lampiran lampiran 1. ethical clearance
TRANSCRIPT
77
LAMPIRAN
Lampiran 1. Ethical Clearance
78
Lampiran 2. Determinasi Tanaman
79
Lampiran 3. Tanda Bukti Hewan Uji
Lampiran 4. Surat Keterangan Penelitian
80
Lampiran 5. Perhitungan Hasil Randeman
Randemen Ekstrak Metanol, Fraksi larut, dan Fraksi tak Larut n-
Heksan Buah Parijoto
Berat Randemen %
Ekstrak Metanol 375,28 g 7,5056 %
Fraksi larut 44,86 g 1,0115%
Fraksi tak Larut n-Heksan 20,23 g 2,243 %
Jumlah rendemen pada Ekstrak Metanol, Fraksi Larut, dan Fraksi tak Larut Buah
Parijoto (Medinilla speciosa Blume)
Lampiran 6. Kadar Air
Ekstrak Fraksi Larut n-heksan Fraksi tak larut n-
heksan
81
Kadar air Ekstrak Metanol, Fraksi larut, dan Fraksi tak Larut n-
Heksan Buah Parijoto.
Kadar Air %
Ekstrak Metanol 8 %
Fraksi larut 5,47%
Fraksi tak Larut n-Heksan 5,99 %
Lampiran 7. Skrining fitokimia
Skrinning Fitokimia Ekstrak Metanol, Fraksi Larut, dan Fraksi tak Larut n-
Heksan Buah Parijoto
Parameter
Uji
Ekstrak
Metanol
Fraksi
larut
Fraksi tak
larut n-
heksan
Reagen Parameter uji
Positif jika-
Flavonoid ++ _ +++ HCl, serbuk
Mg
Jingga, merah
Saponin ++ _ ++ H2O Buih busa
Tanin + _ + FeCl3 Kuning intensif
Glikosida + _ + FeCl3 Cincin coklat
Terpenoid + + _ Liebermann
burchard
Coklat
kemerahan
82
83
Lampiran 8. Kadar Flavonoid Total Ekstrak Metanol, Fraksi Larut dan
Fraksi tak Larut N-heksan Buah Parijoto
Perhitungan Kensentrasi Ekstrak Metanolik Buah Parijoto
Konsentrasi ekstrak (%)=
Setara dengan
Konsentrasi sampel uji = 1 mg/ml
Pembuatan Absorbasi Larutan Sampel
1 ml larutan sampel + 0,3 ml NaNO2 5% + 0,3 ml AlCl3 10% + 2 ml NaOH 1 M
+ ad 10 ml aquadest
Pembuatan Larutan Baku Kuersetin
Konsentrasi 1000 ppm Kuersetin =
Pembuatan Larutan Standar
Konsentrasi 50 ppm Kuersetin = V1.C1 = V2. C2
= V1. 1000 ppm = 10 ml . 50 ppm
=
= V1 = 0,5 ml
Konsentrasi 40 ppm Kuersetin = V1.C1 = V2. C2
= V1. 1000 ppm = 10 ml . 40 ppm
=
= V1 = 0,4 ml
84
Konsentrasi 30 ppm Kuersetin = V1.C1 = V2. C2
= V1. 1000 ppm = 10 ml . 30 ppm
=
= V1 = 0,3 ml
Konsentrasi 20 ppm Kuersetin = V1.C1 = V2. C2
= V1. 1000 ppm = 10 ml . 20 ppm
=
= V1 = 0,2 ml
Konsentrasi 10 ppm Kuersetin = V1.C1 = V2. C2
= V1. 1000 ppm = 10 ml . 10 ppm
=
= V1 = 0,1 ml
Kurva Kalibrasi
1 ml larutan standar + 0,3 ml NaNO2 5% + 0,3 ml AlCl3 10% + 2 ml NaOH 1 M
+ ad 10 ml aquadest
Larutan Blangko
0,3 ml NaNO2 5% + 0,3 ml AlCl3 10% + 2 ml NaOH 1 M + ad 10 ml aquadest
Pembuatan NaNO2 5%
NaNO2 5% p.a=
85
Pembuatan AlCl3 10 %
AlCl3 10 % p.a =
Pembuatan NaOH 1 M
M =
1 =
1 =
1 =12,5 g
g =
g = 0,08 gram
Penentuan Operating Time Kadar Flavonoid Total
Menit ke - Absorbansi
0 2,3529
5 2,2855
10 2,2198
15 2,1405
20 2,0574
25 1,9719
30 1,8984
35 1,8108
40 1,7566
45 1,6957
50 1,6396
55 1,5891
60 1,5411
86
Kurva Baku Penentuan (Kurva Baku Kuersetin)
[mg/ml] R1 R2 R3
Rata - rata
10 0,1265 0,125 0,115 0,122167
20 0,1951 0,1993 0,181 0,1918
30 0,2807 0,2864 0,2889 0,285333
40 0,3932 0,352 0,3288 0,358
50 0,5267 0,4952 0,4693 0,497067
Kurva Baku Kuersetin
[µg/ml] A510nm
10 0,122167
20 0,1918
30 0,285333
40 0,358
50 0,497067
87
Perhitungan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Metanolik Buah Parijoto
A = 0,0161
B = 0,0916
R = 0,9833
Persamaan regresi linier :
y = B + A
y = 0,0916 + 0,0161
y = absorbansi sampel
= kadar flavonoid sampel (g/ml)
Konsentrasi Flavonoid Total (x)
Sampel R1 R2 R3 Rerata
Ekstrak 0,0118 0,0102 0,012 0,01133
Fraksi atas 0,019 0,0171 0,0159 0,01733
Fraksi bawah 0,017 0,0185 0,018 0,01783
88
Ekstrak
y = B + A
y = 0,0916 + 0,0161
0,01133= 0,0916 + 0,0161
0,01133- 0,0161= 0,0916 x
-0,00477=0,0916 x
X= -0,052 mg/g
Fraksi Larut N-heksan
y = B + A
y = 0,0916 + 0,0161
0,01733=0,0916 + 0,0161
0,01733- 0,0161= 0,0916 x
0,00123=0,0916 x
X= 0,0134 mg/g
Fraksi Tak Larut N-heksan
y = B + A
y = 0,0916 + 0,0161
y = B + A
y = 0,0916 + 0,0161
0,01783=0,0916 + 0,0161
0,01783- 0,0161= 0,0916 x
0,00173=0,0916 x
X= 0,0188 mg/g
Kadar Senyawa Flavonoid Total Ekstrak, Fraksi Tak Larut dan Fraksi Larut N-
heksan Metanolik Buah Parijoto
Sampel Kadar flavonoid total
Ekstrak metanolik -0,052 mg/g Fraksi tak larut n-heksan 0,0134 mg/g
Fraksi larut n-heksan 0,0188 mg/g
89
Lampiran 9. Hasil SPSS Pengukuran Diameter Tubulus Seminferus dan
Jumlah Spermatosit Primer
Deskriptive
90
91
Uji Normalitas
Uji Homogenitas
Transformasi
92
Kruskal-Wallis
Kelompok Normal vs Ekstrak
Kelompok Normal vs Fraksi Larut N-heksan
93
Kelompok Normal vs Fraksi Tak Larut N-heksan
Kelompok Esktrak vs Fraksi Larut N-heksan
Kelompok Ekstrak vs Fraksi Tak Larut N-heksan
94
Kelompok Fraksi Larut dan Tak Larut N-heksan
Lampiran 10. Perhitungan Dosis Ekstrak Metanol, Fraksi Larut dan Fraksi
tak Larut Buah Parijoto
Dosis sampel yang digunakan = 500 mg/KgBB
Pembuatan Larutan stok
Konsentrasi sampel = 500mg x BB Tikus 0,25Kg = 125mg/KgBB
Volume pemberian larutan
Lampiran 11. Perhitungan Pembuatan EMBP
Penyiapan Larutan Ekstrak, Fraksi Laut dan tak Larut N-heksan : misal tikus 250g
Larutan stock :
1. Ditimbang ekstrak metanol, fraksi larut dan tak larut n-heksan masing –
masing sebanyak 5 g
2. Dilarutkan dalam aquadest 50 mL
3. Konsentrasi :
5000 mg / 50 mL = 100 mg/ mL
Jika BB tikus 250 g, maka:
Dosis 500mg/kgBB x BB tikus
= 500 mg / kgBB x 250 g
= 500 mg / kgBB x 0,25 kg
= 125 mg
Larutan ekstrak, fraksi larut dan tak larut yang diambil sebesar :
125 mg
100 mg x 1mL = 1,25 mL
95
Lampiran 12. Dosis Larutan sampel
Kelompok
H1 H2 H3 H4 H5 H6 H7 BB
(g)
v.s
(ml)
BB
(g)
v.s
(ml)
BB
(g)
v.s
(ml)
BB
(g)
v.s
(ml)
BB
(g)
v.s
(ml)
BB
(g)
v.s
(ml)
BB
(g)
v.s
(ml)
I (Normal)
1 300 290 282 279 285 283 284
2 250 248 233 229 234 235 237
3 223 220 210 209 221 216 214
4 240 238 236 235 237 223 227
5 268 260 251 246 250 249 251
6 280 277 245 243 240 239 238
RERATA 260 256 243 240 245 241 242
II (Ekstrak
dosis 500
mg/KgBB)
1 307 1,54 278 1,39 267 1,34 267 1,3 268 1,34 270 1,35 273 1,37
2 280 1,4 269 1,35 261 1,31 260 1,28 259 1,3 262 1,31 263 1,32
3 264 1,32 256 1,28 254 1,27 256 1,13 256 1,28 257 1,29 257 1,29
4 237 1,19 225 1,13 218 1,09 225 1,24 225 1,13 226 1,13 226 1,13
5 266 1,33 253 1,27 246 1,23 248 1,29 249 1,25 249 1,25 249 1,25
6 282 1,41 265 1,33 256 1,28 257 1,26 258 1,29 259 1,3 263 1,32
RERATA 273 1,36 258 1,29 250 1,25 252 1,25 253 1,26 254 1,27 255 1,28
III (Fraksi Larut n-
heksan dosis
500
mg/KgBB)
1 313 1,57 310 1,55 306 1,53 228 1,14 231 1,16 237 1,19 243 1,22
2 264 1,32 260 1,3 259 1,3 258 1,29 257 1,29 256 1,28 256 1,28
3 276 1,38 275 1,38 277 1,39 275 1,38 270 1,35 268 1,34 265 1,33
4 226 1,13 223 1,12 216 1,08 217 1,09 217 1,09 217 1,09 217 1,09
5 282 1,41 280 1,4 275 1,38 276 1,38 276 1,38 276 1,38 276 1,38
6 268 1,34 268 1,34 260 1,3 261 1,31 261 1,31 265 1,33 264 1,32
RERATA 283 1,42 270 1,35 264 1,32 253 1,27 244 1,22 245 1,22 247 1,23
IV (Fraksi
Larut n-
heksan dosis
500mg/KgBB)
1 284 1,42 280 1,4 278 1,39 271 1,36 267 1,34 259 1,34 259 1,3
2 271 1,36 260 1,3 253 1,27 236 1,18 229 1,15 230 1,15 231 1,16
3 276 1,38 263 1,32 258 1,29 246 1,23 230 1,15 234 1,15 236 1,18
4 289 1,45 262 1,31 253 1,27 255 1,28 256 1,28 258 1,28 262 1,31
5 288 1,44 271 1,36 265 1,33 259 1,3 242 1,21 245 1,21 247 1,24
6 291 1,46 284 1,42 276 1,38 253 1,27 240 1,2 242 1,2 244 1,22
RERATA 272 1,36 269 1,35 266 1,33 253 1,26 252 1,26 253 1,27 254 1,27
96
Kelompok
H8 H9 H10 H11 H12 H13 H14
BB
(g)
v.s
(ml)
BB
(g)
v.s
(ml)
BB
(g)
v.s
(ml)
BB
(g)
v.s
(ml)
BB
(g)
v.s
(ml)
BB
(g)
v.s
(ml)
BB
(g)
v.s
(ml)
I (Normal)
1 268
266 268 270 272 275 290
2 221
220 222 225 226 226 239
3 256
295 290 285 280 273 212
4 222
220 222 225 227 228 238
5 238
236 238 240 242 243 257
6 220
216 220 220 221 224 240
RERATA 238
242 243 244 245 245 246
II (Ekstrak
dosis 500
mg/KgBB)
1 270 1,35 271 1,36 272 1,36 275 1,38 276 1,38 277 1,39 281 1,405
2 220 1,1 223 1,12 225 1,13 230 1,15 233 1,17 236 1,18 268 1,34
3 250 1,25 251 1,26 252 1,26 253 1,27 252 1,26 253 1,27 257 1,285
4 220 1,1 222 1,11 223 1,12 224 1,12 225 1,13 226 1,13 227 1,135
5 235 1,18 237 1,19 239 1,2 240 1,2 241 1,21 242 1,21 250 1,25
6 217 1,09 220 1,1 220 1,1 225 1,13 228 1,14 231 1,16 266 1,33
RERATA 235 1,18 237 1,19 239 1,19 241 1,21 243 1,21 244 1,22 258 1,291
III (Fraksi
Larut dosis
500mg/KgBB)
1 268 1,34 269 1,35 270 1,35 271 1,36 270 1,35 271 1,36 272 1,36
2 221 1,11 225 1,13 228 1,14 230 1,15 233 1,17 245 1,23 256 1,28
3 249 1,25 250 1,25 251 1,26 254 1,27 255 1,28 256 1,28 257 1,285
4 247 1,24 244 1,22 242 1,21 240 1,2 238 1,19 227 1,14 230 1,15
5 237 1,19 241 1,21 244 1,22 249 1,25 253 1,27 228 1,14 276 1,38
6 220 1,1 226 1,13 231 1,16 235 1,18 238 1,19 245 1,23 272 1,36
RERATA 240 1,2 243 1,21 244 1,22 247 1,23 248 1,24 245 1,23 261 1,303
IV(Fraksi Tak
Larut n-
heksan dosis
500
mg/KgBB)
1 267 1,34 265 1,33 264 1,32 263 1,32 260 1,3 258 1,29 247 1,235
2 218 1,09 220 1,1 222 1,11 223 1,12 225 1,13 227 1,14 241 1,205
3 248 1,24 249 1,25 250 1,25 249 1,25 250 1,25 251 1,26 253 1,265
4 218 1,09 220 1,1 224 1,12 228 1,14 232 1,16 237 1,19 282 1,41
5 233 1,17 235 1,18 238 1,19 240 1,2 241 1,21 243 1,22 264 1,32
6 216 1,08 221 1,11 225 1,13 227 1,14 230 1,15 235 1,18 265 1,325
RERATA 233 1,17 235 1,18 237 1,19 238 1,19 240 1,2 242 1,21 259 1,293
97
Lampiran 13. Dokumentasi Penelitian
Gambar 1
Sortasi kering buah Parijoto Gambar 2
Sortasi basah buah Parijoto
Gambar 3
Penimbangan Sampel Gambar 4
Penghalusan sampel
Gambar 5
Proses Maserasi Gambar 6
Proses Fraksinasi
98
Gambar 7
Hasil Fraksinasi
Gambar 8
Pengukuran kadar flavonoid
Gambar 9
Penyondean hewan uji Gambar 10
Pembedahan hewan uji
Gambar 11
Pembuatan preparat
Gambar 12
Pengamatan preparat
99
Lampiran 14. Gambar Histologi
Gambar 13
Spermatosit primer kelompok I (normal)
perbesaran 400x
Gambar 14
Diameter tubulus seminiferus kelompok I
(normal) perbesaran 100x
Gambar 14
Spermatosit primer kelompok II (Ekstrak
dosis 500mg/KgBB)
Gambar 15
Diameter tubulus seminiferus kelompok II
(Ekstrak dosis 500mg/KgBB)
100
Gambar 16
Spematosit primer kelompok III (Fraksi
larut n-heksan dosis 500mg/KgBB)
Gambar 18
Diameter tubulus semniferus kelompok III
(Fraksi larut n-heksan dosis 500mg/KgBB)
Gambar 19
Spematosit primer kelompok IV (Fraksi tak
larut n-heksan dosis 500mg/KgBB)
Gambar 20
Diameter tubulus semniferus kelompok IV
(Fraksi tak larut n-heksan dosis
500mg/KgBB)