58

Lampiran 1. Peremajaan Bakteri Bacillus mycoides

Nutrien agar dan dilarutkan dengan aquades dan dipanaskan sampai

homongen

Sterilisasi suhu 121 ℃ selama 15 menit, dituang ke dalam tabung reaksi sebanyak 3

ml, dibiarkan padat pada posisi miring

Setelah padat, media digores dengan 1 ose isolat Bacillus mycoides secara aseptis

dengan metode gores secara zig-zag

Media yang sudah berisi isolat bakteri kemudian diinkubasi dalam inkubator

selama 24 jam pada suhu 37 ℃.

59

Lampiran 2. Kurva Pertumbuhan

diambil 1 ose isolat Bacillus mycoides kemudian diinokulasikan ke dalam tabung reaksi yang berisi

media Nutrient Broth sebanyak 10 ml

diinkubasi dalam waterbath shaker selama 24 jam pada suhu 37 ℃ kecepatan 120 rpm

diambil 1 ml Bacillus mycoides kemudian diinokulasikan ke dalam 250 ml media Nutrient

Broth steril dan diinkubasi dalam incubator pada suhu 37 ℃ selama 24 jam

Kemudian dilakukan pembacaan OD setiap 2 jam pada panjang gelombang 660 nm dan dibuat

kurva pertumbuhan

60

Lampiran 3. Fermentasi Onggok dengan Bacillus mycoides

Onggok kering giling 1 kg dicampur air 1000 ml, dikukus selama 30 menit dan didinginkan pada suhu ruang

Dicampur secara merata dengan 0,1% (v/w) medium (Pepton 10 g, Yeast extract 5 g, NaCl 10 g, (NH4)2SO4 2 g, K2HPO4 3 g, KH2PO4 2 g,

MgSO4.7H2O 0,5 g) dalam 1000 ml aquades.

Satu ose Bacillus mycoides diinokulasikan ke dalam 10 ml media Nutrien Brorth Diinkubasi selama 24 jam dalam shaker inkubator 120 rpm pada suhu

37℃.

Diambil 1 ml dan dimasukkan ke dalam 100 ml media Nutrien Brorth steril dan diinkubasi pada inkubator pada suhu 37 selama 10 jam

Sebanyak 1%, 3% dan 5% inokulum cair dicampurkan secara merata dengan substrat onggok yang telah dicamour mineral dan dikukus serta didinginkan

Dimasukkan ke dalam toples dan ditutup rapat untuk mendapatkan kondisi anaerob

Diinkubasi dilakukan selama 2 hari, 5 hari dan 8 hari pada suhu 37℃.

Dikeringkan menggunakan oven pada suhu 35-45℃ selama 1 hari.

Diambil sampel dan dimasukkan dalam freezer untuk keperluan analisis laboratorium.

61

Lampiran 4. Tabel data hasil analisa kadar serat kasar onggok setelah difermentasi

Sampel Ulangan m krts m sampel m akhir Serat (%)

Kontrol 1 1 1,144 2,013 1,346 10,035

2 1,145 2,008 1,343 9,861

Kontrol 2 1 1,146 2,011 1,355 10,393

2 1,145 2,009 1,352 10,304

Kontrol 3 1 1,144 2,01 1,349 10,199

2 1,144 2,008 1,351 10,309

1% 2 hari 1 1 1,145 2,004 1,341 9,780

2 1,146 2,016 1,338 9,524

1% 2 hari 2 1 1,145 2,003 1,334 9,436

2 1,144 2,007 1,333 9,417

1% 2 hari 3 1 1,144 2,017 1,337 9,569

2 1,144 2,004 1,334 9,481

3% 2 hari 1 1 1,146 2,012 1,325 8,897

2 1,145 2,005 1,327 9,077

3% 2 hari 2 1 1,143 2,006 1,322 8,923

2 1,146 2,016 1,324 8,829

3% 2 hari 3 1 1,145 2,009 1,321 8,761

2 1,144 2,012 1,318 8,648

5% 2 hari 1 1 1,145 2,004 1,308 8,134

2 1,145 2,008 1,306 8,018

5% 2 hari 2 1 1,146 2,013 1,301 7,700

2 1,145 2,002 1,299 7,692

5% 2 hari 3 1 1,145 2,007 1,297 7,573

2 1,143 2,019 1,298 7,677

1% 5 hari 1 1 1,146 2,003 1,342 9,785

2 1,145 2,012 1,338 9,592

1% 5 hari 2 1 1,144 2,006 1,336 9,571

2 1,145 2,007 1,338 9,616

1% 5 hari 3 1 1,146 2,012 1,332 9,245

2 1,145 2,004 1,335 9,481

3% 5 hari 1 1 1,145 2,018 1,311 8,226

2 1,145 2,004 1,309 8,184

3% 5 hari 2 1 1,146 2,006 1,303 7,827

2 1,145 2,011 1,305 7,956

62

Sampel Ulangan m krts m sampel m akhir Serat (%)

3% 5 hari 3 1 1,144 2,009 1,298 7,666

2 1,145 2,007 1,301 7,773

5% 5 hari 1 1 1,144 2,016 1,287 7,093

2 1,145 2,003 1,286 7,039

5% 5 hari 2 1 1,146 2,002 1,293 7,343

2 1,145 2,014 1,292 7,299

5% 5 hari 3 1 1,144 2,003 1,281 6,840

2 1,145 2,008 1,284 6,922

1% 8 hari 1 1 1,146 2,006 1,327 9,023

2 1,145 2,012 1,327 9,046

1% 8 hari 2 1 1,145 2,009 1,323 8,860

2 1,146 2,004 1,326 8,982

1% 8 hari 3 1 1,145 2,003 1,321 8,787

2 1,145 2,016 1,324 8,879

3% 8 hari 1 1 1,144 2,006 1,287 7,129

2 1,146 2,012 1,289 7,107

3% 8 hari 2 1 1,145 2,004 1,284 6,936

2 1,144 2,007 1,289 7,225

3% 8 hari 3 1 1,145 2,016 1,283 6,845

2 1,146 2,003 1,284 6,890

5% 8 hari 1 1 1,145 2,007 1,264 5,929

2 1,144 2,008 1,262 5,876

5% 8 hari 2 1 1,144 2,014 1,255 5,511

2 1,146 2,002 1,257 5,544

5% 8 hari 3 1 1,145 2,01 1,249 5,174

2 1,145 2,008 1,251 5,279

63

Lampiran 5. Tabel data hasil analisa kadar protein kasar onggok setelah

difermentasi

Sampel ulangan m smpl titrasi Protein (%)

Kontrol 1 1 2,012 1,1 0,957

2 2,003 1,2 1,049

Kontrol 2 1 2,008 1,3 1,134

2 2,017 1,3 1,129

Kontrol 3 1 2,008 1,3 1,134

2 2,011 1,4 1,219

1% 2 hari 1 1 2,009 1,6 1,395

2 2,011 1,7 1,480

1% 2 hari 2 1 2,007 1,8 1,570

2 2,017 1,7 1,476

1% 2 hari 3 1 2,004 1,7 1,485

2 2,002 1,7 1,487

3% 2 hari 1 1 2,012 2,3 2,002

2 2,006 2,2 1,920

3% 2 hari 2 1 2,018 2,3 1,996

2 2,003 2,3 2,011

3% 2 hari 3 1 2,009 2,4 2,092

2 2,016 2,4 2,085

5% 2 hari 1 1 2,003 2,8 2,448

2 2,007 2,7 2,356

5% 2 hari 2 1 2,011 2,8 2,438

2 2,004 2,9 2,534

5% 2 hari 3 1 2,016 3 2,606

2 2,003 2,9 2,535

1% 5 hari 1 1 2,009 2,6 2,266

2 2,003 2,7 2,360

1% 5 hari 2 1 2,017 2,9 2,518

2 2,004 2,8 2,447

1% 5 hari 3 1 2,009 2,9 2,528

2 2,007 2,9 2,530

3% 5 hari 1 1 2,004 5,8 5,068

2 2,012 5,7 4,961

3% 5 hari 2 1 2,005 5,9 5,153

2 2,018 5,8 5,033

64

Sampel ulangan m smpl titrasi Protein (%)

3% 5 hari 3 1 2,007 5,8 5,060

2 2,017 5,8 5,035

5% 5 hari 1 1 2,008 6,3 5,494

2 2,003 6,4 5,595

5% 5 hari 2 1 2,017 6,5 5,643

2 2,008 6,5 5,668

5% 5 hari 3 1 2,016 6,7 5,819

2 2,002 6,6 5,773

1% 8 hari 1 1 2,011 4,7 4,092

2 2,003 4,6 4,021

1% 8 hari 2 1 2,017 4,5 3,907

2 2,009 4,6 4,009

1% 8 hari 3 1 2,012 4,8 4,177

2 2,004 4,7 4,107

3% 8 hari 1 1 2,006 8,3 7,245

2 2,003 8,2 7,168

3% 8 hari 2 1 2,016 8,3 7,209

2 2,003 8,4 7,343

3% 8 hari 3 1 2,004 8,5 7,427

2 2,011 8,5 7,401

5% 8 hari 1 1 2,009 10,2 8,890

2 2,003 10,3 9,004

5% 8 hari 2 1 2,012 10,2 8,877

2 2,007 10,2 8,899

5% 8 hari 3 1 2,004 10,4 9,087

2 2,009 10,5 9,152

65

Lampiran 6. Data rata-rata kadar serat kasar onggok setelah difermentasi

Perlakuan Kadar serat kasar onggok setelah

fermentasi (%) Rata-

rata Jumlah inokulum

(Bacillus mycoides)

Lama

fermentasi

Ulangan

1

Ulangan

2

Ulangan

3

1%

2 hari 9,780 9,436 9,569 9,595

5 hari 9,785 9,616 9,481 9,627

8 hari 9,023 8,982 8,879 8,961

3%

2 hari 8,897 8,829 8,761 8,829

5 hari 8,184 7,956 7,773 7,971

8 hari 7,129 7,225 6,890 7,081

5%

2 hari 8,018 7,700 7,677 7,798

5 hari 7,093 7,343 6,922 7,119

8 hari 5,876 5,511 5,174 5,520

Kontrol (0%, 0 hari) 10,035 10,393 10,309 10,245

66

Lampiran 7. Data rata-rata kadar protein kasar onggok setelah difermentasi

Perlakuan Kadar protein kasar setelah

fermentasi (%) Rata-

rata Jumlah inokulum

(Bacillus mycoides)

Lama

fermentasi

Ulangan

1

Ulangan

2

Ulangan

3

1%

2 hari 1,480 1,570 1,487 1,512

5 hari 2,360 2,518 2,530 2,469

8 hari 4,092 4,009 4,177 4,092

3%

2 hari 2,002 2,011 2,085 2,032

5 hari 5,068 5,033 5,035 6,733

8 hari 7,245 7,343 7,401 7,329

5%

2 hari 2,448 2,534 2,535 2,505

5 hari 5,595 5,643 5,773 5,671

8 hari 9,004 8,899 9,152 9,018

Kontrol (0%, 0 hari) 1,049 1,129 1,134 1,104

67

Lampiran 8. Analisis Hasil Anava Ganda Kadar Serat Kasar Onggok

terfermentasi

a. Uji ANAVA

Dependent Variable:data

Source

Type III Sum

of Squares df Mean Square F Sig.

Model 2110.197a 10 211.020 5.805E3 .000

inokulum 29.907 2 14.954 411.344 .000

Lama 11.406 2 5.703 156.877 .000

inokulum *

lama 2.389 4 .597 16.429 .000

Error .727 20 .036

Total 2110.925 30

a. R Squared = 1.000 (Adjusted R Squared = .999)

b. Uji DMRT Pengaruh Jumlah Inokulum terhadap Kadar Serat Kasar

Onggok Setelah Fermentasi

Duncan

Inokul

um N

Subset

1 2 3 4

5 9 6.8189

3 9 7.9556

1 9 9.3911

0 3 10.2400

Sig. 1.000 1.000 1.000 1.000

68

c. Uji DMRT Pengaruh Lama Fermentasi terhadap Kadar Serat Kasar

Onggok setelah fermentasi

Duncan

lama N

Subset

1 2 3 4

8 9 7.1844

5 9 8.2356

2 9 8.7456

0 3 10.2400

Sig. 1.000 1.000 1.000 1.000

d. Uji DMRT Interaksi Jumlah Inokulum dan Lama Fermentasi terhadap

Kadar Serat Kasar Onggok setelah fermentasi

Duncan

interaksi N

Subset

1 2 3 4 5 6

9 3 5.5167

6 3 7.0767

8 3 7.1167

7 3 7.8233

5 3 7.9667

4 3 8.8233

3 3 8.9600

1 3 9.5900

2 3 9.6233

10 3 10.2400

Sig. 1.000 .800 .368 .390 .833 1.000

69

Lampiran 9.Analisis Hasil Anava Ganda Kadar Protein Kasar Onggok

setelah fermentasi

a. Uji ANAVA

Source

Type III Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Model 691.726a 10 69.173 3.453E3 .000

lama 106.109 2 53.054 2.649E3 .000

inokulum 41.825 2 20.912 1.044E3 .000

lama *

inokulum 11.641 4 2.910 145.290 .000

Error .401 20 .020

Total 692.127 30

a. R Squared = .999 (Adjusted R Squared = .999)

b. Uji DMRT Pengaruh Jumlah Inokulum terhadap Kadar Protein Kasar

Onggok setelah fermentasi

Duncan

inokulum N

Subset

1 2 3 4

0 3 1.0967

1 9 2.7478

3 9 4.7989

5 9 5.7267

Sig. 1.000 1.000 1.000 1.000

70

c. Uji DMRTPengaruh Lama Fermentasi terhadap Kadar Protein Kasar

Onggok setelah fermentasi

Duncan

lama N

Subset

1 2 3 4

0 3 1.0967

2 9 2.0133

5 9 4.3911

8 9 6.8689

Sig. 1.000 1.000 1.000 1.000

d. Uji DMRT Interaksi Jumlah Inokulum dan Lama Fermentasi terhadap

Kadar Protein Kasar Onggok Setelah Fermentasi

Duncan

Interaksi N

Subset

1 2 3 4 5 6 7 8 9

10 3 1.0967

1 3 1.5100

4 3 2.0300

2 3 2.4667

7 3 2.5000

3 3 4.2667

5 3 5.0400

8 3 5.6667

6 3 7.3267

9 3 9.0133

Sig. 1.000 1.000 1.000 .776 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000

71

Lampiran 10. Gambar Onggok Saat Fermentasi

Onggok setelah inkubasi suhu 37℃ selama 2 hari ( inokulum 1%,3%,5%)

Onggok setelah inkubasi suhu 37℃ selama 5 hari ( inokulum 1%,3%,5%)

Onggok setelah inkubasi suhu 37℃ selama 8 hari ( inokulum 1%,3%,5%)

72

Lampiran 11. Onggok Hasil Fermentasi yang telah dioven dan digiling

Kontrol (inokulum 0% ; lama fermentasi 0 hari)

Inokulum 1% ; Lama fermentasi 2 hari

Inokulum 1% ; Lama fermentasi 5 hari

73

Inokulum 3% ; Lama fermentasi 2 hari

Inokulum 3% ; Lama fermentasi 5 hari

Inokulum 3% ; Lama fermentasi 8 hari

74

Inokulum 5% ; Lama fermentasi 2 hari

Inokulum 5% ; Lama fermentasi 5 hari

Inokulum 5% ; Lama fermentasi 8 hari

75

Lampiran 12. Gambar Alat Penelitian

Timbangan analitik Hotplate

Shaker inkubator Inkubator

76

Autoklaf Laminar Air Flow

Oven Lemari es

77

KEMENTERIAN AGAMA RI

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN)

MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG

FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI

Jl. Gajayana No. 50 Dinoyo Malang (0341)558933 Fax.(0341) 558933

BUKTI KONSULTASI SKRIPSI

Nama : Mahmudah

NIM : 09620071

Fakultas/Jurusan : Sains dan Teknologi/Biologi

Judul Skripsi : Pengaruh Jumlah Inokulum dan Lama Fermentasi

oleh Bacillus mycoides Terhadap Kadar Serat Kasar dan

Protein Kasar Onggok

Pembimbing I : Dr. Hj. Ulfah Utami, M.Si

Pembimbing II : Dr. H. Murnirul Abidin, M.A

No Tanggal HAL TandaTangan

1. 25 Januari 2013 Konsul BAB I, II 1.

2. 8 Februari 2013 Revisi BAB I, II 2.

3. 15 Februari 2013 Konsul BAB I, II, III 3

4. 19 Februari 2013 Revisi BAB I, II, III 4.

5. 27 Februari 2013 Revisi BAB I, III 5.

6. 14 Maret 2013 Revisi BAB III 6.

7. 28 Maret 2013 Revisi BAB III 7.

8. 23 Maret 2013 ACC BAB I, II, III 8.

9. 28 Juni 2013 Konsul BAB I, II, IV Agama 9.

10. 24 Juni 2013 Konsul BAB IV 10.

11. 29 Juni 2013 Revisi BAB I, II, IV Agama 11.

12. 24 Juni 2013 Revisi BAB IV 12.

13. 29 Juni 2013 Revisi BAB I, II, IV Agama 13.

14 Juli 2013 ACC Skripsi 14

Malang, 01 Juli 2013

Mengetahui,

Ketua Jurusan Biologi

Dr. H. Eko Budi Minarno, M.Pd

NIP. 197630114 199903 1 001