mpba_isolasi dan identifikasi eugenol dari bunga cengkeh
TRANSCRIPT
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
1/41
METODE PEMISAHAN BAHAN ALAM
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI EUGENOL DARI BUNGA
CENGKEH (Syzygium aromaticum L.)
KELOMPOK 2
DISUSUN OLEH
Luh Rasmita Dewi 1008505024
Ni Made Gitarini 1008505028
Ni Putu Mita Juniari 1008505029Ida Bagus Natha usuma 10085050!"
M# I$an Iswandi 1008505042
Ni Made Dwi Dianth% Mar%adhi 1008505044
&nge'ia Putri M(e'i(n( 100850504)Dewa &%u &de'ia *i+iandari 100850504"
Ni ade, -anti,a Dewi 1008505049
&de Budihendrawan 100850505!
Jurusan Farmas
Fa!u"#as Ma#$ma#!a %an I"mu P$n&$#a'uan A"am
Un$rs#as U%aana
2*+,
1
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
2/41
BAB I
PENDAHULUAN
+.+. La#ar B$"a!an&
In$'amasi ada'ah suatu res.(n /aringan terhada. rangsangan $isi, atau ,imiawi%ang merusa,# Rangsangan ini ditandai dengan adan%a .anas n%eri merah eng,a, dan
disertai gangguan $ungsi# Peng(atan in$'amasi di'a,u,an dengan mengguna,an (at
antiin$'amasi %aitu (at %ang memi'i,i a,ti+itas mene,an atau mengurangi .eradangan#
at3(at antiin$'amasi dig('(ng,an men/adi ster(id dan n(n3ster(id atung 20026#
Namun mas%ara,at ,ini 'eih 7enderung untu, era'ih ,e .eng(atan %ang erasa' dari
a'am back to nature6 %ang umumn%a di.andang 'eih aman ,arena mem.un%ai e$e,
sam.ing %ang 'eih sedi,it dianding,an (at (atan m(dern -ari 200)6#
Penggunaan ahan a'am seagai (at tradisi(na' di Ind(nesia te'ah di'a,u,an ('eh
nene, m(%ang ,ita se/a, eraad3aad %ang 'a'u teru,ti dari adan%a nas,ah 'ama .ada
daun '(ntar us(d( Jawa6 :sada Ba'i6 L(ntara, .aura -u'awesi -e'atan6 d(,umen
-erat Prim(n Jam.i -erat Ra7i,an B(reh ;u'ang Da'em dan re'ie$ 7andi B(r(udur
%ang menggamar,an (rang sedang mera7i, (at /amu6 dengan tumuhan seagai ahan
a,un%a -u,andar 200)6# -a'ah satu ahan %ang sering diguna,an da'am .eng(atan
tradisi(na' :sada Ba'i ada'ah /eru, manis da'am .eng(atan .en%a,it tuju Putra 19916#
Jeru, manis Citrus sinensis6 mengandung sen%awa3sen%awa se.erti mengandung
is37imene [email protected] 7tan(' itr(ne''a' @er.ine(' itra' Gerania'6 :nde7ana' Ner%' a7etat
Geran%' a7etate >(.aene L(ngi.inene C'emene D(de7ana' >arr%a%(.h%''ene
&manadeh et al# 200)6# Lim(nen meru.a,an sen%awa ter.en(id %ang te'ah teru,ti
memi'i,i an%a, a,ti+itas $arma,('(gis# -a'ah satu diantaran%a se7ara i'miah memi'i,i
a,ti+itas seagai antiin$'amasi# Me,anisme &,ti+itas antiin$'amasi 'im(nene ini mung,in
disea,an .ada intera,si 'im(nen dengan sin%a' ,as,ade %ang me'iat,an sit(,in dan
.engaturan $a,t(r trans,ri.si dan .ada e,s.resi gen .r(3in$'amasi Migue' 20106# 'eh
,arena itu 'im(nen memi'i,i .(tensi untu, di,emang,an seagai (at antiin$'amasi
%ang erasa' dari a'am#
2
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
3/41
Berdasar,an .ema.aran di atas ma,a di.er'u,an suatu met(de is('asi %ang te.at
untu, da.at memisah,an sen%awa 'im(nen dari ,andungan 'ainn%a %ang ada .ada ,u'it
/eru, manis Citrus sinensis6#
+.2 Rumusan Masa"a'Bagaimana ran7angan is('asi sen%awa g('(ngan ter.en(id dari ,u'it uah /eru,
manis Citrus sinensis6
+., Tu-uan
:ntu, mengetahui ran7angan is('asi sen%awa g('(ngan ter.en(id dari ,u'it uah
/eru, manis Citrus sinensis6#
+. Tn-auan Pus#a!a
+..+ Tanaman J$ru! Mans /Citrus sinensis(L.) Os0$1!
@anaman /eru, ada'ah tanaman uah tahunan %ang erasa' dari &sia# >ina di.er7a%a
seagai tem.at .ertama ,a'i /eru, tumuh# -e/a, ratusan tahun %ang 'a'u /eru, sudah
tumuh di Ind(nesia ai, se7ara a'ami atau diudida%a,an# @anaman /eru, %ang ada di
Ind(nesia ada'ah .eningga'an (rang Be'anda %ang mendatang,an /eru, manis dan ,e.r(,
dari &meri,a dan Ita'i Prihatman 20006#
a. K"as3!as Tanaman /Citrus sinensis(L.) Os0$1!
Di+isi E -.ermat(.h%ta
-u di+isi E &ngi(s.ermae
e'as E Di7(t%'ed(nae
rd( E Ruta'es
e'uarga E Ruta7eae
Genus E >itrus
-.esies E Citrus sinensisL #6 se7, rwa et al# 20096
0. D$s!r4s Tanaman
Citrus sinensis eru.a tanaman ,e7i' era,ar dang,a' sema, atau .(h(n#
@inggin%a se,itar ) 31! m dengan .un7a, ,eru7ut tertutu. dan seagian esar
7aangn%a erduri# Ranting miring ,eti,a muda sering dengan duri tea'# Daun ha'us
!
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
4/41
erentu, (+a' eru,uran 5315 A 238 7m erwarna hi/au ge'a. .ada agian atas
meng,i'a. sering,a'i miri. dengan au ,has uah tang,ai daun ersa%a.# Bunga ,e7i'
erentu, 'i'in ,ehi/auan3.utih erau harum ,e'(.a, erentu, .iring terdiri 5
,e'(.a, erwarna .utih erentu, u'at .an/ang dengan u,uran 1!322 7m# Buah
/eru, erwarna ,emerahan3hi/au ,e,uningan3hi/au entu, u'at u,uran 4312 7m terdiridari ,u'it ,asar dengan tea' ) mm me'indungi agian da'am erair .u'. rwa et al#
20096#
Gamar uah /eru, da.at di'ihat .ada gamar 1#1
Gamar 1#1 Citrus sinensisL#6 se7, rwa et al# 20096
1. Kan%un&an Kma Tanaman
Berdasar,an .eni'tian %ang te'ah di'a,u,an Citrus sinensismengandung itrus sinensi memi'i,i a,ti+itas seagai anti (,sidan dan antiin$'amasi#
+..2 T$r4$n5%
ata ter.en(id men7a,u. se/um'ah esar sen%awa tumuhan dan isti'ah ini
diguna,an untu, menun/u,,an ahwa se7ara i(sintesis semua sen%awa tumuhan itu erasa'
4
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
5/41
dari sen%awa %ang sama# Jadi semua ter.en(id erasa' dari m('e,u' is(.rena >2F>>!63
>F>2 dan ,erang,a ,ar(nn%a diangun ('eh .en%amungan dua atau 'eih satuan >5ini#
emudian sen%awa itu di.i'ah3.i'ah men/adi eera.a g('(ngan erdasar,an /um'ah satuan
%ang terda.at .ada sen%awa terseut dua >106 tiga >156 em.at >206 enam >!06 atau
de'a.an >406 satuan# @er.en(id terdiri atas eera.a ma7am sen%awa mu'ai dari ,(m.(nenmin%a, atsiri %aitu m(n(ter.ena dan ses,uiter.ena %ang mudah menggua. > 10 dan >156
diter.ena %ang 'eih su,ar mengua. >206 sam.ai ,e sen%awa %ang tida, mengua. %aitu
triter.en(id dan ster(' >!06 serta .igmen ,ar(ten(id >406# Masing3smasing g('(ngan
ter.en(id itu tae' 1#16 .enting ai, .ada .ertumuhan dan meta('isme mau.un .ada
e,('(gi tumuhan ar(rne 198"6#
;a'au.un se7ara i(sintesis ter.en(id di.er('eh dari m('e,u' is(.rene %aitu sen%awa
%ang memang terda.at seagai ahan a'am sen%awa terseut u,an'ah .raat in vivo.
-en%awa %ang seenarn%a ter'iat ia'ah is(.enteni' .ir($(s$at >2F>>!6>2>2PP
%ang terentu, dari asetat me'a'ui asam me+a'(nat >2>2>>!6 >2>#
Is(.enteni' .ir($(s$at terda.at di da'am se' hidu. dan er,eseimangan dengan is(mern%a
%aitu dimeti'a'i' .ir($(s$at >!62 >F>>2PP# Pada i(sintesis satu m('e,u' is(.enteni'
.ir($(s$at disamung dengan satu m('e,u' dimeti'a'i' .ir($(s$at mementu, gerani' .ir($(s$at
>106 %aitu sen%awa antara %ang meru.a,an ,un7i .ada .ementu,an m(n(ter.ena
,emudian gerani' .ir($(s$at disamung 'agi dengan is(.enteni' .ir($(s$at sehingga terentu,
$arnesi' .ir($(s$at >156 %aitu sen%awa antara .ada sintesis ses,uiter.ena ar(rne 198"6#
G('(ngan ter.en(id tumuhan da.at di'ihat .ada tae' 1#1#
@ae' 1#1 G('(ngan :tama @er.en(in @umuhanJum'ah
satuan
is(.rena
Jum'ah
,ar(n
G('(ngan Jenis utama sumern%a
1 >5 Is(.rena Didete,si da'am daun Hamamelis japonica
m(n(ter.ana da'am min%a, atsiri tumuhan misa'n%a
ment(' dariMentha6
2 >10 M(n(ter.en(id M(n(ter.ena 'a,t(n misa'n%a ne.eta'a,t(n6
@r(.('(n da'am ,a%u G%mn(s.ermae6
! >15 -es,uiter.en(id -es,uiter.ena da'am min%a, atsiri
-es,uiter.ena 'a,t(n terutama da'am >(m.(sitae6
4 >20 Diter.en(id &sam diter.ena da'am dammar tumuhan gieri'in
misa'n%a asam giere'at6
) >!0 @riter.en(id -ter(' misa'n%a sit(ster('6
@riter.ena misa'n%a =3amirin6
8 >40 @etrater.en(id ar(ten(idH misa'n%a =3,ar(tena6
N >n P('iiss(.rena aret misa'n%a da'amHevea brasiliensisH,ar(ten(id >50 di,ena' da'am eera.a a,teria
5
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
6/41
Beragai ,(minasi satuan >5 >10 dan >15 se'an/utn%a da.at ter/adi .ada sintesis
ter.en(id tinggi misa'n%a triter.en(id terentu, dari dua satuan $arnesi' dan ,araten(id
terentu, ,arena .en%amungan dua satuan gerani'3gerani'# ean%a,an ter.en(id a'am
mem.un%ai stru,tur si,'i, dan mem.un%ai satu gugus $ungsi atau 'eih hidr(,si'
,ar(ni'6 sehingga .ada 'ang,ah a,hir sintesis ter/adi si,'isasi dan (,sidasi atau.enguahan stru,tur 'ain%a ar(rne 198"6#
-e7ara ,imia ter.en(id umumn%a 'arut da'am 'ema, dan terda.at di da'am
sit(.'asma se' tumuhan# adang3,adang min%a, atsiri terda.at di da'am se' ,e'en/ar
,husus .ada .ermu,aan daun sedang,an ,araten(id terutama erhuungan dengan
,'(r(.'ast di da'am daun dan dengan ,r(m(.'ast di da'am daun unga .eta'6# Biasan%a
ter.en(id die,stra,si dari /aringan tumuhan dengan mema,ai eter min%a, umi eter atau
,'(r($'(m dan da.at di.isah,an se7ara ,r(mat(gra$i .ada si'i,a ge' atau a'umina mema,ai
.e'arut di atas# @eta.i sering ,a'i ada ,esu,aran sewa,tu mendete,si da'am s,a'a mi,r(
,arena semuan%a ,e7ua'i ,ar(ten(id6 tida, erwarna dan tida, ada .erea,si ,r(m(geni,
semesta %ang .e,a# -ering ,a'i ,ita harus menganda',an 7ara dete,si %ang nisi tida, ,has
.ada .e'at L@ %aitu .en%em.r(tan dengan asam su'$at .e,at diterus,an dengan
.emanasan ar(rne 198"6#
eis(meran meru.a,an ha' %ang umum .ada ter.en(id dan .asangan is(mer da.at
teris('asi dari tumuhan 7(nt(hn%a gerani(' dan ner(' ,eduan%a m(n(ter.ena# Di sam.ing
itu ,ean%a,an ter.en(id meru.a,an sen%awa a'isi,'i, dan ,arena 7in7in si,'(he,sana
iasan%a ter.i'in mementu, ,ursi ma,a mungin terda.at ,(n$(rmasi ge(metri, %ang
ereda ergantung .ada .en%u'ihan .ada 7in7in# arena itu stere(,imia ter.en(id si,'i,
tida, da.at di'e.as,an dan sering ,a'i su,ar ditentu,an# Dari segi .ra,tis harus diingat
ahwa .engis(meran dan tata susun3u'ang stru,tur di da'am m('e,u' da.at ter/adi dengan
mudah .ada ,(ndisi %ang nisi 'una, dan sen%awa /adian da.at terentu, sewa,tu is('asi
ar(rne 198"6#
-udah an%a, dan erma7am3ma7am .eran ter.en(id tumuhan %ang di,etahui#
-i$atn%a %ang da.at mengatur .ertumuhan sudah teru,ti dua dari g('(ngan utama
.engatur tumuhan ia'ah ses,uiter.en(id asisin dan gieri'in %ang mem.un%ai ,erang,a
dasar diter.en(id# ita sudah mengetahui .entingn%a ,ar(ten(id untu, warna tumuhan
dan sudah .asti ter.en(id >40 ini ter'ihat .u'a seagai .igmen .emantu .ada $(t(sintesis#
Bagaimana .entingn%a m(n( dan ses,uiter.en agi tumuhan untu, memer aud an
)
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
7/41
wangi %ang ,has sudah di,etahui# :mumn%a masih e'um an%a, %ang di,etahui mengenai
.eranan ter.en(id .ada antara,si tumuhan dengan hewan misa'n%a seagai a'at
,(muni,asi dan .ertahanan .ada serangga namun idang ini se,arang mudah men/adi
'a.angan .ene'itian %ang a,ti$# &,hirn%a .atut diseut,an ter.en(id tertentu %ang tida,
mengua. te'ah diim.'i,asi,an seagai h(rm(ne ,e'amin .ada $ungus ar(rne 198"6#a. Mna! a#sr
Pada min%a, atsiri %ang agian utaman%a ter.en(id iasan%a ter.en(id itu terda.at
.ada $ra,si atsiri %ang tersu'ing ua.# at ini'ah .en%ea wangi harum atau au %ang ,has
.ada an%a, tumuhan# -e7ara e,(n(mi sen%awa terseut .enting seagai dasar
wewangian a'am dan /uga untu, rem.ah3rem.ah serta seagai sen%awa 7ita3rasa a'am dan
/uga untu, rem.ah3rem.ah serta seagai sen%awa 7ita3rasa di da'am industr% ma,anan#
-u,u tumuhan %ang ,a%a a,an min%a, atsiri ia'ah su,u Compositae, Matricaria, Labiatae
misa'n%aMenthas..#Myrtaceae Eucalyptus, Pinaceae Pinus Rosaceae,unga mawar
Rutaceae, Citrus, Cuminum cyminum, Anethum# G('(ngan sen%awa 'ainn%a mung,in
terda.at ersama3sama dengan ter.ena dida'am min%a, atsiri ar(rne 198"6#
-e7ara ,imia ter.ena min%a, atsiri da.at di.i'ah men/adi dua g('(ngan %aitu
m(n(ter.ena dan ses,uiter.ena eru.a is(.ren(id >10 dan >15 %ang /ang,a titi, didihn%a
ereda titi, didih m(n(ter.ena 14031800> titi, didih sesuiter.ena 2000>6#
M(n(ter.ena da.at di.i'ah 'eih 'an/ut men/adi tiga g('(ngan ergantung .ada a.a,ah
stru,tur ,imian%a asi,'i, misa'n%a gerani('6 m(n(si,'i, misa'n%a 'im(nen6 atau isi,'i,
misa'n%a
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
8/41
M(n(ter.ena sederhana tersear 'uas dan 7enderung meru.a,an agian dari
,ean%a,an min%a, atsiri# Beera.a sen%awa iasa di/um.ai ersama3sama da'am min%a,
daun terutama
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
9/41
-i$at $isi,(3,imia 'im(nen ada'ah seagai eri,utE
Rumus ,imia E >101)
Nama ,imia E 13meti'34313 meti'eteni'6 si,'(he,san
Berat m('e,u' E 1!)2!
@iti, 'e'eh E 959(>
@iti, didih E 1"55 1")5 (>
e'arutan da'am air E 3
L(g (w E 48!
i'i.ss(n et al. 19986
+.. M$#5%$ E!s#ra!s
Pen%arian ada'ah ,egiatan .enari,an at %ang da.at 'arut dari ahan %ang tida, da.at
'arut dengan .e'arut 7air# a,t(r %ang mem.engaruhi ,e7e.atan .en%arian ada'ah ada'ah
,e7e.atan di$usi at %ang 'arut me'a'ui 'a.isan3'a.isan atas antara 7airan .an%ari dengan
ahan %ang mengandung at terseut# Met(de e,stra,si %ang diguna,an %aitu met(de
desti'asi#
Desti'asi ada'ah suatu .r(ses %ang terdiri atas eera.a taha. %aitu menguah suatu
sen%awa men/adi entu, ua.n%a meng,(ndensasi,an ua. %ang terentu, men/adi 7air
,ema'i dan menam.ung ,(ndensat ,e da'am suatu .enam.ung# Dengan 7ara ini ma,asuatu 7am.uran dengan titi, didih %ang ereda da.at di.isah,an ristanti et al# 20086#
Dengan 7ara ini .u'a ma,a sen%awa %ang 'eih mudah mengua. dengan mudah da.at
di.isah,an dari sen%awa %ang su,ar mengua.# Jadi .ada desti'asi ini ter/adi .r(ses
.emisahan %ang erdasar,an .eredaan titi, didih#
Ma7am3ma7am desti'asi di'ihat dari a'at dan te,ni, %ang diguna,an %aitu E
1# Desti'asi -ederhana
-uatu desti'asi di,ata,an sederhana /i,a rang,aian a'at %ang disusun tida,
mengguna,an ,('(m desti'asi# Desti'asi a,an memeri,an hasi' .emisahan %ang ai, /i,a
.eredaan titi, didih sen%awa3sen%awa da'am 7am.uran diatas 1000># a' %ang .er'u
di.erhati,an da'am desti'asi sederhana %aitu E
a# susunan a'at 'eih ai, artin%a desti'asi er/a'an dari ,iri ,e ,anan
# se'a'u ditamah,an atu didih ,eda'am 'au desti'asi untu, menghindari um.ing
9
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
10/41
7# 'au desti'asi %ang diguna,an harus sesuai dengan /um'ah 7am.uran %ang a,an
didesti'asi
d# .emanasan harus diatur untu, men/aga ,e7e.atan desti'asi 1 tetes .erdeti,
e# .enam.ung desti'at seai,n%a terendam da'am .enangas es untu, men7egah
terentu,n%a ua. terutama agi sen%awa %ang t(,si, mau.un %ang mudah tera,ar$# /angan .ernah mengguna,an ge'as e,er untu, menam.ung desti'at
2# Desti'asi ra,si
Bereda dengan desti'asi sederhana .ada desti'asi $ra,si diguna,an ,('(m $ra,si#
e7e.atan desti'asi /uga harus diatur sedemi,ian sehingga ,ese'uruhan a'at asah ('eh
7airan teta.i dida'am sistem tida, sam.ai ter'a'u .enuh dengan ,(ndensat# :ntu,
men7a.ai e$isiensi $ra,sinasi %ang tinggi seai,n%a diguna,an ,('(m %ang er'a.is
ham.a udara atau /i,a tida, tersedia ,('(m seai,n%a diung,us dengan a'uminium $(i'
untu, mengurangi .anas %ang hi'ang#
!# Desti'asi am.a :dara
Ban%a, 7airan (rgani, %ang tida, da.at didesti'asi .ada te,anan atm(s$ir ,arena
tem.eratur %ang di.er'u,an untu, er'angsungn%a desti'asi da.at men%ea,an sen%awa
terde,(m.(sisi# a' ini iasan%a ter/adi .ada sen%awa3sen%awa %ang memi'i,i titi, didih
diatas 2000># dengan a'at desti'asi +a,um ini ma,a sen%awa terseut da.at didesti'asi
.ada suhu %ang 'eih rendah sehingga da.at mengurangi ,emung,inan sen%awa
terde,(m.(sisi ,arena suhu tinggi#
ristanti d,,# 20086
+..6 S!rnn& F#5!ma
-,rining $it(,imia meru.a,an taha. .endahu'uan da'am .ene'itian $it(,imia 7ara ini
diguna,an seagai 'ang,ah awa' untu, memantu da'am memeri,an gamaran tentang
g('(ngan sen%awa %ang tergantung da'am tanaman %ang sedang dite'iti# Met(de %ang
diguna,an .ada s,rining $it(,imia harus memenuhi eera.a ,riteria %aitu sederhana 7e.at
han%a memutuh,an .era'atan %ang sederhana ,has untu, satu g('(ngan sen%awa memi'i,i
atas 'imit dete,si %ang 7u,u. esar da.at mendete,si ,eeradaan sen%awa mes,i da'am
,(nsentrasi %ang 7u,u. ,e7i'6 ristanti 20086#
a. I%$n#3!as T$r4$n5%
:/i s,rining sen%awa g('(ngan ter.en(id di'a,u,an dengan mengguna,an
.erea,si Lieermann3Bur7hard# Bahan sam.e' tanaman sean%a, 5gram die,stra,si
10
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
11/41
dengan .e'arut n3he,san atau .etr('eum eter 10m'6 ,emudian disaring# C,stra, %ang
di.er('eh diami' sedi,it dan di,ering,an diatas .a.an s.(t test ditamah,an tiga tetes
anhidrida asetat &726 dan ,emudian satu tetes asam su'$at .e,at 2-46# &dan%a
sen%awa g('(ngan ter.en(id a,an ditandai dengan timu'n%a warna merah ristanti
20086#
+..7 M$#5%$ P$msa'an
Pada .rinsi.n%a .r(ses .emisahan se7ara ,r(mat(gra$i me'iat,an eera.a si$at
$isi,a utama dari m('e,u' %aitu E
1# ,e7enderungan m('e,u' untu, me'arut da'am 7airan ,e'arutan6#
2# ,e7enderungan m('e,u' untu, me'e,at .ada .ermu,aan seru, ha'us ads(r.si6#
!# ,e7enderungan m('e,u' untu, mengua. ,eatsirian6#
usmardi%ani dan &sOari 19926
euntungan ,r(mat(gra$i seagai met(de ,ua'itati$ %aitu 7u.'i,an sen%awa %ang
di.er'u,an sangat sedi,it dan wa,tu ana'isis .ende,# euntungan da'am met(de ,uantitati$
ada'ah da.at mengana'isis 'angsung suatu ,(m.(nen 7am.uran atau hasi' suatu rea,si tan.a
harus me'a,u,an $ra,sinasi 'eih dahu'u sehingga da.at 'eih men/amin ,ete'itian hasi'
ana'isis usmardi%ani dan &sOari 19926#
Jenis ,r(mat(gra$i %ang diguna,an da'am ana'isis ,ua'itati$ dan ,uantitati$ %aitu
,r(mat(gra$i ,('(m ,r(mat(gra$i gas ,r(mat(gra$i ,ertas ,r(mat(gra$i 'a.is ti.is L@6
,r(mat(gra$i 7air ,iner/a tinggi >@6 dan ,r(mat(gra$i 7air +a,um# Pemi'ihan met(de ini
tergantung .ada si$at ,e'arutan dan +('ati'itas sen%awa %ang di.isah,an# r(mat(gra$i ,ertas
diguna,an untu, sen%awa tumuhan %ang 'arut air ,ar(hidrat asam amin( $en(' d''6#
L@ diguna,an untu, .emisahan sen%awa 'i.id %ang 'arut 'i.ida ster(id d''6# r(mat(gra$i
gas 7air untu, sen%awa %ang mudah mengua. asam 'ema, m(n(3 dan sesuiter.en
hidr(,ar(n dan sen%awa su'$ur usmardi%ani dan &sOari 19926#
a. Kr5ma#5&ra3 La4s T4s
r(mat(gra$i 'a.is ti.is ada'ah met(de .emisahan $isi,(,imia# La.isan %ang
memisah,an %ang terdiri atas ahan erutir3utir $ase diam6 ditem.at,an .ada
.en%angga eru.a .e'at ge'as '(gam atau 'a.isan %ang 7(7(,# >am.uran %ang a,an
di.isah eru.a 'arutan dit(t(',an eru.a er7a, atau .ita awa'6# -ete'ah .e'at atau
11
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
12/41
'a.isan ditaruh di da'am e/ana tertutu. ra.at %ang erisi 'arutan .engemang %ang
7(7(, $ase gera,6 .emisahan ter/adi se'ama .eramatan ,a.i'er .engemangan6# ase
diam %ang diguna,an da'am L@ meru.a,an .en/era. eru,uran ,e7i' dengan diameter
.arti,e' antara 103!0 m# -ema,in ,e7i' u,uran rata3rata .arti,e' $ase diam dan sema,in
sem.it ,isaran u,uran $ase diam ma,a sema,in ai, ,iner/a L@ da'am ha' e$isiensin%adan res('usin%a Gand/ar dan R(hman 20096#
Pen/era. %ang .a'ing sering diguna,an ada'ah si'i,a dan seru, se'u'(sa
sementara me,anisme .emisahan %ang utama .ada L@ ada'ah .artisi dan ads(rsi#
La.isan ti.is %ang diguna,an seagai .en/era. /uga da.at diuat dari si'i,a %ang te'ah
dim(di$i,asi# Beera.a .en/era. L@ seru.a dengan .en/era. %ang diguna,an .ada
>@# ean%a,an .en/era. di,(ntr(' ,ea/egan u,uran .arti,e' dan 'uas
.ermu,aann%a Gand/ar dan R(hman 20096#
ase gera, .ada L@ da.at di.i'ih dari .usta,a teta.i 'eih sering dengan
men7(a37(a ,arena wa,tu %ang di.er'u,an han%a seentar# -istem %ang .a'ing
sederhana ia'ah 7am.uran 2 .e'arut (rgani, ,arena da%a e'usi 7am.uran ,edua .e'arut
ini da.at mudah diatur sedemi,ian ru.a sehingga .emisahan da.at ter/adi se7ara
(.tima'# Pada .rinsi.n%a .enger/aan L@ me'i.uti taha.3taha. seagai eri,ut E
a# Pemuatan .e'at
Disam.ing .e'at dengan u,uran esar 20 7m A 20 7m atau 10 7m A 20 7m ada
eragai /enis .e'at %ang umum diguna,an da'am L@ antara 'ain ada'ah .e'at L@
seagai 'a.isan ,e7i' %ang diuat .ada ,a7a (/e, usmardi%ani dan &sOari 19926#
# Pen(t('an 7u.'i,an .ada .e'at
Pemisahan .ada ,r(mat(gra$i 'a.is ti.is %ang (.tima' a,an di.er('eh han%a /i,a
men(t(',an sam.e' dengan u,uran er7a, se,e7i' dan sesem.it mung,in#
-eagaimana da'am .r(sedur ,r(mat(gra$i 'ain /i,a sam.e' %ang diguna,an ter'a'u
an%a, ma,a a,an menurun,an res('usi# Pen(t('an sam.e' %ang tida, te.at a,an
men%ea,an er7a, %ang men%ear dan .un7a, ganda# :ntu, mem.er('eh
re.r(dusii'itas +('ume sam.e' %ang dit(t(',an .a'ing sedi,it 05 L# Ji,a +('ume
sam.e' %ang a,an dit(t(',an 'eih esar dari 2310 L ma,a .en(t('an harus
di'a,u,an se7ara ertaha. dengan di'a,u,an .engeringan antar t(t('an Gand/ar dan
R(hman 20096#
12
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
13/41
7# Pemi'ihan ads(ren
Beragai /enis ads(ren %ang tersedia di .erdagangan dan .a'ing umum diguna,an
antara 'ain ada'ah si'i,a ge' a'umina ,ise'gur dan se'u'(sa# -i'i,a ge' meru.a,an
ads(ren %ang .a'ing an%a, diguna,an disedia,an da'am eragai /enis dengan
s.esi$itas %ang ereda# Biasan%a di7am.ur dengan ,a'sium su'$at seagai .engi,atuntu, menem.e',an ads(ren .ada .e'at .en%angga usmardi%ani dan &sOari
19926#
&'umina ersi$at asa dan da.at di.er('eh dengan atau tan.a .engi,at# ise'gur
ersi$at netra' dan da%a ads(rsin%a 'eih 'emah dari.ada si'i,a ge' atau a'umina
/uga tersedia da'am entu, 7am.uran dengan atau tan.a .engi,at# -e'u'(sa ersi$at
seagai serat %ang da.at diguna,an tan.a .engi,at# -eru, se'u'(sa dengan eragai
si$at .enu,ar i(n da.at di.er('eh dengan atau tan.a .engi,at# >(nt(h dari ads(ren
ini antara 'ain ada'ah dieti'amin( eti' se'u'(sa dan ,ar(,si meta' se'u'(sa
usmardi%ani dan &sOari 19926#
d# Pemi'ihan sistem .engemang
Pemi'ihan ini tergantung .ada si$at 7am.uran sen%awa %ang a,an di.isah,an dan
media .emisahan %ang diguna,an# Pada umumn%a .('aritas .e'arut dan .('aritas
sen%awa disesuai,an untu, menda.at,an sistem .engemang %ang a,an diguna,an#
Pe'arut %ang ersi$at 'eih .('ar umumn%a memeri,an da%a migrasi %ang 'eih
esar disam.ing itu .enggunaan ,(minasi dua .e'arut atau 'eih a,an memeri,an
hasi' .emisahan %ang 'eih ai, dari .ada .e'arut tungga'# -e7ara umum .e'arut %ang
diguna,an untu, L@ 'eih er+ariasi dianding,an dengan .e'arut .ada
,r(mat(gra$i ,ertas# @eta.i ,eteru'angan harga R$ .ada L@ ,urang sehingga
di.er'u,an satu atau 'eih sen%awa .emanding seagai a7uan usmardi%ani dan
&sOari 19926#
e# Pengemangan ,r(mat(gram
Pe'at L@ %ang sia. untu, di,emang,an umumn%a dimasu,,an se7ara +erti,a' ,e
da'am e/ana ,r(mat(gra$i dan .engemangan di,er/a,an se7ara menai,# arga R$
antara 'ain di.engaruhi ('eh dera/at ,e/enuhan ruangan di da'am e/ana ,r(mat(gra$i#
:ntu, itu dinding see'ah da'am e/ana di'a.isi dengan ,ertas saring %ang te'ah
diasahi dengan sistem .e'arut sehingga udara di da'am e/ana terseut teta. /enuh
.e'arut# Pada L@ .e'arut ergera, dengan 7e.at .ada .e'at dan iasan%a di.er'u,an
1!
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
14/41
/ara, ramat 10312 7m dari titi, .en(t('an# -ete'ah .e'at terseut diang,at ,e 'uar
dari e/ana .e'arut a,an mengua. dengan sangat 7e.at sehingga seai,n%a garis
de.an .e'arut segera ditandai usmardi%ani dan &sOari 19926#
Gamar 1#!# r(mat(gra$i 'a.is ti.is menai,
usmardi%ani dan &sOari 19926#
-e'ain 7ara menai, terseut ada eera.a 7ara .engemangan ,r(mat(gram %ang
umum diguna,an se.erti .engemangan h(ri(nta' .engemangan ganda
.engemangan ,(ntin%u .engemangan menurun dan .engemangan 'andaian
usmardi%ani dan &sOari 19926#
$# Dete,si er7a,
Ber7a, .emisahan .ada L@ umumn%a meru.a,an er7a, %ang tida, erwarna#
:ntu, .enentuann%a da.at di'a,u,an se7ara ,imia $isi,a mau.un i('(gi# >ara
,imia %ang iasa diguna,an ada'ah dengan merea,si,an er7a, dengan suatu
.erea,si me'a'ui 7ara .en%em.r(tan sehingga er7a, men/adi /e'as# >ara $isi,a %ang
da.at diguna,an untu, menam.a,,an er7a, ada'ah dengan .en7a7ahan radi(a,ti$
dan $'u(resensi sinar u'tra+i('et# '(uresensi sinar u'tra+i('et terutama untu, sen%awa
%ang da.at er$'u(resensi memuat er7a, a,an ter'ihat /e'as# Ji,a sen%awa tida,
da.at er$'u(resensi ma,a ahan .en%era.n%a a,an dieri indi,at(r %ang
er$'u(resensi dengan demi,ian er7a, a,an ,e'ihatan hitam sedang 'atar
e'a,angn%a a,an ,e'ihatan er$'u(resensi Gand/ar dan R(hman 20096# Beri,ut
ada'ah 7ara37ara ,imiawi untu, mendete,si er7a, E
Men%em.r(t 'em.eng L@ dengan reagen ,r(m(geni, %ang a,an erea,si se7ara
,imia dengan se'uruh s('ut %ang mengandung gugus $ungsi(na' tertentu sehingga
er7a, men/adi erwarna# adang3,adang 'em.eng di.anas,an ter'eih dahu'u
untu, mem.er7e.at rea,si .ementu,an warna dan intensitas warna er7a,#
14
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
15/41
Mengamati 'em.eng di awah sinar 'am.u u'tra +i('et %ang di.asang .an/ang
ge'(mang emisi 254 atau !)) untu, menam.a,,an s('ut seagai er7a, %ang
ge'a. atau er7a, %ang er$'u(resensi terang .ada dasar %ang er$'u(resensi
seragam#
Men%em.r(t 'em.eng dengan asam su'$at .e,at atau asam nitrat .e,at 'a'u
di.anas,an untu, meng(,sidasi s('ut3s('ut (rgani, %ang a,an nam.a, seagai
er7a, hitam sam.ai ,e7(,'at37(,'atan#
Mema.ar,an 'em.eng dengan ua. i(dium da'am 7hamer tertutu.#
Me'a,u,an scannin! .ada .ermu,aan 'em.eng dengan densit(meter suatu
instrument %ang da.at mengu,ur intensitas radiasi %ang dire$'e,si,an dari
.ermu,aan 'em.eng ,eti,a disinari dengan 'am.u :* atau 'am.u sinar tam.a,#
-('ut3s('ut %ang mam.u men%era. sinar a,an di7atat seagai .un7a, peak6 da'am.en7atat recorer6
Gand/ar dan R(hman 20096
Penggunaan L@ da.at digaung,an dengan G> se7ara menguntung,an ,arena
,eduan%a da.at digaung,an dengan G> se7ara menguntung,an ,arena ,eduan%a sa'ing
me'eng,a.i# Bah,an i'a radas G> tida, tersedia ,ita masih da.at mengana'usa min%a,
atsiri dengan mema,ai L@ seagai satu3satun%a 7ara .emisahan# ;a'au.un ada radas
G> L@ teta. erguna .ada setia. taha. .emisahan dan ana'isis ter.ena itu# Bi'a ,ita
menghada.i ses,uiter.en(id %ang ,eatsiriann%a rendah mung,in L@ meru.a,an 7ara
.i'ihan#
-i'i,a ge' meru.a,an .en/era. %ang .a'ing an%a, diguna,an dengan .engemang
se.erti enene ,'(r($(rm enene3,'(r($(rm 1E16 dan enene3eti' asetat 19E16# :ntu,
ana'isis ter.ena %ang mengandung (,sigen misa'n%a ,ar+(n6 'a.isan si'i,a /angan
dia,ti$,an du'u see'um di.a,au ,arena air %ang ada memantu .emisahan#
@er.ena a'7(h(' .a'ing ai, di.isah,an mema,ai .e'at %ang dia7em dengan
.ara$$in dengan .engemang metan(' "0Q# Pe'at si'i,a ge' %ang te'ah dia,ti$,an harus
di7e'u.,an du'u ,e da'am 'arutan .ara$$in 5Q da'am eter min%a, umi se'ama satu menit
,emudian diiar,an m(ngering see'um di.a,ai# Pengemangann%a# Metan(' "05 harus
di/enuh,an /uga dengan min%a, .ara$$in#
15
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
16/41
M(di$i,asi 'ain untu, memisah,an ter.ena erdasar,an /um'ah i,atan rang,a. ia'ah
mengguna,an .e'at L@ si'i,a ge' %ang diuat dengan .en%a.utann%a mengguna,an uur
si'i,a ge' %ang diuat dengan 'arutan 25Q &gN! da'am air seagai .engganti air#
Pengemang %ang diguna,an untu, .e'at si'i,a ge' &gN! ia'ah meti'ena ,'(rida3,'(r($(m3
eti' asetat3n#.r(.an(' 45E45E45E456>ara umum dete,si ia'ah men%em.r(t dengan 'arutan Mn4 02Q da'am air
antim(n% ,'(rida da'am ,'(r($(rm 2-4 .e,at atau +ani''in3 2-4# Perea,si tera,hir
diuat segar dengan menamah,an 8 m' etan(' sami' didingin,an ,e da'am 05 g +ani'in
da'am 2 m' 2-4 .e,at# -ete'ah disem.r(t .e'at di.anas,an .ada 10031050> sam.ai
.ementu,an warna sem.urna# &da .erea,si %ang 'eih se'e,ti$ untu, mendete,si ter.ena
%ang mem.un%ai i,atan rang,a. ua. r(m6 dan ter.ena %ang mem.un%ai gugus ,et(n
243dinitr( $eni'hidrain6# @angga.an eera.a ter.ena umum terhada. .erea,si dete,si
ter'ihat .ada ta'e 1#!#
@ae' 1#2 Dete,si M(n(ter.ana .ada Pe'at r(mat(gra$i La.is @i.is
@angga.an terhada. u/iH
@er.ena :* Br(m 243DNP 2-4.e,at
Lim(nena 3 3 >(,'at
(,'at
Pu'eg(n uning
Gerani(' 3 3 Lema%ung
ar+(n Merah /amu
S3-imena 3 3 3
se'ama 10 menit
ar(rne 198"6#
0. Kr5ma#5&ra3 K5"5m
Pada .r(ses .emisahan ini 7am.uran %ang a,an di.isah,an di'eta,,an .ada
agian atas ,('(m ads(ren %ang erada da'am suatu taung# Pe'arut seagai $ase gera,
,arena ga%a erat atau did(r(ng ('eh te,anan diiar,an menga'ir me'a'ui ,('(m
memawa serta .ita 'inarut %ang ergera, dengan ,e7e.atan ereda# Linarut %ang te'ah
memisah di,um.u',an eru.a $ra,si %ang ,e'uar dari agian awah ,('(m sehingga
met(de ini meru.a,an ,r(mat(gra$i e'usi usmardi%ani dan &sOari 19926#
1# r(mat(gra$i ,('(m ads(r.si
1)
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
17/41
Pada .rinsi.n%a met(de .emisahan ini didasar,an .ada .eristiwa ads(r.si
sen%awa ana'it# at .en%era. misa'n%a a'uminium (,sida %ang te'ah dia,ti$,an si'i,a
ge' tanah diat(me ter,a'sinasi atau tanah si'i,a %ang dimurni,an untu, ,r(mat(gra$i6
da'am ,eadaan ,ering atau da'am 7am.uran dengan air dimam.at,an ,e da'am taung
,a7a %ang di'eng,a.i ,eran /enis tertentu .ada agian awahn%a seagai ,('(m,r(mat(gra$i# -ee'umn%a .ada agian awah taung di'eta,,an segum.a' ,e7i' g'ass
w((' atau ,a.as untu, menahan ads(ren# at u/i di'arut,an da'am se/um'ah ,e7i'
.e'arut dituang,an ,e da'am ,('(m dan diiar,an menga'ir ,e da'am at .en%era.# at
er,hasiat diads(rsi dari 'arutan se7ara ,uantitati$ ('eh ahan .en%era. eru.a .ita
sem.it .ada .ermu,aan atas ,('(m# Dengan .enamahan .e'arut me'a'ui ,('(m ('eh
ga%a gra+itasi atau dengan memeri,an te,anan masing3masi ng at ergera, turun
da'am ,('(m dengan ,e7e.atan tertentu sehingga ter/adi .emisahan dan di.er('eh
,r(mat(gram# La/u gera,an at di.engaruhi ('eh se/um'ah +ariae' misa'n%a da%a
ads(r.si at .en/erat u,uran .arti,e' dan 'uas .ermu,aan si$at dan .('aritas .e'arut
te,anan %ang diguna,an dan suhu sistem ,r(mat(gra$i De.,es RI 19956#
Ji,a at %ang ter.isah erwarna atau er$'u(resensi dengan sinar :* ,('(m
.en%era. da.at di,e'uar,an dan dengan 7ara mem(t(ng me'intang 'a.isan %ang
di.er'u,an da.at di.isah,an at disari dengan .e'arut %ang 7(7(,# Ji,a at %ang ter.isah
ta, erwarna 'eta, 'a.isan at da.at diteta.,an dengan 7ara memeri warna atau
men%em.r(t ,('(m %ang te'ah di,e'uar,an dengan .erea,si %ang da.at mementu,
warna# at radi(a,ti$ da.at di,etahui tem.atn%a dengan mengguna,an .en7a7ah Geiger
Mu''er atau a'at %ang se/enis# Pemisahan %ang 'eih an%a, di'a,u,an ada'ah .emisahan
dengan menga'ir,an .e'arut me'a'ui ,('(m sehingga at er,hasiat %ang di,ehenda,i
,e'uar da'am e'uat# >ara ini diseut ,r(mat(gra$i menga'ir# adar at da'am e'uat da.at
diteta.,an dengan 7ara titrasi s.e,tr($(t(metri atau ,('(rimetri atau .e'arut da.at
diua.,an hingga di.er('eh at da'am ,eadaan ham.ir murni# Ji,a di,ehenda,i
.emisahan eera.a at er,hasiat da.at di'a,u,an dengan menga'ir,an se'an/utn%a
.e'arut %ang sama atau .e'arut 'ain %ang memi'i,i da%a e'uasi %ang ,uat De.,es RI
19956#
2# r(mat(gra$i ,('(m .artisi
Pada ,r(mat(gra$i ini at %ang harus di.isah,an teragi antara 2 7airan %ang
tida, da.at ter7am.ur# -a'ah satu 7airan %aitu $ase %ang diam atau $ase %ang 'eih .('ar
1"
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
18/41
iasan%a disera. ('eh at .en%era. .adat ,arena itu memeri,an daerah .ermu,aan
%ang sangat 'uas ,e.ada .e'arut %ang menga'ir atau $ase gera, atau $ase %ang ,urang
.('ar dan menghasi',an .emisahan %ang ai, %ang tida, da.at di7a.ai .ada .en%arian
dengan 7ara .eng(7(,an# r(mat(gra$i ,('(m .artisi di'a,u,an dengan 7ara miri.
dengan ,r(mat(gra$i ,('(m ads(r.si %aitu 7am.uran %ang te'ah di'arut,an da'amsedi,it .e'arut ditamah,an .ada .un7a, ,('(m dan e'uasi di'a,u,an dengan .e'arut
%ang menga'ir# :mumn%a see'um diguna,an $ase ergera, di/enuh,an dahu'u dengan
$ase tida, ergera,# Da'am ha' tertentu 'eih ai, at %ang di.eri,sa %ang te'ah
di'arut,an da'am $ase tida, ergera, ditamah,an .ada sedi,it at .en%era. ,emudian
7am.uran ini di.indah,an .ada .un7a, ,('(m De.,es RI 19956#
1. Kr5ma#5&ra3 Gas
r(mat(gra$i gas meru.a,an met(de %ang dinamis untu, .emisahan dan dete,si
sen%awa3sen%awa %ang mudah mengua. da'am suatu 7am.uran# egunaan umum
,r(mat(gra$i gas ada'ah untu, memisah,an sen%awa %ang mudah mengua. ai, se7ara
,ua'itati$ atau.un ,uantitati$ sen%awa da'am suatu 7am.uran# Prinsi. ,er/a
,r(mat(gra$i gas ada'ah .emisahan dimana s('ut3s('ut %ang mudah mengua. dan
stai' terhada. .anas6 ermigrasi me'a'ui ,('(m %ang mengandung $ase diam dengan
suatu ,e7e.atan %ang tergantung .ada rasi( distriusin%a# Pemisahan ter/adi ,arena
.eredaan titi, didih masing3masing sen%awa# ase gera, eru.a gas a,an
menghantar,an s('ut ,e dete,t(r Gan/ar dan R(hman 200"6
Gamar 1#4 &'at ,r(mat(gra$i gas
18
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
19/41
Dete,t(r %ang diguna,an .ada gas ,r(mat(gra$i ada'ah dete,t(r hantar .anas
dete,t(r i(nisasi n%a'a s.e,tr(s,(.i massa dan res(nansi magnet inti Gand/ar dan
R(hman 200"6#
G> meru.a,an 7ara ter.enting untu, mene'aah min%a, atsiri ,arena dengan
se,a'i ,er/a G> memung,in,an ana'isis ,ua'itati$ dan ,uantitati$# a' ini terutama.enting i'a se/um'ah sen%awa %ang seru.a terda.at da'am semua angg(ta ,e'(m.(,
tertentu dengan demi,ian .eredaan ,uantitati$'ah %ang .a'ing erarti# -udah'ah .asti
G> meru.a,an a'at %ang ta, terganti,anuntu, te'aah ,em(ta,s(n(mi min%a, atsiri
da'am daun dan ,u'it se.erti da'am gimn(s.ermae#
:ntu, mengidenti$i,asi ter.ena atsiri da'am suatu ahan tumuhan .enggunaan
G> harus digaung dengan 7ara 'ain terutama dengan L@# Misa'n%a L@ erguna
untu, memantau $ra,si %ang di.isah,an dengan G> .re.arati+e sea'i,n%a i'a radas
G> .re.arati$ tida, tersedia .emisahan s,a'a esar da.at di'a,u,an .ada L@
,emudian $ra,si L@ di.antau dengan G># :ntu, memasti,an identitas .ada wa,tu
'am.au s.e7trum in$ramerah min%a, atsiri %ang te'ah di.isah,an diuat se7ara rutin
teta.i se,arang 'eih 'aim memuat s.e7trum massan%a ,arena ,ean%a,an ter.ena
memeri,an .('a .e7ahan %ang ,has# Da'am ha' ,ritis ai, s.e7trum in$ramerah
mau.un s.e7trum massa harus ditentu,an#
ra,sinasi .endahu'uan e,stra, eter ,asar atau e,stra, eter min%a, umi ,asar
tumuhan dengan ,r(mat(gra$i ,('(m asam si'i,at ,adang3,adang menguntung,an
,arena 7ara ini men7egah .en7emaran ,(',(m G> ('eh .en7emar %ang ertiti, didih
tinggi %ang mung,in terda.at da'am e,stra, ,asar terseut# @eta.i hasi' %ang
memuas,an te'ah di.er('eh di'a(rat(rium ini dengan meng,r(mat(gra$i 'angsung
e,stra, eter ,ering daun atau seru, i/i#
Beragai /enis $ase diam untu, ,('(m te'ah diguna,an untu, meng,r(mat(gra$i
min%a, atsiri# Barang,a'i $ase n(n.('ar %ang .a'ing .(.u'ar ia'ah a.ie(n L dan si'i7(n
-C !0# ase .('ar %ang .a'ing an%a, diguna,an ia'ah .('%ester dieti'ena g'i,(' adi.at
dan >ar(waA 400# arus di.erhati,an agar ahan .en%angga misa'n%a >hr(m(s(r
;6 harus eas dari sese.(ra esi atau asam ,arena ter.ena .e,a terhada. .en7emar
%ang demi,ian#
Pada G> min%a, atsiri ,asar di.er'u,an .emr(graman suhu agar da.at
memisah,an m(n(ter.ena sesuiter.ena dan turunanter(,sigenasi 'ainn%a dengan ai,#
19
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
20/41
Pada ,('(m n(n.('ar hidr(,ar(n tere'usi menurut titi, didihn%a teta.i .ada ,('(m
/enis 'ai tida, se'a'u da.at di.er,ira,an wa,tu retensi nisin%a# Beera.a 7(nt(h wa,tu
retensi nisi ter'ihat .ada tae' 1#2# Ini dieri,an untu, memer gamaran ahwa .er'u
mengguna,an 'eih dari satu ,('(m untu, memisah,an dan mengidenti$i,asi ter.ena#
Jadi .asangan sen%awa %ang er,aitan misa'n%a K
!
,arena # >ara ini te'ah diguna,an
dengan erhasi' ai, .ada .(t(ngan ahan herarium# %ang wa'au.un te'ah disim.an
.ada 'emaran ,ertas se'ama ertahun3tahun masih menghasi',an 7u,u. min%a, atsiri
untu, da.at ditentu,an .('a susunan%a ar(rne 198"6# ;a,tu retensi nisi ter.ena
.ada ,r(mat(gra$i gas da.at di'ihat .ada tae' 1#2#
@ae' 1#! ;a,tu Retensi Nisi @er.ena .ada r(mat(gra$i Gas >air
RRt da'am ,('(mH
@er.ena &.ie(n
N 10Q
P('ieti'ena g'i,('
15Q
P('ieti'ena g'i,('
is.r(.i(nitri' 15Q
se.an/ang ,('(m !00 7m#
20
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
21/41
+..7 S4$!#r5m$#r Massa
>ara ini da.at di'a,u,an dengan /um'ah at %ang sangat sedi,it# :ntu, .emuatan
s.e,trum massa han%a diutuh,an se,itar 1 mi,r(gam sam.ai .a'ing tinggi 05mg at#
Pada s.e,tr(metri massa .r(ses %ang ter/adi ada'ah seagai eri,ut E
3 I(nisasi m('e,u' .ada mana a,an terentu, hasi' i(nisasi ermuatan .(sii$3 Me.er7e.at i(n .(siti$ me'a'ui medan 'istri,
3 Pemisahan i(n erdasar,an .erandingan massan%a terhada. muatan mTe6
3 Identi$i,asi dan registrasi i(n
:ntu, i(nisasi sen%awa %ang mengua. da'am +a,um tinggi ditema, dengan
e'e,tr(n# Da'am ha' ini e'e,tr(n a,an ter'em.ar ,e'uar dari ('e,u'# &,an dida.at ,ati(n3
m('e,u' ermuatan .(siti$ tungga' atau ganda# Bagian dari ,ati(n3m('e,u' ermuatan
.(siti$ tungga' atau ganda# Bagian dari ,ati(n3m('e,u' ini .ada wa,tu ertemu dengan
e'e7tr(n a,an menerima /um'ah energi %ang tinggi a,an men%ea,an .enguraian 'eih
'an/ut# ati(n m('e,u' ini man/adi $ragmen %ang 'eih ,e7i' $ragmentasi6# ati(n3
,ati(n dan $ragmen %ang ermuatan .(siti$ a,an di.er7e.at ('eh tegangan tari,an dan
die'(,,an da'am agian ana'is s.e7tr(meter massa#
Bagian ini terdiri dari taung '(gam %ang terda.at diantara dua ,utu magnet#
Medan magnet a,an meme'(,,an agian %ang ermuatan dari arah garis 'urus a'iran
men/adi .ita %ang e'eng,ung %ang dengan .eruahan ,(ntin%u medan magnet atau
tegangan tari,an ,ati(n sesuai dengan massan%a a,an diregistrasi erurutan seagai
s.e7trum massa R(t and Ba's7h,e 19886#
21
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
22/41
BAB II
RANCANGAN PEMISAHAN LIMONEN
2.+ A"a# %an Ba'an
,.+.+ A"a# P$n$"#an&'at %ang diguna,an da'am .ene'itian ini ada'ah a'at3a'at ge'as m(rtir a'at
.enggi'ing blener6 timangan ana'iti, desi,at(r 7awan .(rse'en (+en vaccum rotary
evaporator danchamberL@ dan ,('(m ,r(mat(gra$i Pi.et mi,r( 'am.u :* ('(m
DB 5#
2.+.2 Ba'an P$n$"#an
Bahan %ang diguna,an untu, .ene'itian ada'ah sim.'isia u'it uah /eru, %ang
di.er('eh metan(' auades eter .r(te'eum eter si'i,a mesh 203!5 .'at si'i,a ge' G)0
enen ,'(r($(rm 24 DNP asam su'$at .e,at gas he'ium >' 'ierman (ur7hard
Na2-4 Na>' .erea,si serium su'$at 1Q#
2.2 P$"a!sanaan P$n$"#an
2.2.+ P$na4an Ba'an
u'it uah /eru, di,u.as .aren,im .utih erentu, s.(ns dihi'ang,an# u'it uah
/eru, ,emudian di,ering,an dengan .emanasan tida, 'angsung atau dengan di angin
angin,an# -ete'ah .engeringan se'esai u'it uah /eru, di,e7i',an u,uran .arti,e'n%a
dengan mengguna,an 'ender sehingga dihasi',an seru, ,u'it uah /eru,
2.2.2.P$n$#a4an Ka%ar Ar
Pr(sedur .eneta.an ,adar air di'a,u,an dengan 7ara desti'asi se.erti eri,utE
1# &'at
-euah 'au 500 mL dihuung,an dengan .endingin a'ir a'i, dengan
.ert('(ngan a'at .enam.ung# @aung .enerima 5 m' ers,a'a 01 m'# Pemanas %ang
diguna,an seai,n%a .emanas 'istri, %ang suhun%a da.at diatur atau tangas min%a,#
Bagian atas 'au taung .en%amung seai,n%a diung,us dengan ases De.,es RI
19956#
22
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
23/41
2# Perea,si
-e/um'ah t('uen P di,(7(, dengan sedi,it air diiar,an memisah diuang
'a.isan air su'ing De.,es RI 19956#
!# >ara Peneta.an
@aung .enerima dan .endingin diersih,an dengan asam .en7u7i dii'as
dengan air di,ering,an da'am 'emari .engering# e da'am 'au ,ering dimasu,,an
se/um'ah at %ang ditimang sa,sama %ang di.er,ira,an mengandung 2 m' sam.ai 4
m' air# Ji,a at eru.a .asta ditimang da'am sehe'ai 'emaran '(gam dengan u,uran
%ang sesuai dengan 'eher 'au# :ntu, at %ang da.at men%ea,an ge/('a, mendada,
ditamah,an .asir ,ering %ang te'ah di7u7i se7u,u.n%a hingga men7u,u.i dasar 'au
atau se/um'ah taung ,a.i'er .an/ang 'eih ,urang 100 mm %ang sa'ah satu u/ungn%a
tertutu.# Dimasu,,an 'eih ,urang 200 m' t('uen ,e da'am 'au dihuung,an dengan
a'at# Dituang t('uen ,e da'am taung .enerima me'a'ui a'at .endingin# Di.anas,an
'au hati3hati se'ama 15 menit De.,es RI 19956#
-ete'ah t('uen mu'ai mendidih disu'ing dengan ,e7e.atan 'eih ,urang 2 tetes
tia. deti, hingga seagian esar air tersu'ing ,emudian dinai,,an ,e7e.atan hingga 4
tetes tia. deti,# -ete'ah semua air tersu'ing agian da'am .endingin di7u7i dengan
t('uen sami' diersih,an dengan si,at taung %ang disamung,an .ada seuah ,awat
temaga dan 'eih diasahi dengan t('uen# Pen%u'ingan di'an/ut,an se'ama 5 menit#
@aung .enerima .endingin diiar,an hingga suhu ,amar# Ji,a ada tetes air %ang
me'e,at .ada .endingin taung .enerima dig(s(, dengan ,aret %ang dii,at,an .ada
seuah ,awat temaga dan asahi dengan t('uen hingga tetesan air turun# -ete'ah air
dan t('uen memisah sem.urna +('ume air dia7a# itung ,adar air da'am Q# De.,es
RI 19956#
2.2., E!s#ra!s %$n&an D$s#"as
Ditimang sean%a, 150 gram u'it uah /eru, dimasu,,an ,e da'am 'au 'eher tiga
dan ditamah,an 200 mL auades# Pera'atan disti'asi dirang,ai dan .r(ses disti'asi
di/a'an,an sam.ai min%a, u'it uah /eru, tere,stra, se'uruhn%a# -e'ama .r(ses disti'asi
+('ume di/aga ,(nstan# Disti'at ditam.ung untu, .emisahan se'an/utn%a urniawan
20086#
2!
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
24/41
2.2. E!s#ra!s %$n&an D$s#"as B$r#n&!a#
Pr(ses is('asi dan .uri$i,asi 'im(nen diawa'i dengan .r(ses desti'asi $ra,si(na'
dengan .emisahan 'im(nen .ada te,anan %ang ereda# (ndisi suhu dan te,anan
dim(di$i,asi untu, menda.at,an 'im(nen %ang murni# Desti'asi di'a,u,an .ada te,anan
!00 115 atau 100 mm g sedang,an untu, suhu di'a,u,an .ening,atan suhu se7araertaha.# emudian $ra,si ditam.ung# -uhu %ang (.tima' untu, memisah,an 'im(nen
ada'ah 25#032)#! U># Disti'at ditam.ung dan ditamah,an Na>'# ase air dan min%a,
di.isah,an dengan megguna,an 7(r(ng .isah# -e'an/utn%a ditamah,an Na2-4anhidrat
,emudian disaring untu, memisah,an Na2-4 &manadeh et al.,200)6#
2.2.6 S!rnn& F#5!ma #$r4$n5%
-ean%a, 1 gram seru, sim.'isia disari dengan 20 m' eter se'ama 2 /am disaring
,emudian di'a,u,an .emeri,saan .ada masing3masing .erea,si dengan .r(sedur seagai
eri,utE
1# i'trat sean%a, ! tetes ditamah dengan 2 tetes .erea,si -a',(ws,% 2-4 .e,at6#
&.ai'a terentu, warna merah menun/u,,an adan%a ter.en(idaTster(ida#
2# i'trat sean%a, ! tetes ditamah,an dengan 2 tetes .erea,si Lieermann B(u7hard#
&.ai'a terentu, warna ungu atau merah %ang eruah men/adi iru ungu atau iru
hi/au menun/u,,an adan%a ter.en(idaTster(ida#
!# i'trat sean%a, ! tetes ditamah,an dengan 2 tetes .erea,si 7erium su'$at 1Q#
&.ai'a terentu, warna 7(,'at menun/u,,an adan%a ter.en(idaTster(ida#
Pr(sedur %ang sama /uga di'a,u,an untu, sam.e' da'am entu, asah#
2.2.7 Pur3!as %$n&an Kr5ma#5&ra3 !5"5m
:ntu, .emurnian 'eih 'an/ut dari 'im(nen di'a,u,an dengan met(de ,r(mat(gra$i
,('(m# Disia.,an ,('(m si'i,a ge' G)0 mesh 203!56 dan arang a,ti$# Min%a,
dimasu,,an ,e da'am ,('(m dan die'usi dengan .etr('eum eter ,emudian $ra,si
ditam.ung se'ama 5 menit#
2.2.8 I%$n#3!as Lm5n$n %$n&an KLT
Identi$i,asi terhada. min%a, atsiri ai, hasi' desti'asi air desti'asi $ra,si(na' dan
,r(mat(gra$i ,('(m di'a,u,an dengan met(de L@ dan .erea,si warna#
24
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
25/41
a# Pen%ia.an P'at
Disia.,an .'at L@ si'i7a ge' G)0disia.,an sean%a, ! uah# Pada te.i
atas dan awah dieri atas 1 7m# P'at di7u7i da'am 7hamer %ang erisi 2 mL
metan(' dan die'usi sam.ai semua .'at terasahi# P'at dia,ti+asi da'am (+en
.ada suhu 120V> se'ama !0 menit#
# Pen%ia.an e'uen
Diuat e'uen dengan ,(m.(sisi enenaE,'(r($(rm 1E1 +T+6 sean%a, 10
mL# Pe'arut dimasu,an ,e da'am 'au u,ur 10 mL dan dig(/(g hingga
h(m(gen# C'uen dimasu,,an ,e da'am 7hamer untu, .r(ses .en/enuhan#
7# Pen(t('an Penge'usian dan Identi$i,asi
Diami' sean%a, masing3masing 25L 'arutan u/i dan standar 'im(nen
,emudian dit(t(',an .ada .'at# P'at ,emudian die'usi dengan e'uen di atas
dengan /ara, ramat 8 7m# -ete'ah die'usi .'at di,ering,an da'am (+en .ada
suhu 100V> se'ama 10 menit# P'at I di'ihat di awah :*254 ,emudian disem.r(t
dengan 2-4.e,at# P'at I ,emudian di.anas,an .ada suhu 100(> se'ama 10
menit# P'at II disem.r(t dengan 'arutan $'u(resein 005Q da'am air dan diua.i
dengan r(m# P'at III disem.r(t dengan 24 DNP#
2.2.9 I%$n#3!as Lm5n$n %$n&an GC:MS
Identi$i,asi terhada. min%a, atsiri hasi' .enggaungan $ra,si ,r(mat(gra$i ,('(m
di'a,u,an dengan s.e,tr(meter G> M-# -am.e' diana'isis di awah ,(ndisi eri,utE
@erm(uest G> 2000 ,('(m DB35 !0m W 250 Xm W 0#25 Xm +('ume in/e,si 01
m' gas .emawaE e'ium 'a/u a'ir 15 m'Tmenit suhu (+enE 503 2)0 U> dengan ,e7e.atan
.ening,atan suhu seesar 25 U>Tmenit m(de i(nisasiE term(uest $innigan mass 2000
electron impactCI6 .ada "0 e* tem.eratur trans"er lineE 2)5 U> dan tem.eratur sumer
i(nE 2!0 U> &manadeh et al# 200)6#
Identi$i,asi min%a, atsiri dan ,(m.(nen $ra,si 'ainn%a di'a,u,an dengan
.erandingan wa,tu retensi re'ati$ RRt6 dan s.e,trum massan%a dengan sam.e'
autenti,n%a data 'iteratur dan an, data M- %ang ada .ada library 7(m.uter &manadeh
et al# 200)6
25
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
26/41
2., Ana"sa Has"
2.,.+ I%$n#3!as %$n&an KLT
P(siti$ mengandung 'im(nene /i,aE
a# Pada .'at I terentu, warna 7(,'at sete'ah disem.r(t dengan 2-4.e,at Panas,an .e'at
100
(
> 10 menit
# Pada .'at 2 terentu, er7a, ,uning .ada 'atar merah sete'ah diua.i dengan r(m
7# Pada .'at ! tida, terentu, er7a, ,uning .ada 'atar e'a,ang .utih hasi' negati+e
terhada. u/i 24 DNP6
ar(rne 19886
2.,.2 I%$n#3!as %$n GC:MS
a# -.e,trum M- Lim(nen
Marue et al# 20126
2. S!$ma K$r-a
2..+ S!$ma K$r-a S$1ara Umum
2)
-,rining it(,imia
C,stra,si dengan desti'asi air
Peneta.an adar &ir
Pen%ia.an sam.e'
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
27/41
2..2 P$na4an Sam4$"
2"
Puri$i,asi Is('asi6 dengan ,r(mat(gra$i ,('(m
Identi$i,asi dengan $as Chromato!aphy Mass %pectrometry
ra,sinasi dengan desti'asi $ra,sinasi
Identi$i,asi dengan L@ dan .erea,si warna
u'it uah /eru, di,u.as
Paren,im .utih erentu, s.(ns dihi'ang,an
u'it uah /eru, di,ering,an dengan .emanasan ta, 'angsung
u'it uah /eru, di ha'us,an dengan 'ender
-eru, ,u'it uah /eru,
Identi$i,asi dengan L@ dan .erea,si warna
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
28/41
2.., P$n$#a4an Ka%ar Ar
28
@aung .enerima dan .endingin diersih,an dengan asam
Dii'as dan di,ering,an
at ditimang mengandung 234m' air
Dituang t('uen ,e da'am taung .enerima
Di.anas,an 'au hati3hati se'ama 15 menit
Disu'ing dengan ,e7e.atan 'eih ,urang 2 tetes tia. deti,
Dii'as dan di,ering,an
Bagian da'am .endingin di7u7i dengan t('uen
Pen%u'ingan di'an/ut,an se'ama 5 menit
*('ume air dia7a# itung ,adar air da'am Q#
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
29/41
2... S!rnn& F#5!ma T$r4$n5%
2..6. E!s#ra!s %$n&an D$s#"as Ar
29
1 gram seru, 20 mL eter disari 2 /am
disaring
i'trat
! tetes $i'trate 2
tetes .erea,si 7erium
su'$at 1Q#
! tetes $i'trat 2 tetes
.erea,si Lieermann
B(u7hard#
! tetes $i'trat 2 tetes
.erea,si -a',(ws,%
2-4 .e,at6#
warna merah
menun/u,,an adan%a
ter.en(idaTster(ida#
warna ungu atau merah
eruah men/adi iru
hi/au
ter.en(idaTster(ida#
7(,'at menun/u,,an
adan%a
ter.en(idaTster(ida#
150 gram ,u'it uah /eru, dimasu,,an ,e da'am 'au
Ditamah 200 mL auadest
&'at desti'asi dira,it
Di.er('eh air dengan 'a.isan min%a, di .ermu,aann%a
Diami' 'a.isan min%a,
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
30/41
2..7 P$msa'an %$n&an D$s#"as Fra!s5na"
2..8. Su03ra!snas %$n&an Kr5ma#5&ra3 K5"5m
!0
('(m si'i,a ge' G)0 )!3200Xm6 disia.,an
Min%a, dimasu,,an ,e da'am ,('(m
Die'usi dengan .etr('eum eter
ra,si
Desti'at dari desti'asi air
Didesti'asi .ada te,anan 100 mm g
-uhu .er'ahan diting,at,an 25#032)#! U>6
Di.er('eh air dengan 'a.isan min%a, di.ermu,aann%a
Disti'at ditam.ung ditamah,an Na>'
ase air dan min%a, di.isah,an dengan 7(r(ng .isah
Ditamah,an Na2-
4 dan disaring
Ditamah,an Na2-
4 dan disaring
Di.er('eh ! ra,si desti'at
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
31/41
2..9. I%$n#3!as %$n&an Kr5ma#5&ra3 La4s T4s %an P$r$a!s ;arna
!1
Disia.,an .'at L@ si'i7a ge' G 254 disia.,an sean%a, ! uah#
Pada te.i atas dan awah dieri atas 1 7m#
P'at dia,ti+asi da'am (+en .ada suhu 120V> se'ama !0 menit#
C'uen dimasu,,an ,e da'am 7hamer untu, .r(ses .en/enuhan
P'at di7u7i da'am 7hamer %ang erisi 2 mL metan(' dan die'usi sam.ai semua .'atterasahi
Diuat e'uen dengan ,(m.(sisi enenaE,'(r($(rm 1E1 +T+ sean%a, 10 mL#
Diami' sean%a, masing3masing 25L 'arutan u/i standar 'im(nen ,emudian
dit(t(',an .ada .'at
.'at di,ering,an da'am (+en .ada suhu 100V> se'ama 10 menit#
P'at ,emudian die'usi dengan e'uen di atas dengan /ara, ramat 8 7m#
P'at I P'at II P'at III
Di'ihat di awah
:*254 @ida,
er$'u(r(sensi6
Disem.r(t dengan
'arutan $'u(resein
005Q da'am air
Disem.r(t dengan 24
DNP
disem.r(t dengan2-4.e,at
Panas,an .e'at
100(> 10 menit
Diua.i dengan r(m asi' 36 tida, adaer7a, ,uning .ada
'atar .utih
asi' 6 er7a,
,uning .ada 'atar
merah
terentu, warna
7(,'at
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
32/41
2.. 2000 ,('(m DB35 !0m W 250 Xm W 0#25 Xm +('ume in/e,si 01
m' gas .emawaE e'ium 'a/u a'ir 15 m'Tmenit suhu (+enE 503 2)0 U> dengan
,e7e.atan .ening,atan suhu seesar 25 U>Tmenit m(de i(nisasiE term(uest
$innigan mass 2000 electron impactCI6 .ada "0 e* tem.eratur trans"er lineE 2)5U> dan tem.eratur sumer i(nE 2!0 U>
Identi$i,asi min%a, atsiri dan ,(m.(nen $ra,si 'ainn%a di'a,u,an dengan.erandingan wa,tu retensi re'ati$ RRt6 dan s.e,trum massan%a dengan sam.e'
autenti,n%a data 'iteratur dan an, data M- %ang ada .ada library 7(m.uter
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
33/41
BAB III
PEMBAHASAN
Lim(nen meru.a,an sa'ah satu sen%awa ter.en %ang .a'ing sering ditemu,an# -en%awa
ini meru.a,an ,(m.(nen utama da'am min%a, %ang terda.at .ada /eru,# Lim(nen tida, ersi$at,arsin(gen mutageni, dan ne$r(t(,si, .ada manusia serta te'ah dite'iti da.at diguna,an seagai
agen anti,an,er -un 200"6# Lim(nen .enting untu, di.isah,an ,arena 'im(nen memi'i,i
a,ti+itas $arma,('(gi %ang da.at di,emang,an seagai (at aru# -a'ah satu a,ti+itas %ang te'ah
teru/i %aitu a,ti+itasn%a seagai antiin$'amasi Migue' 20106# Pemisahan 'im(nen dari ,u'it uah
/eru, terdiri dari eera.a taha. %aitu .en%ia.an ahan s,rining $it(,imia desti'asi air desti'asi
$ra,si(na' ,r(mat(gra$i ,('(m# Identi$i,asi di'a,u,an dengan met(de L@ dan .erea,si warna
serta G>3M-#
Pada .r(ses .en%ia.an ahan ,u'it uah /eru, di,u.as# Paren,im .utih erentu, s.(ns
dihi'ang,an# Paren,im .utih ini han%a mengandung sedi,it 'im(nen teta.i memeri ,(ntriusi
terhada. massa sam.e' sehingga a.ai'a tida, dihi'ang,an ,(nsentrasi 'im(nen .ada sam.e' ,u'it
uah /eru, ini se('ah3('ah a,an memi'i,i ,(nsentrasi 'im(nen %ang 'eih sedi,it Da+id(ws,i
dan DiMar7( 20096# u'it uah /eru, ,emudian di,ering,an dengan .emanasan tida, 'angsung
atau dengan di angin3angin,an# a' ini di'a,u,an ,arena dengan di'a,u,ann%a .engeringan
dengan 7ara %ang te.at a,an menghasi',an mutu sim.'isia %ang tahan disim.an 'ama dan tida,
ter/adi .eruahan ahan a,ti$ %ang di,andungn%a# Pengeringan suatu ahan ter'a'u 'ama dan
suhun%a %ang ter'a'u tinggi da.at menurun,an mutu ,arena da.at merusa, ,(m.(nen3,(m.(nen
%ang terda.at di da'amn%a# Pengeringan dengan 7ara a'iran udara da.at menghasi',an sim.'isia
%ang 'eih ai, warna 'eih segar ,adar au 'eih rendah sari ter'arut dan ,andungan ahan
a,ti$ 'eih tinggi dianding .engeringan matahari 'angsung dan .engeringan (+en Man(i 200)6#
-ete'ah .engeringan se'esai ,u'it /eru, di,e7i',an u,uran .arti,e'n%a dengan
mengguna,an 'ender sehingga dihasi',an seru, ,u'it /eru,# :,uran .arti,e' diuat tida, ter'a'u
ha'us ,arena 'im(nen meru.a,an ,(m.(nen min%a, atsiri %ang a.ai'a u,uran .arti,e' ter'a'u
,e7i' a,an men%ea,an .e7ahn%a se' dan menga,iat,an min%a, atsiri a,an mengua. see'um
.r(ses e,stra,si di'a,u,an# a' ini men%ea,an min%a, atsiri %ang dihasi',an a,an 'eih
sedi,it# -eru, hasi' .enge7i'an u,uran .arti,e' ini ,emudian ditentu,,an ,adar airn%a dengan
mengguna,an met(de desti'asi# a' ini disea,an ('eh min%a, atsiri %ang ter,andung da'am
sim.'isia# Dengan met(de desti'asi ini sen%awa %ang 'eih mudah mengua. dengan mudah da.at
!!
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
34/41
di.isah,an dari sen%awa %ang su,ar mengua. ristanti et al# 20086# Pada ahan di'a,u,an
.eneta.an ,adar air# a' ini .enting di'a,u,an untu, men/amin ,andungan air %ang ter,andung
da'am sim.'isia tida, 'eih dari 10Q sehingga tida, merusa, mutu sim.'isia %ang da.at
men%ea,an men%ea,an tumuhn%a a,teri serta dengan di'a,u,ann%a .eneta.an ,adar air
dihara.,an di.er('eh ((t sim.'isia %ang ,(nstan De.,es RI 19956#:ntu, memasti,,an adan%a 'im(nen %ang meru.a,an sen%awa ter.en(id .ada ahan
di'a,u,an s,rining $it(,imia ter.en(id# -ean%a, 1 gram seru, sim.'isia disari dengan 20 m'
eter se'ama 2 /am disaring ,emudian di'a,u,an .emeri,saan ter.en(i$# @erda.at eragai 7ara
s,rinig $it(,imia ter.en(id %aitu $i'trat sean%a, ! tetes ditamah dengan 2 tetes .erea,si
-a',(ws,% 2-4 .e,at6# &.ai'a terentu, warna merah menun/u,,an adan%a
ter.en(idaTster(ida# &sam su'$at meng,ata'isis rea,si hidrasi 'im(nen men/adi ter.in hidrat
menurut rea,si seagai eri,ut#
Gamar !#1 Rea,si 'im(nen dengan asam su'$at J(hns(n 19996
>ara 'ain %ang da.at di'a,u,an ada'ah $i'trat sean%a, ! tetes ditamah,an dengan 2 tetes
.erea,si Lieermann B(u7hard# Perea,si Lieermann3Bur7hard terdiri dari anhidrida asam
asetat dan asam su'$at dengan .erandingan !E1 -iadi 20126# Rea,si ter/adi me'a'ui intera,si
antara ter.en dengan asam .ada reagen Lieermann3Bur7hard Mar'iana et al., 20056#&.ai'a
terentu, warna ungu atau merah %ang eruah men/adi iru ungu atau iru hi/au menun/u,,an
adan%a ter.en(idaTster(ida# Rea,si sen%awa ter.en %ang ter/adi da.at ditun/u,,an .ada gamar
!#2
Gamar !#2 Me,anisme rea,si ter.en(id dengan .erea,si Lieermann3Bur7hard -iadi 20126#
!4
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
35/41
Met(de s,rining %ang 'ain %aitu $i'trat sean%a, ! tetes ditamah,an dengan 2 tetes .erea,si
7erium su'$at 1Q# &.ai'a terentu, warna 7(,'at menun/u,,an adan%a ter.en(idaTster(ida
ristanti 20086# Me,anisme rea,si %ang ter/adi ada'ah seagai eri,ut# Pementu,,an o#
ben&o'uinone hidr('isis gugus +ini' ester dan is(merisasi o#ben&o'uinone men/adi p#
ben&o'uinone(u 20096# &.ai'a hasi' s,rining $it(,imia ter.en(id seru, sim.'isia ,u'it uah/eru, menghasi',an hasi' .(siti$ taha. .emisahan dian/ut,an dengan desti'asi air#
Prinsi. met(de desti'asi air ada'ah dengan menguah suatu sen%awa men/adi entu,
ua.n%a meng,(ndensasi,an ua. %ang terentu, men/adi 7air ,ema'i dan menam.ung
,(ndensat ,e da'am suatu .enam.ung# Dengan 7ara ini ma,a suatu 7am.uran dengan titi, didih
%ang ereda da.at di.isah,an ristanti et al# 20086# Dengan 7ara ini .u'a ma,a sen%awa %ang
'eih mudah mengua. dengan mudah da.at di.isah,an dari sen%awa %ang su,ar mengua.# Jadi
.ada desti'asi ini ter/adi .r(ses .emisahan %ang erdasar,an .eredaan titi, didih# C,stra,si awa'
dari 'im(nen di'a,u,an dengan met(de desti'asi air ,arena didasari ('eh si$at sen%awa 'im(nen
%ang mudah mengua. re'ati$ stai' terhada. .anas dan .ra,tis tida, 'arut da'am air# Di'ihat dari
si$atn%a 'im(nen stai' terhada. .emanasan dimana titi, didih dari 'im(nen ada'ah 1"55
1")5(> i'i.ss(n et al. 19986# Lim(nen tida, 'arut da'am air sehingga min%a, 'im(nen dari
,u'it /eru, a,an ter.isah sem.urna dengan air %ang diguna,an untu, desti'asi dan /uga titi, didih
antara air dan 'im(nen rentangn%a 7u,u. /auh %aitu "553")5 (> sehinnga .r(ses e,stra,si a,an
er'angsung dengan ai, dimana met(de e,stra,si desti'asi didasar,an .ada .eredaan titi,
didihn%a# Desti'at %ang dihasi',an ada'ah adan%a 'a.isan min%a, diatas $ase air ,arena ((t
/enis 'im(nen 084 gT7m!6 'eih ,e7i' dari ((t /enis air 1 gT7m!6 i'i.s(n et al 19986#
@aha.an dari .r(ses desti'asi air ada'ah dengan menimang 150 gram ,u'it /eru, dimasu,,an ,e
da'am 'au 'eher tiga dan ditamah,an 200 mL auades# Pera'atan desti'asi dirang,ai dan .r(ses
desti'asi di/a'an,an sam.ai min%a, ,u'it /eru, tere,stra, se'uruhn%a# Disti'at %ang dihasi',an
,emudian ditam.ung untu, .emisahan se'an/utn%a#
:ntu, me%a,in,an erhasi'n%a .r(ses e,stra,si 'im(nen di'a,u,an identi$i,asi desti'at
hasi' desti'asi air# Pr(ses ini mengguna,an met(de L@ dan .erea,si warna# ase diam %ang
diguna,an ada'ah si'i,a ge' G254dan $ase gera, %ang diguna,an ada'ah enenaE,'(r($(rm 1E1
+T+6# Lim(nen tida, er$'u(resensi .ada :*254 sehingga a,an tam.a, er7a, ge'a. .ada .'at
si'i,a ge' G254 ar(rne 198"6# Dari .engamatan di awah sinar :*254da.at dihitung harga R$
masing3masing s.(t ,emudian harga R$ sam.e' dianding,an dengan R$ standar 'im(nen# -e'ain
.engamatan di awah sinar :* dete,si /uga da.at di'a,u,an dengan .erea,si ,imia# -ete'ah
!5
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
36/41
diua.i dengan r(m 'im(nen memeri,an er7a, ,uning .ada 'atar e'a,ang merah# &dan%a
i,atan rang,a. .ada 'im(nen men%ea,an ter/adin%a rea,si adisi dengan Br2# Rea,si adaisi ini
men%ea,an .emutusan i,atan rang,a. 'im(nen sehingga Br2 %ang semu'a erwarna 7(,'at
a,an ,ehi'angan warnan%a# Rea,si %ang ter/adi ada'ahE
Gamar !#!# Rea,si 'im(nen dengan r(min ima'' 19996
Pada .r(ses identi$i,asi diguna,an /uga .erea,si 243DNP 243dinitr($eni'hidrain6#
Lim(nen tida, memeri rea,si .(siti$ .ada 243DNP ,arena tida, adan%a gugus ,et(n dan
a'dehid .ada sen%awa 'im(nen# Rea,si %ang ter/adi antara gugus ,et(n dan a'dehid dengan 243
DNP se7ara umum ada'ahE
Gamar !#4# Rea,si a'dehid dan ,et(n dengan 243DNP a7(u 19996
Dengan adan%a .erea,si sem.r(t 2-4.e,at 'im(nen a,an memeri,an er7a, warna
7(,'at ar(rne 198"6# &sam su'$at meng,ata'isis rea,si hidrasi 'im(nen men/adi ter.in hidrat
menurut rea,si seagai eri,ut#
Gamar !#5 Rea,si 'im(nen dengan asam su'$at J(hns(n 19996
!)
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
37/41
-e'ain warna %ang terentu, diguna,an .u'a data R$ sen%awa standar 'im(nen ,arena
.erea,si sem.r(t sa/a tida, 7u,u. ,uat untu, memu,ti,an ahwa sen%awa %ang di.isah,an
ada'ah 'im(nen# -ea sen%awa '# ungsi dari .enamahan Na>' ada'ah untu, memudah,an .r(ses .emisahan min%a, .ada
,u'it /eru, dan air# ase air dan min%a, di.isah,an dengan megguna,an 7(r(ng .isah#
-e'an/utn%a ditamah,an Na2-4 anhidrat tu/uan .enamahan ini ada'ah untu, mengurangi
,adar air %ang ter7am.ur da'am min%a,# Na2-4,emudian disaring dari desti'at&manadehet
al.,200)6#
:ntu, .emurnian 'eih 'an/ut dari 'im(nen di'a,u,an dengan met(de ,r(mat(gra$i
,('(m# Disia.,an ,('(m si'i,a ge' G)0 mesh 203!56# Min%a, dimasu,,an ,e da'am ,('(m dan
die'usi dengan .etr('eum eter ,emudian $ra,si ditam.ung se'ama 5 menit# Pemi'ihan $ase diam
.etr('eum eter ,arena 'im(nen meru.a,an sen%awa %ang ersi$at n(n.('ar -ete'ah di'a,u,an
,r(mat(gra$i ,('(m di.er('eh eera.a $ra,si# ra,si3$ra,si ini a,an diidenti$i,asi ,andungan
'im(nenn%a dengan ,r(mat(gra$i 'a.is ti.is dan .erea,si warna# Met(de %ang sama dengan
identi$i,asi see'umn%a#
:ntu, identi$i,asi 'im(nen 'eih 'an/ut da.at diguna,an ,r(mat(gra$i gas# (ndisi
.emisahan ada'ah seagai eri,ut term(uest G> 2000 ,('(m DB35 !0m W 250 Xm W 0#25 Xm
+('ume in/e,si 01 m' gas .emawaE e'ium 'a/u a'ir 15 m'Tmenit suhu (+enE 503 2)0 U>
dengan ,e7e.atan .ening,atan suhu seesar 25 U>Tmenit m(de i(nisasiE term(uest $innigan
mass 2000 electron impactCI6 .ada "0 e* tem.eratur trans"er lineE 2)5 U> dan tem.eratur
sumer i(nE 2!0 U> &manadeh et al# 200)6# Pening,atan suhu di'a,u,an untu, menda.at,an
.emisahan %ang 'eih ai, ar(rne 198"6#
Identi$i,asi dengan ,r(mat(gra$i gas dan dete,t(r M- memeri ,emudahan untu, .r(ses
ana'isis# @er'eih 'agi data s.e7trum sen%awa %ang diingi,an terda.at .ada library computer#
Identi$i,asi ter.en di'a,u,an dengan .erandingan wa,tu retensi nisi relative retention time
RRt66 dan s.e,tra massa standarn%a# Dianding,an dengan .enggunaan wa,tu retensi Rt6
!"
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
38/41
identi$i,asi dengan RRt'eih te.at diguna,an untu, ana'isis ,ua'itati$# a' ini disea,an ada
.emisahan sen%awa dengan eragai /enis swen%awa ter/adi .eruahan wa,tu retensi sehingga
wa,tu retensi u,an 'agi men/adi ,ara,ter dari suatu sen%awa# -edang,an RRtmemeri,an hasi'
%ang 'eih memuas,an untu, .r(ses identi$i,asi sen%awa M7Nair and Mi''er 199"6# Pada
,('(m DB35 ni'ai RRt'im(nen ada'ah 10!1 &manadeh et al# 200)6#
!8
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
39/41
DAFTAR PUSTAKA
&manadeh agh(u Mani &shra$i atemeh M(hammadi# 200)# New C'a(rated @e7hniue$(r Is('ati(n and Puri$i7ati(n ($ Lim(nen $r(m range i'# (ranian )ournal o"Pharmaceutical %ciences %prin!, 2 26E 8"390
Da+id(ws,i -# dan DiMar7( B# 2009# *he E+traction an uanti"ication o" Limonen "rom CitrusRins -sin! $CM%# :-&E Per,inC'mer In7# P# 2
De.,es RI# 198)# %eiaan $alenik# Ja,artaE De.artemen esehatan Re.u'i, Ind(esia# P# 832"#
De.,es RI# 1995#Materia Meika (nonesia )ili /(# Ja,arta E De.artemen esehatan Re.u'i,
Ind(nesia# P# !!43!!)#
i'i.ss(n # J# B# &seda -# ar'ss(n# 1998# Limonen# Gene+aE ;(r'd ea'th rganiati(n#
P# 5
Gand/ar I# G# dan R(hman# 2009#0imia Analisis 1armasi# BandungE Pusta,a Pe'a/ar# P# !5!3
!)2#
ar(rne J#B# 198". Metoe 1itokimia Penuntun Cara Moern Men!analisa *umbuhan.
Bandung E Penerit I@B# P# 12!312" 1!431!5#
J(hns(n ;# 1999#(nvitation to 2r!anic Chemistry# :-&E J(nes Y Bart'ett Learning# P 112
atung B#G# 200)#3asic an Clinical Pharmacolo!y 45thEition. -an ran7is7(# P# 4493459#
ristianti N N#-# &minah M# @an/ung B#urniadi# 2008#3uku Ajar 1itokimia# -uraa%a E
Jurusan imia La(rat(rium imia rgani, MIP& :ni+ersitas &ir'angga# P# 4"348 )23
)5#
usmardi%ani -# dan Nawawi# 1992#0imia 3ahan Alam# Ja,artaE :ni+ersitas Bidang I'mu
a%ati# P# "484392
ima'' D# 1999# Citrus Processin!6 A Complete $uie, -e7(nd Cditi(n# :-&E &s.en
Pu'isher# P# 124#
urniawan ># urniawan N# Indraswati dan Mud/i/ati# 2008# C,stra,si Min%a, u'it Jeru,
dengan Met(de Desti'asi Penge.resan dan La7hing# 7iya *eknik " 16E 15324
Man(i # 200)# Pengaruh >ara Pengeringan @erhada. Mutu -im.'isia -ami'(t(# 3ul. Littro
Z*II 16E 1 5#
Mar'ina -#D# *# -ur%anti dan -u%(n(# 2005# -,rining it(,imia dan &na'isis r(mat(gra$i
La.is @i.is (m.(nen imia Buah Lau -iam %echium eule Ja7# -wart#6 da'am
C,stra, Ctan('#3io"armasi ! 16E 2)3!1#
!9
-
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
40/41
Marues # G# rens7h -# R# M# a'es,i N# Nagata B# # L# N# -# Maia -# M# N# Laari
># Len dan G# >(rr[a # 2012# Di$$erentiati(n ($ i+e Pine -.e7ies >u'ti+ated in
Brai' Based (n >hem(metri7 &na'%sis ($ their *('ati'es Identi$ied % Gas>hr(mat(gra.h%3Mass -.e7tr(metr%#). 3ra&. Chem. %oc. 2! 96E 138
M7Nair # M# and J#M# Mi''er# 199"# Basi7 Gas >hr(mat(gra.h%# >anadaE J(hn ;i'e% and -(n
In7# P# 5235!#
Migue' M# G## 2010# &nti(Aidant and &nti3In$'ammat(r% &7ti+ities ($ Cssentia' i'sE & -h(rt
Re+iew#Molecules, 8545, 49, 92523928"#
rwa et a'# 2009# >itrus sinensis# >ited 2012 ,t !06# &+ai'a'e $r(m E
htt.ETTwww#w(r'dagr($(restr%#(rgTtreed2T&@PD-T>itrus\sinensis#.d$
Prihatman # 2000#Citrus sp# Ja,arta E ant(r De.uti Menegriste, Bidang Penda%agunaan dan
Pemas%ara,atan I'mu Pengetahuan dan @e,n('(gi# P# 1#
Putra -# 1991. *aru Premana. :.ada -astraE Ba'i# P# 5
R(t # J# and G# Ba's7h,e# 1988#Analisis 1armasi.(g%a,arta E Gad/ah Mada :ni+ersit% Press#P# !993400#
-ari L# # R# # 200)# Peman$aatan at @radisi(na' Dengan Pertimangan Man$aat daneamanann%a#Majalah (lmu 0e"armasian III 16E 01 0"#
-iadi # 2012# C,stra, Bung,i' Bi/i Jara, Pagar )atropha Curcas6 seagai Bi(.estisida %angC$e,ti$ dengan Penamahan Larutan Na>'#)urnal M(PA !5 16E ""38!
-u,andar C # @ren dan Paradigma Dunia armasi Industri3'ini,3@e,n('(gi esehatan
disam.ai,an da'am (rasi i'miah Dies Nata'is I@B 7ited 2012 ,t !06# &+ai'a'e $r(mEhtt.ETTit#a7#idT$(7usT$(7us\$i'eT(rasi3i'miah3dies345#.d$#
-un J# 200"# D3 Lim(nenE -a$et% and >'ini7a' -tud%# Alternative Meicine Revie:, 12 !6E 25932)4#
a7(u # 1999# Meth(d Pr(7edures $(r -am.'ing &'deh%de and et(ne :sing 243Dinitr(.hen%'hidra%neE & Re+iew#Proc (nstn Mech En!rs 21!E 50!3518#
(u G# 2009# *he *otal %yntheses 2" %alvia *erpenes6 ;=#3russonol, ;>=#
%alviasperanol An ;hinaE :ni+ersit% ($ -7ien7e and@e7hn('(g% ($ >hina# P#
40
http://www.worldagroforestry.org/treedb2/AFTPDFS/Citrus_sinensis.pdfhttp://www.worldagroforestry.org/treedb2/AFTPDFS/Citrus_sinensis.pdf -
8/12/2019 Mpba_isolasi Dan Identifikasi Eugenol Dari Bunga Cengkeh
41/41
LAMPIRAN