hongos en pinuss hartweggi y pinus mosntezumae

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. “HONGOS PRESENTES EN AISLAMIENTOS DE PLANTAS DE Pinus hartwegii (pino de las alturas) Y Pinus montezumae (pino real)”

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Page 1: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

.

“HONGOS PRESENTES EN AISLAMIENTOS DE PLANTAS DE Pinus hartwegii (pino de las alturas) Y Pinus montezumae (pino real)”

Page 2: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

“HONGOS PRESENTES EN AISLAMIENTOS DE PLANTAS DE

Pinus hartwegii (pino de las alturas) Y Pinus montezumae (pino

real)”

OBJETIVO GENERAL.

Clasificar a nivel especie los principales hongos presentes en plantas y semillas de P.

montezumae y p. hartwegii.

OBJETIVOS ESPECIFICOS.

Utilización de diferentes medios de cultivo para la identificación de los principales

hongos fitopatogenos asociados en especies de Pinus hartwegii y P.

montezumae.

Identificar de acuerdo a las claves taxonómicas los principales géneros de hongos

fitopatogenos y realizar su clasificación a nivel especie.

Establecer recomendaciones de prevención para los hongos fitopatogenos.

Page 3: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

INTRODUCCION.

Los hongos juegan un papel muy importante en la naturaleza como degradadores de la

materia orgánica, pero por otra parte son causantes de enfermedades dentro de los

cultivos los cuales son invadidos por diversos hongos de efecto patógeno y otros tantos

asociados dependiendo las condiciones de la planta.

Los hongos se dividen en dos grupos “hongos de campo “y “hongos de almacén” la

diferencia entre los dos grupos son las de aireación, temperatura, cultura de sanidad y

limpieza entre otras muchas condiciones más.

Dentro de la gran tarea de producir y mantener plántula con los mejores estándares de

calidad se toma en cuenta principalmente, la importancia del conocimiento y estudio de

los hongos asociados a la plantación de P. hartwegii y P. montezumae

En la actualidad los efectos, secuelas y consecuencias de estos patógenos ocasionan

pérdidas económicas y a la diversidad de la especie.

Con el siguiente trabajo se pretende dar recomendaciones de prevención y control para

géneros de hongos dentro del vivero San Luis para esto se tomaran antecedentes en

cepas de Fusarium, Alternaría, Aspergillius, Penicillium, Epicoccus,

Mucor, Rhizopus, Carbón O Roya que fueron aisladas en años anteriores por los

administradores de laboratorio de microbiología del vivero san Luis Tlaxialtemalco para

poder realizar la identificación de las mismas

Page 4: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

3.-ANTECEDENTES.

5.-ENFERMEDADES EN VIVEROS FORESTALES.

En México aproximadamente existen 400 vivero forestales, se encuentran en todos los

ambientes desérticos, tropicales, húmedos y templados producen más de 300 millones

de árboles cada año y utilizan más de 100 especies de árboles la mayoría de los viveros

tiene un ciclo de producción anual pero algunos producen planta de dos a mas años de

edad en los viveros, los problemas por enfermedad son de gran importancia y con

frecuencia las perdidas rebasan el 50 % de la producción (Aragón ,2007)

HONGOS ASOCIADOS A PLÁNTULAS Y SEMILLAS FORESTALES.

La semilla que se cosecha de los arboles, tiene en su testa numerosos microorganismos

saprofitos y parásitos facultativos que llegan transportados por el viento, el agua de la

lluvia para depositarse en la superficie externa de la semilla. El arribo de estos hongos se

inicia a partir de la apertura de frutos o conos de coníferas en patio de secado al aire libre

o durante el almacenamiento. Cuando existen condiciones de humedad, temperatura,

estos microorganismos se desarrollan afectando los tejidos muertos de la testa y algunos

logran penetrar el embrión y matar al endospermo y los cotiledones antes de la

germinación de la plántula; otros alcanzan la plántula cundo esta ya germino y provocan

su muerte (Aragón ,2007)

Los géneros de hongos más comunes que se presentan; Rhizopus, Aspergillius,

Penicillium sin embargo el numero de hongos que puede estar sobre las semillas es

grande y rebasar más de 30 especies (Aragón ,2007)

CARACTERÍSTICAS DE LOS HONGOS (Urbina ,2011)

La reproducción puede ser asexual o sexual, principalmente por esporas.

La mayor parte de los hongos son saprofitos; algunos se consideran parásitos;

otros mutualistas (que se asocian con otros seres en beneficio mutuo, como ocurre

con los líquenes Eucariontes (con pared celular) Sin tejido vascular

Page 5: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

Se reproducen principalmente por medio de esporas, que son diseminadas por el

viento y pueden ser sexuadas o asexuadas.

No tienen movimiento Pueden ser uní o multicelulares

La pared celular está formada de quitina; en las plantas es celulosa.

Son heterotróficos, se alimentan de materia orgánica.

Los organismos autotróficos, producen sus alimentos por medio de la fotosíntesis.

Los hongos primero digieren y después ingieren Para lograr lo anterior producen

toxinas

La mayoría de los hongos, almacenan alimentos como glicógeno.

La mayoría de los hongos tienen un núcleo pequeño con poco DNA.

Son saprofitos Se les considera parásitos y mutualistas

Se alimentan de materia orgánica en descomposición.

La falta de clorofila afecta profundamente su forma de vida: no necesitan de la luz

crecen en cualquier dirección; invaden el sustrato con filamentos absorbentes.

Como parásitos, usan la materia orgánica de organismos vivos, causando algún

daño a plantas.

En simbiosis, pueden beneficiar a otros organismos, como las micorrizas en las

raíces de las plantas y los líquenes: asociación de un hongo y un alga.

Son organismos muy útiles por su versatilidad genética y fisiológica.

Producen enormes cantidades de esporas que permanecen viables hasta que las

condiciones climatológicas favorecen su multiplicación.

Pueden causar daños a los humanos por las toxinas que producen.

Descomponen toda clase de productos manufacturados, exceptuando los plásticos

y algunos plaguicidas. Algunos como las levaduras, son muy útiles al ser humano.

Los hay que producen antibióticos, hormonas y esteroides.

Son muy importantes en la investigación, debido a que se reproducen rápida y

fácilmente, ocupan poco espacio, se multiplican rápidamente y su ciclo de vida es

corto.

Características moleculares (recién descubiertas), indican que los hongos están

más relacionados con los animales que con las plantas.(Urbina ,2011)

GENERALIDADES DE LOS HONGOS

Page 6: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

Alternaría nessPrioritaria de ambientes tropicales (Chiapas, Estado de México, Jalisco, Michoacán,

Nayarit (Aragón ,2007)

Diagnosis

Enfermedad ocasional en el vivero consecuencia de factores de estrés, puede causar un

80% de mortalidad según la especie (Aragón ,2007)

El daño se presenta con más frecuencia en plántulas de 1 mes de edad, presentando

principalmente clorosis proseguida por una necrosis (Aragón ,2007)

En plantas de 3 meses de edad causa defoliación parcial en las hojas cercanas al suelo

(Aragón ,2007)

En arboles adultos es de poca importancia, solo causa cambio de color en la planta

(Aragón ,2007)

Ciclo Biológico

Las esporas pueden llegar a la planta por diferentes medios ya que pueden ser

dispersadas por el viento, germina en las hojas o acículas cuando los tallos se mojan,

producen tubos germinativos que penetran por los estomas directamente en la epidermis

(Aragón ,2007)

Recomendaciones.

Evitar resecamientos por altas temperaturas.

Evitar anegamientos por riego excesivo.

Evitar daños por agroquímicos (Aragón ,2007)

Cuando ya dentro del vivero la enfermedad esta avanzada se recomiendo remover y

retirar el material dañado para evitar que el contagio continúe (Aragón ,2007)

Mucor

Page 7: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

Los mucorales se caracterizan por producir un micelio profuso, bien desarrollado, los

mucorales se reproducen sexualmente por zigosporas y la asexual es por

esporangiosporas y algunas veces por medio de conidios (Aragón ,2007)

Rhizopus

Rhizopus (Mucorales, Mucoraceae)

Amplia distribución mundial, en ambientes templados a tropicales, muchas de sus

especies son saprofitas o algunas parasitas se presenta con mayor facilidad en almacén

se encuentra a temperatura ambiente y en condiciones de humedad causa infecciones

severas (Aragón ,2007)

Diagnosis

Estructuras asexuales y sexuales, las asexuales son más comunes se reconocen por el

micelio mas arqueado (Aragón ,2007)

La estructura sexual se forma cuando las hifas de diferente origen y compatibles se unen

por proyecciones miceliares de ambas (Aragón ,2007)

La semilla afectada por este hongo muestra delgadas capas de micelio algodonoso de

color blanco.la testa de la semilla es consumida cuando el micelio entra en contacto con

los cotiledones y causa pudrición de ellos (Aragón ,2007)

Las especies más comunes de rhizopus son:

R. stolonifer, R.tritici, R. nodosus, R.reflexus, R.maydis Y R. artocarpi

(Aragón ,2007)

Ciclo Biológico

Sobrevive como esporangio en residuos de materia orgánica, se desarrolla un micelio

algodonoso multiramificado, blanquecino, en la madurez liberan esporangiosposras que

inician un ciclo asexual rápido de apenas horas o días (Aragón ,2007)

Las esporas asexuales se dispersan por el viento, el agua o por insectos las zigosporas

pueden permanecer por meses en estado de reposo (Aragón ,2007)

Page 8: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

Recomendaciones

Evitar sobré humedad en el almacén o el área de crecimiento de la planta

(Aragón ,2007)

Aspergillius

Las plantas hospedantes pertenecen a grupos de angiospermas y gimnospermas, hongo

saprofito se introducen en la semilla y afectan los cotiledones (Aragón ,2007)

Se distribuye en todo tipo de ambientes desde clima templado hasta tropical

(Aragón ,2007)

Importancia.

Son comunes en materia orgánica, como frutos sobre -maduros o productos alimenticios

viejos, en almacenes de semilla que están a temperatura ambiente y con alta humedad,

reducen la viabilidad de la semilla (Aragón ,2007)

Los aspergillius son un grupo de hongos cosmopolita y sumamente perjudicial para el

hombre, aun como parasito benigno, su ataque se limita a las semillas, frutos maduros y

otros órganos que se aprovechan como alimento (Aragón ,2007)

Diagnosis

Presenta conidióforos largos, con el ápice hinchado, cubierto por una o dos series de

fialides, donde se forman conidios hialinos u oscuros en cadenas, globosos u ovales .Se

observa micelio blanquecino en la semilla dañada (Aragón ,2007)

Ciclo biológico

En ambientes húmedos se requiere de pocos días u horas para el desarrollo del micelio y

se produzcan conidios. El hongo se mantiene mientras la materia orgánica se consuma

por completo, las esporas de este tipo de hongo se dispersa por el viento (Aragón ,2007)

Recomendaciones

manejo cuidadoso del producto durante la cosecha.

Page 9: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

evitar heridas que propician la infección los granos han de almacenarse a una

humedad de 13% por que la mayoría de las cepas de aspergillius desarrollan

desde los 13.5% hasta 18.5%. (Romero ,1993)

Penicillium

Género con numerosas especies, saprofitas algunos son capaces de dañar frutos y

semillas almacenadas (Romero ,1993)

Diagnosis

La forma asexual es común conidióforos largos septados, lisos a rugosos, individuales o

en sinemas ramificados cerca de ápice en uno, dos, o más verticilos (Romero ,1993)

Ciclo biológico

Ciclo rápido de pocos días los conidios se producen en grandes cantidades y se

dispersan con el viento, el desarrollo del hongo se presenta a temperaturas de medias a

altas y en humedades mayores al 15% de la humedad relativa (Romero ,1993)

Fusarium

La mayoría de los hospedantes son coníferos y angiospermas, el daño que causa a la

germinación de la semilla de estas puede ser importante, la pudrición de raíz por

Fusarium es una de las enfermedades más comunes en plántulas de coníferas en el

planeta (Romero ,1993)

Diagnosis

Los síntomas son variables las plantas afectadas generalmente son se acículas

esparcidas y cloróticas o solamente acículas retorcidas (Romero ,1993)

Son hongos de ciclo rápido solo necesitan algunas horas o pocos días para su

crecimiento (Romero ,1993)

Control Y Recomendaciones

Page 10: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

Mantener un ambiente fresco con una humedad del 13 % y temperaturas entre 3 y

5°C.

Utilizar en pisos y estanterías una solución de hipoclorito de sodio

Una interesante y novedosa opción es utilizar control biológico para la prevención

de infecciones se recomienda cubrir la testa de las semillas con esporas del hongo

Trichoderma, este funciona como inhibidor de la mayoría de los hongos que están

en la superficie de la testa además su efecto permanece en las primeras etapas de

la plántula.

Para aplicación de este hongo se aplican 150 a 300g por cada 100K de semilla la dosis

varia con el tamaño de la semilla lo recomendado es para semilla de tamaño grande o

media no calibre.de Pinus ayacahuite (Romero ,1993)

Manejo

Asegurar la aireación de los arboles en las platabandas y con ello eliminar la

humedad el follaje y que el hongo no pueda desarrollarse.

Recolectar y destruir planta enferma

Esterilizar las charolas

Aplicar un tratamiento preventivo con cloratalonil a la base de los tallos, cuando la

infección está presente se aplica dicloran (revisar indicciones de envase)

(Romero ,1993)

Carbón O Roya

Su principal hospedante es Pinus pinácea, su distribución de esta enfermedad está en

el estado de México el .principal género encontrado en producciones de pino es el género

Cronartium casi siempre presentes en plantas de edad avanzada y especies susceptibles.

Page 11: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

Ciclo biológico

Entre los meses de marzo a mayo, es posible observar las picniosporas y los tejidos

hinchados de los brotes (Romero ,1993)

Manejo

En el caso de Pinus pinea son tan severas que se limita el uso de la especie y se

prefiere no utilizarla como el pino de navidad.(Romero ,1993)

Para infecciones menos severas se sugiere el uso de triadimefon.la aspersión se

dirige al follaje. (Romero ,1993)

En los arboles urbanos es preferible no utilizar a las especies susceptibles, en

particular P. radiata Y P. greggii (Romero ,1993)

Pestalotia

Acérvulos negros discado o pulvinados, subepidermicos; conidióforos cortos y simples

conidios oscuros de varias células (la apical y la basal puntiagudas e hialinas).la literatura

menciona varias especies que causan manchas foliares o lesiones cancrosas en frutos de

plantas tropicales (Romero ,1993)

METODOLOGÍA

El ensayo se llevo a cabo en el laboratorio de microbiología dentro de las instalaciones

de la Comisión De Recursos Naturales Del Distrito Federal, Delegación Xochimilco

(COREN )utilizando el material existente en el cepario del laboratorio tomando cepas

aisladas anteriormente desde el 2006 en donde se tubo presencia de los siguientes

géneros Fusarium, Alternaría, Aspergillius, Penicillium, Epicoccus,

Mucor, Rhizopus, Carbón O Roya .las cuales estuvieron presentándose en

especies de P. montezumae Y P. hartwegii.

RE-AISLAMIENTO DE LA CEPA.

Page 12: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

Las cepas fueron sembradas en cajas petri con el medio de cultivo (PDA) Papa

Dextrosa Agar; se hicieron 3 repeticiones para purificar la cepa, Las observaciones se

hicieron cada tres días para ver el crecimiento, se realizaron en cultivos monospóricos.

CULTIVOS MONOSPÓRICOS

Los cultivos monospóricos se usan para obtener cultivos desarrollados de

una espora simple, para esto se utilizaron tres métodos

Agua-Tween 2%

Agua –Agar 2%

OBSERVACIÓN MICROSCOPICA.

Preparación en cinta adhesiva

Técnica

1. Colocar sobre un portaobjetos una gota de solución de lacto fenol no demasiado

grande para evitar que la cinta flote y la preparación quede demasiado gruesa.

2. Cortar un trozo de cinta adhesiva transparente de aproximadamente 2cm.

3. Tocar con el lado adhesivo de la cinta la superficie de una colonia de hongo de un

cultivo. En la zona central de una colonia puede haber una excesiva concentración

de esporas.

4. Pegar la cinta adhesiva sobre la gota del portaobjetos. Eliminar el colorante

sobrante con un papel de filtro cintazo con diurex, poniéndolas en porta objetos con

un poco de lacto fenol el cual nos ayudo a ver mejor las estructuras morfológicas

de nuestro hongo.

TÉCNICAS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE LOS HONGOS

Para la identificación de hongos fitopatogenos es necesario la observación de sus

estructuras somáticas y reproductivas. Mediante la técnica ya mencionada.

La observación de las características de las estructuras producidas y el uso de las claves

taxonómicas son necesarios para determinar el género y la especie del hongo patógeno

RESULTADOS

Page 13: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

RE-AISLAMIENTO DE LA CEPA

En el proceso de re-aislamiento y purificación de las cepas tomando en cuenta los años y

los medios de almacenamiento fue un poco complicado obtener cepas totalmente

purificadas esto aunado al corto tiempo para realizar la técnica varias veces hasta obtener

nuestro objetivo

En la primer etapa de siembra del ensayo se sembraron 7 géneros de hongos

encontrados anteriormente en P. hartwegii entre ellos Alternaría, Rhizopus.

Aspergillius, Fusarium, Penicillium, Mucor, Pestalotia. Y en

P.montesumae (Alternaría, Aspergillius, Fusarium, Penicillium, Mucor,

Pestalotia, carbón o roya.)

De las 33 muestras solo el 9 de ellas salieron sin presentar contaminación esto en P.

hartwegii

En la tabla (1) y grafica (1) se representa la cantidad de re-aislamientos y el porcentaje

de cada género que se re-aisló.

GENERO MUESTRAS RE-AISLADAS

MUESTRAS LIMPIAS

MUESTRAS CONTAMINADAS

TOTAL GENERAL

Alternaría 3 1 2Rhizopus 3 2 1Aspergillius 6 1 5Fusarium 12 2 10Penicillium 3 1 2Mucor 3 1 2Pestalotia 3 1 2TOTALES 33 9 24 66

Al mismo tiempo las cepas encontradas en P. montezumae fueron re -

aisladas para purificarlas, obteniendo solo algunos aislamientos puros los

cuales se muestran en la siguiente tabla (2) y porcentaje de cada

género grafica (2).

Tabla 1

Tabla 2

Grafica 1

14%

14%

14%14%

14%

14%

14%

MUESTRAS RE-AISLADASAlternaría Carbón o roya Aspergillius FusariumPenicillium Mucor Pestalotia

Page 14: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

Para determinar y clasificar cada tipo de hongo se tomaron en cuenta varios parámetros

como:

Morfología básica del hongo.

Tamaño de la colonia a 3 días de crecimiento.

Tamaño del conidio.

Color de la colonia.

El primer aislamiento puro que se obtuvo pertenece al género Fusarium este tipo de

hongo es patógeno en la mayoría de las plantaciones forestales.

En P .hartwegii se presentaron 4 tipos de Fusarium que se describen a

continuación:

Fusarium (rojo) decoloración en acículas P .Hartwegii.

Objetivo 40 X

Spp Fusarium moniliforme gibberella.

Grafica 2

14%

14%

14%14%

14%

14%

14%

MUESTRAS RE-AISLADASAlternaría Carbón o roya Aspergillius FusariumPenicillium Mucor Pestalotia

14%

14%

14%14%

14%

14%

14%

MUESTRAS RE-AISLADASAlternaría Carbón o roya Aspergillius FusariumPenicillium Mucor Pestalotia

GENERO MUESTRAS RE-AISLADAS

MUESTRAS LIMPIAS

MUESTRAS CONTAMINADAS

TOTAL GENERAL

Alternaría 3 2 1Carbón o roya 3 2 1Aspergillius 3 1 2Fusarium 3 1 2Penicillium 3 1 2Mucor 3 2 1Pestalotia 3 2 1TOTALES 21 11 10 42

Page 15: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

Macro conidios – ausentes

Micro conidios-abundantes

Clamidosporas-ausentes

Tamaño de la colonia a los 3 días -2-2.5 cm de diámetro.

Para poder clasificar un hongo a nivel especie debemos tener en cuenta las características

morfológicas del género que estamos estudiando en el caso de Fusarium se toma en

cuenta tamaño de conidios, ausencia de macro conidios y Clamidosporas.

Con los datos anteriores determinamos que este Fusarium en acículas de P.

hartwegii corresponde a la especie

Fusarium moniliforme gibberella.

2.- Fusarium hartwegii L.00600 “M”

Objetivo 40 X

Macro conidios – ausentes

Micro conidios-abundantes

Clamidosporas-ausentes

Tamaño de la colonia a los 3 días - 3.5 -4 cm de diámetro

Spp. Fusarium moniliforme. (Booth, 1971).

3.5 – 4

cm

Page 16: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

En P. hartwegii se realizaron aislamientos los cuales presentaron Spp. Fusarium

moniliforme, al igual que en el aislamiento de P. montezumae. La descripción

fue basada en claves taxonómicas de Fusarium (Booth, 1971).

Otro género del cual se realizaron aislamientos es Alternaría la cual se presento en

P. hartwegii, así como en P. montezumae lamentablemente por condiciones de

espacio y estado de senescencia del aislamiento original de Alternaría en P.

montezumae el aislamiento fue perdido por contaminación de otro género de hongo.

Aquí se presenta la descripción de alternaría comprendida en P. hartwegii y la especie

en la que se clasifico según su morfología

Alternaría obscura ½ acícula

Conidios.- 64µSeptas.- 5 Cadenas.-largas de varios conidios.

De acuerdo con la descripción y observación morfológica llegue a la conclusión de que la

Alternaría presentada en P. hartwegii pertenece a la especie Alternaría

tenuissima (Neergard, 1945)

Otra de los géneros en estudio es Aspergillius flavus el cual se presento en las dos

especies de Pinus.

Para saber el tipo de especie se toman en cuenta varios parámetros que son de gran

importancia los cuales se mencionan a continuación.

Aspergillius flavus en P. hartwegii

Page 17: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

Color de la cepa o colonia –verde azul, verde oscuro

Esterigmas en una o dos series --presentadas en dos series.

Tomando en cuenta la morfología y la utilización de las claves de identificación a nivel

especie del genero Aspergillius flavus (Moreno, 1988), se llego a la conclusión de

que el aislamiento pertenece a la especie Aspergillius flavus link tanto en P.

montezumae como en P. hartwegii

En el siguiente cuadro se representan las principales especies de hondos que se

presentan en las dos especies de Pinus y de que parte de la plántula proviene.

Cuadro 1

Especie forestal Parte de la planta Genero de hongos Especie

P. hartwegiiacículas

fusariumSpp fusarium

moniliforme gibberella

P. hartwegiisemillas

fusariumSpp fusarium

moniliforme gibberella

P. hartwegiiacículas Fusarium

enchinamientoSpp fusarium

moniliforme gibberella

P. hartwegiitallo

Fusarium violetaSpp fusarium

moniliforme gibberellaP. montezumae

acículasfusarium

Spp fusarium moniliforme gibberella

P. hartwegii acículas Alternaría obscura A. tenuissima P. montezumae

Perdida de cepax X

P. hartwegiiacículas

Aspergillius flavusAspergillius flavus

linkP. montezumae

acículasAspergillius flavus

Aspergillius flavus link

Page 18: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

CUADRO REPRESENTATIVO DE CEPAS CLASIFICADAS POR ESPECIE.

Los 5 géneros de hongos faltantes Rhizopus, Penicillium, Mucor, Pestalotia,

Carbón o Roya, fueron examinadas solo en su estructura morfológica debido al poco

tiempo que se tuvo para continuar observando las muestras de estos géneros, la

complejidad para poder definir una especie acertadamente es cuestión de un análisis

minucioso de las estructuras y una comparación exhaustiva de las características de

dichas estructuras ,con las claves de identificación para especies de hongos dependiendo

el género ,todo esto no se puede determinar en un tiempo muy corto como el que se

tuvo para realizar el ensayos , tiempo es una variable determinante para no cometer

equivocaciones es por eso que el estudio de las cepas faltantes solo se realizo de manera

general y en la parte de anexos se muestran las imágenes de estructuras principales.

Recomendaciones.

Las recomendaciones que propongo para prevenir los daños por hongos en plántulas

de P. hartwegii y P. montezumae son las siguientes.

Lo esencial seria tomar medidas preventivas, la contaminación más frecuente causa

ante de mayores daños es la presencia Fusarium este género desde la semilla

está afectando se propone:

Hacer mas estudios pero desde la semilla (aislamientos de semilla)

limpieza constante y de manera minuciosa del área en que se llevan a cabo los

tratamientos pre -germinativos para evitar la contaminación por aire o agua, o algún

otro tipo de vector, ya sean moscas o mosquitos.

Preferentemente mantener el área de pre germinado en un control más hermético para

evitar que las moscas o mosquitos depositen las esporas de este hongo o las mismas

Cuadro 1

Page 19: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

corrientes de aire provoquen la enfermedad, se podrían utilizar mallas térmicas o malla

sombra para tener el efecto rompe viento.

Las medidas de sanidad y la cultura de prevención dentro del área de semillas es

esencial para no provocar enfermedades y afectar posteriormente la producción de la

plántula que recae en perdidas vegetales y económicas

Con respecto a los hongos de menor presencia y afectación en plántulas debido a

que son saprofitos u oportunistas se recomienda lo siguiente.

Estudiar más sobre el tipo de riego para cada especie, no todas las especies necesitan

la misma cantidad de agua y esto provoca un estrés o saturación hídrica la cual hace

más vulnerable a la plántula a hongos saprofitos dependiendo su especie.

Con respecto a los pallets se recomienda poner un poco mas de espacio entre ellos

para que las personas que pasen en los pasillos de extracción de planta no maltraten o

magullen las hojas de las plántulas.

Los periodos para crecimiento y salida de la planta del vivero deben ser estudiados

con la finalidad de ver el mejor tiempo de salida de cada especie ,tener plantaciones

más tiempo del requerido provoca mayor vulnerabilidad en las plántulas por que las

instalaciones y charolas no son aptas para resistir plantas con mayor edad.

En lo que respecta a sustratos deben tener también condiciones de limpieza rigurosas,

por que aunque sea tierra y materiales minerales no están exentos de contaminación

por agua o por aire.

Estudio Y Prevención De Hongos.

Estos son algunos estudios o investigaciones que proponen hacer las afectaciones de los

hongos patógenos y saprofitos en coníferas.

Porcentaje de infección por hongos en semilla, para verificar y fijar parámetros para

determinar si el lote es puro o no.

Realizar estudios sobre cuales hongos pueden competir con otros para elaborar un

nuevo control biológico, parecido en efecto al Trichoderma.

Page 20: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

Las últimas recomendaciones que son una base principal para cualquier

investigación y desarrollo eficaz del control dentro de viveros y semillas son las

siguientes.

Infraestructura de laboratorios, ampliación e implementación de espacios cerrados

para obtener en menor tiempo los aislamientos puros.

Mayor cantidad de material para los ensayos.

Mantenimiento frecuente de las autoclaves y la incubadora.

Implementación de un cepario (cuarto frio para mantenimiento de las cepas )

Reactivos de acuerdo con los estudios a realizar.

Estas recomendaciones las propongo en consideración a circunstancias que retrasaron el

trabajo por realizar, el espacio del laboratorios es muy pequeño y esto aunado a la

infraestructura no adecuada con la que se cuenta provoca falta de tiempo y espacio para

las actividades dentro del lugar.

ANEXOS.

Figura 1 - estructuras de Rhizopus figura 2.-estructuras de Mucor

Page 21: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

Figura 3.- estructuras de Pestalotia. Fig. 4.- estructuras de Penicillium

Figura 5.-estructuras de Carbón o Roya.

Figura 6.- material para aislamiento. Figura 7.- caja con medio de cultivo.

Page 22: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

DIA SEMANA 1 SEMANA 2 SEMANA3 SEMAN 4 SEMANA 1 SEMANA2 SEMAN 3 SEMANA 4 SEMANA 1

FECHA18/06/2012 22/06/2012

25/06/201229/06/2012

02/07/2012 06/07/2012

09/07/201213/07/2012

16/07/201220/07/2012

23/07/201227/07/2012

30/07/201203/08/2012

06/08/201210/08/2012

13/08/201217/08/2012

LUNES Laboratorio (M) Semillas

listado de los principales hongos en PinusMontezumae y PinusHartwegii.

Selección de las cepas existentes dentro del cepario del laboratorio de microbiología se procedió a su siembra en (PDA)

Observación y separación de cepasBuenas de cepas no viables

Permiso para salir

Revisión de literatura e investigación Observación de muestras

Revisión de literaturaObservación y medición de estructuras

revisión de literatura

MARTES Laboratorio (M) Semillas

identificar cual es el medio de cultivo idóneo para la reproducción delas esporas y conidios de los diferentes hongos. observación

Se observo el crecimiento de la cepa pero no presentaba así que saque unas muestras para observar los hongos en unas semillas, y se encontraron ácaros.

Sacar muestras de las cepas limpias.Resiembra de cepas que no salieron o se contaminaron

Permiso para salir

Realización de mas muestras de hongos faltantes ,realización de cámaras húmedas para crecimiento de hongos en tejidos dañados (aguacate)

Calibración del microscopio Observación microscópica

Revisión de

literatura

MIERCOLES Laboratorio (M) Parcela Investigación

Observar el crecimiento Separar factibles y nulas Y volver a ver cuales se tendrán que re aislar

Siembra de las cepas de alternaría en preparaciónAgua –agar Agua -tween

Revisar las siembras en agua –agarAgua -tween

Observar las estructuras y tomar fotografías de las cepas que salieron.

Observación microscópicaPreparación de medio de cultivo con Czapek

Editar y terminación de trabajo

JUEVES Laboratorio (N) Parcela Investigación

Preparación de materialCepas factibles 5 repeticiones y cepas no viables 3 repeticiones c/u

Observación de las principales estructuras de alternaría al microscopio

Preparación de muestras de chile poblano en deterioro por hongos y su observación

Realizar literatura e investigación Observación de muestras.

Poner a licuar el medio de Czapek y vaciar la mezcla en cajas petri

VIERNES Laboratorio (N) Permiso por doc.

tomar acuerdos para organizar la siembra de los hongos en medio de cultivo

Siembra de las muestras 93 cepas en total Permiso para salir

Hacer tapones para tubos con medio de cultivo y tomar fotos de las estructuras de las cepas pendientes

Siembra de tejidos P. hartwegiiPreparación de cámaras húmedas con teocote

Observación microscópicaSiembra de aspergillius y penicillium en el medio de Czapek

Page 23: HONGOS EN PINUSS HARTWEGGI  Y PINUS MOSNTEZUMAE

Bibliografía.

Aragón C. L.2007.Enfermedades Forestales En México. Primera Edición.587

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Booth.1971.THE GENUS FUSARIUM .primera edición.233pp

Moreno M.E.1988.manual para la identificación de hongos en granos y sus

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Romero C.S. 1993.Hongos Fitopatogenos. universidad chapingo .primera

edición .341pp.

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