penuntun praktikum biokimia (3).docx
TRANSCRIPT
-
7/26/2019 PENUNTUN PRAKTIKUM BIOKIMIA (3).docx
1/3
PENUNTUN PRAKTIKUM BIOKIMIA MODUL RESPIRASI
Dr. Hafiz Soewoto, Sp.Biok.Ked.
1. Uji Oksihemoglobin dn Deoksihemoglobin
T!j!n
Membuktikan hemoglobin dapat mengikat oksigen membentuk oksihemoglobin (HbO 2) dan
dapat terurai kembali menjadi O2dan deoksihemoglobin.
Ds"
Dalam keadaan tereduksi Fe dalam molekul Hb dapat mengikat dan melepaskan oksigen
tergantung pada tekanan O2dan CO2.
Hb(Fe2+
) + O2 Hb(Fe2+
)O2 deoksiHb oksiHb
Untuk mereduksi oksiHb menjadi deoksiHb digunakan larutan pereduksi tokes.
Al# dn Bhn
Al# Bhn dn $e"eksi
!. "abung reaksi !. Darah segar
2. #ak tabung 2. $ereaksi stokes
%. Disposible s&ringe %. 'arutan HOH
. *lumunium oil,. *lkohol s-ab
%" Ke"j &
A. Oksi'b
!. e dalam sebuah tabung reaksi en/erkan 2 ml darah dengan 0 ml air suling. Campur
dengan baik dan perhatikan -arna merah terang dari oksihemoglobin &ang terbentuk.
2. 1agi 2 isi tabung tersebut sehingga masingmasing tabung berisi ml. 3unakan tabung
! sebagai kontrol.
B. Pemben#!kn deoksi'b!. 4si tabung ketiga dengan 2 ml pereaksi tokes dan tambahkan HOH se/ukupn&a
untuk melarutkan endapan &ang segera terbentuk. Campuran ini merupakan larutan
pereduksi &ang kuat.
2. Masukkan beberapa tetes larutan tokes ke dalam tabung 2. "erlihat perubahan -arna
karena terbentukn&a deoksiHb. 1andingkan dengan tabung !.
%. Pemben#!kn kembli oksi'b d"i deoksi'b
!. o/ok kuatkuat tabung &ang bereaksi deoksiHb5 maka akan terjadi kembali
oksigenasi dari udara. $erhatikan dan /atat -arna HbO2&ang kembali terbentuk.
2. Oksigenasi dan deoksigenasi kembali ini dapat dilakukan berulangulang.
PSPD Universitas Palangka Raya Page 2
-
7/26/2019 PENUNTUN PRAKTIKUM BIOKIMIA (3).docx
2/3
'sil
'sil Tb!ng 1
oksi'b
Tb!ng (
deoksi'b
Tb!ng )
"eoksigensi'b
6arna &ang terbentuk
Pembhsn &
Kesim$!ln &
(. Uji !n#!k Me#hemoglobin
T!j!n
Memperlihatkan bila besi dalam molekul hemoglobin dioksidasi menjadi Fe%+5 maka
terbentuk metHb &ang tidak lagi bisa mengikat oksigen.
Ds"
Hb(Fe2+) + %Fe(C)0 Hb (Fe%+) + Fe(C)0
'b oksid#o" Me#'b
MetHb ini tidak dapat lagi mengikat oksigen.
Al# dn Bhn
Al# Bhn dn $e"eksi
!. "abung reaksi !. Darah segar
2. 6ater bath 2. $ereaksi stokes
%. #ak tabung %. $ereaksi %Fe(C)0. Disposible s&ringe
,. *lumunium oil
0. *lkohol s-ab
7. $enjepit tabung%" Ke"j
PSPD Universitas Palangka Raya Page 3
-
7/26/2019 PENUNTUN PRAKTIKUM BIOKIMIA (3).docx
3/3
!. 8n/erkan ! ml darah dengan ml air suling dalam tabung reaksi.
2. e dalam tabung itu tambahkan beberapa tetes %Fe(C)0 %% 9. $erhatikan dan /atat
perubahan -arna &ang terjadi. emudian tambahkkan pereaksi tokes ke dalaam
tabung itu dan ko/ok kuatkuat. $erubahan apakah &ang terlihat:
%. 8n/erkan % ml darah dengan % ml air suling dan panaskan sebentar5 lalu tambahkan
0 m l %Fe(C)0. Campur dengan membalikbalikann&a. $erhatikan gelembunggelembung oksigen &ang terbentuk.
'sil
"abung 6arna "abung !
+ %Fe(C)0$engo/okan kuat
+ tokes
$engo/okan kuat
6arna "abung 2
+ %Fe(C)03elembung udara
Pembhsn &
Kesim$!ln &
PSPD Universitas Palangka Raya Page 4