Probenesid berinteraksi dengan proses pengangkutan obat di beberapa situs dalam tubuh. Bagi kebanyakan kuinolon, pembersihan ginjal berkurang dengan pemberian seiring probenesid. Interaksi antara gemifloxacin dan probenesid belum dipelajari. Kami mempelajari tingkat, perjalanan waktu, situs (s), dan mekanisme interaksi ini. Tujuh belas relawan sehat berpartisipasi dalam studi acak, lintas dua arah. Subyek menerima 320 mg gemifloxacin sebagai tablet oral tanpa dan dengan 4,5 g probenesid dibagi dalam delapan dosis oral. Konsentrasi obat dalam plasma dan urin dianalisis dengan kromatografi spektrometri massa tandem cair. WinNonlin digunakan untuk analisis noncompartmental, pemodelan kompartemen, dan statistik, dan NONMEM digunakan untuk pemeriksaan prediktif visual. Administrasi seiring probenesid peningkatan konsentrasi gemifloxacin plasma dan jumlah diekskresikan dalam urin dibandingkan dengan jumlah awal. Data perkiraan rata-rata (persen koefisien variasi). Pemodelan menunjukkan penghambatan kompetitif dari sekresi tubular ginjal gemifloxacin oleh probenesid sebagai mekanisme yang paling mungkin dari interaksi. Perkiraan Km dan Vmax untuk bagian saturable eliminasi ginjal adalah 9.16 mg / liter (20%) dan 113 mg / jam (21%), masing-masing. Berdasarkan rasio molar, afinitas untuk transporter ginjal adalah 10 kali lipat lebih tinggi untuk gemifloxacin daripada probenesid. Sejak probenesid mencapai area 200-kali-tinggi di bawah molar konsentrasi-waktu kurva 0-24 jam dibanding gemifloxacin, probenesid menghambat sekresi tubular aktif gemifloxacin. Probenesid juga mengurangi clearance nonrenal dari gemifloxacin dari 25,2 (26%) menjadi 21,0 (23%) liter / jam. Probenesid menghambat ginjal sekresi tubular gemifloxacin, kemungkinan besar dengan mekanisme kompetitif, dan sedikit menurun nonrenalclearance dari gemifloxacin.Gemifloxacin adalah fluoronaphthyridone antimikroba dengan peningkatan aktivitas terhadap patogen gram positif (7). Hal ini disetujui oleh FDA untuk pengobatan eksaserbasi bakteri akut bronkitis kronis dan ringan sampai sedang masyarakat pneumonia. Pembersihan ginjal gemifloxacin melebihi laju filtrasi glomerulus, yang menunjukkan sekresi tubular bersih (2). Sebagai gemifloxacin ada terutama sebagai Zwitterion pada pH fisiologis, kemungkinan untuk berinteraksi dengan anion organiktransporter (OAT) dan transporter kation organik (OCTs) dalam sel tubulus ginjal (31). Probenesid diketahui menghambat proses transpor aktif molekul obat anionik dan kationik di beberapa situs dalam tubuh (13, 15, 16). Probenesid didokumentasikan dengan baik untuk mengurangi sekresi ginjal banyak kuinolon, misalnya, gatifloksasin (21), levofloxacin (10, 11), dan ciprofloxacin (14). Namun, tidak ada laporan tentang interaksi antara probenesid dan gemifloxacin.Untuk studi tentang perjalanan waktu dan mekanisme interaksi obat-obat, pemodelan kompartemen lebih unggul analisis noncompartmental standar (NCA). Selain keterbatasan havingother, standar NCA tidak memungkinkan seseorang untuk memprediksiinteraksi untuk regimen dosis lain dari obat inhibitor ditambah yang mungkin lebih relevan untuk praktek klinis.Kami tidak mengetahui adanya studi tentang perjalanan waktu dan mekanisme interaksi antara probenesid dan kuinolon melalui pemodelan kompartemen dengan manusia atau hewan. Tujuan utama kami adalah untuk menggambarkan sejauh mana interaksi antara gemifloxacin dan probenesid menggunakan pemberian beberapa dosis probenesid. Tujuan kedua kami adalah untuk menggambarkan perjalanan waktu dan mekanisme yang masuk akal untuk interaksi antara gemifloxacin dan probenesid di lokasi ginjal dan nonrenal dengan pemodelan kompartemen.

BAHAN DAN METODEStudi desain dan pemberian obat.Tujuh belas subyek Kaukasia sehat (sembilan laki-laki dan delapan perempuan) berpartisipasi dalam studi. Prosedur klinis Umum yang seperti yang dijelaskan sebelumnya (18). Penelitian ini adalah acak, terkontrol, analisis Crossover dua arah. Subyek berpuasa dari 12 jam sebelum sampai 3 h setelah pemberian of gemifloxacin. Dalam masing-masing dua periode studi, masing-masing subjek menerima dosis oral tunggal dari 320 mg gemifloxacin (Factive, 320-mg tablet) baik sendiri atau dengan 4,5 g dari probenesid (Probenecid Weimer, 500-mg tablet) dibagi menjadi delapan dosis oral. Kita dimaksudkan untuk mempelajari exten maksimum interaksi antara probenesid dan gemifloxacin. Oleh karena itu, kami diberikan dosis relatif tinggi dari probenesid sepanjang seluruh plasma gemifloxacin profil konsentrasi-waktu. Dosis Probenesid adalah 1.000 mg pada 10 jam dan 2 jam sebelum pemberian gemifloxacin, diikuti oleh 250 mg pada 6 jam dan 14 jam setelah pemberian gemifloxacin dan 500 mg pada 24 jam, 36 jam, 48 jam, dan 60 jamsetelah pemberian gemifloxacin. Dosis dari semua obat diberi dengan 240 ml dari karbonasi rendah-, air mineral kalsium-miskin. Makanan dan cairan intake berada ketat standar pada setiap hari studi. Para masa pengobatan dipisahkan oleh periode washout dari setidaknya 7 hari. Subyek diminta untuk menjauhkan diri dari kafein yang mengandung makanan dan minuman, produk jeruk, jus jeruk, alkohol, dan paparan sinar matahari yang berlebihan selama periode studi.Jadwal Sampling.Sampel darah diambil dari vena lengan dengan menggunakan kateter berdiamnya segera sebelum dosis gemifloxacin dan pada 0,5, 1,1.5, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 16, 24, 36, dan 48 jam postdose. Sampel urin dikumpulkan sebelum gemifloxacin administrasi dan selama interval waktu berikut: 0 sampai 4, 4 sampai 8, 8 sampai 12, 12 sampai 16, 16 sampai 24, 24-30, 30 sampai 36, 36-48, 48-60, dan 60 sampai 72 jam setelah dosis gemifloxacin. Semua sampel dilindungi dari daylight seluruh persiapan sampel dan analisis. Semua sampel segera dibekukan dan disimpan di20 C sampai analisis.Penentuan plasma dan konsentrasi urin obat.Untuk penentuan gemifloxacin plasma dan konsentrasi probenesid, 50 dan 100L, masing-masing, masing-masing sampel diendapkan dengan 250 dan 300L, masing-masing, asetonitril yang mengandung standar internal. Setelah benar-benar campuran, sampel disentrifugasi selama sekitar 15 menit pada 11.000 g untuk sampel gemifloxacin atau 5 menit pada 3.280 g untuk sampel probenesid. Dari setiap sampel urin manusia, 50L dari supernatan diencerkan dengan 400 l fase gerak yang mengandung standar internal. Untuk plasma disiapkan dan sampel urin, 10 l dari masing-masing sampel gemifloxacin atau 15L dari masing-masing sampel probenesid dikromatografi pada kolom fase terbalik dengan elusi isokratik. Sampel dianalisis dengan kromatografi cair-spektrometri massa tandem, dengan metode reaksi-monitoring yang dipilih. Reaksi untuk gemifloxacin adalah prekursor 3 ion produk untuk gemifloxacin m / z 390 3 m / z 313 dan internal standar m / z 394 3 m / z 313.Kedua analisis berada dalam modus positif. Gemifloxacin dan standar internaldielusi setelah sekitar 1,1 menit. Kalibrasi dilakukan oleh tertimbang (1/y2) regresi linier. Reaksi untuk probenesid adalah prekursor 3 ion produk untuk probenesid m / z 284 3 m / z 240 dan internal standar m / z 329 3m / z 205. Kedua analisis berada dalam modus negatif. Probenesid dan standar internal terelusi setelah 1,4 dan 0,8 menit. Kalibrasi dilakukan dengan tertimbang (1/x2) regresi linier. Perangkat lunak MacQuan (versi 1.6 [1991-1998]; PE SCIEX, Thorn bukit, Ontario, Kanada) digunakan untuk evaluasi kromatogram.Standar kalibrasi untuk plasma dan urin disusun oleh menambahkan volume yang tepat atas suatu larutan standar dari gemifloxacin atau probenesid atau dari yang lebih sangat terkonsentrasi standard solution kalibrasi terhadap obat-bebas plasma manusia atau urin. Tidak ada gangguan yang diamati dalam plasma dan urin untuk gemifloxacin, probenesid, atau standar internal. Kurva kalibrasi dalam plasma dan urin yang linier antara 0,0100 dan 5,00 mg / liter untuk gemifloxacin dan antara 2,45 dan 97,6 mg / liter untuk probenesid. Batas-batas kuantifikasi itu identik dengan tingkat kalibrasi terendah. The interday presisi dan pemulihan analitis dari sampel kontrol kualitas berduri dari gemifloxacin dalam plasma manusia (urin) berkisar 3,7-7,2% (5,7-7,7%) dan 100,9-101,4% (98,1-103,3%), masing-masing. The interday presisi dan pemulihan analitis dari sampel kontrol kualitas berduri dari probenesid dalam plasma manusia berkisar 5,1-5,8% dan 90,3-102,6%, masing-masing.Perhitungan.WinNonlin (versi 4.0.1, Pharsight Corporation) digunakan untuk NCA (seperti yang dijelaskan sebelumnya [18]), pemodelan kompartemen, dan analisis statistik varians. NONMEM versi V rilis 1.1 (NONMEM Proyek Group, University of California, San Francisco) (4) telah dimanfaatkan untuk cek prediktif visual (5) dan simulasi Monte Carlo. Pemodelan kompartemen Semua plasma dan profil urin untuk gemifloxacin (withand tanpa probenesid) dan probenesid dimodelkan secara bersamaan dalam rangkauntuk mendapatkan jumlah maksimum informasi dari data. Model diskriminasi, termasuk pemeriksaan prediktif visual, dilakukan seperti dilaporkan sebelumnya (19).Penyerapan dan disposisi gemifloxacin.Satu, dua, dan tiga kompartemen model disposisi dengan penyerapan orde pertama dan dengan atau tanpa jeda waktu penyerapan diuji. Clearance ginjal gemifloxacin adalah CLR (fu GFR) Vmax R / KMRG? mana fu adalah fraksi non-protein yang terikat gemifloxacin dalam plasma, GFR adalah laju filtrasi glomerulus, Vmax R adalahtingkat maksimum penghapusan ginjal campuran-order, Km R adalah konsentrasi gemifloxacin dikaitkan dengan tingkat setengah-maksimal untuk penghapusan ginjal campuran urutan gemifloxacin, [G] adalah konsentrasi gemifloxacin plasma, fu GFR filtrasi clearance, dan Vmax R / KMR G menjelaskan sekresi tubular bersih.Karena jangkauan fu adalah antara 0,3 dan 0,4 (3) dan semua mata pelajaran memiliki fungsi ginjal normal, pembersihan filtrasi ginjal gemifloxacin, fu GFR, adalah sekitar 2 liter / jam dan menyumbang hanya sekitar 6% dari clearance total tubuh. Oleh karena itu, komponen orde pertama clearance ginjal tetap untuk 2 liter / jam. The nonrenal penghapusan gemifloxacin digambarkan sebagai proses orde pertama. Untuk model dengan interaksi berbasis mekanisme di situs nonrenal, clearance nonrenal adalah CL NRVmax NR / Km NRG mana Vmax NR adalah tingkat maksimum penghapusan nonrenal dan Km NR adalah konsentrasi gemifloxacin terkait dengan tingkat setengah-maksimal dari dicampur-order eliminasi nonrenal. Penyerapan dan disposisi probenesid. Satu-dan dua-kompartemen model disposisi dengan paralel orde pertama dan dicampur-order jalur eliminasi diuji, karena penghapusan saturable probenesid telah dilaporkan sebelumnya (9, 34). The penyerapan lisan digambarkan sebagai sebuah proses orde pertama dengan atau tanpa waktu lag. Model interaksi.Diasumsikan bahwa penghapusan ginjal orde pertama (filtrasi glomerulus) dari gemifloxacin tidak dipengaruhi oleh probenesid dan probenesid yang berinteraksi dengan sekresi tubular, dengan penghapusan nonrenal, atau dengan keduanya. Interaksi ini digambarkan sebagai kompetitif, kompetitif, atau nonkompetitif inhibisi (Table1). Atau, interaksi statis dinyatakan baik sebagai dua kelonggaran nonrenal yang berbeda untuk gemifloxacin dengan dan tanpa probenesid atau sebagai dua clearance intercompartmental yang berbeda.Model dengan kombinasi yang berbeda dari interaksi di ginjal dan non-situs ginjal ditunjukkan pada Tabel 2. Untuk interaksi kompetitif, relatifafinitas (dinyatakan sebagai rasio dari penghambatan kompetitif konstan [Kic] tothe Km) dari gemifloxacin dan probenesid untuk transporter dihitung (Tabel 1),dengan perbedaan berat molekul (389 g / mol untuk dasar gemifloxacin dan 285 g / mol untuk dasar probenesid) yang menyumbang. Etika.Studi ini disetujui oleh komite etika lokal, dan semua mata pelajaran memberikan persetujuan tertulis diinformasikan sebelum memulai penelitian. Penelitian dilakukan sesuai dengan versi revisi dari Deklarasi Helsinki.HASILSemua 17 subjek menyelesaikan studi. Rata-rata simpangan baku berat badan adalah 69,113 kg, dan tinggi rata-rata 173 cm 10. Konsentrasi Gemifloxacin dalam plasma berada sedikit lebih tinggi untuk pengobatan dengan probenesid (Gbr. 1A), dan jumlah dari gemifloxacin diekskresikan dalam urin (Gbr. 1B) berkurang oleh konsentrasi probenesid (Gbr. 1C). NCA. Penambahan probenesid untuk gemifloxacin mengurangi pembersihan ginjal median 13,1-6,49 liter / jam (pengurangan sebesar 51%, P0.01) dan izin nonrenal median 24,2-19,0 liter / jam (pengurangan sebesar 19%, P0.01). Oleh karena itu, jarak total tubuh mengalami penurunan sebesar 31% (P0.01). Terminal median paruh gemifloxacin dalam plasma meningkat 8,09-9,49 jam (22%, P0.01) dengan probenesid.Pemodelan kompartemen.Sebuah model disposisi dua kompartemen dengan jeda waktu dipilih untuk gemifloxacin, dan model satu kompartemen dengan jeda waktu dipilih untuk probenesid. The informasi kriteria Akaike (data tidak ditampilkan) dan cek prediktif visual yang menunjukkan bahwa model 1 memiliki kinerja prediktif terbaik di antara model interaksi diuji (Tabel 2 dan Gambar. 2). Ini menyarankan penghambatan kompetitif dari sekresi tubular ginjal dari gemifloxacin oleh probenesid sebagai mekanisme paling mungkin. Tabel 3 berisi daftar parameter farmakokinetik rata-rata gemifloxacin untuk model 1.Setelah kami menyumbang perbedaan dalam berat molekul, afinitas gemifloxacin ke transporter tubulus ginjal was10 kali lipat lebih tinggi dari probenesid. Sejak probenesid mencapai area 200 kali lipat lebih tinggi-bawah molar kurva konsentrasi-waktu 0-24 jam dibanding probenesid (Gambar 1), probenesid menghambat sekresi gemifloxacin di transporter ginjal simulasi Monte Carlo menyarankan bahwa daerah gemifloxacin bawah kurva konsentrasi-waktu (0 sampai 24 jam) meningkat sebesar 20% (median) saat gemifloxacin diberikan bersama-sama dengan dosis klinis yang relevan dari probenesid (500 mg twicedaily).PEMBAHASANThe interaksi dengan probenesid telah dipelajari untuk waktu yang lama dan bagi banyak kuinolon dan beta-laktam. Luasnya interaksi dengan probenesid mungkin mencapai signifikansi klinis untuk obat yang menampilkan sekresi tubular aktif (12, 21, 33). Mengurangi pembersihan ginjal dengan probenesid telah dilaporkan selama beberapa kuinolon, misalnya, norfloksasin (25), fleroxacin (23), enoxacin (35), ciprofloxacin (14), levofloxacin (10, 11), dan gatifloksasin (21). Moksifloksasin dan sparfloxacin tidak terpengaruh oleh probenesid (24, 28).Dalam sebagian besar studi, interaksi dengan probenesid dipelajari di situs ginjal. Kurang yang diketahui tentang interaksi dari probenesid dengan obat-obatan di situs lain dalam tubuh. Probenesid berinteraksi dengan kedua OAT dan OCTs yang terlibat dalam sekresi ginjal aktif dari molekul obat (13), dan mereka telah ditemukan pada berbagai situs lain dalam tubuh (20, 26).Baru-baru ini, probenesid ditunjukkan untuk mempengaruhi proses transpor aktif di penghalang darah-otak (6). Pentingnya transporter narkoba dalam hepatosit telah disorot oleh Cummins et al. (8). Melalui pengaruh probenesid pada transporter narkoba di hepatosit atau enterosit, suatu pengaruh probenesid tentang penghapusan nonrenal dan metabolisme obat-obatan tampaknya mungkin. Pada manusia, probenesid mengurangi ginjal mantan cretion parasetamol glukuronat sebesar 79% (15) dan juga meningkatkan biotransformasi carbamazepine (17).The eliminasi ginjal dari gemifloxacin tidak berubah menyumbang selama 20 sampai 40% dari dosis. Sebagian besar dari dosis tersebut tereliminasi melalui rute lainnya, yang menawarkan berbagai kemungkinan untuk sebuah interaksi dengan probenesid di situs nonrenal (s). Sebagai Zwitterion pada pH fisiologis (pKa16.5, pKa28.9), gemifloxacin mungkin bisa berinteraksi dengan kedua OAT dan OCTs (27).Cimetidine, suatu inhibitor dari transportasi ginjal kationik organik, mengurangi klirens ginjal dari gemifloxacin oleh 28% (1).Kami mempelajari interaksi antara gemifloxacin dan probenesid. Pemodelan compartmental dari plasma dan urin profil dari gemifloxacin dan probenesid secara bersamaan menunjukkan bahwa sebuah model dengan interaksi kompetitif di situs ginjal dan interaksi statis di situs nonrenal memiliki kinerja prediktif terbaik dari model-model diuji. Sebagai luasnya penghambatan di situs nonrenal adalah jauh lebih kecil daripada di situs ginjal, suatu mekanisme tertentu tidak dapat diidentifikasi untuk interaksi nonrenal. Oleh karena itu, model akhir kami memiliki interaksi kompetitif di situs ginjal dan interaksi yang statis di situs nonrenal. Juga, dari sudut pandang fisiologis, sebuah mekanisme kompetitif tampaknya yang paling masuk akal, karena menggambarkan suatu situasi di mana gemifloxacin dan probenesid bersaing untuk situs aktif yang sama dari transporter tubular ginjal. Itu baru-baru menunjukkan bahwa informasi tentang proses transportasi ginjal dari kuinolon adalah penting, misalnya, untuk mengeksplorasi toksisitas potensial akibat pemakaian kuinolon dengan obat lain, seperti metotreksat (32). Sedangkan dari pemodelan kami tidak ada kesimpulan dapat ditarik tentang yang transporter tertentu terlibat dalam interaksi dipelajari, model yang diusulkan di sini dapat memprediksi sejauh mana dari interaksi untuk regimen dosis selain yang dipelajari. Interaksi obat di lokasi sekresi tubular sering dilaporkan, dan model kami dapat dimanfaatkan sebagai dasar untuk model untuk kelompok obat drugsand lainnya.Dalam gambaran terbaru dari kuinolon ginjal literatur transportasi, studi yang dikutip menyarankan keterlibatan dari kedua OAT dan OCTs untuk ciprofloxacin, norfloksasin, ofloksasin, enoxacin, enrofloxacin, fleroxacin, pefloxacin, dan levofloksasin (32). Kedua OAT1 dan OAT3 yang sebelumnya diidentifikasi untuk penyerapan ginjal dari carboxyfluoroquinolones (29, 30, 32). Levo floxacin ditunjukkan untuk menghambat OCT2 (22). Disarankan kuinolon thatzwitterionic seperti ofloxacin, levofloxacin, dan gemifloxacin dapat berinteraksi dengan OAT dan OCTs. VanWert et al. (32) menemukan bahwa ciprofloxacin diangkut dengan OAT3 dan bahwa ciprofloxacin, norfloksasin, ofloksasin, dan gatifloksasin menghambat OAT3. Ciprofloxacin tidak berinteraksi dengan OAT1, sementara probenesid menghambat kedua OAT1 dan OAT3. Dengan tidak adanya informasi tentang transporter spesifik berinteraksi dengan gemifloxacin, tampaknya mungkin bahwa OAT, OCTs, atau keduanya terlibat dalam interaksi antara gemifloxacin dan probenesid. Untuk kuinolon probenesid dan juga beberapa, interaksi telah dilaporkan dengan OAT1, OAT3, dan OCTs.Kami tidak mengetahui adanya laporan dari model berbasis mekanisme interaksi kuinolon dan probenesid pada manusia atau hewan. Seperti kebanyakan kuinolon dieliminasi melalui sekresi tubular, penghambatan kompetitif dari sekresi tubular ginjal bahwa kami temukan untuk gemifloxacin dengan probenesid juga bisa berlaku untuk kuinolon lain.Sebagai kesimpulan, pemodelan menyarankan penghambatan kompetitif dari sekresi tubular ginjal gemifloxacin oleh probenesid.Berdasarkan rasio molar, afinitas untuk transporter ginjal adalah 10 kali lipat lebih tinggi untuk gemifloxacin daripada probenesid, namun probenesid menghambat sekresi gemifloxacin karena probenesid mencapai 200 daerah rata-kali lebih tinggi di bawahmolar kurva konsentrasi-waktu 0-24 jam dibanding gemifloxacin. Studi mekanistik Masa Depan untuk kuinolon lainnya diminta untuk lebih mengeksplorasi mekanisme ini dari interaksi.