pembuatan preparat nukleus

24
PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS (Laporan Praktikum Genetika Ikan) Oleh Puji Lestari 1214111051 Kelompok 2 JURUSAN BUDIDAYA PERAIRAN

Upload: hoshi-no-hikari-pardi

Post on 19-Jan-2016

162 views

Category:

Documents


12 download

TRANSCRIPT

Page 1: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

(Laporan Praktikum Genetika Ikan)

Oleh

Puji Lestari

1214111051

Kelompok 2

JURUSAN BUDIDAYA PERAIRAN

FAKULTAS PERTANIAN

UNIVERSITAS LAMPUNG

2014

Page 2: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

1.PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Setiap organisme tersusun dari salah satu diantara dua jenis sel yang secara struktural berbeda, sel prokariotik dan sel eukariotik. Hanya bakteri dan arkhea; alga hijau biru yang memiliki sel prokariotik. Sedangkan protista, tumbuhan, jamur dan hewan semuanya mempunyai sel eukariotik.

Sel adalah unit terkecil dari makhluk hidup. Setiap Organisme di dunia ini tersusun atas sel-sel yang saling berintegrasi membentuk suatu fungsi tertentu dalam tubuh makhluk hidup. Baik organisme tinkat seluler (Uniseluler) maupun organisme Multiseluler.

Nukleus atau inti sel berfungsi sebagai pengendali dan pengatur sel. seluruh aktifitas sel diatur oleh nukleus. Nukleus juga berfungsi sebagai pembawa informasi genetik yaitu kromosom, yang diwariskan ke generasi selanjutnya. Kromosom adalah struktur yang tersusun oleh molekul DNA dan protein (histon). Nukleus sel bakteri terpapar atau kontak langsung dengan sitoplasma karena tidak memiliki membran inti.

1.2 Tujuan

Adapun Tujuan dari praktikum pembuatan preparat nucleus ialah agar mahasiswa mampu membuat preparat nucleus

Page 3: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

II.TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Nukleolus

Nukleolus adalah struktur yang paling menonjol dari sebuah intieukariotik. Nukleolus ini berperan dalam sintesis rRNA dan biogenesis darisubunit ribosom ( Busch dan Smetana, 1970 dalam Raska, 2004). Organel inti ini mengandung relative sedikit DNA kromosom tetapi kaya protein dan kompleks ribonukleoprotein (RNP) termasuk subunit pre-ribosom besar dan kecil.

Individuhaploid mempunyai satu nukleolus, diploid mempunyai satu atau duanukleolus per sel, dan triploid mempunyai satu, dua atau tiga per sel dan seterusnya. Nukleolus terbentuk di sekitar diskrit lokus kromosom yang dikenal sebagai NOR. Pengertian Nucleolus Organizer Region (NOR) adalah suatu daerah disekitar kromosom yang berfungsi membentuk nukleolus, disebut juga nucleolarorganizer, daerah yang berisi beberapa tempat gen pengkode ribosom RNA(RNA-r). Keterangan lebih lanjut menjelaskan bahwa setiap satu set

kromosom. Hanya mengandung satu kromosom dengan satu Nucleolar Organizer

Region (NOR) dan inti diploid normal mengandung dua nukleolus. satu NOR mempunyai kemampuan untuk tidak membentuk lebih dari satu nukleolus, berdasar atas pernyataan tersebut diharapkan sel diploid yang mumpunyaisepasang NOR hanya mampu membentuk maksimal dua nukleolus, sel triploidhanya mampu membetuk tiga nukleolus demikian pula pada tetraploid hanyamampu membentuk empat nukleolus (Junqueira, Carneiro, Kelley. 1998)

2.2 Pembagian dan Fungsi Nukleuolus1. Perakitan Subunit ribosomPerakitan subunit ribosom terjadi dengan cara berikut.

Nukleolus adalah lokasi untuk transkripsi rRNA prekursor molekul dari DNA. Molekul prekursor rRNA panjang yang diolah untuk membentuk 3 RNA matang.

Langkah selanjutnya dalam proses adalah pengemasan. RNA dikemas bersama beberapa, bentuk-bentuk khusus dari protein.

Akhirnya, unit ribosom terbentuk. Unit-unit ribosom dapat bervariasi dalam ukuran. Bahan baku dalam bentuk subunit ribosom yang dibutuhkan untuk proses translasi.

Page 4: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

Perakitan subunit ribosom diangkut ke sitoplasma sel (yaitu di luar nukleolus) dan berpartisipasi dalam proses penerjemahan (sintesis protein) (Kimball, John W. 1983)

Page 5: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

2. Nukleolus Organizer Region (NOR)NOR adalah daerah dalam sel di mana pembentukan nukleolus terjadi di sekitar kromosom. Karena pembentukan dan penyusunan nukleolus tidak terjadi secara acak, ini disebut sebagai ‘unsur secara genetik ditentukan‘. NOR memiliki bentuk melingkar dan dikelilingi oleh filamen disebut pars fibrosa (PF). Filamen Pars fibrosa yang baru terbentuk ditranskripsi RNA ribosom. Setelah pembagian inti, wilayah ini akan berhubungan dengan inti. Beberapa salinan gen RNA ribosom merupakan Nukleolus Organizer Region (NOR). Banyak salinan tandem gen RNA ribosom ditemukan di NOR. Jumlah NOR ada dalam kromosom manusia 5. NOR dapat diidentifikasi melalui analisis kariotipe dengan cara pewarnaan perak nitrat.

3. Sekuestrasi NukleolusSekuestrasi adalah diantara fungsi penting nukleolus. Proses Sekuestrasi nukleolus menyebabkan imobilisasi protein. Ini berarti bahwa protein tidak lagi mampu berinteraksi berpasangan dengan pasangan mereka. Protein yang diasingkan oleh nukleolus termasuk pVHL, Mdm2, hTERT, dll (Anonim,2012)

4. Biogenesis mRNANukleolus diketahui memainkan peran penting dalam biogenesis mRNA. Mereka juga terlibat dalam metabolisme RNA dan peristiwa perakitan RNP (ribonucleoprotein) (Hidayat, Estiti B. 1995)

2.3 bentuk atau struktur nucleolusStruktur yang menonjol didalam nukleus yang tidak sedang membelah ialah nukleolus, yang merupakan tempat komponen ribosom disintesis dan dirakit. Komponen-komponen ini kemudian dilewatkan melalui pori nukleus ke sitoplasma , kemudian semuanya bergabung untuk membentuk ribosom. Kadang-kadang terdapat dua nukleoli atau lebih , jumlahnya tergantung pada spesiesnya dan tahap siklus reproduktif sel tersebut. Nukleolus berbentuk menyerupai bola dan melalui mikroskop elektron nukleolus tersebut tampak sebagai suatu massa yang terdiri dari butiran dan serabut berwarna pekat yang menempel pada bagian kromatin (Genester, Finn. 1994)

Struktur nucleolus akan terlihat di bawah pengamatan mikroskop electron sebagai sebuah atau lebih bangunan basofil yang berukuran lebih besar daripada ukuran butir-butir kromatin. Nukleolus merupakan tempat berlangsungnya transkripsi gen yang dari proses tersebut didapatkan molekul rRNA. rRNA adalah salah satu jenis RNA yang merupakan materi penyusun ribosom. Molekul rRNA yang baru terbentuk segera dikemas bersama protein ribosom untuk dikeluarkan dari inti sel. 

Transkripsi molekul rRNA di dalam nucleolus menjamin terbentuknya molekul ribosom yang ada di dalam sitoplasma. Untuk kebutuhan tersebut, maka di dalam anak inti terdapat sejumlah potongan-potongan DNA (rDNA) yang ditranskripsi menjadi rRNA secara berulang-ulang dan berjalan sangat cepat dengan bantuan

Page 6: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

enzim RNA polymerase I. Potongan-potongan DNA tersebut dinamakan nucleolar organizer. Kandungan RNA dalam anak inti jika dibandingkan dengan bagian lain dari inti sel adalah tidak tetap, yaitu diperkirakan 5%-20% (Bevelander,1979)

Struktur nukleolus akan tampak jika dilihat dengan menggunakan mikroskop elektron , bagian-bagian nukleolus antara lain :

1. Zona GranulerMerupakan bagian pinggir nukleolus dibentuk dari butiran-butiran padat berukuran sedikit lebih kecil dari ribosom dalam sitoplasma yaitu sekitar 150-200 A. Bagian ini mengandung protein ribonukleat.

2. Zona Fibrosa/NukleolonemaDaerah yang terdapat di tengah anak inti dan tampak sebagai benang-benang halus, berupa serat-serat yang berukuran 50-60A, fibril terdiri dari protein ribonukleat.

3. Zona AmorfDaerah amorf yang merupakan matriks anak inti yang tampak homogen dan terdiri dari protein sebagai pengikat kedua bagian diatas. Daerah ini hanya terdapat pada nukleolus tertentu. 

4. Nukleolus KromatinTerdiri dari serat-serat tebalnya 100 A , mengandung DNA pada bagian tertentu (Pramudiyanti. 2008)

2.4 Letak dan Isi NukleolusNukleolus terletak di konstriksi sekunder (daerah pengorganisasian nukleolus). Nukleolus mengandung ikalan-ikalan DNA yang berasal dari  beberapa kromosoma, setiap ikalan mengandung sekelompok gen rRNA. Setiap kelompokan gen itu disebut daerah NOR (Nucleolar Organizer Region). Di NOR gen-gen rRNA disalin oleh polymerase RNA. Dari elektromikrofag, nukleolus terdiri dari tiga daerah pusat yang terdiri dari fibrila yang mempunyai daya serap warna sangat lemah mengandung DNA yang belum disalin, kelompokan padat yang terdiri dari fibrila dan mengandung molekul-molekul RNA yang baru saja disalin, kelompokkan bahan yang membentuk butir-butir yang mengandung zarah prazat ribosoma (Anonim, 2011).

Page 7: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

III. METODELOGI

3.1 Waktu dan TempatAwal praktikum dilaksanakan pada Kamis, 2014 di Laboratorium Perikanan Fakultas Pertanian Universitas Lampung.

3.2 Alat dan BahanPeralatan dan bahan-bahan yang dibutuhkan dalam praktikum ini adalah ikan komet, peralatan bedah, cawan petri, pipet tetes, ginsa ungu, asam asetat 50%, alkohol, aquadest, kaca preparat, dan mikroskop.

1.3 Cara KerjaMetode yang dilakukan dalam pembuatan preparat nucleus yaitu :

1. Potong sirip ikan 5 x 5 mm,2. Kemudian ditempelkan pada tisu,3. Fiksasi ke dalam larutan carnoy sebanyak 2 kali, masing-masing 30

menit,4. Sisa larutan dibuang, lalu letakkan jaringan pada sendok,5. Tambahkan 3-4 tetes asam asetat 50%,6. Cacah jaringan hingga terbentuk lalu sedot suspense,7. Hangatkan gelas objek pada hot plate dengan suhu 450C,8. Teteskan pada gelas objek hangat,9. Sedot kembali setelah terbentuk ring diameter 1,5 cm,10. Kemudian preparat diwarnai, menggunakan giemsa,11. Sebarkan kepermukaan gelas objek dengan tusuk gigi12. Bilas dengan air bersih lalu tiriskan sampai kering 13. Amati di bawah mikroskop.

Page 8: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Tabel Hasil

Keterangan Foto

Terlihat inti sel

(nukleus) di dalam

sel

Terlihat banyak

terdapat sel-sel

Terlihat banyak

terdapat sel-sel

Terlihat terdapat

beberapa sel

4.2 PembahasanDari pengamatan preparat nukleolus yang dilakukan ditemukan nukleolus (anak inti), gambar 1 menunjukkan gambar nukleolus dengan perbesaran 10x dan gambar 2,3 dan 4 menunjukkan gambar nukleolus menggunakan perbesaran 40x. Pada gambar tersebut juga dapat diketahui bahwa inti sel (nukleus) memiliki bentuk paling besar dengan posisi di tengah sel.

Page 9: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

Nukleus itu sendiri berbentuk oval. Seperti yang telah dinyatakan oleh Campbell (2008) bahwa nukleus mengandung sebagian besar gen dalam sel eukariotik ( sebagian gen terletak dalam mitokondria dan kloroplas ) Nukleus umumnya merupakan organel yang paling menonjol dalam sel eukariotik dengan diameter 5 m.

Dalam pembuatan preparat nucleolus ini ada tahapan atau proses-proses yang dilakukan yaitu, dimulai dari pemotongan sirip ikan dengan ukuran 5 x 5 mm,kemudian diletakkan di atas tisu. Kemudian difiksasi dalam larutan carnoy selama 30 menit, setalah itu dilakukan fiksasi kembali hingga 30 menit. Fiksasi merupakan perlakuan untuk mematikan sel tanpa merusak bentuk dan kandungannya (Paine, 1975). Menurut Hernandez (2006) fungsi lain dari larutan fiksatif adalah menaikkan daya pewarnaan karena adanya bahan-bahan kasar yang merupakan komponen cairan fiksatif. Larutan fiksatif yang paling sering digunakan adalah campuran methanol dengan asam asetat glacial pada perbandingan 3:1 . Setelah dilakukan fiksasi, masukkan jaringan kedalam gelas objek cekung atau cawan petri lalu tambahkan 3-4 tetes asam asetat 50%. Kemudian cacah jaringan hingga terbentuk atau hingga halus, lalu sedot suspensi nya dengan menggunakan pipet tetes. Suspensi tersebut diletakkan pada gelas objek yang hangat. lalu Gelas objek dipanaskan diatas hot plate. Hot plate yang digunakan berfungsi mengeringkan suspensi sel di atas preparat, hal ini berguna agar sel melekat dengan erat. Kemudian tunggu hingga suspensi tersebutterbentuk ring yang berdiamter 1,5 cm. Setelah terbentuk ring, dilakukan pewarnaan dengan Giemsa sambil diratakan ke permukaan objek dengan tusuk gigi, perataan ini dilakukan agar sel tidak bertumpuk-tumpuk dan mudah untuk diamati, giemsa merupakan pewarna yang paling sering digunakan untuk mewarnai kromosom. Pewarnaan ini dilakukan hingga 20-25 menit sampai warna tersebut menempel atau kering. Lalu tahapan berikutnya gelas objek dibilas dengan menggunakan larutan hipotonik dan didiamkan sebentar selanjutnya diamati dibawah mikroskop.

Fungsi Bahan Yang DigunakanPerlakuan hipotonik bertujuan agar sel-sel membesar dan kromosom-kromosom menyebar letaknya (Denton, 1973; Sharma, 1976 dalam Sucipto, 2008). Larutan hipotonik dapat dibuat dari campuran akuades, sodium sitrat dan potassium klorid. Lama perlakuan bergantung pada suhu dan konsistensi jaringan/sel yang digunakan (Denton, 1973; Sharma, 1976 dalam Sucipto, 2008). Praktikum ini menggunakan larutan hipotonik.

Pewarnaan dilakukan agar kromosom mudah diamati di bawah mikroskop (Denton, 1973; Sharma, 1976 dalam Sucipto, 2008). Giemsa merupakan pewarna yang paling sering digunakan untuk mewarnai kromosom (Denton, 1973; Sharma, 1976; Chaves et al., 1991 dalam Sucipto, 2008) meskipun mekanisme pewarnaannya tidak bersih (Macgregor dan Valley, 1983 dalam Sucipto, 2008).

Giemsa digunakan untuk jenis preparat ulasan tipis maupun tebal (Gunarso, 1989). Komponen aktif Giemsa berupa molekul eosin Y dan biru metilen (Sharma, 1976; Magregor dan Valley, 1983 dalam Sucipto, 2008). Kualitas hasil

Page 10: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

pewarnaan bervariasi tergantung perbandingan pewarna yang digunakan (Sharma, 1976 dalam Sucipto, 2008).

Fiksasi merupakan perlakuan untuk mematikan sel tanpa merusak bentuk dan kandungannya (Denton, 1973; Sharma, 1976 dalam Sucipto, 2008). Menurut Gunarso (1989) fungsi lain dari larutan fiksatif adalah menaikkan daya pewarnaan karena adanya bahan-bahan kasar yang merupakan komponen cairan fiksatif. Larutan fiksatif yang paling sering digunakan adalah campuran methanol dengan asam asetat glacial pada perbandingan 3:1 (v/v). Larutan ini harus dalam keadaan segar jika akan digunakan (Wilson dan Morrison, 1962; Denton, 1973; Phillips et al., 1986; Chaves et al., 1991 dalam Sucipto, 2008). Fiksasi dalam praktikum ini juga menggunakan campuran methanol dengan asam asetat glacial pada perbandingan 3:1 (v/v) yang disebut larutan carnoy. Larutan KCl dan Carnoy haruslah dalam kondisi fresh atau baru.

Fungsi Nukleus dan NukleolusNukleus memiliki peran yang sangat vital dalam kehidupan sebuah sel. Peranan nucleus dalam hal ini adalah untuk mengatur dan mengontrol segala aktifitas kehidupan sel serta membawa informasi genetik yang diturunkan ke generasi berikutnya. Informasi genetik ini disimpan dalam suatu molekul polinukleutida yang disebut DNA (Deoxyribonucleic acid). DNA pada umumnya tersebar di dalam nucleus sebagai matriks seperti benang yang disebut kromatin. Ketika sel akan memulai membelah, kromatin akan berkondensasi membentuk struktur yang lebih padat dan memendek yang selanjutnya disebut kromosom. Kromosom tersusun atas molekul DNA dan protein histon. Struktur di dalam nucleus yang merupakan tempat berkonsentrasinya molekul DNA adalah nucleolus (anak inti.). Nucleolus berperan sebagai tempat terjadinya sintesis molekul RNA (Ribonucleic acid) dan ribosom. RNA merupakan hasil salinan DNA yang akan ditransfer ke sitoplasma untuk diterjemahkan menjadi rantai asam amino yang disebut protein (Anonim,2011).Fungsi nukleolus adalah membentuk RNA ribosom dengan bantuan pusat organisasi inti. RNA ribosom dibentuk untuk pembentukan macam-macam molekul protein. Sel-sel yang lebih aktif membuat protein, seperti neuron dan sel kanker, memiliki banyak nukleolus yang besar-besar (Anonim, 2011).

Teknik yang dilakukan pada praktikum ini adalah pewarnaan giemsa. Pewarnaan ini dilakukan setelah dilakukan pemanasan objek di hot plate pada suhu 450C. Pewarnaan dilakukan agar kromosom mudah diamati di bawah mikroskop. Giemsa merupakan pewarna yang paling sering digunakan untuk mewarnai kromosom meskipun mekanisme pewarnaannya tidak bersih. Giemsa digunakan untuk jenis preparat ulasan tipis maupun tebal (Gunarso, 1989). Komponen aktif Giemsa berupa molekul eosin Y dan metilen biru.

Ketika pembuatan ring, hindari adanya gelembung udara karena akan menyulitkan ketika pengamatan kromosom. Suhu hot plate jangan terlalu panas (± 45-50 oC), jika terlalu panas maka preparat akan gosong. Ketika pewarnaan dengan larutan giemsa, jangan terlalu banyak larutan yang diteteskan atau perendaman jangan

Page 11: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

terlalu lama karena akan menyebabkan warna ring terlalu tebal dan menyulitkan pengamatan.

Kegagalan praktikum sebelumnya disebabkan karena kesalahan dalam melakukan prosedur praktikum, terlalu lamanya perendaman menggunakan larutan carnoy, dan tingginya suhu pada hot plate saat dilakukan pemanasan gelas objek. Keberhasilan praktikum dikarenakan sesuainya prosedur yang dilakukan.

Page 12: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

Fungsi Bahan Yang DigunakanPerlakuan hipotonik bertujuan agar sel-sel membesar dan kromosom-kromosom menyebar letaknya (Denton, 1973; Sharma, 1976 dalam Sucipto, 2008). Larutan hipotonik dapat dibuat dari campuran akuades, sodium sitrat dan potassium klorid. Lama perlakuan bergantung pada suhu dan konsistensi jaringan/sel yang digunakan (Denton, 1973; Sharma, 1976 dalam Sucipto, 2008). Praktikum ini menggunakan larutan hipotonik.

Pewarnaan dilakukan agar kromosom mudah diamati di bawah mikroskop (Denton, 1973; Sharma, 1976 dalam Sucipto, 2008). Giemsa merupakan pewarna yang paling sering digunakan untuk mewarnai kromosom (Denton, 1973; Sharma, 1976; Chaves et al., 1991 dalam Sucipto, 2008) meskipun mekanisme pewarnaannya tidak bersih (Macgregor dan Valley, 1983 dalam Sucipto, 2008).

Giemsa digunakan untuk jenis preparat ulasan tipis maupun tebal (Gunarso, 1989). Komponen aktif Giemsa berupa molekul eosin Y dan biru metilen (Sharma, 1976; Magregor dan Valley, 1983 dalam Sucipto, 2008). Kualitas hasil pewarnaan bervariasi tergantung perbandingan pewarna yang digunakan (Sharma, 1976 dalam Sucipto, 2008).

Fiksasi merupakan perlakuan untuk mematikan sel tanpa merusak bentuk dan kandungannya (Denton, 1973; Sharma, 1976 dalam Sucipto, 2008). Menurut Gunarso (1989) fungsi lain dari larutan fiksatif adalah menaikkan daya pewarnaan karena adanya bahan-bahan kasar yang merupakan komponen cairan fiksatif. Larutan fiksatif yang paling sering digunakan adalah campuran methanol dengan asam asetat glacial pada perbandingan 3:1 (v/v). Larutan ini harus dalam keadaan segar jika akan digunakan (Wilson dan Morrison, 1962; Denton, 1973; Phillips et al., 1986; Chaves et al., 1991 dalam Sucipto, 2008). Fiksasi dalam praktikum ini juga menggunakan campuran methanol dengan asam asetat glacial pada perbandingan 3:1 (v/v) yang disebut larutan carnoy. Larutan KCl dan Carnoy haruslah dalam kondisi fresh atau baru.

Fungsi Nukleus dan NukleolusNukleus memiliki peran yang sangat vital dalam kehidupan sebuah sel. Peranan nucleus dalam hal ini adalah untuk mengatur dan mengontrol segala aktifitas kehidupan sel serta membawa informasi genetik yang diturunkan ke generasi berikutnya. Informasi genetik ini disimpan dalam suatu molekul polinukleutida yang disebut DNA (Deoxyribonucleic acid). DNA pada umumnya tersebar di dalam nucleus sebagai matriks seperti benang yang disebut kromatin. Ketika sel akan memulai membelah, kromatin akan berkondensasi membentuk struktur yang lebih padat dan memendek yang selanjutnya disebut kromosom. Kromosom tersusun atas molekul DNA dan protein histon. Struktur di dalam nucleus yang merupakan tempat berkonsentrasinya molekul DNA adalah nucleolus (anak inti.). Nucleolus berperan sebagai tempat terjadinya sintesis molekul RNA (Ribonucleic acid) dan ribosom. RNA merupakan hasil salinan DNA yang akan ditransfer ke

Page 13: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

sitoplasma untuk diterjemahkan menjadi rantai asam amino yang disebut protein (Anonim,2011).Fungsi nukleolus adalah membentuk RNA ribosom dengan bantuan pusat organisasi inti. RNA ribosom dibentuk untuk pembentukan macam-macam molekul protein. Sel-sel yang lebih aktif membuat protein, seperti neuron dan sel kanker, memiliki banyak nukleolus yang besar-besar (Anonim, 2011).

Teknik yang dilakukan pada praktikum ini adalah pewarnaan giemsa. Pewarnaan ini dilakukan setelah dilakukan pemanasan objek di hot plate pada suhu 450C. Pewarnaan dilakukan agar kromosom mudah diamati di bawah mikroskop. Giemsa merupakan pewarna yang paling sering digunakan untuk mewarnai kromosom meskipun mekanisme pewarnaannya tidak bersih. Giemsa digunakan untuk jenis preparat ulasan tipis maupun tebal (Gunarso, 1989). Komponen aktif Giemsa berupa molekul eosin Y dan metilen biru.

Ketika pembuatan ring, hindari adanya gelembung udara karena akan menyulitkan ketika pengamatan kromosom. Suhu hot plate jangan terlalu panas (± 45-50 oC), jika terlalu panas maka preparat akan gosong. Ketika pewarnaan dengan larutan giemsa, jangan terlalu banyak larutan yang diteteskan atau perendaman jangan terlalu lama karena akan menyebabkan warna ring terlalu tebal dan menyulitkan pengamatan.

Kegagalan praktikum sebelumnya disebabkan karena kesalahan dalam melakukan prosedur praktikum, terlalu lamanya perendaman menggunakan larutan carnoy, dan tingginya suhu pada hot plate saat dilakukan pemanasan gelas objek. Keberhasilan praktikum dikarenakan sesuainya prosedur yang dilakukan.

Page 14: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

V. KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 KesimpulanDari praktikum yang telah dilakukan didapatkan kesimpulan sebagai berikut :

1. Nukleolus bila dilihat dengan menggunakan suatu mikroskop cahaya akan tampak sebagai bangunan basofil yang mempunyai ukuran lebih besar dari butir-butir atau kelompok-kelompok kromatin yang ada pada inti sel.

2. Fungsi nukleolus adalah membentuk RNA ribosom dengan bantuan pusat organisasi inti. RNA ribosom dibentuk untuk pembentukan macam-macam molekul protein.

3. Suhu hot plate jangan terlalu panas (± 45-50 oC), jika terlalu panas maka preparat akan gosong. Ketika pewarnaan dengan larutan giemsa, jangan terlalu banyak larutan yang diteteskan atau perendaman jangan terlalu lama karena akan menyebabkan warna ring terlalu tebal dan menyulitkan pengamatan.

5.2 SaranSaran yang ingin disampaikan adalah adanya keseriusan yang dilakukan oleh praktikan maupun asisten dosen dalam melakukan praktikum. Agar praktikum dapat berjalan sesuai dengan prosedur yang dilakukan dan hasi pengamatan dalam praktikun dapat dipertanggungjawabkan.

Page 15: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

DAFTAR PUSTAKA

Anonim, 2011 http://taufik-ardiyanto.blogspot.com/2011/07/makalah-nukleolus-anak-inti-sel.html. Diakses tanggal 9 Juni 2014 Pukul 22.09

Anonim, 2012. http://selamathariyadi.wordpress.com/2012/10/18/laporan-praktik/. Diaksek pada tanggal 9 Juni 2014 Pukul 23.42

Bevelander, Gerrit W. 1979. Dasar-dasar Histologi. Jakarta: Erlangga.

Campbell, Neil A, & Reece, Jane B. 2008. Biologi 1 Ed. 8. Jakarta: Erlangga.

Genester, Finn. 1994. BUKU TEKS BIOLOGI. Jakarta: Binarupa Aksara

Hernandez-Verdun, Daniele (2006). "Nucleolus: from structure to dynamics". Histochem. Cell. Biol 125 (125): 127–137.doi:10.1007/s00418-005-0046-4.

Hidayat, Estiti B. 1995. Anatomi Tumbuhan Berbiji. Bandung: ITB.

Kimball, John W. 1983. Biologi. Jilid 1. Jakarta: Erlangga.

Junqueira, Carneiro, Kelley. 1998. HISTOLOGI DASAR. Jakarta: Buku Kedokteran EGC

Paine P, Moore L, Horowitz S (1975). "Nuclear envelope permeability". Nature 254 (5496): 109–114. doi:10.1038/254109a0. PMID 1117994.

Pramudiyanti. 2008. BAHAN AJAR MATA KULIAH BIOLOGI SEL. Bandar Lampung: Universitas Lampung.

Sucipto, Adi. 2008. Preparasi Kromosom. www.adisucipto.wordpress.com. Diakses pada tanggal 10 Juni 2014 pikul 23.52

Page 16: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

FOTO CARA KERJA PRAKTIKUM

Sampel ikan yang digunakan sirip ikan yang sudah dipotong

Proses fiksasi proses pemanasan

Page 17: PEMBUATAN PREPARAT NUKLEUS

LAMPIRAN