penjelasan mikroskop

MikroskopMikroskopDrh Azmunir M.Yc,M.ScDrh Azmunir M.Yc,M.ScBagian BiologiBagian BiologiFakultas KedokteranFakultas KedokteranUniversitas Syiah KualaUniversitas Syiah Kuala

MIKROSKOP ADALAHMIKROSKOP ADALAH

Alat yang terdiri dari beberapa Alat yang terdiri dari beberapa macam lensa yang berguna untuk macam lensa yang berguna untuk memperbesar bayangan dari memperbesar bayangan dari benda yg diamati.benda yg diamati.

Suatu alat untuk memperjelas Suatu alat untuk memperjelas benda- benda yang kecil (bakteri, benda- benda yang kecil (bakteri, jamur, sel ).jamur, sel ).

SELAIN DARI LENSASELAIN DARI LENSA

Juga mempunyai bagian-bagian lain Juga mempunyai bagian-bagian lain (komponen) yang keseluruhannya (komponen) yang keseluruhannya saling mempunyai arti dalam meng- saling mempunyai arti dalam menghasilkan bayangan benda.hasilkan bayangan benda.

Seandainya kombinasi bagian-Seandainya kombinasi bagian-bagian tersebut tidak sempurna bagian tersebut tidak sempurna mustahil akan menciptakan mustahil akan menciptakan bayangan yang baik.bayangan yang baik.

BAGIAN-BAGIAN DARI BAGIAN-BAGIAN DARI MIKROSKOP :MIKROSKOP :

A.A. STATIF, yang terdiri dari :STATIF, yang terdiri dari :

1. Kaki : bagian yang sebelah 1. Kaki : bagian yang sebelah bawah, yg fungsinya untuk bawah, yg fungsinya untuk menahan berdirinya mikroskop. menahan berdirinya mikroskop. Bentuknya satu sama lainnya Bentuknya satu sama lainnya berbeda-beda (biasanya ber- berbeda-beda (biasanya berbentuk seperti ladam kuda).bentuk seperti ladam kuda).

LANJUTANLANJUTAN

2. Tiang : bagian mikroskop yang 2. Tiang : bagian mikroskop yang menghubungkan kaki dengan menghubungkan kaki dengan tangkai. Pada tiang ada engsel tangkai. Pada tiang ada engsel yang menautkan tiang dengan yang menautkan tiang dengan kaki, sehingga tangkai mikroskop kaki, sehingga tangkai mikroskop mudah untuk digerak-gerakkan mudah untuk digerak-gerakkan (tergantung dari jenis mikroskop).(tergantung dari jenis mikroskop).

LanjutanLanjutan

3. Tangkai : bagian yang terletak antara 3. Tangkai : bagian yang terletak antara tiang dengan tubus, sebagai tiang dengan tubus, sebagai penghubung kaki dengan tubus.penghubung kaki dengan tubus.

4. Skrup : ada yang kasar (macro meter) 4. Skrup : ada yang kasar (macro meter) dan ada yang halus (micro meter).dan ada yang halus (micro meter).

Macro meter letak dibagian atas dari Macro meter letak dibagian atas dari tungkai (menaikan dan menurunkan). tungkai (menaikan dan menurunkan).

LanjutanLanjutan

Sedangkan micrometer terletak Sedangkan micrometer terletak pada tangkai mikroskop yg juga pada tangkai mikroskop yg juga fungsinya menaikkan dan fungsinya menaikkan dan menurunkan tubus dalam rangka menurunkan tubus dalam rangka memperjelas bayangan dari memperjelas bayangan dari benda yang diamati (gerakan benda yang diamati (gerakan lambat sekali).lambat sekali).

LanjutanLanjutan

5. Meja Benda : tempat meletakkan 5. Meja Benda : tempat meletakkan preparat, meja ini mempunyai preparat, meja ini mempunyai bentuk papan empat segi dan ada bentuk papan empat segi dan ada lobang ditengahnya, yg berfungsi lobang ditengahnya, yg berfungsi untuk menerangi preparat yang untuk menerangi preparat yang akan diamati.akan diamati.

LanjutanLanjutan

6. Skrup Penggerak Preparat : yang 6. Skrup Penggerak Preparat : yang fungsinya untuk menggerakkan fungsinya untuk menggerakkan preparat baik kekanan, kekiri preparat baik kekanan, kekiri atau keatas dan kebawah. atau keatas dan kebawah. Preparat letaknya tepat di atas Preparat letaknya tepat di atas lubang meja benda atau tepat lubang meja benda atau tepat dibawah lensa objektif.dibawah lensa objektif.

LanjutanLanjutan

7. Penjepit Preparat : letaknya pada 7. Penjepit Preparat : letaknya pada meja preparat ada 2 buah meja preparat ada 2 buah (tergantung jenis mikroskop) (tergantung jenis mikroskop) yang berguna untuk menjepit yang berguna untuk menjepit preparat agar mudah waktu preparat agar mudah waktu preparat digerakkan.preparat digerakkan.

LanjutanLanjutan

8. Buluh Teropong : pada bagian atas 8. Buluh Teropong : pada bagian atas ada lensa okuler dengan cara ada lensa okuler dengan cara memasukkan tanpa diputar memasukkan tanpa diputar kedalam buluh teropong. Pada kedalam buluh teropong. Pada bagian bawah terdapat sejumlah bagian bawah terdapat sejumlah lensa objektif yang menghadap ke lensa objektif yang menghadap ke arah preparat. Cara pasang lensa arah preparat. Cara pasang lensa tersebut dg memasukkan ke lobang tersebut dg memasukkan ke lobang pada revolver putar arah jarum jam.pada revolver putar arah jarum jam.

B. ALAT PENERANGANB. ALAT PENERANGAN

1. Cermin : berbentuk lingkaran 1. Cermin : berbentuk lingkaran bulat, dengan permukaan cekung bulat, dengan permukaan cekung dan datar. Berfungsi untuk dan datar. Berfungsi untuk mengembil cahaya dari luar mengembil cahaya dari luar (sumber matahari) atau sumber (sumber matahari) atau sumber lain (lampu). Cermin cekung lain (lampu). Cermin cekung dapat mengambil cahaya lebih dapat mengambil cahaya lebih banyak dari cermin datar.banyak dari cermin datar.

LanjutanLanjutan

2. Diapragma : yang berguna untuk 2. Diapragma : yang berguna untuk mengatur cahaya yang masuk. mengatur cahaya yang masuk. Kalau cahaya yang masuk banyak Kalau cahaya yang masuk banyak atau terang berakibat bayangan atau terang berakibat bayangan benda menjadi silau, jadi aturlah benda menjadi silau, jadi aturlah diapragma sesuai kebutuhan. diapragma sesuai kebutuhan.

LanjutanLanjutan

3. Filter : biasanya dipakai apabila 3. Filter : biasanya dipakai apabila sumber cahaya yang diambil dari sumber cahaya yang diambil dari listrik, hal ini untuk mengatasi listrik, hal ini untuk mengatasi agar cahaya masuk serasi dengan agar cahaya masuk serasi dengan penglihatan kita (pakailah filter penglihatan kita (pakailah filter biru).biru).

LanjutanLanjutan

4. Kondensor : berfungsi untuk 4. Kondensor : berfungsi untuk mengatur cahaya yang masuk mengatur cahaya yang masuk untuk menerangi preparat yang untuk menerangi preparat yang akan diamati. Kondensor dapat akan diamati. Kondensor dapat digerakkan ke atas atau ke bawah, digerakkan ke atas atau ke bawah, bila digerakkan ke atas artinya bila digerakkan ke atas artinya cahaya banyak masuk, kalau ke cahaya banyak masuk, kalau ke bawah artinya cahaya sedikit bawah artinya cahaya sedikit masuk.masuk.

JENIS MIKROSKOPJENIS MIKROSKOP - mikroskop polarisasi, - mikroskop polarisasi, - mikroskop fase - mikroskop fase

kontras, kontras, - mikroskop - mikroskop

interferens, interferens, - mikroskop lapangan - mikroskop lapangan

gelap gelap - mikroskop elektronmikroskop elektron

Mikroskop dengan sumber Mikroskop dengan sumber cahaya terlihatcahaya terlihat

Mikroskop Cahaya (atau Mikroskop Cahaya (atau Optik)Optik)

Mikroskop PolarisasiMikroskop Polarisasi Mikroskop Fase kontras Mikroskop Fase kontras Mikroskop InterferensMikroskop Interferens Mikroskop Lapangan (medan) Mikroskop Lapangan (medan)

GelapGelap Mikroskop ElectronMikroskop Electron

Mikroskop cahayaMikroskop cahaya Pd dasarnya mikroskop cahaya bekerja Pd dasarnya mikroskop cahaya bekerja

sbg suatu alat pembesar dua tingkat. sbg suatu alat pembesar dua tingkat.

Suatu lensa objektif melakukan Suatu lensa objektif melakukan pembesaran awal, dan suatu lensa pembesaran awal, dan suatu lensa okuler ditempatkan sedemikian rupa okuler ditempatkan sedemikian rupa shg memperbesar bayangan pertama shg memperbesar bayangan pertama untuk kedua kalinya.untuk kedua kalinya.

Pembesaran seluruhnya diperoleh dng Pembesaran seluruhnya diperoleh dng mengalikan kekuatan pembesaran mengalikan kekuatan pembesaran lensa objektif dan lensa okuler.lensa objektif dan lensa okuler.

Gambar skematik :mikroskop cahaya yang memperlihatkan komponen-komponen utamanya dan lintasan cahaya dari sumber (substage lamp = lampudi bawah mikroskop) ke mata pengamat.

Gambar suatu lensa benda Gambar suatu lensa benda dng sifat-sifat sbb :dng sifat-sifat sbb :

Pembesaran x 25, Pembesaran x 25, NA = 0,45, planakromatik, NA = 0,45, planakromatik,

dikoreksi untuk panjang dikoreksi untuk panjang tabung 160 mm dan tabung 160 mm dan untuk kaca penutup untuk kaca penutup setebal 0,17 mm.setebal 0,17 mm.

Gambar berkas Gambar berkas cahaya yang cahaya yang memasuki lensa memasuki lensa benda untuk benda untuk memperlihatkan memperlihatkan semiangel semiangel apertura (apertura (µ) dari µ) dari mana dapat mana dapat dihitung apertura dihitung apertura numeriknumerik

BAGIAN-BAGIAN BAGIAN-BAGIAN MIKROSKOP CAHAYAMIKROSKOP CAHAYA

1.1. Tutup OkulerTutup Okuler

2.2. Lensa OkulerLensa Okuler

3.3. Tubus/buluh teropongTubus/buluh teropong

4.4. Macro meterMacro meter

5.5. MicrometerMicrometer

6.6. RevolverRevolver

7.7. Lengan mikroskopLengan mikroskop

LANJUTANLANJUTAN

8. Lensa Objectif8. Lensa Objectif

9. Meja benda9. Meja benda

10. Penjepit preparat10. Penjepit preparat

11. Penggerak preparat11. Penggerak preparat

12. Condensor12. Condensor

13. Micro condensor13. Micro condensor

14. Cermin14. Cermin

15. Kaki15. Kaki

MACAM-MACAM MACAM-MACAM UKURAN OKULERUKURAN OKULER

1.1. Ukuran 5 kaliUkuran 5 kali


3.3. Ukuran 12,5 kaliUkuran 12,5 kali


MACAM-MACAM MACAM-MACAM UKURAN LENSA UKURAN LENSA OBJEKTIFOBJEKTIF1.1. Ukuran 4 kaliUkuran 4 kali





CARA MENCARI CARA MENCARI BAYANGAN BAYANGAN MIKROSKOPMIKROSKOP1.1. Letak lensa objectif harus sejajar Letak lensa objectif harus sejajar

dengan tubus atau tegak lurus dengan tubus atau tegak lurus dengan meja benda.dengan meja benda.

2.2. Letak cermin harus disesuaikanLetak cermin harus disesuaikan

3.3. Diapragma disetel sesuai Diapragma disetel sesuai kebutuhankebutuhan

KEGUNAAN BAGIAN2 KEGUNAAN BAGIAN2 MIKROSKOPMIKROSKOP

1.1. Macro meter untuk melihat/ Macro meter untuk melihat/ mencari gambar pertama kali mencari gambar pertama kali dengan cara menaikkan dan dengan cara menaikkan dan menurunkan macro metermenurunkan macro meter

2.2. Micro meter untuk melihat Micro meter untuk melihat gambar supaya jelas kelihatan.gambar supaya jelas kelihatan.

3.3. Micro condensor untuk Micro condensor untuk menaikkan/ menurunkan meja menaikkan/ menurunkan meja benda. benda.

LARANGAN PADA LARANGAN PADA PENGGUNAAN PENGGUNAAN MIKROSKOPMIKROSKOP Apabila melihat gambar Apabila melihat gambar

menggunakan pembesaran besar menggunakan pembesaran besar (kuat) atau ukuran lensa objectif (kuat) atau ukuran lensa objectif 40 kali, dilarang memutar/ 40 kali, dilarang memutar/ memainkan macro meter, karena memainkan macro meter, karena berakibat sangan fatalberakibat sangan fatal

TERIMA KASIHTERIMA KASIH

SELAMAT MENCOBA KEBOLEHANNYASELAMAT MENCOBA KEBOLEHANNYA SAMPAI KETEMU DI LABORATORIUMSAMPAI KETEMU DI LABORATORIUM PADA WAKTU DAN KESEMPATAN PADA WAKTU DAN KESEMPATAN

YANG LAIN.YANG LAIN. TIDAK MENGIKUTI PRAKTIKUM TIDAK MENGIKUTI PRAKTIKUM

ARTINYA UJIAN BLOK TIDAK BOLEHARTINYA UJIAN BLOK TIDAK BOLEH IKUT.IKUT.

Fotomikrograf dari lapangan mikroskopik dan pembesaran yang sama (x350) Ttp dng apertura numerik objektif yg berbeda.A NA = 0,22 ; b NA = 1,0 : B memperlihatkan detail yg lebih banyak dan lebih tajam dibanding A

AB

c. Sinusoidal (discontinous) capillariesc. Sinusoidal (discontinous) capillaries

S, sinusoid

Mikroskop fase Mikroskop fase kontraskontras

Mikroskop fase kontrasMikroskop fase kontras Cahaya yg melintasi media dng indeks bias yg berbeda-Cahaya yg melintasi media dng indeks bias yg berbeda-

beda, kecepatannya berkurang dan arahnya berubah.beda, kecepatannya berkurang dan arahnya berubah. Di dlm sel, berbagai organel : Di dlm sel, berbagai organel : - nukleusnukleus - mitokondria- mitokondria - granula sekresi ------ - granula sekresi ------ menunjukkan menunjukkan berbagai indeks bias berbagai indeks bias mengubah sinar yg mengubah sinar yg melintasinya.melintasinya. Membentuk perbedaan fase di antara 2 daerah yg Membentuk perbedaan fase di antara 2 daerah yg

berdekatan -----berdekatan ----- memakai suatu sistem optik khusus memakai suatu sistem optik khusus shg bayangan tsb menjadi dapat dilihat.shg bayangan tsb menjadi dapat dilihat.

Pemeriksaan jaringan segar atau sel hidupPemeriksaan jaringan segar atau sel hidup

Sel-sel deskuamasi Sel-sel deskuamasi dari mukosa mulut, dari mukosa mulut, (Preparat segar (Preparat segar yang tidak yang tidak diwarnai). diwarnai).

Fotomikrograf atas Fotomikrograf atas dibuat dng dibuat dng mikroskop fase mikroskop fase kontras; kontras;

Fotomikrograf Fotomikrograf bawah dibuat dng bawah dibuat dng mikroskop cahaya mikroskop cahaya standar, x 300.standar, x 300.

MIKROSKOP FASE MIKROSKOP FASE KONTRASKONTRAS

Merupakan cara yg menciptakan kontras hanya Merupakan cara yg menciptakan kontras hanya melalui cara optikmelalui cara optik

Indeks refraksi Indeks refraksi suatu ukuran densitas optik suatu suatu ukuran densitas optik suatu objek atau kecepatan penerobosan oleh gelombang objek atau kecepatan penerobosan oleh gelombang cahaya yg melaluinya. cahaya yg melaluinya.

Misalnya:Misalnya: * Udara * Udara indeks refraksi sekitar 1,0, indeks refraksi sekitar 1,0, * Air * Air kira-kira 1,3 kira-kira 1,3 * Kaca * Kaca kira-kira 1,5 kira-kira 1,5 Cahaya merambat Cahaya merambat paling cepat :udara paling cepat :udara lebih lambat : air lebih lambat : air lebih lambat lagi : dalam kacalebih lambat lagi : dalam kaca

Gelombang cahaya yg menempuh jarak yg sama Gelombang cahaya yg menempuh jarak yg sama melalui udara, air, dan kaca tidak akan muncul pada melalui udara, air, dan kaca tidak akan muncul pada saat yg sama; mereka akan muncul diluar fase satu saat yg sama; mereka akan muncul diluar fase satu sama lain. sama lain.

Alat kontras fase terdiri atas lempeng-lempeng optik Alat kontras fase terdiri atas lempeng-lempeng optik yg terletak diatas kondensor dan lensa-lensa yg terletak diatas kondensor dan lensa-lensa objektif, yg mengubah perbedaan-perbedaan fase objektif, yg mengubah perbedaan-perbedaan fase menjadi perbedaan-perbedaan amplitudo.menjadi perbedaan-perbedaan amplitudo.

Singkatnya, perbedaan indeksi refraksi jadi langsung Singkatnya, perbedaan indeksi refraksi jadi langsung terlihat. Objek yg biasanya transparan menjadi terlihat. Objek yg biasanya transparan menjadi terlihat melalui perbedaan-perbedaan kontras.terlihat melalui perbedaan-perbedaan kontras.

Mikroskop fase kontras tidak banyak membantu Mikroskop fase kontras tidak banyak membantu dalam mempelajari sajian-sajian yg difiksasi dan dalam mempelajari sajian-sajian yg difiksasi dan dipulas, karena perbedaan transparansi di situ tidak dipulas, karena perbedaan transparansi di situ tidak penting. Alat ini dipakai terutama untuk mempelajari penting. Alat ini dipakai terutama untuk mempelajari sel-sel hidup dan jaringan-jaringan yg tidak dipulas.sel-sel hidup dan jaringan-jaringan yg tidak dipulas.

Mikroskop Mikroskop polarisasipolarisasi

Mikroskop PolarisasiMikroskop Polarisasi Dikembangkan oleh para ahli mineralogi untuk Dikembangkan oleh para ahli mineralogi untuk

digunakan dlm penelitian bahan-bahan kristal.digunakan dlm penelitian bahan-bahan kristal.

Banyak obyek alam, termasuk kristal dan serat, Banyak obyek alam, termasuk kristal dan serat, menunjukkan suatu sifat optik yg dikenal sbg menunjukkan suatu sifat optik yg dikenal sbg pembias ganda atau pembias ganda atau birefringenbirefringen..

Pd bahan histologi, Pd bahan histologi, birefringen birefringen disebabkan oleh disebabkan oleh cara orientasi partikel-partikel asimetrik, yg cara orientasi partikel-partikel asimetrik, yg terlampau kecil untuk dapat dipisahkan bahkan terlampau kecil untuk dapat dipisahkan bahkan oleh lensa yg terbaik sekalipun. Jadi suatu oleh lensa yg terbaik sekalipun. Jadi suatu pengamatan terhadap pengamatan terhadap birefringenbirefringen memungkinkan memungkinkan penarikan kesimpulan tentang organisasi struktur penarikan kesimpulan tentang organisasi struktur yg tak terlihat dng cara-cara mikroskopi biasa.yg tak terlihat dng cara-cara mikroskopi biasa.

MIKROSKOP MIKROSKOP INTERFERENSINTERFERENS

MIKROSKOP MIKROSKOP INTERFERENSINTERFERENS Seperti halnya mikroskop fase kontras, mikroskop Seperti halnya mikroskop fase kontras, mikroskop

interferens bergantung pd kemampuan suatu interferens bergantung pd kemampuan suatu objek menghambat cahaya. objek menghambat cahaya.

Tetapi berbeda dari mikroskop fase kontras, yg Tetapi berbeda dari mikroskop fase kontras, yg tergantung pada cahaya yg diuraikan oleh sajiantergantung pada cahaya yg diuraikan oleh sajian

Mikroskop interferens mengirimkan dua berkas Mikroskop interferens mengirimkan dua berkas cahaya terpisah melalui sajian. Berkas-berkas ini cahaya terpisah melalui sajian. Berkas-berkas ini kemudian bergabung dalam bidang bayangan. kemudian bergabung dalam bidang bayangan. Setelah penggabungan kembali, perbedaan dalam Setelah penggabungan kembali, perbedaan dalam perlambatan cahaya menghasilkan interferens yg perlambatan cahaya menghasilkan interferens yg dapat dipakai untuk mengukur ketebalan atau dapat dipakai untuk mengukur ketebalan atau indeks refraksi objek yg diamati.indeks refraksi objek yg diamati.

MIKROSKOP LAPANGAN MIKROSKOP LAPANGAN GELAPGELAP

MIKROSKOP LAPANGAN MIKROSKOP LAPANGAN GELAPGELAP Menggunakan cahaya serong yg kuat, yg tidak Menggunakan cahaya serong yg kuat, yg tidak

memasuki lensa objektif.memasuki lensa objektif.

Digunakan suatu kondensor lapangan gelap khusus, yg Digunakan suatu kondensor lapangan gelap khusus, yg pusat lensanya tidak dilalui cahaya. Jadi cahaya sampai pusat lensanya tidak dilalui cahaya. Jadi cahaya sampai pd objek yg akan dilihat dng sudut sedemikian pd objek yg akan dilihat dng sudut sedemikian miringnya sehingga tak ada cahaya yg dapat masuk miringnya sehingga tak ada cahaya yg dapat masuk lensa objektif.lensa objektif.

Jadi lapangan pandang menjadi gelap. Partikel-partikel Jadi lapangan pandang menjadi gelap. Partikel-partikel kecil yg terdapat dlm lapangan pandang akan kecil yg terdapat dlm lapangan pandang akan memantulkan sebagian cahaya ke arah lensa objektif memantulkan sebagian cahaya ke arah lensa objektif dan tampak sebagai bntik-bintik berkilauan.dan tampak sebagai bntik-bintik berkilauan.

Jadi disini dimungkinkan melihat partikel-partikel jauh Jadi disini dimungkinkan melihat partikel-partikel jauh di bawah batas daya pemisah cahaya terang. Peristiwa di bawah batas daya pemisah cahaya terang. Peristiwa ini menyerupai peristiwa “terlihatnya” partikel-partikel ini menyerupai peristiwa “terlihatnya” partikel-partikel debu dlm suatu berkas cahaya matahari yg memasuki debu dlm suatu berkas cahaya matahari yg memasuki ruangan gelap. ruangan gelap.

Pemeriksaan lapangan gelap juga dipakai untuk meneliti Pemeriksaan lapangan gelap juga dipakai untuk meneliti objek-objek transparan kecil seperti kilomikron, yg tidak objek-objek transparan kecil seperti kilomikron, yg tidak terlihat pada cahaya terang.terlihat pada cahaya terang.

Mikroskop dengan cahaya Mikroskop dengan cahaya tak terlihattak terlihat


Mikroskop ultravioletMikroskop ultraviolet

Mikroskop elektronMikroskop elektron


Bayangan dapat dibentuk oleh sinar-sinar Bayangan dapat dibentuk oleh sinar-sinar selain cahaya yg terlihat, selain cahaya yg terlihat,

Dlm hal ini, krn bayangan2/ tak dapat dilihat Dlm hal ini, krn bayangan2/ tak dapat dilihat secara langsung, mereka dibuat dapat dilihat secara langsung, mereka dibuat dapat dilihat dng bantuan suatu film fotografi yg peka.dng bantuan suatu film fotografi yg peka.

Pada umumnya sinar-sinar yg dipakai pd Pada umumnya sinar-sinar yg dipakai pd mikroskop khusus ini semuanya mempunyai mikroskop khusus ini semuanya mempunyai panjang gelombang yg lebih pendek drpd panjang gelombang yg lebih pendek drpd cahaya terlihat, dng demikian memungkinkan cahaya terlihat, dng demikian memungkinkan resolusi yg lebih tinggi.resolusi yg lebih tinggi.

Mikroskop UltravioletMikroskop Ultraviolet Karena lensa-lensa optik biasa hampir tidak dapat Karena lensa-lensa optik biasa hampir tidak dapat

ditembusi sinar ultraviolet, maka dipakai lensa-lensa ditembusi sinar ultraviolet, maka dipakai lensa-lensa kuarts diseluruh sistem lensakuarts diseluruh sistem lensa

Pada dasarnya sistem ini memungkinkan peningkatan Pada dasarnya sistem ini memungkinkan peningkatan resolusi kira-kira dua kali lipat yg terdapat pd resolusi kira-kira dua kali lipat yg terdapat pd mikroskop biasa (0,1 mikron, atau mikrometer,mikroskop biasa (0,1 mikron, atau mikrometer,µm).µm).

Sinar ultraviolet juga digunakan dalam mikroskop Sinar ultraviolet juga digunakan dalam mikroskop fluoresens. Banyak substansi mempunyai sifat fluoresens. Banyak substansi mempunyai sifat memancarkan cahaya terlihat apabila disinar dengan memancarkan cahaya terlihat apabila disinar dengan cahaya tak terlihat. cahaya tak terlihat.

Jika sinar ultraviolet difokuskan pada sajian tersebut, Jika sinar ultraviolet difokuskan pada sajian tersebut, ia berpendar dan fluoresensi yg dipancarkan dapat ia berpendar dan fluoresensi yg dipancarkan dapat diamati. Fluoresensi dapat terjadi secara alami di diamati. Fluoresensi dapat terjadi secara alami di dalam sajian itu atau terjadi disebabkan oleh dalam sajian itu atau terjadi disebabkan oleh pemberian zat warna fluoresen yg terikat pd unsur pemberian zat warna fluoresen yg terikat pd unsur khas tertentu dr sajian.khas tertentu dr sajian.

Mikroskop Mikroskop ElektronElektron

Perbandingan diagram sistem optik suatu mikroskop cahaya dan mikroskop elektron. Untuk memudahkan perbandingan, sistem mikroskop cahaya telah dibalikkan dan diberi tambahan alat pelengkap kamera.

Lintasan berkas Lintasan berkas elektron di dalam elektron di dalam mikroskop elektron. mikroskop elektron. Potongan yg sangat Potongan yg sangat tipis diletakkan tepat tipis diletakkan tepat di atas lensa benda di atas lensa benda elektromagnit. elektromagnit. Bayangan tersebut Bayangan tersebut diproyeksikan pada diproyeksikan pada suatu tabir pendar- suatu tabir pendar- fluor dan diamati fluor dan diamati secara langsung secara langsung atau melalui sistem atau melalui sistem optis dengan optis dengan perbesaran x 10.perbesaran x 10.

Mikroskop elektronMikroskop elektron Mikroskop elektron berfungsi berdasarkan prinsip bahwa:Mikroskop elektron berfungsi berdasarkan prinsip bahwa: * Suatu berkas elektron dpt disimpangkan oleh medan * Suatu berkas elektron dpt disimpangkan oleh medan elektromagnit elektromagnit spt penyimpangan lensa pd sinar di dlm lensa kaca.spt penyimpangan lensa pd sinar di dlm lensa kaca. * Elektron-elektron dihasilkan dng pemanasan suhu tinggi * Elektron-elektron dihasilkan dng pemanasan suhu tinggi

suatu suatu kawat pijar logam (kawat pijar logam (KatodaKatoda) di dlm suatu ruangan hampa.) di dlm suatu ruangan hampa. Elektron yg dipancarkan kmd disampaikan ke suatu perbedaan Elektron yg dipancarkan kmd disampaikan ke suatu perbedaan potensial sebesar kira-kira 60 – 100 kV atau lebih di antara potensial sebesar kira-kira 60 – 100 kV atau lebih di antara katoda dan anodakatoda dan anoda Anoda Anoda berbentuk suatu pelat logam dng sebuah lubang berbentuk suatu pelat logam dng sebuah lubang

kecil di tengahnya. Elektron-elektron dipercepat dr katoda ke kecil di tengahnya. Elektron-elektron dipercepat dr katoda ke anoda.anoda.

Bbrp di antara partikel ini melewati bag. lubang tengah di Bbrp di antara partikel ini melewati bag. lubang tengah di anoda, shg membentuk suatu arus (atau berkas) elektron. anoda, shg membentuk suatu arus (atau berkas) elektron.

Berkas ini disimpangkan oleh lensa elektromagnit dng cara Berkas ini disimpangkan oleh lensa elektromagnit dng cara spt pd mikroskop optikspt pd mikroskop optik

Kondensor memfokuskan berkas elektron pd bidang benda Kondensor memfokuskan berkas elektron pd bidang benda dan lensa benda membentuk suatu bayangan benda .dan lensa benda membentuk suatu bayangan benda .

Bayangan yg diperoleh diperbesar lebih lanjut dng 1 – 2 lensa Bayangan yg diperoleh diperbesar lebih lanjut dng 1 – 2 lensa proyektor, proyektor, akhirnya diproyeksikan ke suatu tabir pendar- akhirnya diproyeksikan ke suatu tabir pendar-fluor atau pelat fotografikfluor atau pelat fotografik

Beberapa aspek yang dapat diperlihatkan oleh suatu organ berbentuk pipa biladipotong. Tanda panah menunjukkan apa yang terlihat di bawah mikroskop dalam tiap bidang pemotongan tertentu.

Gambar mikroskop elektron EM 9 A model ZeissGambar mikroskop elektron EM 9 A model Zeiss

Cell membraneCell membraneA. Intestinal cells; B & C: HypothalamusA. Intestinal cells; B & C: Hypothalamus

• The EM showed, that all cells are

surrounded by a plasma

membrane 6 to 10 nm

Mikroskop elektronMikroskop elektron Mikroskop elektron transmisi (TEM) Mikroskop elektron transmisi (TEM) menggunakan menggunakan

suatu sistem yg pd dasarnya analog dng mikroskop suatu sistem yg pd dasarnya analog dng mikroskop cahaya.cahaya.

Sumber cahaya pd ME Sumber cahaya pd ME suatu berkas elektron suatu berkas elektron berkecepatan tinggi yg dipercepat lagi dlm ruang hampa.berkecepatan tinggi yg dipercepat lagi dlm ruang hampa.

Berkas ini menembus sajian itu dan difokuskan pd suatu Berkas ini menembus sajian itu dan difokuskan pd suatu layar fluoresen atau lempeng fotografi oleh serangkaian layar fluoresen atau lempeng fotografi oleh serangkaian medan-medan elektromagnit atau elektrostatik.medan-medan elektromagnit atau elektrostatik.

Panjang gelombang elektron-elektron ini tergantung pd Panjang gelombang elektron-elektron ini tergantung pd tegangan percepatan yg dipakai secara rutin, panjang tegangan percepatan yg dipakai secara rutin, panjang gelombang elektron kurang lebih 0,05 angstrom (gelombang elektron kurang lebih 0,05 angstrom (Ǻ).Ǻ).

Medan listrik atau medan magnit yg dipergunakan sbg Medan listrik atau medan magnit yg dipergunakan sbg lensa belum sempurna dan tidak mempunyai apertura lensa belum sempurna dan tidak mempunyai apertura numerik dari lensa-lensa optik.numerik dari lensa-lensa optik.

Jadi limit praktis dari resolusi mikroskop elektron Jadi limit praktis dari resolusi mikroskop elektron kira- kira-kira 2 Ǻ (0,2 nm), kira 2 Ǻ (0,2 nm),

Limit biasa untuk sajian biologis adalah kira-kira 3,5 Ǻ Limit biasa untuk sajian biologis adalah kira-kira 3,5 Ǻ (0,35 nm).(0,35 nm).


Memungkinkan pengamatan struktur sel Memungkinkan pengamatan struktur sel dan jaringan yg tidak terlihat dng dan jaringan yg tidak terlihat dng mikroskop cahaya.mikroskop cahaya.

Struktur yg lebih kecil dr suatu Struktur yg lebih kecil dr suatu makrometer sekarang dapat diamati.makrometer sekarang dapat diamati.

Istilah : Struktur halus Istilah : Struktur halus struktur yg struktur yg menunjukkan unsur-unsur struktur yg menunjukkan unsur-unsur struktur yg hanya dapat dilihat dengan mikroskop hanya dapat dilihat dengan mikroskop elektron.elektron.

Istilah Ultrastruktur Istilah Ultrastruktur sebaiknya dihindari sebaiknya dihindari oleh krn berarti “ di luar struktur”oleh krn berarti “ di luar struktur”

Mikroskop elektron Mikroskop elektron skening (SEM)skening (SEM)

Berbeda dng mikroskop elektron transmisi, tidak Berbeda dng mikroskop elektron transmisi, tidak tergantung pd elektron-elektron yg menembus sajian tergantung pd elektron-elektron yg menembus sajian yg diperiksa.yg diperiksa.

Mikroskop ini menembaki permukaan sajian dng berkas Mikroskop ini menembaki permukaan sajian dng berkas elektron yg terfokus secara teliti.elektron yg terfokus secara teliti.

Bila berkas itu mengenai suatu titik pd sajian, elektron-Bila berkas itu mengenai suatu titik pd sajian, elektron-elektron primer yg dibiaskan dan pancaran-pancaran elektron primer yg dibiaskan dan pancaran-pancaran elektron-elektron sekunder, yg berasal dr permukaan, elektron-elektron sekunder, yg berasal dr permukaan, dikumpulkan oleh suatu detektor.dikumpulkan oleh suatu detektor.

Tanda-tanda yg dihasilkan oleh banyak titik Tanda-tanda yg dihasilkan oleh banyak titik dikumpulkan membentuk suatu tabung sinar katode.dikumpulkan membentuk suatu tabung sinar katode.

SEM mempunyai variasi jarak fokus yg besar, mk alat SEM mempunyai variasi jarak fokus yg besar, mk alat ini memungkinkan pengamatan langsung terhadap ini memungkinkan pengamatan langsung terhadap sajian dng permukaan yg mempunyai berbagai sajian dng permukaan yg mempunyai berbagai bangunan dng ketringgian yg berbeda.bangunan dng ketringgian yg berbeda.

Seperti juga pd mikroskop cahaya, TEM dan SEM Seperti juga pd mikroskop cahaya, TEM dan SEM memerlukan teknik khusus untuk mempersiapkan sajian memerlukan teknik khusus untuk mempersiapkan sajian untuk diperiksa.untuk diperiksa.

Mikroskop elektronMikroskop elektron Filamen metal dipanaskan dalam tabung hampa Filamen metal dipanaskan dalam tabung hampa

elektron diperkuat dng potensial elektrik elektron diperkuat dng potensial elektrik Berkas elektron dibiaskan medan elektromagnjt Berkas elektron dibiaskan medan elektromagnjt

(sifat = cahaya)(sifat = cahaya) e = 0,05 Ǻ e = 0,05 Ǻ 100.000 x 100.000 x גג

c = 5500 Ǻc = 5500 Ǻ גג 3 kumparan magnetik ~ lensa : - kondensor3 kumparan magnetik ~ lensa : - kondensor Layar fluoresensi : foto : 1.000.000 xLayar fluoresensi : foto : 1.000.000 x De BroglieDe Broglie

12,212,2= = גג Ǻ Ǻ

√ √ vv

Jadi v = 50.000 volt Jadi v = 50.000 volt 0,05350,0535= = גג Ǻ Ǻ


e = 0,04 Ǻ e = 0,04 Ǻ r = 0,02 Ǻ r = 0,02 Ǻ גג

LL = 4400 Ǻ = 4400 Ǻ r r LL = 2200 Ǻ = 2200 Ǻ גג

= 0,22 µ= 0,22 µ

Mikroskop fluoresensMikroskop fluoresens

Imunositokimia Imunositokimia mrpk cabang histokimia . mrpk cabang histokimia . Pada tingkat mikroskop cahaya, teknik Pada tingkat mikroskop cahaya, teknik

antibodifluoresen antibodifluoresen mrpk metode yg peka untuk mrpk metode yg peka untuk menentukan letak polisakarida atau protein menentukan letak polisakarida atau protein spesifik.spesifik.

Dasar teknik Dasar teknik tubuh bereaksi thdp substansi tubuh bereaksi thdp substansi protein asing, protein asing, antigen, dng menghasilkan antigen, dng menghasilkan substansi spesifik, substansi spesifik, antibodi, yg bersenyawa antibodi, yg bersenyawa dng dan menonaktifkan antigen itu.dng dan menonaktifkan antigen itu.

Molekul2 zat warna fluoresen terikat secara kimia Molekul2 zat warna fluoresen terikat secara kimia pd molekul antibodi dan tempat bereaksinya dng pd molekul antibodi dan tempat bereaksinya dng antigen dpt dilihat dng mikroskop ultraviolet.antigen dpt dilihat dng mikroskop ultraviolet.

Methods of antibody labeling : Direct Methods of antibody labeling : Direct

and indirectand indirect

Direct Direct immunocytochemistryimmunocytochemistry

Cultured neuron from rat Cultured neuron from rat superior cervical ganglion superior cervical ganglion were immuno-stained were immuno-stained with fluorescent-labeled with fluorescent-labeled antibody spesific for the antibody spesific for the insulin receptor.insulin receptor.

Antibody + receptor Antibody + receptor insulininsulin

Indirect Indirect immunochemistry.immunochemistry.

Fluorecent antibodies Fluorecent antibodies were prepared were prepared against primary type against primary type IV collagen, to IV collagen, to demonstrate the demonstrate the presence of presence of continous basal continous basal lamina at the lamina at the interface between interface between malignant clusters of malignant clusters of cells and the cells and the surrounding surrounding connective tissue.connective tissue.

Asam nukleat : Jingga akridinAsam nukleat : Jingga akridinMetode fluoresensi untuk Metode fluoresensi untuk menetapkan DNA & RNAmenetapkan DNA & RNA

DNA DNA

(hijau-(hijau-kuning)kuning)

RNARNA

(merah-(merah-jingga)jingga)

Aparat Golgi : GiemsaAparat Golgi : GiemsaSel plasma (apus sumsum tulang): Sel plasma (apus sumsum tulang): sel ini berfungsi sel ini berfungsi zat menghasilkan antibodi zat menghasilkan antibodi

Sitoplasma RE Sitoplasma RE granulosum granulosum protein (zat protein (zat antibodi)antibodi)

Aparat golgi Aparat golgi (membungkus (membungkus zat antibodi zat antibodi sebelum sebelum disekresikan)disekresikan)

Pars Endocrin Pancreas Pars Endocrin Pancreas (Victoria-blue)(Victoria-blue)

Pars endokrin (Insula pankreatica)

Pars eksokrin

Sel beta (biru)

Granula sekresi : Hematoksilin Granula sekresi : Hematoksilin besibesi Kelenjar Kelenjar pankreaspankreas

Nukleus dari Nukleus dari sel2 sel2 sekresi,kromatisekresi,kromatin tersebarn tersebar

Sel-sel sekresi Sel-sel sekresi berkelompok di berkelompok di saluran kecil di saluran kecil di pusat dan pusat dan granula sekresi granula sekresi (hitam)(hitam)

Gambar A & B sel β pankreas dengan Gambar A & B sel β pankreas dengan pewarnaanantibodi monoclonal anti-insulin, A adalah pewarnaanantibodi monoclonal anti-insulin, A adalah gambar sel β pankreas normal dan B gambaran sel β gambar sel β pankreas normal dan B gambaran sel β pankreas pada hiperglikemia (Portha,pankreas pada hiperglikemia (Portha, 2001),2001),

A B

Gambar C & D sediaan imunofloresen warna merah Gambar C & D sediaan imunofloresen warna merah menunjukkan insulin dan warna hijau menunjukkan menunjukkan insulin dan warna hijau menunjukkan glukagon. glukagon. Gambar C berasal dari pankreas normal dan gambar D Gambar C berasal dari pankreas normal dan gambar D sama berasal dari pankreas tikus Px hiperglikmia sama berasal dari pankreas tikus Px hiperglikmia (Laybutt, 2002).(Laybutt, 2002).

C D

Lain-lainLain-lain

Komponen SelKomponen Sel

1.1. Membran selMembran sel

2.2. SitoplasmaSitoplasma

3.3. NukleusNukleus

Struktur SelStruktur Sel BinatangBinatang HeparHepar

SitoskeletonSitoskeleton

Sel saraf : Pewarna basofilik : Sel saraf : Pewarna basofilik : Cresyl-violetCresyl-violet Reticulum Reticulum endoplasmicum granulosumendoplasmicum granulosum Reticulum Reticulum

endoplasmicuendoplasmicum granulosumm granulosum

Ultrastructure of anterior pituitary cells Ultrastructure of anterior pituitary cells (PAS orange-G hematoxylin)(PAS orange-G hematoxylin)

A, acidophils stain bright yellow; B, basophils stain darkly; C, chromophobes

Enteroendocrine cells Enteroendocrine cells (Immunoperoxidase)(Immunoperoxidase)

Enteroendocrine cells

Bangunan khusus pada Bangunan khusus pada epitheliumepithelium

ApicalApical

LateralLateral

BasalBasal

CiliaCilia

ApicalApical

Gambar 11. Gambar A & B sel β pankreas dengan pewarnaanantibodi monoclonal anti-insulin, A adalah gambar sel β pankreas normal dan B gambaran sel β pankreas pada hiperglikemia (Portha, 2001), gambar C & D sediaan imunofloresen warna merah menunjukkan insulin dan warna hijau menunjukkan glukagon. Gambar C berasal dari pankreas normal dan gambar D sama berasal dari pankreas tikus Px hiperglikmia (Laybutt, 2002).

Gambar mikroskop elektron modern.Gambar mikroskop elektron modern.

Mikroskop Mikroskop fluoresens.fluoresens.

Fotomikrograf sajian biakan jaringan otak janin tikus. Kiri Sel-sel biakan primer memperlihatkan populasi sel heterogen, yg membentuk latar belakang berupa selapis sel-sel gepeng yg kebanyakan berasal dari sel glia (penyokong)

penjelasan mikroskop

Documents