pengaruh penambahan virgin coconut oil (vco) … · contoh hasil uji statistik uji...

PENGARUH PENAMBAHAN VIRGIN COCONUT OIL(VCO) PADA PERASAN DAGING BUAH MAKUTO DEWO

(Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.)PADA MENCIT PUTIH BETINA :

KAJIAN TERHADAP EFEK ANTI-INFLAMASI

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu SyaratMemperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Ilmu Farmasi

Oleh :

VERA ROSIANA

NIM : 038114066

FAKULTAS FARMASIUNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA2007

ii

PENGARUH PENAMBAHAN VIRGIN COCONUT OIL(VCO) PADA PERASAN DAGING BUAH MAKUTO DEWO

(Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.)PADA MENCIT PUTIH BETINA :

KAJIAN TERHADAP EFEK ANTI-INFLAMASI

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu SyaratMemperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Ilmu Farmasi

Oleh :

VERA ROSIANA

NIM : 038114066

FAKULTAS FARMASIUNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA2007

vii

PRAKATA

Puji syukur kepada Allah Bapa, Putra, dan Roh Kudus atas segala

bimbingan, dukungan, kekuatan, kasih, dan cintanya yang senantiasa dilimpahkan

kepada penulis, sehingga penulis dapat melakukan penelitian dan penyusunan

skripsi yang berjudul ”Pengaruh Penambahan Virgin Coconut Oil (VCO) pada

Perasan Daging Buah Makuto Dewo (Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl) pada

Mencit Putih Betina : Kajian terhadap Efek Anti-Inflamasi” sebagai salah satu

syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) di Fakultas Farmasi

Universitas Sanata Dharma Yogyakarta, dengan baik dan lancar.

Dalam penyusunan skripsi ini, penulis banyak menerima bimbingan,

arahan, dukungan, dan bantuan dari berbagai pihak dalam menghadapi hambatan

dan kesulitan yang ditemui penulis. Dalam kesempatan ini, penulis ingin

mengucapkan terima kasih kepada :

1. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

2. Yosef Wijoyo, M.Si., Apt. selaku dosen pembimbing dan penguji yang telah

memberi banyak bantuan, bimbingan dan arahan selama penelitian dan

penyusunan skripsi ini.

3. dr. Luciana Kuswibawati, M.Kes., yang telah memberikan kesediaannya

sebagai dosen penguji dan memberikan saran, masukan, serta kritik yang

membangun.

viii

4. Drs. Mulyono, Apt. yang telah membantu dalam memberi pengetahuan dan

masukan kepada penulis serta telah memberikan kesediaannya sebagai dosen

penguji.

5. Phebe Hendra, M.Si., Apt. yang telah membantu penulis dalam menyediakan

jurnal-jurnal yang dibutuhkan dalam penyusunan skripsi ini.

6. Mas Heru yang telah menyediakan mencit dan memberi keceriaan selama

penulis melakukan penelitian di laboratorium farmakologi.

7. Mas Parjiman yang telah meyediakan alat dan membantu penulis selama

penulis melakukan penelitian.

8. Mas Kayat yang telah banyak membantu selama penelitian berlangsung.

9. Staff pengajar dan segenap dosen Fakultas Farmasi, Universitas Sanata

Dharma, Yogyakarta.

10. Boboh dan Kung-Kung, segala perjuangan dan kerja keras yang penulis

curahkan dalam skripsi ini merupakan bentuk rasa terima kasih penulis atas

rasa cinta dan sayang yang diberikan.

11. Mama, Papa, dan adikku, Hendra Gunawan yang telah memberikan dukungan

dan kasih yang luar biasa kepada penulis. Penulis sangat bersyukur

mempunyai keluarga yang begitu mencintai penulis.

12. Ii Ayen, Widdy, dan Demas yang telah memberi dukungan kepada penulis

selama penulis menempuh pendidikan di Fakultas Farmasi Universitas Sanata

Dharma.

13. Leonied Yamato, S.Farm., Apt. yang sedang dalam proses meraih gelar

M.Si.nya, kau menjadi sumber inspirasi penulis dalam mencapai masa depan.

ix

14. Ignatius Madya S.P. Putra dan Titus Punto Wibi Kurniawan, teman

seperjuangan penulis dalam penelitian dan penyusunan skripsi ini, terima

kasih atas kerja sama yang diberikan.

15. Keluarga dan orang terdekat Madya dan Punto yang telah memberikan

bantuan dan dukungan.

16. Yulia Ratika Siwi, Lucia Esti Purwandari, Alvian Yoan Diaz, Budiarto,

Agatha Vilma, Hartono, Andreas Sudarto, Maria Rosa, Katarina Ratih, Agnes

Rufina, Lucy Lahrita, Jenny, Robertus Hengky yang telah memberikan

dukungan dan semangat kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.

17. Sahabat terbaik penulis : Lina, Ellen, Ningsih, Thriz, Vonny, Ayu yang telah

membantu penulis menghilangkan rasa jenuh dalam penyusunan skripsi ini,

masa-masa indah bersama kalian di Petung 36 tidak akan terlupakan.

18. Kakak, teman, dan sahabat penulis, Eddy Sugianto, S.Farm. yang telah

memberikan perhatian, dukungan, dan bantuan yang besar kepada penulis.

19. Ferry, Yulius, Afu, Handi, Albert, Mardoni, Vivien, Lavie, Monica, Lia, Ina,

Lian yang secara langsung maupun tidak langsung telah memberi dukungan

kepada penulis. Terima kasih karena penulis telah diberi kesempatan untuk

mengenal kalian.

20. Seluruh mahasiswa Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma angkatan

2003, adik kelas, kakak kelas penulis dan semua pihak yang telah memberikan

kontribusi dan tidak dapat disebutkan satu persatu.

x

Akhir kata, penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak

kekurangan. Penulis selalu membuka diri atas masukkan, saran, dan kritik yang

bersifat membangun demi perbaikan skripsi ini. Penulis berharap skripsi ini

menjadi bagian pengetahuan dan berguna bagi semua.

Yogyakarta, 8 Januari 2007

Penulis

xii

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL

HALAMAN JUDUL …………………………………………………...……

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING …………………………….

HALAMAN PENGESAHAN ……………………………………………….

HALAMAN PERSEMBAHAN ……………………………………………..

PRAKATA …………………………………………………………………..

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ………………...…………………..

DAFTAR ISI ...………………………………………………………………

DAFTAR TABEL ..………………………………………………………….

DAFTAR GAMBAR ….……………………………………...……………..

DAFTAR LAMPIRAN ..…………………………………………………….

INTISARI ………….………………………………………………………..

ABSTRACT ………………………………………………...………………..

BAB. I PENGANTAR .……………………………………………………..

A. Latar Belakang …………………………….………………………...

1. Permasalahan ……………………….……………………….

2. Keaslian Penelitian …………….…………………………….

3. Manfaat Penelitian .…………….…………………………….

B. Tujuan Penelitian ……………….………………………..............

BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA …….………………………………...

A. Virgin Coconut Oil (VCO)) ……………….………………………...

Hal

i

ii

iii

iv

v

vii

xi

xii

xvi

xviii

xx

xxii

xxiii

1

1

3

3

5

5

7

7

xiii

B. Tanaman Makuto Dewo

(Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.)……. ……………………...

1. Morfologi…………………………………………………….....

2. Nama Daerah……………………………………………………

3. Kandungan Kimia……………………………………………….

4. Khasiat…………………………………………………………..

C. Inflamasi ……...……………………………………………………..

1. Definisi ….…………………………………………………...

2. Penyebab …………………………………………………….

3. Respon….…………………………………………….............

4. Tanda-tanda …………………………………………………

5. Mekanisme…………………………………………………...

6. Mediator……………………………………………………..

D. Obat Anti inflamasi ..………………………………………………...

E. Natrium Diklofenak ………………..………………………………..

F. Radikal Bebas dan Antioksidan……………………………………...

G. Flavonoid…… ………………………………………………………

H. Vitamin E….…………………………………………………………

I. Metode Pengujian Daya Anti-Inflamasi……………………………..

1. Uji eritema……………………………………………………

2. Paw edema test……………………………………………….

3. Tes radang selaput dada (pleurisy)…………………………..

4. Tes kantong granuloma………………………………………

8

8

8

9

9

9

9

10

10

11

13

15

20

23

24

27

28

29

29

30

31

31

xiv

J. Landasan Teori………………………………………………………

K. Hipotesis……………………………………………………………...

BAB III. METODOLOGI PENELITIAN ……….…………………………

A. Jenis dan Rancangan Penelitian …………………………………….

B. Metode dan Prinsip Penelitian……………………………………….

C. Variabel dan Definisi Operasional…………………………………..

1. Variabel…….. ….…………………………………………...

2. Definisi Operasional………………………………………...

D. Subyek dan Bahan Penelitian …...…………………………………...

1. Subyek Uji…………………………………………………..

2. Bahan Penelitian…………………………………………….

E. Alat Penelitian ...………...…………………………………………...

F. Tata Cara Penelitian ..………………………………………………..

1. Determinasi tanaman makuto dewo...…...…………………...

2. Pembuatan bahan uji………..…..……………………………

3. Orientasi percobaan….… ……………………………………

4. Perlakuan hewan uji…………………...……………………..

5. Tata cara analisis hasil........................................……………..

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ………….......................………...

A. Hasil Determinasi Buah Makuto Dewo..……………………………

B. Pembuatan Larutan Uji.......................................................................

1. Pembuatan perasan daging buah makuto dewo.....................

32

34

35

35

35

35

35

36

37

37

37

38

38

38

38

40

42

44

45

45

46

46

xv

2. Pembuatan campuran perasan daging buah makuto dewo

dengan VCO..........................................................................

C. Hasil Orientasi Percobaan.................………………………………..

1. Hasil orientasi penetapan selang waktu pemotongan kaki.....

2. Hasil orientasi penetapan dosis natrium diklofenak...............

3. Hasil orientasi penetapan selang waktu pemberian natrium

diklofenak...............................................................................

D. Hasil Perlakuan Pada Hewan Uji ………...……..…………………..

E. Perbandingan Hasil Penelitian dengan Penelitian Lain…….………...

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN …….………………………………

A. Kesimpulan ..…………………………………………………………

B. Saran ...……………………………………………………………….

DAFTAR PUSTAKA ...……………………………………………………..

LAMPIRAN ………...……………………………………………………….

BIOGRAFI …..………………………………………………………………

46

46

47

50

53

57

71

74

74

75

76

81

97

xvi

DAFTAR TABEL

I. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1%

subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan

kaki..……..................................................................................................

II. Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah data bobot udema kaki mencit

akibat injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang

waktu pemotongan kaki……………………….….…………………......

III. Rangkuman hasil uji Scheffe data bobot udema kaki mencit akibat

injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu

pemotongan kaki…………………………………….……..……………

IV. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1%

subplantar setelah pemberian berbagai variasi dosis natrium

diklofenak……………………………………………………………….

V. Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah data bobot udema kaki mencit

akibat injeksi karagenin 1% subplantar setelah pemberian natrium

diklofenak dalam 3 peringkat dosis………………………….………….

VI. Rangkuman hasil uji Scheffe data bobot udema kaki mencit akibat

injeksi karagenin 1% subplantar setelah pemberian natrium diklofenak

dalam 3 peringkat dosis…………………………………………….……

VII. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1%

subplantar setelah pemberian natrium diklofenak dosis efektif pada

rentang waktu tertentu…………………………………………………...

Hal

47

48

49

51

52

53

54

xvii

VIII. Rangkuman hasil uji Anava Satu Arah data bobot udema kaki mencit

akibat injeksi karagenin 1% subplatar setelah pemberian natrium

diklofenak dosis efektif pada rentang waktu tertentu…………………..

IX. Rangkuman hasil uji Scheffe data bobot udema kaki mencit akibat

injeksi karagenin 1% subplantar setelah pemberian natrium diklofenak

dosis efektif pada rentang waktu tertentu..….…………………………..

X. Rata-rata bobot udema telapak kaki mencit akibat karagenin 1%

subplantar pada kelompok kontrol dan perlakuan......….……................

XI. Rata-rata efek anti-inflamasi pada kelompok kontrol dan

perlakuan……………………………...…………………………………

XII. Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah efek anti-inflamasi kelompok

kontrol dan perlakuan……………………………………………………

XIII. Rangkuman hasil uji Scheffe efek anti-inflamasi kelompok kontrol dan

perlakuan………………………………………………………………...

XIV. Potensi relatif VCO dan kombinasi perasan daging buah makuto dewo

dan VCO………………………………………………………………..

XV. Hasil uji efek anti-inflamasi, proteksi nyeri, dan efek hepatoprotektif

pada kelompok perlakuan……………………………………………….

55

56

59

61

63

63

71

72

xviii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1

Gambar 2.

Gambar 3.

Gambar 4.

Gambar 5.

Gambar 6a.

Gambar 6b.

Gambar 7.

Gambar 8

.

Gambar 9.

Gambar 10.

Patogenesis dan tanda suatu peradangan………………………

Skema dari mediator-mediator yang berasal dari asam

arakhidonat dan titik tangkap dari obat anti-inflamasi………..

Klasifikasi obat Anti-Inflamasi Non Steroid (AINS)…………

Mekanisme kerja obat anti-inflamasi.......……………………..

Struktur natrium diklofenak.......................……………………

Kerangka flavonoid..................................……………………..

Sistem penomoran turunan flavonoid …………………………

Struktur kimia vitamin E........…………………………………

Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi

karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu

pemotongan kaki........................................................................


karagenin 1% subplantar setelah pemberian berbagai variasi

dosis natrium diklofenak..............................................………..


karagenin 1% subplantar setelah pemberian natrium

diklofenak dosis efektif pada rentang waktu

tertentu…………………………….……...................................

Hal

13

17

21

22

23

27

27

29

47

51

54

xix

Gambar 11.

Gambar 12.

Gambar 13.

Gambar 14.

Gambar 15.

Gambar 16.

Gambar 17.

Grafik rata-rata bobot udema telapak kaki mencit akibat

karagenin 1% subplantar pada kelompok kontrol dan

perlakuan ……........................………………………. ……….

Grafik rata-rata efek anti-inflamasi pada kelompok kontrol

dan perlakuan..........................................................................…

Mekanisme kemungkinan penangkapan radikal bebas oleh

vitamin E..........................................................................……..

Mekanisme reaksi penangkapan radikal bebas oleh

flavonoid...............................................................................….

Mekanisme resonansi radikal bebas flavonoid……………..….

Mekanisme penggabungan radikal bebas flavonoid…………...

Grafik perbandingan hasil uji efek anti-inflamasi, proteksi

nyeri, dan efek hepatoprotektif pada kelompok perlakuan……

60-

62

67

68

68

69

73

xx

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1.

Lampiran 2.

Lampiran 3.

Lampiran 4.

Lampiran 5.

Lampiran 6.

Lampiran 7.

Lampiran 8.

Lampiran 9.

Lampiran 10.

Lampiran 11.

Lampiran 12.

Foto virgin coconut oil (VCO) merk Vicol produksi CV

Kelapa Mas, Yogyakarta..................…………..………………

Foto buah makuto dewo.........................……………….……..

Foto alat homogenizer merk Yastral BmbH D-7801 Dottingen

tipe: X 1020...........……………………………………………

Surat pengesahan determinasi tanaman makuto dewo………..

Sertifikat analisis diklofenak-Na (BP98)... ……………………

Perhitungan konsentrasi natrium diklofenak.............................

Skema kerja kelompok perlakuan..............................................

Contoh perhitungan % efek anti-inflamasi dan potensi relatif

terhadap natrium diklofenak.......................................................

Data bobot udema kaki mencit pada orientasi selang waktu

pemotongan kaki................................................………………

Data bobot udema kaki mencit pada orientasi dosis efektif

natrium diklofenak….....………………………………………

Data bobot udema kaki mencit pada orientasi selang waktu

pemberian natrium diklofenak................................................…

Data bobot udema kaki mencit kelompok kontrol dan

kelompok perlakuan...........................…………………………

Hal

81

82

83

84

85

86

87

89

90

90

91

92

xxi

Lampiran 13. Contoh hasil uji statistik uji Kolmogorov-Smirnov, uji Anova

Satu Arah, dan uji Scheffe dengan taraf kepercayaan 95% data

kelompok kontrol dan perlakuan beserta cara

intepretasinya................................................………….............. 93

xxii

INTISARI

Telah dilakukan penelitian tentang pengaruh penambahan virgin coconut oil(VCO) pada perasan daging buah makuto dewo (Phaleria macrocarpa (Scheff.)Boerl.) pada mencit putih betina dengan menggunakan model inflamasi akut.Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui efek anti-inflamasi kombinasiperasan daging buah makuto dewo dan VCO dengan perbandingan yangmenunjukkan peningkatan jumlah VCO serta untuk mengetahui keefektifankombinasi tersebut dibandingkan VCO atau perasan daging buah makuto dewo.

Jenis penelitian ini adalah penelitian eksperimental murni rancangan acaklengkap pola searah menggunakan metode induksi udema oleh Langford yangdimodifikasi. Subyek uji adalah mencit putih betina galur Swiss, berumur 2-3bulan dengan berat badan 20-30 gram. Tujuh puluh ekor mencit dikelompokkanmenjadi 10 kelompok. Kelompok I-V merupakan kelompok kontrol, sedangkankelompok VI-X diberi kombinasi VCO dan perasan daging buah makuto dewodengan perbandingan berturut-turut 1:¼, 1: ½, 1:1, 1:2, 1:4. Lima belas menitkemudian diinjeksi subplantar dengan karagenin 1% pada kaki kiri bagianbelakang. Setelah 3 jam hewan uji dikorbankan dan kedua kakinya dipotong padasendi torsocrural, kemudian ditimbang. Data bobot udema dianalisis dengan ujiKolmogorov-Smirnov untuk melihat distribusinya, dilanjutkan analisis varian polasatu arah dan uji Scheffe untuk melihat perbedaan antarkelompok.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa kombinasi VCO dan perasan dagingbuah makuto dewo dengan perbandingan 1:¼, 1: ½, 1:1, 1:2, 1:4 mempunyai efekanti-inflamasi berturut-turut sebesar 18,55%, 24,34%, 25,70%, 26,09%, 42,77%.Penelitian ini juga menunjukkan bahwa VCO memiliki efek anti-inflamasi sebesar35,00% sedangkan perasan daging buah makuto dewo tidak memiliki efek anti-inflamasi. Peningkatan efek anti-inflamasi sebanding dengan penambahan VCOpada perasan daging buah makuto dewo.

Kata kunci : efek anti-inflamasi, virgin coconut oil (VCO), perasan daging buahmakuto dewo (Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl)

xxiii

ABSTRACT

The research on the influence of addition of virgin coconut oil (VCO) intomakuto dewo squeezed (Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.) in white femalesmall mice by using an acute inflammation models had been done. The goal ofthis research is to know about the anti-inflammation effect of the combination ofmakuto dewo squeezed and VCO and also to know its effectiveness compare withpure VCO and pure makuto dewo squeeze.

This research is pure experimental research. The subject of this experimentwas Switzerland white female mice whose age 2-3 months and its weight is 20-30gram. Seventy small mice were divided into ten groups. Group I to group V wereas control group, whereas group VI to group X were given the combination ofmakuto dewo squeeze and VCO with proportion 1: 1/4; 1: ½; 1:1; 1:2; and 1:4.Successively fifteen minutes later, those small mice’s left legs were injected withkaragenin 1%. Then, 3 hours later those small mice were killed and its two legswere cut at torsocrural joint. Data about oedema weight was analyzed withKolmogorov-Smirnov to see its distribution. After that, this research wascontinued with variant analysis of one direction pattern then researcher didScheffe test.

The result of the analysis shows that the combination of makuto dewosqueeze and VCO with proportion 1: 1/4; 1: ½; 1:1; 1:2; and 1:4 has the percentageof anti-inflammation effect was successively 18,55%, 24,34%, 25,70%, 26,09%,42,77%. This research also shows that pure VCO has the percentage of anti-inflammation effect was successively 35,00% and pure makuto dewo squeezedoesn’t have anti-inflammation effect. The raising of anti-inflammation effect isequivalent with addition of VCO into makuto dewo squeeze.

Keyword : anti-inflammation effect, virgin coconut oil (VCO), makuto dewosqueeze

1

BAB I

PENGANTAR

A. Latar Belakang

Virgin Coconut Oil (VCO) atau minyak kelapa murni di tahun 2005 dan

2006 menjadi sangat fenomenal setelah diketahui berbagai khasiatnya yang

menjanjikan. Banyak orang berlomba-lomba mengkonsumsi VCO demi kesehatan

tubuhnya, bahkan orang sehat sekalipun. Virgin coconut oil mengandung asam

lemak jenuh minyak kelapa yang didominasi oleh asam laurat yang merupakan

medium chain trigliceride (MCT) (Sukartin dan Sitanggang, 2005). Asam laurat

inilah yang menjadikan minyak kelapa mampu menambah kesehatan bagi tubuh.

Menurut H. Kono dan dr. A. Nanji, ahli penyakit dalam dari Amerika Serikat,

MCT minyak kelapa akan langsung disalurkan dari saluran cerna menuju hati.

Medium chain trigliceride akan menonaktifkan virus yang ditemuinya. Seperti

yang telah diketahui, salah satu penyebab hepatitis adalah infeksi virus, sehingga

VCO dapat menjadi obat antihepatitis. Minyak kelapa juga mengandung fosfatida,

gums, sterol, dan tokoferol. Tokoferol berfungsi sebagai antioksidan alami dan

mengandung komponen aktif biologis yang secara umum diterima sebagai

aktivitas vitamin E dalam menjaga kekebalan tubuh manusia (Syah, 2005).

Sebagai antioksidan, vitamin E dapat menangkap radikal bebas (radical

scavenging) dan membentuk radikal yang lebih stabil. Mekanisme kerjanya

adalah dengan penghambatan enzim terutama siklooksigenase-2 (COX-2)

2

2

sehingga pembentukan spesies oksigen reaktif yang dapat menyebabkan

kerusakan jaringan dan proses peradangan menjadi terhambat.

Makuto dewo telah banyak diteliti secara ilmiah sebagai tanaman

Indonesia yang memiliki khasiat sebagai obat. Daun dan kulit buah makuto dewo

mengandung alkaloid, saponin, dan flavonoid. Adanya flavonoid dalam makuto

dewo menunjukkan aktivitas antialergi, anti-inflamasi, antivirus, antiproliferasi,

dan antikarsinogenik. Menurut penelitian yang dilakukan oleh Marissa (2006) dan

Puspitasari (2006), ekstrak etanol daging buah makuto dewo terbukti memiliki

daya anti-inflamasi pada mencit putih betina. Adanya flavonoid dalam makuto

dewo diduga dapat memberikan efek anti-inflamasi karena flavonoid merupakan

antioksidan yang dapat menangkap radikal bebas yang merupakan hasil dari

respon zat kimia penginduksi udema.

Inflamasi merupakan salah satu aspek yang harus dipenuhi oleh suatu obat

antihepatitis yang ideal. Menurut Donatus (1992), obat hepatitis yang ideal

seharusnya tidak hanya mempunyai aspek preventif (perlindungan hati dari aneka

hepatotoksin/ hepatoprotektif) tetapi harus pula mempunyai aspek kuratif

(penanggulangan radang/ inflamasi) dan aspek suportif (meningkatkan sistem

imun). Dalam rangka mengembangkan penelitian mengenai kombinasi VCO dan

makuto dewo agar dapat menjadi salah satu alternatif obat hepatitis yang ideal,

maka peneliti ingin menguji efek anti-inflamasinya pada mencit putih betina.

Inflamasi merupakan respon bila sel-sel atau jaringan tubuh mengalami

cedera atau mati. Inflamasi dianggap sebagai sesuatu yang tidak diinginkan,

walaupun peradangan sebenarnya adalah gejala yang menguntungkan (Price and

3

Wilson, 1992). Peran proses inflamasi diantaranya untuk penghancuran

mikroorganisme yang masuk sehingga akan mencegah penyebaran infeksi

(Underwood, 1996). Inflamasi tidak diinginkan karena terjadinya inflamasi

biasanya disertai gejala-gejala yang menimbulkan rasa tidak nyaman yaitu

kemerahan (rubor), panas meningkat (calor), pembengkakan (tumor), nyeri

(dolor), dan gangguan fungsi (functiolaesa). Hal ini menjadi alasan mengapa

inflamasi butuh pengobatan.

1. Permasalahan

Berdasarkan latar belakang yang telah dikemukakan di atas, dirumuskan

permasalahan sebagai berikut ini.

a. Apakah penambahan VCO pada perasan daging buah makuto dewa

mempunyai efek anti-inflamasi yang lebih tinggi daripada VCO atau

perasan daging buah makuto dewo murni ?

b. Berapakah besar penambahan VCO pada perasan daging buah makuto

dewa yang efektif dalam kajian efek anti-inflamasi?

2. Keaslian Penelitian

Penelitian yang menggunakan makuto dewo di Universitas Sanata Dharma

Yogyakarta sudah banyak dilakukan diantaranya:

a. Efek Hepatoprotektif Perasan Buah Makuto Dewo (Phaleria macrocarpa

(Scheff.) Boerl.) pada Mencit Jantan Terinduksi Parasetamol (Sisilia,

2001).

b. Efek Hepatoprotektif Perasan Buah Makuto Dewo (Phaleria macrocarpa

(Scheff.) Boerl.) pada Mencit Jantan Terinduksi CCl4 (Wijayanti, 2002).

4

c. Efek Hepatoprotektif Infusa Daging Buah Makuto Dewo (Phaleria

macrocarpa (Scheff.) Boerl.) pada Mencit Jantan Terinduksi CCl4

(Linawati, 2002).

d. Efek Hepatoprotektif Infusa Simplisia Daging Buah Makuto Dewo

(Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.) pada Mencit Jantan Terinduksi

Parasetamol (Prasetia, 2002).

e. Efek Hepatoprotektif Infusa Simplisia Daging Buah Makuto Dewo


Karbontetraklorida (Harianto, 2003).

f. Efek Hepatoprotektif Ekstrak Etanol Daging Buah Makuto Dewo


CCl4 (Yudanti, 2005).

g. Efek Hepatoprotektif Ekstrak Etanol Daging Buah Makuto Dewo


Parasetamol (Purwandani, 2005).

h. Daya Analgesik Ekstrak Etanol Daging Buah Makuto Dewo (Phaleria

macrocarpa (Scheff.) Boerl.) pada Mencit Betina Terinduksi Kimia

(Anggoro, 2005).

i. Daya Anti-Inflamasi Ekstrak Etanol Daging Buah Makuto Dewo (Phaleria

macrocarpa (Scheff.) Boerl.) pada Mencit Betina Terinduksi Karagenin

(Marissa, 2006).

5

j. Daya Anti-Inflamasi Ekstrak Etanol Daging Buah Makuto Dewo (Phaleria

macrocarpa (Scheff.) Boerl.) pada Mencit Betina Terinduksi Formalin

(Puspitasari, 2006).

Penelitian mengenai efek anti-inflamasi VCO dan penelitian mengenai

efek anti-inflamasi kombinasi VCO dan makuto dewo pada mencit putih betina,

sepanjang pengetahuan penulis belum pernah ada yang melakukan.

3. Manfaat Penelitian

a. Manfaat teoritis

Penelitian ini diharapkan dapat bermanfaat dalam pengembangan ilmu

kefarmasian serta pengetahuan tentang keefektifan penambahan VCO pada

perasan buah makuto dewo sebagai anti-inflamasi.

b. Manfaat praktis

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah mengenai

kebenaran, keefektifan efek anti-inflamasi dari penambahan VCO pada

perasan buah makuto dewo secara khusus untuk penyakit hepatitis.

B. Tujuan Penelitian

1. Tujuan umum

Penelitian ini dilakukan untuk mengembangkan penelitian mengenai

penambahan VCO pada perasan daging buah makuto dewo yang efektif agar

dapat menjadi alternatif obat hepatitis ideal.

6

2. Tujuan khusus

Penelitian ini secara khusus bertujuan untuk mengetahui apakah

penambahan VCO pada perasan daging buah makuto dewo dapat memberikan

efek anti-inflamasi yang lebih baik dibandingkan perasan buah makuto dewo atau

VCO itu sendiri dan untuk mengetahui berapa besar penambahan VCO pada

perasan daging buah makuto dewo yang efektif dalam kajian anti-inflamasi.

7

BAB II

PENELAAHAN PUSTAKA

A. Virgin Coconut Oil (VCO)

Minyak kelapa murni atau Virgin Coconut Oil (VCO) merupakan salah

satu hasil olahan dari buah kelapa (Cocos nucifera) famili Arecaceae (Palmae).

Komponen minyak kelapa terdiri dari asam lemak jenuh (90%) dan minyak tak

jenuh (10%) (Sutarmi dan Rozaline, 2005).

Secara kimiawi, minyak kelapa terbentuk dari rantai karbon, hidrogen, dan

oksigen yang disebut dengan asam lemak. Komponen-komponen asam lemak

tersebut akan membentuk gliserida saat bergabung dengan gliserol. Gliserida yang

umum terdapat pada lemak dan minyak adalah trigliserida atau lipida (Syah,

2005).

Minyak kelapa mengandung fosfatida, gums, sterol, dan tokoferol.

Tokoferol berfungsi sebagai antioksidan alami yang dapat memperpanjang

periode terjadinya proses oksidasi sampai timbulnya bau tengik. Tokoferol juga

mengandung komponen aktif biologis yang secara umum diterima sebagai

aktivitas vitamin E dalam menjaga kekebalan tubuh manusia (Syah, 2005).

Kurang lebih 50% asam lemak pada minyak kelapa adalah asam laurat dan

7% asam kapriat. Kedua asam tersebut merupakan asam lemak jenuh rantai

sedang yang mudah dimetabolisir dan bersifat antimikroba sehingga dapat

meningkatkan imun tubuh (kekebalan tubuh) dan mudah diubah menjadi energi.

Dalam tubuh, asam laurat menjadi monolaurin, sedangkan asam kapriat menjadi

8

monokaprin. Hasil pecahan lemak jenuh rantai sedang jarang disimpan sebagai

lemak dan jarang menumpuk di pembuluh darah. Minyak kelapa memiliki kadar

asam lemak tidak jenuh ganda omega-3 eicosa-penta-einoic acid (EPA) dan

docasa-hexaenoic acid (DHA) yang dapat menurunkan very low density

lipoprotein (VLDL) dan viskositas darah, menghambat tromboksan, serta

mencegah penyumbatan pembuluh darah (Sutarmi dan Rozaline, 2005).

Asam laurat dan asam lemak jenuh berantai pendek yang terkandung

dalam minyak kelapa murni berperan positif dalam proses pembakaran nutrisi

makanan menjadi energi. Fungsi lain dari zat ini, antara lain sebagai antivirus,

antibakteri, dan antiprotozoa (Sutarmi dan Rozaline, 2005)

B. Tanaman Makuto Dewo (Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.)

Makuto dewo termasuk dalam familia Thymelaeaceae dengan nama latin

spesiesnya Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl. (Anonim, 1998; Backer and van

den Brink, 1963).

1. Morfologi

Tanaman makuto dewo merupakan tanaman berupa herba dengan tinggi kira-

kira mencapai 5 meter. Tanaman ini tumbuh di dataran rendah dengan

ketinggian 1000 meter di atas permukaan laut (Anonim, 2000).

2. Nama Daerah

Nama daerahnya adalah Makuto dewo (Jawa), Makuto rojo (Jawa), Makuto

ratu (Jawa), Raja obat (Banten), Simalakama (Jawa), Mahkota dewa

9

(Indonesia) (Ning, 2001) atau Simalakama (Sumatera/ Melayu) (Winarto,

2005).

3. Kandungan Kimia

Zat aktif yang terkandung di dalam daun dan kulit buah antara lain alkaloid,

terpenoid, saponin, dan senyawa resin. Pada daun diketahui terkandung lignan

(polifenol), sedangkan pada kulit buah terkandung zat flavonoid (Winarto,

2005).

4. Khasiat

Pengobatan dengan ramuan makuto dewo diyakini dan telah terbukti

secara turun-temurun dapat menyembuhkan beberapa penyakit seperti kanker,

tumor, diabetes mellitus, hepatitis, jantung, rematik, asam urat tinggi, penyakit

kulit, dan gangguan ginjal (Winarto, 2005).

C. Inflamasi

1. Definisi

Inflamasi atau peradangan merupakan suatu respon protektif normal

terhadap luka jaringan yang disebabkan oleh trauma fisik, zat kimia yang

merusak, atau zat-zat mikrobiologik. Inflamasi adalah usaha tubuh untuk

menginaktivasi atau merusak organisme yang menyerang, menghilangkan zat

iritan, dan mengatur derajat perbaikan jaringan (Mycek, Harvey, and Champe,

1997). Bila sel-sel atau jaringan tubuh mengalami cedera atau mati, selama hospes

tetap hidup ada respon yang menyolok pada jaringan hidup di sekitarnya. Respon

terhadap cedera ini dinamakan peradangan. Yang lebih khusus peradangan adalah

10

reaksi vaskular yang hasilnya merupakan pengiriman cairan, zat-zat terlarut, dan

sel-sel dari sirkulasi darah ke jaringan-jaringan interstitial pada daerah cedera atau

nekrosis (Price and Wilson, 1992).

2. Penyebab

Penyebab utama dari radang akut ialah infeksi mikrobial (bakteri,

virus,dll), agen fisik (trauma, radiasi pengion, panas, dingin, dll), atau kimiawi

(korosif, asam, basa, dll) (Underwood, 1996). Penting untuk diketahui bahwa

inflamasi dan infeksi tidak sinonim. Infeksi disebabkan oleh mikroorganisme dan

menyebabkan inflamasi, tetapi tidak semua inflamasi disebabkan oleh infeksi

(Kee and Hayes, 1996).

3. Respon

Menurut Katzung (2001), inflamasi secara umum dibagi dalam 3 fase,

yakni: inflamasi akut, respon imun, dan inflamasi kronis. Inflamasi akut

merupakan respon awal terhadap cedera jaringan, hal tersebut terjadi melalui

media rilisnya autacoid serta pada umumnya didahului oleh pembentukan respon

imun (Katzung, 2001). Fase ini ditandai dengan adanya vasodilatasi lokal dan

peningkatan permeabilitas kapiler (Vogel, 2002).

Respon imun terjadi bila sejumlah sel yang mampu menimbulkan

kekebalan diaktifkan untuk merespon organisme asing atau substansi antigenik

yang terlepas selama respon terhadap inflamasi akut serta kronis. Akibat dari

respons imun bagi tuan rumah mungkin menguntungkan, seperti bilamana ia

menyebabkan organisme penyerang menjadi difagositosis atau dinetralisir.

Sebaliknya, akibat tersebut juga dapat bersifat merusak bila menjurus kepada

11

inflamasi kronis. Inflamasi kronis melibatkan keluarnya sejumlah mediator yang

tidak menonjol dalam respons akut seperti interferon, platelet-derived growth

factor (PDGF) serta interleukin-1,2,3 (Katzung, 2001). Pada fase ini terjadi

degenerasi jaringan dan fibrosis (Vogel, 2002).

4. Tanda-tanda

Tanda-tanda pokok peradangan adalah:

a. rubor (kemerahan)

Rubor biasanya merupakan hal pertama yang terlihat didaerah yang

mengalami peradangan. Waktu reaksi peradangan mulai timbul, maka arteriol

yang mensuplai darah tersebut melebar akibat adanya pelepasan mediator

kimia yakni histamin (Kee and Hayes, 1996). Dengan demikian lebih banyak

darah mengalir ke dalam mikrosirkulasi lokal. Kapiler yang sebelumnya

kosong atau sebagian saja yang merenggang dengan cepat terisi penuh dengan

darah. Keadaan ini dinamakan hiperemia atau kongesti, menyebabkan warna

merah lokal karena peradangan akut (Price and Wilson, 1992).

b. calor (panas)

Calor terjadi bersamaan dengan kemerahan dari reaksi peradangan akut.

Daerah peradangan pada kulit menjadi lebih panas dari sekelilingnya, sebab

darah yang disalurkan tubuh ke permukaan daerah yang terkena lebih banyak

daripada yang disalurkan ke daerah normal (Price and Wilson, 1992). Panas

juga mungkin dapat disebabkan pirogen yang mengganggu pusat pengatur

panas pada hipotalamus (Kee and Hayes, 1996).

12

c. tumor (pembengkakan)

Pembengkakan ditimbulkan oleh pengiriman cairan dan sel-sel dari sirkulasi

darah ke jaringan-jaringan interstitial. Pada keadaan dini reaksi peradangan

sebagian besar eksudat adalah cair. Kemudian sel-sel darah putih, atau

leukosit meninggalkan aliran darah dan tertimbun sebagai bagian dari eksudat

(Price and Wilson, 1992).

d. dolor (rasa sakit)

Rasa sakit dari reaksi peradangan dapat dihasilkan dengan berbagai cara.

Perubahan pH lokal atau konsentrasi lokal ion-ion tertentu dapat merangsang

ujung-ujung saraf. Hal yang sama, pengeluaran zat kimia tertentu seperti

histamin atau zat bioaktif lainnya dapat merangsang saraf (Price and Wilson,

1992). Menurut Underwood (1996), beberapa mediator kimiawi pada radang

akut termasuk bradikinin, prostaglandin, dan serotonin, diketahui juga dapat

mengakibatkan rasa sakit. Selain itu, pembengkakan jaringan yang meradang

yang mengakibatkan peningkatan tekanan lokal tanpa diragukan lagi dapat

menimbulkan rasa sakit (Price and Wilson, 1992).

e. functio laesa (perubahan fungsi)

Functio laesa yaitu berkurangnya fungsi dari organ yang mengalami

keradangan (Sander, 2003). Hilangnya fungsi disebabkan karena penumpukan

cairan pada tempat cedera jaringan dan karena rasa nyeri, yang mengurangi

mobilitas pada daerah yang terkena (Kee and Hayes, 1996). Gerakan yang

terjadi pada daerah radang, baik yang dilakukan secara sadar ataupun secara

reflek akan mengalami hambatan oleh rasa sakit; pembengkakan yang hebat

13

secara fisik mengakibatkan berkurangnya gerak jaringan (Underwood, 1996).

Dalam gambar 1 digambarkan bagan patogenesis peradangan.

Gambar 1. Patogenesis dan tanda suatu peradangan (Mutschler, 1986)

5. Mekanisme

Respon dari radang akut melalui tiga proses yaitu perubahan diameter

pembuluh darah dengan konsekuensi alirannya, kenaikan permeabilitas vaskuler

dan pembentukan cairan eksudat, serta pembentukan eksudat seluler berupa

emigrasi neutrofil polimorf ke dalam rongga ekstravaskuler (Underwood, 1996).

Segera sesudah masuknya rangsang iritan terdapat konstriksi singkat

arteriola diikuti dilatasi berkepanjangan. Ini menjurus kepada menjadi merahnya

anyaman kapiler dengan darah dan membukanya saluran kapiler yang tak aktif.

Juga terjadi dilatasi venula dan pembuluh limfa sehingga aliran darah bertambah

(Spector and Spector, 1989).

Pembuluh darah secara normal permeabel terhadap air dan solute kecil

namun hanya sedikit permeabel terhadap protein plasma yakni albumin, globulin,

noksius

Kerusakan sel

Pembebasanbahan mediator

Emigrasileukosit

Proliferasisel

eksudasi Perangsanganreseptor nyeri

Gangguansirkulasi lokal

pemerahan panas Pembengkakan

Gangguanfungsi

nyeri

14

dan fibrinogen. Kenyataannya, tekanan onkotiklah yang menahan molekul dengan

melawan tekanan hidrostatik darah. Tekanan onkotik ini membuat air tetap tinggal

didalam pembuluh sedangkan desakan tekanan hidrostatik darah mendorongnya

keluar lewat dinding pembuluh (Spector and Spector, 1989).

Pada radang, terdapat kenaikan hidrostatik yang disebabkan oleh

vasodilatasi dan penurunan tekanan onkotik yang disebabkan bocornya cairan

berkadar protein tinggi keluar endotel (Robbins, Cotran, dan Kumar, 1995). Hal

ini menyebabkan terganggunya keseimbangan sehingga lebih banyak air

meninggalkan darah memasuki jaringan. Yang lebih penting, dinding venula dan

kapiler sekarang kehilangan impermeabilitasnya terhadap protein. Sebagai

akibatnya albumin, globulin, dan fibrinogen tercurah lewat dinding menuju

jaringan. Pembengkakan jaringan ini dikenal sebagai udema dan cairannya sendiri

disebut eksudat. Perubahan dalam sifat dinding pembuluh inilah yang disebut

meningkatnya permeabilitas pembuluh. Bertambahnya permeabilitas pembuluh

dapat disebabkan oleh kerusakan endotel yang langsung mempengaruhi kapiler

dan venula serta oleh aksi mediator kimia (seperti histamin) yang menyebabkan

konstraksi endotel hanya pada venula (Spector and Spector, 1989).

Dalam sirkulasi normal, sel hanya terdapat di bagian tengah aliran dalam

pembuluh darah dan tidak mengalir pada bagian tepi (zona plasmatik) dekat

endotel. Meskipun demikian, hilangnya cairan intravaskuler dan meningkatnya

viskositas plasma disertai lambatnya aliran pada tempat terjadinya radang akut,

memungkinkan neutrofil mengalir ditepi zona plasmatik. Proses ini disebut

marginasi. Neutrofil kemudian menempel pada endotel dan beremigrasi melalui

15

celah diantara sel endotel melintasi lamina basalis untuk sampai ke dinding

pembuluh darah dan menuju ke lokasi radang (Underwood, 1996). Neutrofil

bergerak menuju pusat radang karena pengaruh mediator kimia (prostaglandin,

leukotrien, komplemen-C5a) disebut kemotaksis. Lalu, menggerombol pada pusat

radang atau mengelilingi pusat radang dengan tujuan melokalisir daerah radang

disebut agregasi. Pada akhirnya neutrofil memakan kuman-kuman atau sel mati

dan dicernakan oleh enzim katalitik dari lisosom, disebut fagositosis (Sander,

2003).

Neutrofil merupakan garis pertahanan pertama melawan mikroorganisme

yang masuk. Jika respon inflamatoris akut berjalan terus, maka sel mononuklear

(termasuk limfosit dan monosit) akan muncul pada daerah inflamatoris, setelah ke

luar dari pembuluh darah melalui cara yang sama dengan neutrofil. Monosit

memperbesar pertahanan dengan menambahkan fungsi fagosit ke daerah radang

(Ward, 1993).

6. Mediator

Amina vasoaktif yang paling penting adalah histamin yang mampu

menghasilkan vasodilatasi dan peningkatan permeabilitas vaskuler. Sejumlah

besar histamin disimpan dalam sel mast, sel basofil, dan trombosit. Banyak cedera

fisik menyebabkan degranulasi sel mast dan melepaskan histamin (Price and

Wilson, 1992)

Pada beberapa tahun terakhir ini perhatian dipusatkan pada metabolit asam

arakhidonat sebagai mediator inflamasi yang penting. Bila membran sel

mengalami kerusakan oleh suatu rangsangan kimiawi, fisik, atau mekanis maka

16

enzim fosfolipase diaktifkan untuk mengubah fosfolipida yang terdapat di situ

menjadi asam arakhidonat (Tjay dan Rahardja, 2002). Asam arakhidonat yang

merupakan suatu asam lemak 20-karbon, disimpan atau tersedia dalam bentuk

ester dari struktur fosfolipid di membran sel dari kebanyakan jaringan, tetapi

dapat juga berasal dari ester trigliserida atau ester kolesterol (Wilmana, 1995).

Agar dapat dipergunakan sel membentuk mediator, asam arakhidonat harus

dibebaskan dari membran fosfolipid oleh aktivitas fosfolipase sel. Selama proses

radang, lisosom neutrofil diyakini merupakan sumber fosfolipase yang penting

(Robbins, Cotran, and Kumar, 1995).

Asam arakhidonat dimetabolisme melalui dua alur utama yaitu alur

siklooksigenase (COX) dan alur lipoksigenase. Skema dari mediator-mediator

yang berasal dari asam arakhidonat dapat dilihat pada gambar 2.

17

Gambar 2. Skema dari mediator-mediator yang berasal dari asam arakhidonat dan titiktangkap kerja obat anti-inflamasi (Rang, Dale, Ritter, and Moore, 2003)

Keterangan:OAINS = Obat Anti-Inflamasi Non Steroid; PAF = Platelet Activating Factor; LT = leukotrien

↓ = diubah; = dihambat; = enzim; = obat anti-inflamasi

Fosfolipid

Fosfolipase A2

Glukokortikoid(menginduksi

lipokortin)

Liso-gliseril-fosforilkolin

PAF(vasodilator,

meningkatkanpermeabilitas

vascular,bronkokonstriktor,

kemotaksin)

ˉ

Arakidonat

5-HPETE

LTA4

LTB4

(kemotaksin)

LTC4

LTD4

LTE4

(bronkokonstriktor;meningkatkan

permeabilitas vaskular

Reseptorantagonisleukotrien

(mis,zafirukas,

montelukas)

ˉ

5-Lipoksigenase

Inhibitor 5-Lipoksigenase(mis, zileutin)

ˉ

Siklikendoperoksid

NSAIDs

ˉ

Siklo-oksigenase

TXA2

(trombotik;vasokonstri

ktor)

AntagonisTXA2

ˉPGI2

(vasodilator;hiperalgesik;

menghentikanagregasiplatelet)

PGE2

(vasodilator;hiperalgesik)

PGD2

(menghambatagregasiplatelet;

vasodilator)

PGD2α

(bronkokonstriktor; kontraksimiometrial)

Antagonis PG

ˉ

LipoksinA & B

Glukukortikoidmenghambat

induksi

12-HETE(kemotaksin)

12-Lipoksignase

15-Lipoksigenase

InhibitorTXA2

sinthase

ˉ

PAFantagonis

ˉ

ˉ

18

Enzim siklooksigenase yang terlibat dalam reaksi ini terdiri dari dua

isoenzim, yakni siklooksigenase-1 (COX-1) dan siklooksigenase-2 (COX-2).

Enzim siklooksigenase-1 terdapat di kebanyakan jaringan antara lain di trmbosit,

ginjal, dan saluran cerna (Tjay dan Rahardja, 2002). Enzim ini berperan dalam

memelihara kehidupan sel. Siklooksigenase-1 menghasilkan prostaglandin jenis

PGI2 dan PGE2 serta tromboksan (TXA2) yang dibutuhkan dalam fungsi

homeostasis. Di lambung, enzim ini bertugas mensintesis prostaglandin yang

berfungsi memproteksi mukosa lambung dan regulasi darah. Enzim

siklooksigenase-1 bersifat konstitutif (bersifat pokok, selalu ada) dan cenderung

menjadi homeostasis dalam fungsinya (Katzung, 2001). Enzim siklooksigenase-2

dalam keadaan normal tidak terdapat di jaringan tapi dibentuk selama proses

peradangan oleh sel-sel radang (Tjay dan Rahardja, 2002). Dengan adanya

rangsangan maka kadarnya akan meningkat, terutama pada sel leukosit, sel

monosit, dan sel kondriosit. Enzim ini sangat mudah diinduksi oleh berbagai

mekanisme dan akan menghasilkan PGE2 yang berperan dalam inflamasi, nyeri,

dan demam.

Asam arakhidonat yang dikatalisis oleh siklooksigenase diubah menjadi

endoperoksida dan seterusnya menjadi zat prostaglandin. Peroksida melepaskan

radikal bebas oksigen yang juga memegang peranan timbulnya nyeri.

Prostaglandin yang dibentuk ada tiga kelompok yaitu prostaglandin (PG),

prostasiklin (PGI2), dan tromboksan (TXA2, TXB2). Prostaglandin (PG) dapat

dibentuk oleh semua jaringan. Yang terpenting adalah PGE2 dan PGF2 yang

berdaya vasodilatasi dan meningkatkan permeabilitas dinding pembuluh dan

19

membran sinovial sehingga terjadi radang dan nyeri. Prostasiklin terutama

dibentuk di dinding pembuluh dan berdaya vasodilatasi. Tromboksan khusus di

bentuk dalam trombosit berdaya vasokonstriksi (antara lain di jantung) (Tjay dan

Rahardja, 2002).

Bagian lain dari arakhidonat diubah oleh enzim lipoksigenase menjadi zat

leukotrien (LT). LTB4, LTC4, LTD4, dan LTE4 dibentuk sebagai hasil dari

metabolisme ini. LTC4, LTD4, dan LTE4 terutama dibentuk di eosinofil (Tjay dan

Rahardja, 2002) dan menyebabkan peningkatan permeabilitas vaskuler (Robbins,

Cotran, and Kumar, 1995). LTB4 khusus disintesa di makrofag dan neutrofil

alveolar dan bekerja kemotaksis yaitu menstimulasi migrasi leukosit. Tertarik oleh

leukotrien, leukosit dalam jumlah besar menginvasi daerah peradangan dan

mengaktifkan banyak gejala radang (Tjay dan Rahardja, 2002).

Fosfolipida selain diubah menjadi arakhidonat oleh enzim fosfolipase juga

diubah menjadi lyso-glyseril-fosforilkolin yang kemudian diubah lagi menjadi

Platelet Activating Factor (PAF) (Rang et al., 2003). Platelet Activating Factor

menyebabkan agregasi dan pelepasan trombosit, vasodilatasi, peningkatan

permeabilitas vaskuler, peningkatan adhesi leukosit, dan kemotaksis leukosit

(Robbins, Cotran, and Kumar, 1995).

Sejumlah substansi yang dihasilkan oleh sel memiliki sifat-sifat yang juga

penting dalam peradangan. Dalam daftar ini terdapat metabolit oksigen yang

dihasilkan oleh neutrofil dan makrofag (Price and Wilson, 1992). Radikal bebas

turunan oksigen yang dihasilkan terdiri dari H2O2, superoksida (O2•ˉ), dan radikal

hidroksil (OH*). Radikal oksigen ini menyebabkan kerusakan sel endotel yang

20

akhirnya meningkatkan permeabilitas vaskuler (Robbins, Cotran, and Kumar,

1995).

Jalur lipoksigenase dari arakhidonat menghasilkan leukotrien yang

mempunyai efek kemotaksis yang kuat pada eosinofil, neutrofil, dan makrofag

serta meningkatkan bronkokonstriksi dan perubahan-perubahan dalam

permeabilitas pembuluh darah (Katzung, 2001). Stimulasi membran neutrofil

menghasilkan free radicals derivat oksigen. Anion superoksida dibentuk oleh

reduksi oksigen molekuler yang dapat memacu produksi molekul lain yang reaktif

seperti hidrogen peroksida (H2O2), serta radikal hidroksil (OH*) (Wibowo dan

Gofir, 2001).

D. Obat Anti-inflamasi

Obat anti-inflamasi adalah golongan obat yang memiliki aktivitas

menekan atau mengurangi peradangan. Tujuan utama pengobatan pasien dengan

anti-inflamasi yakni meringankan rasa nyeri, yang sering kali merupakan gejala

awal yang terlihat dan keluhan utama pasien; dan memperlambat atau membatasi

proses perusakan pada jaringan (Katzung, 2001). Berdasarkan mekanisme

kerjanya, obat-obat anti-inflamasi terbagi ke dalam golongan steroid yang

terutama bekerja dengan cara menghambat pelepasan prostaglandin dari sel-sel

sumbernya dan golongan non steroid yang bekerja melalui mekanisme lain seperti

inhibisi siklooksigenase yang berperan pada biosintesis prostaglandin (Anonim,

1991). Golongan kortikosteroid mempunyai efek samping yang lebih berbahaya

pada dosis tinggi dan penggunaan lama (Tjay dan Rahardja, 2002) sehingga obat-

21

obat Anti-Inflamasi Non Steroid (AINS) memegang peran utama dalam

pengobatan radang (Katzung, 2001). Klasifikasi AINS berdasarkan kimiawinya

dapat dilihat pada gambar 3.

AINS

ASAM KARBOKSILAT ASAM ENOLAT

Asam Derivat Asam Derivat Asam Derivat Asam Derivat DerivatAsetat Salisilat Propionat Fenamat Pirazolon Oksikam

Aspirin As. Tiaprofenat As. mefenamat Azapropazon PiroksikamBenorilat Fenbufen Meklofenamat Fenilbutazon TenoksikamDiflunisal Fenoprofen OksifenbutazonSalsalat Flurbiprofen

IbuprofenKetoprofenNaproksen

Derivat Asam Fenilasetat Derivat Asam asetat Inden/indol:

Diklofenak IndometasinFenklofenak Sulindac

Tolmetin

Gambar 3. Klasifikasi obat Anti-Inflamasi Non Steroid (AINS) (Wilmana, 1995)

Cara kerja AINS untuk sebagian besar berdasarkan hambatan sintesis

prostaglandin, dimana kedua jenis siklooksogenase diblokir. Obat AINS ideal

hendaknya hanya menghambat COX-2 (peradangan) dan tidak COX-1

(perlindungan mukosa lambung) (Tjay dan Rahardja, 2002). Berbagai AINS

mungkin memiliki mekanisme kerja tambahan, termasuk hambatan kemotaksis,

penurunan produksi radikal bebas dan superoksida, dll (Katzung, 2001). Spesies

22

oksigen reaktif yang diproduksi neutrofil dan makrofag terlibat dalam kerusakan

jaringan pada beberapa kondisi, dan AINS yang mempunyai efek peredaman

radikal oksigen yang kuat sama baiknya seperti aktivitas inhibisi COX dapat

mengurangi kerusakan jaringan (Rang et al., 2003). Mekanisme kerja obat anti-

inflamasi dapat dilihat pada gambar 4.

Gambar 4. Mekanisme kerja obat anti inflamasi (Wilmana, 1995)

Metabolisme sebagian besar obat AINS berlangsung melalui enzim

CYP450 dalam hati. Sekalipun ekskresi ginjal adalah rute yang paling penting

untuk eliminasi terakhir, hampir semuanya melalui berbagai tingkat ekskresi

empedu dan penyerapan kembali (sirkulasi enterohepatitis) (Katzung, 2001).

Sejumlah efek samping berkaitan dengan penghambatan sintesis

prostaglandin dan terutama terjadi pada lambung, ginjal, dan fungsi trombosit

(Tjay dan Rahardja, 2002). Efek samping yang tidak diinginkan dari AINS pada

Trauma/ luka pada sel

Gangguan pada membran sel

Fosfolipid

Enzim fosfolipaseDihambat kortikosteroid

Asam arakidonat

Hidroperoksid

Leukotrien

enzim lipoksigenase enzim siklooksigenase

EnderoperoksidPGG2/PGH

Tromboksan A2

PGE2, PGF2, PGD2 Prostasiklin

Dihambat olehAINS

23

lambung terutama terjadi karena inhibisi COX-1. Enzim COX-1 bertanggung

jawab untuk sintesis prostaglandin yang berguna untuk menghambat sekresi asam

lambung dan melindungi mukosa lambung (Rang et al., 2003). Obat AINS dapat

menyebabkan gangguan fungsi ginjal karena menghambat prostaglandin yang

berguna untuk memelihara volume darah yang mengalir melalui ginjal (perfusi).

Obat AINS juga menyebabkan agregasi trombosit dikurangi sehingga masa

pendarahan dapat diperpanjang (Tjay dan Rahardja, 2002).

E. Natrium Diklofenak

NH

Cl

ClNaOCCH2

O

Gambar 5. Struktur natrium diklofenak (Hanson, 2000)

Diklofenak adalah penghambat siklooksigenase yang relatif nonselektif,

juga mengurangi bioavailabilitas asam arakhidonat. Obat ini mempunyai sifat-

sifat anti-inflamasi, analgetik, antipiretik yang biasa. Diklofenak cepat diserap

sesudah pemberian secara oral, tetapi bioavailabilitas sistemiknya hanya antara

30-70 % karena metabolisme lintas pertama. Obat ini mempunyai paruh waktu 1-

2 jam (Katzung, 2001). Diklofenak dimetabolisme di hati oleh sitokrom P450 lalu

diekskresikan melalui urin (65 %) dan cairan empedu (35 %) (Hardman, Limbird,

dan Gilman, 2001). Metabolisme berlangsung di dalam hati menjadi metabolit

tidak aktif, jadi disfungsi ginjal tidak mempengaruhi kliren secara nyata. Kliren

empedu bisa mencapai 30% dari kliren total (Katzung, 2001).

24

Efek samping yang terjadi meliputi pendarahan gastrointestinal dan

timbulnya ulserasi lambung (walaupun lebih jarang daripada AINS lain)

(Katzung, 2001). Diklofenak juga dapat menyebabkan gangguan fungsi hati dan

gangguan haid (Tjay dan Rahardja, 2002).

F. Radikal Bebas dan Antioksidan

Radikal bebas dapat didefinisikan sebagai setiap spesies yang mengandung

satu atau lebih elektron tidak berpasangan (Halliwell and Gutteridge, 1999). Suatu

molekul bersifat stabil bila elektronnya berpasangan, tetapi bila tidak berpasangan

(single) molekul tersebut menjadi tidak stabil dan memiliki potensi untuk merusak

(Kurnani, 2001). Radikal bebas kebanyakan berasal dari reaksi redoks biokimiawi

yang melibatkan O2 yang terjadi sebagai bagian dari metabolisme sel normal

namun dapat diinisiasi oleh pemaparan cahaya UV, polutan lingkungan, dan asap

rokok (Diantini dan Safitri, 2001). Radikal bebas terpenting yang terdapat dalam

tubuh adalah radikal derivat oksigen atau sering disebut sebagai Reactive Oxygen

Species (ROS). Radikal-radikal tersebut berada dalam bentuk triplet (3O2), singlet

(1O2), superoksida (O2˙ˉ), radikal hidroksida (OH˙), nitrit oksida (NO˙), dll

(Kurnani, 2001).

Radikal bebas merusak molekul makro pembentuk sel, yaitu protein,

karbohidrat, lemak, dan DNA akibatnya sel menjadi rusak, mati, atau bermutasi.

Peristiwa itu menjadi salah satu penyebab berbagai penyakit degeneratif seperti

kanker dan penuaan sel (Anonim, 2003a). Radikal yang merusak DNA dapat

menyebabkan kerusakan oksidasi low-density lipoprotein (LDL), sehingga

25

mengakibatkan terjadinya aterosklerosis (Setiati, 2003). Namun, radikal bebas

dalam kadar tertentu justru diperlukan untuk pertahanan tubuh. Ketika kuman

masuk ke dalam tubuh, leukosit akan menghancurkan dan memakan kuman

dengan bantuan radikal bebas (Anonim, 2003a). Jadi kunci kerja radikal bebas

yang aman dan efektif dalam tubuh adalah keseimbangan (Cooper, 2001).

Antioksidan adalah senyawa yang dalam kadar lebih rendah dibanding

bahan yang dapat dioksidasi, sangat memperlambat atau menghambat oksidasi

bahan tersebut. Antioksidan dipercaya mempunyai kemampuan memperlambat

proses aterosklerosis karena mampu menghambat proses oksidatif (Sitompul,

2003).

Antioksidan dibedakan menjadi antioksidan endogen dan antioksidan

eksogen. Selain radikal bebas, tubuh pun memproduksi antioksidan endogen yang

dapat meredakan dampak negatif dari reaksi radikal bebas (Anonim, 2004).

Antioksidan yang diproduksi dalam tubuh (endogen) berupa tiga enzim yaitu

superoksid dismutase (SOD), glutation peroksidase (GPX), dan katalase (Cooper,

2001). Contoh cara kerja antioksidan endogen dalam menghilangkan radikal

bebas adalah misalnya jika ada radikal superoksida (O2∙−) maka enzim superoksid

dismutase (SOD) akan mempercepat reaksi dismutasi dari O2∙─ menjadi H2O2

(1). Hidrogen peroksida (H2O2) kemudian dapat dihilangkan dengan 2 tipe enzim.

Katalase secara langsung mengkatalisis dekomposisi H2O2 menjadi O2 (2)

sedangkan enzim glutation peroksidase (GPX) menghilangkan H2O2 dengan

menggunakannya untuk mengoksidasi substrat glutation tereduksi (GSH) (3)

(Halliwell and Gutteridge, 1999).

26

2 O2∙─ + 2 H+ → H2O2 + O2 (1)

2 H2O2 → 2 H2O + O2 (2)

H2O2 + 2 GSH → GSSG + 2 H2O (3)

Tetapi bila produksi radikal bebas terus meningkat sistem pertahanan

antioksidan tubuh tidak akan efektif lagi bekerja sebagai pelindung terhadap

serangan radikal bebas. Dalam keadaan ini akan terjadi apa yang disebut dengan

stress oksidatif atau kerusakan oksidatif. Untuk mencegah terjadinya stress

oksidatif ini, antioksidan dari luar (antioksidan eksogen) sangat diperlukan

(Subarnas, 2001).

Sistem antioksidan endogen diperkuat oleh sistem antioksidan eksogen

yang diperoleh dari makanan (Setiati, 2003). Antioksidan eksogen bekerja dengan

cara menangkap radikal dan mencegah reaksi berantai, misalnya retinol, β-

karoten, vitamin C, α-tokoferol (vitamin E), serta albumin. Antioksidan eksogen

bekerja melalui 3 macam mekanisme, yakni pemotongan rantai propagasi dari

radikal bebas, melalui mekanisme khelasi terhadap metal transisi sehingga efek

prooksidan dari metal dapat dihambat, serta memadamkan pengaruh singlet

oksigen (Setiati, 2003).

G. Flavonoid

Flavonoid mempunyai aktivitas antioksidan sehingga dapat melindungi

tubuh dari kerusakan akibat radikal bebas. Mekanisme kerja antioksidan flavonoid

meliputi: (1) penekanan pembentukan radikal bebas atau spesies oksigen reaktif,

baik dengan cara penghambatan enzim atau pengelatan ion logam yang terlibat

27

dalam produksi radikal bebas; (2) peredaman radikal bebas (Halliwell and

Gutteridge, 1999).

Kandungan senyawa flavonoid di dalam tanaman sangat rendah, yaitu

sekitar 0,25% dan secara umum terikat atau terkonjugasi dengan senyawa gula

membentuk glikosida. Golongan flavonoid dapat digambarkan sebagai deretan

senyawa C6-C3-C6, artinya kerangka karbonnya terdiri atas dua gugus C6 (cincin

benzena tersubstitusi) disambungkan oleh rantai alifatik 3-karbon. Kerangka dasar

flavonoid dan sistem penomoran untuk turunan flavonoid terlihat pada gambar 6.

C C C

O

A

B

8 1

5

7

6

4

3

2

3'

4'

5'6'

1'

2'

1a 1b

Gambar 6. Kerangka flavonoid (6a) dan sistem penomoran turunan flavonoid (6b)(Robinson, 1991)

Beberapa penelitian melaporkan bahwa aktivitas antioksidan flavonoid

ditentukan oleh gugus tertentu dalan struktur flavonoid tersebut. Karakteristik

struktur flavonoid yang mampu memberikan efek antioksidan antara lain karena

adanya (1) gugus katekol (O-dihidroksi) pada cincin B yang mempunyai sifat

sebagai donor proton, (2) gugus pirogalol (trihidroksi) pada cincin B, (3) gugus 4-

oxo pada cincin heterosiklik, (4) gugus 3-OH pada cincin heterosiklik, serta (5)

gugus 5-OH dan 7-OH yang potensial pada keadaan tertentu. Ketika senyawa-

senyawa ini bereaksi dengan radikal bebas maka terbentuk radikal baru yang

distabilisasi oleh efek resonansi inti aromatik.

28

Flavonoid menghambat enzim yang berperan pada pembentukan anion

superoksid misalnya xantin oksidase dan protein kinase. Disamping itu flavonoid

juga menghambat enzim siklooksigenase, lipoksigenase, monooksigenase

mikrosom, glutation S-transferase, yang kesemua enzim tersebut terlibat dalam

produksi radikal bebas (Subarnas, 2001). Efek flavonoid terhadap organisme

sangat banyak macamnya, sehingga tumbuhan yang mengandung flavonoid dapat

dipakai dalam pengobatan (Robinson, 1991).

H. Vitamin E

Tokoferol atau vitamin E adalah vitamin larut lemak yang memiliki

peranan penting sebagai antioksidan. Vitamin E alami terdapat dalam delapan

bentuk yang berbeda (isomer), yakni 4 tokoferol dan 4 tokotrienol. Semua isomer

tersebut memiliki cincin kromanol, dengan gugus hidroksil yang dapat

memberikan sebut atom hidrogen untuk mengurangi radikal bebas dan rantai

samping hidrofobik yang mengizinkan terjadinya penetrasi ke membran biologi.

Terdapat bentuk alfa, beta, gamma, dan delta untuk tokoferol dan tokotrienol.

Determinasinya dilakukan dengan melihat jumlah gugus metil pada cincin

kromanol. Tiap bentuk tersebut memiliki aktivitas biologinya masing-masing

(Anonim, 2006).

Alfa-tokoferol merupakan bentuk yang sangat aktif dari vitamin E. Alfa-

tokoferol memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat. 1 IU dari vitamin E

ekuivalen dengan 0,668 miligram RRR-alfa-tokoferol (Anonim, 2006). Struktur

kimia dari vitmin E (tokoferol) dapat dilihat pada gambar 7.

29

O

CH3

CH3

CH3

HO

H3C

CH2 CH2 CH2 CH

CH3

CH3

3

Gambar 7. Struktur kimia vitamin E (α-tokoferol)

I. Metode Pengujian Daya Anti-inflamasi

Beberapa metode yang banyak digunakan untuk meneliti inflamasi akut

dan sub akut adalah sebagai berikut.

1.Uji eritema

Tanda paling awal dari reaksi inflamasi di kulit adalah kemerahan

(eritema) yang berhubungan dengan vasodilatasi, dimana belum disertai eksudasi

plasma dan udema. Pada marmot albino reaksi eritema terlihat dua jam setelah

penyinaran UV pada kulit yang telah dicukur. Uji eritema yang disebabkan UV

dapat digunakan untuk mengukur fase vasodilatasi pada reaksi inflamasi.

Mekanisme dari reaksi ini tidak diketahui, tapi pelepasan prostaglandin

kelihatannya berperan pada fenomena ini (Gryglewski, 1977). Keuntungan dari uji

ini adalah sederhana tapi membutuhkan latihan bagi penggunanya untuk

menggunakan fotometer refleksi dengan tujuan untuk menghilangkan penilaian

subjektif (Vogel, 2002). Eritema yang disebabkan UV pada marmut ini juga

dihambat oleh obat-obat yang tidak berhubungan dengan biosintesis prostaglandin

dan bukan agen anti-inflamasi. Oleh karena itu, ketika menggunakan uji eritema

UV untuk mengukur aktivitas suatu bahan kimia harus selalu diingat

kemungkinan hasil “positif palsu” dan “negatif palsu” (Gryglewski, 1977).

30

2. Paw edema test

Diantara banyak metode yang digunakan untuk skrining obat anti-

inflamasi, satu dari teknik yang paling umum digunakan didasarkan pada

kemampuan beberapa bahan uji untuk menghambat produksi udema kaki hewan

uji setelah injeksi bahan pembuat radang. Banyak zat pembuat radang (iritan)

yang telah digunakan seperti brewer’s yeast, formaldehid, dextran, albumin telur,

kaolin, aerosol, karagenin, dll (Vogel, 2002). Iritan yang paling banyak digunakan

adalah karagenin. Karagenin adalah fosfolipida tersulfatasi yang diekstrak dari

lumut irlandia Chondrus crispus (Gryglewski, 1977). Reaksi inflamasi yang

diinduksi karagenin mempunyai dua fase: fase awal dan akhir. Fase awal berakhir

setelah 60 menit dan dihubungkan dengan pelepasan histamin, serotonin, dan

bradikinin. Fase akhir terjadi antara 60 menit setelah injeksi dan berakhir setelah

tiga jam. Fase ini dihubungkan dengan pelepasan prostaglandin dan neutrofil yang

menghasilkan radikal bebas, seperti hidrogen peroksida, superoksida, dan radikal

hidroksil (Suleyman, Demircan, Karagoz, Ozta, dan Suleyman, 2004). Tikus

Sprague Dawley jantan atau betina digunakan dalam uji ini. Efeknya dapat diukur

dengan beberapa cara misalnya kaki belakang dipotong pada sendi tarsocrural

dan ditimbang (Vogel, 2002). Metode ini banyak digunakan karena sederhana dan

murah dari segi peralatan, bahan, dan cara kerjanya (Jain, Patil, Singh, dan

Kulkarni, 2001).

3. Tes radang selaput dada (pleurisy)

Radang selaput dada dikenal sebagai fenomena inflamasi eksudatif pada

manusia (Vogel, 2002). Radang selaput dada pada tikus dapat disebabkan injeksi

31

intrapleural dari turpentine, evans blue, gum arab, glikogen, dekstran, perak nitrat,

atau karagenin. Pada waktu tertentu setelah injeksi iritan hewan uji dibunuh dan

eksudat dipindahkan, lebih baik dengan mencuci rongga dada dengan sejumlah

larutan Hank’s yang diketahui volumenya untuk memastikan didapatnya eksudat

dan sel utuh yang lengkap (Gryglewski, 1977). Radang selaput dada yang

disebabkan karagenin dipertimbangkan sebagai model inflamasi akut yang paling

sempurna dimana keluarnya cairan, migrasi leukosit, dan parameter biokimia lain

yang ada dalam respon inflamasi dapat diukur dengan mudah dari eksudat (Vogel,

2002).

4. Tes kantung granuloma

Metode ini dapat digunakan untuk memperkirakan potensi anti-inflamasi

kortikosteroid (Vogel, 2002). Setelah kantung dibuat di punggung tikus dengan

injeksi subkutan 10-25 ml udara steril, berbagai iritan (minyak croton yang

dicairkan, turpentine, microbacterial, fosfolipase A2, atau karagenin) dimasukkan

pada lubang (Gryglewski, 1977). Empat puluh delapan jam sesudahnya udara

diambil dan hewan diinjeksi larutan uji atau larutan standar (Vogel, 2002). Empat

sampai empat belas hari setelahnya respon inflamasi dievaluasi dengan dasar

volume cairan yang diambil dari kantung sama seperti berat dan tebal dinding

kantung. Model kantung granuloma ini lebih sensitif terhadap obat anti-inflamasi

steroid daripada non steroid (Gryglewski, 1977).

32

J. Landasan Teori

Inflamasi sebenarnya merupakan respon biologi reaksi-reaksi kimiawi

secara berurutan dan bertugas melindungi tubuh dari infeksi dan memperbaiki

jaringan yang rusak (Wilmana, 1995). Bila ada jaringan yang rusak, maka tubuh

akan membentuk prostaglandin sebagai mediator dalam peradangan. Pada

biosintesis prostaglandin akan dihasilkan radikal oksigen akibat konversi

peroksidase pada jalur siklooksigenase maupun lipoksigenase (Tjay dan Rahardja,

2002). Berbagai kinin, neuropeptida, dan histamin juga dikeluarkan di tempat

cedera jaringan sebagaimana juga komponen-komponen komplemen, sitokin, dan

produk-produk lain dari leukosit dan platelet (Katzung, 2001).

Oksigen aktif (O22ˉ; H2O2; OHˉ) dan asam hipoklorit (HOCl) yang

merupakan bagian dari satuan tempur aneka zat kimia dan terkandung dalam sel

fagosit (neutrofil, monosit, makrofag, dan eosinofil) juga dilepaskan manakala sel

fagosit teraktifkan selama berlangsung peradangan (Wijoyo, 2001). Rangsangan

dari selaput neutrofil menghasilkan radikal-radikal bebas yang berasal dari

oksigen. Anion superoksida dibentuk melalui reduksi dari oksigen molekuler,

yang bisa merangsang produksi molekul-melekul reaktif lainnya seperti halnya

hidrogen peroksida dan radikal hidroksil. Interaksi dari bahan-bahan ini dengan

asam arakhidonat menghasilkan pembentukan substansi-substansi kemotaksis,

selanjutnya secara berkesinambungan meneruskan inflamasi (Katzung, 2001).

Reaksi inflamasi yang disebabkan oleh metode uji daya anti-inflamasi

yang digunakan dalam penelitian ini yaitu metode induksi udema oleh karagenin

juga melibatkan radikal bebas. Menurut Suleyman et al. (2004), fase akhir reaksi

33

inflamasi yang diinduksi oleh karagenin dihubungkan dengan pelepasan

prostaglandin dan neutrofil yang menghasilkan radikal bebas, seperti hidrogen

peroksida, superoksida, dan radikal hidroksil.

Radikal bebas dapat didefinisikan sebagai setiap spesies yang mengandung

satu atau lebih elektron tidak berpasangan (Halliwell and Gutteridge, 1999).

Radikal bebas dalam kadar tertentu diperlukan untuk pertahanan tubuh (Anonim,

2003a). Namun, radikal bebas yang berlebih dapat menyebabkan inflamasi dan

kerusakan yang luas diseluruh tubuh dan mempercepat degenerasi jaringan yang

menyebabkan penuaan lebih cepat (Pizzorno, 1998). Oleh sebab itulah diperlukan

suatu antioksidan yang dapat menangkap radikal bebas untuk mencegah terjadinya

inflamasi.

Tanaman makuto dewo mengandung alkaloid, saponin, polifenol, dan

flavonoida dalam kulit buah dan buahnya. Flavonoida dapat bertindak sebagai

antioksidan. Yang paling penting adanya sifat penangkap radikal-radikal bebas

(free radical scavenging), dimana dapat memutuskan reaksi berantai radikal

bebas. Robinson (1991) menunjukkan bahwa flavonoida dapat menghambat

enzim-enzim seperti fosfodiesterase, aldoreduktase, monoamina oksidase, protein

kinase, reverse transcriptase, DNA polimerase dan lipooksigenase dan bertindak

sebagai penampung radikal hidroksil dan superoksida yang baik sehingga dapat

melindungi lipid membran terhadap reaksi yang merusak.

Makuto dewo mengandung senyawa antioksidan karena makuto dewo

memiliki flavonoid yang mempunyai sifat: (1) menangkap radikal bebas dan

34

bersifat antioksidan, (2) menghambat enzim-enzim yang terlibat dalam produk

radikal bebas.

Virgin coconut oil (VCO) mengandung tokoferol yang secara umum

diterima sebagai vitamin E. Menurut Syah (2005), senyawa ini diduga sebagai

antioksidan alami yang kuat. VCO juga mengandung asam lemak jenuh dalam

jumlah tinggi (asam laurat dan asam miristat), sehingga minyak kelapa tahan

terhadap proses oksidasi.

VCO dan makuto dewo, keduanya mengandung senyawa antioksidan yang

dapat menangkap radikal bebas berlebih penyebab inflamasi. Oleh karena itu,

penambahan VCO pada perasan daging buah makuto dewo diduga memiliki daya

anti-inflamasi yang lebih efektif.

K. Hipotesis

Efek anti-inflamasi penambahan virgin coconut oil (VCO) pada perasan

daging buah makuto dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.) lebih efektif

dibandingkan efek anti-inflamasi makuto dewa atau VCO murni.

35

BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian

Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental murni dengan

rancangan acak lengkap pola searah.

B. Metode dan Prinsip Penelitian

Metode yang digunakan dalam penelitian ini yaitu metode induksi udema

oleh Langford, dkk. (1972) yang telah dimodifikasi. Prinsip dari metode ini adalah

aktivitas anti-inflamasi ditandai dengan penurunan bobot udema.

C. Variabel dan Definisi Operasional

1. Variabel

a. Variabel bebas:

Penambahan Virgin Coconut Oil (VCO) terhadap perasan daging buah

makuto dewo.

b. Variabel tergantung:

Berat udema telapak kaki mencit betina yang mengalami inflamasi buatan

dengan karagenin.

36

c. Variabel pengacau:

1) Variabel pengacau terkendali

a) Subyek uji adalah mencit putih dengan spesifikasi galur Swiss,

berat badan 20 – 30 g, umur 2 – 3 bulan dan jenis kelamin betina.

b) Buah makuto dewo yang digunakan adalah makuto dewo yang

sudah tua, berwarna merah segar.

2) Variabel pengacau tak terkendali:

Kondisi patologis subyek uji, kemurnian VCO, umur buah makuto

dewo.

2. Definisi operasional

a. Perasan daging buah makuto dewo adalah sari hasil perasan tangan dari

potongan kecil daging buah makuto dewo dan sudah terpisah dari

ampasnya.

b. Uji efek anti-inflamasi adalah uji dengan menggunakan mencit galur Swiss

sebagai hewan uji yang diradangkan telapak kaki kirinya, dan diukur bobot

kakinya dengan cara memotong kedua kaki belakang mencit, kemudian

ditimbang dan dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif karagenin

1% sub plantar.

37

D. Subyek dan Bahan Penelitian

1. Subyek Uji

Subyek uji yang digunakan berupa mencit putih dengan spesifikasi: galur

Swiss, berat badan antara 20-30 gram, umur antara 2-3 bulan, jenis kelamin

betina.

2. Bahan Penelitian

a. Virgin coconut oil (VCO)

VCO yang digunakan merupakan VCO produksi dari CV Kelapa Mas,

Yogyakarta dengan merk Vicol.

b. Buah makuto dewo

Buah makuto dewo yang digunakan berasal dari perkebunan makuto dewo

di Purworejo, Jawa Tengah. Makuto dewo ini diambil pada bulan Juli-

Agustus dengan spesifikasi: masak dan bewarna merah tua.

c. Zat peradang

Zat peradang (inflamatogen) yang digunakan adalah karagenin tipe 1

(Sigma Chemical Co.) yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi dan

Toksikologi, Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

d. Natrium diklofenak

Natrium diklofenak (BP 98) yang digunakan berasal dari PT. Ifars

Pharmaceutical Laboratories, Solo.

e. NaCl fisiologis

NaCl fisiologis yang digunakan adalah Otsu NS (Normal Saline) i.v

infusion yang diperoleh dari apotek Kimia Farma Yogyakarta.

38

f. Aquadest

Aquadest yang digunakan berasal dari Laboratorium Farmakologi dan

Toksikologi, Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

E. Alat Penelitian

1. Alat-alat gelas merek Pyrex Iwaki Glass, Japan.

2. Neraca analitik merek Mettler Toledo tipe AB 204 Germany.

3. Homogenizer merek Yastral GmbH D-7801 Dottingen tipe : X 1020.

4. Spuit injeksi subplantar (0,1 - 1,0 ml) merek Terumo.

5. Alat pemberian peroral yaitu jarum suntik (0,1 - 1,0 ml) yang ujungnya diberi

bulatan kecil dengan lubang ditengahnya sehingga tidak melukai hewan uji.

Jarum suntik peroral ini dibuat di Bengkel MIPA, Universitas Gadjah Mada,

Yogyakarta.

6. Gunting dan pinset.

F. Tata Cara Penelitian

1. Determinasi Tanaman Makuto Dewo

Determinasi dilakukan di Laboratorium Kebun Obat Fakultas Farmasi

Sanata Dharma Yogyakarta dengan cara mencocokkan ciri-ciri tanaman tersebut

dengan buku acuan.

39

2. Pembuatan Bahan Uji

a. Pembuatan perasan daging buah makuto dewo

Makuto dewo yang akan digunakan dicuci bersih dengan air mengalir.

Kulit makuto dewo dibuang dan buahnya dipotong kecil-kecil, kemudian

diperas dengan kain saringan sehingga diperoleh perasan buah makuto

dewo.

b. Pembuatan campuran larutan uji

Sejumlah ml sari buah makuto dewo yang sudah diperas dicampur dengan

sejumlah ml VCO.

b. Pembuatan larutan karagenin

Menurut Williamson, Okpako, dan Evans (1996), 0,05 ml larutan

karagenin 1 % yang dilarutkan dalam 0,9 % NaCl fisiologis digunakan

sebagai bahan pembuat radang pada mencit. Larutan karagenin 1 % dibuat

dengan cara karagenin sebanyak 100 mg dilarutkan dalam NaCl fisiologis

(0,9 %) hingga volume 10 ml. Perhitungan dosis karagenin dengan

mengasumsikan volume pemberian 0,05 ml dan BB mencit 20 g adalah

sebagai berikut:

dosis karagenin =BB

CxV

=kg0,02

mg/10ml100x0,05

= 25 mg/kgBB

d. Pembuatan larutan natrium diklofenak

40

Larutan natrium diklofenak dosis 4,48 mg/kgBB dengan konsentrasi 0,18

mg/ml dibuat dengan menimbang 4,50 mg serbuk natrium diklofenak

kemudian ditambahkan aquadest sampai volumenya 25 ml dalam labu

ukur.

3. Orientasi Percobaan

a. Penentuan dosis natrium diklofenak

Dosis natrium diklofenak yang digunakan sebagai dosis orientasi adalah

3,36; 4,48; dan 5,6 mg/kgBB. Dosis ini diperoleh berdasarkan penelitian

Maryanto (1997) dengan cara perhitungan:

(1) dosis untuk tikus 200 g = 30 mg/kgBB

dosis untuk tikus 200 g =250

200x 30 = 24 mg/kgBB

konversi dari tikus 200 g ke mencit 20 g = 0,14 x 24 mg/kgBB

= 3,36 mg/kgBB



200x 40 = 32 mg/kgBB


= 4,48 mg/kgBB



200x 50 = 40 mg/kgBB


= 5,6 mg/kgBB

41

b. Penetapan selang waktu pemotongan kaki

Dua belas hewan uji dibagi dalam empat kelompok, kemudian kaki kirinya

disuntik dengan karagenin 1% sebanyak 0,05 ml sedangkan kaki kanannya

sebagai kontrol, hanya disuntik dengan spuit injeksi tanpa karagenin. Tiap

kelompok dikurbankan pada selang waktu tertentu (1, 2, 3, dan 4 jam)

setelah penyuntikan karagenin. Setelah dikurbankan, kedua kaki

belakangnya dipotong pada sendi tarsocrural dan ditimbang. Waktu

pemotongan kaki ditentukan pada saat kaki mengalami peningkatan udema

yang berarti.

c. Penetapan dosis natrium diklofenak

Sembilan hewan uji dibagi dalam tiga kelompok. Tiap kelompok diberi

natrium diklofenak secara peroral dengan dosis tertentu (3,36 mg/kgBB;

4,48 mg/kgBB; dan 5,6 mg/kgBB) 15 menit sebelum disuntik dengan

karagenin 1 %. Tiga jam setelah disuntik karagenin, hewan uji

dikurbankan dan kedua kaki belakangnya dipotong pada sendi tarsocrural

dan ditimbang. Dosis natrium diklofenak ditentukan pada saat kaki

mengalami penurunan udema yang berarti.

d. Penetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak

Dua belas hewan uji dibagi dalam empat kelompok. Tiap kelompok diberi

natrium diklofenak secara peroral pada selang waktu tertentu (15, 30, 45,

dan 60 menit) sebelum disuntik dengan karagenin 1 %. Tiga jam setelah

penyuntikan karagenin, hewan uji dikurbankan dan kedua kaki

belakangnya dipotong pada sendi tarsocrural dan ditimbang. Waktu

42

pemberian natrium diklofenak ditentukan pada saat kaki mengalami

penurunan udema yang berarti.

e. Penetapan kombinasi penambahan VCO pada perasan daging buah makuto

dewo.

Perbandingan jumlah VCO dan perasan daging buah makuto dewo

yang digunakan dilakukan dengan melihat kekentalan campuran VCO dan

perasan daging buah makuto dewo yang masih dapat dikeluarkan dari

spuit injeksi. Perbandingan kombinasi VCO dan perasan daging buah

makuto dewo yang digunakan dalam penelitian yaitu sebesar 1:¼, 1:½,

1:1, 1:2 dan 1:4.

4. Perlakuan Hewan Uji

a. Perlakuan hewan uji

Tujuh puluh hewan uji dibagi dalam sepuluh kelompok secara acak. Tiap

kelompok terdiri dari tujuh hewan uji.

Kelompok I = Kontrol karagenin dosis 25 mg/kgBB secara subplantar

Kelompok II = Kontrol aquadest 25 g/kgBB secara peroral

Kelompok III = Kontrol larutan natrium diklofenak

4,48 mg/kgBB secara peroral

Kelompok IV = Kontrol VCO sebanyak 1 ml secara peroral

Kelompok V = Kontrol perasan daging buah makuto dewo

sebanyak 1 ml secara peroral

Kelompok VI, VII, VIII, IX, dan X diberi kombinasi perasan daging buah

makuto dewo dan VCO secara peroral dengan perbedaan pada

43

penambahan VCO. Perbandingan perasan daging buah makuto dewo dan

VCO yang diberikan adalah 1:¼, 1: ½, 1:1, 1:2, dan 1:4.

Semua kelompok (kecuali kelompok I) pada menit ke 15 setelah perlakuan

diatas kemudian disuntik karagenin 1% sebanyak 0,05 ml pada telapak

kaki kiri secara subplantar. Kaki kanannya digunakan sebagai kontrol

sehingga hanya disuntik dengan spuit injeksi tanpa karagenin. Tiga jam

setelah disuntik karagenin, hewan uji dikurbankan kemudian kedua

kakinya dipotong pada bagian sendi tarsocrural lalu ditimbang.

b. Perhitungan efek anti-inflamasi

Aktivitas anti-inflamasi menurut Langford dkk (1972) diperoleh dari data

perubahan bobot kaki mencit yang dinyatakan sebagai % efek anti-

inflamasi dan dirumuskan sebagai berikut :

% efek anti-inflamasi =D

DU x 102

Keterangan:U = rata-rata bobot kaki kelompok karagenin dikurangi rata-rata bobot

kaki kelompok normal (tanpa perlakuan)D = rata-rata bobot kaki kelompok perlakuan dikurangi rata-rata bobot

kaki kelompok normal (tanpa perlakuan)

Rumus tersebut memungkinkan diperolehnya % efek anti-inflamasi yang

melebihi 100%, sehingga diperbaiki menjadi:

% efek anti-inflamasi =U

DU x 100 %

Keterangan:U = rata-rata bobot kaki kelompok karagenin dikurangi rata-rata bobot

kaki kelompok normal (tanpa perlakuan)D = rata-rata bobot kaki kelompok perlakuan dikurangi rata-rata bobot

kaki kelompok normal (tanpa perlakuan)

44

Rumus inilah yang digunakan dalam penelitian ini untuk memperoleh %

efek anti-inflamasi.

c. Perhitungan potensi relatif efek anti-inflamasi

Potensi relatif efek anti-inflamasi penambahan VCO pada perasan daging

buah makuto dewo terhadap natrium diklofenak sebagai kontrol positif

dihitung dengan rumus:

Potensi relatif efek anti-inflamasi =

DAd

DApx 100 %

Keterangan:Dap = % efek anti-inflamasi kelompok perlakuanDad = % efek anti-inflamasi larutan natrium diklofenak

5. Tata Cara Analisis Hasil

Data yang diperoleh dianalisis dengan uji Kolmogorov-Smirnov untuk

melihat normalitas distribusi data. Jika data terdistribusi normal maka

dilanjutkan dengan uji Anova Satu Arah dengan taraf kepercayaan 95 %. Jika

diperoleh nilai probabilitas (p) < 0,05 maka diartikan ada perbedaan diantara

kelompok perlakuan dan jika p > 0,05 berarti tidak ada perbedaan diantara

kelompok perlakuan. Analisis dilanjutkan dengan uji Scheffe. Jika diperoleh

nilai p < 0,05 maka diartikan ada perbedaan bermakna secara statistik, jika

diperoleh nilai p > 0,05 maka diartikan perbedaan tersebut tidak bermakna

secara statistik.

45

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Determinasi Buah Makuto Dewo

Determinasi tanaman makuto dewo (Phaleria macrocarpa (Scheff.)

Boerl.) dilakukan untuk menghindari kesalahan akan tanaman yang digunakan.

Determinasi dilakukan di laboratorium Kebun Tanaman Obat Fakultas Farmasi

Universitas Sanata Dharma Yogyakarta dengan hasil determinasi sebagai berikut:

Famili

1b-2b-3b-4b-13b-14b-17b-18b-19b-20b-21b-22b-23b-24b-25b-26b-27b-799b-

800b-801b-802b-806b-807b-809b-810b-811b-825b-826b-829b-830b-831b-832b-

833b-834a-835a-836a-837a-851b-856b-857b-872b-874b-875b-876b-877d-933b-

934a-935b-936-937b-939a-940a-941b-942b ………………..…(64. Thymelaceae)

Genus

1a……………………………………………………………...…….(Phaleria Jack)

Spesies

1a-2b………………………………….…..(Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.)

Dari hasil determinasi tersebut diketahui bahwa tanaman makuto dewo yang

mempunyai nama ilmiah Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.

46

B. Pembuatan Larutan Uji

1. Pembuatan perasan daging buah makuto dewo

Larutan uji diperoleh dengan memeras daging buah makuto dewo masak

yang telah dicuci bersih terlebih dahulu dengan menggunakan kain saring. Biji

buah harus dibuang karena sifatnya yang toksik. Buah makuto dewo yang matang

ditandai dengan warna kulit yang merah tua dan agak lunak apabila ditekan.

Dari hasil orientasi diketahui bahwa dengan memeras 200 g daging buah

makuto dewo akan dihasilkan 100 ml air perasan. Air perasan daging buah

makuto dewo yang digunakan dalam penelitian ini merupakan perasan yang

murni tanpa adanya penambahan air.

2. Pembuatan campuran perasan daging buah makuto dewo dengan VCO

Setelah air perasan daging buah makuto dewo didapat, maka langkah

selanjutnya adalah mencampurkan air perasan tersebut dengan Virgin Coconut Oil

dengan takaran yang telah ditentukan. Pencampuran dilakukan dengan bantuan

alat homogenizer selama 30 detik.

C. Hasil Orientasi Percobaaan

Orientasi percobaan dilakukan untuk memaksimalkan metode uji yang

digunakan sehingga dapat diperoleh hasil yang kevalidannya dapat diterima.

Dalam penelitian ini ada tiga macam orientasi yang dilakukan, yaitu penetapan

selang waktu pemotongan kaki, penetapan dosis natrium diklofenak, dan

penetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak.

47

1. Hasil orientasi penetapan selang waktu pemotongan kaki

Orientasi penetapan selang waktu pemotongan kaki dilakukan dengan tujuan

untuk mengetahui kapan waktu yang tepat untuk mendapatkan udema yang berarti

pada telapak kaki mencit setelah penyuntikan karagenin. Data bobot udema kaki

mencit yang dihasilkan akibat pemberian karagenin dalam berbagai selang waktu

pemotongan kaki (1 ,2, 3, dan 4 jam) dapat dilihat pada lampiran 11. Rata-rata

bobot udema kaki mencit pada tiap kelompok dapat dilihat pada tabel I dan grafik

rata-rata bobot udema dapat dilihat pada gambar 8.

Tabel I. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar dalamberbagai variasi selang waktu pemotongan kaki

Selang waktu pemotongan kaki(jam)

Rata-rata bobot udema kakimencit (mg)

1 41,502 57,333 77,734 82,33

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

1 2 3 4

waktu (jam)

rata

-rat

ab

ob

ot

ud

ema

(mg)

Gambar 8. Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1%subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki

48

Dari gambar 8 dapat dilihat bahwa bobot udema kaki mencit akibat injeksi

karagenin 1% subplantar semakin meningkat dengan semakin lamanya waktu

pemotongan kaki mencit. Bobot udema paling kecil terdapat pada kelompok

pemotongan kaki 1 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantar dan yang terbesar

pada kelompok pemotongan kaki 4 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantar.

Dari data tersebut dapat diketahui bahwa karagenin sudah berefek optimal pada

kelompok pemotongan kaki 4 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantar.

Data rata-rata bobot udema kaki mencit kemudian dianalisis dengan uji

Kolmogorov-Smirnov untuk melihat distribusi datanya. Dari analisis diperoleh

probabilitas (p) > 0,05 yang artinya data terdistribusi normal sehingga dapat

dilanjutkan analisis dengan uji Anova Satu Arah dengan taraf kepercayaan 95%.

Uji ini dilakukan untuk melihat apakah ada perbedaan antarkelompok.

Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah dapat dilihat pada tabel II.

Tabel II. Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah data bobot udema kaki mencit akibatinjeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktupemotongan kaki

Keterangan DF F Probabilitas (p)Bobot udema

antarkelompok perlakuan3 184,576 0,00

Hasil analisis uji Anova Satu Arah menunjukkan bahwa data

antarkelompok adalah berbeda (signifikan) karena p < 0,05. Analisis uji Scheffe

dilakukan sebagai analisis lanjutan untuk melihat apakah perbedaan yang

diperoleh bermakna atau tidak bermakna secara statistik. Rangkuman hasil uji

Scheffe dapat dilihat pada tabel III.

49

Tabel III. Rangkuman hasil uji Scheffe data bobot udema kaki mencit akibat injeksikaragenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki

Bobot udema kaki mencit dibandingkan kelompok-Kelompok ± SE

I II III IVI 41,50±1,20 - B B BII 57,33±1,03 B - B BIII 77,73±1,45 B B - TBIV 82,33±1,77 B B TB -

Keterangan:I = pemotongan kaki 1 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantarII = pemotongan kaki 2 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantarIII = pemotongan kaki 3 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantarIV = pemotongan kaki 4 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantarB = berbeda bermakna (p < 0,05)TB = berbeda tidak bermakna (p > 0,05)

= rata-rata bobot udemaSE = standard error

Dari hasil uji Scheffe dapat dilihat bahwa kelompok pemotongan kaki 1

jam setelah injeksi karagenin 1% subplantar (kelompok I) berbeda bermakna

dengan kelompok pemotongan kaki 2 jam setelah injeksi (kelompok II) dan

berbeda tidak bermakna dengan kelompok pemotongan kaki 3 (kelompok III) dan

4 jam (kelompok IV) setelah injeksi karagenin 1% subplantar. Sedangkan

kelompok pemotongan kaki 3 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantar

berbeda bermakna dengan kelompok pemotongan kaki 1 dan 2 jam dan berbeda

tidak bermakna dengan kelompok pemotongan kaki 4 jam setelah injeksi. Bobot

udema kaki mencit yang paling tinggi terdapat pada kelompok pemotongan kaki 4

jam setelah injeksi karagenin 1% subplantar. Dapat disimpulkan, bahwa karagenin

pada waktu tersebut berefek optimal (gambar 8). Arti secara statistik, jika

pemotongan kaki mencit dilakukan 1 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantar,

bobot udemanya akan berbeda dengan bobot udema yang pemotongan kakinya

dilakukan pada 2, 3, atau 4 jam setelah injeksi. Begitu pula jika pemotongan kaki

50

mencit dilakukan 2 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantar, bobot udemanya

akan berbeda dengan bobot udema yang pemotongan kakinya dilakukan pada 1, 3,

atau 4 jam setelah injeksi. Namun jika pemotongan kaki mencit dilakukan 3 atau 4

jam setelah injeksi karagenin 1% subplantar maka bobot udemanya dapat

dikatakan sama, dan diharapkan telah mencapai udema optimal. Untuk efisiensi

waktu kerja, pemotongan kaki mencit selanjutnya dilakukan 3 jam setelah injeksi

karagenin 1% subplantar karena bobot udema kaki mencit yang dihasilkan jika

pemotongan dilakukan 3 atau 4 jam setelah injeksi adalah sama secara statistik.

2. Hasil orientasi penetapan dosis natrium diklofenak

Orientasi penetapan dosis natrium diklofenak dilakukan dengan tujuan untuk

mengetahui besar dosis natrium diklofenak yang dapat menimbulkan penurunan

bobot udema kaki mencit yang paling efektif. Variasi dosis natrium diklofenak

yang digunakan dalam penelitian ini adalah 3,36 mg/kgBB, 4,48 mg/kgBB, dan

5,60 mg/kgBB. Pemilihan variasi dosis natrium diklofenak tersebut didasarkan

pada penelitian Maryanto (1997), yang melakukan konversi dari dosis efektif

natrium diklofenak untuk tikus dengan berat badan 200 g ke mencit dengan berat

badan 20 g. Dari hasil perhitungan diperoleh dosis natrium diklofenak untuk

mencit dengan berat badan 20 g adalah 4,48 mg/kgBB. Untuk mengetahui apakah

dosis natrium diklofenak ini efektif untuk mencit, maka dilakukan penambahan 2

dosis, yaitu dosis 3,36 mg/kgBB dan 5,60 mg/kgBB. Data bobot udema kaki

mencit yang dihasilkan akibat injeksi karagenin 1% subplantar setelah pemberian

natrium diklofenak dalam berbagai variasi dosis dapat dilihat pada lampiran 10.

51

Rata-rata bobot udema kaki mencit pada tiap kelompok dapat dilihat pada tabel IV

dan grafik rata-rata bobot udema dapat dilihat pada gambar 9.

Tabel IV. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantarsetelah pemberian berbagai variasi dosis natrium diklofenak

Dosis natrium diklofenak(mg/kgBB)

Rata-rata bobot udema kaki mencit(mg)

3,36 54.674,48 38.975,60 60.33

0

10

20

30

40

50

60

70

rata-rata

bobot udema

(mg)

3,36 4,48 5,60

dosis (mg/kgBB)

Gambar 9. Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1%subplantar setelah pemberian berbagai variasi dosis natrium diklofenak

Dari gambar 9 dapat dilihat bahwa bobot udema kaki mencit pada

kelompok yang diberi natrium diklofenak dengan dosis 4,48 mg/kgBB

memberikan nilai paling kecil. Sedangkan bobot udema kaki mencit yang terbesar

adalah pada kelompok yang diberi natrium diklofenak dengan dosis 5,60

mg/kgBB. Dapat disimpulkan bahwa natrium diklofenak dengan dosis 4,48 mg/

kgBB dapat memberikan penurunan bobot udema yang cukup besar.

52






Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah dapat dilihat pada tabel V.

Tabel V. Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah data bobot udema kaki mencit akibatinjeksi karagenin 1% subplantar setelah pemberian natrium diklofenak dalam 3peringkat dosis







Scheffe dapat dilihat pada tabel VI.

Dari hasil uji Scheffe dapat dilihat bahwa rata-rata bobot udema pada

kelompok I yang diberi natrium diklofenak dengan dosis 3,36 mg/kg BB berbeda

bermakna dengan kelompok II yang diberi natrium diklofenak dengan dosis 4,48

mg/kgBB dan tidak bermakna dengan kelompok II yang diberi natrium diklofenak

dengan dosis 5,60 mg/kgBB. Dosis natrium diklofenak yang efektif dalam

orientasi ini adalah 4,48 mg/kgBB karena memberikan penurunan bobot udema

yang paling kecil daripada dosis 3,36 mg/kgBB dan 5,60 mg/kgBB.

53

Tabel VI. Rangkuman hasil uji Scheffe data bobot udema kaki mencit akibat injeksikaragenin 1% subplantar setelah pemberian natrium diklofenak dalam 3peringkat dosis

Bobot udema kaki mencit dibandingkankelompok-Kelompok ± SE

I II IIII 54,67±1,03 - B TBII 38,97±1,92 B - BIII 60,33±0,65 TB B -

Keterangan:I = pemberian natrium diklofenak dengan dosis 3,36 mg/kgBB peroralII = pemberian natrium diklofenak dengan dosis 4,48 mg/kgBB peroralIII = pemberian natrium diklofenak dengan dosis 5,60 mg/kgBB peroralB = berbeda bermakna (p < 0,05)TB = berbeda tidak bermakna (p > 0,05)


3. Hasil orientasi penenetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak

Orientasi penetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak dilakukan

dengan tujuan untuk mengetahui kapan waktu yang tepat saat natrium diklofenak

memberikan penurunan udema yang berarti pada telapak kaki mencit setelah

penyuntikan karagenin 1% subplantar. Data bobot udema kaki mencit yang

dihasilkan akibat pemberian karagenin 1% subplantar setelah pemberian natrium

diklofenak dengan dosis efektif 4,48 mg/kgBB dalam berbagai selang waktu (15,

30, 45, dan 60 menit) dapat dilihat pada lampiran 11. Rata-rata bobot udema kaki

mencit pada tiap kelompok dapat dilihat pada tabel VII dan grafik rata-rata bobot

udema dapat dilihat pada gambar 10.

54

Tabel VII. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantarsetelah pemberian natrium diklofenak dosis efektif pada rentang waktu tertentu

Selang waktu pemotongan kaki(jam)

Rata-rata bobot udema kakimencit (mg)

1 37,832 41,433 56,804 59,30

0

10

20

30

40

50

60

70

15 30 45 60

waktu (menit)

rata

-ra

tab

ob

ot

ud

ema

(mg

)

Gambar 10. Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1%subplantar setelah pemberian natrium diklofenak dosis efektif pada rentangwaktu tertentu

Dari gambar 10 dapat dilihat bahwa bobot udema kaki mencit akibat

injeksi karagenin 1% subplantar setelah pemberian natrium diklofenak dosis

efektif pada rentang waktu 45 dan 60 menit terjadi kenaikan yang cukup tajam

dibandingkan dengan bobot udema setelah pemberian natrium diklofenak pada

rentang waktu 15 dan 30 menit. Artinya, mulai menit ke-45, efek anti-inflamasi

natrium diklofenak semakin berkurang, sehingga udema yang terbentuk tidak

dapat dihambat maksimal.

55






Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah dapat dilihat pada tabel VIII.

Tabel VIII. Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah data bobot udema kaki mencit akibatinjeksi karagenin 1% subplantar setelah pemberian natrium diklofenak dosisefektif pada rentang waktu tertentu







Scheffe dapat dilihat pada tabel IX.

Dari hasil uji Scheffe dapat dilihat bahwa kelompok yang diberi natrium

diklofenak dosis efektif pada selang waktu 15 menit sebelum injeksi karagenin

1% subplantar (kelompok I), berbeda tidak bermakna dengan kelompok yang

diberi natrium diklofenak dengan selang waktu 30 menit (kelompok II). Dan

kelompok yang diberi natrium diklofenak dosis efektif pada selang waktu 45

menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar (kelompok I), juga berbeda tidak

bermakna dengan kelompok yang diberi natrium diklofenak dengan selang waktu

56

60 menit (kelompok II). Namun kelompok I dan II menunjukkan perbedaan yang

bermakna dengan kelompok III dan IV.

Tabel IX. Rangkuman hasil uji Scheffe data bobot udema kaki mencit akibat injeksikaragenin 1% subplantar setelah pemberian natrium diklofenak dosis efektifpada rentang waktu tertentu

Bobot udema kaki mencit dibandingkan kelompok-Kelompok

__

± SE I II III IVI 37,83±2,06 - TB B BII 41,43±2,17 TB - B BIII 56,80±3,67 B B - TBIV 59,30±1,19 B B TB -

Keterangan:I = pemberian natrium diklofenak 4,48 mg/kgBB 15 menit sebelum injeksi

karagenin 1% subplantarII = pemberian natrium diklofenak 4,48 mg/kgBB 30 menit sebelum injeksi

karagenin 1% subplantarIII = pemberian natrium diklofenak 4,48 mg/kgBB 45 menit sebelum injeksi

karagenin 1% subplantarIV = pemberian natrium diklofenak 4,48 mg/kgBB 60 menit sebelum injeksi

karagenin 1% subplantarB = berbeda bermakna (p < 0,05)TB = berbeda tidak bermakna (p > 0,05)


Natrium diklofenak ditentukan untuk diberikan pada menit ke-15 sebelum

injeksi karagenin 1% subplantar, karena pada menit ke-15, rata-rata bobot

udemanya paling kecil dibandingkan dengan kelompok lainnya. Artinya natrium

diklofenak telah diabsorpsi secara optimal untuk memberikan penurunan bobot

udema yang berarti. Selain itu, penentuan waktu pemberian natrium diklofenak ini

juga mempertimbangkan efisiensi waktu, sehingga dipilih 15 menit sebelum

injeksi karagenin.

57

D. Hasil Perlakuan pada Hewan Uji

Penelitian pengaruh penambahan virgin coconut oil (VCO) pada perasan

daging buah makuto dewo (Phaleria macrocapa (Scheff.) Boerl.) kajian terhadap

efek anti-inflamasi adalah untuk mengetahui apakah kombinasi VCO dan perasan

daging buah makuto dewo mempunyai efek anti-inflamasi atau tidak dan untuk

mengetahui besarnya penambahan VCO yang efektif dalam kajian anti-inflamasi.

Selain itu, dalam penelitian ini sekaligus juga untuk mengetahui apakah VCO dan

makuto dewa masing-masing memiliki efek anti-inflamasi atau tidak. Efek anti-

inflamasi dalam penelitian yang menggunakan metode induksi udema oleh

Langford, Holmes, dan Emele yang telah dimodifikasi ini ditandai dengan

penurunan bobot udema pada telapak kaki mencit yang telah disuntik dengan

karagenin 1% subplantar akibat pemberian campuran VCO dan perasan daging

buah makuto dewo secara peroral.

Metode induksi udema oleh karagenin adalah metode standar dan sangat

umum digunakan untuk menguji efek anti-inflamasi akut. Metode ini banyak

digunakan karena sederhana dan murah dari segi peralatan, bahan, dan cara

kerjanya (Jain dkk, 2001). Data yang diperoleh adalah bobot telapak kaki mencit

yang diberi injeksi karagenin 1% subplantar dikurangi dengan bobot telapak kaki

mencit yang diberi perlakuan campuran VCO dan makuto dewo sebelum injeksi

karagenin 1% subplantar.

Karagenin 1% digunakan sebagai zat penginduksi udema pada telapak

kaki mencit karena karagenin merupakan salah satu zat iritan atau penginduksi

udema yang sering digunakan untuk memprediksi efektivitas potensial terapeutik

58

dari obat-obat anti-inflamasi, baik dari golongan steroid maupun nonsteroid.

Karagenin memberikan udema yang reproduksibel. Selain itu, karagenin juga

tidak menimbulkan kerusakan pada jaringan (Jain et al., 2001), tidak

menimbulkan bekas serta memberikan respon yang lebih peka terhadap anti-

inflamasi dibandingkan senyawa lain. Udema yang diinduksi karagenin

menunjukkan respon dua fase. Fase pertama diperantarai melalui pelepasan

histamin, serotonin, dan bradikinin. Sedangkan fase kedua berhubungan dengan

pelepasan prostaglandin dan neutrofil yang menghasilkan radikal bebas, seperti

hidrogen peroksida, superoksida, dan radikal hidroksil (Suleyman dkk, 2004).

Aquadest merupakan pelarut dari natrium diklofenak dan sediaan yang

diberikan adalah perasan daging buah makuto dewo. Kontrol aquadest diperlukan

untuk mengetahui apakah aquadest memiliki efek anti-inflamasi yang

berpengaruh terhadap efek anti-inflamasi sediaan yang diteliti. Natrium

diklofenak digunakan sebagai kontrol karena memiliki aktifitas yang besar

sebagai anti-inflamasi dan memiliki efek samping yang rendah dibanding OAINS

lainnya.

Data bobot udema kaki mencit yang dihasilkan akibat injeksi karagenin

1% subplantar pada kelompok kontrol dan kelompok perlakuan dapat dilihat pada

lampiran 12. Data rata-rata bobot udema telapak kaki mencit akibat karagenin 1%

subplantar dari tiap kelompok kontrol dan perlakuan disajikan pada tabel X dan

grafiknya dapat dilihat pada gambar 11.

59

Tabel X. Rata-rata bobot udema telapak kaki mencit akibat karagenin 1% subplantar padakelompok kontrol dan perlakuan

KelompokRata-rata bobot udema kaki mencit

(mg) ± SEKaragenin 25 mg/kg BB 81,14 ± 1,62Aquadest 25 g/kg BB 77,83 ± 1,18Diklofenak 4,48 mg/kg BB 36,03 ± 2,12Makuto Dewo 107,19 ± 6,42VCO 52,71 ± 0,74Kombinasi perasan daging buah makutodewo dan VCO dengan perbandingan 1:1/4

66,06 ± 2,35

Kombinasi perasan daging buah makutodewo dan VCO dengan perbandingan 1:1/2

61,36 ± 2,28

Kombinasi perasan daging buah makutodewo dan VCO dengan perbandingan 1:1

60,26 ± 2,61


59,94 ± 0,58


46,41 ± 2,12

Dari dari tabel X dan gambar 11 dapat dikatakan bahwa aquadest tidak

menghambat udema yang diakibatkan oleh karagenin 1% subplantar karena rata-

rata bobot udema kelompok kontrol aquadest tidak berbeda jauh dengan

kelompok kontrol karagenin. Jadi, aquadest tidak memiliki efek anti-inflamasi.

Dapat dilihat juga bahwa kontrol perasan daging buah makuto dewo memberikan

rata-rata bobot udema yang lebih tinggi dibandingkan dengan rata-rata bobot

udema kelompok karagenin. Dapat disimpulkan bahwa perasan daging buah

makuto dewo merupakan peradang yang lebih tinggi daripada karagenin.

Sedangkan untuk kelompok perlakuan lainnya memiliki efek anti-inflamasi. Hal

ini diketahui dengan adanya penurunan bobot udema telapak kaki mencit setelah

diberi perlakuan.

60

0

20

40

60

80

100

120

rata-rata

bobot udema

(mg)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

kelompok

Gambar 11. Grafik rata-rata bobot udema telapak kaki mencit akibat karagenin 1%subplantar pada kelompok kontrol dan perlakuan

Keterangan:1 = kelompok kontrol karagenin2 = kelompok kontrol aquadest3 = kelompok kontrol natrium diklofenak4 = kelompok kontrol makuto dewo5 = kelompok kontrol VCO6 = kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewo

dan VCO dengan perbandingan 1:1/4

7 = kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewodan VCO dengan perbandingan 1:1/2

8 = kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewodan VCO dengan perbandingan 1:1



Dari data rata-rata bobot udema setiap kelompok dapat dihitung efek anti-

inflamasinya. Rata-rata efek anti-inflamasi kelompok kontrol dan perlakuan

disajikan pada tabel XI dan grafik efek anti-inflamasinya dapat dilihat pada

gambar 12.

61

Tabel XI. Rata-rata efek anti-inflamasi pada kelompok kontrol dan perlakuan

Kelompok Efek anti-inflamasi (%) ± SEKaragenin 25 mg/kg BB 0.00 ± 2.00Aquadest 25 g/kg BB 4,03 ± 1,46Diklofenak 4,48 mg/kg BB 55,58 ± 2,61Makuto Dewo -32.16 ± 7.92VCO 35,00 ± 0.92Kombinasi perasan daging buah makutodewo dan VCO dengan perbandingan 1:1/4

18,55 ± 2,90

Kombinasi perasan daging buah makutodewo dan VCO dengan perbandingan 1:1/2

24,34 ± 2,81


25,70 ± 3,22


26,09 ± 0,68


42,77 ± 2,61

Dari tabel XI dapat dilihat bahwa kelompok kontrol makuto dewo

memiliki efek anti-inflamasi negatif. Dari gambar 12 juga ditunjukkan bahwa

kelompok kontrol makuto dewo memiliki diagram batang yang berbeda dari

kelompok lainnya, dimana arahnya menuju ke bawah. Hal ini menunjukkan

bahwa perasan daging buah makuto dewo memiliki efek inflamasi yang lebih

besar daripada karagenin. Karagenin dalam penelitian ini merupakan zat pembuat

radang dan digunakan sebagai kontrol. Efek anti-inflamasi dihitung dengan

menggunakan rumus dari metode Langford dkk., dimana karagenin merupakan zat

yang memberikan efek anti-inflamasi sebesar nol. Dari hasil perhitungan, efek

anti-inflamasi dari perasan daging buah makuto dewo memberikan nilai negatif,

sehingga dapat disimpulkan bahwa makuto dewo memiliki kemampuan membuat

radang lebih besar daripada karagenin.

62

-40-30-20-10

0102030405060

efek anti-

inflamasi

(%)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

kelompok

Gambar 12. Grafik rata-rata efek anti-inflamasi pada kelompok kontrol dan perlakuan

Keterangan:1 = kelompok kontrol karagenin2 = kelompok kontrol aquadest3 = kelompok kontrol natrium diklofenak4 = kelompok kontrol makuto dewo5 = kelompok kontrol VCO6 = kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewo






Efek anti-inflamasi pada setiap kelompok kemudian dianalisis dengan uji

Kolmogorov-Smirnov. Hasil analisis tersebut menyatakan bahwa data terdistribusi

secara normal. Untuk mengetahui apakah ada perbedaan efek anti-inflamasi dari

setiap kelompok maka dilakukan uji Anova Satu Arah. Hasil uji Anova Satu Arah

dapat dilihat pada tabel XII.

63

Tabel XII. Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah efek anti-inflamasi kelompok kontrol danperlakuan

Keterangan DF F Probabilitas (p)Efek anti-inflamasi


Hasil uji Anova Satu Arah menyatakan bahwa p < 0,05 sehingga dapat

disimpulkan ada perbedaan efek anti-inflamasi antar kelompok. Analisis

dilanjutkan dengan uji Scheffe untuk melihat apakah perbedaan tersebut bermakna

atau tidak bermakna. Hasil uji Scheffe dapat dilihat pada tabel XIII.

Tabel XIII. Rangkuman hasil uji Scheffe efek anti-inflamasi kelompok kontrol danperlakuan

Dibandingkan dengan kelompokKelp.

I II III IV V VI VII VIII IX XI - TB B B B TB B B B BII TB - B B B TB B B B BIII B B - B B B B B B TBIV B B B - B B B B B BV B B B B - TB TB TB TB TBVI TB TB B B TB - B B B TBVII B B B B TB TB - TB TB TBVIII B B B B TB TB TB - TB TBIX B B B B TB TB TB TB - TBX B B TB B TB B TB TB TB -

Keterangan:I = kelompok kontrol karageninII = kelompok kontrol aquadestIII = kelompok kontrol natrium diklofenakIV = kelompok kontrol makuto dewoV = kelompok kontrol VCOVI = kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewo


VII = kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewodan VCO dengan perbandingan 1:1/2

VIII= kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewodan VCO dengan perbandingan 1:1

IX = kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewodan VCO dengan perbandingan 1:2

X = kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewodan VCO dengan perbandingan 1:4

B = berbeda bermakna (p < 0,05)TB = berbeda tidak bermakna (p > 0,05)

64

Dari tabel XIII dapat dilihat bahwa kontrol karagenin (kelompok I) efek

anti-inflamasinya tidak bermakna dengan kontrol aquadest (kelompok II) dan

dengan kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewo dan

VCO dengan perbandingan 1: 1/4 (kelompok VI). Dapat disimpulkan bahwa

aquadest dan kombinasi perasan daging buah makuto dewo dan VCO dengan

perbandingan 1: 1/4 tidak memiliki efek anti-inflamasi. Aquadest tidak

memberikan pengaruh efek anti-inflamasi sehingga dapat digunakan sebagai

pelarut. Sedangkan kelompok lainnya jika dibandingkan dengan karagenin,

memiliki efek anti-inflamasi, meskipun besarnya berbeda-beda. Hal ini dapat

dilihat dengan adanya penurunan udema pada telapak kaki mencit.

Kelompok kontrol natrium diklofenak (kelompok III) memiliki perbedaan

yang bermakna hampir terhadap semua kelompok, kecuali kelompok perlakuan

kombinasi perasan daging buah makuto dewo dan VCO dengan perbandingan 1:4

(kelompok X). Dapat disimpulkan bahwa kombinasi perasan daging buah makuto

dewo dan VCO dengan perbandingan 1:4 memiliki efek anti-inflamasi yang sama

dengan efek anti-inflamasi natrium diklofenak.

Natrium diklofenak merupakan salah satu obat anti-inflamasi non steroid

dengan mekanisme menurunkan aktivitas enzim siklooksigenase. Mekanisme ini

menghambat sintesis prostaglandin (Anonim, 2003b). Inflamasi dan trauma

memacu metabolisme prostaglandin dan leukotrien dari asam arakhidonat yang

diperantarai enzim siklooksigenase dan lipoksigenase menghasilkan H2O2.

Prostaglandin dan leukotrien adalah mediator yang penting dalam inflamasi.

Selama berlangsung radang, manakala sel fagosit teraktifkan maka akan

65

melepaskan oksigen aktif (O2-; H2O2; OH-) dan asam hipoklorit (HClO) (Wijoyo,

2001). Reaktif radikal ini dapat menyebabkan kerusakan sel dan jaringan secara

langsung melalui degradasi oksidatif dari komponen sel.

Kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewo dan

VCO dengan perbandngan 1:4 memiliki perbedaan yang bermakna dengan

kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewo dan VCO

dengan perbandingan 1: 1/4, namun memiliki perbedaan yang tidak bermakna

dengan kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewo dan

VCO dengan perbandingan 1: 1/2, 1:1, dan 1:2. Berdasarkan hasil analisis tersebut

dapat dikatakan bahwa kombinasi perasan daging buah makuto dewo dan VCO

dengan perbandingan 1: 1/2, 1:1, 1:2, dan 1:4 memiliki efek anti-inflamasi yang

sama, meskipun keefektifannya dibandingkan dengan natrium diklofenak berbeda,

hanya kombinasi perasan daging buah makuto dewo dan VCO dengan

perbandingan 1:4 yang memiliki efek anti-inflamasi yang berbeda tidak bermakna

dengan natrium diklofenak.

Kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewo dan

VCO dengan perbandingan 1: 1/4 memiliki perbedaan yang tidak bermakna dengan

kelompok kontrol karagenin. Sehingga dapat dikatakan bahwa kelompok

perlakuan ini tidak memiliki aktivitas anti-inflamasi.

Efek anti-inflamasi dari kelompok perlakuan kombinasi perasan daging

buah makuto dewo dan VCO meningkat secara berturut-turut dari perbandingan

perasan daging buah makuto dewo dan VCO 1: ¼ (18,55%),1: ½ (24,34%),

1:1(25,70%), 1:2 (26,09%), dan 1:4 (42,77%). Efek anti-inflamasi semakin

66

meningkat dengan semakin banyaknya penambahan VCO dan semakin

berkurangnya jumlah makuto dewo. Jika dilihat dari gambar 12, makuto dewo

justru memiliki kemampuan membuat radang, jadi tidak memiliki efek anti-

inflamasi. Dapat disimpulkan bahwa dalam kombinasi tersebut yang berperan

besar memberikan efek anti-inflamasi adalah VCO.

Minyak kelapa mengandung fosfatida, gums, sterol, dan tokoferol (Syah,

2005). Tokoferol berfungsi sebagai antioksidan alami yang diduga berhubungan

dengan efek anti-inflamasi VCO.

Cara kerja vitamin E sebagai antioksidan adalah dengan menyumbangkan

elektron kepada radikal bebas, atau dapat dikatakan vitamin E akan menangkap

(scavenging) radikal bebas. Mekanisme penangkapan radikal bebas oleh vitamin

E (α-tokoferol) dapat ditunjukkan pada gambar 13.

Vitamin E yang menangkap radikal bebas menjadi vitamin E yang radikal,

namun lebih stabil daripada radikal hidroksil karena kemampuan stabilitas

resonansinya. Hal ini menyebabkan elektron tidak berpasangan yang ada pada

radikal bebas vitamin E terjebak dalam stabilitas resonansi.

67

O

CH3

CH3

CH3

O

H3C

CH2 CH2 CH2 CH

CH3

CH3

H

O

CH3

CH3

CH3

O

H3C

CH2 CH2 CH2 CH

CH3

CH3

Radikal vitamin E

O

CH3

CH3

CH3

O

H3C

CH2 CH2 CH2 CH

CH3

CH3O

CH3

CH3

CH3

O

H3C

CH2 CH2 CH2 CH

CH3

CH3

O

CH3

CH3

CH3

O

H3C

CH2 CH2 CH2 CH

CH3

CH3

O

CH3

CH3

CH3

O

H3C

CH2 CH2 CH2 CH

CH3

CH3

3

3

33

33

OH

Gambar 13. Mekanisme penangkapan radikal bebas oleh vitamin E(Sugianto, wawancara pribadi, 18 Desember 2006)

Dari penelitian ini, diketahui bahwa perasan daging buah makuto dewo

memiliki kemampuan sebagai zat pembuat radang, bahkan kemampuannya lebih

besar daripada karagenin yang digunakan sebagai kontrol. Makuto dewo

mengandung flavonoid. Flavonoid mampu memperbaiki ketidakseimbangan

sistem antioksidan dalam tubuh. Flavonoid atau 1,3-diarilpropan merupakan salah

satu senyawa polifenol. Flavonoid memiliki gugus enol yang mampu menangkap

radikal bebas (zat antara yang toksik). Dengan demikian flavonoid berperan

sebagai inhibitor radikal bebas.

68

Diketahui atom O lebih elektronegatif daripada atom C sehingga memiliki

kecenderungan menarik elektron pada atom H. Tarikan elektron oleh atom O ini

diperkuat adanya cincin benzen yang nermuatan positif. Kondisi ini menyebabkan

atom H dari hidroksil ini mudah putus dan bersifat asam. Kereaktifan flavonoid

berguna untuk mereduksi radikal bebas menjadi molekul netral sehingga aktivitas

radikal bebas dapat dikurangi. Reaksi penangkapan radikal bebas oleh flavonoid

dapat dijelaskan dalam gambar 14.

O

OH

O

O H OH

O

OH

O

O

Gambar 14. Mekanisme reaksi penangkapan radikal bebas oleh flavonoid

Flavonoid yang menangkap radikal bebas menjadi flavonoid yang radikal,

namun lebih stabil daripada radikal hidroksil karena kemampuan stabilitas

resonansinya. Hal ini menyebabkan elektron tidak berpasangan yang ada pada

radikal bebas flavonoid terjebak dalam stabilitas resonansi. Mekanisme resonansi

radikal bebas flavonoid ditunjukkan pada gambar 15.

O

OH

O

O

O

OH

O

O

Gambar 15. Mekanisme resonansi radikal bebas flavonoid

69

Selain itu, radikal bebas flavonoid juga dapat mengalami reaksi

penggabungan (reaksi kopling). Reaksi penggabungan ini menjadikan radikal

bebas flavonoid lebih stabil. Mekanisme penggabungan radikal bebas flavonoid

menjadi bentuk yang lebih stabil ditunjukkan pada gambar 16.

OOH

O

O

O

OH

O

O

O

O

O

HO

O

O O

OH

Gambar16. Mekanisme penggabungan radikal bebas flavonoid

Makuto dewo seharusnya memiliki efek anti-inflamasi karena kandungan

flavonoidnya. Radikal bebas dapat direduksi oleh flavonoid dan dihasilkan radikal

bebas flavonoid yang lebih stabil. Namun, perlu diingat pula bahwa keberadaan

radikal bebas flavonoid yang berlebihan menyebabkan reaktifitasnya juga

berlebihan, akibatnya dapat menyebabkan perasan daging buah makuto dewo

bersifat prooksidan. Jika dibandingkan dengan VCO yang digunakan, perasan

daging buah makuto dewo bukan merupakan produk yang siap dikonsumsi seperti

70

VCO yang tentunya sudah melalui berbagai macam proses sehingga siap dan

aman untuk dikonsumsi.

Makuto dewo juga mengandung racun, terutama di bagian biji buahnya.

Sebuah penelitian yang dilakukan Universitas Gadjah Mada Yogyakarta,

konsumsi biji buah makuto dewo dapat mengakibatkan muntah dan lidah menjadi

mati rasa. Sebenarnya tidak dianjurkan untuk mengkonsumsi buah makuto dewo

secara langsung karena dapat mengakibatkan pingsan. Dimungkinkan, senyawa

toksik dalam biji buah makuto dewo inilah yang membuat perasan daging buah

makuto dewo yang digunakan memiliki aktivitas pembuat radang. Untuk

mengetahui aktivitas inflamasi makuto dewo dan zat toksik yang terkandung

dalam biji makuto dewo, perlu dilakukan penelitian yang lebih spesifik.

Virgin coconut oil dan semua kombinasi perasan daging buah makuto

dewo dan VCO dengan berbagai perbandingan memiliki efek anti-inflamasi

sehingga dapat dibandingkan dengan efek anti-inflamasi natrium diklofenak

sebagai kontrol untuk memperoleh potensi relatif. Perasan daging buah makuto

dewo tidak memiliki efek anti-inflamasi, sehingga tidak dapat dibandingkan

dengan efek anti-inflamasi natrium diklofenak. Data potensi relatif dari VCO dan

kombinasi perasan daging buah makuto dewo dan VCO dapat dilihat pada tabel

XIV.

Virgin coconut oil dan kombinasi perasan daging buah makuto dewo dan

VCO dengan perbandingan 1: ¼, 1: ½, 1:1, 1:2, 1:4 mempunyai potensi relatif

yang lebih rendah daripada natrium diklofenak. Potensi relatif kombinasi perasan

71

daging buah makuto dewo dan VCO meningkat secara berturut-turut dari

perbandingan 1: ¼, 1: ½, 1:1, 1:2, 1:4.

Tabel XIV. Potensi relatif VCO dan kombinasi perasan daging buah makuto dewo danVCO

Kelompok Potensi relatif (%)VCO 62,97

Perasan daging buah makuto dewo danVCO perbandingan 1: ¼

33,38

Perasan daging buah makuto dewo danVCO perbandingan 1: ½

43,79

Perasan daging buah makuto dewo danVCO perbandingan 1: 1

46,24


46,94


76,95

E. Perbandingan Hasil Penelitian dengan Penelitian Lain

Penelitian penambahan VCO terhadap perasan makuto dewo juga

dilakukan dalam kajian efek analgesik dan hepatoprotektif oleh Putra (2006) dan

Kurniawan (2006). Perasan daging buah makuto dewo, VCO, dan kombinasi

keduanya memiliki efek analgesik yang ditandai dengan berkurangnya jumlah

geliat mencit akibat asam asetat setelah diberi perasan daging buah makuto dewo,

VCO, dan kombinasi keduanya (Putra, 2006). Perasan daging buah makuto dewo,

VCO, dan kombinasi keduanya juga memiliki efek hepatoprotektif (Kurniawan,

2006). Perbandingan hasil uji efek anti-inflamasi, proteksi nyeri, dan efek

hepatoprotektif dapat dilihat pada tabel XV dan grafiknya dapat dilihat pada

gambar 17.

72

Tabel XV. Hasil uji efek anti-inflamasi, proteksi nyeri, dan efek hepatoprotektif padakelompok perlakuan

Kelompok Efek anti-inflamasi (%)

Proteksi nyeri(%)

Efek hepatoprotektif(%)

I -32.16 57,14 46,36II 35,00 58,05 85,53III 18,55 61,90 50,29IV 24,34 56,24 38,17V 25,70 63,03 36,29VI 26,09 60,32 45,41VII 42,77 68,71 96,63

Keterangan:1 = kelompok kontrol makuto dewo2 = kelompok kontrol VCO3 = kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewo






Gambar 17 menunjukkan pola yang berbeda antara efek anti-inflamasi,

proteksi nyeri, dan efek hepatoprotektif. Perasan daging buah makuto dewo murni

memiliki efek analgesik dan efek hepatoprotektif yang cukup tinggi, namun tidak

memiliki efek anti-inflamasi. Virgin coconut oil murni memiliki efek anti-

inflamasi, efek analgesik, dan efek hepatoprotektif yang cukup tinggi, bahkan

lebih tinggi daripada perasan daging buah makuto dewo murni. Kombinasi

perasan daging buah makuto dewo dan VCO menunjukkan diagram efek anti-

inflamasi, efek analgesik, dan efek hepatoprotektif yang cenderung naik dan

menunjukkan nilai tertinggi pada kombinasi dengan perbandingan 1:4.

73

-40

-20

0

20

40

60

80

100

efek (%)

1 2 3 4 5 6 7

kelompok perlakuan

efek anti-inflamasi

proteksi nyeri

efek hepatoprotektif

Gambar 17. Grafik perbandingan hasil uji efek anti-inflamasi, proteksi nyeri, dan efekhepatoprotektif pada kelompok perlakuan

Keterangan:1 = kelompok kontrol makuto dewo2 = kelompok kontrol VCO3 = kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewo






Dari ketiga penelitian tersebut dapat disimpulkan bahwa kombinasi

perasan daging buah makuto dewo dan VCO dengan perbandingan 1:4 paling baik

digunakan sebagai anti-inflamasi, analgesik, dan hepatoprotektif sehingga dapat

diajukan sebagai obat hepatitis ideal. Salah satu kriteria obat hepatitis yang baik

adalah dapat memberikan perlindungan terhadap hati (efek hepatoprotektif), dapat

menghilangkan radang (efek anti-inflamasi), dan mempunyai efek analgesik.

74

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat diambil

kesimpulan sebagai berikut:

1. Penambahan virgin coconut oil (VCO) pada perasan daging buah makuto

dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.) mempunyai efek anti-inflamasi

yang lebih besar daripada efek anti-inflamasi VCO murni. Hal ini ditunjukkan

dengan kemampuan kombinasi perasan daging buah makuto dewo dan VCO

dalam mengurangi bobot udema yang ditimbulkan oleh karagenin 1 %.

Perasan daging buah makuto dewo murni tidak memiliki efek anti-inflamasi.

2. Efek anti-inflamasi kombinasi perasan daging buah makuto dewo dan VCO

berdasarkan urutan perbandingan kombinasi: perbandingan 1:¼ (18,55 %);

perbandingan 1:½ (24,34 %); perbandingan 1:1 (25,70 %); perbandingan 1:2

(26,09 %); dan perbandingan 1:4 (42,77 %). Kombinasi perasan daging buah

makuto dewo dan VCO dengan perbandingan 1:4 mempunyai efek anti-

inflamasi paling besar.

75

B. Saran

Untuk melanjutkan penelitian ini maka perlu dilakukan:

1. uji efek anti-inflamasi perasan daging buah makuto dewo dengan

menggunakan metode lain.

2. uji efek anti-inflamasi VCO dengan menggunakan metode lain.

3. uji efek anti-inflamasi kombinasi perasan daging buah makuto dewo dan

VCO dengan menggunakan metode lain.

4. uji efek anti-inflamasi kombinasi perasan daging buah makuto dewo dan VCO

dengan lama masa pemberian yang lebih lama.

5. penentuan dosis efektif VCO dalam kajian efek anti-inflamasi VCO.

6. uji toksisitas akut dan subkronis kombinasi perasan daging buah makuto dewo

dan VCO.

76

DAFTAR PUSTAKA

Anggoro, D.R., 2005, Daya Analgesik Ekstrak Etanol Daging Buah Makuto Dewo(Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.) pada Mencit Betina TerinduksiKimia, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta

Anonim, 1991, Penapisan Farmakologi, Pengujian Fitokimia dan PengujianKlinik, hal. 49, Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alam Pytomedika,Jakarta

Anonim, 1998, Monograph: Quercetin, Alternative Medical Review, 3 (2), 143

Anonim, 2000, Makuto Dewo Penakluk Lever, Trubus, 31, (372), 51-52

Anonim, 2003a, Antioksidan, Radikal Bebas, dan Penuaan, Kompas, 11 Mei 2003

Anonim, 2003b, Drug Information Handbook, 11th Edition, p 406-407, Lexi-Comp Inc., Ohio

Anonim, 2004, Free Radicals and Cancer, http: www.betterlife.com diakses pada30 November 2006

Anonim, 2006, Tocopherol, http: www.wikipedia.com diakses pada 27 November2006

Backer, C.A., and Bakhuizen van den Brink, R.C., 1963, Flora of Java, Vol I, p3-9, 11, 25, 27-29, 507-512, N.V.P. Noorhdroff, Groningen, TheNetherlands.

Backer, C.A., and Bakhuizen van den Brink, R.C., 1965, Flora of Java, Vol II, p171 – 172, 178, N.V.P. Noorhdroff, Groningen, The Netherlands

Cooper, K.H., 2001, Antioxidant Revolution, diterjemahkan oleh Marlia SinggihWibowo, hal. 50, 218, Penerbit Kaifa, Bandung

Diantini, A., dan Safitri, R., 2001, Status Antioksidan Total, dalam SeminarNasional dan Lokakarya Pemahaman Konsep Radikal Bebas dan PerananAntioksidan dalam Meningkatkan Kesehatan Menuju Indonesia Sehat2010, FMIPA, Pusat Penelitian Kesehatan Universitas Padjajaran

Donatus, I.A., 1992, Fitofarmaka Penyakit Hati, Kumpulan Naskah LengkapSimposium Gastro - Hepatologi, Yogyakarta

Gryglewski, R.J., 1977, Some Experimental Models for the Study ofInflammation and Anti-Inflammatory Drugs, in I. L. Bonta, J. Thomson,

http://www.betterlife.com/

http://www.wikipedia.com/

77

and K.Brune, Inflammation: Mechanism and Their Impact on Therapy, p19-21, Birkhaurser Verlag Basel, Rotterdam

Halliwell, B., and Gutteridge, J. M. C., 1999, Free Radicals in Biology andMedicine, 3rd edition, p 36, 229, Oxford University Press, New York

Hanson, G.R., 2000, Analgesic, Antipyretic, and Anti Inflammatory Drugs, inGennaro (Ed.), Remmington: The Science and Practise of Pharmacy, 20th

Edition, p 1456, Lippincott Williams and Wilkins, USA

Hardman, J.G., Limbird, L.E., and Gilman, A.G., 2001, Goodman and Gilman’sthe Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th Edition, p 709, theMcGraw-Hill Companies Inc., New York

Hariyanto, 2003, Efek Hepatoprotektif Infusa Simplisia Daging Buah MakutoDewo (Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.) pada Mencit JantanTerinduksi Karbontetraklorida, Skripsi, Fakultas Farmasi UniversitasSanata Dharma, Yogyakarta

Jain, N.K., Patil, C.S., Singh, A., and Kulkarni, S.K., 2001, a Simple Technique toEvaluate Inflammatory Pain Along With Anti-Inflammatory Studies inCarrageenan-Induced Paw Edema, Indian J. Pharmacol., 33, 114-115

Kurnani, Tb.B., 2001, Radikal Bebas dalam Polutan Lingkungan, dalam SeminarNasional dan Lokakarya Pemahaman Konsep Radikal Bebas dan PerananAntioksidan dalam Meningkatkan Kesehatan Menuju Indonesia Sehat2010, FMIPA, Pusat Penelitian Kesehatan Universitas Padjajaran

Katzung, B.G., 2001 , Basic and Clinical Pharmacology, diterjemahkan olehBagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga, Edisi 8,Buku 2, hal. 449-453, 457, 462, Penerbit Salemba Medika, Jakarta.

Kee, J.L., and Hayes, E.R., 1996, Pharmacology : A Nursing Process Approach,diterjemahkan oleh Peter Anugrah, 1st Edition, 310-321, Penerbit EGC,Jakarta

Kurniawan, T.W. 2007, Pengaruh Penambahan Virgin Coconut Oil (VCO) padaPerasan Daging Buah Makuto Dewo (Phaleria macrocarpa (Scheff.)Boerl.) pada Mencit Putih Betina : Kajian terhadap Efek Hepatoprotektif,Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta

Langford, F.D., Holmes, P.A., and Emele, J.F., 1972, Objective Methods toEvaluation of Analgesic/ Anti Inflammatory Activity, J.Pharm. Sci., 61(1),75-77

78

Linawati, Y., 2002, Efek Hepatoprotektif Infusa Daging Buah Makuto Dewo(Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.) pada Mencit Jantan TerinduksiCCl4, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta

Marissa, L., 2006, Daya Anti-Inflamasi Ekstrak Etanol Daging Buah MakutoDewo (Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.) pada Mencit BetinaTerinduksi Karagenin, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas SanataDharma, Yogyakarta

Maryanto, 1997, Daya Antiinflamasi Infusa Daun Sosor Bebek (Kalanchoepinnata, pers) pada Tikus Putih Jantan, Skripsi, Fakultas FarmasiUniversitas Gadjah Mada, Yogyakarta

Mycek, M.I., Harvey, R. A. dan Champe, P.C., 2001, Lippincoott’s IllustratedReviews: Pharmacology, diterjemahkan oleh Agoes, A., Edisi 2, 404-414,Widya Medika, Jakarta

Ning, H., 2001, Mahkota Dewa OBat Pusaka Para Dewa, 4, Agro Media Pustaka,Jakarta

Pizzorno, J., 1998, Total Wellness Sehat dan Bebas Penyakit, 232-258,Profesional Books, Jakarta, Indonesia

Prasetia, I.N.B. 2003, Efek Hepatoprotektif Infusa Simplisia Daging Buah MakutoDewo (Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.) pada Mencit JantanTerinduksi Parasetamol, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas SanataDharma, Yogyakarta

Price, S.A., and Wilson, L.N., 1992, Pahtophysiology, diterjemahkan oleh PeterAnugerah , Edisi 4, Buku I, hal. 36-57, EGC, Jakarta

Purwandani, Y.L., 2005, Efek Hepatoprotektif Ekstrak Etanol Daging BuahMakuto Dewo (Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.) pada Mencit JantanTerinduksi Parasetamol, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas SanataDharma, Yogyakarta

Puspitasari, E.D., 2006, Daya Anti-Inflamasi Ekstrak Etanol Daging Buah MakutoDewo (Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.) pada Mencit BetinaTerinduksi Formalin, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas SanataDharma, Yogyakarta

Putra, I.M.S.P., 2007, Pengaruh Penambahan Virgin Coconut Oil (VCO) padaPerasan Daging Buah Makuto Dewo (Phaleria macrocarpa (Scheff.)Boerl.) pada Mencit Putih Betina : Kajian terhadap Daya Analgesik,Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta

79

Rang, H.P., Dale, M.M., Ritter, J.M., and Moore, P.K., 2003, Pharmacology, 5th

Edition, p 231-237, 244-250, Bath press, USA

Robbins, S.L., Cotran, R.S., and Kumar, V., 1995, Pocket Companion to RobbinsPathologic Basis of Disease, diterjemahkan oleh Achmad Tjarta, SutisnaHimawan, Kurniawan, Edisi 5, hal 31, 36, 39-41, EGC, Jakarta

Robinson, T., 1991, The Organic Constituents of Higher Plants, diterjemahkanoleh Kosasih Padmawinata, Edisi 6, hal. 191-216, ITB, Bandung

Sander, M.A., 2003, Atlas Patologi Anatomi, hal 12, UMM Press, Malang

Setiati, S., 2003, Radikal Bebas, Antioksidan, dan Proses Menua, Medika, No. 6,366-369, Jakarta

Sisilia, 2001, Efek Hepatoprotektif Air Perasan Buah Makuto Dewo (Phaleriamacrocarpa (Scheff.) Boerl.) pada Mencit Jantan Terinduksi Parasetamol,Skripsi, Fakultas Farmasi Univwersitas Sanata Dharma, Yogyakarta

Sitompul, B,. 2003, Antioksidan dan Penyakit Aterosklerosis, Medika, No. 6, 373-377, Jakarta

Spector, W.G., and Spector, T.D., 1989, An Introduction to General Pathology,diterjemahkan oleh Soetjipto, Harsoyo, Amelia Hana, and Pudji Astuti,Edisi 3, hal 71-77, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta

Subarnas, A., 2001, Komponen Aktif Antioksidan dalam Bahan Alam, dalamSeminar Nasional dan Lokakarya Pemahaman Konsep Radikal Bebas danPeranan Antioksidan dalam Meningkatkan Kesehatan Menuju IndonesiaSehat 2010, FMIPA, Pusat Penelitian Kesehatan Universitas Padjajaran

Sugianto, E. (wawancara pribadi, 18 Desember 2006)

Sukartin, K. dan Sitanggang M., 2005, Gempur Penyakit dengan VCO, 14-20, 36-37, Agro Media Pustaka, Jakarta

Suleyman, H., Demircan, B., Karagoz, Y., Ozta, N., and Suleyman, B., 2004,Anti-Inflammatory Effects of Selective COX-2 Inhibitors, Pol. J.Pharmacol., 56, 775-780

Sutarmi, dan Rozaline, H. 2005, Taklukkan Penyakit dengan VCO, hal. 5-15,Penebar Swadaya, Jakarta

Syah, A.N.A., 2005, Perpaduan Sang Penakluk Penyakit VCO + Minyak BuahMerah, 14-18, 26-42, Agro Media Pustaka, Jakarta

80

Tjay, T.H., dan Rahardja, K., 2002, Obat-Obat Penting: Khasiat, Penggunaan,dan Efek-Efek Sampingnya, Edisi V, hal. 308-313, Penerbit PT. ElexMedia Komputindo Kelompok Gramedia, Jakarta

Underwood, J.C.E., 1996, General and Systematic Pathology, diterjemahkan olehSarjadi, Edisi 2, Volume 1, hal. 232-234, Penerbit EGC, Jakarta

Vogel, H.G., 2002, Drug Discovery & Evaluation: Pharmalogical Assays, 2nd

Edition, p 725, 751-761, Springer, New York

Ward, P.A., 1993, Inflamasi, in Bellanti, J.A., Immunology III, diterjemahkan olehSamik Wahab, hal 226, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta

Wibowo, S., dan Gofir, A., 2001, Farmakologi dalam Neurologi, Farmakoterapi,Edisi I, 113-115, Penerbit Salemba Medika, Jakarta

Wijayanti, I., 2002, Efek Hepatoprotektif Air Perasan Buah Makuto Dewo(Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.) pada Mencit Jantan TerinduksiCCl4, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta

Wijoyo, Y., 2001, Antaraksi Sari Wortel (Daucus Carota L.) – Parasetamol:Kajian terhadap Kehepatoksikan dan Kinerja Toksikinetika Parasetamolpada Tikus, Tesis, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta

Williamson, E.M., Okpako, D.T., and Evans, F.J., 1996, Pharmacological Methodin Phytotherapy Research Volume 1: Selection, Preparation, andPharmacological Evaluation of Plant Material, 131-136, John Wileyand Sons Ltd., England

Wilmana, P.F., 1995, Analgesik Anti-inflamasi Nonsteroid dan Obat Pirai, dalamGaniswara, S.G. (Editor), Farmakologi dan Terapi, Edisi IV, hal 207-211,Bagian Farmakologi-Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta

Winarto, W.P., 2005, Mahkota Dewa: Budi Daya & Pemanfaatan untuk Obat, 1-11, Penebar Swadaya, Jakarta

Yudanti, G.P., 2005, Efek Hepatoprotektif Ekstrak Etanol Daging Buah MakutoDewo (Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.) pada Mencit JantanTerinduksi CCl4, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma,Yogyakarta

81

LAMPIRAN

Lampiran 1. Foto virgin coconut oil (VCO) merek Vicol produksi CV KelapaMas, Yogyakarta

82

Lampiran 2. Foto buah makuto dewo

83

Lampiran 3. Foto alat homogenizer merek Yastral GmbH D-7801 Dottingen tipe :X 1020

85

Lampiran 5. Sertifikat Analisis Diklofenak-Na (BP 98)

86

Lampiran 6. Perhitungan konsentrasi natrium diklofenak.

Perhitungan konsentrasi natrium diklofenak dengan mengasumsikan volume

pemberian 0,5 ml dan berat badan 20 gram adalah sebagai berikut:

a. Dosis 3,36 mg/kgBB

Konsentrasi natrium diklofenak =V

BBxD

=ml0,5

mg0,02xmg/kgBB3,36= 0,13 mg/ml

a. Dosis 4,48 mg/kgBB


BBxD

=ml0,5


b. Dosis 3,36 mg/kgBB


BBxD

=ml0,5


87

Lampiran 7. Skema kerja kelompok perlakuan.

70 ekor mencit dibagi 10 kelompok

Kel 2 Kel 3 Kel 4 Kel 5 Kel 6 Kel 7 Kel 9Kel 8

Diberiaquadest

Diberinatrium

diklofenak

Diberi kombinasi VCO dan perasan daging buah makutodewo perbandingan 1:1/4, 1:1/2, 1:1, 1:2, 1:4

Injeksi subplantar karagenin 1%

Kedua kaki dipotong pada sendi torsocrural

ditimbang

3 jam kemudian

15 menitkemudian

DiberiMakutodewo

Kel10Kel 1

DiberiVCO

88

Keterangan lampiran 7 :

1 = kelompok kontrol karagenin2 = kelompok kontrol aquadest3 = kelompok kontrol natrium diklofenak4 = kelompok kontrol makuto dewo5 = kelompok kontrol VCO6 = kelompok perlakuan kombinasi perasan daging buah makuto dewo






89

Lampiran 8. Contoh perhitungan % efek anti-inflamasi dan potensi relatifterhadap natrium diklofenak

Contoh perhitungan % efek anti-inflamasi pada kelompok perlakuan kombinasi

perasan daging buah makuto dewo dan VCO dengan perbandingan 1:4 adalah:

% daya anti-inflamasi =U

DU x 100%

Diketahui:

U = 81,10 mg

D = 46,40 mg

% daya anti-inflamasi =10,81

40,4610,81 x 100%

= 42,79 %

Contoh perhitungan % potensi relatif kelompok perlakuan kombinasi perasan

daging buah makuto dewo dan VCO dengan perbandingan 1:4 terhadap natrium

diklofenak:


DAd

DApx 100%

Diketahui:

Dap = 42,79 %

Dad = 55,61 %


61,55

79,42x 100%

= 76,95 %

90

Lampiran 9. Data bobot udema kaki mencit pada orientasi selang waktupemotongan kaki

Bobot kaki mencit (g) pada selang waktu (jam)Mencit Keterangan

1 2 3 4Kaki kiriKaki kanan

0,21030,1664

0,20970,1508

0,29040,2107

0,27870,19681

Bobot udema 0,0439 0,0589 0,0797 0,0819Kaki kiriKaki kanan

0,19830,1579

0,17690,1192

0,22260,1477

0,23440,15492


0,20380,1636

0,23350,1781

0,18650,1079

0,20350,11793

Bobot udema 0,0402 0,0554 0,0786 0,0856Rata-rata bobot udema 0,0415 0,0573 0,0777 0,0823

Lampiran 10. Data bobot udema kaki mencit pada orientasi dosis efektif natriumdiklofenak

Bobot kaki mencit (g) akibat pemberian natriumdiklofenak pada dosis tertentu (mg/kgBB) sebelum

injeksi karagenin 1% subplantarMencit Keterangan

3,36 4,48 5,60Kaki kiriKaki kanan

0,26370,2110

0,20450,1627

0,21870,15811

Bobot udema 0,0527 0,0418 0,0606Kaki kiriKaki kanan

0,20800,1529

0,17130,1315

0,23550,17422

Bobot udema 0,0551 0,0398 0,0613Kaki kiriKaki kanan

0,19530,1391

0,19320,1579

0,20430,14523

Bobot udema 0,0562 0,0353 0,0591Rata-rata bobot udema 0,0547 0,0390 0,0603

91

Lampiran 11. Data bobot udema kaki mencit pada orientasi selang waktupemberian natrium diklofenak

Bobot kaki mencit (g) akibat pemberian natriumdiklofenak pada selang waktu tertentu (menit)

sebelum injeksi karagenin 1% subplantarMencit Keterangan

15 30 45 60Kaki kiriKaki kanan

0,18620,1450

0,14990,1062

0,18590,1360

0,18820,12671


0,26030,2262

0,22150,1844

0,19090,1328

0,19490,13752


0,14670,1085

0,21310,1696

0,20800,1456

0,19850,13953

Bobot udema 0,0382 0,0435 0,0624 0,0590Rata-rata bobot udema 0,0378 0,0414 0,0568 0,0593

92

Lampiran 12. Data bobot udema kaki mencit kelompok kontrol dan kelompok perlakuan

Bobot udema (g) pada kelompok:Kombinasi perasan VCO dan

daging buah makuto dewo dandengan perbandingan

Men-cit

Bobot(mg)

Kara-genin25mg/kgBB

Aqua-dest25g/

kgBB

Diklo-fenak

4,48mg/kgBB

VCOMakutoDewo

1:4

11:

2

11:1 1:2 1:4

Kaki kiriKaki kanan

0,25750,1788

0,23260,1542

0,14670,1804

0,20680,1563

0,30230,1847

0,20180,1294

0,26370,2088

0,22580,1632

0,23440,1725

0,21630,17481

Bobot udema 0,0787 0,0784 0,0337 0,0505 0,1176 0,0724 0,0549 0,0626 0,0619 0,0415Kaki kiriKaki kanan

0,25670,1680

0,20740,1351

0,19180,1507

0,19470,1408

0,27900,1781

0,22020,1436

0,22600,1599

0,21190,1560

0,22260,1625

0,23350,18812


0,20020,1218

0,24450,1660

0,20270,1609

0,21230,1570

0,27500,1805

0,22550,1647

0,23290,1765

0,21880,1636

0,22000,1615

0,22000,16833


0,26030,1750

0,22120,1423

0,19250,1497

0,20850,1569

0,26500,1746

0,21210,1457

0,23700,1705

0,21240,1548

0,21240,1531

0,21030,17004


0,25190,1706

0,22520,1445

0,18750,1565

0,22370,1729

0,32170,1984

0,20380,1436

0,26590,1973

0,21010,1543

0,23360,1757

0,20380,15395


0,25040,1724

0,23400,1530

0,18820,1577

0,20510,1531

0,28340,1912

0,20910,1455

0,23550,1729

0,22340,1713

0,21870,1576

0,19830,14396


0,25120,1736

0,25040,1754

0,19490,1636

0,21660,1617

0,30880,1765

0,22470,1623

0,26500,2106

0,23120,1620

0,20910,1483

0,20360,16197

Bobot udema 0,0776 0,0750 0,0313 0,0549 0,1323 0,0624 0,0544 0,0692 0,0608 0,0417Udema rata-rata 0,0811 0,0778 0,0360 0,0527 0,1072 0,0661 0,0614 0,0603 0,0599 0,0464

93

Lampiran 13. Contoh hasil uji statistik uji Kolmogorov-Smirnov, uji Anova Satuarah, dan uji Scheffe dengan taraf kepercayaan 95% data kelompokkontrol dan perlakuan beserta cara interpretasinya

NPar Tests

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

persen dayaanti inflamasi

N 70

Mean 19.9844Normal Parameters(a,b)

Std. Deviation 24.95962

Absolute .116

Positive .072

Most ExtremeDifferences

Negative -.116

Kolmogorov-Smirnov Z .975

Asymp. Sig. (2-tailed) .298

a Test distribution is Normal.b Calculated from data.

Cara interpretasi:

Uji Kolmogorov Smirnov ini digunakan untuk mengetahui kenormalan distribusi

data. Data terdistribusi normal jika signifika > 0,05 dan data terdistribusi tidak

normal jika signifikan < 0,05.

OnewayDescriptives

persen efek anti inflamasi

N MeanStd.

DeviationStd.Error

95% ConfidenceInterval for Mean

Minimum

Maximum

LowerBound

UpperBound

karagenin 7 -.0529 5.28800 1.99868 -4.9434 4.8377 -9.37 4.32

aquades 7 4.0329 3.86042 1.45910 .4626 7.6031 .12 10.85

diklofenak 7 55.5771 6.91190 2.61245 49.1847 61.9696 47.23 62.39

VCO 7 35.0000 2.42273 .91570 32.7594 37.2406 31.81 37.73

Makuto Dewo 7 -32.1643 20.95712 7.92105 -51.5464 -12.7822 -63.13 -11.47

perbandingan 1:1/4 7 18.5500 7.68081 2.90307 11.4464 25.6536 5.55 25.77

perbandingan 1:1/2 7 24.3443 7.42719 2.80721 17.4753 31.2133 15.41 32.92

perbandingan 1:1 7 25.7014 8.51944 3.22005 17.8223 33.5806 14.55 35.76

perbandingan 1:2 7 26.0871 1.78922 .67626 24.4324 27.7419 23.67 28.61

perbandingan 1:4 7 42.7686 6.91516 2.61369 36.3731 49.1640 32.92 50.31

Total 70 19.9844 24.95962 2.98324 14.0330 25.9358 -63.13 62.39

94

Test of Homogeneity of Variances


LeveneStatistic df1 df2 Sig.

13.826 9 60 .000

ANOVA


Sum ofSquares df Mean Square F Sig.

Between Groups 38344.970 9 4260.552 55.084 .000

Within Groups 4640.820 60 77.347

Total 42985.790 69

Cara interpretasi:

Uji Anova Satu Arah digunakan untuk mengetahui apakah ada perbedaan diantara

setiap kelompok. Jika signifikan yang diperoleh < 0,05 berarti ada perbedaan

diantara kelompok dan analisis data dapat dilanjutkan ke uji Scheffe untuk

mengetahui perbedaan tersebut bermakna atau tidak secara statistik. Jika

signifikan yang diperoleh > 0,05 berarti tidak ada perbedaan antar kelompok.

95

Post Hoc TestsMultiple Comparisons

Dependent Variable: persen daya anti inflamasi

Scheffe

-4.08571 4.70097 1.000 -24.2292 16.0578

-55.63000* 4.70097 .000 -75.7735 -35.4865

-35.05286* 4.70097 .000 -55.1963 -14.9094

32.11143* 4.70097 .000 11.9679 52.2549

-18.60286 4.70097 .100 -38.7463 1.5406

-24.39714* 4.70097 .005 -44.5406 -4.2537

-25.75429* 4.70097 .002 -45.8978 -5.6108

-26.14000* 4.70097 .002 -46.2835 -5.9965

-42.82143* 4.70097 .000 -62.9649 -22.6779

4.08571 4.70097 1.000 -16.0578 24.2292

-51.54429* 4.70097 .000 -71.6878 -31.4008

-30.96714* 4.70097 .000 -51.1106 -10.8237

36.19714* 4.70097 .000 16.0537 56.3406

-14.51714 4.70097 .405 -34.6606 5.6263

-20.31143* 4.70097 .046 -40.4549 -.1679

-21.66857* 4.70097 .023 -41.8121 -1.5251

-22.05429* 4.70097 .019 -42.1978 -1.9108

-38.73571* 4.70097 .000 -58.8792 -18.5922

55.63000* 4.70097 .000 35.4865 75.7735

51.54429* 4.70097 .000 31.4008 71.6878

20.57714* 4.70097 .041 .4337 40.7206

87.74143* 4.70097 .000 67.5979 107.8849

37.02714* 4.70097 .000 16.8837 57.1706

31.23286* 4.70097 .000 11.0894 51.3763

29.87571* 4.70097 .000 9.7322 50.0192

29.49000* 4.70097 .000 9.3465 49.6335

12.80857 4.70097 .596 -7.3349 32.9521

35.05286* 4.70097 .000 14.9094 55.1963

30.96714* 4.70097 .000 10.8237 51.1106

-20.57714* 4.70097 .041 -40.7206 -.4337

67.16429* 4.70097 .000 47.0208 87.3078

16.45000 4.70097 .226 -3.6935 36.5935

10.65571 4.70097 .816 -9.4878 30.7992

9.29857 4.70097 .911 -10.8449 29.4421

8.91286 4.70097 .931 -11.2306 29.0563

-7.76857 4.70097 .971 -27.9121 12.3749

-32.11143* 4.70097 .000 -52.2549 -11.9679

-36.19714* 4.70097 .000 -56.3406 -16.0537

-87.74143* 4.70097 .000 -107.8849 -67.5979

-67.16429* 4.70097 .000 -87.3078 -47.0208

-50.71429* 4.70097 .000 -70.8578 -30.5708

-56.50857* 4.70097 .000 -76.6521 -36.3651

-57.86571* 4.70097 .000 -78.0092 -37.7222

-58.25143* 4.70097 .000 -78.3949 -38.1079

-74.93286* 4.70097 .000 -95.0763 -54.7894

18.60286 4.70097 .100 -1.5406 38.7463

14.51714 4.70097 .405 -5.6263 34.6606

-37.02714* 4.70097 .000 -57.1706 -16.8837

-16.45000 4.70097 .226 -36.5935 3.6935

50.71429* 4.70097 .000 30.5708 70.8578

-5.79429 4.70097 .996 -25.9378 14.3492

-7.15143 4.70097 .983 -27.2949 12.9921

-7.53714 4.70097 .976 -27.6806 12.6063

-24.21857* 4.70097 .006 -44.3621 -4.0751

24.39714* 4.70097 .005 4.2537 44.5406

20.31143* 4.70097 .046 .1679 40.4549

-31.23286* 4.70097 .000 -51.3763 -11.0894

-10.65571 4.70097 .816 -30.7992 9.4878

56.50857* 4.70097 .000 36.3651 76.6521

5.79429 4.70097 .996 -14.3492 25.9378

-1.35714 4.70097 1.000 -21.5006 18.7863

-1.74286 4.70097 1.000 -21.8863 18.4006

-18.42429 4.70097 .107 -38.5678 1.7192

25.75429* 4.70097 .002 5.6108 45.8978

21.66857* 4.70097 .023 1.5251 41.8121

-29.87571* 4.70097 .000 -50.0192 -9.7322

-9.29857 4.70097 .911 -29.4421 10.8449

57.86571* 4.70097 .000 37.7222 78.0092

7.15143 4.70097 .983 -12.9921 27.2949

1.35714 4.70097 1.000 -18.7863 21.5006

-.38571 4.70097 1.000 -20.5292 19.7578

-17.06714 4.70097 .182 -37.2106 3.0763

26.14000* 4.70097 .002 5.9965 46.2835

22.05429* 4.70097 .019 1.9108 42.1978

-29.49000* 4.70097 .000 -49.6335 -9.3465

-8.91286 4.70097 .931 -29.0563 11.2306

58.25143* 4.70097 .000 38.1079 78.3949

7.53714 4.70097 .976 -12.6063 27.6806

1.74286 4.70097 1.000 -18.4006 21.8863

.38571 4.70097 1.000 -19.7578 20.5292

-16.68143 4.70097 .209 -36.8249 3.4621

42.82143* 4.70097 .000 22.6779 62.9649

38.73571* 4.70097 .000 18.5922 58.8792

-12.80857 4.70097 .596 -32.9521 7.3349

7.76857 4.70097 .971 -12.3749 27.9121

74.93286* 4.70097 .000 54.7894 95.0763

24.21857* 4.70097 .006 4.0751 44.3621

18.42429 4.70097 .107 -1.7192 38.5678

17.06714 4.70097 .182 -3.0763 37.2106

16.68143 4.70097 .209 -3.4621 36.8249

(J) kelompokaquades

diklofenak

VCO

Makuto Dewo

perbandingan 1:1/4

perbandingan 1:1/2

perbandingan 1:1

perbandingan 1:2

perbandingan 1:4

karagenin

diklofenak

VCO

Makuto Dewo

perbandingan 1:1/4

perbandingan 1:1/2

perbandingan 1:1

perbandingan 1:2

perbandingan 1:4

karagenin

aquades

VCO

Makuto Dewo

perbandingan 1:1/4

perbandingan 1:1/2

perbandingan 1:1

perbandingan 1:2

perbandingan 1:4

karagenin

aquades

diklofenak

Makuto Dewo

perbandingan 1:1/4

perbandingan 1:1/2

perbandingan 1:1

perbandingan 1:2

perbandingan 1:4

karagenin

aquades

diklofenak

VCO

perbandingan 1:1/4

perbandingan 1:1/2

perbandingan 1:1

perbandingan 1:2

perbandingan 1:4

karagenin

aquades

diklofenak

VCO

Makuto Dewo

perbandingan 1:1/2

perbandingan 1:1

perbandingan 1:2

perbandingan 1:4

karagenin

aquades

diklofenak

VCO

Makuto Dewo

perbandingan 1:1/4

perbandingan 1:1

perbandingan 1:2

perbandingan 1:4

karagenin

aquades

diklofenak

VCO

Makuto Dewo

perbandingan 1:1/4

perbandingan 1:1/2

perbandingan 1:2

perbandingan 1:4

karagenin

aquades

diklofenak

VCO

Makuto Dewo

perbandingan 1:1/4

perbandingan 1:1/2

perbandingan 1:1

perbandingan 1:4

karagenin

aquades

diklofenak

VCO

Makuto Dewo

perbandingan 1:1/4

perbandingan 1:1/2

perbandingan 1:1

perbandingan 1:2

(I) kelompokkaragenin

aquades

diklofenak

VCO

Makuto Dewo

perbandingan 1:1/4

perbandingan 1:1/2

perbandingan 1:1

perbandingan 1:2

perbandingan 1:4

MeanDifference

(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound

95% Confidence Interval

The mean difference is significant at the .05 level.*.

96

Cara interpretasi:

Terjadi perbedaan yang bermakna secara statistik jika signifikan < 0,05. Hal ini

dapat terlihat dengan adanya tanda bintang (*) pada mean difference. Jika

signifikan > 0,05 berarti perbedaan tersebut tidak bermakna secara statistik.

Homogeneous Subsetspersen efek anti inflamasi

Scheffe

Subset for alpha = .05

kelompok N 1 2 3 4 5

Makuto Dewo 7 -32.1643

karagenin 7 -.0529

aquades 7 4.0329

perbandingan 1:1/4 7 18.5500 18.5500

perbandingan 1:1/2 7 24.3443 24.3443

perbandingan 1:1 7 25.7014 25.7014

perbandingan 1:2 7 26.0871 26.0871

VCO 7 35.0000 35.0000

perbandingan 1:4 7 42.7686 42.7686

diklofenak 7 55.5771

Sig. 1.000 .100 .226 .107 .596

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.a Uses Harmonic Mean Sample Size = 7.000.

97

BIOGRAFI PENULIS

Vera Rosiana lahir pada tanggal 18 Februari 1985 di

Purwokerto, merupakan anak pertama dari pasangan

Maman Hidayat dan Patricia Liem Pi An dan

merupakan kakak dari seorang adik laki-laki. Penulis

skripsi berjudul “Pengaruh Penambahan Virgin

Coconut Oil (VCO) pada Perasan Daging Buah

Makuto Dewo (Phaleria macrocarpa (Scheff.)

Boerl.) pada Mencit Putih Betina : Kajian Terhadap

Efek Anti-Inflamasi” menempuh pendidikan taman kanak-kanak di TK Santo

Yosef Purwokerto pada tahun 1989 dan kemudian melanjutkan pendidikan di SD

Santo Yosef Purwokerto pada tahun 1991 sampai dengan tahun 1997. Pada tahun

itu pula penulis melanjutkan pendidikan di SLTP Susteran Purwokerto hingga

tahun 2000. Setamat SLTP, penulis melanjutkan studi di SMU Stella Duce 1

Yogyakarta dan memperoleh ijazah SMU-nya pada tahun 2003. Penulis menjadi

mahasiswa Fakultas Farmasi Sanata Dhama Yogyakarta angkatan 2003. Selama

menjadi mahasiswa farmasi, penulis memiliki pengalaman sebagai asisten

praktikum farmasi, antara lain praktikum Farmasi Fisika, FTS Solid, FTS Liquid

Semi Solid, Toksikologi, dan Kimia Analisis Instrumen. Selain itu, penulis juga

memiliki beberapa pengalaman berorganisasi selama masa kuliah, antara lain

sebagai sekretaris dalam panitia ”TITRASI” tahun 2004.

pengaruh penambahan virgin coconut oil (vco) … · contoh hasil uji statistik uji...

Documents