i

PENGARUH KOMBINASI 2,4-DIKLOROFENOKSIASETAT DAN 6-BENZYLAMINOPURIN UNTUK MENINGKATKAN

KEBERHASILAN INDUKSI KALUS EKSPLAN DAUN BINAHONG (Anredera cordifolia)

SKRIPSI

Diajukan Untuk Memenuhi Sebagian Syarat Mencapai Derajat Strata Satu (S-1)

Oleh :

ALFIAN DENI RULIANTO 1504020020

PROGRAM STUDI AGROTEKNOLOGI

FAKULTAS PERTANIAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

2019

ii

Pengaruh Kombinasi 2,4-Diklorofenoksiasetat…, Alfian Deni Rulianto, Fakultas Pertanian UMP, 2019

iii

HALAMAN PENGESAHAN

Pengaruh Kombinasi 2,4-Diklorofenoksiasetat…, Alfian Deni Rulianto, Fakultas Pertanian UMP, 2019

iv

Pengaruh Kombinasi 2,4-Diklorofenoksiasetat…, Alfian Deni Rulianto, Fakultas Pertanian UMP, 2019

v

MOTTO

“Esensi dari menjadi manusia adalah ketika seseorang tidak mencari kesempurnaan” –George Orwell

“Terus berusaha untuk yang terbaik dan selalu berdoa”

Pengaruh Kombinasi 2,4-Diklorofenoksiasetat…, Alfian Deni Rulianto, Fakultas Pertanian UMP, 2019

vi

PERSEMBAHAN

Puji syukur kepada Allah SWT atas segala rahmat dan anugrahNya

sehingga penulis mampu menyelesaikan skripsi ini. Shalawat dan salam semoga selalu tercurahkan kepada Baginda Nabi

Muhammad SAW.

Karya ini saya persembahkan untuk :

Ibu Rumiati dan Bapak Juli Suyatno, terimakasih atas do’a, motivasi, pengorbanan dan kasih sayang yang diberikan, semoga Allah

membalasnya dengan yang lebih baik. Untuk AdikkuHandika Rizal dan keluargaku, terimakasih atas do’a

dan dukungannya semoga kebaikan selalu menyertai kita semua.

Untuk temanku wahyu, momi, lili, vindi, tangkas, trimu, teguh yang telah banyak membantu dan mendukung baik dalam menyelesaikan

skripsi.

Untuk semua Teman-teman Agroteknologi 2015, terimakasih atas kebersamaan ini dan semoga tetap terjalin silaturahmi diantara kita

semua.

Untuk Almamaterku Universitas Muhammadiyah Purwokerto semoga tetap menjadi universitas yang unggul, modern dan islami.

Pengaruh Kombinasi 2,4-Diklorofenoksiasetat…, Alfian Deni Rulianto, Fakultas Pertanian UMP, 2019

vii

Alfian Deni Rulianto, 2019. Pengaruh Kombinasi 2,4-Diklorofenoksiasetat dan 6-Benzylaminopurin untuk Meningkatkan Keberhasilan Induksi Kalus Eksplan Daun Binahong (Anredera cordifolia). Pembimbing: Anis Shofiyani, S.P.,M.P. dan Hamami Alfasani D., S.Si, M.Si.

RINGKASAN

Binahong merupakan jenis tanaman yang dimanfaatkan untuk obat tradisional. Ekstraksi senyawa metabolit sekunder dari kalus tanaman binahong lebih efektif dibandingkan dari tanaman. Faktor yang dapat mempengaruhi pembentukan kalus diantaranya yaitu, jaringan atau organ yang digunakan sebagai eksplan, zat pengatur tumbuh, komposisi medium, dan faktor lingkungan. Persyaratan minimal yang dibutuhkan untuk menumbuhkan kalus adalah penyediaan media yang sesuai bagi setiap jenis tanaman yang dikulturkan. Zat pengatur tumbuh dan jenis eksplan berperan pula dalam keberhasilan induksi kalus. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh zat pengatur tumbuh maupun kombinasi 2,4-D dan BAP terhadap induksi kalus daun binahong. Perlakuan disusun dalam 12 kombinasi menggunakan RAL faktorial dengan faktor pertama konsentrasi 2,4-D yaitu 0 ppm, 1 ppm, 2 ppm, 3 ppm dan faktor kedua konsentrasi BAP 0 ppm, 0,5 ppm, 1 ppm. Semua variabel pengamatan diamati selama 49 HST. Data di analisis dengan menggunakan analisis ragam kemudian dilakukan uji lanjut DMRT pada taraf 5% untuk variabel waktu induksi kalus, persentase pembentukan kalus, persentase browning, sumber kontaminasi dan persentase kontaminasi. Variabel tekstur dan warna kalus dilakukan dengan analisis deskriptif kualitatif. Hasil penelitian menunjukan 2,4-D dan BAP berpengaruh secara mandiri pada variabel waktu induksi kalus. Kombinasi zat pengatur tumbuh 2,4-D 1 ppm dan BAP 1 ppm mampu menginduksi kalus paling baik terhadap rata-rata waktu induksi kalus yaitu pada 7,33 hari setelah tanam dengan kalus bertekstur remah dan berwarna putih. Tidak terjadi interaksi antara 2,4-D dan BAP terhadap induksi kalus eksplan daun binahong pada semua variabel.

Kata kunci : Kultur jaringan, Kalus, Daun binahong, 2,4-D, BAP

Pengaruh Kombinasi 2,4-Diklorofenoksiasetat…, Alfian Deni Rulianto, Fakultas Pertanian UMP, 2019

viii

Alfian Deni Rulianto, 2019. The Effect of 2.4-Dichlorophenoxyacetic and 6-Benzylaminopurine Combination to Increase the Success of Explant Callus Induction of Binahong Leaf (Anredera cordifolia). Supervisor: Anis Shofiyani, S.P.,M.P. and Hamami Alfasani D., S.Si, M.Si.

SUMMARY

Binahong is a type of plant that is used for traditional medicine. Extraction of secondary metabolites from the plants is more effective than from its original plants. Factors that can affect callus formation include tissue or organs used as explants, plant growth substance, medium composition, and environmental factors. The minimum requirement needed to grow callus is the provision of suitable media for each type of plant that is cultured. Plant growth substance and types of explants also play a role in the success of callus induction. This study aims to determine the effect of plant growth substance and the combination of 2,4-D and BAP on callus induction of Binahong leaves. The treatments were arranged in 12 combinations using factorial RAL with the first factor 2,4-D concentration of 0 ppm, 1 ppm, 2 ppm, 3 ppm and the second factor was BAP concentration of 0 ppm, 0.5 ppm, 1 ppm. All observational variables were observed during 49 HST. Data were analyzed using analysis of variance and then carried out further tests DMRT at 5% level for callus induction time variables, callus formation percentage, browning percentage, source of contamination and percentage of contamination. Callus texture and color variables were performed with qualitative descriptive analysis. The results showed 2,4-D and BAP had an independent effect on callus induction time variables. The combination of plant growth substance 2.4-D 1 ppm and BAP 1 ppm is able to induce the best callus to the average callus induction time, which is at 7.33 days after planting with crumb textured and white callus. There was no interaction between 2.4-D and BAP on the callus induction of Binahong leaf explants on all variables.

Keywords: tissue culture, callus, Binahong leaves, 2.4-D, BAP

Pengaruh Kombinasi 2,4-Diklorofenoksiasetat…, Alfian Deni Rulianto, Fakultas Pertanian UMP, 2019

ix

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, karena atas berkat

rahmat dan karunia-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan naskah penelitian

ini dengan judul “Pengaruh kombinasi 2,4-Diklorofenoksiasetat dan 6-

benzylaminopurin untuk meningkatkan keberhasilan induksi kalus eksplan

daun binahong (Anredera cordifolia)”.

Keberhasilan penyusunan skripsi ini tidak akan terwujud dan terselesaikan

dengan baik tanpa ada bantuan, bimbingan, dorongan serta yang tak terhingga

nilainya dari beberapa pihak baik secara materil maupun spiritual. Dalam

kesempatan ini dengan segala kerendahan dan ketulusan hati, penulis

mengucapkan terimakasih yang tak terhingga kepada:

1. Kedua orang tua penulis yang senantiasa mendukung baik secara moril

maupun materi.

2. Bapak Ir. Bambang Nugroho, M.P., selaku Dekan Fakultas Pertanian,

Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah memberi izin untuk

melaksanakan penelitian ini.

3. Ibu Oetami Dwi Hajoeningtijas, S.P.,M.P. selaku Ketua Program Studi

Agroteknologi Fakultas Pertanian yang telah memberi izin dan dukungan yang

diberikan dalam melaksanakan penelitian ini.

4. IbuAnis Shofiyani, S.P.,M.P. selaku dosen pembimbing I yang selalu sabar

memberikan bimbingan, saran dan pengarahan hingga penulis dapat

menyelesaikan penyusunan naskah penelitian ini.

Pengaruh Kombinasi 2,4-Diklorofenoksiasetat…, Alfian Deni Rulianto, Fakultas Pertanian UMP, 2019

x

5. Bapak Hamami Alfasani D., S.Si., M.Si. selaku dosen pembimbing II yang

selalu sabar dalam memberikan bimbingan, saran dan pengarahan hingga

penulis dapat menyelesaikan penyusunan naskah penelitian ini.

6. Bapak Ir. Aman Suyadi, M.P. selaku dosen penelaahyang selalu sabar dalam

memberikan pengarahan dan saran hingga penulis dapat menyelesaikan

penyusunan naskah ini dengan baik.

7. Serta semua pihak yang telah membantu baik secara langsung maupun tidak

langsung dalam menyelesaikan naskah penelitian ini.

Penyusun menyadari sepenuhnya bahwa naskah penelitian ini masih banyak

kekurangan dan jauh dari kesempurnaan. Oleh karena itu, penyusun

mengharapkan kritik dan saran sebagai masukan dalam perbaikan naskah

penelitian ini, dan semoga naskah penelitian ini dapat bermanfaat bagi semua

orang.

Purwokerto, 19 Agustus 2019

Alfian Deni Rulianto

Pengaruh Kombinasi 2,4-Diklorofenoksiasetat…, Alfian Deni Rulianto, Fakultas Pertanian UMP, 2019

xi

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ................................................................................................ i

HALAMAN PERSETUJUAN ................................................................................ ii

HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................ iii

HALAMAN PERNYATAAN ............................................................................... iv

MOTTO .................................................................................................................. v

HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................................ vi

RINGKASAN ....................................................................................................... vii

SUMMARY ......................................................................................................... viii

KATA PENGANTAR ........................................................................................... ix

DAFTAR ISI .......................................................................................................... xi

DAFTAR TABEL ................................................................................................ xiii

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xiv

DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xv

BAB I PENDAHULUAN ................................................................................ 1 A. Latar Belakang ................................................................................ 1 B. Perumusan Masalah ........................................................................ 3 C. Tujuan Penelitian ............................................................................ 4 D. Manfaat Penelitian .......................................................................... 4 E. Hipotesis .......................................................................................... 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ....................................................................... 5 A. Klasifikasi Tanaman Binahong ....................................................... 5 B. Kultur Jaringan ................................................................................ 6

1. Media Kultur Jaringan ................................................................ 9 2. Kultur Kalus .............................................................................. 10 3. Zat Pengatur Tumbuh Dalam Induksi Kalus ........................... 11

BAB III METODOLOGI PENELITIAN .......................................................... 14 A. Tempat dan Waktu Penelitian ....................................................... 14 B. Alat dan Bahan Penelitian ............................................................. 14 C. Rancangan Penelitian. ................................................................... 15 D. Pelaksanaan Penelitian .................................................................. 15 E. Variabel Pengamatan .................................................................... 19 F. Analisis Data ................................................................................. 20

Pengaruh Kombinasi 2,4-Diklorofenoksiasetat…, Alfian Deni Rulianto, Fakultas Pertanian UMP, 2019

xii

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................... 21 A. Hasil Penelitian ............................................................................. 21 B. Pembahasan ................................................................................... 23

1. Waktu Induksi kalus ............................................................... 23 2. Persentase Pembentukan kalus ............................................... 26 3. Tekstur Kalus ......................................................................... 29 4. Warna Kalus ........................................................................... 31 5. Persentase Browning .............................................................. 33 6. Sumber Kontaminasi .............................................................. 35 7. Persentase Kontaminasi .......................................................... 37

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................... 40 A. Kesimpulan ................................................................................... 40 B. Saran .............................................................................................. 40

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 41

LAMPIRAN ....................................................................................................... 46

Pengaruh Kombinasi 2,4-Diklorofenoksiasetat…, Alfian Deni Rulianto, Fakultas Pertanian UMP, 2019

xiii

DAFTAR TABEL

Tabel. 3.1. Kombinasi perlakuan 2,4-D dan BAP................................................. 15

Tabel. 3.2. Komposisi Medium MS ...................................................................... 16

Tabel. 4.1. Nilai F hitung untuk variabel yang terdiri dari waktu induksi kalus, persentase pembentukan kalus, persentase browning, sumber kontaminasi dan persentase kontaminan berdasarkan rancangan acak lengkap dari kombinasi 2,4-D dan BAP dengan masing-masing konsentrasi. dalam peningkatan induksi kalus eksplan daun binahong (Anredera cordifolia) setelah 49 HST. ............................................... 22

Tabel. 4.2. Waktu induksi kalus eksplan (hari) daun binahong setelah 49 hari setelah tanam ....................................................................................... 24

Tabel. 4.3. Pengaruh perlakuan 2,4-D dan BAP terhadap pembentukan tekstur kalus eksplan daun binahong .............................................................. 29

Tabel. 4.4. Pengaruh 2,4-D dan BAP terhadap pembentukan warna kalus eksplan daun binahong ..................................................................................... 31

Pengaruh Kombinasi 2,4-Diklorofenoksiasetat…, Alfian Deni Rulianto, Fakultas Pertanian UMP, 2019

xiv

DAFTAR GAMBAR Gambar 4.1. Pengaruh perlakuan 2,4-D dan BAP terhadap induksi kalus eksplan

daun binahong ............................................................................... 26 Gambar 4.2. Grafik pengaruh perlakuan 2,4-D dan BAP terhadap persentase

pembentukan kalus eksplan daun binahong. ................................. 26 Gambar 4.3. Pengaruh perlakuan 2,4-D 1 BAP 1 terhadap pembentukan kalus

eksplan daun binahong. ................................................................. 29 Gambar 4.4. Pengaruh perlakuan 2,4-D dan BAP dalam pembentukan tekstur

kalus eksplan daun binahong ........................................................ 31 Gambar 4.5. Pengaruh 2,4-D dan BAP terhadap pembentukan warna kalus

eksplan daun binahong .................................................................. 33 Gambar 4.6. Grafik Pengaruh perlakuan 2,4 D dan BAP terhadap persentase

browning pada eksplan daun binahong. ........................................ 33 Gambar 4.7. Pengaruh 2,4-D dan BAP terhadap browning pada eksplan daun

binahong ........................................................................................ 35 Gambar 4.8. Grafik pengaruh perlakuan 2,4-D dan BAP terhadap presentase

eksplan daun binahong yang terkontaminasi oleh jamur dan bakteri 36 Gambar 4.9. Kontaminasi yang terjadi terhadap eksplan daun binahong. ......... 37 Gambar 4.10. Grafik Pengaruh perlakuan 2,4 D dan BAP terhadap

persentasekontaminasi................................................................... 37 Gambar 4.11. Kontaminasi yang terjadi pada eksplan daun binahong ................ 39

Pengaruh Kombinasi 2,4-Diklorofenoksiasetat…, Alfian Deni Rulianto, Fakultas Pertanian UMP, 2019

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran1. Rekap hasil pengamatan eksplan daun binahong setelah 49

HST..............................................................................................46

Lampiran2. Hasil analisis statistika pada 49 HST untuk waktu induksi kalus dengan menggunakan perangkat lunak IBM-SPSS versi 23 .................................................................................................49

Lampiran3. Hasil analisis statistika pada 49 HST untuk persentase pembentukan kalus dengan menggunakan perangkat lunak IBM-SPSS versi 23......................................................................52

Lampiran4. Hasil analisis statistika pada 49 HST untuk persentase browning dengan menggunakan perangkat lunak IBM-SPSS versi 23 ........................................................................................55

Lampiran5. Hasil analisis statistika pada 49 HST untuk sumber kontaminasi jamur dengan menggunakan perangkat lunak IBM-SPSS versi 23......................................................................58

Lampiran6. Hasil analisis statistika pada 49 HST untuk sumber kontaminasi bakteri dengan menggunakan perangkat lunak IBM-SPSS versi 23......................................................................61

Lampiran7. Hasil analisis statistika pada 49 HST untuk persentase kontaminasi dengan menggunakan perangkat lunak IBM-SPSS versi 23 ..............................................................................64

Lampiran8. Perhitungan dan Pengambilan larutan .........................................67

Lampiran9. Dokumentasi Penelitian ...............................................................68

Lampiran10. Denah penelitian ..........................................................................69

Pengaruh Kombinasi 2,4-Diklorofenoksiasetat…, Alfian Deni Rulianto, Fakultas Pertanian UMP, 2019