kti - limun

35
Mikrobilogi Uji Kualitas Air ”LIMUN” Karya Tulis ini disusun sebagai Tugas Akhir Praktikum Bidang: Mikrobiologi Disusun oleh : Akademi Farmasi -B AKADEMI FARMASI PUTRA INDONESIA MALANG

Upload: reiyaa

Post on 29-Jun-2015

787 views

Category:

Documents


4 download

TRANSCRIPT

Page 1: KTI - Limun

Mikrobilogi

Uji Kualitas Air

”LIMUN”

Karya Tulis ini disusun sebagai Tugas

Akhir Praktikum

Bidang: Mikrobiologi

Disusun oleh :

Akademi Farmasi -B

AKADEMI FARMASI PUTRA INDONESIA MALANG

Jl. Barito no 5 Malang

Page 2: KTI - Limun

KATA PENGANTAR

Puji syukur kami panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena dengan

berkah dan rahmat-Nya kami dapat menyelesaikan Tugas Akhir Perkuliahan pada

mata pelajaran Mikrobiologi yang berjudul “Uji Kualitas Air Limun”.

Karya ilmiah ini disusun untuk memenuhi tugas mata pelajaran

Mikrobiologi yang dibina oleh Ibu Ayu Ristamaya Yusuf.

Dalam kesempatan ini, kami juga mengucapkan terima kasih kepada pihak-

pihak yang telah membantu dalam penulisan karya ilmiah ini, yakni sebagai

berikut :

1. Ibu Ayu Ristamaya Yusuf, selaku guru mata pelajaran mikrobiologi

yang telah membimbing kami dalam menyelesaikan tugas akhir ini.

2. Teman-teman yang telah membantu memberi masukan, baik kritik

maupun saran yang bermanfaat dalam penulisan tugas akhir ini.

3. Orang tua yang telah membantu memberikan saran dan juga dukungan

baik materi maupun bukan materi.

4. Pihak-pihak lain yang telah membantu yang tidak dapat kami sebutkan

satu persatu.

Kami telah berusaha untuk menyelesaikan tugas akhir perkuliahan ini

dengan sebaik-baiknya. Namun, kami juga mohon maaf apabila terdapat

kesalahan dalam penulisan tugas akhir perkuliahan ini yang kurang berkenan di

hati para pembaca. Oleh karena itu, kami mengharapkan kritik dan saran dari para

pembaca agar tugas akhir perkuliahan ini dapat diperbaiki dengan lebih baik lagi.

Semoga tugas akhir perkuliahan ini bermanfaat, karena dengan disusunnya

tugas akhir perkuliahan ini kita dapat mengetahui tentang kondisi sediaan limun

yang sekarang ada dalam masyarakat. Sehingga dapat menambah wawasan dan

pengetahuan kita semua.

Malang, Mei 2009

Penulis

II

Page 3: KTI - Limun

DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR...........................................................................................IIDAFTAR ISI.........................................................................................................IIIBAB I.......................................................................................................................5PENDAHULUAN...................................................................................................5

I.1 Latar Belakang.............................................................................................5I.2 Pembatasan Masalah....................................................................................6I.3 Perumusan Masalah.....................................................................................6I.4 Tujuan...........................................................................................................7I.5 Manfaat.........................................................................................................7

BAB II.....................................................................................................................8TINJAUAN PUSTAKA.........................................................................................8

II.1 Limun...........................................................................................................8II.2 Bahan Pembuatan Limun..........................................................................8

II.2.1 Sirup Buah dan Sari Buah..................................................................8II.2.2 Gula.......................................................................................................8

II.3 Zat Tambahan dalam Pembuatan limun................................................10II.3.1 Bahan yang Diperbolehkan...............................................................10II.3.2 Bahan yang Dilarang.........................................................................10

II.4 Mikroba dalam Limun.............................................................................11II.5 Proses Pembuatan Limun........................................................................11

II.5.1 Tahap Pemasakan Gula....................................................................11II.5.2 Tahap Penyaringan............................................................................11II.5.3 Tahap Pencampuran.........................................................................12II.5.4 Tahap Pengisian ke Botol..................................................................12II.5.5 Tahap Penutupan Botol.....................................................................12II.5.6 Tahap Inspeksi...................................................................................12

II.6 Syarat Mutu Sirup dan Limun................................................................12BAB III..................................................................................................................14METODE PENELITIAN....................................................................................14

III.1 Tempat dan Waktu Percobaan..............................................................14III.2 Bahan dan Alat Percobaan.....................................................................14

III.2.1. Bahan Percobaan.............................................................................14III.2.2. Alat Percobaan :..............................................................................15

III.3 Metode Penelitian....................................................................................16III.4 Pelaksanaan Percobaan..........................................................................16

III.4.1. Uji Kualitas Air...............................................................................16III.4.2. Uji Penunjang..................................................................................16

III.5 Kriteria Pengamatan...............................................................................17BAB IV..................................................................................................................18HASIL DAN PEMBAHASAN............................................................................18

IV.1 Uji Kualitas Air........................................................................................18IV.2 Uji Penunjang..........................................................................................18

BAB V....................................................................................................................19PENUTUP.............................................................................................................19

III

Page 4: KTI - Limun

V.1 Simpulan....................................................................................................19V.2 Harapan Dan Saran..................................................................................19

DAFTAR PUSTAKA...........................................................................................20LAMPIRAN..........................................................................................................21

Gambar.............................................................................................................21Diagram Alir.....................................................................................................21

IV

Page 5: KTI - Limun

BAB I

PENDAHULUAN

I.1 Latar Belakang

Air adalah salah satu aspek penting bagi mahluk hidup agar dapat bertahan

hidup, khususnya manusia. Air merupakan aspek penting kehidupan karena

mahluk hidup tak akan dapat bertahan hidup tanpa air, seperti halnya manusia

yang mempunyai 80 % komposisi air dalam tubuhnya. Tetapi apakah semua

jenis air yang ada di sekitar kita aman untuk dikonsumsi? Apakah air tersebut

tidak akan menggangu kesehatan tubuh bila dikonsumsi? Tentu tidak, air yang

baik dikonsumsi adalah air yang telah melalui proses pemasakan atau

pemanasan hingga mendidih. Tujuan dilakukannya pemanasan ialah agar

mikroorganisme-mikroorganisme patogen yang ada dalam air tersebut mati.

Selain proses pemanasan, masih banyak lagi cara yang dapat dilakukan untuk

mengendalikan air yang digunakan sebagai air minum, contohnya adalah

penyaringan, dan masih banyak lainnya.

Berbagai jenis minuman dengan berbagai merek dan kemasan marak

beredar di pasaran, mulai minuman yang terdaftar secara resmi di badan POM

(badan Penelitian Obat Makanan dan Minuman ) hingga minuman yang

kurang jelas asal usul dan keamanannya. Untuk minuman yang telah terdaftar

dalam badan POM dan memiliki nomor registrasi pada wadahnya, tingkat

keamanan dan kebersihan minuman tersebut dapat dipastikan hingga

masyarakat dapat dengan tenang mengkonsumsi minuman tersebut.

Bagaimanakah dengan minuman yang tidak memiliki no registrasi tetapi

masih banyak kita temukan di masyarakat? Apakah minuman tersebut layak

dikonsumsi?

Limun adalah salah satu jenis minuman yang banyak beredar di

masyarakat. Limun dibuat dengan rasa buah-buahan dan mengandung soda

didalamnya. Seperti halnya minuman rasa buah lainnya limun dibuat dengan

cara mencampurkan buah, minuman bersoda, gula, dan bahan-bahan lainnya.

Karena rasanya yang nikmat, kandungan soda yang menyegarkan dan

5

Page 6: KTI - Limun

harganya yang murah, limun menjadi pilihan pertama bagi masyarakat untuk

menghilangkan kehausan. Konsumen limun yang terbesar adalah siswa siswi

sekolah dasar hingga tingkat menegah yang beranggapan bahwa limun adalah

minuman yang menyegarka dan murah harganya. Tetapi karena harganya

yang murah, apakah limun tersebut layak untuk dikonsumsi? Apakah air yang

digunakan dalam pembuatan limun tersebut adalah air yang telah melalui

proses pemasakan? Apakah limun tersebut telah dibuat secara higienis dan

layak untuk diminum? Dan bagaimana dengan wadah dan tempat

penyimpanan limun tersebut? Masih banyak hal lain yang belum dapat

dipastikan dari limun yang beredar dipasaran, selain karena banyaknya merek

yang beredar, sebagian besar konsumen limun adalah siswa siswi sekolah

dasar dan tingkat menengah yang tidak memikirkan kehigienisan limun

tersebut.

Dalam makalah yang berjudul “Limun” ini, penulis mencoba menjawab

pertanyaan tersebut. Dengan menggunssakan metode penelitian, penulis

mencoba untuk memaparkan apakah limun yang banyak dikonsumsi

masyarakat adalah limun yang layak dikonsumsi dan higienis.

Harapan penulis, makalah ini dapat lebih memperluas pengetahuan

pembaca mengenai limun.

I.2 Pembatasan Masalah

Adapun masalah yang ingin penulis selesaikan melalui penulisan makalah

ini adalah :

1. Apakah Limun itu?

2. Apakah manfaat limun itu?

3. Bagaimana proses pembuatan limun itu?

4. Apakah limun yang banyak beredar di masyarakat telah layak untuk

dikonsumsi?

I.3 Perumusan Masalah

Dari pembatasan masalah yang telah penulis sampaikan di atas, dapat kita

peroleh satu rumusan masalah yakni :

6

Page 7: KTI - Limun

“Apakah limun yang banyak beredar di masyarakat telah layak untuk

dikonsumsi? “

I.4 Tujuan

Adapun tujuan dari penulisan karya tulis ini adalah :

1. Mengetahui tentang limun.

2. Mengetahui proses pembuatan limun.

3. Mengetahui manfaat dan kelebihan limun.

4. Mengetahui kehigienisan dan mutu produksi limun di

masyarakat

I.5 Manfaat

Adapun manfaat yang diharapkan penulis dari karya tulis ini adalah :

1. Bagi penulis

a. Dapat menambah pengalaman penulis dalam pembuatan karya

tulis.

b. Dapat menambah pengetahuan penulis, terutama mengenai limun.

c. Dapat ikut mensosialisasikan mengenai proses pembuatan limun yang

baik dan sesuai standart mutu.

d. Dapat ikut meluruskan persepsi masyarakat yang salah mengenai

pembuatan limun.

2. Bagi pembaca dan masyarakat

a. Dapat mengetahui bagaimana proses pembuatan limun.

b. Dapat mengetahui manfaat limun.

c. Dapat meluruskan persepsi yang salah mengenai proses dan manfaat

limun.

d. Dapat ikut mensosialisasikan mengenai limun yang layak dikonsumsi.

3. Bagi ilmu pengetahuan

Dapat menambah khazanah ilmu pengetahuan, khususnya biologi yang

mempelajari tentang hasil pangan dan manfaatnya.

7

Page 8: KTI - Limun

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

II.1 Limun

Limun adalah salah satu jenis minuman yang dibuat dengan rasa buah –

buahan dan mengandung soda didalamnya . Minuman limun biasa dibuat dari

sari buah yang diekstrakkan atau dari minuman sirup yang diberi essen /

pemanis dengan rasa buah – buahan , misalnya rasa jeruk , anggur .apel , salak

, kopi , dan sebagainya .

II.2 Bahan Pembuatan Limun

II.2.1 Sirup Buah dan Sari Buah

Menurut SNI (1994), sirup didefinisikan sebagai larutan gula pekat

(sakarosa : High Fructose Syrup dan atau gula inversi lainnya) dengan atau

tanpa penambahan bahan tambahan makanan yang diijinkan. Definisi sirup

yang lain yaitu sejenis minuman ringan berupa larutan kental dengan citarasa

beraneka ragam, biasanya mempunyai kandungan gula minimal 65 %. dibuat

dengan cara melarutkan gula tebu atau sirup jagung, atau kombinasi keduanya

dalam air, dengan menambahkan bahan penambah cita rasa pada larutan

tersebut.

Pada prinsipnya dikenal 2 (dua) macam sari buah, yaitu :

Sari buah encer (dapat langsung diminum), yaitu cairan buah yang

diperoleh dari pengepresan daging buah, dilanjutkan dengan penambahan

air dan gula pasir.

Sari buah pekat/Sirup, yaitu cairan yang dihasilkan dari pengepresan

daging buah dan dilanjutkan dengan proses pemekatan, baik dengan cara

pendidihan biasa maupun dengan cara lain seperti penguapan dengan

hampa udara, dan lain-lain. Sirup ini tidak dapat langsung diminum, tetapi

harus diencerkan dulu dengan air (1 bagian sirup dengan 5 bagian air).

Buah-buahan yang sering diolah menjadi sari buah atau sirup antara lain :

pala, pisang, jambu biji, mangga, sirsak, wortel, tomat, kueni, markisa,

8

Page 9: KTI - Limun

nangka, jahe, asam, hampir semua jenis jeruk, dan lain-lain. Sari buah atau

sirup buah dapat tahan selama3 bulan.

II.2.2 Gula

Gula biasa disebutkan untuk setiap jenis karbohidrat yang

digunakan sebagai pemanis. Pemanis sendiri jenisnya

bermacam-macam, berdasarkan kemampuan menghasilkan

energi, pemanis dibedakan menjadi 2, yaitu pemanis nutritif

dan pemanis non nutritif. Pemanis nutritif adalah jenis

pemanis yang jika dikonsumsi akan menghasilkan sejumlah

energi atau kalori di dalam tubuh. Jenis pemanis ini dibagi

menjadi 2 kelompok utama, yaitu pemanis nutritif alami dan

pemanis nutritif sintetis.

Pemanis nutritif alami merupakan jenis pemanis yang

dapat menghasilkan sejumlah energi dan terdapat secara

alami dalam bahan tertentu, contohnya madu, laktosa, gula

tebu (sukrosa), gula aren, dan gula buah-buahan (fruktosa).

Pemanis nutritif sintetis merupakan jenis pemanis yang bisa

menghasilkan sejumlah kalori tetapi tidak terdapat secara

alamiah dalam bahan tertentu. Pemanis ini diproduksi secara

sintetis (buatan), contohnya adalah aspartam.

Pemanis non nutritif adalah jenis pemanis yang apabila

dikonsumsi tidak akan dapat menghasilkan kalori. Jenis

pemanis ini juga dibedakan menjadi 2, yaitu pemanis non

nutritif alami dan pemanis non nutritif sintetis. Pemanis non

nutritif alami contohnya steviosida dan rebausida yang

terdapat pada tanaman stevia. Pemanis non nutritif sintetis

contohnya sakarin dan siklamat

Gula memegang peranan dan fungsi yang sangat besar

dalam industri minuman. Gula berfungsi sebagai pemanis,

menyempurnakan rasa asam, citarasa lain, dan juga

memberikan rasa berisi karena memperbaiki kekentalan. Gula

terdapat dalam berbagai bentuk yaitu sukrosa, glukosa,

9

Page 10: KTI - Limun

fruktosa, dan 8 dekstrosa. Jenis gula yang biasa dipakai dalam

pembuatan sirup adalah sukrosa, tetapi bisa juga digunakan

jenis gula yang lain. Untuk mengetahui jenis dan tingkat

kemanisan gula, dapat dilihat pada tabel berikut:

Tabel Tingkat Kemanisan Relatif pada Tingkat Sukrosa 10%

Jenis Gula Tingkat Kemanisan

Sukrosa 1.0

Glukosa 0.7

Fruktosa 1.2

Gula Invert 1.0

Laktosa 0.4

Maltosa 0.5

Sorbitol 0.5

Sakarin 300.0

II.3 Zat Tambahan dalam Pembuatan limun

II.3.1 Bahan yang Diperbolehkan

Asam sitrat dapat berfungsi sebagai pengawet karena pada

pH rendah (kurang dari 4.6) mikroorganisme berbahaya

seperti Clostridium botulinum akan sulit untuk tumbuh dan

berkembang. Asitrat juga dapat bertindak sebagai penegas

rasa dan warna atau menyelubungi after taste yang tidak

disukai. Hal ini menyebabkan asam sitrat banyak digunakan

dalam industri minuman, asam sitrat juga berfungsi untuk

mengisolasi/memisahkan ion-ion logam yang dapat

menyebabkan terjadinya reaksi oksidasi, reaksi pencoklatan,

dan pembentukan sruktur-struktur kompleks.

10

Page 11: KTI - Limun

Selain itu asam sitrat juga dapat menginaktifkan enzim

yang tidak disukai seperti polyphenol oxidase yang dapat

menyebabkan terjadinya reaksi pencoklatan enzimatis.

II.3.2 Bahan yang Dilarang

Bahan pewarna rhodamin B untuk merah dan metanil yellow untuk

kuning. Bahan pewarna ini merupakan pewarna sintetis yang terlarang

digunakan pada produk makanan karena mengandung residu logam berat yang

berbahaya bagi kesehatan.

Rhodamin B berasal dari metanlinilat dan dipanel alanin sehingga mudah

larut dalam alkohol sebenarnya merupakan bahan pewarna kertas, bulu domba

dan sutera. Rhodamin B disalah gunakan sebagai pewarna sirup, limun, es

mambo, bak pao, es cendol, es kelapa, permen. Metanil yellow berdasarkan

kriteria kesehatan dunia (WHO) memiliki tingkat keracunan tingkat tiga

sering dijumpai penggunaannya dalam sirup, pisang goreng, manisan mangga,

atau kedondong dengan maksud memunculkan warna kuning yang menarik.

Pewarna Ponceau 3R, Ponceau Sx, dan Amaranth. Ini sering digunakan

secara melebihi batas ambang dalam pembuatan sirup limun. Sedangkan

Benzoat sorbet dan sakarin siklimat dalam sirup, limun, saus, manisan, kue

basah, es mambo, es cendol, es kelapa. Ciri makanan yang mengandung

Rhodamin B:

Warna kelihatan cerah (berwarna-warni), sehingga tampak menarik.

Ada sedikit rasa pahit (terutama pada sirop atau limun).

Muncul rasa gatal di tenggorokan setelah mengonsumsinya.

Baunya tidak alami sesuai makanannya.

Gula Bibit

Selain pewarna, jajanan kakilima menjual berbagai macam produk

minuman dengan harga yang lebih terjangkau, tak mungkin sepenuhnya

menggunakan gula asli (gula pasir maupun gula merah), melainkan memilih

gula bibit. Gula bibit bukanlah gula yang aman bagi kesehatan. Disebut saja

gula sakarin dan aspartam, yang jauh lebih murah dibanding gula asli.

11

Page 12: KTI - Limun

Saat ini pemanis buatan aspartam juga sedang gencar dilarang, karena efek

buruk terhadap otak. Namun, masih banyak jajanan dan panganan, selain

industri makanan yang menggunakan aspartam.

II.4 Mikroba dalam Limun

Dalam limun juga terdapat berbagai macam mikroba, milai dari coliform,

e.coli, salmonella, s.aureus, vibrio cholera, kapang, khamir yang harus

memenuhi syarat sirup dan limun yang baku. ( Lihat tabel II.6 )

II.5 Proses Pembuatan Limun

II.5.1 Tahap Pemasakan Gula

Pada tahapan ini, gula ( sukrosa ) dilarutkan dengan air dalam

perbandingan tertentu, kemudian dimasak. Pemasakan gula dilakukan pada

suhu sekitar 1500C – 1600C. Selama pemasakan gula dilakukan pengadukan,

fungsi dari pengadukan ini adalah untuk mempercepat pelarutan gula.

II.5.2 Tahap Penyaringan

Penyaringan terhadap larutan gula yang telah dimasak dilakukan untuk

menghilangkan kotoran-kotoran yang ada. Kemudian hasil penyaringan

larutan gula dibiarkan mendingin.

II.5.3 Tahap Pencampuran

Dalam keadaan dingin, larutan gula tersebut dicampur dengan essence,

sitrit, bahan pengawet dan pewarna. Campuran inilah yang kita kenal dengan

sebutan sirup (juga dapat dibuat dengan menggunakan sari buah).

II.5.4 Tahap Pengisian ke Botol

Pengisian sirup kedalam botol

Sirup yang telah jadi dimasukkan kedalam botol-botol. Volume pengisian

sirup dalam botol dibedakan menjadi 2, yaitu sebanyak 60ml untuk botol

berukuran 310 ml, dan 85ml untuk botol yang berukuran 410ml.

Pengisian water steril dan karbon dioksida kedalam botol

Botol yang telah berisikan sirup kemudian ditambahkan water steril dan

karbon dioksida. Water steril adalah air yang telah mengalami sterilisasi

dan pendinginan pada suhu 00C – 20C. Sedangkan karbon dioksida yang

12

Page 13: KTI - Limun

digunakan adalah yang berasal dari pertamina yang berguna untuk

meningkatkan aktivitas bahan pengawet dan tampilan yang indah.

II.5.5 Tahap Penutupan Botol

Botol yang telah berisikan water steril dan karbon dioksida segera ditutup

untuk menghidari masuknya mikroorganisme lain dan mencegah hilangnya

karbon dioksida yang telah siisikan.

II.5.6 Tahap Inspeksi

Botol yang telah berisikan limun kemudian diinspeksi apakah terjadi

kebocoran atau cacat pada botol tersebut. Dan limun siap dipasarkan.

II.6 Syarat Mutu Sirup dan Limun

Sirup dan Limun yang beredar di masyarakat harus memenuhi syarat-

syarat tertentu. Syarat mutu sirup dan limun sesuai dengan Standart Nasional

Indonesia dapat dilihat pada tabel berikut.

Tabel Syarat Mutu Sirup dan Limun SNI 01-3544-1994

No

Kriteria Uji Satuan Persyaratan

1 KeadaanAroma - NormalRasa - Normal

2 Jumlah Gula % b/b Min 653 Bahan Tambahan

MakananPemanis buatan - Tidak boleh adaPewarna buatan

-Sesuai SNI 01-0222-

1995Pengawet

-Sesuai SNI 01-0222-

19954 Cemaran Logam

Timah (Pb) mg/kg Maks 1.0Tembaga (Cu) mg/kg Maks 1.0Seng (Zn) mg/kg Maks 25

5 Cemaran Arsen (As) mg/kg Maks 0.56 Cemaran Mikroba

Angka lempeng total koloni

koloni/ml Maks 5 x 102

Coliform APM/ml Maks 20

13

Page 14: KTI - Limun

E. Coli APM/ml <3Salmonella koloni/25n NegatifS. Aureus koloni/ml 0Vibrio Cholera koloni/ml NegatifKapang koloni/ml Maks 50Khamir koloni/ml Maks 50

Sumber : Dewan Standarisasi Nasional (1994)

II.7 Prosedur Penelitian

II.7.1 Angka Lempeng Total

Angka Lempeng Total digunakan untuk menghitung jumlah

mikroorganisme yang ditumbuhkan pada media PCA ( Plate Count Agar )

yang dapat berkembang biak dan membentuk koloni yang dapat dilihat

langsung tanpa bantuan mikroskop . Dalam perhitungan ALT menggunakan

metode hitungan cawan , metode ini sensitif karena :

1. Hanya sel hidup yang dihitung.

2. Beberapa mikroorganisme dapat dihitung sekaligus.

3. Dapat digunakan isolasi dan identifikasi mikroorganisme karena

koloni yang terbentuk mungkin berasal dari satu sel

mikroorganisme dengan penampakan pertumbuhan yang spesifik.

II.7.2 Uji Kualitas Air

Uji kualitas Air secara mikrobiologis dapat dilakukan dengan metode

Most Probable Number ( MPN ) atau Angka Paling Mungkin ( APM ) .

Metode ini digunakan untuk menentukan adanya kandungan koliform dalam

suatu sampel air .

Koliform merupakan suatu grup bakteri berbentuk koli ( batang ) yang

digunakan sebagai indikator adanya polusi , kotoran , dan kondisi sanitasi

yang tidak baik pada air , susu , produk – produk susu dan makanan . Bakteri

koliform dibedakan jadi dua ,yaitu : koliform fekal , misalnya : Escheria coli ,

dan koliform nonfekal , misalnya : Enterobacter aerogenesis .

14

Page 15: KTI - Limun

Uji MPN adalah uji penduga koliform yang juga merupakan uji kuantitatif

koliform pada sampel air ( jumlah koloni koliform dinyatakan dalam MPN ) .

Media yang digunakan dalam uji MPN adalah media cair dalam tabung

reaksi , dimana perhitungan dilakukan berdasarkan jumlah tabung positif yang

ditumbuhi mikroba setelah diinkubasi pada suhu dan waktu tertentu .

Pengamatan tabung positif dapat dilihat pada terbentuknya gas atau tidak pada

tabung durham .

Terbentuknya gas pada tabung durham dalam Lactosa Broth tidsk selalu

menunjukkan jumlah koliform karena kemungkinan terdapat mikroba

pemecah lactosa yang kain , seperti bakteri asam laktat dan khamir tertentu .

Oleh karena itu perlu dilakukan uji penguat koliform yang menggunakan

media BGLBB ( Brilliant Lactose Bile Broth ) . tujuan dari uji penguat adalah

untuk mengetahui apakah benar terdapat koliform dalam sampel dan

membedakan koliform fekal dan non fekal .

15

Page 16: KTI - Limun

BAB III

METODE PENELITIAN

III.1 Tempat dan Waktu Percobaan

Percobaan dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi Akademi Putra

Indonesia Malang pada bulan Mei sampai Juni 2009.

III.2 Bahan dan Alat Percobaan

III.2.1. Bahan Percobaan

Lactosa Broth ( LB )

Brillian Green Bille Broth ( BGLBB )

PCA

Perhitungan Bahan ;

Lactosa Broth ( LB )

Untuk dua sampel :

LB tebal : 3 tabung * 5 ml = 15 ml * 2 = 30 ml

Pepton = 13 gram / 1000 ml * 15 ml * 2

= 0.390g =390 mg

Lactosa =13 gram / 1000 ml * 15 ml * 2

= 0.390 g = 390 mg

Kaldu = 1000 ml / 1000 ml * 15 ml * 2

= 30 ml

LB tipis : 3 tabung * 9 ml = 27 ml * 2 = 54 ml

Pepton = 13 g / 1000 ml * 27 ml * 2

= 0.702 g = 702 mg

Lactosa = 13 g / 1000 ml * 27 ml * 2

= 0.702 g = 702 mg

Kaldu = 1000 ml / 1000 ml * 27 ml * 2

= 54 ml

BGLBB

Untuk dua sampel :

16

Page 17: KTI - Limun

5 tabung * 2 * 10 ml = 100 ml

40 g/1000 ml *50 ml = 2 g * 2 =4 g

Untuk perhitungan ALT

Pepton :

6 tabung pengencer = 6 * 9 ml

= 54 ml pepton 0.01 %

= 0.01 g / 100 ml * 54 ml

= 0.0054 g / 54 ml

= 5.4 mg / 54 ml

PCA

6 tabung media = 6 * 15 ml

=90 ml PCA

= 22.5 g / 1000 ml * 90 ml

= 2.025g

III.2.2. Alat Percobaan :

32tabung reaksi ( 6 tabung untuk LB tebal , 6 tabung untuk LB

tipis , 10 tabung untuk BGLBB , 10 tabung untuk uji ALT )

1 buah jarum ose

2 buah lampu spiritus

2 buah batang pengaduk

1 buah bola hisap

15 buah blutip

5 buah beker galass

1 buah gelas ukur 100 ml

1 buah gelas ukur 10 ml

1 buah pipet volume 0.1 ml

1 buah pipet volume 1 ml

2 buah kaki tiga

2 buah asbes

4 buah cawan petri

20 buah tabung durham

17

Page 18: KTI - Limun

III.3 Metode Penelitian

III.4 Pelaksanaan Percobaan

III.4.1. Uji Kualitas Air

Uji MPN menggunakan seri 5 tabung

Menimbang bahan – bahan sesuai yang tertera diatas

Menbuat media tebal , dengan komposisi lactosa , pepton , dan

kaldu , kemudian masak sampai mendidih dan tuang dalam tabung

reksi @ 5 ml, dari tiap tabung ambil sedikit dan masukkan dalam

tabung durham

Membuat media tipis ,dengan komposisi lactosa , pepton ,dan

kaldu , kemudian masak sampai mendidih dan tuang dalam tabung

reaksi @ 9 ml, dari tiap tabung ambil sedikit dan masukkan dalam

tabung durham

Membuat BGLBB , setelah BGLBB mendidih tuang dalam tabung

reaksi @ 10 ml

Pipet 10 ml sampel lalu masukkan dalam 3 tabung media tebal

Pipet 1 ml sampel lalu masukkan dalam 1 tabung media tipis

Pipet 0.1 ml sampel lalu masukkan dalam 1 tabung media tipis

Inkubasikan setiap media yang berisi sampel pada suhu 37 0 C

selama 1 x 24 jam

Amati gas yang berada pada tabung durham , apabila terdapat gas ,

ambil 2 ose dari hasil tersebut lalu masukkan dalam BGLBB

Inkubasikan hasil yang positif

III.4.2. Uji Penunjang

Pipet 1 ml sampel , dimasukkan dalam tabung reaksi yang berisi 9

ml larutan pengencer steril dan dihomogenkan ( pengenceran 10 -1 )

Kemudian dilanjutkan sampai pengenceran 10 -6 dengan cara seperti

diatas , dimana diambil 1 ml sampel dari pengenceran sebelumnya

dan dimasukkan dalam 9 ml larutan pengencer steril

Ambil 1 ml dari tiap pengenceran ( 3 pengenceran terakhir ) dan

inokulasikan dalam cawan petri steril dengan media tertentu

18

Page 19: KTI - Limun

Inkubasi pada suhu 370C selama 48 jam

Hitung koloni yang tumbuh dan catat hasilnya

III.5 Kriteria Pengamatan

Pengamatan yang dilakukan terhadap Limun meliputi :

Uji Kualitas Air

Pada minuman limun akan diuji jumlah MPN dan koliform

yang ada, kemudian akan dibandingkan dengan syarat mutu

limun yang telah sisahkan secara nasional.

Uji Penunjang

Pada minuman limun akan diujikan jumlah angka lempeng

total, jumlah kapang dan jumlah bakteri yang ada, kemudian

akan dibandingkan dengan syarat mutu limun yang telah

sisahkan secara nasional.

19

Page 20: KTI - Limun

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

IV.1 Uji Kualitas Air

Uji Penduga

Sampel Pertama

Volume MPN / 1000 ml

10 ml 1 ml 0.1 ml

3 tabung (+) 1 tabung + 1 tabung +

Sampel Kedua

Volume MPN / 1000 ml

10 ml 1 ml 0.1 ml

3 tabung (+) 1 tabung (+) 1 tabung (+)

Sampel : Minuman Limun merck X

Minuman Limun merck Y

Waktu : 1 x 24 jam

Media : Lactosa Broth

Kontrol : negatif atau tidak terkontaminasi

Uji Penegas:

IV.2 Uji Penunjang

Perhitungan ALT ( Angka Lempeng Total )

o Pengenceran 10 -3

Jumlah koloni =

20

Page 21: KTI - Limun

Perhitungan SPC = jumlah koloni x 1 / faktor pengenceran=

o Pengenceran 10-4

Jumlah koloni =

Perhitungan SPC = jumlah koloni x 1 / faktor pengenceran=

o Pengenceran 10 -5

Jumlah koloni :

Perhitungan SPC = jumlah koloni x 1 / faktor pengenceran =

o Pengenceran 10-6

21

Page 22: KTI - Limun

Jumlah koloni =

Perhitungan SPC = jumlah koloni x 1 / faktor pengenceran=

o Kontrol : negatif atau tidak terkontaminasi .

Pengamatan 2 x 24 jamMedia : PCA ( Plate Count Agar )Sampel : Minuman Limun merck X

22

Page 23: KTI - Limun

BAB V

PENUTUP

V.1 Simpulan

V.2 Harapan Dan Saran

23

Page 24: KTI - Limun

DAFTAR PUSTAKA

Anonim. 1997. Kamus Besar Bahasa Indonesia Edisi Kedua. Jakarta : Balai

Pustaka.

Anonim. digital-collections/jiunkpe/s1/tmi/2002/jiunkpe-ns-s1-2002-25497126-

2833-kebutuhan_bb-chapter4.pdf. Diakses tanggal 15 Mei, 2009

Anonim. www.indagsar-karawang.com. Diakses tanggal 15 Mei, 2009

Anonim. http://www.akupercaya.com/forums/warung-kopi/4490-info-waspadai-

formalin-di-sekitar-kita.html. Diakses tanggal 15 Mei, 2009

Anonim. http://tegtitan.wordpress.com/2008/03/28/bahan-kimia-terlarang-pada-

produk-makanan. Diakses tanggal 15 Mei, 2009

Anonim. http://www.indonesiaindonesia.com/f/gaya-hidup-kesehatan. Diakses

tanggal 15 Mei, 2009

Anonim. http://www.suaramerdeka.com/harian/0507/07/x_nas.html. Diakses

tanggal 15 Mei, 2009

Anonim. http://smpputri.wordpress.com/2009/01/28/inside-the-class-membuat-

sirup-buah. Diakses tanggal 15 Mei, 2009

Anonim. http://pkditjenpdn.depdag.go.id/index.php. Diakses tanggal 15 Mei,

2009

Herlina Marta, Asri Widyasanti, Tati Sukarti.. 2007. Pengaruh Penggunaan Jenis

Gula dan Konsentrasi Saribuah Terhadap Beberapa Karakteristik Sirup Jeruk.

. Universitas Padjadjaran

24

Page 25: KTI - Limun

LAMPIRAN

Gambar

Diagram Alir

Diagram Alir Pembuatan Sari Buah dan Sirup Yang kemudian akan

dilanjutkan menjadi limun.

25