laporan-trimistin-doc.doc

7/16/2019 laporan-trimistin-doc.doc

http://slidepdf.com/reader/full/laporan-trimistin-docdoc 1/13

2.10 RESUME JURNAL

1. Isolasi dan karakterisasi sebuah ekstraselluler lipase dari konidia

pada neurospora crassa

Hidrolisis enzim essensial pada penggunaan sumber karbon selama

pengecambahan fungal konidia. Dalam konidia pada neurospora

crassa terdapat tiga enzim, dengan nama trehalase (Hanks &

sussman, 1969), invertase dan B-arylglucosidase (Eberhart & Beck,

1970,1973), yang dapat mempermudah pengecambahan. Trigliserida

(TGs) memperhatikan energi penyimpangan bentuk, laju selama

pengecambahan dari fungal konidia dan biji2 tanaman, oleh karena itu

penting untuk mengerti sifat dan properti lipase.

Sebuah lipase trigliserida (EC 3.1.1.3) dari konidia pada

neurospora crassa dimurnikan dan dikarakterisasi. Enzim ini

dimurnikan oleh sephadex G-100 kromatografi kolom. Kehomogenan

dicek oleh PAGE, dan pusat isoelektrik mempunyai sebuah single

band yang sesuai untuk sebuah pI dari 6-4. Enzim ini mempunyai

sebuah sifat nyata yaitu Mr 54000 ± 1000 sebagai penentu dari filtrasi

gel. SDS-PAGE dapat menyumbangkan sebuah single band dari Mr

27000, usulan itu hadir dari dua subunit yang sama. Lipase ini lebih

menyukai trigliserida dengan C16 dan C18 rantai asil lemak. Itu

memecah hanya kelompok utama dari trigliserida. Lipase juga

memperlihatkan sebuah pilihan dari substrat yang berisi endoginmenjadi asam lemak dan mungkin ternyata berguna dalam studi rinci

pada hubungan fisiologi dari kekhususan asil lemak lipase. Enzim ini

tidak dibuat detergen, atau agen pengikat thiol. Modifikasi kelompok

amino bebas menyebabkan 90% hambatan, usulan sebuah peran dari

kelompok ini dalam aktifitas lipase.

2. Isolasi dan Karakeristik dari Lepidopteran khusus Bacillus

thuringiensis

Tujuan galur bacillus thuringiensis yang terisolasi dan dipilih

berdasarkan uji toksisitas primer dari 22 perwakilan contoh tanah dari



gujarat tengah wilayah india. Karakteristik strain disediakan berguna

untuk menginformasikan mengenai distribusi dengan menganalisis

gen pribumi.analisis SDS-PAGE isolat ini menunjukan adanya jenis pola,yang sebanding dengan memeriksa standar B thuringiensis

var.kurstaki. Hanya 1 mengisolasi memberikan pola yang berbeda.

Karakteristik strain didasarkan pada prnggunaan primer anlisisnya

bahwa sebagian aktivitas mereka terhadap hama. Sementara

Lepidoteran menggunakan dominan gen Cry1 A dan Cry1 Ac dan

beberapa mengisolasi menginformasikan adanya gen Cry1 Ab,Cry1

B,Cry1 Ddan Cry1 9. Hasil SDS-PAGE seluruh sel protein

menunjukan bahwa semua isolat dari satu sama lain termasuk

standar,yang menunjukan keanekaragaman manfaatnya.

(Manikuntala kudu,1986)

3. Isolasi dan karakterisasi Bacillus sp . BP-6 LipA, sebuah Enzim

Lipase yang memiliki sifat-sifat spesifik antara spesies Bacillus

mesofilik.

Pada percobaan ini yaitu Isolasi dan karakterisasi sebuah bakteri

Bacillus SP dilakukan dengan tujuan untuk mempelajari proses isolasi

bakteri yang memiliki stuktur meso, mengkloning, kemudian

memahami karakter dari bakteri tersebut tak jauh kaitannya dalam

pentingnya suatu boteknologi untuk kelompok-kelompok enzim.

Metode percobaan yang digunakan adalah Isolasi dan pengklonan

untuk karakterisasi bakteri Bacillus tersebut. Telah dijelaskan dalam

percobaan ini bahwa dalam Bacillus sp, BP-6 menunjukkan

aktivitasnya pada plat tributyrin yang digunakan untuk isolasi enzim

lipase dengan kode gen LipA. Nukleotida ORF 663 yang sudah

terisolasi kemudian diklon dalam bakteri Escherichia colli untuk

mengetahui karakteristiknya lebih lanjut.

Hasil yang diperoleh pada percobaan ini adalah bahwa kode gen untuk

Bacillus sp, BP-6 LipA ditemukan dalam Spesies Bacillus mesofilik

yang kemudian menunjukkan sifat-sifat spesifiknya dalam gen

tersebut. Enzim yang terklon juga memiliki sifat sama sehingga dapat

disebut sebagai enzim lipase homogen.



(C.Ruiz,F.I.Javier Pastor and P.Diaz,2003)

4. “isolation and purification of carotenoids from marigold flower”

Dalam jurnal internasional yang berjudul “isolation and purification of

carotenoids from marigold flower” menjelaskan penemuan masa kini

yang realistis dan proses efektif untuk mengisolasi dan memurnikan

karotenoid yang mengandung yang mengandung konsentrasi yang

lebih tinggi karotenoid seperti luteintrans, trans-zeaxanthin, cis lutein,

ß-karoten, dan cryptoxantin dari kelopak bunga marigold di bawah

kondisi yang terkendali tanpa meninggalkan jejak apapun pelarut

organik berbahaya. Proses ini melibatkan ensilaging bunga marigold,

dehidrasi, ekstraksi pelarut, hidrolisis alkali karotenoid ester dengan

alkohol absolut, kristalisasi/pemurnian dengan menggunakan air,

alkohol absolut campuran diikuti oleh filtrasi dan pengeringan hingga

kristal yang jauh bebas dari kelembaban dan benar benar bebas dari

residu berbahaya pelarut. Kristal ini cocok untuk produk makanan

nutraceutical dan sebagai suplemen.

5. ISOLASI DAN IDENTIFIKASI MOMORDICIN I DARI

EKSTRA DAUN MOMORDICA CHARANTIA L

Senyawa momordicin I telah berhasil diisolasi dari ekstrak

diklorometana daun pare, momordica charantina L. isolasi dilakukan

dengan memfraksinasi ekstrak klorometana yang diikuti dengan

biossay menggunakan larua udang artemia salina L. untuk

mendapatkan fraksi paling aktif. Fraksionasi dilakukan dengan kolom

kromatografi phase terbaik menggunakan 1 seri eluen MeOH H2O (0-

100% MeOH) sselanjutnya dimurnikan dengan rekristalisasi

menggunakan kloroform sehingga dihasilkan kristal berwarna putih

dengan titik leleh 125-1280

C. Dari hasil data spektra IR,1

HNMR,



13CNMR, DEPT, HCOST, HMCQC, HMBC dan MS, struktur isolat

aktif dielusidassi sebagai 3,7,2,3-trihydroxycucurbitan-5,25-diena-19-

al yang lebih dikenal dengan senyawa momordicin I

Momordica charantina L. ditemukan di daerah tropis dan daerah yang

aktif subur ditanami sayuran, buah buahan, daun dan akar dari M

charantia disgunakan untuk campuran penyembuh bebrapa penyakit,

misalnya obat pencuci perut di India, keseluruhan sari buah dapat

digunakan sebagai obat penyakit limpa, hati, encok, dll. Di filipina

dilaporkan bahwa kepada penderita radang usus besar yang kronis.

Sedangkan sari buah daun daun digunakan dalam jumlah sedikit yaitu

satu sendok teh untuk anak anak batuk. Benih dari tumbuhan ini juga

dilaporkan dapat digunakan untuk penyakit diabetes karena

mempunyai aktivitas potensi antidiabetes.

6. Pengasingan, pemurnian, dan NMR tugas yang penuh dari

cyclopamine dari Veratrum californicum

Hedgehog jalan kecil pemberian isyarat adalah penting bagi

embryogenesis dan untuk jaringan/tisu homeostasis di orang dewasa

[itu]. Bagaimanapun, mungkin mempengaruhi penyakit berbahaya

brown jumlah jaringan/tisu ketika menurut Undang-Undang Dasar

diaktipkan, dan mungkin juga mempunyai suatu peran dalam bentuk

lain dari normal dan maladaptive pertumbuhan. Cyclopamine, suatu

secara alami terjadi steroidal alkaloida, [yang] secara rinci

menghalangi Hedgehog jalan kecil dengan bungkus secara langsung

Melancarkan, suatu Hedgehog yang penting menanggapi unsur. Untuk

menggunakan cyclopamine sebagai alat untuk menyelidiki dan/atau

menghalangi Hedgehog jalan kecil di (dalam) vivo, suatu kwantitas

yang substansiil diperlukan, dan sebagai cyclopamine perihal yang

praktis telah (menjadi) secara efektif yang tak tersedia untuk

pemakaian di (dalam) binatang lebih besar dari tikus-tikus.

Mengakibatkan catatan/kertas ini, kita melaporkan suatu pemurnian



dan pengasingan yang efisien dan cepat dari jumlah yang besar tentang

cyclopamine dari akar dan batang yang tumbuh mendatar dari

Veratrum californicum Dur. ( Corn/Jagung Lily/Bunga Bakung atau

Hellebore yang sumbang/palsu barat). Kita juga menyediakan tugas

yang terang dari karbon dan resonansi satuan listrik positif dengan

penggunaan multinuclear spectra dan putaran yang menggabungkan

jaringan. Kesimpulan Ini metoda bisa temu suatu kebutuhan sangat riil

di dalam masyarakat ilmiah berbeda dengan membiarkan cyclopamine

untuk menjadi lebih siap yang tersedia

7. Hidrolisis untuk Asam Miristat.

Senyawa kompleks yang memiliki struktur molekul dapat dipisahkan

dari bahan-bahan alami. Trimiristin dapat diekstraksi dari biji pala.

Kristalisasi dari aseton dapat menghasilkan senyawa murni. Sebagian

besar senyawa yang terdapat pada pala larut dalam eter, akan tetap

dalam larutan aseton. Trimiristin, terdapat asam karboksilat dan

mengandung 14 atau lebih atom karbon, juga di kenal sebagai lemak

atau trigliserida dan komponen makanan. Ketika trimiristin di refluks

dengan NaOH dalam etanol berair dan kemudian di asamkan.

Percobaan ini lamanya 4 jam. Pertama ekstraksi. Pemanasan yang

berlebihan dapat menyebabkan beberapa campuran hancur keluar.

Panaskan hanya pada titik didih. Dibilas hanya untuk memastikan

bahwa trimiristin yang tertinggal maksimal. Pelarut menguap, yang

kenyal padat kekuningan akan tetap. Ini adalah trimiristin mentah.

Rekristalisasi dari trimiristin. Jika kristal tidak muncul setelah

pendinginan, menggores permukaan kaca dengan pengaduk untuk

mendorong kristalisasi. Hidrolisis terlalu panas akan menyebabkan

etanol menguap. Filtrasi kristal yang bagus adalah lambat.

Menggunakan banyak air untuk bilasan akan memperlambat proses

limbah filtrate dari hidrolisis adalah asam.



8. Isolasi Glikosida Triterpenoid dari batang Terminalia Arjuna

menggunakan Teknik Kromatografi dan Penyelidikan

Farmakologi

Penelitian ini melaporkan isolasi dan karakterisasi pembuatan

Glikosida Triterpenoid dari ekstraksi Terminalia Arjuna. Terminalia

Arjuna adalah sejenis pohon besar yang biasa tumbuh di India.

Mengandung zat kimia seperti :hydrolysable tannins3, triterpenoid

acids and their glycosides 4,5, flavonoids6, Phenolics7, phytosterol.

Terminalia Arjuna telah digunakan di India sebagai agen dalam

hipertensi dan kanker hati. Tanaman ini kaya akan zat kimia yang

sangat berguna dalam penyembuhan asma dan anemia. Isolasi senyawa

organic di dalam nya menggunakan teknik Kromatografi. Karakterisasi

senyawa menggunakan teknik spektroskopi khusus yang menemukan

hasil akhir berupa Olean-3b,22b-diol-12-en-28b-Dglucopyranoside-oic

acid. Metode isolasi ini sederhana, harga terjangkau dan efisien.

Penelitian ini sangat membantu dalam pengembangan obat tradisional,

karena dengan sukses dapat memanfaatkan kayu dan batang yang

kering.

(TANUSHREE ,2007)

9. isolation and purification glycoside from trollius ledebouri using

high-speed counter-currentchromatography by stepwise

increasing the flow-rate of the mobile phase”

Dari jurnal yang berjudul “isolation and purification glycoside from

trollius ledebouri using high-speed counter-currentchromatography by

stepwise increasing the flow-rate of the mobile phase” dikatakan

bahwa tiga flavonoid glikosida termasuk orientin, vitexin, quarcetin-3-

o-neohesperidoside dan satu komponen yang tidak diketahui diisolasi

dan dimurnikan dengan counter current kromatografi dengan



kecepatan tinggi (HSCCC) dan semi preparatif HPLC daritrollius

ledebouri reichb, pengobatan tradisional China. Persiapan HSCCC

dengan sistem dua fase solven yang terdiri dari etil asetat-n-butanol-air

(2:1:3, v/v/v) yang berhasil disususn dengan menaikkan flow-rate fase

gerak dari 1,5 sampai 2,5 ml/min setelah 190 menit. Konsekuensiynya

95,8 mg orientin, 11,6 mg fitexin, 9,3 mg komponen tak diketahui

dengan kemurnian sampai 97% dan 1 fraksi kemurnian fraksial (berisi

quarcetin-3-o-neohesperidoside pada kemurnian 85,1%), yang

diperoleh dari 500 mg ekstrak bahan mentah. Kemudian kemurnian

parsial tadi lebih dimurnikan lagi menggunakan reserved-phase semi-

preparative high-performance liquid chromatography. Strukturnya

diidentifikasi dari semua fraksi murni dengan menggunakan UV, MS,

H NMR, C NMR.



2.11 Analisa Bahan

1. Biji Buah Pala

Mengandung unsur-unsur psikotropik

Mempunyai daya bunuh terhadap serangga.

Mengakibatkan muntah-muntah, kepala pusing.

Komposisi biji buah pala :

• Minyak atsiri 2-16 % , rata-rata 10 %.

• Minyak kental 25-40 % terdiri atas beberapa asam seperti asam

polimetrik, asam stearat dan asam miristat.

• Karbohidrat ± 30 %, protein ± 60 %.

• Miristat ± 48 %.

(Arsyad, 2001)

2. Aseton (CH3COCH3)

Sifat fisik :

• Berat molekul : 58,08

• Densitas : 0,792 g/cm3

• Titik lebur : -94,60C

• Titik didih : 56,50C

Sifat kimia :

• Senyawa organik yang mudah menguap, mudah terbakar,

berbau khas, dan agak manis.



• Merupakan gugus fungsi keton, larut dalam air, alkohol,

eter, kloroform, dan minyak.• Biasa digunakan sebagai pelarut lemak, minyak, plastik,

dan lilin.

(Pudjaatmaka, 1993)

3. Eter

Sifat fisik :

• Titik didih 356 ºC,

• titik beku – 11,3 ºC,

• densitas 0,708 g/cm3

• cairan encer tidak berwarna, jernih, berbau, rasanya aneh.

• mudah menguap dan mudah terbakar, mudah meletus

sifat kimia:

• bereaksi dengan HI

• bereaksi dengan PCl5 pada pemanasan

• tidak bereaksi dengan logam Na

(Wilcox, 1995)



I. r Pustaka

Arsyad, M. Natsir. 2001. Kamus Kimia. PT. Gramedia Pusaka Utama : Jakarta.

Fieser, Louis. F. 1957. Experiment in Organic Chemistry, 3nd edition, Revised,

D. C. Heath and Company : Boston.

Gibson, Cha rles, S. 1956. Essential Principles of Organic Chemistry.

Chambridge of The University Press : London.



Mulyono. 2002. Kamus Kimia. Ganesha Silatama : Bandung.

Wilcox, C.F. 1995. Experimental Organic Chemistry, 2nd edition. Prentice Hall :

New Jersey.

LAMPIRAN

Pertanyaan:

1. Sebutkan danjelaskan cra-cara laindari isolasi trimiristin dalam biji buah

pala!

2. Tuliskan struktur dari senyawa trimiristin!

3. Bagaimana cara saudara dapat mengetahui bahwa produk hasil isolasi

adalah senyawa trimiristin?



Jawaban:

1. Cara lain untuk mengisolasi trimiristin adalah metode ekstraksi lanjutan

dari senyawa material padat dengan pelarut panas ( metode sokhletasi ).Dengan metode ini trimiristin dapat diperoleh dalam waktu 4 hari.

Penggunaan pelarut yang terbatas dan hasil yang maksimum membuat

metode ini lebih menguntungkan dan dipandang sebagai metode yang

paling tepat dalam isolasi trimiristin.

2. Struktur trimiristin:

HC

H2C

H2C O

O

O

C

C

C

O

O

O

(CH2)12

(CH2)12

(CH2)12

CH3

CH3

CH3

Trimiristin

3. Cara untuk mengetahui bahwa produk hasil isolasi adalah senyawa

trimiristin yaitu dengan pengujian titik leleh produk. Jika titik leleh produk

mendekati 56,50C maka senyawa tersebut merupakan trimiristin.

Semarang, 23 Januari 2009

Praktikan,



Ika Pratiwi K A Ina Noprastika Khairun Nisa

J2C008026 J2C008027 J2C008028

Laelatri A Latifah Hauli Lilis A

J2C008029 J2C008030 J2C008031

Lina R Dewi Permata S Diah Kurnia S

J2C008032 J2C008086 J2C008087

Mengetahui,

Asisten

Ditya Putri S

J2C006021

laporan-trimistin-doc.doc

Documents