preparat irisan-metode parafin
TRANSCRIPT
Kelompok 1Ardhania PratiwiErma YunitaNur AzizahYunita Putri
PEMBUATAN PREPARAT IRISAN MELALUI METODE
PARAFIN
JURUSAN BIOLOGIFAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS NEGERI MALANG
TUJUAN
1. Membuat preparat irisan melintang batang dengan metode parafin
2. Membuat preparat irisan melintang akar dengan metode parafin
3. Membuat preparat irisan melintang daun dengan metode parafin
4. Membuat preparat irisan bujur meristem apikal batang dengan metode parafin
5. Membuat preparat irisan bujur meristem apikal akar dengan metode parafin
6. Mendeskripsikan ciri khas preparat irisan yang dihasilkan terkait dengan:a. Struktur anatomis spesimenb. Teknis fiksasi dan pewarnaan yang dilakukan
BAHAN
Dikotil : - Akar, batang/cabang, daun tumbuhan Klerek
(Sapindus rarak)Monokotil : - Akar dan batang tumbuhan Jagung (Zea
mays)- Daun tumbuhan Sereh (Cymbophogon
nardus)
ALAT & BAHAN- Pompa Vakum - Neraca - Alkohol abs : Xylol = 2:2- Desikator - Pipet tetes - Alkohol abs : Xylol =
1:3- Oven - Pipet transfer - Xylol- Kulkas - Gelas koplin - Xylol - parafin- Mikrotom - Jarum preparat - Aquades- Mikroskop - Lampu spiritus - Eritrosin- Loupe - Gliserin - Safranin- Nampan pengering - Formalin - Kristal violet- Pisau - Asam asetat - Fast green- Silet - Alkohol 50% - Orange-G- Kaca benda - Alkohol 70% - Minyak Cengkeh- Kaca penutup - Alkohol 85% - Balsam - Beaker glass - Alkohol 95% Kanada/Entelan- Kuas - Alkohol absolut- Gelas ukur - Alkohol abs : Xylol = 3:1
PROSEDUR1. Koleksi Spesimen2. Fiksasi3. Dehidrasi4. Penjernihan5. Infiltrasi6. Pengeblokan7. Pengirisan8. Penempelan9. Pengecatan/Pewarnaan10. Mounting
KOLEKSI SPESIMEN
AKAR, BATANG, DAUN ( bisa dari tanaman pot, pengecambahan, piaraan dalam tempat lembab, kultur jaringan)
Memotong Spesimen
Memasukkannya ke dalam bejana/wadah yang di dalamnya terdapat air untuk mencegah kekeringan/kerusakan sebelum fiksasi
FIKSASI
Mengeluarkan udara dalam jaringan tumbuhan dengan menggunakan pompa vakum
Hasil koleksi spesimen di rendam dalam akuades di dalam pompa vakum
Jika spesimen sudah tenggelam,mengganti akuades di dalam pompa vakum dengan larutan fiksatif misal: FAA selama 24 jam/ tergantung jenis preparat
DEHIDRASI
Mengganti larutan alkohol 50% dengan alkohol 70%(rendam 30 menit/tergantung kebutuhan)
Spesimen dapat disimpan
PENJERNIHAN
Alkohol/Xylol (1: 3) 1 jam
Xylol I, 1 jam
Xylol II, 1 jam
INFILTRASI
PENGEBLOKAN
Parafin pada dasar kotak
Tambah parafin dan atur spesimen
Luncur dan selam blok
PENGIRISAN
Mengatur tebal tipisnya irisan
Memindah hasil irisan dan meletakkan pada kaca benda menggunakan kuas yang basah
PENEMPELAN
Melarutkan 1 gr gelatin dm 100 ml aquades
Memanaskan sampai 30°C smbil diaduk.(Hingga Larut)
Menambahkan 2 gr kristal fenol dan 15 ml gliserin
Menyaring selagi masih panas
Mengoleskan perekat Haupt diatas kaca benda
Meneteskan sedikit formalin 3% diatas perekat Haupt pada kaca benda
Letakkan irisan diatas formalin
Panaskan diatas lampu spiritus
Sisa perekat dan formalin pada kaca benda dihisap menggunakan kertas hisap
Mengeringkan preparat bisa menempatkan di kotak pengering
PEWARNAAN
Irisan temp
el kerin
g
Xylol I (3
menit)
Xylol II (3
menit)Alkohol absolut
(2 menit)
Alkohol 95%
(2 menit)
Alkohol 70%
(2 menit)
Safranin 1% dalam alkohol 50%(2-24 jam)
Air
Kristal violet jenuh dalam aquades(1 menit)
Air
Alkohol absolut (3-4 celup)
Alkohol absolut (3-4 celup)
Fast green 1% dalam Alkohol absolut
(5-10 celup dalam 10 detik)
Orange-G jenuh dalam
Minyak cengkeh (10 detik)
Alkohol absolut : Minyak cengkeh : xylol1 : 1 : 1
Celup+goyang jernih
Xylol I (2-5 menit)
Xylol II (2-5 menit)
MOUNTING
MOUNTING
Tetes balsem kanada/entelan
Hasil pewarnaan
Tutup kaca benda
Simpan di pengeringan
Pemeriksaan Preparat
PREPARAT AWETAN IRISAN
.terima kasih.