Laporan PraktikumHari/Tanggal: Rabu, 17 September 2014MikrobiologiWaktu: 11:00 WIBPJP: Ivone Wulandari B. S.Si M.SiAsisten: Ade Setiawan, A.Md. Embun Novita A., A.Md.

PENGENALAN ALAT DAN BAHANKelompok 2Aang Febrizal J3L113020

PROGRAM KEAHLIAN ANALISIS KIMIAPROGRAM DIPLOMA INSTITUT PERTANIAN BOGORBOGOR2014

A. Pendahuluan1. Latar BelakangLaboratorium, seperti layaknya tempat bekerja harus dapat memberikan kenyamanan, kesehatan dan keamanan kepada semua orang yang bekerja didalamnya, termasuk pengelola laboratorium itu sendiri. Untuk itu, perlu studi kelayakan mengenai perencanaan dalam merancang laboratorium kimia yang meliputi adanya prosedur pengoperasian baku yang memerhatikan kesehatan dan keselamatan kerja ( K3 ) dilaboratorium, adanya ventilasi dan perlengkapan pelindung yang berfungsi baik, adanya penataan dan pengelolaan bahan kimia dan peralatan laboratorium, serta adanya prosedur pengolahan limbah laboratorium (Day & Underwood 1998).Sebelum melakukan praktikum, terlebih dahulu kita harus mengenal atau mengetahui tentang alat-alat yang digunakan dalam melakukan praktikum tersebut. Hal ini berguna untuk mempermudah kita dalam melaksanakan percobaan, sehingga resiko kecelakaan di laboratorium dapat ditanggulangi. Kebersihan dan kesempurnaan alat sangat penting untuk bekerja di laboratorium. Alat yang kelihatan secara kasat mata, belum tentu bersih, tergantung pada pemahaman seorang analis mengenai apa artinya bersih. Alat kaca seperti gelas piala atau erlenmeyer paling baik dibersihkan dengan sabun atau deterjen sintetik. Pipet, buret, dan labu volumetrik mungkin memerlukan larutan deterjen panas untuk bisa bersih benar (Day & Underwood 1998).2. TujuanPraktikum kali ini bertujuan supaya praktikan mengenal alat-alat laboratorium dan bahan-bahan yang digunakan pada praktikum mikrobiologi umum.

B. Alat dan BahanAlat-alat yang diunakan pada paktikum kali ini yaitu mikroskop cahaya, mikropipet, cawan petri, tabung reaksi, labu erlenmeyer, bunsen, mortal & pestle, beaker glass, gelas ukur, batang l, pinset, jarum ose, kaca preparat, spatula, oven, autoklaf, dan laminar air flow.Bahan-bahan yang digunakan pada praktikum kali ini yait

C. Prosedur/Cara KerjaPraktikum pengenalan alat dan bahan laboratorium mikrobiologi dilakukakan prosedur sebagai berikut, alat dan bahan yang akan dikenalkan dan dijelaskan oleh dosen dan asisten dosen praktikum disiapkan diruang laboratorium. Keseluruhan jumlah praktikan dibagi menjadi 3 kelompok kecil. Setiap kelompok kecil akan dipandu oleh salah satu dosen atau asisiten dosen praktikum. Tiga kelompok kecil tersebut akan bergantian secara bergilir ke tiga tempat alat dan bahan yang dikenalkan dan dijelaskan. Setiap pengenalan dan penjelasan dari dosen atau asisten dosen praktikum dicatat oleh praktikan.D. Data dan Hasil Pengamatan

Tabel 1 Alat-alat laboratorium MikrobiologiNOALATFUNGSIGAMBAR

1Mikroskop CahayaMemperbesar bayangan

2MikropipetMengambil bahan dengan ukuran mikron

3Cawan PetriTempat media dan mikroba

4Tabung ReaksiMeletakkan media

5Labu ErlenmeyerMencampur larutan

6Bunsen spirtusAlat pembakaran

7Mortal & PestleMenghaluskan bahan

8Beaker GlassMengukur volume larutan

9Gelas UkurMengukur volume larutan

10Batang sebar Menyebarkan bakteri

11PinsetPenjepit alat

12Jarum OseMemindahkan mikrobia

NOALATFUNGSIGAMBAR

13SpatulaMengambil media

14OvenSterilisasi pemanasan kering

15AutoklafSterilisasi pemanasan basah

16Laminar Air FlowTempat proses isolasi mikroba

17InkubatorMenginkubasi mikrobia

18Tip Pipet TubeMengambil bakteri 0,01 m

19FreezerPendingin media dan mikroba

20Hot PlatePemanasan

21ShakerMenghomogenkan larutan

22TubeTempat menyimpan bakteri

23Kaca PreparatTempat media pengamatan

Tabel 2 Beberapa Prinsip Alat-alat LaboratiriumNoNama AlatPrinsip

1Mikroskop CahayaLensa objektif melakukan pembesaran awal dan lensa okuler akan memperbesar bayangan pertama untuk kedua kalinya. Pembesaran total adalah hasil kali kekuatan lensa objektif dan lensa okuler. Lensa kondensor memusatkan cahaya dari sumbernya menjadi suatu berkas sinar terang yang akan menyinari objek sehingga memberikan cahaya yang cukup terang untuk mengamati bayangan yang diperbesar tersebut.

2MikropipetPlunger ditekan menggunakan ibu jari dan ketika dilepaskan, maka zat cair akan masuk ke dalam tip. Cairan dikeluarkan dengan cara menekan kembali plunger.

3OvenMenghancurkan lisis mikroba menggunakan udara panas.

4AutoklafUap air panas akan merusak protein mikroba hingga mengalami koagulasi, pada saat itu protein akan mengendap (denaturasi) dan menyebabkan kematian pada mikroba. Saat penggunaan autoklaf penutupan harus benar-benar rapat agar uap air yang bertekanan tinggi masuk ke dalam atau bereduksi ke alat.

5Laminar Air FlowMeniupkan udara steril secara kontinyu melewati tempat keja sehingga bebas dari debu dan spora-spora yanng mungkin jatuh ke dalam media waktu pelaksanaan penanaman. Aliran udara berasal dari udara ruangan yang ditark ke dalam ala melallui filter pertama (pre-filter), yang kemudian ditiupkan keluar melalui filter yang sangat halus yang disebut HEPA (High Efficiency Particulate Air Filter) dengan menggunakan blower.

6InkubatorMenginkubasi dengan menggunakan suhu tertentu dalam keadaan diam.

7FreezerMengawetkan mikroba/medium sesuai pada suhu yang diinginkan.

8Hot PlateMemanaskan (plate) yang terdapat dalam alat ini sehingga mampu memppercepat proses homogenisasi.

9ShakerMotor berputar untuk menggerakkan tuas, dan tuas tersebut dihubungkan dengan poros yang terhubung dengan sebuah plat. Ketika motor berputar, secara otomatis mekanik shaker bis langsung menggerakkan plat tersebut dengan gerakkan jungkat-jungkit.

Tabel 3 Media Pertumbuhan BakteriMEDIAKONSISTENSI MEDIAFUNGSIKOMPOSISI (gr/L)

Nutrient Agar (NA)Padat(Nonslektif)Pertumbuhan mikroorganisme yang tidak slektif (heteretrof)20

Plat Count Agar (PCA)Padat(Nonslektif)Menghitung jumlah koloni bakteri23,5

Potato Dextrose Agar (PDA)Padat(Slektif)Mengembangbiakkan jamur dan kapang39

Eosin Methylene Blue (EMBA)Padat(Slektif)Mendeteksi ada atau tidaknya Choliform37

Skim Milk Agar (SMA)Padat(Slektif)Mendeteksi adanya enzim Protease

Salmonella Shigella Agar (SSA)Padat(Slektif)Mendeteksi adnya Salmonella dan Shigella60

Oksidative Fermentative (OF)Semi PadatKemampuan memecah karbohidrat dalam suasana aerobik/anaerobik9,4

Sulfida Indol Motility (SIM)Semi PadatKemampuan membentuk indol, sulfida dan motilitas30

Nutrient Broth (NB)Cair(Nonslektif)Pertumbuhan mikroorganisme yang tidak slektif (heteretrof)8

Lactose Borth (LB)Cair(Slektif)Mendeteksi adanya laktosa13

E. PembahasanPraktikum pengenalan alat dan bahan yang digunakan pada praktikum mikrobiologi, banyak mengenalkan alat-alat gelas dan beberapa alat lainnya seperti pada data diatas. Alat-alat gelas yang digunakan yaitu cawan petri, tabung reaksi, labu erlenmeyer, bunsen spirtus, beaker glass, gelas ukur, batang sebar, jarum ose, dan kaca preparat. Bahan gelas banyak dipakai dalam laboratorium mikrobiologi, dikarenakan adanya beberapa keunggulan. Keunggulannya adalah bahan baku gelas tahan terhadap reaksi kimia, tahan terhadap perubahan temperatur yang mendadak misalnya dalam proses sterilisasi menggunakan autoclave, memiliki koefisien muai yang kecil dan memiliki daya tembus cahaya yang besar, serta sangat memudahkan dalam pengukuran suatu larutan, larutan yang dituangkan dalam alat gelas akan membentuk miniskus, sehingga keakuratan pengukuran lebih teliti. Disamping memiliki keunggulan tersebut, alat-alat gelas juga memiliki beberapa kelemahan. Kelemahan alat gelas yaitu mudah pecah terhadap tekanan mekanik, mudah tumbuh jamur sehingga mengganggu daya tembus cahaya dan mudah tergores. Sekian banyak alat-alat gelas yang digunakan tersebut, memiliki kegunaan atau fungsi yang berbeda-beda. Beberapa alat gelas digunakan sebagai alat ukur volume larutan, tempat media, dan sebagai alat bantu untuk memindahkan bahan. Alat gelas yang berfunsi sebagai alat ukur volume larutan yaitu beaker glass dan gelas ukur. Alat gelas yang berfungsi sebagai tempat media yaitu cawan petri, tabung reaksi, labu erlenmeyer, dan kaca preparat. Sedangkan alat gelas yang diguknakan untuk memindahkan bahan yaitu batang sebar dan jarum ose. Selain alat-alat gelas tersebut, alat-alat lain yang digunakan yaitu mikroskop cahaya, mikropipet, mortal & pestle, pinset, spatula, oven, autoklaf, laminar air flow, inkubator, tip pipet tube, freezer, hot plate, shaker, dan tube. Alat-alat tersebut memiliki fungsi sesuai dengan prinsip kerja yang dimiliknya. Media pertumbuhan mikroorganisme memiliki sifat yang berbeda-beda terhadap mikroorganisme yang menempatinya. Ada mikroorganisme yang tumbuh pada suatu media, namun jika di media yang lain mikroorganisme tersebut tidak dapat tumbuh. Sehingga media tersebut ada yang bersifat slektif dan non slektif. Media yang baik adalah media yang kompoisi pembuatannya baik, artinya sesuai dengan komposisi yang seharusnya. Media yang digunakan untuk pertumbuhan mikroroganisme yaitu Nutrient Agar (NA), Plat Count Agar (PCA), Potato Dextrose Agar (PDA), Eosin Methylene Blue (EMBA), Skim Milk Agar (SMA), Salmonella Shigella Agar (SSA), Oksidative Fermentative (OF), Sulfida Indol Motility (SIM), Nutrient Broth (NB), dan Lactose Borth (LB).

F. SimpulanBerdasarkan praktikum mikrobiologi yang telah dilakukan tentang pengenalan alat dan bahan laboratorium, dapat disimpulkan bahwa setiap alat digunakan sesuai fungsi dan prinsipnya masing-masing. Alat-alat yang digunakan memiliki fungsi sebagai tempat bahan atau media , alat ukur volume larutan, alat sterilisasi, alat pemindah bahan, alat pendingin, dan alat pemanas. Bahan yang digunakan berkaitan dengan media untuk menganalisa mikroorganisme dalam bentuk cair, padat, dan semi padat. Media tersebut ada yg slektif dan ada juga yang nonslektif untuk mikroorganisme.

G. Daftar Pustaka

Day, R.A. Jr. and A.L. Underwood. 1998.Kimia Analisis Kuantitatif. R. Soendoro dkk, penerjemah. Jakarta (ID): Erlangga. Terjemahan dari Quantitative Analysis