serum pertama di tambah suspensi sel A 10%, pada tetes serum kedua di tambah suspensi sel B 10%, pada tetes serum ketiga di tambah suspensi sel O 10%

3. Goyangkan bloodgrouping plate hingga tercampur dengan baik

4. Baca adanya aglutinasi

SERUM GROUPING/TYPING

Gol darah Sel A Sel B Sel O Auto kontrol

A - + - -

B + - - -

O + + - -

AB - - - -

Pemeriksaan Gol. Darah Metode Pemeriksaan Gol. Darah Metode TabungTabung

1. Pisahkan plasma dari sel darah1. Pisahkan plasma dari sel darah

2. Cuci sel darah 3x dan buat susp. Sel 5% dalam saline2. Cuci sel darah 3x dan buat susp. Sel 5% dalam saline

3. Cell grouping / typing :3. Cell grouping / typing :

- Masukkan 1 tetes anti A, 1 tetes anti B ke dalam 2 tabung Masukkan 1 tetes anti A, 1 tetes anti B ke dalam 2 tabung pertama, pertama,

- Tambahkan masing-masing 1 tetes susp. sel 5% darah yg Tambahkan masing-masing 1 tetes susp. sel 5% darah yg diperiksa pada setiap tabung yg berisi anti serum diperiksa pada setiap tabung yg berisi anti serum

4. Serum grouping / typing :4. Serum grouping / typing :

- kedalam 4 tabung berikutnya teteskan masing-masing 2 tetes kedalam 4 tabung berikutnya teteskan masing-masing 2 tetes serum / plasma darah yg diperiksaserum / plasma darah yg diperiksa

- pada masing-masing tabung tambahkan 1 tetes tes sel A, 1 tes sel pada masing-masing tabung tambahkan 1 tetes tes sel A, 1 tes sel B, 1 tetes sel O dan 1 tetes susp.sel 5% darah yg diperiksaB, 1 tetes sel O dan 1 tetes susp.sel 5% darah yg diperiksa

5. Kocok sampai tercampur 5. Kocok sampai tercampur

6. Putar 3400 rpm 15 detik / 1000 rpm 1 menit6. Putar 3400 rpm 15 detik / 1000 rpm 1 menit

7. Baca adanya aglutinasi 7. Baca adanya aglutinasi

pisahkan sel dari serum

Cuci selBuat

suspensi 5%

serum @ 1 tetes

sel A sel O sel 5%sel BAnti BAnti A

Suspensi sel

kocok

Sentrifus 3400 rpm/15”

(1000 rpm/10”)

Pembacaanreaksi

(+) aglitinasi(-) tidak aglutinasi AB

O

B

AA

B

O

AB

Penentuan Golongan Darah ABOCara Reverse/Tube/Indirect :

Serum test direaksikan dengan : Gol.

DarahSusp.Sel-A Susp.Sel-B

+

-

-

+

-

+

-

+

B

A

AB

O

Grading System for Reactions

Other methods for blood grouping

• Gel Cards– The cards containing specific typing reagents (monoclonal

antibodies to the various red cell antigens).

• Interpretation of Results– Reaksi positif terlihat sel darah merah diatas gel column setelah

disentrifus– Reaksi negatif terlihat terpisah dengan gel column pada dasar

sedimen

BLOOD GROUPING MICROPLATE TEST METHOD

Saat ini, penentuan golongan darah rutin dikerjakan pada lempeng mikro-96-lubang (96-well microplate) :

- 3 lajur (1-3) pd lempeng utk uji sel penderita dgn antisera

- Lajur 4-6 utk uji sera penderita dgn sel yg diketahui golongannya

- Lajur 7-8 utk uji gol-Rhesus terhadap sel darah penderita .

Reaksi (+) menunjukkan aglutinasi tajam dan reaksi (-) sel merata (disperse)