hongos en pinuss hartweggi y pinus mosntezumae
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“HONGOS PRESENTES EN AISLAMIENTOS DE PLANTAS DE Pinus hartwegii (pino de las alturas) Y Pinus montezumae (pino real)”
“HONGOS PRESENTES EN AISLAMIENTOS DE PLANTAS DE
Pinus hartwegii (pino de las alturas) Y Pinus montezumae (pino
real)”
OBJETIVO GENERAL.
Clasificar a nivel especie los principales hongos presentes en plantas y semillas de P.
montezumae y p. hartwegii.
OBJETIVOS ESPECIFICOS.
Utilización de diferentes medios de cultivo para la identificación de los principales
hongos fitopatogenos asociados en especies de Pinus hartwegii y P.
montezumae.
Identificar de acuerdo a las claves taxonómicas los principales géneros de hongos
fitopatogenos y realizar su clasificación a nivel especie.
Establecer recomendaciones de prevención para los hongos fitopatogenos.
INTRODUCCION.
Los hongos juegan un papel muy importante en la naturaleza como degradadores de la
materia orgánica, pero por otra parte son causantes de enfermedades dentro de los
cultivos los cuales son invadidos por diversos hongos de efecto patógeno y otros tantos
asociados dependiendo las condiciones de la planta.
Los hongos se dividen en dos grupos “hongos de campo “y “hongos de almacén” la
diferencia entre los dos grupos son las de aireación, temperatura, cultura de sanidad y
limpieza entre otras muchas condiciones más.
Dentro de la gran tarea de producir y mantener plántula con los mejores estándares de
calidad se toma en cuenta principalmente, la importancia del conocimiento y estudio de
los hongos asociados a la plantación de P. hartwegii y P. montezumae
En la actualidad los efectos, secuelas y consecuencias de estos patógenos ocasionan
pérdidas económicas y a la diversidad de la especie.
Con el siguiente trabajo se pretende dar recomendaciones de prevención y control para
géneros de hongos dentro del vivero San Luis para esto se tomaran antecedentes en
cepas de Fusarium, Alternaría, Aspergillius, Penicillium, Epicoccus,
Mucor, Rhizopus, Carbón O Roya que fueron aisladas en años anteriores por los
administradores de laboratorio de microbiología del vivero san Luis Tlaxialtemalco para
poder realizar la identificación de las mismas
3.-ANTECEDENTES.
5.-ENFERMEDADES EN VIVEROS FORESTALES.
En México aproximadamente existen 400 vivero forestales, se encuentran en todos los
ambientes desérticos, tropicales, húmedos y templados producen más de 300 millones
de árboles cada año y utilizan más de 100 especies de árboles la mayoría de los viveros
tiene un ciclo de producción anual pero algunos producen planta de dos a mas años de
edad en los viveros, los problemas por enfermedad son de gran importancia y con
frecuencia las perdidas rebasan el 50 % de la producción (Aragón ,2007)
HONGOS ASOCIADOS A PLÁNTULAS Y SEMILLAS FORESTALES.
La semilla que se cosecha de los arboles, tiene en su testa numerosos microorganismos
saprofitos y parásitos facultativos que llegan transportados por el viento, el agua de la
lluvia para depositarse en la superficie externa de la semilla. El arribo de estos hongos se
inicia a partir de la apertura de frutos o conos de coníferas en patio de secado al aire libre
o durante el almacenamiento. Cuando existen condiciones de humedad, temperatura,
estos microorganismos se desarrollan afectando los tejidos muertos de la testa y algunos
logran penetrar el embrión y matar al endospermo y los cotiledones antes de la
germinación de la plántula; otros alcanzan la plántula cundo esta ya germino y provocan
su muerte (Aragón ,2007)
Los géneros de hongos más comunes que se presentan; Rhizopus, Aspergillius,
Penicillium sin embargo el numero de hongos que puede estar sobre las semillas es
grande y rebasar más de 30 especies (Aragón ,2007)
CARACTERÍSTICAS DE LOS HONGOS (Urbina ,2011)
La reproducción puede ser asexual o sexual, principalmente por esporas.
La mayor parte de los hongos son saprofitos; algunos se consideran parásitos;
otros mutualistas (que se asocian con otros seres en beneficio mutuo, como ocurre
con los líquenes Eucariontes (con pared celular) Sin tejido vascular
Se reproducen principalmente por medio de esporas, que son diseminadas por el
viento y pueden ser sexuadas o asexuadas.
No tienen movimiento Pueden ser uní o multicelulares
La pared celular está formada de quitina; en las plantas es celulosa.
Son heterotróficos, se alimentan de materia orgánica.
Los organismos autotróficos, producen sus alimentos por medio de la fotosíntesis.
Los hongos primero digieren y después ingieren Para lograr lo anterior producen
toxinas
La mayoría de los hongos, almacenan alimentos como glicógeno.
La mayoría de los hongos tienen un núcleo pequeño con poco DNA.
Son saprofitos Se les considera parásitos y mutualistas
Se alimentan de materia orgánica en descomposición.
La falta de clorofila afecta profundamente su forma de vida: no necesitan de la luz
crecen en cualquier dirección; invaden el sustrato con filamentos absorbentes.
Como parásitos, usan la materia orgánica de organismos vivos, causando algún
daño a plantas.
En simbiosis, pueden beneficiar a otros organismos, como las micorrizas en las
raíces de las plantas y los líquenes: asociación de un hongo y un alga.
Son organismos muy útiles por su versatilidad genética y fisiológica.
Producen enormes cantidades de esporas que permanecen viables hasta que las
condiciones climatológicas favorecen su multiplicación.
Pueden causar daños a los humanos por las toxinas que producen.
Descomponen toda clase de productos manufacturados, exceptuando los plásticos
y algunos plaguicidas. Algunos como las levaduras, son muy útiles al ser humano.
Los hay que producen antibióticos, hormonas y esteroides.
Son muy importantes en la investigación, debido a que se reproducen rápida y
fácilmente, ocupan poco espacio, se multiplican rápidamente y su ciclo de vida es
corto.
Características moleculares (recién descubiertas), indican que los hongos están
más relacionados con los animales que con las plantas.(Urbina ,2011)
GENERALIDADES DE LOS HONGOS
Alternaría nessPrioritaria de ambientes tropicales (Chiapas, Estado de México, Jalisco, Michoacán,
Nayarit (Aragón ,2007)
Diagnosis
Enfermedad ocasional en el vivero consecuencia de factores de estrés, puede causar un
80% de mortalidad según la especie (Aragón ,2007)
El daño se presenta con más frecuencia en plántulas de 1 mes de edad, presentando
principalmente clorosis proseguida por una necrosis (Aragón ,2007)
En plantas de 3 meses de edad causa defoliación parcial en las hojas cercanas al suelo
(Aragón ,2007)
En arboles adultos es de poca importancia, solo causa cambio de color en la planta
(Aragón ,2007)
Ciclo Biológico
Las esporas pueden llegar a la planta por diferentes medios ya que pueden ser
dispersadas por el viento, germina en las hojas o acículas cuando los tallos se mojan,
producen tubos germinativos que penetran por los estomas directamente en la epidermis
(Aragón ,2007)
Recomendaciones.
Evitar resecamientos por altas temperaturas.
Evitar anegamientos por riego excesivo.
Evitar daños por agroquímicos (Aragón ,2007)
Cuando ya dentro del vivero la enfermedad esta avanzada se recomiendo remover y
retirar el material dañado para evitar que el contagio continúe (Aragón ,2007)
Mucor
Los mucorales se caracterizan por producir un micelio profuso, bien desarrollado, los
mucorales se reproducen sexualmente por zigosporas y la asexual es por
esporangiosporas y algunas veces por medio de conidios (Aragón ,2007)
Rhizopus
Rhizopus (Mucorales, Mucoraceae)
Amplia distribución mundial, en ambientes templados a tropicales, muchas de sus
especies son saprofitas o algunas parasitas se presenta con mayor facilidad en almacén
se encuentra a temperatura ambiente y en condiciones de humedad causa infecciones
severas (Aragón ,2007)
Diagnosis
Estructuras asexuales y sexuales, las asexuales son más comunes se reconocen por el
micelio mas arqueado (Aragón ,2007)
La estructura sexual se forma cuando las hifas de diferente origen y compatibles se unen
por proyecciones miceliares de ambas (Aragón ,2007)
La semilla afectada por este hongo muestra delgadas capas de micelio algodonoso de
color blanco.la testa de la semilla es consumida cuando el micelio entra en contacto con
los cotiledones y causa pudrición de ellos (Aragón ,2007)
Las especies más comunes de rhizopus son:
R. stolonifer, R.tritici, R. nodosus, R.reflexus, R.maydis Y R. artocarpi
(Aragón ,2007)
Ciclo Biológico
Sobrevive como esporangio en residuos de materia orgánica, se desarrolla un micelio
algodonoso multiramificado, blanquecino, en la madurez liberan esporangiosposras que
inician un ciclo asexual rápido de apenas horas o días (Aragón ,2007)
Las esporas asexuales se dispersan por el viento, el agua o por insectos las zigosporas
pueden permanecer por meses en estado de reposo (Aragón ,2007)
Recomendaciones
Evitar sobré humedad en el almacén o el área de crecimiento de la planta
(Aragón ,2007)
Aspergillius
Las plantas hospedantes pertenecen a grupos de angiospermas y gimnospermas, hongo
saprofito se introducen en la semilla y afectan los cotiledones (Aragón ,2007)
Se distribuye en todo tipo de ambientes desde clima templado hasta tropical
(Aragón ,2007)
Importancia.
Son comunes en materia orgánica, como frutos sobre -maduros o productos alimenticios
viejos, en almacenes de semilla que están a temperatura ambiente y con alta humedad,
reducen la viabilidad de la semilla (Aragón ,2007)
Los aspergillius son un grupo de hongos cosmopolita y sumamente perjudicial para el
hombre, aun como parasito benigno, su ataque se limita a las semillas, frutos maduros y
otros órganos que se aprovechan como alimento (Aragón ,2007)
Diagnosis
Presenta conidióforos largos, con el ápice hinchado, cubierto por una o dos series de
fialides, donde se forman conidios hialinos u oscuros en cadenas, globosos u ovales .Se
observa micelio blanquecino en la semilla dañada (Aragón ,2007)
Ciclo biológico
En ambientes húmedos se requiere de pocos días u horas para el desarrollo del micelio y
se produzcan conidios. El hongo se mantiene mientras la materia orgánica se consuma
por completo, las esporas de este tipo de hongo se dispersa por el viento (Aragón ,2007)
Recomendaciones
manejo cuidadoso del producto durante la cosecha.
evitar heridas que propician la infección los granos han de almacenarse a una
humedad de 13% por que la mayoría de las cepas de aspergillius desarrollan
desde los 13.5% hasta 18.5%. (Romero ,1993)
Penicillium
Género con numerosas especies, saprofitas algunos son capaces de dañar frutos y
semillas almacenadas (Romero ,1993)
Diagnosis
La forma asexual es común conidióforos largos septados, lisos a rugosos, individuales o
en sinemas ramificados cerca de ápice en uno, dos, o más verticilos (Romero ,1993)
Ciclo biológico
Ciclo rápido de pocos días los conidios se producen en grandes cantidades y se
dispersan con el viento, el desarrollo del hongo se presenta a temperaturas de medias a
altas y en humedades mayores al 15% de la humedad relativa (Romero ,1993)
Fusarium
La mayoría de los hospedantes son coníferos y angiospermas, el daño que causa a la
germinación de la semilla de estas puede ser importante, la pudrición de raíz por
Fusarium es una de las enfermedades más comunes en plántulas de coníferas en el
planeta (Romero ,1993)
Diagnosis
Los síntomas son variables las plantas afectadas generalmente son se acículas
esparcidas y cloróticas o solamente acículas retorcidas (Romero ,1993)
Son hongos de ciclo rápido solo necesitan algunas horas o pocos días para su
crecimiento (Romero ,1993)
Control Y Recomendaciones
Mantener un ambiente fresco con una humedad del 13 % y temperaturas entre 3 y
5°C.
Utilizar en pisos y estanterías una solución de hipoclorito de sodio
Una interesante y novedosa opción es utilizar control biológico para la prevención
de infecciones se recomienda cubrir la testa de las semillas con esporas del hongo
Trichoderma, este funciona como inhibidor de la mayoría de los hongos que están
en la superficie de la testa además su efecto permanece en las primeras etapas de
la plántula.
Para aplicación de este hongo se aplican 150 a 300g por cada 100K de semilla la dosis
varia con el tamaño de la semilla lo recomendado es para semilla de tamaño grande o
media no calibre.de Pinus ayacahuite (Romero ,1993)
Manejo
Asegurar la aireación de los arboles en las platabandas y con ello eliminar la
humedad el follaje y que el hongo no pueda desarrollarse.
Recolectar y destruir planta enferma
Esterilizar las charolas
Aplicar un tratamiento preventivo con cloratalonil a la base de los tallos, cuando la
infección está presente se aplica dicloran (revisar indicciones de envase)
(Romero ,1993)
Carbón O Roya
Su principal hospedante es Pinus pinácea, su distribución de esta enfermedad está en
el estado de México el .principal género encontrado en producciones de pino es el género
Cronartium casi siempre presentes en plantas de edad avanzada y especies susceptibles.
Ciclo biológico
Entre los meses de marzo a mayo, es posible observar las picniosporas y los tejidos
hinchados de los brotes (Romero ,1993)
Manejo
En el caso de Pinus pinea son tan severas que se limita el uso de la especie y se
prefiere no utilizarla como el pino de navidad.(Romero ,1993)
Para infecciones menos severas se sugiere el uso de triadimefon.la aspersión se
dirige al follaje. (Romero ,1993)
En los arboles urbanos es preferible no utilizar a las especies susceptibles, en
particular P. radiata Y P. greggii (Romero ,1993)
Pestalotia
Acérvulos negros discado o pulvinados, subepidermicos; conidióforos cortos y simples
conidios oscuros de varias células (la apical y la basal puntiagudas e hialinas).la literatura
menciona varias especies que causan manchas foliares o lesiones cancrosas en frutos de
plantas tropicales (Romero ,1993)
METODOLOGÍA
El ensayo se llevo a cabo en el laboratorio de microbiología dentro de las instalaciones
de la Comisión De Recursos Naturales Del Distrito Federal, Delegación Xochimilco
(COREN )utilizando el material existente en el cepario del laboratorio tomando cepas
aisladas anteriormente desde el 2006 en donde se tubo presencia de los siguientes
géneros Fusarium, Alternaría, Aspergillius, Penicillium, Epicoccus,
Mucor, Rhizopus, Carbón O Roya .las cuales estuvieron presentándose en
especies de P. montezumae Y P. hartwegii.
RE-AISLAMIENTO DE LA CEPA.
Las cepas fueron sembradas en cajas petri con el medio de cultivo (PDA) Papa
Dextrosa Agar; se hicieron 3 repeticiones para purificar la cepa, Las observaciones se
hicieron cada tres días para ver el crecimiento, se realizaron en cultivos monospóricos.
CULTIVOS MONOSPÓRICOS
Los cultivos monospóricos se usan para obtener cultivos desarrollados de
una espora simple, para esto se utilizaron tres métodos
Agua-Tween 2%
Agua –Agar 2%
OBSERVACIÓN MICROSCOPICA.
Preparación en cinta adhesiva
Técnica
1. Colocar sobre un portaobjetos una gota de solución de lacto fenol no demasiado
grande para evitar que la cinta flote y la preparación quede demasiado gruesa.
2. Cortar un trozo de cinta adhesiva transparente de aproximadamente 2cm.
3. Tocar con el lado adhesivo de la cinta la superficie de una colonia de hongo de un
cultivo. En la zona central de una colonia puede haber una excesiva concentración
de esporas.
4. Pegar la cinta adhesiva sobre la gota del portaobjetos. Eliminar el colorante
sobrante con un papel de filtro cintazo con diurex, poniéndolas en porta objetos con
un poco de lacto fenol el cual nos ayudo a ver mejor las estructuras morfológicas
de nuestro hongo.
TÉCNICAS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE LOS HONGOS
Para la identificación de hongos fitopatogenos es necesario la observación de sus
estructuras somáticas y reproductivas. Mediante la técnica ya mencionada.
La observación de las características de las estructuras producidas y el uso de las claves
taxonómicas son necesarios para determinar el género y la especie del hongo patógeno
RESULTADOS
RE-AISLAMIENTO DE LA CEPA
En el proceso de re-aislamiento y purificación de las cepas tomando en cuenta los años y
los medios de almacenamiento fue un poco complicado obtener cepas totalmente
purificadas esto aunado al corto tiempo para realizar la técnica varias veces hasta obtener
nuestro objetivo
En la primer etapa de siembra del ensayo se sembraron 7 géneros de hongos
encontrados anteriormente en P. hartwegii entre ellos Alternaría, Rhizopus.
Aspergillius, Fusarium, Penicillium, Mucor, Pestalotia. Y en
P.montesumae (Alternaría, Aspergillius, Fusarium, Penicillium, Mucor,
Pestalotia, carbón o roya.)
De las 33 muestras solo el 9 de ellas salieron sin presentar contaminación esto en P.
hartwegii
En la tabla (1) y grafica (1) se representa la cantidad de re-aislamientos y el porcentaje
de cada género que se re-aisló.
GENERO MUESTRAS RE-AISLADAS
MUESTRAS LIMPIAS
MUESTRAS CONTAMINADAS
TOTAL GENERAL
Alternaría 3 1 2Rhizopus 3 2 1Aspergillius 6 1 5Fusarium 12 2 10Penicillium 3 1 2Mucor 3 1 2Pestalotia 3 1 2TOTALES 33 9 24 66
Al mismo tiempo las cepas encontradas en P. montezumae fueron re -
aisladas para purificarlas, obteniendo solo algunos aislamientos puros los
cuales se muestran en la siguiente tabla (2) y porcentaje de cada
género grafica (2).
Tabla 1
Tabla 2
Grafica 1
14%
14%
14%14%
14%
14%
14%
MUESTRAS RE-AISLADASAlternaría Carbón o roya Aspergillius FusariumPenicillium Mucor Pestalotia
Para determinar y clasificar cada tipo de hongo se tomaron en cuenta varios parámetros
como:
Morfología básica del hongo.
Tamaño de la colonia a 3 días de crecimiento.
Tamaño del conidio.
Color de la colonia.
El primer aislamiento puro que se obtuvo pertenece al género Fusarium este tipo de
hongo es patógeno en la mayoría de las plantaciones forestales.
En P .hartwegii se presentaron 4 tipos de Fusarium que se describen a
continuación:
Fusarium (rojo) decoloración en acículas P .Hartwegii.
Objetivo 40 X
Spp Fusarium moniliforme gibberella.
Grafica 2
14%
14%
14%14%
14%
14%
14%
MUESTRAS RE-AISLADASAlternaría Carbón o roya Aspergillius FusariumPenicillium Mucor Pestalotia
14%
14%
14%14%
14%
14%
14%
MUESTRAS RE-AISLADASAlternaría Carbón o roya Aspergillius FusariumPenicillium Mucor Pestalotia
GENERO MUESTRAS RE-AISLADAS
MUESTRAS LIMPIAS
MUESTRAS CONTAMINADAS
TOTAL GENERAL
Alternaría 3 2 1Carbón o roya 3 2 1Aspergillius 3 1 2Fusarium 3 1 2Penicillium 3 1 2Mucor 3 2 1Pestalotia 3 2 1TOTALES 21 11 10 42
Macro conidios – ausentes
Micro conidios-abundantes
Clamidosporas-ausentes
Tamaño de la colonia a los 3 días -2-2.5 cm de diámetro.
Para poder clasificar un hongo a nivel especie debemos tener en cuenta las características
morfológicas del género que estamos estudiando en el caso de Fusarium se toma en
cuenta tamaño de conidios, ausencia de macro conidios y Clamidosporas.
Con los datos anteriores determinamos que este Fusarium en acículas de P.
hartwegii corresponde a la especie
Fusarium moniliforme gibberella.
2.- Fusarium hartwegii L.00600 “M”
Objetivo 40 X
Macro conidios – ausentes
Micro conidios-abundantes
Clamidosporas-ausentes
Tamaño de la colonia a los 3 días - 3.5 -4 cm de diámetro
Spp. Fusarium moniliforme. (Booth, 1971).
3.5 – 4
cm
En P. hartwegii se realizaron aislamientos los cuales presentaron Spp. Fusarium
moniliforme, al igual que en el aislamiento de P. montezumae. La descripción
fue basada en claves taxonómicas de Fusarium (Booth, 1971).
Otro género del cual se realizaron aislamientos es Alternaría la cual se presento en
P. hartwegii, así como en P. montezumae lamentablemente por condiciones de
espacio y estado de senescencia del aislamiento original de Alternaría en P.
montezumae el aislamiento fue perdido por contaminación de otro género de hongo.
Aquí se presenta la descripción de alternaría comprendida en P. hartwegii y la especie
en la que se clasifico según su morfología
Alternaría obscura ½ acícula
Conidios.- 64µSeptas.- 5 Cadenas.-largas de varios conidios.
De acuerdo con la descripción y observación morfológica llegue a la conclusión de que la
Alternaría presentada en P. hartwegii pertenece a la especie Alternaría
tenuissima (Neergard, 1945)
Otra de los géneros en estudio es Aspergillius flavus el cual se presento en las dos
especies de Pinus.
Para saber el tipo de especie se toman en cuenta varios parámetros que son de gran
importancia los cuales se mencionan a continuación.
Aspergillius flavus en P. hartwegii
Color de la cepa o colonia –verde azul, verde oscuro
Esterigmas en una o dos series --presentadas en dos series.
Tomando en cuenta la morfología y la utilización de las claves de identificación a nivel
especie del genero Aspergillius flavus (Moreno, 1988), se llego a la conclusión de
que el aislamiento pertenece a la especie Aspergillius flavus link tanto en P.
montezumae como en P. hartwegii
En el siguiente cuadro se representan las principales especies de hondos que se
presentan en las dos especies de Pinus y de que parte de la plántula proviene.
Cuadro 1
Especie forestal Parte de la planta Genero de hongos Especie
P. hartwegiiacículas
fusariumSpp fusarium
moniliforme gibberella
P. hartwegiisemillas
fusariumSpp fusarium
moniliforme gibberella
P. hartwegiiacículas Fusarium
enchinamientoSpp fusarium
moniliforme gibberella
P. hartwegiitallo
Fusarium violetaSpp fusarium
moniliforme gibberellaP. montezumae
acículasfusarium
Spp fusarium moniliforme gibberella
P. hartwegii acículas Alternaría obscura A. tenuissima P. montezumae
Perdida de cepax X
P. hartwegiiacículas
Aspergillius flavusAspergillius flavus
linkP. montezumae
acículasAspergillius flavus
Aspergillius flavus link
CUADRO REPRESENTATIVO DE CEPAS CLASIFICADAS POR ESPECIE.
Los 5 géneros de hongos faltantes Rhizopus, Penicillium, Mucor, Pestalotia,
Carbón o Roya, fueron examinadas solo en su estructura morfológica debido al poco
tiempo que se tuvo para continuar observando las muestras de estos géneros, la
complejidad para poder definir una especie acertadamente es cuestión de un análisis
minucioso de las estructuras y una comparación exhaustiva de las características de
dichas estructuras ,con las claves de identificación para especies de hongos dependiendo
el género ,todo esto no se puede determinar en un tiempo muy corto como el que se
tuvo para realizar el ensayos , tiempo es una variable determinante para no cometer
equivocaciones es por eso que el estudio de las cepas faltantes solo se realizo de manera
general y en la parte de anexos se muestran las imágenes de estructuras principales.
Recomendaciones.
Las recomendaciones que propongo para prevenir los daños por hongos en plántulas
de P. hartwegii y P. montezumae son las siguientes.
Lo esencial seria tomar medidas preventivas, la contaminación más frecuente causa
ante de mayores daños es la presencia Fusarium este género desde la semilla
está afectando se propone:
Hacer mas estudios pero desde la semilla (aislamientos de semilla)
limpieza constante y de manera minuciosa del área en que se llevan a cabo los
tratamientos pre -germinativos para evitar la contaminación por aire o agua, o algún
otro tipo de vector, ya sean moscas o mosquitos.
Preferentemente mantener el área de pre germinado en un control más hermético para
evitar que las moscas o mosquitos depositen las esporas de este hongo o las mismas
Cuadro 1
corrientes de aire provoquen la enfermedad, se podrían utilizar mallas térmicas o malla
sombra para tener el efecto rompe viento.
Las medidas de sanidad y la cultura de prevención dentro del área de semillas es
esencial para no provocar enfermedades y afectar posteriormente la producción de la
plántula que recae en perdidas vegetales y económicas
Con respecto a los hongos de menor presencia y afectación en plántulas debido a
que son saprofitos u oportunistas se recomienda lo siguiente.
Estudiar más sobre el tipo de riego para cada especie, no todas las especies necesitan
la misma cantidad de agua y esto provoca un estrés o saturación hídrica la cual hace
más vulnerable a la plántula a hongos saprofitos dependiendo su especie.
Con respecto a los pallets se recomienda poner un poco mas de espacio entre ellos
para que las personas que pasen en los pasillos de extracción de planta no maltraten o
magullen las hojas de las plántulas.
Los periodos para crecimiento y salida de la planta del vivero deben ser estudiados
con la finalidad de ver el mejor tiempo de salida de cada especie ,tener plantaciones
más tiempo del requerido provoca mayor vulnerabilidad en las plántulas por que las
instalaciones y charolas no son aptas para resistir plantas con mayor edad.
En lo que respecta a sustratos deben tener también condiciones de limpieza rigurosas,
por que aunque sea tierra y materiales minerales no están exentos de contaminación
por agua o por aire.
Estudio Y Prevención De Hongos.
Estos son algunos estudios o investigaciones que proponen hacer las afectaciones de los
hongos patógenos y saprofitos en coníferas.
Porcentaje de infección por hongos en semilla, para verificar y fijar parámetros para
determinar si el lote es puro o no.
Realizar estudios sobre cuales hongos pueden competir con otros para elaborar un
nuevo control biológico, parecido en efecto al Trichoderma.
Las últimas recomendaciones que son una base principal para cualquier
investigación y desarrollo eficaz del control dentro de viveros y semillas son las
siguientes.
Infraestructura de laboratorios, ampliación e implementación de espacios cerrados
para obtener en menor tiempo los aislamientos puros.
Mayor cantidad de material para los ensayos.
Mantenimiento frecuente de las autoclaves y la incubadora.
Implementación de un cepario (cuarto frio para mantenimiento de las cepas )
Reactivos de acuerdo con los estudios a realizar.
Estas recomendaciones las propongo en consideración a circunstancias que retrasaron el
trabajo por realizar, el espacio del laboratorios es muy pequeño y esto aunado a la
infraestructura no adecuada con la que se cuenta provoca falta de tiempo y espacio para
las actividades dentro del lugar.
ANEXOS.
Figura 1 - estructuras de Rhizopus figura 2.-estructuras de Mucor
Figura 3.- estructuras de Pestalotia. Fig. 4.- estructuras de Penicillium
Figura 5.-estructuras de Carbón o Roya.
Figura 6.- material para aislamiento. Figura 7.- caja con medio de cultivo.
CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES
DIA SEMANA 1 SEMANA 2 SEMANA3 SEMAN 4 SEMANA 1 SEMANA2 SEMAN 3 SEMANA 4 SEMANA 1
FECHA18/06/2012 22/06/2012
25/06/201229/06/2012
02/07/2012 06/07/2012
09/07/201213/07/2012
16/07/201220/07/2012
23/07/201227/07/2012
30/07/201203/08/2012
06/08/201210/08/2012
13/08/201217/08/2012
LUNES Laboratorio (M) Semillas
listado de los principales hongos en PinusMontezumae y PinusHartwegii.
Selección de las cepas existentes dentro del cepario del laboratorio de microbiología se procedió a su siembra en (PDA)
Observación y separación de cepasBuenas de cepas no viables
Permiso para salir
Revisión de literatura e investigación Observación de muestras
Revisión de literaturaObservación y medición de estructuras
revisión de literatura
MARTES Laboratorio (M) Semillas
identificar cual es el medio de cultivo idóneo para la reproducción delas esporas y conidios de los diferentes hongos. observación
Se observo el crecimiento de la cepa pero no presentaba así que saque unas muestras para observar los hongos en unas semillas, y se encontraron ácaros.
Sacar muestras de las cepas limpias.Resiembra de cepas que no salieron o se contaminaron
Permiso para salir
Realización de mas muestras de hongos faltantes ,realización de cámaras húmedas para crecimiento de hongos en tejidos dañados (aguacate)
Calibración del microscopio Observación microscópica
Revisión de
literatura
MIERCOLES Laboratorio (M) Parcela Investigación
Observar el crecimiento Separar factibles y nulas Y volver a ver cuales se tendrán que re aislar
Siembra de las cepas de alternaría en preparaciónAgua –agar Agua -tween
Revisar las siembras en agua –agarAgua -tween
Observar las estructuras y tomar fotografías de las cepas que salieron.
Observación microscópicaPreparación de medio de cultivo con Czapek
Editar y terminación de trabajo
JUEVES Laboratorio (N) Parcela Investigación
Preparación de materialCepas factibles 5 repeticiones y cepas no viables 3 repeticiones c/u
Observación de las principales estructuras de alternaría al microscopio
Preparación de muestras de chile poblano en deterioro por hongos y su observación
Realizar literatura e investigación Observación de muestras.
Poner a licuar el medio de Czapek y vaciar la mezcla en cajas petri
VIERNES Laboratorio (N) Permiso por doc.
tomar acuerdos para organizar la siembra de los hongos en medio de cultivo
Siembra de las muestras 93 cepas en total Permiso para salir
Hacer tapones para tubos con medio de cultivo y tomar fotos de las estructuras de las cepas pendientes
Siembra de tejidos P. hartwegiiPreparación de cámaras húmedas con teocote
Observación microscópicaSiembra de aspergillius y penicillium en el medio de Czapek
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