SITOTOKSISITAS EKSTRAK METANOL DAUN SUKUN (Artocarpus altilis),

NANGKA (Artocarpus heterophyllus), DAN KLUWIH (Artocarpus camansi)

TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D

PUBLIKASI ILMIAH

Disusun sebagai salah satu syarat menyelesaikan Program Studi Strata I pada Fakultas Farmasi

Oleh:

VINDHY MULYA GUSTINA

K 100 130 131

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

2016

1

SITOTOKSISITAS EKSTRAK METANOL DAUN SUKUN (Artocarpus altilis), NANGKA

(Artocarpus heterophyllus), DAN KLUWIH (Artocarpus camansi) TERHADAP SEL

KANKER PAYUDARA T47D

Abstrak

Kanker di Indonesia hampir 70% ditemukan dalam kondisi stadium akhir. Salah satunya

kanker payudara yang menjadi masalah penting dalam dunia kesehatan. Tanaman

Artocarpus seperti sukun, nangka, dan kluwih pada daun memiliki aktivitas sitotoksik

dengan nilai IC50 yang poten pada sel kanker seperti MCF-7 (kanker payudara), SW-480

(kanker paru), dan SMMC-7721 (kanker hati). Penelitian sebelumnya mendorong

dilakukannya penelitian mengenai ada tidaknya aktivitas sitotoksik daun sukun, nangka,

dan kluwih terhadap sel kanker payudara T47D dan diperoleh nilai IC50nya. Ekstraksi

dengan teknik maserasi menggunakan penyari metanol. Identifikasi kandungan senyawa

menggunakan Kromatografi Lapis Tipis pada fase gerak optimal etilasetat : n-heksan

(2:8). Metode uji sitotoksik yaitu MTT assay dengan seri konsentrasi masing-masing

ekstrak 1000, 500, 250, 125 dan 62,5 µg/mL. Absorbansi dari hasil uji MTT dibaca

ELISA reader pada panjang gelombang 595 nm dan dihitung % sel hidup dan didapatkan

nilai IC50. Hasil uji skrining fitokimia menunjukkan bahwa ke tiga tanaman mengandung

senyawa golongan flavonoid, alkaloid, dan tanin. Berdasarkan uji aktivitas sitotoksik

ekstrak metanol daun sukun, nangka, dan kluwih menunjukkan bahwa ke tiga tanaman

tersebut memiliki aktivitas sitotoksik terhadap sel kanker payudara T47D dengan potensi

lemah dengan IC50 masing-masing 234,4 ; 891,2 ; 239,8 µg/mL.

Kata Kunci: Sukun, Nangka, Kluwih, T47D, IC50

Abstract

Cancer in Indonesia almost 70% were found in the late stage. One of them breast cancer

is becoming an important issue in the world of health. Plant groups of Artocarpus such as

sukun, nangka, and kluwih on the leaves have cytotoxic activity with IC50 values that

potent in certain cancer cells such as MCF-7 (breast cancer), SPC-A-1, SW-480 (lung

cancer), and SMMC -7721 (liver cancer). The study encourages research about whether

or not the cytotoxic activity of the leaves of breadfruit, jackfruit, and kluwih against

breast cancer cells T47D with IC50 values. Extraction using maceration method with

methanol. Identification of the content of each plant using Thin Layer Chromatography

with ethyl acetate: n-hexane (2: 8). The method cytotoxic activity is MTT assay with a

series of concentrations is 1000, 500, 250, 125 and 62.5 µg/mL. Absorbance is obtained

from the MTT assay results that read by ELISA reader at a wavelength of 595 nm and

calculated % live cells to obtain IC50 values. The test results of phytochemical screening

by TLC showed that all three plants contain flavonoid compounds, alkaloids, and

tannins. Based on the test cytotoxic activity of the methanol extract of leaves of

breadfruit, jackfruit, and kluwih showed that this extract had a cytotoxic activity against

breast cancer T47D cells with low potential with IC50 values respectively 234.4 ; 891.2;

239.8 µg/mL.

Keywords: Breadfruit, Jackfruit, Kluwih, T47D, IC50.

2

1. PENDAHULUAN

Kanker adalah masalah kesehatan masyarakat yang terbesar di negara maju maupun berkembang dan

menjadi faktor kematian tertinggi. Menurut data GLOBOCAN pada tahun 2012, terbukti bahwa

kanker payudara termasuk penyakit kanker dengan persentase kasus baru tertinggi 43,3%, dan

persentase kematian sebesar 12,9%. Maka dari itu, kanker payudara menjadi masalah penting dalam

dunia kesehatan dengan meningkatnya kejadian setiap tahunnya (Depkes RI, 2015). Pengobatan

kemoterapi kanker memerlukan biaya tinggi, menimbulkan banyak efek samping bersifat toksik dan

merusak jaringan lain yang normal, serta sering kali terjadi kegagalan dalam terapi kemoterapi (Ihbe-

heffinger, 2013). Dari uraian diatas, usaha pengembangan alternatif pengobatan kanker terutama

kanker payudara dengan eksplorasi tanaman obat perlu dilakukan.

Artocarpus altilis termasuk tanaman yang memiliki potensi sebagai obat antikanker pada

bagian daun yang mengandung senyawa turunan flavonoid terhadap sel adenokarsinoma SPC-A-1,

sel karsinoma kolon SW-480 dan sel karsinoma hati SMMC-7721 dengan IC50 poten mendekati nilai

IC50 kontrol positif (9-fluorourasil) dengan IC50 masing-masing sebesar 28,14; 34,62; dan 49,86

µg/mL (Wang et al., 2007). Artocarpus heterophyllus dan Artocarpus camansi memiliki famili yang

sama dengan sukun yaitu Moraceae yang juga memiliki potensi sebagai antikanker. Analisis

fitokimia daun nangka menunjukkan kandungan senyawa utama berupa flavonoid dan fenol sebesar

86,75 mg/g dan 524,86 mg/g (Raaman & Sivaraj, 2014). Beberapa aktivitas farmakologis daun

nangka yaitu efek hipoglikemik dan hipolipidemia (Omar et al., 2011). Selain itu, daun nangka

berpotensi sebagai antikanker pada sel kanker PC-3 (Human Prostate Cancer Cells) dan H460

(Human Lung Cancer Cells) dengan IC50 masing-masing 7,9 µg/mL dan 8,3 µg/mL (Di et al.,

2013). Pada tanaman kluwih, kandungan daun kluwih berupa alkaloid, flavonoid, tanin, dan steroid

(Marianne et al., 2011). Aktivitas yang dimiliki daun kluwih yaitu antikanker pada sel MCF-7, Lung

Adenocarcinoma cell line (sel A549), dan Chinese hamster ovary noncancer cell dengan IC50 9,58 ;

42,66; dan 43,42 µg/mL (Tantengco & Jacinto, 2015). Dari beberapa hasil penelitian di atas, maka

mendorong dilakukan penelitian pada bagian daun sukun, nangka dan kluwih (famili Moraceae)

yang diekstrak dengan metanol dan diuji aktivitas antikanker terhadap sel kanker payudara T47D

menggunakan MTT assay.

2. METODE

Kategori penelitian eksperimental dengan rancangan penelitian Post Test Only with Control Grup.

Pengambilan ketiga sampel berasal dari kota Sukoharjo, Jawa Tengah.

3

2.1 Alat

Rotary evaporator (Heidolp), timbangan analitik (Sartorius), waterbath, LAF (Nuaire), inkubator

CO2 (Binder), tissue culture flask (Nunclon), tabung kolonical steril (Nunclon), sentrifuge (Sigma),

pipet pasteur, mikropipet (Soccorex), haemocytometer (Marienfield Germany), counter, steril

mikroskop fase kontras (Olympus Jepang), plate 96 (Iwaki), peralatan gelas (Pyrex), blue tip dan

yellow tip (Greiner), ependorf steril, cell counter, ELISA reader (ELX 800 Bio Tech), kamera digital

(Sony), vortex (Genie), bejana elusi, pipa kapiler dan cawan penguap.

2.2 Bahan

Daun sukun, daun nangka, daun kluwih, sel T47D, media kultur RPMI 1640 (Gibcobrl), DMSO

(Dimethyl Sulfoxide), MTT 5 mg/mL PBS (50 mg MTT dan 10 mL PBS), PBS (Phosphate

Buffered Saline), SDS (Sodium Dodecyl Sulphate) 10% dalam 0,01 N HCl (larutan stopper),

Aluminium Foil, tripsin-EDTA (tripsin 0,25%), alkohol 70%, metanol, aseton, silica gel GF254, etil

asetat, n-heksana, FeCl3, reagen sitroborat dan reagen dragendorff.

2.3 Langkah penelitian

1. Pembuatan Ekstrak dengan metode maserasi

Sampel diserbuk dan ditimbang 200 gram. Kemudian dimaserasi dengan pelarut metanol 1,4 L dan

disimpan 1x24 jam sambil diaduk sesekali lalu disaring dengan corong Buchner. Dilakukan replikasi

4x untuk mendapatkan rendemen lebih banyak.

2. Skrining fitokimia menggunakan alat KLT dengan pereaksi semprot

Optimasi fase gerak menggunakan etilasetat : n-heksan 5:5; 4:6; 3:7 ; 2:8 ; 1:9 sehingga didapatkan

fase gerak optimal yaitu EA : n-heksan (2:8). Setelah didapatkan hasil elusi sampel, kemudian plat

disemprot dengan reagen pereaksi semprot dan diamati secara visual maupun UV366 nm seperti pada

tabel dibawah ini :

Tabel 1. Reagen pereaksi semprot untuk mengidentifikasi kandungan senyawa

Reagen Pereaksi

Semprot

Senyawa Pengamatan Keterangan

bercak

FeCl3 Tanin Sinar tampak (visual) Abu-abu sampai

biru

Sitroborat Flavonoid Sinar UV366 nm Kuning-jingga

Dragendorff Alkaloid Sinar tampak (visual) Orange

kecoklatan

(Saifudin, 2014)

4

3. Sterilisasi LAF

Menyalakan lampu UV selama kurang lebih 30 menit sebelum digunakan.

4. Panen Sel

Sel T47D diambil dari inkubator CO2 kemudian sel diamati melalui mikroskop hingga terlihat

kondisi sel 80% konfluen. Media di dalam tissue culture flask dibuang dengan pipet pasteur, dicuci

sel di dalam flask dengan menuang Phosphate Buffered Saline (PBS) sebanyak 5 mL. 500 µL

tripsin-EDTA (tripsin 0,025%) ditambahkan secara merata agar sel lepas, flask diinkubasi selama 3

menit. Diambil 10 µL sel dalam flask diletakkan di kamar hitung dalam LAF untuk menghitung

jumlah sel yang akan di transfer ke plate dengan haemocytometer. Sejumlah sel ditransfer ke dalam

tabung conical tube steril ad 10 mL media kemudian dihomogenkan.

5. Preparasi Sampel

Ke tiga sampel ditimbang 10 mg, dimasukkan dalam tabung konikal kemudian dilarutkan dengan

DMSO 100 µL dan divortex sampai terlarut kemudian ditambahkan media RPMI ad 10 mL. Larutan

stok uji dibuat seri konsentrasi 1000 µg/mL, 500 µg/mL, 250 µg/mL, 125 µg/mL, dan 62,5 µg/mL.

Volume akhir setiap seri konsentrasi untuk perlakuan dibuat 100 µL/sumuran dan dimasukkan dalam

plate 96.

6. Uji sitotoksik terhadap sel T47D dengan metode MTT

100 µL suspensi sel tiap sumuran di dalam well plate 96, kecuali kontrol media tanpa sel, kemudian

plate diinkubasi selama 24 jam dalam inkubator CO2 hingga konfluen 80%. Jika dalam 24 jam belum

konfluen, diinkubasi kembali maksimal 24 jam. Jika sudah konfluen, media dibuang, ditambahkan

sampel 100 µL dalam tiap sumuran dengan variasi kadar (1000, 500, 250, 125, 62,5) µg/mL. Plate

diinkubasi 24 jam–48 jam dalam inkubator CO2. Dibuang media, lalu dicuci dengan PBS 100 µL,

kemudian 100 µL MTT 5 mg/mL dalam PBS ditambahkan ke setiap sumuran. Inkubasi kembali

plate selama kurang lebih 4 jam pada suhu 37℃. Sel hidup akan bereaksi dengan MTT (3-(4,5-

dimetilthiazol-2-il)-2,5 difeniltetrazoliumbromid) membentuk formazan ungu. Setelah itu,

ditambahkan 100 µL larutan SDS 10% ke dalam plate untuk menghentikan reaksi pembentukan

formazan atau sebagai stopper reagen. Bungkus plate dengan alumunium foil dan diletakkan

ditempat gelap pada suhu kamar selama 24 jam. Plate dibaca dengan ELISA reader pada panjang

gelombang 595 nm dan diperoleh absorbansi untuk menghitung persentase sel hidup dan nilai IC50-

nya (Haryoto et al., 2013).

7. Analisis Data

Absorbansi kontrol pelarut lebih rendah dari absorbansi kontrol sel maka hitung persentase sel hidup

dengan rumus berikut :

5

( )

( )

Dibuat grafik log konsentrasi vs persentase sel hidup didapatkan persamaan regresi linier,

dimasukkan y = 50% kemudian cari x nya dan dihitung antilog dari konsentrasi tersebut sehingga

didapatkan nilai IC50 (Fitriasari, 2013).

3. HASIL DAN PEMBAHASAN

Ekstraksi dengan metode maserasi menggunakan pelarut metanol dengan jumlah rendemen masing-

masing tanaman yaitu sukun 11,84 %, nangka 10,39 % dan kluwih 10,60 %.

3.1 Skrining Fitokimia

Hasil skrining fitokimia dengan KLT yang disemprot dengan pereaksi semprot berupa dragendorff,

FeCl3, dan sitroborat kemudian dilihat secara visual dan UV366 nm dapat dilihat pada Gambar 1 :

Dragendorff

S N K

FeCl3

S N K

Sitroborat

S N K

Gambar 1. Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak Metanol Daun Sukun (S), Nangka (N), Kluwih (K)

setelah divisualisasi dengan pereaksi semprot Dragendroff, FeCl3, dan Sitroborat

Tabel 2. Deteksi golongan senyawa dengan KLT dan pereaksi semprot

Sampel

Warna penampakan bercak

Hasil Dragendorff FeCl3 Sitroborat

Visual Visual 366

Sukun Coklat, Orange,

Kuning, Abu tua

Coklat, Biru, Abu Coklat, Biru,

Abu

Flavonoid,

Alkaloid,

Tanin

Nangka Coklat keabuan,

Kuning

kecoklatan, Abu

tua

Abu, Kuning

coklat, Abu tua

Abu, Kuning

coklat, Abu tua

Flavonoid,

Alkaloid,

Tanin

Kluwih Coklat, Orange

Kuning , Abu

Kecoklatan, Coklat

Kuning, Abu

Kecoklatan,

Coklat

Kuning, Abu

Flavonoid,

Alkaloid,

Tanin

Senyawa aktif dalam daun sukun berupa geranil flavonoid dan geranil dihidrokalkon (Wang

et al., 2007), flavonoid yang terprenilasi (Fajriah et al., 2013), steroid, fenol, terpenoid, dan tanin

6

Enzim dehidrogenase

suksinat

(Pradhan & Mohanty, 2015), alkaloid (Marianne et al., 2011). Sedangkan senyawa aktif dalam daun

nangka berupa golongan flavonoid seperti artokarpusin A dan artokarpusin B (Wang et al., 2013),

isoquersitrin dari golongan polifenol (Omar et al. (2011), sapogenin, tanin, dan sikloartenon (Hari &

Divya, 2014). Pada daun dan batang nangka menunjukkan adanya sapogenin, cycloartenone,

cycloartenol, β-sitosterol dan tanin yang memiiliki aktivitas estrogenik (Pradhan and Mohanty,

2015). Pada daun kluwih terkandung adanya senyawa metabolit berupa β-sitosterol dari golongan

steroid (Nasution et al., 2014), alkaloid, tanin (Marianne et al., 2011), dan senyawa kalkon dari

golongan flavonoid (Mariana, 2013).

Pada hasil penelitian ini sampel sukun, nangka, dan kluwih memiliki genus yang sama yaitu

Artocarpus, dengan dihasilkan metabolit sekunder berupa flavonoid, alkaloid, dan tanin. Penelitian

ini dibandingkan dengan penelitian sebelumnya terbukti menunjukkan bahwa kandungan senyawa

dari isolat daun sukun, nangka, maupun kluwih mengandung senyawa utama golongan flavonoid.

Sedangkan adanya senyawa tanin telah diidentifikasi dan dilaporkan dari ekstrak daun sukun,

nangka, dan kluwih oleh Pradhan and Mohanty (2015), Hari and Divya (2014), dan Marianne et al.

(2011). Adanya senyawa alkaloid dari ekstrak daun kluwih telah dilaporkan oleh Marianne et al.

(2011), tetapi belum dipaparkan adanya senyawa hasil isolasi dari ekstrak tersebut.

Peran penting senyawa flavonoid pada aktivitas sitotoksik terhadap sel T47D yaitu dengan

mengaktivasi protein p53. Sel T47D yang digunakan dalam penelitian ini merupakan jenis sel kanker

yang mengalami mutasi pada gen p53, yang mengakibatkan tidak mampu melakukan pengendalian

siklus sel dan terjadi hambatan dalam apoptosis sel (Tussanti dan Johan, 2014).

3.2 Uji Sitotoksik dengan metode MTT terhadap sel T47D

Uji sitotoksik menggunakan metode MTT dengan prinsip terjadinya reduksi garam kuning

tetrazolium MTT oleh sistem reduktase dalam mitokondria sel-sel yang hidup membentuk kristal

formazan berwarna ungu yang bersifat basa dan larut dalam SDS 10% dalam HCl.

Garam MTT Kristal Formazan Ungu

Gambar 2. Reaksi Pembentukan Kristal Formazan dari Reduksi Garam MTT

Sistem

Reduktase

7

A B C

D E

Gambar 3. Uji aktivitas sitotoksik dengan perlakuan ekstrak metanol daun sukun, nangka, kluwih

terhadap sel T47D : Kontrol sel (A); Perlakuan dengan ekstrak kluwih 250 ug/mL(B); Nangka 500

ug/mL(C); Sukun 1000 ug/mL(D); Sukun 62,5 ug/mL setelah pemberian MTT (E). Pengamatan

dilakukan dengan mikroskop perbesaran 100x : ( ) menunjukkan sel hidup, ( ) menunjukkan sel

mati dan ( ) menunjukkan sel hidup yang bereaksi dengan MTT

Tabel 3. Uji Aktivitas Sitotoksik Ekstrak Metanol Daun Sukun, Nangka, Kluwih terhadap Sel

T47D

Ekstrak

Konsentrasi

ekstrak

(g/mL)

Log

Konsentrasi

Rata-rata %

Sel Hidup

Persamaan

Regresi Linier

IC50

(µg/mL)

Sukun 250 2,39794 14,35032

y = -338,7x + 854,17

R² = 0,8194 234,4 125 2,09691 199,2162

62,5 1,79588 218,2695

Nangka

1000 3 46,90986 y = -260,7x + 820,83

R² = 0,9665 891,2 500 2,69897 100,0904

250 2,39794 203,9192

Kluwih

250 2,39794 16,27977 y = -336,7x + 853,03

R² = 0,7989

239,8

125 2,09691 205,7281

62,5 1,79588 218,9931

Menurut National Cancer Institute (NCI) mengelompokkan suatu senyawa tergolong memiliki

aktivitas sitotoksik jika IC50 ≤ 20 µg/mL (Tussanti et al., 2014). Dari kriteria diatas, dapat dilihat

bahwa IC50 dari daun sukun, nangka maupun kluwih > 20 µg/mL, sehingga aktivitas sitotoksik

terhadap sel T47D lemah.

8

Gambar 4. Hubungan log konsentrasi ekstrak dengan persentase sel hidup pada ekstrak metanol

daun sukun, nangka, dan kluwih terhadap sel T47D

Menurut penelitian BPOM (2013), menunjukkan bahwa senyawa geranil kalkon yang diisolasi dari

daun sukun menunjukkan aktivitas inhibisi terhadap sel liposarkoma manusia SW872 dengan IC50

3,8 µg/mL. Efek apoptosis pada kayu sukun terhadap sel T47D dengan kandungan utama artokarpin

dapat meningkatkan apoptosis sub G1 sehingga sel hidup T47D turun dengan nilai IC50 6,19 µg/mL

(Arung et al., 2009). Penelitian Wang et al. (2007) membuktikan bahwa daun Artocarpus altilis

terbukti memiliki aktivitas sitotoksik yang poten terhadap sel kanker paru SPC-A-1 dan SW-480,

kanker hati SMMC-7721 dengan IC50 masing-masing sebesar 28,14; 34,62; 49,86 µg/mL.

Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa daun sukun memiliki aktivitas sitotoksik yang lemah

terhadap sel kanker payudara T47D dengan IC50 234,4 µg/mL. Sedangkan penelitian Arung et al.

(2009), kayu sukun terbukti memiliki aktivitas sitotoksik yang potensinya tinggi terhadap sel T47D

dibanding hasil penelitian ini yang telah dilaporkan bahwa kayu sukun mengandung senyawa utama

artokarpin. Penelitian Wang et al. (2007) menunjukkan bahwa daun sukun memiliki potensi terhadap

sel kanker paru dan kanker hati. Potensi pada bagian tanaman sukun seperti daun dan kayu memiliki

potensi sitotoksik terhadap sel kanker tertentu, hal itu dikarenakan setiap bagian tanaman memiliki

0

50

100

150

200

250

300

0 1 2 3

% s

el h

idu

p

Log Konsentrasi Ektrak Sukun

0

50

100

150

200

250

0 1 2 3 4

% s

el h

idu

p

Log Konsentrasi Ekstrak Nangka

0

50

100

150

200

250

300

0 1 2 3

% s

el h

idu

p

Log Konsentrasi Ekstrak Kluwih

9

kandungan senyawa aktif metabolit sekunder yang berbeda dan memiliki mekanisme untuk

menghambat pertumbuhan sel kanker tertentu.

Penelitian oleh Patel & Patel (2011) menunjukkan adanya aktivitas sitotoksik dengan IC50

35,26 μg/mL. Sedangkan, sel MCF-7 & sel HeLa tidak memiliki aktivitas sitotoksik terhadap MCF-7

dan sel HeLa (Patel & Patel, 2011).

Menurut hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak metanol daun nangka memiliki

aktivitas sitotoksik terhadap T47D sangat lemah dengan IC50 891,2 µg/mL. Sel MCF-7 dan T47D

merupakan jenis sel kanker payudara, namun dari hasil penelitian ini dapat dilihat bahwa potensi

daun nangka lebih unggul pada sel T47D dibandingkan dengan sel MCF-7. Pada sel kanker paru

A549, daun nangka memiliki aktivitas sitotoksik yang lebih poten dibanding pada sel T47D karena

mekanisme yang berbeda antara keduanya, sel A549 meningkatkan ekspresi FAK (Focal adhesion

kinase) dalam migrasi dan invasi sel (Munawir, 2015).

Kluwih memiliki famili yang sama dengan sukun dan nangka yaitu Moraceae. Penelitian

Tantengco & Jacinto (2015) menunjukkan bahwa daun kluwih memiliki aktivitas sitotoksik terhadap

MCF-7 dengan nilai IC50 9,58 µg/mL (Tantengco & Jacinto, 2015). Penelitian skripsi oleh

Fatmawati (2012) tentang aktivitas sitotoksik kulit batang kluwih mempunyai efek sitotoksik

terhadap sel HeLa dengan nilai IC50 sebesar 17,82 μg/mL.

Menurut hasil penelitian ini, didapatkan bahwa ekstrak metanol daun kluwih memiliki

aktivitas sitotoksik yang lemah terhadap sel T47D dengan nilai IC50 239,8 µg/mL. Sel T47D dan

MCF-7 merupakan sel kanker payudara, namun memiliki aktivitas sitotoksik yang berbeda dengan

mekanisme penghambatan sel kanker yang berbeda pula. Mekanisme sel MCF-7 yaitu overekspresi

Bcl-2 dan tidak mengekspresikan caspase-3 (Butt et al., 2000), selain itu MCF-7 mengekspresikan

protein p53 wild type. Sedangkan sel T47D mengekspresikan protein p53 yang termutasi (Neve et

al., 2006). Selain perbedaan jenis sel, bagian tanaman dari kluwih yang lain memiliki kandungan

spesifik tertentu yang dapat menghambat pertumbuhan sel kanker.

Dalam penelitian ini belum dilakukan pemisahan klorofil pada daun, sehingga dapat

mempengaruhi hasil uji kromatografi lapis tipis dalam mengidentifikasi kandungan. Klorofil

memiliki beberapa aktivitas farmakologi seperti efek sitotoksik (Bastide et al., 2011), antioksidan

dengan IC50 200 μg/mL (Hsu et al., 2013), dan antidiabetes (McCarty, 2001). Cara untuk

menghilangkan klorofil dari daun menggunakan metode pemisahan partisi, dengan cara serbuk daun

direndam menggunakan 250 mL eter dan digojog sampai semua klorofil berpindah dari fase air ke

fase eter sehingga klorofil hilang. Pelarut nonpolar lainnya yang dapat melarutkan klorofil yaitu

10

n-heksan, petroleum eter, benzene, dan toluen. Setelah itu, dilakukan maserasi dengan pelarut

metanol agar didapatkan ekstrak kental tanpa adanya klorofil (Fardhani, 2014)

4. PENUTUP

Dari uraian diatas mengenai penelitian uji aktivitas sitotoksik dengan daun sukun, nangka, dan

kluwih terhadap sel kanker payudara T47D menunjukkan bahwa potensi aktivitas sitotoksik daun

sukun lebih tinggi dibandingkan dengan kluwih maupun nangka dalam membunuh sel T47D. Hal

tersebut dilihat dari nilai IC50 yang menunjukkan sukun lebih kecil dibandingkan dengan kluwih

maupun nangka. Menurut kriteria potensi sitotoksik menunjukkan bahwa daun sukun, nangka,

kluwih memiliki aktivitas sitotoksik yang lemah dalam membunuh sel kanker payudara T47D

dengan nilai IC50 masing-masing sebesar 234,4 ; 891,2 ; 239,8 µg/mL. Hasil skrining fitokimia

dengan KLT dihasilkan bahwa ke tiga tanaman mengandung senyawa metabolit sekunder berupa

flavonoid, alkaloid, dan tanin.

PERSANTUNAN

Terimakasih saya ucapkan kepada staf laboratorium Kimia Farmasi dan Biologi Farmasi yang telah

membantu penulis dalam menyelesaikan artikel ilmiah ini.

DAFTAR PUSTAKA

Arung, E. T., Wicaksono, B. D., Handoko, A., Kusuma, I. W., Yulia, D., & Sandra, F. (2009). Anti-

Cancer Properties of Diethylether Extract of Wood from Sukun ( Artocarpus altilis ) in Human

Breast Cancer ( T47D ) Cells. Tropical Journal of Pharmaceutical Research, 8(August), 317–

324.

Badan POM. (2013). Formularium Ramuan Etnomedisin Obat Asli Indonesia Volume III.

Indonesia.

Bastide, N. M., Pierre, F. H. F., & Corpet, D. E. (2011). Heme iron from meat and risk of colorectal

cancer: A meta-analysis and a review of the mechanisms involved. Cancer Prevention

Research, 4(2), 177–184. https://doi.org/10.1158/1940-6207.CAPR-10-0113

Butt, A. J., Firth, S. M., King, M. A., & Baxter, R. C. (2000). Insulin-like growth factor-binding

protein-3 modulates expression of Bax and Bcl-2 and potentiates p53-independent radiation-

induced apoptosis in human breast cancer cells. Journal of Biological Chemistry, 275(50),

39174–39181. https://doi.org/10.1074/jbc.M908888199

Di, X., Wang, S., Wang, B., Liu, Y., Yuan, H., Lou, H., & Wang, X. (2013). New phenolic

compounds from the twigs of Artocarpus heterophyllus. Drug Discoveries & Therapeutics,

7(1), 24–28.

Fajriah, S., Mozef, T., Artanti, N., Lotulung, P. D. N., & Abbas, J. (2013). Isolation of Prenylated

Flavonoid from Ethyl Acetate Fraction of Artocarpus altilis Leaves using Counter-Current

Chromatography. Asian Transactions on Basic and Applied Sciences, 02(06), 6–9.

11

Fardhani, H. L. (2014). Pengaruh Metode Ekstraksi Secara Infundasi Dan Maserasi Daun Asam

Jawa (Tamarindus indica L.) Terhadap Kadar Flavonoid Total. Universitas Gadjah Mada,

296344.

Fitriasari, A., Dewi, D., Ikawati, M., & Meiyanto, E. (2013). Prosedur Tetap Uji Sitotoksik Metode

MTT. Cancer Chemoprevention Research Center UGM, 2–4.

Hari, A., & Divya, D. (2014). Artocarpus  : A Review of its Phytochemistry and Pharmacology.

Journal of Pharma Search, 9(1), 7–12.

Haryoto, Indrayudha, P., Azizah, T., Azizah, T., & Suhendi, A. (2013). Aktivitas Sitotoksik Ekstrak

Etanol Tumbuhan Sala (Cynometra ramiflora Linn ) Terhadap Sel HeLa, T47D dan WiDR.

Jurnal Penelitian Saintek, 18(2), 21–28.

Hsu, C., Chao, P., Hu, S., & Yang, C. (2013). The Antioxidant and Free Radical Scavenging

Activities of Chlorophylls and Pheophytins. Food and Nutrition Sciences, 4(August), 1–8.

https://doi.org/10.4236/fns.2013.48A001

Ihbe-heffinger, A., Paessens, B., & Berger, K. (2013). The impact of chemotherapy-induced side

effects on medical care usage and cost in German hospital care — an observational analysis on

non-small-cell lung cancer patients. Support Care Cancer, 21, 1665–1675.

https://doi.org/10.1007/s00520-012-1711-5

Marianne, Yuandani, & Rosnani. (2011). Antidiabetic Activity From Ethanol Extract of Kluwih’s

Leaf (Artocarpus camansi). Jurnal Natural, 11(2), 64–68.

McCarty, M. F. (2001). The chlorophyll metabolite phytanic acid is a natural rexinoid - potential for

treatment and prevention of diabetes. Medical Hypotheses, 56(2), 217–219.

Munawir, A. (2015). Anti-Metastatic Effect of Boiled Garlic Extract on A549 Lung Cancer Cells

Line by FAK Mechanism. Kedokteran Brawijaya, 28(Agustus), 291–296.

Neve, R. M., Chin, K., Fridlyand, J., Yeh, J., Baehner, F. L., Fevr, T., … Gray, J. W. (2006). A

collection of breast cancer cell lines for the study of functionally distinct cancer subtypes.

Cancer Cell, 10(6), 515–527. https://doi.org/10.1016/j.ccr.2006.10.008

Omar, H. S., El-beshbishy, H. A., Moussa, Z., Taha, K. F., & Singab, A. N. B. (2011). Antioxidant

Activity of Artocarpus heterophyllus Lam . ( Jack Fruit ) Leaf Extracts  : Remarkable

Attenuations of Hyperglycemia and Hyperlipidemia in Streptozotocin-Diabetic Rats. The

Scientific World Journal, 11, 788–800. https://doi.org/10.1100/tsw.2011.71

Patel, R. M., & Patel, S. K. (2011). Cytotoxic activity of methanolic extract of Artocarpus

heterophyllus against A549 , Hela and MCF-7 cell lines. Journal of Applied Pharmaceutical

Science, 01(07), 2286082.

Pradhan, C., & Mohanty, M. (2015). A Review on Phytochemistry , Bio-Efficacy , Medicinal and

Ethno- Pharmaceutical Importance of Artocarpus altilis. International Journal of Pharmacy &

Pharmaceutical Research, 3(1), 219–231.

Raaman, N., & Sivaraj, C. (2014). Antioxidant Activities And Phytochemical Analysis Of Methanol

Extract Of Leaves Of Artocarpus Heterophyllus Lam. International Journal of Pharmacy and

Pharmaceutical Sciences, 6(8), 6–10.

RI, D. K. (2015). Stop Kanker - Pusat Data dan Informasi. Infodatin-Kanker, hal 3.

Saifudin, Azis., 2014. Senyawa Alam Metabolit Sekunder (Teori, Konsep, dan Teknik Pemurnian),

Deepublish, Yogyakarta.

12

Tantengco, O. A. G., & Jacinto, S. D. (2015). Cytotoxic activity of crude extracts and fractions

from Premna odorata (Blanco), Artocarpus camansi (Blanco) and Gliricidia sepium (Jacq.)

against selected human cancer cell lines. Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine, 5(12),

1037–1041. https://doi.org/10.1016/j.apjtb.2015.09.011

Wang, Y., Xu, K., Lin, L., Pan, Y., & Zheng, X. (2007). Geranyl flavonoids from the leaves of

Artocarpus altilis. Phytochemistry, 68, 1300–1306.