11/17/2008

1

NEISSERIA

ORDO : Eubacteriales

FAMILI : Neisseriaceae

GENUS : Neisseria

SPECIES : 1. Neisseria meningitidis

2. Neisseria gonorrhoeae

NEISSERIA MENINGITIDIS

• Iva Puspitasari, dr

11/17/2008

2

Morfologi dan identifikasi

• Diplococcus gram negatif• Intra seluler / extraseluler• Punya pili• Suasana mikroaerofilik• Menghasilkan asam tanpa gas dari

fermentasi glukosa dan maltosa

• Medium selektif : Modified Thayer Martin (MTM)

• Spesimen steril : kaldu tripticase soy, coklat agar dalam sungkup CO2

11/17/2008

3

STRUKTUR ANTIGEN

1.Antigen polisakarida kapsuler kurang lebih ada 13 serogrup : A,B,C,Y,W 135

A,B,C merupakan penyebab utama di klinik

Grup A : mengandung N asetil monosamin fosfat

Grup B : mengandung asam neuraminat

• Identifikasi dan purifikasi dari grup A,B,C dapat dipakai sebagai vaksin

• Antigen kapsuler grup B identik dengan antigen polisakarida kapsuler K1 E.coli

2. Antigen somatik : 1. fraksi nukleoprotein 2. antigen karbohidrat

somatik

11/17/2008

4

• Protein membran luar dibagi dalam klas 1,2,3 berdasarkan berat molekul yang analog dengan gonococcus :

• 1. POR - spesifikasi serotipe- pembentukan pori-pori dinding sel

2. OPA- untuk adesi sel (= pili )

• 3. LOS

- fungsi sebagai efek endotoksin

11/17/2008

5

Patogenese dan manifestasi klinis

• flora transien di nasofaring

• Port d’ entry : tract. Respiratory

• Masa inkubasi : < 7 hari

• Menyebar secara hematogen dengan gejala :

• Demam --makula eritematous -- ptechiae --echimosis -- purpura vaskulitis -- thrombosis -- emboli meningokokus -- DIC

• Penyebab penyakit : Meningitis, artritis, perikarditis, hipoadrenergik state (anak ginjal)

• Sindroma waterhouse-friderichsen

11/17/2008

6

DIAGNOSIS LABORATORIUM

Spesimen : darah -- kultur

CSF -- smear, kultur, reaksi biokimia

Smear : CSF, aspirat ptechiaea

Kultur : media thayer martin 37 C

Serologi : tes aglutinasi latex

tes hemaglutinasi

TERAPI

• Penisilin G• Chloramphenicol• Cephalosporin generasi III

(cefotaxim,ceftriaxon)• Carier state Tx : Rifampin 2 x 600 mg

Minocyclin 2 x 100 mg selama 2 hari

Efek samping : gangguan vestibuler

11/17/2008

7

IMUNISASI

• Vaksin grup B : imunogen lemah

• Vaksin grup A dan C : dosis single 50 mikrogram

• Respon imun 90% pada dewasa

• Pada bayi < 1 th ?

cairan cerebrospinal penderita meningitis meningokokus tampak diplokokus garam negatif berpasangan

11/17/2008

8

Neisseria meningitidis, koloni abu-abu pucat, pada agar coklat (agar darah dipanaskan 18 jam suhu 37C

Tes pemanfaatan karbohidrat pada Nisseria meningitidis dg glukosa, maltosa, laktosa, sukrosa produksi asam ditunjukkan dg

warna kuning

11/17/2008

9

NEISSERIA GONORRHOEAENEISSERIA GONORRHOEAE

Iva Puspitasari,drIva Puspitasari,dr

MORFOLOGIMORFOLOGI

•• Gram negatif , diplococcus intraseluler Gram negatif , diplococcus intraseluler PMNPMN

•• Diameter 0,8 miumikronDiameter 0,8 miumikron•• Bentuk ginjal berpasangan pada sisi cekung Bentuk ginjal berpasangan pada sisi cekung

berhadapanberhadapan•• Non motilNon motil•• Punya pilli Punya pilli

11/17/2008

10

•• Tidak punya spora Tidak punya spora •• Koloni pada MTM (Modified Thayer Koloni pada MTM (Modified Thayer

Martin) tampak cembung, berkilau, tidak Martin) tampak cembung, berkilau, tidak berpigmen, tidak hemolisis,mukoid, dengan berpigmen, tidak hemolisis,mukoid, dengan diameter 1diameter 1--5 mm5 mm

•• Memfermentasi karbohidratMemfermentasi karbohidrat•• Menghasilkan asam tanpa gas Menghasilkan asam tanpa gas

•• Kebutuhan terhadap O2 mikroaerofilik Kebutuhan terhadap O2 mikroaerofilik (CO2 5%)(CO2 5%)

•• Tes oksidase +Tes oksidase +

11/17/2008

11

STRUKTUR ANTIGENSTRUKTUR ANTIGEN

•• Antigennya sangat heterogen berfungsi Antigennya sangat heterogen berfungsi untuk menghindar dari pertahanan sel untuk menghindar dari pertahanan sel inang (host), terdiri dari :inang (host), terdiri dari :

•• 1. PILLI1. PILLImerupakan molekul pillinmerupakan molekul pillinfungsi : fungsi : -- daya lekat antar seldaya lekat antar sel

-- daya tempel terhadap sel daya tempel terhadap sel eukaryoteukaryot

-- resistensi terhadap fagositosisresistensi terhadap fagositosisJumlahnya ratusanJumlahnya ratusan

11/17/2008

12

•• 2. POR2. PORtersusun secara trimer dan membentuk tersusun secara trimer dan membentuk poripori--pori pada permukaan, terdiri dari :pori pada permukaan, terdiri dari :-- Por A dengan 18 subtipePor A dengan 18 subtipe-- Por B dengan 28 subtipePor B dengan 28 subtipe

3. OPA3. OPAProtein yang berfungsi untuk adesi dalam Protein yang berfungsi untuk adesi dalam koloni dan dengan sel inang khususnya sel koloni dan dengan sel inang khususnya sel dengan tampilan antigen karsinoembrionik dengan tampilan antigen karsinoembrionik CD 66 CD 66 Terdapat pada koloni yang pekat bukan Terdapat pada koloni yang pekat bukan pada koloni yang transparanpada koloni yang transparanJumlah ratusan Jumlah ratusan

11/17/2008

13

•• 4. RMP ( Reduction Modifiable Protein)4. RMP ( Reduction Modifiable Protein)Fungsi : mengubah berat molekul saat Fungsi : mengubah berat molekul saat

terjadi reduksiterjadi reduksiJumlah : satuJumlah : satu

5. LOS (Lipooligosakarida)5. LOS (Lipooligosakarida)bedakan dengan kuman enterik batang bedakan dengan kuman enterik batang

gram negatif yang memiliki LPS gram negatif yang memiliki LPS (lipopolisakarida), kuman ini tidak (lipopolisakarida), kuman ini tidak memiliki rantai antigen O panjang memiliki rantai antigen O panjang

LOS identik dengan membran sel manusia LOS identik dengan membran sel manusia glikosphingolipid yang berfungsi untk glikosphingolipid yang berfungsi untk menghindari pengenalan kekebalan menghindari pengenalan kekebalan (immune recognation)(immune recognation)

11/17/2008

14

•• Sialisasi : suatu proses terminal galaktosa Sialisasi : suatu proses terminal galaktosa dari gonococci berkonjugasi dengan dari gonococci berkonjugasi dengan NANA(asam N asetil neuraminat) bersifat NANA(asam N asetil neuraminat) bersifat resisten terhadap antibodi manusiaresisten terhadap antibodi manusia

•• Jumlah 8 atau lebihJumlah 8 atau lebih

•• 6. Protein lain :6. Protein lain :-- Lip (H8) : jumlah 1 Lip (H8) : jumlah 1

heat modifiableheat modifiableidentik dengan OPAidentik dengan OPA

-- Fbp : jumlah 1Fbp : jumlah 1identik dengan Poridentik dengan Por

11/17/2008

15

Ig A 1 protease : jumlah 2 Ig A 1 protease : jumlah 2 fungsi : memisahkan dan fungsi : memisahkan dan

mengelaborasi Ig A1mengelaborasi Ig A1Identik dengan meningococcus, Identik dengan meningococcus, Hemophillus influenza, Hemophillus influenza, Sterptococcus pneumoniaSterptococcus pneumonia

MEKANISME PERPINDAHANMEKANISME PERPINDAHAN

•• Pillin : mengganti seluruh atau sebagian genPillin : mengganti seluruh atau sebagian gen•• Opa : penambahan atau penghilangan satu Opa : penambahan atau penghilangan satu

atau lebih kode pentametrik DNAatau lebih kode pentametrik DNA•• LOS ?LOS ?•• Gonococcus memiliki beberapa plasmid :Gonococcus memiliki beberapa plasmid :

-- BM 2,4 x 10.6 fungsi ?BM 2,4 x 10.6 fungsi ?

11/17/2008

16

•• -- BM 3,4 x 10.6BM 3,4 x 10.6•• -- BM 4,7 x 10.6BM 4,7 x 10.6•• Kedua plasmid dengan BM terakhir Kedua plasmid dengan BM terakhir

memproduksi beta laktamase sehingga memproduksi beta laktamase sehingga menyebabkan reisten terhadap penisilinmenyebabkan reisten terhadap penisilin

PATOGENESIS, PATOGENESIS, PATOLOGI,KLINISPATOLOGI,KLINIS

•• Gonococcus menyerang membran selaput Gonococcus menyerang membran selaput lendir saluran genitourinarius, mata rektum, lendir saluran genitourinarius, mata rektum, tenggorok tenggorok ---- supurasi akut supurasi akut ---- invasi invasi jaringan jaringan ---- onflamasi kronis onflamasi kronis -- fibrosisfibrosis

•• LakiLaki--laki : Gx : uretritis, nanah kental laki : Gx : uretritis, nanah kental kuning, disuria kuning, disuria ----epididimitis, proctitis epididimitis, proctitis ----fibrosis fibrosis ---- striktur uretrastriktur uretra

11/17/2008

17

•• Wanita : Gx : tanpa gejala Wanita : Gx : tanpa gejala ---- endocervix endocervix ---- tuba uterina tuba uterina ---- salpingitis salpingitis ----fibrosis fibrosis ---- infertilitasinfertilitas

UJI DIAGNOSTIK UJI DIAGNOSTIK LABORATORIUMLABORATORIUM

1.1. Spesimen : Spesimen : -- nanah ( urethral, cervix, nanah ( urethral, cervix, rektum, conjuntiva, sinovial rektum, conjuntiva, sinovial fluid) fluid)

-- darahdarah2.2. Smear : nanah di cat gramSmear : nanah di cat gram3.3. Kultur : nanah atau darah ditanam pada Kultur : nanah atau darah ditanam pada

media modifikasi thayer martin, yang media modifikasi thayer martin, yang berisi :berisi :

11/17/2008

18

Coklat agar, vankomycin 3 mikrogram, Coklat agar, vankomycin 3 mikrogram, colistin 7,5 mikrogram permililiter, colistin 7,5 mikrogram permililiter, amphotericin B 1 mikrogram permililiter, amphotericin B 1 mikrogram permililiter, trimetropim 3 mikrogram permililitertrimetropim 3 mikrogram permililiter

Koloni kuman dicat gram, tes oksidasiKoloni kuman dicat gram, tes oksidasiBahan sub kultur diidentifikasi melalui tes Bahan sub kultur diidentifikasi melalui tes

fermentasi karbohidratfermentasi karbohidrat

•• 4. Serologi : 4. Serologi : -- tes Imunoblotingtes Imunobloting-- RadioimunoassayRadioimunoassay-- ELISAELISA

11/17/2008

19

TERAPITERAPI

•• Nisseria gonorrohoe memproduksi Nisseria gonorrohoe memproduksi penisilinase (PPNG = Penicillinase penisilinase (PPNG = Penicillinase Producing Nisseria gonnorrhoe)Producing Nisseria gonnorrhoe)

•• Penicilline G MIC > 2 mikrogram /ml Penicilline G MIC > 2 mikrogram /ml apabila resisten ? Berikanapabila resisten ? Berikan

•• Tetracycline MIC > 2 mikrogram / ml Tetracycline MIC > 2 mikrogram / ml apabila resisten ? berikan apabila resisten ? berikan

•• Ceftriaxone injeksi 125 mg . i.m + Ceftriaxone injeksi 125 mg . i.m + doxycycline 2 x 100 mg . p.o selama 7 hari doxycycline 2 x 100 mg . p.o selama 7 hari atau erytromicin 4 x 500 mg. p.o untuk atau erytromicin 4 x 500 mg. p.o untuk wanita hamilwanita hamil

•• Ofloxacin 1 x 400 mg. p.o Ofloxacin 1 x 400 mg. p.o 2 x 200 mg. p.o2 x 200 mg. p.o

11/17/2008

20

EPIDEMIOLOGI DAN EPIDEMIOLOGI DAN PENCEGAHANPENCEGAHAN

•• Nisseria gonorrhoe merupakan penyakit Nisseria gonorrhoe merupakan penyakit venerial / sexual transmitted disease / venerial / sexual transmitted disease / penyakit hubungan sexualpenyakit hubungan sexual

•• LakiLaki--laki 20 laki 20 –– 30 %30 %•• Wanita >Wanita >•• Profilaksis : Profilaksis : -- kondom kondom

-- kemoprofilaksiskemoprofilaksis

•• Opthalmia neonatorum : Opthalmia neonatorum : Terapi : Terapi : -- Ag NO3 (perak nitrat) Ag NO3 (perak nitrat) ----

ditinggalkan ditinggalkan -- salp erytromicin 0,5 % salp erytromicin 0,5 % -- salp tetrasiklin 1%salp tetrasiklin 1%

11/17/2008

21

MEDIA PERBENIHANMEDIA PERBENIHAN

Spesimen : Spesimen : -- darah, cairan sinovial darah, cairan sinovial ( tanpa kontaminasi ) dapat ( tanpa kontaminasi ) dapat langsung ditanam pada coklat langsung ditanam pada coklat agar agar

-- sekret uretra, vagina sekret uretra, vagina (tercampur kontaminasi) ditanam (tercampur kontaminasi) ditanam pada :pada :

•• TM ( thayer martin ) / medium selektif : TM ( thayer martin ) / medium selektif : coklat agar, vankomisin, colistin, nistatin, coklat agar, vankomisin, colistin, nistatin, trimetoprimtrimetoprim

•• NYCM ( new york city medium) NYCM ( new york city medium) Modified I : linkosin, kolistin, ampfoterisin Modified I : linkosin, kolistin, ampfoterisin

B, trimetoprim B, trimetoprim Modified II : vankomisin, kolistin, Modified II : vankomisin, kolistin,

amfoterisin B, trimetoprimamfoterisin B, trimetoprim

11/17/2008

22

PERBENIHAN TRANSPORTPERBENIHAN TRANSPORT

•• Medium transport dapat disimpan dalam Medium transport dapat disimpan dalam lemari es selama 24 jamlemari es selama 24 jam

•• Stuart medium : agar, asam tioglikolat, Na Stuart medium : agar, asam tioglikolat, Na OH, buffer gliserofosfat OH, buffer gliserofosfat 1/100, Ca Cl2 1/10.000, 1/100, Ca Cl2 1/10.000, metilen blue 1/500.000, metilen blue 1/500.000, lidi kapas dicelup dalam lidi kapas dicelup dalam charcoal 1%charcoal 1%

•• Carry blair : identik dengan stuart Carry blair : identik dengan stuart asam tioglikolat + NaOH asam tioglikolat + NaOH diganti sodium tioglikolatdiganti sodium tioglikolat

•• AMIES : identik dengan carry blair + AMIES : identik dengan carry blair + charcoal 1%charcoal 1%

11/17/2008

23

PERBENIHAN TRANSGROWPERBENIHAN TRANSGROW

•• Perbenihan kombinasi transport dan Perbenihan kombinasi transport dan sekaligus pertumbuhan merupakan media sekaligus pertumbuhan merupakan media thayer martin + CO2 10% dituang pada : thayer martin + CO2 10% dituang pada :

-- plat plastik : jambecplat plastik : jambec--neigon neigon -- tabung plastik : GO slide tabung plastik : GO slide diinkubasi 37 C selama 24 diinkubasi 37 C selama 24 --48 jam48 jam

TES OKSIDASETES OKSIDASE

•• Untuk mengetahui adanya enzim sitokrom Untuk mengetahui adanya enzim sitokrom oksidase yg terikat dalam hemoprotein oksidase yg terikat dalam hemoprotein pada rantai terakhir respirasi aerobdengan pada rantai terakhir respirasi aerobdengan cara transfer elektron H cara transfer elektron H ---- + O2 = H2O + O2 = H2O dipakai larutan kovac 1% (tetra metil p dipakai larutan kovac 1% (tetra metil p fenilendiamin dihidroklorida 1%) fenilendiamin dihidroklorida 1%) ----warna unguwarna ungu

11/17/2008

24

TES IODOMETRITES IODOMETRI

•• Untuk mengetahui m.o memproduksi Untuk mengetahui m.o memproduksi penisilinase atau beta laktamasepenisilinase atau beta laktamase

•• Suspensi gonokokus + penisilin 6.000 Suspensi gonokokus + penisilin 6.000 mikrogram + buffer fosfat pH 6,0 mikrogram + buffer fosfat pH 6,0 ---- 30 30 menit pada suhu kamar + 2 tetes kanji 1% menit pada suhu kamar + 2 tetes kanji 1% + 1 tetes lugol + 1 tetes lugol ---- warna biru (karena warna biru (karena terbentuk komplek yodium terbentuk komplek yodium –– kanji)kanji)

Pus uretra penderita gonoroe,pewarnaan gram, Pus uretra penderita gonoroe,pewarnaan gram, tampak diplokokus gram negatif intraselulertampak diplokokus gram negatif intraseluler

11/17/2008

25

Biakan Neisseria gonorrhoe pada medium selektif Biakan Neisseria gonorrhoe pada medium selektif Modifikasi New York City Modifikasi New York City

Tes oksidase positif Neisseria gonorrhoe, bahan Tes oksidase positif Neisseria gonorrhoe, bahan isolat digoreskan pada kertas saring yg ditetesi isolat digoreskan pada kertas saring yg ditetesi

larutan fenilen diamin, dioksidasi menjadi larutan fenilen diamin, dioksidasi menjadi indofenol ungu indofenol ungu

11/17/2008

26

Tes pemanfaatan karbohidrat pada Neisseria Tes pemanfaatan karbohidrat pada Neisseria gonorhoe yang hanya menghasilkan asam pada gonorhoe yang hanya menghasilkan asam pada

peragian glukosaperagian glukosa