UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK ETANOL 70% BIJI COKLAT (Theobroma

cacao L.) TERHADAP PENINGKATAN KADAR KOLESTEROL HDL

(High Density Lipoprotein) PADA MENCIT (Mus musculus)

SKRIPSI

Untuk memenuhi sebagian persyaratan

Mencapai derajat sarjana Kedokteran

HALAMAN JUDU L

VESTY ANGGRAINI HARYANTI

J500140128

FAKULTAS KEDOKTERAN UMUM

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

2018

ii

iii

iv

MOTTO

“Karena sesungguhnya bersama setiap kesulitan ada kemudahan. Sesungguhnya

bersama setiap kesulitan ada kemudahan.” (Q.S Al-Insyirah: 5-6)

“Wahai orang-orang beriman! Mohonlah pertolongan (kepada Allah) dengan

sabar dan shalat. Sungguh, Allah beserta orang-orang yang sabar.” (Q.S Al-

Baqarah: 153)

“Musuh yang paling berbahaya diatas dunia ini adalah penakut dan bimbang.

Teman yang paling setia hanyalah keberanian dan keyakinan yang teguh”

-Andrew Jackson-

v

KATA PENGANTAR

BISMILLAHIRRAHMANIRRAHIM

Assalamu’alaikum Wr.Wb.

Puji syukur kehadirat Allah SWT, yang telah melimpahkan rahmat dan

hidayah-Nya kepada penulis sehingga dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul

Uji Efektivitas Ekstrak Etanol 70% Biji Coklat (Theobroma Cacao L.) Terhadap

Peningkatan Kadar Kolesterol HDL (High Density Lipoprotein) Pada Mencit (Mus

Musculus).

Skripsi ini disusun guna melengkapi persyaratan untuk mendapat gelar

kesarjanaan pada Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Surakarta.

Pada kesempatan yang bahagia ini, penulis hendak mengucapkan

terimakasih kepada:

1. Prof. DR. dr. EM Sutrisna, M.Kes selaku Dekan Fakultas Kedokteran

Universitas Muhammadiyah Surakarta dan selaku Dosen Pembimbing yang

telah memberikan pengarahan, saran serta dukungan yang berarti kepada

penulis selama penyusunan skripsi.

2. dr. Rochmadina Suci Bestari, M.Sc selaku penguji I, terima kasih atas

bimbingan dan arahan selama proses penyusunan skripsi.

3. dr. Sri Wahyu Basuki, M.Kes selaku penguji II, terima kasih atas bimbingan

dan arahan selama proses penyusunan skripsi.

4. dr. Erika Diana Risanti, M.Sc selaku ketua biro skripsi Fakultas Kedokteran

Universitas Muhammadiyah Surakarta yang telah membantu dalam

perizinan dan bimbingan skripsi.

5. Seluruh dosen pengajar yang telah membekali ilmu kepada penulis. Ilmu ini

sangat bermanfaat bagi penulis.

6. Papa tersayang, Bambang Hartanto A,TD, S.E, M.Si dan Mama tersayang,

Rita Mardianti yang senantiasa memberikan motivasi, pengorbanan, dan

perjuangan yang tiada henti serta doa yang selalu dipanjatkan kepada Allah

sehingga penulis bisa menyelesaikan skripsi ini. Semoga penulis dapat

senantiasa membahagiakan dan menjadi anak yang berbakti. Penulis sangat

vi

bersyukur kepada Allah yang telah memberikan orang tua terbaik yang

penuh dengan kasih sayang dan perhatian.

7. Saudara-saudara penulis Cynthia Hardivianty, S.kep, Ns dan Danny Rizki

Ramadhan yang selalu memberi semangat dan kekuatan bagi penulis.

8. Sahabat-sahabat OTW, Skill Lab, dan SR yang selalu membersamai penulis

dalam menyelesaikan skripsi ini.

9. Rekan-rekan seperjuangan dalam skripsi farmakologi yang senantiasa

memberikan kebaikan untuk membersamai penulis dalam menyelesaikan

skripsi.

10. Rekan-rekan seperjuangan dalam PKM 2016 yang senantiasa memberikan

kebaikan untuk membersamai penulis.

11. Terimakasih kepada rekan-rekan angkatan 2014 Fakultas Kedokteran

Universitas Muhammadiyah Surakarta (Asclepius 14).

12. Terimakasih kepada orang-orang yang menyayangi penulis yang tidak dapat

disebutkan satu-persatu.

13. Seluruh Civitas akademika Fakultas Kedokteran Universitas

Muhammadiyah Surakarta yang telah mendoakan dan membantu dalam

penyusunan skripsi.

Semoga Allah SWT membalas kebaikan dan ketulusan mereka dengan

melimpahkan rahmat dan karunia-Nya. Semoga skripsi ini dapat memberikan

sumbangan bagi kemajuan ilmu pengetahuan, bermanfaat bagi pembaca, serta

bernilai ibadah di hadapan Allah SWT. Aamiin Allahuma Aamiin.

Wassalamu’alaikum Wr. Wb.

Surakarta, 10 Januari 2018

Vesty Anggraini Hryanti

vii

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ................................................................................................ i

HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................. ii

PERNYATAAN ..................................................................................................... iii

MOTTO ................................................................................................................. iv

KATA PENGANTAR ............................................................................................ v

DAFTAR ISI ......................................................................................................... vii

DAFTAR TABEL ................................................................................................... x

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. xi

DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xii

DAFTAR SINGKATAN ..................................................................................... xiii

ABSTRAK ........................................................................................................... xiv

ABSTRACT .......................................................................................................... xv

BAB I ...................................................................................................................... 1

PENDAHULUAN .................................................................................................. 1

A. Latar Belakang Masalah ............................................................................... 1

B. Perumusan Masalah ..................................................................................... 3

C. Tujuan Penelitian ......................................................................................... 3

1. Tujuan Umum ........................................................................................... 3

2. Tujuan Khusus .......................................................................................... 3

D. Manfaat Penelitian ....................................................................................... 3

1. Manfaat Teoritis ....................................................................................... 3

2. Manfaat Praktis ......................................................................................... 3

BAB II ..................................................................................................................... 4

LANDASAN TEORI .............................................................................................. 4

A. Tinjauan Pustaka .......................................................................................... 4

1. Dislipidemia ............................................................................................. 4

2. Lipid ......................................................................................................... 5

3. Simvastatin ............................................................................................. 12

4. Propiltiourasil (PTU) .............................................................................. 13

viii

5. Coklat (Theobroma cacao L.) ................................................................ 13

6. Pengaruh Ekstrak Biji Coklat Terhadap Kadar HDL ............................. 17

7. Hewan Uji ............................................................................................... 17

8. Simplisia dan Ekstrak ............................................................................. 19

B. Kerangka Teori........................................................................................... 21

C. Hipotesis ..................................................................................................... 22

BAB III ................................................................................................................. 23

METODE PENELITIAN ...................................................................................... 23

A. Jenis Penelitian ........................................................................................... 23

B. Tempat dan Waktu Penelitian .................................................................... 23

C. Subjek Penelitian ........................................................................................ 23

D. Hewan Uji .................................................................................................. 23

E. Teknik Sampling ........................................................................................ 23

F. Besar Sampel .............................................................................................. 24

G. Kriteria Restriksi .................................................................................... 24

1. Kriteria Inklusi ....................................................................................... 24

2. Kriteria Eksklusi ..................................................................................... 25

3. Kriteria Dropout ..................................................................................... 25

H. Variabel Penelitian ................................................................................. 25

1. Variabel Bebas ....................................................................................... 25

2. Variabel Terikat ...................................................................................... 25

3. Variabel Luar .......................................................................................... 25

I. Definisi Operasional Variabel Penelitian ................................................... 25

J. Instrumen Penelitian................................................................................... 27

K. Cara Kerja .................................................................................................. 28

L. Alur Penelitian ........................................................................................... 32

M. Analisis Data .............................................................................................. 33

N. Jadwal Kegiatan ......................................................................................... 33

BAB IV ................................................................................................................. 34

HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN .................................................... 34

A. Hasil Penelitian .............................................................................................. 34

ix

1. Determinasi Tanaman ................................................................................ 34

2. Randemen ................................................................................................... 34

3. Hasil Analisis Data ..................................................................................... 35

B. Pembahasan ................................................................................................... 39

BAB V ................................................................................................................... 46

KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................................. 46

A. Kesimpulan .................................................................................................... 46

B. Saran .............................................................................................................. 46

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 47

LAMPIRAN .......................................................................................................... 52

x

DAFTAR TABEL

1. Tabel 1. Jadwal Kegiatan .......................................................................... 32

2. Tabel 2. Berat Badan Rata-rata Mencit Selama Penelitian ...................... 34

3. Tabel 3. Rata-Rata HDL Darah Pre-Treatment dan Post-treatment ........ 35

4. Tabel 4. Hasil uji One-way ANOVA ......................................................... 37

5. Tabel 5. Hasil Analisis Uji Post Hoc Test LSD ........................................ 37

xi

DAFTAR GAMBAR

1. Gambar 1. Rumus Struktur Simvastatin .................................................. 12

2. Gambar 2. Buah Coklat (Theobroma cacao L.) ...................................... 14

3. Gambar 3. Skema kerangka teori ............................................................. 20

4. Gambar 4. Skema alur penelitian ............................................................. 31

5. Gambar 5. Rata-rata Berat Badan Hewan Uji ......................................... 34

6. Gambar 6. Rata-rata dan Standar deviasi Kadar HDL pre-treatment ..... 35

7. Gambar 7. Rata-rata dan Standar deviasi Kadar HDL post-treatment ..... 36

xii

DAFTAR LAMPIRAN

1. Lampiran 1. Data hasil berat badan mencit awal sebelum perlakuan

2. Lampiran 2. Data Hasil Berat Badan Mencit Setelah Induksi

3. Lampiran 3. Data Hasil Pemeriksaan Kolesterol HDL

4. Lampiran 4. Hasil Uji Statistik Kadar HDL Awal, Pre-treatment, dan Post-

treatment

5. Lampiran 5. Hasil Uji Statistik ANOVA

6. Lampiran 6. Hasil Uji Statistik Post Hoc dengan LSD

7. Lampiran 7. Surat Ethical Clearance

8. Lampiran 8. Surat Ijin Tempat Penelitian

9. Lampiran 9. Surat Determinasi Tanaman

10. Lampiran 10. Surat Selesai Melakukan Penelitian

11. Lampiran 11. Surat Keterangan Hasil

12. Lampiran 12. Surat Keterangan Pembelian Mencit (Mus musculus)

13. Lampiran 13. Dokumentasi Kegiatan Penelitian

xiii

DAFTAR SINGKATAN

ABC-1 : Adenosine Triphosphate-Binding Cassette

Transporter-1

ANOVA : Analysis of Variance

CETP : Cholesterol Ester Transfer Protein

EDTA : Asam Etilendiamin Tetraasetat

FFA : Free Fatty Acid

HDL : High Density Lipoprotein

HDL-C : High Density Lipoprotein- Cholesterol

HMG-KoA : Hydroxy Methyglutarayl-CoA

IDL : Intermediet–Density Lipoproteins

LCAT : Lecithin Cholesterol Acyltransferase

LDL : Low Density Lipoprotein

LPL : Lipoprotein Lipase

MDA : Malondialdehyde

NOx : Nitrogen Oksida

PTU : Propiltiourasil

PUFA-OO• : Peroxyl Polyunsaturated Fatty Acid

PUFA-OOH : Hydroperoxy Polyunsaturated Acid

Puslitbang : Pusat Penelitian dan Pengembangan

RCT : Reverse Cholesterol Transport

ROS : Reactive Oxygen Species

SD : Standar Deviasi

SR-A : Scavenger-A Reseptor

SR-B1 : Scavenger receptor class B type 1

TG : Trigliserida

VLDL : Very Low Density Lipoproteins

xiv

ABSTRAK

UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK ETANOL 70% BIJI COKLAT (Theobroma cacao

L.) TERHADAP PENINGKATAN KADAR KOLESTEROL HDL (High Density

Lipoprotein) PADA MENCIT (Mus musculus)

Vesty Anggraini Haryanti1, EM Sutrisna2

Fakultas Kedokteran, Universitas Muhammadiyah Surakarta

Latar Belakang: Biji coklat (Theobroma cacao L.) mengandung senyawa flavonoid.

Flavonoid dapat mencegah oksidasi kolesterol LDL, menghambat aktivasi dan

pengumpulan platelet yang berefek terhadap peningkatan kadar HDL.

Tujuan Penelitian: Mengetahui efek ekstrak etanol 70% biji coklat (Theobroma cacao

L.) terhadap peningkatan kadar kolesterol HDL pada mencit (Mus musculus).

Metode Penelitian: Penelitian bersifat eksperimental laboratorium metode pre and post

test with control group design. Subjek penelitian 25 ekor Mus musculus jantan galur Swiss

Webster berusia 2-3 bulan, berat badan 20-30 gram yang diinduksi pakan

hiperkolesterolemia dan PTU selama 7 hari. Subjek dibagi menjadi 5 kelompok, yaitu:

kelompok kontrol negatif, kelompok kontrol positif (simvastatin 0,0364 mg/20grBB),

kelompok perlakuan 1 (0,196 mg/20grBB), kelompok perlakuan 2 (0,392 mg/20grBB),

kelompok perlakuan 3 (kombinasi ekstrak coklat dosis 0,392 mg/20grBB dengan

simvastatin 0,0182 mg/20grBB). Pengukuran kadar kolesterol HDL dilakukan pada hari

ke-7, hari ke-14, dan hari ke-28. Data dianalisis menggunakan uji paired t test dan one-way

ANOVA dilanjutkan uji post hoc LSD.

Hasil Penelitian: Berdasarkan hasil uji statistik one-way ANOVA, didapatkan nilai

p=0,000 (p<0,05) terdapat perbedaan yang signifikan kadar HDL mencit antar kelompok.

Hasil uji post hoc LSD kontrol negatif dengan perlakuan 1 p=0,015, kontrol negatif dengan

perlakuan 2 p=0,000, kontrol negatif dengan perlakuan 3 p=0,000. Hasil uji post hoc LSD

menunjukkan bahwa seluruh dosis memiliki perbedaan bermakna dibandingkan dengan

kontrol negatif dengan nilai p<0,05.

Kesimpulan: Ekstrak biji coklat (Theobroma cacao L.) dapat meningkatkan kadar HDL

darah mencit (Mus musculus) pada dosis I (0,196 mg/20grBB), II (0,392 mg/20grBB) dan

kombinasi ekstrak biji coklat (Theobroma cacao L.) dosis 0,392 mg/20grBB dengan

simvastatin 0,0182 mg/20grBB.

Kata kunci: Ekstrak Biji Coklat (Theobroma cacao L.), HDL, Flavonoid

xv

ABSTRACT

THE EFFECTIVENESS OF 70% ETHANOLIC EXTRACTS OF COCOA BEAN

(Theobroma cacao L.) ON INCREASING HDL (High Density Lipoprotein)

CHOLESTEROL LEVEL IN MICE (Mus musculus)

Vesty Anggraini Haryanti1, EM Sutrisna2

Faculty of Medicine, Universitas Muhammadiyah Surakarta

Background: Cocoa bean (Theobroma cacao L.) contains flavonoid compounds.

Flavonoids can prevent oxidation of LDL cholesterol, inhibit platelet activation and inhibit

clot forming which lead to HDL level increase.

Objective: To determine the effectiveness of 70% ethanolic extract of cocoa bean

(Theobroma cacao L.) on decreasing HDL cholesterol level in mice (Mus musculus).

Methods: This research is a laboratory experimental with pre and post test control group

design. The subjects were 25 male mice Swiss Webster strain Mus musculus aged 2-3

months, weight 20-30 grams induced with hypercholesterolemic foods and PTU for 7 days.

Subjects were divided into 5 groups: negative control group, positive control group

(simvastatin 0,0364 mg/20grBW), treatment group 1 (0,196mg/20grBW), treatment group

2 (0,392mg/20grBW), treatment group 3 (combination of cocoa bean extract at dose of

0,392mg/20grBW and simvastatin 0,0182mg/20grBW). Measurements of HDL cholesterol

were performed on day 7, day 14, and day 28. Data were analyzed using paired t test and

one-way ANOVA followed by post hoc LSD test.

Results: The result of one-way ANOVA statistic test, we find that p=0,000 (p<0,05) which

shows the significant difference of HDL levels in mice between groups. The results of post

hoc LSD test between negative control with treatment 1 p= 0,015, negative control with

treatment 2 p= 0,000, negative control with treatment 3 p= 0,000. The results of post hoc

LSD test showed p<0,05 which determine significant differences among each group with

the negative control group.

Conclusion: Cocoa bean (Theobroma cacao L.) extract can increase the HDL level of mice

(Mus musculus) with doses I (0,196mg/20grBW), II (0,392mg/20grBW) and combination

of cocoa bean extract (Theobroma cacao L.) at dose of 0,392mg/20grBW with simvastatin

0,0182mg/20grBW.

Keywords: Cocoa bean extract (Theobroma cacao L.), HDL, flavonoid