identifikasi protein dan lemak.docx
TRANSCRIPT
-
8/18/2019 IDENTIFIKASI PROTEIN DAN LEMAK.docx
1/13
RANCANGAN PERCOBAAN
BIOKIMIA
“IDENTIFIKASI PROTEIN DAN LEMAK”
Disusun oleh:
NURAINI
E1A012033
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI JURUSAN PENDIDIKAN MIPA
FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN
UNIVERSITAS MATARAM2015
-
8/18/2019 IDENTIFIKASI PROTEIN DAN LEMAK.docx
2/13
IDENTIFIKASI PROTEIN
1.1 Tujuan
1. Untuk mengetahui prinsip kerja pada penentuan uji kualitatif (Hopkins-Cole) protein.
1.2 Dasar Teori
Protein dibuat dari satu atau lebih rantai polipeptida yang terdiri dari banyak
asam amino yang dihubungkan oleh rantai peptida. Berat molekul protein berariasi mulai
dari !""" hingga satu juta atau lebih. #emua protein$ tanpa memperhatikan fungsi atau
jenis dari sumbernya dibuat dari dua puluh asam amino$ yang disusun dari rangkaian yang
berariasi
( %ehninger$ 1&').
eistime*aan lain dari protein ini adalah strukturnya yang mengandung +
(1!$,"-1)$ C (!/$0")$ H ($&"-'$,")$ (/1- /,$!")$ # ("$-/)$ disamping C$ H$
(seperti juga karbohidrat dan lemak)$ dan # kadang-kadang P$ 2e dan Cu (sebagai
senya*a kompleks dengan protein). 3engan demikian maka salah satu 4ara terpenting
yang 4ukup spesifik untuk menentukan jumlah protein se4ara kuantitatif adalah dengan
penentuan kandungan + yang ada dalam bahan makanan atau bahan lain
(#udarmaji$1&&).
Protein memegang peranan penting lainnya dalam berbagai proses biologi.
Peran-peran tersebut antara lain5
1. atalisis en6imatik Hampir semua reaksi kimia dalam sistem biologi dikatalisis oleh
en6im dan hampir semua en6im adalah protein./. 7ransportasi dan penyimpanan Berbagai molekul ke4il dan ion-ion ditansport oleh
protein spesifik. 8isalnya transportasi oksigen di dalam eritrosit oleh hemoglobin dan
transportasi oksigen di dalam otot oleh mioglobin.
,. oordinasi gerak ontraksi otot dapat terjadi karena pergeseran dua filamen protein.
Contoh lainnya adalah pergerakan kromosom saat proses mitosis dan pergerakan
sperma oleh flagela.
2
-
8/18/2019 IDENTIFIKASI PROTEIN DAN LEMAK.docx
3/13
0. Penunjang mekanis etegangan kulit dan tulang disebabkan oleh kolagen yang
merupakan protein fibrosa.
!. Proteksi imun 9ntibodi merupakan protein yang sangat spesifik dan dapat mengenal
serta berkombinasi dengan benda asing seperti irus$ bakteri dan sel dari organisma
lain.
. 8embangkitkan dan menghantarkan impuls saraf :espon sel saraf terhadap rangsang
spesifik diperantarai oleh oleh protein reseptor. 8isalnya rodopsin adalah protein yang
sensitif terhadap 4ahaya ditemukan pada sel batang retina. Contoh lainnya adalah
protein reseptor pada sinapsis.
'. Pengaturan pertumbuhan dan diferensiasi Pada organisme tingkat tinggi$ pertumbuhan
dan diferensiasi diatur oleh protein faktor pertumbuhan. 8isalnya faktor pertumbuhan
saraf mengendalikan pertumbuhan jaringan saraf. #elain itu$ banyak hormon merupakan
protein (#antoso$ /"").Praktikum ini bertujuan untuk mengetahui adanya protein pada suatu sampel
dengan menggunakan uji Hopkins-Cole. Uji Hopkins-Cole digunakan untuk menunjukan
inti indol asam aminotriptofan yang ditandai dengan terbentuknya 4in4in ber*arna ungu
pada sampel per4obaan. ;adi reaksi Hopkins-Cole merupakan 4ara untuk menguji
keberadaan 9sam amino tryptofan pada bahan makanan. Pereaksi Hopkins
Cole mengandung asam glioksilat (Hg#0). Prinsip uji Hopkins-Cole adalah kondensasi
inti indol dengan aldehid dimana jika terdapat asam kuat yang menyebabkan terbentuknya
4in4in ungu pada bidang batas. :eaksi tersebut hanya akan berhasil jika ada oksidator kuat$
seperti senya*a H/#0 yang digunakan pada per4obaan ini. 2ungsi penambahan asam
sulfat ini adalah sebagai oksidator agar terbentuk 4in4in ungu pada larutan sampel
(Poedjiadi /""').
-
8/18/2019 IDENTIFIKASI PROTEIN DAN LEMAK.docx
4/13
7riptofan dapat berkondensasi dengan beberapa aldehida dengan bantuan asam
kuat dan membentuk senya*a yang ber*arna. %arutan protein yang mengandung triptofan
dapat direaksikan dengan pereaksi Hopkins = Cole hingga membentuk lapisan di ba*ah
larutan protein. Beberapa saat kemudian akan terjadi 4in4in ungu pada batas antara kedua
lapisan tersebut Beberapa makanan sumber protein ialah daging$ telur$ susu$ ikan$ beras$
ka4ang$ kedelai$ gandum$ jagung$ dan buah = buahan. Beberapa makanan yang
mengandung protein serta kadar proteinnya dapat dilihat pada tabel (9nna poedjiadi$
1&&0).
1.3 Alat Dan Bahan
1.3.1 Alat
1. 7abung reaksi/. Pipet tetes
,. :ak tabung
1.3.2 Bahan
1
.
%arutan Hopkins-Cole
/ %arutan H/#0
,
.
Putih 7elur(9lbmuin)
0
.
-
8/18/2019 IDENTIFIKASI PROTEIN DAN LEMAK.docx
5/13
5 mL H2SO4
Larutan sampel 2 mL
2 mL larutan Hopkins-Cole
1.4 Ranan!an "ero#aan
1.4.1 $a%#ar Ran!&aian
1.4.2 'an!&ah Pero#aan
1. 8enyiapkan alat dan bahan yang diperlukan selama praktikum$
/. memasukkan larutan sampel kedalam tabung reaksi$,. menteteskan / m% reagen Hopkins-4ole kedalam larutan sampel$0. menambahkan ! m% larutan H/#0 melalui dinding tabung.$ dan
!. mengo4ok larutan tersebut hingga terjadi / lapisan$
. mengamati perubahan *arna dan adanya endapan yang terjadi kemudian
men4atat pada tabel pengamatan.
5
a.
-
8/18/2019 IDENTIFIKASI PROTEIN DAN LEMAK.docx
6/13
1.( )asil Pen!a%atan
3ari praktikum yang telah dilakukan diperoleh data hasil pengamatan sebagai berikut.
No Bahan
Pen!a%atan Rea&si
*+,-Se#elu% Pena%#ahan
Rea!en )o"&ins-/ole
Dan 'arutan )2SO4
Sesu0ah Pena%#ahan
Rea!en )o"&ins-/ole
Dan 'arutan )2SO4
1. Analisis )asil
#emua sampel yang diuji menghasilkan reaksi positif ke4uali gelatin. :eaksi
positif ditandai dengan terbentuknya 4in4in ber*arna ungu pada perbatasan dua fase
4airan. 4in4in ungu yang terbentuk pada pertemuan kedua fase 4airan merupakan hasil
kondensasi tryptophan dengan gugus aldehida yang berasal dari asam glioksilat (pada
reagen Hopkins=Cole) dimana struktur dari asam glioksilat adalah HC= CH.
#edangkan fungsi penambahan asam sulfat adalah mengkondisikan reaksi agar
berjalan pada suasana asam. :eaksi negatif yang terjadi pada sampel gelatin
menunjukkan bah*a pada gelatin tidak terdapat inti indol asam amino triptofan
sehingga tidak bisa mengalami kondensasi dengan aldehida yang berasal dari asam
glioksilat sehingga 4in4in ungu pun tidak terbentuk. >nti indol asam amino triptofan
terkandung pada sampel albumin$ kasein$ pepton dan fenol dengan terbentuknya
4in4in ber*arna iolet.
6
-
8/18/2019 IDENTIFIKASI PROTEIN DAN LEMAK.docx
7/13
1. Bahan Dis&usi
1. Bagaimana mengidentifikasi adanya 9sam amino tryptofan pada sampel dengan
menggunakan uji Hopkins=Cole?
2. Bagaimana reaksi yang terjadi antara sampel dengan reagen pada uji Hopkins=Cole?
Datar Pusta&a
7
-
8/18/2019 IDENTIFIKASI PROTEIN DAN LEMAK.docx
8/13
%ehninger. 1&/. Dasar-Dasar Biokimia Jilid I . 8aggy 7hena*idjaja$
penerjemah. ;akarta (>3)5 @rlangga. 7erjemahan dari5 Principles of
Biochemistry.
Poedjiadi. 9na. /""'. Dasar-dasar Biokimia. ;akarta (>3)5 U> Press
Poedjadi$ 9na dan 7itin #upriyanti. 1&&0. Dasar-dasar Biokimia. ;akarta5
Uniersitas >ndonesia
#udarmaji$ #$ dkk. 1&&. 9nalisa Bahan Makanan dan Pertanian. Penerbit
%iberty5 Aogyakarta.
#antoso$ 9n*ar. /"". Rumus Lengkap Kimia. ;akarta 5 P7. ahyu 8edia.
8
-
8/18/2019 IDENTIFIKASI PROTEIN DAN LEMAK.docx
9/13
IDENTIFIKASI 'EAK
1.2 Tujuan
/. Untuk menganalisis sifat dan struktur lemak melalui beberapa uji kualitatif (uji
akrolein)
1.3 Dasar Teori
%ipida adalah senya*a organik berminyak atau berlemak yang tidak larut dalam
air$ dapat diekstrak dari sel dan jaringan oleh pelarut nonpolar$ seperti kloroform dan eter.
9sam lemak adalah komponenunit pembangun pada hampir semua lipida. 9sam lemak
adalah asam organik berantai panjang yang mempunyai atom karbon dari 0 sampai /0.9sam lemak memiliki gugus karboksil tunggal dan ekor hidrokarbon nonpolar yang
panjang. Hal ini membuat kebanyakan lipida bersifat tidak larut dalam air dan tampak
berminyak atau berlemak (%ehninger 1&/).
%ipid dapat diklasifikasikan menjadi lipid sederhana$ lipid majemuk$ dan deriat
lipid (turunan lipid). %ipid sederhana hanya tersusun atas unsur-unsur C$ H$ dan $
misalnya golongan lemak dan golongan malam (a!). %emak ataupun lilin (malam)
merupakan suatu ester. %ipid majemuk merupakan ester asam lemak dengan alkohol yangmengandung gugus lain seperti fosfolipid$ glikolipid$ dan lipoprotein. 3eriat lipid
merupakan turunan dari lipid sederhana dan lipid majemuk yang dihasilkan dari proses
hidrolisis lipid misalnya kolesterol dan asam lemak (Campbell /""/).
9nalisis kualitatif lemak dapat dianalisis dengan menggunakan pereaksi-pereaksi
kimia tertentu ataupun dengan metode uji tertentu. #alah satu 4ontoh dengan
menggunakan uji akrolein. 3alam uji ini terj9di dehidrasi gliserol dalam bentuk bebas
atau dalam lemakminyak menghasilkan aldehidakrilat atau akrolein. 8enurut #4y 7e4h
@n4y4lopedia (/"")$ uji akrolein digunakan untuk menguji keberadaan gliserin atau
lemak. etika lemak dipanaskan setelah ditambahkan agen pendehidrasi (H#0) yang
akan menarik air$ maka bagian gliserol akan terdehidrasi ke dalam bentuk aldehid tidak
-
8/18/2019 IDENTIFIKASI PROTEIN DAN LEMAK.docx
10/13
jenuh atau dikenal sebagai akrolein (CH/DCHCH) yang memiliki bau seperti lemak
terbakar dan ditandai dengan asap putih. Berikut reaksi yang terjadi pada uji akrolein5
2.3 Alat Dan Bahan2.3.1 Alat
1.3.2 Bahan
1
.
%arutan H#0
/ 8inyak elapa
,
.
%emak He*an
0
.
-
8/18/2019 IDENTIFIKASI PROTEIN DAN LEMAK.docx
11/13
3ari praktikum yang telah dilakukan diperoleh data hasil pengamatan sebagai
berikut.
N
o
Bahan Pen!a%atan *Rea&si +,- Keteran!an
1. 8inyak elapa
/. %emak He*an
,.
-
8/18/2019 IDENTIFIKASI PROTEIN DAN LEMAK.docx
12/13
1. #ebutkan dan jelaskan hal-hal yang perlu diperhatikan dalam analisis lemak terkait
dengan sifat fisik dan kimianya F
/. #etiap analisis spesifik untuk bahan-bahan tertentu. Berdasarkan metode analisis lemak
yang telah anda lakukan$ 4oba jelaskan Bagaimana reaksi yang terjadi antara sampel
dengan reagen pada uji akrolein?
Datar Pusta&a
!2
-
8/18/2019 IDENTIFIKASI PROTEIN DAN LEMAK.docx
13/13
%ehninger. 1&/. Dasar-Dasar Biokimia Jilid I . 8aggy 7hena*idjaja$ penerjemah. ;akarta
(>3)5 @rlangga. 7erjemahan dari5 Principles of Biochemistry.
Campbell +9. /""/. Biologi "disi Kelima Jilid #. :ahayu %estari$ penerjemah. ;akarta 5
@rlangga.
Bintang 8. /"1". Biokimia $eknik Penenlitian. ;akarta5 Penerbit @rlangga.
!3