Oleh : Like R. Nindhita

Moderator : dr. Titik Handayani

pemeriksaan darah rutin adalah pemeriksaan terhadap sampel darah yang dilakukan tanpa indikasi tertentu. Biasanya sebagai dasar pemeriksaan laboratorium selanjutnya. Pemeriksaan darah rutin automatik :pemeriksaan sampel darah menggunakan alat hitung sel otomatis → perhitungan sel lebih mudah, cepat dan teliti dibandingkan dengan cara manual Jenis alat yang digunakan a.l : BC-5800, ADVIA120, SYSMEX XT2000i, cell dyne (RSDK).

yaitu metode yang menggunakan 2 teknik dasar (prinsip kerja) :

prinsip impedansi listrik :Sel disuspensikan ke dalam cairan

pengencer/ diluent isotonic dilewatkan celah dengan elektroda dikedua sisinya terjadi perubahan

Tahanan listrik sehingga timbul pulsa-pulsa elektrik yang menggambarkan volume/ukuran/jumlah sel

prinsip pendar cahaya (light scattering)

mengalirkan sel melewati celah dimana berkas cahaya difokuskan mengenai sel kemudian cahaya itu akan dihamburkan, dipantulkan atau dibiaskan ke semua arah ditangkap detektor yang diletakkan pada sudut tertentu dihasilkan pulsa cahaya yang berasal dari hamburan cahaya, intensitas warna atau fluoresensi diubah menjadi aliran listrik diteruskan ke komputer dihitung jumlah, ukuran maupun volume sel

METODE FLOWCITOMETRI

Flowcitometri dg sinar laser semiconduktor

Cellpack as sheath flow . The sample flow is drastically accelerated due to the front sheath, thus cells are separated and approach the aperture one by one

RBC, platelet , haematocryte count (hydrodinamic foccusing) (1)

hydrodinamic foccusing (impedansi listrik)

RBC, platelet , haematocryte count (hydrodinamic

foccusing) (1)

Vo

lum

e -

MC

V

HGB Concentration - CHCMRBC METHOD

28 41

6012

0

Microcytic

MacrocyticH

yperchromic

Hy p

ochr

mic

Vo

lum

e -

MC

V

HGB Concentration - CHCM

NormocyticNormochromic

RBC METHOD

% Hipo-He, Persentase

Eritrosit Hipokromik dengan

Konsentrasi Hemoglobin < 17

pg

% Hipo-He, Persentase

Eritrosit Hipokromik dengan

Konsentrasi Hemoglobin < 17

pg

% Hiper-He, Persentase Eritrosit

Hiperkromik dengan

Konsentrasi Hemoglobin > 49

pg

% Hiper-He, Persentase Eritrosit

Hiperkromik dengan

Konsentrasi Hemoglobin > 49

pg

% MikroR, Persentase Eritrosit Mikrositik dengan

Volume < 60 fl

% MakroR, Persentase Eritrosit Makrositik dengan

Volume > 120 fl

RBC METHOD

PRINSIP KERJA = METODE HITUNG ERITROSIT → IMPEDANSI LISTRIK BATAS ATAS DIPAKAI UNTUK MEMISAHKAN TROMBOSIT DARI SEL DARAH MERAH, BATAS BAWAH DIPAKAI UNTUK MEMISAHKAN TROMBOSIT DARI DEBU DAN MASA ELEKTRIK (FRAGMEN ERITROSIT)Area of Platelet Analysis

The Platelet Method

PLATELET CYTOGRAM

1 Platelets 2 Large platelets3 Red blood cells4 RBC fragments 5 RBC ghosts

1

2

3

4

5

The Platelet Method

SLS-HB METHOD

SLS - HB METHOD

DIFF WBC COUNT- FLOWCITOMETRI

STROMATOLYSER - MELISIS ERITROSIT DAN TROMBOSIT → MELUBANGI MEMBRAN LEKOSIT CAT POLYMETHINE STROMATOLYSER- MASUK KE DALAM LEKOSIT → MENGIKAT ASAM NUKLEAT & ORGANEL SITOPLASMA DIBERI SINAR LASER λ 633nm → ASAM ORGANIK STROMATOLYSER - MENGIKAT EOSINOFIL, MEMBEDAKAN DENGAN NETROFIL MELALUI SIDE SCATTER

DIFF WBC METHOD

DIFF WBC METHOD

DIFF WBC - BASOFIL COUNT

Scatter signal to measure the volume of the cells

Absorption signal for peroxidase activity measurement

Cells with medium peroxidase activity absorbs less light than cells with high peroxidase activity

The Perox Method

DIFF WBC METHOD

DIFF WBC – BASO METHOD

RETICULOCYTE - DIFF METHOD

DIFF WBC METHOD

INTERPRETASI HASIL

SCATTERGRAM

SCATTERGRAM

IMMATUR GRANULOSIT NETROFIL

HISTOGRAM RBC

HISTOGRAM PLT

CONTOH SCATTERGRAM ABNORMAL

No matterwhat your shape or size ....We can make you a SPHERE

TERIMA KASIH

DiaspirasiDilusi

pewarnaan

Forward Scatter

light

Lateral/side scatter

light

Lateral /sidescatte

r light

Lateral/side scatter

light

Photodiode

Photomultiplier

Puls listrik

Identifikasi sel

Instrument Technology

Cell-Dyn 3500-3700 SpectrophotometryImpedanceLight scatter

Cell-Dyn Sapphire SpectrophotometryImpedanceLight scatterFluorecent

Sysmex KX-21 SpectrophotometryImpedance

Sysmex XE-2100 SpectrophotometryImpedance with radiofrekuensiHydrodinamic focussing

FACSaria FlowcytometryOptics SystemHydrodinamic Focussing

apertura

External elektrode

Internal elektrode

Jumlah sel darah merah dihitung dengan prinsip impedansi listrik : sel darah disuspensikan ke dalam cairan pengencer/ diluent isotonic dilewatkan celah dengan elektroda dikedua sisinya terjadi perubahan tahanan listrik sehingga timbul pulsa-pulsa elektrik yang menggambarkan volume/jumlah sel

I’mmelting

PEROXSTAIN

Boy,your granuleslook great !

But youstill lookpale

If you have the granules - we have the stain

DIFF WBC COUNT

IMMATUR GRANULOSIT

NETROFIL