Skrining Fitokimia Daun Sirsak dengan Metode Tabung (Reaksi Warna)

LAPORAN

Praktikum Fitokimia

Pengujian Senyawa Aktif pada Daun Sirsak

OLEH

Imroatus Sholikha 14020

Maria Novita Leka

Wildan Akhya Adim 14037

Yeni Puspika Sari 14038

AKADEMI ANALISIS FARMASI DAN MAKANAN PUTRA INDONESIA MALANG

OKTOBER 2015

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar belakang

Skrining fitokimia atau penapisan kimia adalah tahapan awal untuk mengidentifikasi kandungan kimia yang terkandung dalam tumbuhan, karena pada tahap ini kita bisa mengetahui golongan senyawa kimia yang dikandung tumbuhan yang sedang kita uji/teliti.Metode yang digunakan dalam skrining fitokimia harus memiliki persyaratan :

metodenya sederhana dan cepat peralatan yang digunakan sesedikit mungkin selektif dalam mengidentifikasi senyawa-senyawa tertentu dapat memberikan informasi tambahan mengenai keberadaan senyawa tertentu dalam

kelompok senyawa yang diteliti

Pendekatan  skrining  fitokimia  meliputi  analisis  kualiatif  kandungan  kimia  dalam tumbuhan atau bagian tumbuhan (akar,  batang, daun, bunga,  buah, biji),  terutama kandungan metabolit  sekunder  yang  bioaktif,  yaitu  alkaloid,  antrakinon,  flavonoid, glikosida  jantung, kumarin,  saponin  (steroid  dan  triterpenoid),  tannin  (polifenolat),  minyak  atsiri  (terpenoid), iridoid, dan sebagainya.

Alkaloid adalah senyawa organik yang terdapat di alam bersifat basa atau alkali dan sifat basa ini disebabkan karena adanya atom N (Nitrogen) dalam molekul senyawa tersebut dalam struktur lingkar heterosiklik atau aromatis, dan dalam dosis kecil dapat memberikan efek farmakologis pada manusia dan hewan.

Alkaloid juga adalah suatu golongan senyawa organik yang terbanyak ditemukan di alam. Hampir seluruh senyawa alkaloida berasal dari tumbuh-tumbuhan dan tersebar luas dalam berbagai jenis tumbuhan. Semua alkaloida mengandung paling sedikit satu atom nitrogen.

Hampir semua alkaloida yang ditemukan di alam mempunyai keaktifan biologis tertentu, ada yang sangat beracun tetapi ada pula yang sangat berguna dalam pengobatan. Misalnya kuinin, morfin dan stiknin adalah alkaloida yang terkenal dan mempunyai efek sifiologis dan fisikologis. Alkaloida dapat ditemukan dalam berbagai bagian tumbuhan seperti biji, daun, ranting dan kulit batang. Alkaloida umunya ditemukan dalam kadar yang kecil dan harus dipisahkan dari campuran senyawa yang rumit yang berasal dari jaringan tumbuhan.

Flavonoid merupakan sejenis senyawa fenol terbesar yang ada, senyawa ini terdiri dari lebih dari 15 atom karbon yang sebagian besar bisa ditemukan dalam kandungan tumbuhan.

Flavonoid juga dikenal sebagai vitamin P dan citrin, dan merupakan pigmen yang diproduksi oleh sejumlah tanaman sebagai warna pada bunga yang dihasilkan.

Bagian tanaman yang bertugas untuk memproduksi flavonoid adalah bagian akar yang dibantu oleh rhizobia, bakteri tanah yang bertugas untuk menjaga dan memperbaiki kandungan nitrogen dalam tanah.

1.2 Tujuan1. Untuk mengetahui senyawa aktif yang ada pada daun sirsak2. Untuk mengetahui metode skrining fitokimia

BAB II

DASAR TEORI

2.1 Skrining Fitokimia

Fitokimia atau kimia tumbuhan mempelajari aneka ragam senyawa organik yang

dibentuk dan ditimbun oleh tumbuhan yaitu mengenai struktur kimianya, biosintesisnya,

perubahan serta metabolismenya, penyebarannya secara alamiah serta fungsi biologinya.

Tumbuhan menghasilkan berbagai macam senyawa kimia organik, senyawa kimia ini bisa

berupa metabolit primer maupun metabolit sekunder. Kebanyakan tumbuhan menghasilkan

metabolit sekunder, metabolit sekunder juga dikenal sebagai hasil alamiah metabolisme.

Hasil dari metabolit sekunder lebih kompleks dibandingkan dengan metabolit primer.

Berdasarkan asal biosintetiknya, metabolit sekunder dapat dibagi ke dalam tiga kelompok

besar yakni terpenoid (triterpenoid, steroid, dan saponin) alkaloid dan senyawa-senyawa

fenol (flavonoid dan tanin) (Simbala, 2009). Skrining Fitokimia adalah metode analisis

kualitatif untuk menentukan jenis metabolit sekunder yang terdapat pada tumbuhan.

2.2 Daun Sirsak

Kerajaan : Plantae

Ordo : Magnoliales

Famili : Annonaceae

Spesies : A. Muricata

Nama Binomial : Annona muricata

Tanaman sirsak ( A muricata) yang dikenal selalu berbuah sepanjang tahun ini awalnya tumbuh secara liar, Kemudian dikembangkan menjadi tanaman pekarangan ( verheij dan coronel, 1997). Tanaman ini memiliki ciri umum sebagai berikut :

Pohon dapat tumbuh hingga ketinggian 5-6 meter. Daun sirsak berbentuk elips, memanjang atau bulat menyempit, bagian ujung daun

meruncing. Panjang daun berkisar antara 6-20 cm dengan lebar daun antara 2- 6 cm. Bagian permukaan daun halus dan mengkilat. Warna daun bagian atas lebih berwarna hijau tua dibandingkan bagian bagian

permukaan bawah daun.

Bunga sirsak tumbuh secara tunggal, dapat tumbuh pada semua bagian batang, cabang, dan ranting.

Panjang bunga antara 4-5 cm dgn tangkai pendek. Bentuk bunga kerucut-segitiga dilengkapi dengan 3 helaian bunga yg sedikit tebal dan

tersusun berlapis. Bagian luar petal memiliki warna kuning kehijauan, tiga petal bagian dalam berwarna

kuning pucat. Buah sirsak berbentuk seperti jantung atau oval. Panjang buah antara 10-30 cm, dengan lebar hingga 15 cm dgn berat buah bisa

mencapai 4,5-6,8 kg (adewole dan caxtyon-martins,2006).

2.3 Kandungan Kimia

Daun sirsak mengandung polifenol, steroid, glikosida jantung, dan minyak atsiri (Prachi etal., 2010; Dzulkarnain dan Wahjoedi, 1996).Selain itu, penelitian yang dilakukan oleh Surbakti (1994) menunjukkan bahwa kandungan kimia dari daun ketiga jenis tumbuhan dari marga Annona (Annona muricata L., Annona reticulata L., dan Annona s quamosa L.) mempunyai golongan kandungan yang sama yaitu alkaloid, flavonoid, senyawa polifenol, dan minyak atsiri. Telah diteliti secara fitokimia bahwa akar sirsak Annona muricata L., Annonaceae) menunjukkan adanya golongan alkaloid, saponin, steroid, dan asetogenin. Hasil kromatografi cair vakum ekstrak etanol dengan n-heksana-etil asetat diperoleh beberapa fraksi yang aktivitas hayatinya tinggi dan fraksi yang aktif diidentifikasi suatu senyawa dari golongan triterpenoid dan asetogenin(Bagus, 1994).

2.4 Metabolit Sekunder

1. Flavonoid

Flavonoid terutama berupa senyawa yang larut dalam air. Flavonoid dapat diekstraksi

dengan menggunakan etanol 70% dan tetap ada dalam lapisan air setelah ekstrak ini dikocok

dengan etanol. Flavonoid berupa senyawa fenol, karena itu warnanya akan berubah jika

ditambah basa atau amonia, sehingga mudah dideteksi pada kromatogram atau dalam larutan

(Harborne 1987).

2. Alkaloid

Alkaloid pada umumnya larut dalam bahan pelarut lipofil, yang garamnya larut dalam

pelarut hidrofil. Alkaloid dalam tumbuhan umumnya terdapat sebagai garam, sehingga dapat

langsung diekstraksi dengan bahan pelarut hidrofil (air, etanol) (Voight,1994).

2.5 Reagent1. Uji Mayer

Hasil positif alkaloid pada uji Mayer ditandai dengan terbentuknya endapan putih. Diperkirakan endapan tersebut adalah kompleks kalium-alkaloid. Pada pembuatan pereaksi Mayer, larutan merkurium(II) klorida ditambah kalium iodida akan bereaksi membentuk endapan merah merkurium(II) iodida. Jika kalium iodida yang ditambahkan berlebih maka akan terbentuk kalium tetraiodomerkurat(II) (Svehla, 1990). Alkaloid mengandung atom nitrogen yang mempunyai pasangan elektron bebas sehingga dapat digunakan untuk membentuk ikatan kovalen koordinat dengan ion logam (McMurry, 2004). Pada uji alkaloid dengan pereaksi Mayer, diperkirakan nitrogen pada alkaloid akan bereaksi dengan ion logam K+ dari kalium tetraiodomerkurat(II) membentuk kompleks kalium-alkaloid yang mengendap.

2. Uji DragendroffAgar ion Bi3+ tetap berada dalam larutan, maka larutan itu ditambah asam sehingga

kesetimbangan akan bergeser ke arah kiri. Selanjutnya ion Bi3+ dari bismut nitrat bereaksi dengan kalium iodida membentuk endapan hitam Bismut(III) iodida yang kemudian melarut

dalam kalium iodida berlebih membentuk kalium tetraiodobismutat (Svehla, 1990). Pada uji alkaloid dengan pereaksi Dragendorff, nitrogen digunakan untuk membentuk ikatan kovalen koordinat dengan K+ yang merupakan ion logam. Reaksi pada uji Dragendorff ditunjukkan pada Gambar 4 (Miroslav, 1971). Untuk menegaskan hasil positif alkaloid yang didapatkan, dilakukan uji Mayer, Wagner dan Dragendorff pada fraksi CHCl3dan fraksi air dari sampel.

3. Uji WagnerHasil positif alkaloid pada uji Wagner ditandai dengan terbentuknya endapan coklat

muda sampai kuning. Diperkirakan endapan tersebut adalah kalium-alkaloid. Pada pembuatan pereaksi Wagner, iodin bereaksi dengan ion I- dari kalium iodida menghasilkan ion I3- yang berwarna coklat. Pada uji Wagner, ion logam K+ akan membentuk ikatan kovalen koordinat dengan nitrogen pada alkaloid membentuk kompleks kalium-alkaloid yang mengendap.

BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Alat dan Bahan

Alat:

1. Tabung reaksi

2. Kertas saring

3. Penangas air

4. Cawan

5. Plat tetes

Bahan:

1. Serbuk daun sirsak

2. Aquades

3. Etanol 96%

3.2 Cara Pembuatan Reagent

1. Pembuatan Reagent Meyer

Dilarutkan 1,358 g merkuri (II) klorida dengan 60 ml akuades (larutan A). Dilarutkan 5 g

kalium iodida dengan 10 ml akuades (larutan B). Dituangkan larutan A ke dalam larutan B,

diencerkan dengan akuades sampai volume larutan menjadi 100 mL

2. Pembuatan Reagent Dragendroff

Ditimbang bismut (III) nitrat sebanyak 0,8 g dan dilarutkan dalam 20 ml asam nitrat pekat.

Pada wadah lain ditimbang sebanyak 27,2 g kalium iodida lalu dilarutkan dalam 50 ml

akuades, kemudian kedua larutan dicampurkan dan didiamkan sampai memisah sempurna.

Larutan yang jernih diambil dan diencerkan dengan akuades sampai 100 mL

3. Pembuatan Reagent Wagner

Larutkan 1,27 gram I2 dan 2 gram KI dalam 20 mL air, kemudian diencerkan dengan

aquades hingga 100 mL.

3.3 Cara Menguji Zat Aktif

1. Alkaloid

Preparasi sampel:

1. Siapkan bahan dan alat

2. Serbuk rimpang jahe dalam tabung reaksi timbang sebanyak 2 gram

3. Dipanaskan dengan aquadest 10 mL menggunakan penangas air mendidih selama 30

menit

4. Larutan yang terjadi kemudian disaring

5. Larutan yang dihasilkan tersebut berwarna kuning sampai merah yang menunjukan

adanya senyawa yang mengandung gugus kromofor (flavonoid, tanin, alkaloid, dan

saponin). Tambahkan 3 tetes KOH maka warna akan menjadi lebih intensif.

Cara Uji

Serbuk sebanyak 2 gram dipanaskan dalam tabung reaksi besar dengan HCl 1 % 10

ml selama 30 menit dalam tangas air mendidih. Suspensi disaring dengan kapas ke dalam

tabung reaksi I dan tabung reaksi II sama banyak. Larutan I dibagi dua sama banyak, lalu

tambahkan 3 tetes pereaksi dragendorff kedalam tabung Ia dan larutan Ib ditambahkan

pereaksi 3 tetes meyer. Terbentuknya endapan dengan kedua pereaksi tersebut berarti

menunjukkan adanya alkaloid. Adanya alkaloid. Adanya alkaloid dari basa tertier atau

kuarterner dapat ditunjukkan dengan penambahan serbuk natrium karbonat sampai pH 8-9.

Kemudian dicampur dengan kloroform 4 ml, diaduk palan-pelan. Setelah kloroform

memisah, diambil dengan pipet dan ditambahkan asam cuka 5% sampai pH 5 diaduk lalu

dipisahkan lapisan ats dengan pipet. 5 tetes pereaksi dragendorff ditambahkan pada lapisan

atas, terbentuknya endapan menunjukkan adanya alkaloid dari basa tertier.

2. Pengujian flavonoid

1 gr serbuk simplisia ditambahkan 50 ml air panas dan didihkan selama 10 menit,

didinginkan, disaring dengan kertas saring, diperoleh filtrat.

Cara ujian:

5 ml filtrat ditambah serbuk Mg, 1 ml HCl pekat, dan 5 ml amilalkohol kemudian

dikocok dengan kuat sampai terbentuk 2 lapisan yaitu lapisan atas berwarna merah yang

merupakan lapisan amilalkohol.

BAB IV

PEMBAHASAN

Menurut hasil praktikum yang dilakukan, pengujian alkaloid dengan menggunakan reagent mayer menghasilkan endapan putih, pengujian dengan reagent dragendroff menghasilkan endapan orange, dan pengujian dengan reagent wagner menghasilkan endapan coklat. Hal tersebut sama dengan literatur yang di ambil dari jurnal Skrining Fitokimia dan Analisis Kromatografi Lapis Tipis Komponen Kimia Buah Labu Siam (Sechium edule Jacq. Swartz.) dalam Ekstrak Etanol.

Untuk pengujian flavonoid diperoleh perubahan warna merah tua, setelah dilakukannya pengujian pemanasan dan diberi larutan HCl pekat, sesuai dengan literatur yang di ambil dari jurnal Skrining Fitokimia dan Analisis Kromatografi Lapis Tipis Komponen Kimia Buah Labu Siam (Sechium edule Jacq. Swartz.) dalam Ekstrak Etanol.

Kesimpulan:

Hasil yang diperoleh dari praktikum, sama dengan hasil yang tertera dalam literatur jurnal Skrining Fitokimia dan Analisis Kromatografi Lapis Tipis Komponen Kimia Buah Labu Siam (Sechium edule Jacq. Swartz.) dalam Ekstrak Etanol.