ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
PENGARUH EKSTRAK DAUN KELOR (Moringa oleifera)
TERHADAP KECEPATAN ANGIOGENESIS PASKA
EKSTRAKSI GIGI TIKUS WISTAR
(Penelitian Eksperimental Laboratoris)
SKRIPSI
Oleh :
ELOK AMANDA KHARISMA PUTRI
NIM : 021311133079
FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI
UNIVERSITAS AIRLANGGA
SURABAYA
2016
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
i
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
PENGARUH EKSTRAK DAUN KELOR (Moringa oleifera)
TERHADAP KECEPATAN ANGIOGENESIS PASKA
EKSTRAKSI GIGI TIKUS WISTAR
(Penelitian Eksperimental Laboratoris)
SKRIPSI
Oleh :
ELOK AMANDA KHARISMA PUTRI
NIM : 021311133079
FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI
UNIVERSITAS AIRLANGGA
SURABAYA
2016
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
iii
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
PENETAPAN PANITIA PENGUJI SKRIPSI Skripsi ini telah diuji tanggal 29 November 2016
PANITIA PENGUJI SKRIPSI:
1. Roberto Manahan Y. S., drg., MS., Sp.BMM(K) (Ketua penguji)
2. Dr. David B. Kamadjaja, drg.,MDS.,Sp.BMM(K) (Sekretaris penguji)
3. Prof. Dr. Peter Agus, drg., Sp.BMM(K) (Pembimbing utama)
4. Djodi Asmara, drg., SU., Sp.BMM(K) (Pembimbimg serta)
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
iv
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
UCAPAN TERIMAKASIH
Segala puji bagi Allah Subhanahu Wa Ta’aala, atas kehendak, rahmat dan
karunia-Nya sehingga dapat menyelesaikan karya tulis yang berjudul “Pengaruh
Ekstrak Daun Kelor (Moringa Oleifera) terhadap Kecepatan Angiogenesis Paska
Ekstraksi Gigi Tikus Wistar.” Tulisan ini disusun sebagai prasyarat untuk
menyelesaikan Program Pendidikan Dokter Gigi Strata 1 Fakultas Kedokteran Gigi
Universitas Airlangga Surabaya.
Dalam penyusunan karya tulis ini, penulis mendapat banyak masukan dan
arahan yang berharga dari berbagai pihak. Sepatutnya, penulis mengucapkan terima
kasih kepada:
1. Dr. R. Darmawan Setijanto, drg. M.Kes selaku Dekan Fakultas Kedokteran
Gigi Universitas Airlangga yang telah memberi kesempatan untuk
menempuh pendidikan dokter gigi di Fakultas Kedokteran Gigi Universitas
Airlangga.
2. Roberto Manahan Y. S.., drg., MS., Sp.BMM(K) selaku Ketua Departemen
Bedah Mulut dan Maksilofasial yang telah memberikan ijin dalam
pembuatan skripsi di Departemen Bedah Mulut.
3. Prof. Dr. Peter Agus, drg., Sp.BMM (K) selaku Dosen Pembimbing Utama
yang telah memberikan arahan, masukan, evaluasi serta koreksi selama
penyusunan skripsi.
4. Djodi Asmara drg., SU., Sp.BMM(K) selaku Dosen Pembimbing II yang
juga telah memberikan bimbingan dan pengarahan serta pengetahuan baru
kepada penulis.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
v
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
5. Roberto Manahan Y. S, drg., MS., Sp.BMM(K), Dr. David Buntoro
Kamadjaja drg., MDS., Sp.BMM(K) selaku Dosen penguji yang telah
memberi saran, pengetahuan baru dan membantu menyelesaikan skripsi.
6. Dr. Retno Pudji Rahayu drg., M. Kes selaku Dosen Patologi Mulut yang
telah membimbing dan memberikan pengetahuan dalam tahap
penghitungan pembuluh darah di Departemen Patologi Anatomi Fakultas
Kedokteran Gigi Universitas Airlangga
7. Adi Hapsoro, drg., MS selaku Dosen Ilmu Kesehatan Gigi Masyarakat yang
telah membimbing dan memberi arahan dalam tahap pengolahan data di
Departemen Ilmu Kesehatan Gigi Masyarakat Fakultas Kedokteran Gigi
Universitas Airlangga.
8. Pak Heri yang telah membantu dalam pemeliharaan dan pencabutan gigi
tikus wistar di Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas
Airlangga.
9. Kedua orangtuaku, Ayahanda Muftalichan dan Ibunda Tutik Amiati serta
kakakku Nizar Syauchi yang telah memberikan semangat, masukan,
dorongan moral dan spiritual dan perhatian yang selalu tercurah.
10. Teman-teman seperjuangan angkatan 2013 yang saling memberikan
motivasi dan membantu satu sama lain untuk menyelesaikan skripsi tepat
waktu dan semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu yang telah
membantu menyelesaikan skripsi ini.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
vi
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
ABSTRACT
The Role of Drumstick Leaves (Moringa oleifera) Extract in Increasing
Angiogenesis Post Tooth Extraction of Wistar Rats
Background: Tooth extraction always cause tissue damage and wound. The
process of wound healing after tooth extraction becomes a major concern because
of many complications and makes the patient feel discomfort and pain suffered.
Angiogenesis is one of the indications of wound healing. The composition of the
drumstick leaves such as saponin and flavonoid will increasing angiogenesis
process. Objective: To prove the effect of 15% drumstick leaves extract in
increasing angiogensis post tooth extraction of wistar rats. Method: Wistar rats
divided into 2 control groups and 2 treatment groups. CMC-Na was applied on
control groups and 15% drumstick leaves extract gel applied on treatment groups.
The observations were made on the third and fifth day after tooth extraction by
counting the blood vessel lumen using histopathological samplings. Data were
analyzed using Independent T-test. Result: drumstick leaves extract gel topically
applied in wistar rats socket after tooth extraction, can increase blood vessel lumen.
In statictical test (p<0.05), the significant difference between control groups and
treatment groups can be obtained. Conclusion: the effect of drumstick leaves gel
increase angiogenesis process in wound healing on the third day compared to the
control groups.
Keywords: tooth extraction, angiogenesis, Moringa oleifera, drumstick leaves
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
vii
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL
Lembar Pengesahan ......................................................................................... ii
Penetapan Panitia Penguji ................................................................................ iii
Ucapan Terima Kasih ....................................................................................... iv
Abstract ............................................................................................................ vi
Daftar Isi........................................................................................................... vii
Daftar Gambar ................................................................................................ .. x
Daftar Tabel ..................................................................................................... xi
Daftar Lampiran ............................................................................................... xii
BAB 1 PENDAHULUAN .............................................................................. 1
1.1 Latar Belakang ........................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ...................................................................................... 3
1.3 Tujuan Penelitian ....................................................................................... 3
1.3.1 Tujuan Umum ................................................................................... 3
1.3.2 Tujuan Khusus .................................................................................. 3
1.4 Manfaat Penelitian ..................................................................................... 4
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ..................................................................... 5
2.1 Ekstraksi Gigi ............................................................................................. 5
2.2 Penyembuhan Luka .................................................................................... 5
2.2.1 Fase Inflamasi ................................................................................... 7
2.2.2 Fase Proliferasi ................................................................................. 8
2.2.3 Fase Maturasi .................................................................................... 9
2.3 Faktor yang Mempengaruhi Penyembuhan Luka ...................................... 10
2.4 Penyembuhan Luka paska Ekstraksi Gigi .................................................. 11
2.5 Angiogenesis .............................................................................................. 12
2.6 Moringa oleifera ........................................................................................ 13
2.6.1 Klasifikasi ......................................................................................... 13
2.6.2 Morfologi.......................................................................................... 13
2.6.3 Kandungan........................................................................................ 14
2.7 Gel Ekstrak Daun Kelor ............................................................................. 16
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
viii
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL DAN HIPOTESIS ......................... 18
3.1 Kerangka Konseptual ................................................................................. 18
3.2 Hipotesis ..................................................................................................... 19
BAB 4 METODE PENILITIAN ................................................................... 20
4.1 Jenis Penelitian ........................................................................................... 20
4.2 Rancangan Penelitian ................................................................................. 20
4.3 Sampel dan Besar Sampel .......................................................................... 21
4.3.1 Jenis Sampel ..................................................................................... 21
4.3.2 Kriteria Sampel ................................................................................. 21
4.3.3 Besar Sampel .................................................................................... 21
4.4 Variabel Penelitian ..................................................................................... 22
4.5 Definisi Operasional................................................................................... 23
4.6 Waktu dan Tempat Penelitian .................................................................... 25
4.7 Instrumen Penelitian................................................................................... 25
4.8 Alat dan Bahan ........................................................................................... 25
4.8.1 Alat .................................................................................................... 25
4.8.2 Bahan ................................................................................................ 26
4.9 Cara Kerja .................................................................................................. 27
4.9.1 Persiapan Hewan Coba ..................................................................... 27
4.9.2 Pembuatan Gel Ekstrak Daun Kelor ................................................. 27
4.9.3 Proses Pencabutan Gigi Tikus Wistar ............................................... 28
4.9.4 Pembuatan Sediaan Histologis .......................................................... 28
4.10 Prosedur Pengambilan Data ..................................................................... 32
4.11 Pengolahan dan Analisis Data .................................................................. 32
4.12 Alur Penelitian ......................................................................................... 33
BAB 5 HASIL PENELITIAN DAN ANALISA DATA .............................. 34
5.1 Data Hasil Penelitian .................................................................................. 34
5.2 Analisis Data .............................................................................................. 35
BAB 6 PEMBAHASAN ................................................................................. 36
BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................... 39
7.1 Kesimpulan ................................................................................................ 39
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
ix
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
7.2 Saran ........................................................................................................... 39
DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 40
LAMPIRAN .................................................................................................... 44
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
x
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Daun Kelor (Moringa Oleifera).................................................. 13
Gambar 2.2 Struktur Kimia Flavonoid ........................................................... 15
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
xi
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1 Kandungan Fitokimiai Daun Kelor ................................................. 14
Tabel 5.1 Jumlah Pembuluh Darah pada Hari ke 3 Paska Pencabutan ........... 34
Tabel 5.2 Jumlah Pembuluh Darah pada Hari ke 5 Paska Pencabutan ........... 35
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
xii
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Keterangan Laik Etik ................................................................. 45
Lampiran 2. Tabel Hasil Penelitian ................................................................ 46
Lampiran 3. Kandungan Ekstrak Daun Kelor ................................................ 47
Lampiran 4. Proses Penelitian ........................................................................ 48
Lampiran 5. Hasil Uji Statistik ....................................................................... 49
Lampiran 6. Preparat Pembuluh Darah ......................................................... 50
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
1
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1 Latar belakang
Pencabutan gigi termasuk tindakan bedah yang melibatkan jaringan keras
dan jaringan lunak yang ada di rongga mulut. Umumnya luka setelah pencabutan
gigi dapat sembuh dengan alami sebagai bentuk respon tubuh terhadap jaringan
yang rusak, namun tidak jarang pula mengalami hambatan yang akan
memperlambat proses penyembuhan misalnya infeksi, perdarahan dan dry socket
(Balaji, 2007). Untuk mendapatkan integritas secara anatomis dari bagian yang
terluka serta mendapatkan kembali fungsi normal terjadilah proses penyembuhan
pada luka (Miloro, 2004).
Proses penyembuhan luka terdiri dari beberapa fase, yaitu fase inflamasi
(lag phase) yaitu fase terjadinya hemostasis yang ditandai dengan reaksi
vasokonstriksi yang bertujuan untuk menghentikan perdarahan dan memulihkan
aliran darah pada daerah luka serta terjadi proses inflamasi untuk membuang
jaringan rusak dan mencegah infeksi bakteri, fase selanjutnya adalah fase proliferasi
yaitu fase terbentuknya pembuluh darah baru dan fase maturasi atau remodelling
yaitu fase yang terjadi paling lama (Bisono, 2003; Pusponegoro, 2005). Pada
penyembuhan luka, jaringan memerlukan oksigen dan nutrisi supaya dapat
berproliferasi dengan baik, oleh karena itu dibutuhkan suatu proses yang dapat
memfasilitasi, yaitu angiogenesis. Angiogenesis terjadi pada fase proliferasi dan
merupakan salah satu proses alami yang sangat diperlukan dalam penyembuhan
luka dan menjaga aliran darah ke jaringan setelah terjadi luka (William & Vincent,
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
2
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
2003). Pengelolaan luka yang baik akan menentukan hasil akhir dari proses
penyembuhan luka.
Dalam beberapa tahun terakhir, banyak penelitian yang memanfaatkan
bahan alam sebagai salah satu bahan yang berpotensi mempercepat penyembuhan
luka (Pramono, 2002). Hal ini dipengaruhi oleh kecenderungan masyarakat mencari
alternatif bahan herbal karena mahalnya harga obat modern yang ada di pasaran
saat ini. Salah satu tanaman herbal yang dikembangkan adalah tanaman kelor atau
yang sering disebut “miracle tree” karena semua bagian tumbuhan kelor sangat
bermanfaat bagi kehidupan baik daun, kulit batang, biji dan akarnya (Johni dkk,
2008). Di Indonesia pohon kelor banyak ditanam sebagai pagar hidup, ditanam di
sepanjang ladang atau tepi sawah, berfungsi sebagai tanaman penghijau, selain itu
tanaman kelor juga dikenal sebagai tanaman obat berkhasiat dengan memanfaatkan
seluruh bagian dari tanaman kelor mulai dari daun, kulit batang, biji, hingga
akarnya (Katharina, dkk, 2007). Penelitian terdahulu menunjukkan kandungan
daun kelor berpengaruh terhadap waktu lamanya perdarahan (Unuigbe, 2014).
Senyawa aktif yang dimiliki daun kelor adalah saponin, tanin, flavonoid, alkaloid
dan terpenoid yang didapat dari proses ekstraksi (Yudistira, 2013).
Pada penelitian ini peneliti menggunakan saponin dan flavonoid dalam
ekstrak daun kelor yang dapat mempengaruhi kecepatan penyembuhan luka.
Menurut Faradisa (2008), saponin pada penyembuhan luka dapat membantu
pembentukan angiogenesis karena mengandung antioksidan, disamping itu mampu
mengganggu stabilitas membran sel bakteri sehingga mengakibatkan kerusakan
membran sel. Flavonoid merupakan salah satu senyawa metabolit yang paling
banyak ditemukan di dalam jaringan tanaman. Kandungan flavonoid pada daun
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
3
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
kelor merupakan senyawa polifenol yang menunjukkan potensi tertinggi
antioksidan dibanding pada bagian lain dari tanaman, disamping itu mampu
mengganggu keutuhan membran sel bakteri (Rajalakshmi dan S. Narasimhan,
1985; Gardner et al, 2000; Juliantina, 2008).
Berdasarkan hal-hal tersebut peneliti ingin menguji efek saponin dan
flavonoid dalam kandungan ekstrak daun kelor terhadap kecepatan angiogenesis
paska ekstraksi gigi tikus wistar. Penelitian ini diharapkan bermanfaat bagi
masyarakat karena dapat menjadi solusi penyembuhan luka yang alami, murah,
mudah didapat dan aman.
1.2 Rumusan masalah
Apakah pemberian ekstrak daun kelor dapat mempercepat proses
angiogenesis paska ekstraksi gigi tikus wistar?
1.3 Tujuan
1.3.1 Tujuan umum
Mengetahui pengaruh pemberian ekstrak daun kelor terhadap kecepatan
proses angiogenesis pada tikus wistar.
1.3.2 Tujuan khusus
Membandingkan jumlah pembuluh darah pada soket gigi kelompok tikus
wistar yang diberi gel ekstrak daun kelor dan kelompok tikus wistar yang tidak
diberi gel ekstrak daun kelor.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
4
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
1.4 Manfaat
Bahan alami dari ekstrak daun kelor dapat dipertimbangkan penggunaannya
dalam proses penyembuhan luka dengan harga yang cukup terjangkau, mudah
didapat dan efek samping yang minimal.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
5
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Ekstraksi Gigi
Ekstraksi gigi yang ideal yaitu mengeluarkan gigi dengan trauma atau nyeri
seminimal mungkin sehingga jaringan yang rusak dapat sembuh dengan baik
(Balaji, 2007).
Perawatan gigi memiliki tujuan utama mempertahankan keberadaan gigi
selama mungkin di dalam rongga mulut, namun terkadang pencabutan gigi
diindikasikan sebagai tindakan terbaik untuk mencegah keadaan yang lebih buruk.
Indikasi dan kontraindikasi sebaiknya perlu diketahui sebelum tindakan pencabutan
gigi agar dapat mencapai hasil yang maksimal (Angganisa, 2011).
Paska tindakan ekstraksi gigi tidak jarang terjadi komplikasi, hal ini bisa
menjadi masalah yang serius dan fatal apabila tidak tertangani dengan baik.
Menurut Pederson (1996), komplikasi adalah suatu respon pasien tertentu yang
dianggap sebagai kelanjutan normal dari pembedahan, yaitu perdarahan, rasa sakit
dan edema. Tetapi apabila berlebihan maka perlu ditinjau apakah termasuk
morbiditas yang biasa terjadi atau komplikasi. Komplikasi paska bedah menurut
Pederson (1996) berupa perdarahan, nyeri, edema dan reaksi terhadap obat.
2.2 Penyembuhan luka
Ekstraksi gigi akan menimbulkan luka pada jaringan sekitar soket. Luka
pada jaringan tubuh makhluk hidup merupakan salah satu media yang
memungkinkan mikroba patogen untuk berkembang biak dan akan menginfeksi
luka tersebut. Luka dibagi menjadi dua yaitu luka akut dan luka kronis. Jenis luka
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
6
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
akut akan mencapai penyembuhan normal dalam jangka waktu tertentu. Luka akut
biasanya terjadi pada individu normal, sehat dan dapat dilakukan penutupan luka
secara primer atau dibiarkan menyembuh secara sekunder. Sebagian besar luka
yang terjadi akibat trauma pada organ atau jaringan dapat dikategorikan sebagai
luka akut (Pramesti, 2012).
Tubuh memiliki kemampuan untuk menghilangkan atau menghambat
proses infeksi oleh mikroba dengan tujuan untuk mempertahankan keutuhan
jaringan. Selain itu tubuh juga memiliki kemampuan secara seluler dan biokimia
untuk memperbaiki integritas jaringan dan kapasitas fungsional akibat adanya luka
yang diketahui sebagai proses penyembuhan luka (Miloro, 2004; Sofianty, 2010).
Luka paska pencabutan gigi merupakan salah satu hal yang perlu diperhatikan.
Penyembuhan luka adalah perbaikan yang meliputi regenerasi dan pengendapan
jaringan ikat (fibrosis atau parut). Regenerasi sel umumnya melibatkan proliferasi
dan berdiferensiasi untuk menggantikan sel yang mati (Pramesti, 2012). Proses
penyembuhan luka terjadi pada awal inflamasi, selanjutnya terjadi perusakan,
pelarutan dan penghancuran sel atau agen penyebab kerusakan sel. Pada saat yang
sama terjadi proses reparasi, proses pembentukan kembali jaringan yang rusak.
Proses ini baru selesai sempurna sesudah agen penyebab kerusakan sel dinetralkan.
Selama proses reparasi berlangsung, jaringan rusak diganti oleh regenerasi sel
parenkimal dengan cara mengisi bagian yang rusak dengan jaringan fibroblas
(Prabakti, 2014).
Fisiologi penyembuhan luka dapat dibagi ke dalam 3 fase utama, yaitu fase
inflamasi, fase proliferasi dan fase remodelling (Miloro, 2004):
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
7
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
1. Fase inflamasi akut terhadap cedera, mencakup hemostasis, pelepasan histamin
dan mediator lain dari sel-sel yang rusak dan migrasi sel darah putih (neutrofil
dan makrofag) ke tempat yang rusak tersebut dan pembersihan jaringan yang
mati.
2. Fase proliferasi, yaitu pada saat pembuluh darah baru yang dapat diperkuat
oleh jaringan ikat yang menginfiltrasi luka.
3. Fase remodelling/maturasi, mencakup re-epitelisasi, kontraksi luka dan
reorganisasi jaringan ikat.
2.2.1 Fase inflamasi
Inflamasi merupakan reaksi awal bila tubuh terkena jejas. Fase ini terjadi
segera setelah cedera dan dapat berlangsung selama 3-5 hari. Reaksi awal adalah
vasokonstriksi dengan terjadinya vasodilatasi lokal, keluarnya darah dan cairan
menuju ruangan ekstravaskuler dan terhambatnya aliran limfatik (Miloro, 2004).
Banyak proses yang terjadi pada fase ini antara lain (Moenadjat et al, 2009):
a. Vasokonstriksi dan Hemostasis
Pembuluh darah dan pembuluh limfa mengalami vasokonstriksi dalam
beberapa menit setelah trauma terjadi. Trombosit beragregasi disekitar endotelium
yang cedera. Segera setelah cedera, kaskade koagulasi dimulai.
b. Vasodilatasi dan Peningkatan Permeabilitas
Vasodilatasi dan peningkatan permeabilitas kapiler disebabkan karena
pelepasan zat kimia seperti prostglandin dan histamin pada jaringan yang cedera.
Peningkatan permeabilitas kapiler ini menyebabkan bocornya plasma darah
sehingga menyebabkan jaringan menjadi bengkak. Vasodilatasi akan berakhir
dalam satu jam.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
8
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
c. Fagositosis dan Chemotactic Growth Factor
Beberapa jam setelah cedera, neutrofil/PMN (polymorphonuclear cell)
muncul di daerah cedera, jumlahnya mencapai puncak pada satu hingga dua hari
setelah cedera terjadi. Jumlah neutrofil akan menurun pada hari ketiga jika tidak
terjadi infeksi. Jumlah monosit mencapai puncak pada hari keempat. Jumlah
limfosit mencapai puncak pada hari keenam.
2.2.2 Fase Proliferasi
Pada proses penyembuhan luka yang normal dan sehat, fase ini dimulai pada
hari ke 3-5 setelah cedera terjadi.
a. Angiogenesis dan Granulasi
Pelepasan faktor pertumbuhan menginduksi migrasi dan proliferasi sel
endotel yang akhirnya menyebabkan angiogenesis. Pembuluh darah yang terbentuk
kemudian menembus matriks fibrin luka dan membentuk jejaring pembuluh darah.
Jejaring pembuluh darah tersebut kemudian membentuk jaringan granulasi.
Jaringan granulasi terbentuk dari kolagen, leukosit, fibroblas dan sel
endotel muda.
b. Pembentukan Matriks Ekstraseluler
Dua hingga tiga hari setelah cedera, fibroblas bermigrasi ke daerah luka dan
akan aktif memproduksi kolagen. Kolagen yang pertama dihasilkan adalah
kolagen. Penumpukan kolagen yang merupakan langkah awal yang menyebabkan
integritas kulit muncul kembali. Pembentukan kolagen membutuhkan hidroksilasi
residu prolin dan lisin, sehingga proses ini membutuhkan oksigen,
besi dan vitamin C.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
9
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
c. Re-epitelisasi
Re-epitelisasi membutuhkan migrasi, proliferasi dan diferensiasi
keratinosit. Proses ini dimulai dari tepi-tepi luka beberapa jam setelah luka (Miloro,
2004).
2.2.3 Fase Maturasi
Fase ini merupakan tahap yang paling lama dari proses penyembuhan luka,
tahap ini dapat berlangsung selama 3 minggu hingga 2 tahun setelah luka terjadi.
Walaupun kecepatan sintesis kolagen menurun pada minggu ketiga, akan tetapi
tetap terjadi ikatan antar kolagen dapat berlangsung sampai beberapa bulan. Tahap
maturasi jaringan ini dipengaruhi faktor usia, perbedaan ras, jenis luka dan
lamanya inflamasi (Cockbill, 2002; Li, Chen & Kirsner, 2007).
2.3 Faktor yang Mempengaruhi Penyembuhan Luka
Penyembuhan luka dapat tergantung oleh penyebab dari dalam tubuh sendiri
(endogen) atau oleh penyebab dari luar (eksogen). Penyebab endogen terpenting
adalah gangguan koagulasi yang disebut koagulopati dan ganguan sistem
imun. Proses penyembuhan luka tidak hanya terbatas pada proses regenerasi yang
bersifat lokal saja pada luka, namun dipengaruhi pula oleh faktor intrinsik dan
faktor ekstrinsik (InETNA, 2004). Faktor-faktor yang dapat mempengaruhi
penyembuhan luka (Damayanti dkk, 2015):
a. Vaskularisasi
Vaskularisasi mempengaruhi luka karena luka membutuhkan keadaan
peredaran darah yang baik untuk pertumbuhan atau perbaikan sel.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
10
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
b. Anemia
Anemia dapat memperlambat proses penyembuhan luka karena pada
dasarnya penyembuhan luka membutuhkan kadar protein yang cukup. Oleh sebab
itu, orang yang mengalami kekurangan kadar hemoglobin dalam darah akan
mengalami proses penyembuhan yang relatif lebih lama.
c. Usia
Kecepatan perbaikan sel berlangsung sejalan dengan pertumbuhan dan
kematangan usia seseorang. Namun selanjutnya, proses penuaan dapat menurunkan
sistem perbaikan sel sehingga dapat memperlambat proses penyembuhan luka.
d. Penyakit lain
Penyakit lain atau biasanya penyakit sistemik mempengaruhi lamanya
proses penyembuhan luka. Penderita diabetes melitus dan ginjal akan menyebabkan
proses penyembuhan luka yang lambat.
e. Nutrisi
Nutrisi merupakan unsur utama dalam membantu perbaikan sel, terutama
karena kandungan zat gizi yang terdapat didalamnya. Misalnya vitamin A
membantu proses epitelisasi atau penutupan luka dan sintesis kolagen.
f. Medikasi
Penggunaan obat-obatan akan mempengaruhi kecepatan penyembuhan
luka. Konsumsi aspirin pada penderita penyakit jantung dapat memperpanjang
proses penyembuhan luka.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
11
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
2.4 Penyembuhan Luka Paska Ekstraksi Gigi
Setelah pencabutan gigi, soket akan terisi darah. Pada tahap awal
penyembuhan luka yaitu proses pembekuan darah. Jaringan fibrin yang terbentuk
secara perlahan menutup pembuluh darah yang rusak diikuti terjadinya vasodilatasi
yang kemudian terjadi migrasi leukosit dan pembentukan lapisan fibrin. Pada hari
yang sama terjadi proses inflamasi, neutrofil migrasi ke daerah luka dan
memfagosit jaringan nekrotik (Miloro, 2004). Monosit akan berubah menjadi
makrofag saat keluar dari mikrosirkulasi yang berperan sebagai fagositosis. Jumlah
neutrofil akan menurun ketika terjadi inflamasi kronis. Limfosit dan sel plasma
mulai migrasi ke area luka (Topazian & Goldberg, 2002)
Proses proliferasi epitel pada permukaan bekuan darah akan terjadi pada
hari ketiga paska ekstraksi gigi, selain itu terjadi pula proliferasi fibroblas yang
berasal dari dinding tulang alveolar dan menyebar masuk ke dalam bekuan darah.
Proliferasi fibroblas merupakan hasil mediator kimia dari makrofag atau yang
disebut jaringan granulasi (Topazian & Gorldberg, 2002).
Pada bekuan darah terdapat benang-benang fibrin yang dicerna oleh enzim
jaringan dan perbaikan awal jaringan telah selesai. Osteoklas akan terakumulasi
sepanjang alveolar bone crest dan mengatur tahap resorpsi crest yang aktif. Proses
angiogenesis terjadi pada daerah bekas ligamen periodontal. Semakin lama tensile
strength akan meningkat. Osteoid akan memanjang dari bekuan darah ke alveolar
dan resorpsi osteoklas akan terjadi pada margin kortikal soket alveolar. Fase
remodelling tulang dengan deposisi dan resorpsi berlangsung selama beberapa
minggu hingga tahun (Miloro, 2004).
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
12
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
2.5 Angiogenesis
Angiogenesis adalah suatu proses dimana pembuluh darah baru tumbuh di
daerah luka setelah cedera. Granulasi jaringan merupakan kombinasi dari elemen
seluler termasuk fibroblas dan sel inflamasi, yang bersamaan dengan timbulnya
pembuluh darah di jaringan penghubung di area luka (Singer & Clark, 1999).
Pada saat terjadi kerusakan jaringan, proses angiogenesis mampu
mempertahankan kelangsungan fungsi jaringan dan organ melalui terbentuknya
pembuluh darah baru untuk menggantikan pembuluh darah yang telah rusak
jaringan pada penyembuhan luka memerlukan suplai oksigen dan nutrisi supaya
dapat berproliferasi dengan baik. Oleh karena itu dibutuhkan suatu proses yang
dapat memfasilitasi hal tersebut yaitu angiogenesis (Friska dkk, 2007).
Proses angiogenesis terjadi pada proses penyembuhan luka ketika fase
proliferasi, yaitu antara 2 hari sampai 3 minggu setelah injuri. Proses ini merupakan
proses alami yang penting untuk mengembalikan aliran darah pada daerah yang
luka sehingga mendapatkan suplai nutrisi yang cukup (Miloro, 2004, p.5).
Terbentuknya pembuluh darah baru tergantung pada keseimbangan faktor
angiogenik dan inhibitor angiogenik. Faktor angiogenik meliputi FGF,
angiopoietins, VEGF dan TGF-β. (Ueno et al, 2006; Li, Chen & Kirsner, 2007)
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
13
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
2.6 Moringa oleifera
Gambar 2.1 Daun kelor (Moringa oleifera)
2.6.1 Klasifikasi
Klasifikasi Moringa oleifiera (Krisnadi, 2008):
Kingdom : Plantae
Subkingdom : Tracheobionta
Super Divisi : Spermatobphyta
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Sub Kelas : Dilleniidae
Ordo : Capparales
Famili : Moringaceae
Genus : Moringa
Spesies : Moringa oleifera
2.6.2 Morfologi Moringa oleifera
Kelor (Moringa oleifera) tumbuh dalam bentuk pohon, berumur panjang
(perenial) dengan tinggi 7 - 12 m. Batang berkayu (lignosus), tegak, berwarna putih
kotor, kulit tipis, permukaan kasar. Percabangan simpodial, arah cabang tegak atau
miring, cenderung tumbuh lurus dan memanjang. Perbanyakan bisa secara generatif
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
14
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
(biji) maupun vegetatif (stek batang). Tumbuh di dataran rendah maupun dataran
tinggi sampai di ketinggian ± 1000 m dpl, banyak ditanam sebagai tapal batas atau
pagar di halaman rumah atau ladang (Krisnadi, 2008).
Daun kelor merupakan jenis daun bertangkai karena hanya terdiri atas tangkai
dan helaian saja. Tangkai daun berbentuk silinder dengan sisi atas agak pipih,
menebal pada pangkalnya dan permukaannya halus. Daunnya berbentuk bulat atau
bundar (orbicularis), pangkal daunnya tidak bertoreh dan termasuk ke dalam
bentuk bangun bulat telur. Ujung dan pangkal daunnya membulat (rotundatus)
dimana ujungnya tumpul dan tidak membentuk sudut sama sekali, hingga ujung
daun merupakan semacam suatu busur. Susunan tulang daunnya menyirip
(penninervis), dimana daun kelor mempunyai satu ibu tulang yang berjalan dari
pangkal ke ujung dan merupakan terusan tangkai daun (Krisnadi, 2008).
2.6.3 Kandungan
Tabel 2.1: Kandungan fitokimia daun kelor (Unuigbe, 2014)
Phytochemical Inference
Leaf Seed
Alkaloids - +
Carbohydrates + +
Reducing sugars - +
Saponins + +
Phytosterols - -
Tannins - -
Phenolic
Compounds + +
Flavonoids + +
Proteins - +
+ indicates preserence
- indicates absence of compound
Kelor merupakan tanaman asli Indonesia yang dapat dipergunakan sebagai
obat-obatan dan antioksidan (Shahid and Bhanger, 2004; Ravindra et al, 2005).
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
15
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
Daun kelor memiliki senyawa aktif yang dapat dimanfaatkan diantaranya adalah
saponin, tanin, flavonoid, alkaloid dan terpenoid yang didapat dari proses ekstraksi
(Yudistira dkk, 2013).
a. Saponin
Saponin adalah senyawa glikosida yang terdiri gabungan glukosa dengan
sapogenin yang memiliki berbagai sifat farmakologis yaitu antibakteri, anti
inflamasi dan antioksidan. Berdasarkan struktur kimianya dibagi menjadi 3 kelas
utama yaitu kelas steroid, kelas alkaloid dan kelas triterpenoid. (Rachmawati,
2010). Saponin membantu proses penyembuhan luka karena mempunyai efek
antioksidan dengan membentuk hidrogen peroksida. Disamping itu, saponin juga
berperan sebagai anti bakteri yang dapat mengakibatkan kerusakan membran sel
bakteri sehingga menyebabkan keluarnya komponen penting bakteri seperti asam
nukleat, protein dan nukleotida (Faradisa, 2008). Saponin bereaksi dengan porin
pada membran luar dinding sel bakteri membentuk ikatan polimer yang sangat kuat
mengakibatkan rusaknya porin sehingga akan mengurangi permeabilitas membran
sel bakteri. Menurunnya permeabilitas sel bakteri mengakibatkan sel akan
kekurangan nutrisi, sehingga pertumbuhan bakteri terhambat atau mati
(Rachmawati, 2015).
b. Flavonoid
Gambar 2.2 Struktur kimia flavonoid
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
16
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
Flavonoid merupakan zat golongan fenol alami terbesar yang mempunyai
berbagai manfaat seperti anti inflamasi, antivirus, antibakteri, anti jamur dan
meningkatkan kerja pembuluh darah kapiler (Marais et al, 2006). Senyawa
polifenol pada daun menunjukkan potensi tertinggi antioksidan dibanding pada
bagian lain dari tanaman kelor sesuai dengan penelitian sebelumnya (Gardner et al,
2000). Komponen bioaktif fenol utama daun kelor merupakan quercetin yang
mempunyai kemampuan untuk mengikat atom bagi radikal bebas (Amijaya dkk,
2013).
Flavonoid bersifat antibakteri dengan cara mendenaturasi protein yang
menyebabkan aktiftas metabolisme sel bakteri berhenti karena semua aktifitas
metabolisme sel bakteri dikatalisis. Berhentinya aktifitas metabolisme ini akan
mengakibatkan kematian sel bakteri sehingga mampu mempercepat penyembuhan
luka (Pambudi, 2013).
2.7 Gel Ekstrak Daun Kelor
Dalam penelitian ini peneliti menggunakan sediaan ekstrak daun kelor
berupa gel. Gel mempunyai beberapa keuntungan diantaranya tidak lengket,
mempunyai aliran tiksotropik dan pseudoplastik yaitu gel berbentuk padat apabila
disimpan dan akan segera mencair bila dikocok. Konsentrasi bahan untuk
membentuk massa gel yang baik dibutuhkan hanya sedikit, disamping itu viskositas
gel tidak mengalami perubahan yang berarti pada suhu penyimpanan (Sihombing,
dkk., 2009). Bahan dasar gel yang digunakan adalah CMC-Na yang merupakan zat
dengan warna putih atau sedikit kekuningan, tidak berbau dan tidak berasa,
berbentuk granula yang halus atau bubuk yang bersifat higroskopis (Setyawan,
2007). Pembuatan gel dalam penelitian ini menggunakan bahan dasar CMC Na 3%.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
17
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
Konsentrasi gel ekstrak daun kelor yaitu 15% sesuai dengan penelitian yang
dilakukan Handoko (2015) bahwa aktifitas penyembuhan luka menggunakan
ekstrak daun kelor dengan konsentrasi tersebut dapat mempercepat penyembuhan
luka pada gingivitis.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
18
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
BAB 3
KERANGKA KONSEPTUAL DAN HIPOTESIS
3.1 Kerangka Konseptual
Pada hari ke-3 dan 5
Keterangan:
: yang diteliti
Pencabutan gigi
insisif RB kiri
Soket paska pencabutan
Angiogenesis
Pembuluh darah baru
Ekstrak Daun
Kelor
Saponin
Flavonoid
Aktifitas Makrofag
Penyembuhan Luka
bFGF VEGF
Fibroblas
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
19
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
Penjelasan Kerangka Konsep
Ekstraksi gigi merupakan tindakan bedah berupa pengeluaran gigi dari
soketnya yang dapat mengakibatkan kerusakan jaringan sekitarnya baik jaringan
lunak maupun jaringan keras. Dalam prosesnya jika terjadi gangguan atau
komplikasi paska pencabutan maka proses penyembuhan luka tidak akan berjalan
secara optimal.
Daun kelor diketahui memiliki beberapa kandungan penting dalam
mempercepat penyembuhan luka, kandungan penting tersebut yaitu saponin dan
flavonoid. Saponin dalam ekstrak daun kelor membentuk hidrogen peroksida yang
berperan sebagai antioksidan, selain itu saponin mampu menurunkan aktifitas
bakteri dengan cara mengganggu stabilitas membran sel bakteri yang menyebabkan
kerusakan sel.
Flavonoid yang terdapat dalam ekstrak daun kelor juga memiliki aktifitas
antioksidan dengan cara mengikat elektron terluar dari radikal bebas yang bersifat
tidak stabil. Antioksidan yang telah berikatan akan menyebabkan radikal bebas
lebih stabil sehingga kerusakan membran sel dapat berkurang. Disamping sebagai
antioksidan flavonoid juga mampu mendenaturasi protein sel bakteri dan merusak
membran sel tanpa dapat diperbaiki lagi sehingga penyembuhan luka akan terjadi
lebih cepat.
3.2 Hipotesis
Aplikasi ekstrak daun kelor dapat mempercepat proses angiogenesis paska
ekstraksi gigi tikus wistar.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
20
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
BAB 4
METODE PENELITIAN
4.1 Jenis Penelitian
Jenis penelitian yang dilakukan adalah eksperimental laboratoris secara in
vivo pada hewan coba tikus wistar.
Desain penelitian
Keterangan:
K3 = kelompok kontrol 1, tanpa ekstrak daun kelor, dilihat pembuluh darahnya
pada hari ke 3
K5 = kelompok kontrol 2, tanpa ekstrak daun kelor, dilihat pembuluh darahnya
pada hari ke 5
P3 = kelompok perlakuan 1, dengan ekstrak daun kelor 15%, dilihat pembuluh
darahnya pada hari ke 3
P5 = kelompok perlakuan 2, dengan ekstrak daun kelor 15%, dilihat pembuluh
darahnya pada hari ke 5
4.2 Rancangan Penelitian
Rancangan penelitian yang di gunakan adalah post test only control group
design.
Sampel Random
sampling
Kontrol
Perlakuan
K3
P3
P5
K5
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
21
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
4.3 Sampel dan Besar Sampel
4.3.1 Jenis Sampel
Sampel penelitian menggunakan tikus wistar jantan yang diperoleh dari
Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga Surabaya.
4.3.2 Kriteria Sampel
Subyek penelitian dievaluasi secara klinis, sebelum mendapat perlakuan
penelitian dan pengambilan sampel dilakukan secara random sampling. Beberapa
kriteria sampel yang harus dipenuhi yaitu:
a. Tikus wistar
b. Umur 2-3 bulan
c. Berat badan 150-250 gram
d. Jenis kelamin jantan
e. Sehat, ditandai dengan gerakan yang aktif dan memungkinkan untuk
dijadikan sampel penelitian
Binatang coba yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus wistar
jantan. Pemilihan tikus jantan dalam penelitian ini untuk menghindari adanya
kemungkinan variasi hormonal yang dapat terjadi pada tikus wistar jenis kelamin
betina.
4.3.3 Besar Sampel
Pengambilan sampel dilakukan secara random sampling. Penentuan besar
sampel penelitian ditentukan dengan menggunakan rumus Lemeshow:
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
22
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
𝑛 =2𝛿2(𝑍1−𝛼 + 𝑍1−𝛽)
2
(𝜇1 − 𝜇2)2
Keterangan:
n : banyaknya sampel tiap kelompok
δ : standar deviasi kelompok kontrol
Z1-α : nilai pada distribusi normal standar yang sama dengan tingkat
kemaknaan (untuk 0,05 adalah 1,64)
Z1-β : nilai pada distribusi normal standar yang sama dengan power test
sebesar yang diinginkan (untuk β= 0.10 adalah 1.282)
(μ1 – μ2)2 : beda rata-rata masing-masing kelompok (μ1=16,33 ; μ2 = 11,00)
Dalam rumus ini didapatkan besar sampel minimal adalah 6, pada penelitian
ini digunakan sampel sejumlah 7 ekor tikus wistar untuk masing-masing kelompok.
Maka, jumlah hewan coba yang digunakan adalah 28 ekor tikus wistar.
4.4 Variabel Penelitian
1. Variabel Bebas
Gel ekstrak daun kelor dengan konsentrasi 15%
2. Variabel Terikat
Jumlah pembuluh darah dalam sediaan preparat dari soket bekas pencabutan
gigi tikus wistar pada hari ke-3 dan 5
3. Variabel Terkendali
a. Kriteria sampel
b. Kesehatan hewan coba
c. Teknik pencabutan gigi
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
23
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
d. Penjahitan luka pasca pencabutan gigi tikus wistar
e. Teknik pengambilan dan penghitungan data.
4.5 Definisi Operasional
1. Gel ekstrak daun kelor merupakan hasil dari pengolahan daun kelor dengan
ethanol.
2. Proses angiogenesis diartikan sebagai jumlah pembuluh darah yang terlihat
pada sediaan preparat soket gigi dari tiap sampel yang dilihat dengan
mikroskop pada hari ke-3 dan 5 melalui pemeriksaan HPA dengan
menggunakan mikroskop.
3. Tikus wistar dibagi menjadi 4 kelompok, masing-masing kelompok terdiri
dari 7 ekor tikus Wistar yaitu :
a. Kelompok K3 : kelompok kontrol 1. Kelompok tikus Wistar yang
tidak diberi kandungan ekstrak daun kelor dan dilihat jumlah
pembuluh darahnya pada hari ke 3.
b. Kelompok K5 : kelompok kontrol 2. Kelompok tikus Wistar yang
tidak diberi kandungan ekstrak daun kelor dan dilihat jumlah
pembuluh darahnya pada hari ke 5.
c. Kelompok P3 : kelompok perlakuan 1. Kelompok tikus Wistar yang
diberi kandungan ekstrak daun kelor 15% dan dilihat jumlah
pembuluh darahnya pada hari ke 3.
d. Kelompok P5 : kelompok perlakuan 2. Kelompok tikus Wistar yang
diberi kandungan ekstrak daun kelor 15% dan dilihat jumlah
pembuluh darahnya pada hari ke 5.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
24
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
4. Pemeliharaan tikus dilakukan selama masa adaptasi dan masa penelitian.
Masa adaptasi sekitar satu minggu sedangkan pada masa penelitan
dilakukan pengambilan data pada hari ke-3 dan 5.
5. Kandang tikus berukuran 60 cm x 65 cm x 80 cm, yang cukup untuk empat
hingga lima ekor tikus.
6. Lingkungan tempat tinggal tikus berupa ruangan dengan suhu kamar (25o-
270C) yang memiliki cukup udara dan cahaya agar tidak lembab, jauh dari
kebisingan dan tidak terpapar matahari secara langsung.
7. Makanan tikus dari jagung segar, pakan dan minuman diberikan dalam
jumlah yang sama pada setiap tikus.
8. Pencabutan pada gigi tikus menggunakan gigi insisivus rahang bawah
dengan menggunakan modifikasi dari needle holder di bawah efek anestesi
ketamin sebanyak 0,1-0,2 ml.
9. Dosis gel ekstrak daun kelor yang digunakan dalam penelitian ini 15%.
Pembuatan gel ekstrak daun kelor diperoleh dari pembuatan ekstrak di
Badan Penelitian dan Konsultasi Surabaya
10. Teknik pemberian ekstrak daun kelor dengan teknik topikal pada soket
pasca pencabutan gigi tikus wistar dengan menggunakan syringe sampai
soket penuh, yaitu ± 0.1 ml.
11. Pengambilan data dilakukan pada hari ke-3 dan 5 pasca
pencabutan. Perhitungan dan analisis data dilakukan dengan uji statistik
independent t-test.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
25
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
4.6 Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilakukan pada bulan Agustus-November tahun 2016, dengan
rincian tempat penelitiannya, adalah:
a. Pembuatan ekstrak di Badan Penelitian dan Konsultasi Surabaya.
b. Pemeliharaan dan pemberian perlakuan pada hewan coba dilakukan di
Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga.
c. Pembuataan sediaan HPA dilakukan di Laboratorium Patologi Anatomi
Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga.
d. Penghitungan jumlah pembuluh darah baru di Laboratorium Patologi Mulut
Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Airlangga.
4.7 Instrumen Penelitian
Instrumen yang digunakan pada penelitian ini adalah preparat HPA.
Preparat HPA tersebut dibuat dari hasil biopsi soket bekas ekstraksi gigi tikus pada
hari ke 3 dan 5 pasca pencabutan. Dari preparat pemeriksaan HPA tersebut
dilakukan indentifikasi dengan mikroskop, yaitu identifikasi jumlah pembuluh
darah yang tampak dengan perbesaran 400x.
4.8 Alat dan Bahan
4.8.1 Alat Penelitian
1. Kandang hewan coba berupa bak plastik berukuran 60x65x80 cm dan di
atasnya diberi penutup berupa jaring-jaring yang terbuat dari kawat serta
diberi alas sekam
2. Timbangan binatang
3. Tempat makanan dan minuman tikus wistar
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
26
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
4. Gunting bedah
5. Pinset anatomi
6. Tang untuk pencabutan gigi
7. Scalpel
8. Needle holder
9. Jarum jahit dan benang
10. Syringe
11. Kotak kaca untuk pembiusan
12. Toples kaca untuk fiksasi dan dekalsifikasi
13. Peralatan untuk pembuatan sediaan
14. Mikroskop cahaya
15. Kamera digital
16. Alas kerja
4.8.2 Bahan Penelitian
1. Ekstrak daun kelor dengan konsentrasi 15 %
2. Gel CMC Na (Carboxyl Methyl Selulose Natrium) 3%
3. Ethanol, sebagai pelarut
4. Makanan tikus wistar (berbahan dasar jagung)
5. Air putih untuk minum tikus wistar setiap harinya
6. Obat general anestesi
7. Larutan Formalin 10% untuk fiksasi jaringan
8. Larutan HNO3,5%, 10%, 15%, untuk dekalsifikasi
9. Alkohol 70%, 95%, 100% untuk dehidrasi
10. Larutan xylol
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
27
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
11. Parafin
12. Larutan Haematoxylin Eosin untuk pengecatan
13. Kapas
4.9 Cara kerja
4.9.1 Persiapan Hewan Coba
a. Memilih 24 ekor tikus wistar jantan usia diantara 2-3 bulan dengan berat
badan 150-250 g.
b. Tikus wistar dibagi menjadi 4 kelompok, masing-masing kelompok terdiri
dari 7 ekor tikus wistar.
4.9.2 Pembuatan gel dari ekstrak daun kelor
Pembuatan gel dari ekstrak daun kelor, terdiri dari 3 tahap yaitu:
1. Persiapan Sampel
Daun kelor diambil dari perkebunan Agrowisata Indomas, Menganti,
Gresik. Sampel berupa daun kelor, dikumpulkan, dicuci dan dikeringkan
dengan temperatur ruang selama 7 hari. Pengeringan bertujuan agar
mendapatkan berat tetap dari daun kelor sesuai berat yang digunakan untuk
ekstrak. Sampel yang sudah kering dihancurkan menggunakan blender.
2. Proses Ekstraksi Daun Kelor
Serbuk kering daun kelor, diekstraksi menggunakan alat ekstraktor
ditambah ethanol 96% dengan perbandingan 1:1. Ekstrak tersebut dimasukkan
dalam rotary flash evaporator (rotavapour) selama 24 jam sehingga diperoleh
filtrat jernihnya. Ekstrak yang terkonsentrasi dievaporasi untuk proses
pengeringan di dalam vacuum oven pada temperatur 50-60oC sampai tercapai
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
28
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
kandungan ethanol yang minimal. 1kg daun kelor + 1liter ethanol kemudian
diuapkan sehingga dapat diperoleh 20-30gr residu ekstrak daun kelor cair
berwarna kehijauan.
3. Pembuatan Sediaan Gel
Pada penelitian ini ekstrak daun kelor dibuat dalam bentuk sediaan
gel. Ekstrak akan lebih mudah diaplikasikan dalam bentuk sediaan gel pada
luka pasca pencabutan gigi karena sifatnya yang semisolid, lembut dan elastik.
Sediaan gel mempermudah substansi ekstrak dapat mudah masuk dalam soket
(Khoswanto, 2010). Bahan gel yang akan digunakan adalah CMC Na 3%
sebanyak 3gr, dimasukkan dalam gelas kemudian ditambah 100ml aquades
diaduk selama 6 jam sehingga diperoleh gel sempurna 3%. Ekstrak daun kelor
15% dimasukkan ke dalam gelas kemudian ditambahkan 85ml gel diaduk
selama 30 menit, sehingga diperoleh gel ekstrak daun kelor.
4.9.3 Proses Pencabutan Gigi Tikus Wistar
1. Tikus wistar dilakukan tindakan pembiusan umum dengan menggunakan
klorofom secara inhalasi dengan dosis letal
2. Tikus wistar dilakukan pencabutan gigi insisif kiri rahang bawah dengan
menggunakan tang.
3. Setelah dilakukan pencabutan, dilakukan irigasi dengan menggunakan
aquadest untuk menghilangkan debris atau sisa-sisa pasca pencabutan gigi.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
29
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
4.9.4 Pembuatan Sediaan Histologis
4.9.4.1 Fiksasi Jaringan
Setelah tikus wistar tidak bernyawa lagi, proses selanjutnya adalah
melakukan pengambilan jaringan tubuh yang diinginkan, yaitu pemotongan
mandibula tikus wistar dengan melakukan insisi dari sudut mulut ke arah posterior
sampai rahang bawah terlepas dari tengkorak, selanjutnya dimasukkan kedalam
larutan fiksasi. Larutan fiksasi yang digunakan adalah larutan formalin 10%, untuk
mencegah perubahan jaringan post mortem agar tidak membusuk, mencegah
autolisis jaringan dan mengeraskan jaringan.
4.9.4.2 Pengolahan Jaringan
Pengolahan dilakukan dengan alat autotechnicom selama 24 jam dengan
tahapan:
a. Dehidrasi
Dehidrasi merupakan proses menarik air dari dalam jaringan dengan
menggunakan alkohol secara bertahap sehingga jaringan dapat diisi parafin
untuk membuat blok preparat. Caranya dengan memasukkan jaringan kedalam
alkohol secara berurutan mulai dari konsentrasi :
a) Alkohol 70% selama 15 menit.
b) Alkohol 80% selama 15 menit.
c) Alkohol 90% selama 15 menit.
d) Alkohol 95% selama 15menit.
e) Alkohol 99% selama 15 menit.
f) Alkohol 100% selama 15 menit.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
30
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
b. Clearing
Clearing atau menjernihkan jaringan, yaitu tahap untuk
mengeluarkan alkohol dari jaringan dan menggantinya dengan suatu larutan yang
dapat berikatan dengan parafin. Jaringan tidak dapat langsung dimasukkan ke
dalam parafin karena alkohol dan parafin tidak bisa saling melarutkan, larutan yang
digunakan adalah xylol. Setelah jaringan dikeluarkan dari cairan dehidrasi, jaringan
dimasukkan ke dalam xylol sebanyak 2 kali masing-masing dilakukan selama 30
menit. Jaringan akan menjadi bening.
c. Impregnasi/Embedding
Merupakan proses untuk mengeluarkan cairan (clearing agent)
dari jaringan dan diganti dengan parafin. Pada tahap ini jaringan harus benar- benar
bebas dari clearing agent karena cairan tersebut dapat mengkristal dan sewaktu
dipotong dengan mikrotom akan menyebabkan jaringan mudah robek. Zat
pembenam (bahan impregnasi) yang digunakan adalah parafin cair panas yang
mempunyai temperatur rendah (melting temperature) kira-kira 560C. Jaringan
kemudian direndam dalam parafin cair 1 dengan titik lebur 560C selama 21⁄2 jam,
kemudian dimasukkan dalam parafin cair 2 selama 4 jam. Setelah itu jaringan siap
dimasukkan dalam blok parafin.
d. Pengecoran (Blocking)
Dengan membuat potongan besi berbentuk huruf L (Leuckhart) 2 tuah
potongan besi disusun di atas lembaran logam hingga rapat dan membentuk ruang
seperti kubus. Tuangkan parafin cair di bagian pinggir tempat pertemuan potongan
besi agar tidak bocor. Selanjutnya parafin dituangkan ke dalam ruangan kubus.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
31
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
e. Pemotongan (mounting)
Dilakukan dengan rotary microtome. Selama pemotongan, suhu blok
diusahakan rendah yaitu 5-10oC, dengan mendinginkan blok dan pisau pemotong
dengan air es agar sediaan tetap basah, sehingga blok dapat terpotong dengan baik.
Blok yang mengandung jaringan lalu dipindahkan secara hati-
hati menggunakan kuas ke dalam waterbath yang temperaturnya diatur 37- 400C
dan biarkan beberapa saat hingga blok parafin tersebut mengembang.
Setelah blok parafin terkembang dengan baik, blok parafin
tersebut ditempelkan pada kaca objek dengan cara memasukkan kaca objek itu ke
dalam waterbath dan menggerakkannya ke arah blok parafin, dengan menggunakan
kuas kemudian dilekatkan pada kaca objek. Setelah melekat kaca objek digerakkan
keluar dari waterbath dengan hati-hati agar blok parafin tidak terlipat.
Kaca objek yang berisi blok parafin diletakkan di atas hotplate/termoplate,
dibiarkan selama beberapa jam. Cara lainnya adalah dengan melewatkan kaca objek
di atas api sehingga blok parafin melekat erat di atas kaca objek.
f. Pengecatan jaringan
Jaringan yang telah dipotong diberi pewarnaan sehingga unsur jaringan
menjadi dapat diamati dengan mikroskop. Kemudian, dilakukan pengecatan
Hematoksilin Harris-Eosin (HE) dengan prosedur sebagai berikut:
1. Deparafinisasi, yang bertujuan menghilangkan parafin yang menempel
pada irisan jaringan sehingga bahan cat dapat melekat. Dilakukan dengan
memasukkan dalam larutan xylol.
2. Dehidrasi dalam larutan alkohol dengan gradasi menurun 100%, 95%, 70%.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
32
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
3. Direndam dalam larutan Hematoksilin Harris selama 15 menit.
4. Dibilas dalam air mengalir dalam waktu yang singkat.
5. Dicelupkan dalam HNO3 secara cepat 3-10 x celup, kemudian dilakukan
pengecekan diferensiasi warna di bawah mikroskop.
6. Dibilas dalam air mengalir dalam waktu yang singkat.
7. Dicelup sebanyak 3-5 kali dalam larutan amonium atau litium
hingga potongan berwarna biru cerah.
8. Dicuci dalam air mengalir selama 10-20 menit. Bila pencucian tidak maksimal
jaringan akan sulit diwarnai oleh Eosin.
9. Direndam dalam Eosin selama 15 detik - 2 menit.
10. Dilakukan dehidrasi dalam alkohol dengan konsentrasi yang
meningkat secara perlahan, masing-masing selama 2 menit.
11. Dimasukkan dalam larutan xylol 2x2 menit.
12. Ditutup dengan kaca penutup dan preparat siap untuk dilakukan
pemeriksaan di bawah mikroskop cahaya.
4.10 Prosedur Pengambilan Data
Pengamatan jaringan secara HPA dari hasil biopsi pada hari ke-3 dan ke-5.
Dilakukan perhitungan jumlah pembuluh darah yang terlihat pada hari tersebut,
kemudian membandingkan jumlah penghitungan pada kelompok perlakuan dan
kelompok kontrol. Peningkatan jumlah pembuluh darah pada permukaan dalam
dari soket gigi merupakan indikator penyembuhan luka.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
33
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
4.11 Pengolahan Data Analisis
Penghitungan jumlah pembuluh darah dilakukan dengan cara melihat
jumlah pembuluh darah pada sediaan dengan menggunakan mikroskop cahaya
pembesaran 400x bertujuan untuk menentukan healing center yang paling luas pada
sediaan yang akan dihitung jumlah pembuluh darah. Pengolahan data pada
penelitian ini akan dilakukan dengan uji independent t-test.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
34
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
4.12 Alur Penelitian
24 ekor tikus wistar
Kelompok K3
(6 tikus wistar)
Kelompok K3
Tanpa pemberian
ekstrak daun
kelor pada hari
ke 3
Pengambilan sampel dari soket gigi tikus, kemudian dibuat
sediaan HPA
Sediaan dilihat di bawah mikroskop dengan pembesaran 400x kemudian
dihitung jumlah pembuluh darah yang ditemukan
Analisis data dengan menggunakan uji statistik independent t-test
Kelompok P5
(6 tikus wistar) Kelompok K5
(6 tikus wistar)
Kelompok P3
(6 tikus wistar)
Kelompok K5
Tanpa pemberian
ekstrak daun
kelor pada hari
ke 5
Kelompok P3
Pemberian gel
CMC Na dengan
ektrak daun kelor
15% pada hari ke 3
Kelompok P5
Pemberian gel
CMC Na dengan
ektrak daun kelor
15% pada hari ke 5
Kontrol Perlakuan
Ekstraksi gigi Ekstraksi gigi Ekstraksi gigi Ekstraksi gigi
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
34
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
BAB 5
HASIL PENELITIAN DAN ANALISIS DATA
5.1 Data hasil penelitian
Data hasil pengamatan diambil dari perhitungan jumlah pembuluh darah
pada hari ke-3 dan ke-5 paska pencabutan gigi tikus wistar yang telah dibuat
sediaan, kemudian diamati dan dihitung menggunakan mikroskop dengan
perbesaran 400x. Jumlah pembuluh darah secara lengkap sebagai berikut:
Tabel 5.1 Jumlah pembuluh darah yang terlihat pada hari ke 3 paska pencabutan
Gambar 5.1 (A) Gambar Lumen pembuluh darah kontrol 3 dengan perbesaran 400x, (B)
Gambar Lumen pembuluh darah perlakuan 3 dengan perbesaran 400x.
A B A
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
35
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
Tabel 5.2 Jumlah pembuluh darah yang terlihat pada hari ke 5 paska pencabutan
5.2 Analisis data
Data hasil penghitungan jumlah pembuluh darah yang telah diperoleh
kemudian diolah menggunakan SPSS dan dilakukan uji statistik independent T-test.
Sebelum melakukan uji independent T-test dilakukan uji normalitas dengan
penghitungan One-sample kolmogrov smirnov test didapatkan angka 0,573; 0,993;
0,272 dan 0,994 yang berarti semua data berdistribusi normal dan didapatkan nilai
standard deviasi yaitu 0,547 dan 2,65. Selanjutnya dilakukan uji independent T-test
diperoleh hasil 0.000 pada hari ke 3 dan 0.119 pada hari ke 5. Hasil tersebut
menunjukkan bahwa pemberian ekstrak daun kelor dengan konsentrasi 15%
menunjukkan perbedaan yang signifikan pada hari ke 3 dan perbedaan yang tidak
signifikan pada hari ke 5.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
36
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
BAB 6
PEMBAHASAN
Pada penelitian ini peneliti menggunakan tikus wistar (Ratus norvegicus)
sebagai hewan coba sejumlah 24 ekor. Tikus dibagi menjadi 4 kelompok yaitu 2
kelompok kontrol dan 2 kelompok perlakuan. Masing-masing tikus perlakuan akan
diberi ekstrak daun kelor dengan konsentrasi 15% dalam bentuk gel pada hari ke 3
dan ke 5 paska pencabutan gigi insisif kiri rahang bawah, kemudian diberi ekstrak
daun kelor dan dilakukan suturing pada soket bekas pencabutan.
Ekstrak daun kelor diaplikasikan pada soket bekas pencabutan dengan
tujuan untuk mengetahui apakah ekstrak tersebut dapat mempercepat proses
angiogenesis. Terdapat beberapa faktor terjadinya proses angiogenesis, salah
satunya ditandai dengan peningkatan jumlah pembuluh darah paska terjadinya luka,
sehingga peneliti menggunakan sediaan pembuluh darah dari soket bekas
pencabutan gigi tikus wistar yang diamati pada hari ke 3 dan ke 5. Pembuluh darah
diamati pada hari ke 3 dan 5 karena pada hari tersebut proses angiogenesis sedang
terjadi secara optimal dan pembuluh darah dapat terlihat jelas (Adair & Montani,
2010). Angiogenesis merupakan salah satu tanda proses penyembuhan luka sedang
berlangsung. Ketika jaringan mengalami luka maka akan terjadi proses
angiogenesis sebagai respon untuk memperbaiki kerusakan jaringan. Pembentukan
angiogenesis tergantung pada keseimbangan faktor angiogenik dan inhibitor
angiogenik. Fakor angiogenik meliputi FGF, angiopoietins, VEGF dan TGF-β.
(Ueno et al, 2006; Li, Chen & Kirsner, 2007). Jaringan pada penyembuhan luka
juga memerlukan oksigen dan nutrisi supaya dapat berproliferasi dengan baik.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
37
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
Dalam penelitian Handoko dan Andriani (2015) menyebutkan bahwa
ekstrak daun kelor 15% berpengaruh terhadap rata-rata waktu perdarahan pada
tikus Sprague-Dawley. Ekstrak daun kelor pada penelitian ini dipilih karena daun
kelor mempunyai kandungan flavonoid dan saponin yang tinggi. Senyawa polifenol
pada flavonoid menunjukkan potensi tertinggi antioksidan dibanding pada bagian
lain dari tanaman kelor. Sedangkan saponin mengandung antioksidan dan anti
bakteri yang dapat mengakibatkan kerusakan membran sel bakteri sehingga dapat
meminimalisir bakteri patogen.
Hasil pengamatan yang telah dilakukan peneliti, jumlah pembuluh darah
pada hari ke 3 paska ekstraksi gigi diamati secara histopatologi diperoleh rata-rata
pembuluh darah kelompok kontrol 3 adalah 5,5 dan kelompok perlakuan 3 adalah
16,3. Sedangkan kelompok kontrol 5 didapatkan rata-rata sebesar 8,6 dan kelompok
perlakuan 5 dengan rata-rata sebesar 11. Dari hasil penghitungan tersebut diketahui
bahwa terjadi peningkatan terbesar pada hari ke 3. Pengamatan ini dilakukan pada
hari ke 3 dimana luka sudah memasuki tahap proliferasi. Pada hari ke 3 sel radang
kronis seperti limfosit dan makrofag mencapai jumlah maksimal. Hipoksia pada
jaringan akan memacu makrofag yang diikuti pelepasan faktor pertumbuhan untuk
menginduksi terjadinya migrasi dan proliferasi sel endotel sehingga menyebabkan
terjadinya angiogenesis. Pembuluh darah yang terbentuk kemudian menembus
matriks fibrin luka dan membentuk jejaring pembuluh darah.
Perbedaan jumlah pembuluh darah pada kelompok kontrol 3 dan kelompok
perlakuan 3 menunjukkan bahwa pemberian ekstrak daun kelor dapat mempercepat
proses penyembuhan luka yang dilihat dari peningkatan jumlah pembuluh darah
secara signifikan. Proses penyembuhan terjadi karena pemberian ekstrak daun kelor
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
38
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
mempunyai kandungan flavonoid, saponin, tanin, klorofil, vitamin K dan
poliphenol yang memberikan nutrisi dan melindungi luka dari bakteri, bersifat anti
inflamasi dan meningkatkan kerja pembuluh darah kapiler.
Flavonoid mampu meingkatkan hormon pertumbuhan yang dibutuhkan saat
proses penyembuhan luka yaitu EGF, TGFα, PDGF, VEGF, FGF dan TGFβ
sehingga proses penyembuhan akan lebih cepat (Li, Chen & Kirsner, 2007).
Sedangkan saponin mempunyai efek hemostatik dengan membantu membentuk
fibrin untuk memperkuat bekuan darah, sehingga proses penyembuhan luka pada
fase hemostatik berlangsung lebih singkat dan mempercepat untuk masuk dalam
fase inflamasi sehingga penyembuhan luka terjadi lebih cepat dari proses fisiologis
umumnya (Venny, 2010).
Berdasarkan hasil analisis statistik, gambaran histologis menunjukkan
bahwa hipotesis diterima dan terdapat perbedaan signifikan pada hari ke 3 yang
berarti pemberian ekstrak daun kelor 15% dapat meningkatkan jumlah pembuluh
darah. Sedangkan pada hari ke 5 terdapat perbedaan yang tidak signifikan antara
kelompok kontrol dan kelompok perlakuan karena pada hari ke 5 sudah menuju
proses kesembuhan.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
39
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
BAB 7
KESIMPULAN DAN SARAN
7.1 Kesimpulan
1. Gel ekstrak daun kelor 15% dapat meningkatkan kecepatan angiogenesis
pada proses penyembuhan luka paska ekstraksi gigi tikus wistar jika
dibandingkan dengan kelompok kontrol.
2. Peningkatan jumlah pembuluh darah tertinggi terjadi pada hari ke 3 paska
pencabutan gigi tikus wistar yang diberi gel ekstrak daun kelor.
7.2 Saran
1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui :
a. Pengamatan pembuluh darah pada hari pertama, kedua dan keempat
untuk mengetahui perubahan yang terjadi secara detail.
b. Penelitian selanjutnya meningkatkan konsentrasi ekstrak daun kelor
untuk mengetahui perbedaan jumlah pembuluh darah dengan
konsentrasi yang berbeda.
c. Toksisitas ekstrak daun kelor sehingga dapat diketahui dosis yang dapat
dikonsumsi.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
40
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
DAFTAR PUSTAKA
Adair dan Montani. 2012. Angiogenesis. San Rafel: Morgan Clay Pool Life
Sciences. Hal 2
Adi, N & Linus, S. 2012. Pengaruh Kadar CMC Na sebagai Bahan Pengental
terhadap Sifat Fisik Lotion Replain Minyak Atsiri Akar Wangi (Vetivera
zizanoides (L) Nogh. Akademi Farmasi Theresiana. Semarang, hal. 18.
Angganisa, H E. 2014. Perbedaan Efektifitas Manajemen Nyeri pasca Ekstraksi
Gigi di Rsud Dr. Soehadi Prijonegoro Sragen dan Puskesmas Sidoharjo
Sragen. Universitas Diponegoro, Fakultas Kedokteran Gigi.
Amijaya, A. P., Sri, Muwarni, Wisnu, Wardhana. 2013. Efek Ekstrak Air Daun
Kelor (Moringa Oleifera) terhadap KadarTumor Necrosis Factor Alpha
(Tnf-Α) dan Gambaran Histopatologi Sel Endotel Arteri Coronaria pada
Tikus Putih (Rattus Norvegicus) yang Diberi Diet Aterogenik. Fakultas
Kedokteran Hewan. Universitas Brawijaya.
Balaji, S.2007. Textbook of Oral and Maxillofacial Surgery 1stEd. New Delhi:
Elseveir.P.211
Bisono.2003.Petunjuk Praktis Operasi Kecil. Jakarta: penerbit buku kedokteran
EGC. Hal. 15-17.
Cockbill.2002.The Healing Process. J hospital pharmacist vol 9. Pp 1-5.
Damayanti, Ika P, Risa, Pitriani, Yulrina Ardhiyanti. 2015. Panduan Lengkap
Keterampilan Dasar Kebidanan II. Yogyakarta: Deepublish. Hal. 66-67.
Faradisa, M. 2008. Uji Efektifitas Antimikroba Senyawa Saponin dari Batang
tanaman Belimbing Wuluh (Averrhoa Bilimbi Linn). Skripsi, Fakultas
sains dan teknologi universitas islam negeri Malang, pp. 24-39.
Friska, Sardoko, Caroline T., Sandra F. 2009. Angiogensis: Patofisiologi dan
Aplikasi Klinis. JKM vol. 8, no. 2. P. 174
Gardner, P.T., T.A.C. White, D.B. McPhail & G.G. Duthie (2000). The relative
contributions of vitamin C, carotenoids and phenolics to the antioxidant
potential of fruit juices. Food Chemistry 68: 471-474
Gulcin, Ilhami, Mshvildadze, Vakhtang, Akcahan, Gepdiremen, Riad Elias. 2004.
Antioxidant Activities from Ivy: α-Hederin, Hederasaponin-C,
Hederacolchiside-E and Hederacolchiside-F. Planta Med. Pp. 561-563.
Handoko, Galang, Andriani, Ika. 2015. Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun
Kelor (Moringa Oleifera) Terhadap Waktu Perdarahan Gingivitis Pada Tikus
Sprague-Dawley. Universitas Muhammadiyah Yogyakarta.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
41
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
Indonesia Enterostomal Therapy Nurse Association (InETNA). 2004. Perawatan
Luka. Makalah Mandiri. Jakarta: RS Dharmais. Hal 13
Juliantina., Farida R. Manfaat Sirih (Piper crocatum) sebagai Agen Anti Bakterial
terhadap Gram Positif dan Gram Negatif. JKKI – Jurnal Kedokteran dan
Kesehatan Indonesia; 2009 No 1 (I).H.5.
Juniantito, V & Prasetyo. 2006. Aktivitas Sediaan Gel dari Ekstrak Lidah Buaya
(Aloe barbadensis Mill.) pada Proses Penyembuhan Luka Mencit (Mus
musculus albinus). J II Pert Indon. vol. 11, no. 1, hal. 19.
Khoswanto, C 2010, The Effect of Mengkudu Gel (Morinda citrifolia Linn.) In
Accelerating the Escalation of Fibroblast Post Extraction. Dent J. vol. 43,
no.1, pp. 32, 33.
Katharina, Simbolan, J.M., M. Simbolan. 2007. Cegah Malnutrisi dengan Kelor.
Yogyakarta: Kanisius.
Krisnadi, A. D. (2008). KELOR Super Nutrisi. Blora, Jawa Tengah, Indonesia:
KELORINA.
Li, J., Chen, J., Kirsner, R. 2007. Pathophysiology of Acute Wound Healing. J.
Dermatology. vol 25. no 1, pp 9-18.
Marais, Jannie P.J., Betina, Deavours, Richard A., Dixon, Ferreira, Daneel. 2006.
The Stereochemistry of Flavonoid. New York: Springer. P. 1-2.
Miloro M., 2004. Peterson’s Prinviples of Oral and Maxillofacial Surgery 2nd Ed.
BC Decker Inc. London pp.3-5.
Moenadjat Y. 2009. Luka Bakar: Masalah dan Tata Laksana. Jakarta: Fakultas
Kedokteran Universitas Indonesia.
Pambudi, Ari P. 2013. Uji Daya Antibakteri Ekstrak Daun Kelor (Moringa oleifera)
terhadap Bakteri Edwardsisella tarda Secara In Vitro. Universitas Airlangga.
Pederson W. Gordon. 1996. Buku Ajar Praktis Bedah Mulut. 1st ed, Penerbit Buku
Kedokteran. EGC. Jakarta: pp. 36-44, 60.
Permatasari KI, Periadnadi, Nasir N. 2013. Uji antimikroba ekstrak segar jahe-
jahean (Zingiberaceae) terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli dan
Candida albicans. Jurnal Biologi Universitas Andalas. 2(1): pp. 20-4
Pramesti. 2012. Luka akut dan Luka Kronik. Available from http://dokumen.tips/
documents/makalah-luka-akut-kronik.html
Pramono E. 2002. The Commercial use of Traditional Knowledge and Medicinal
Plant in Indonesia. Submitted for multi-stakeholder dialogue on trade,
intellectual property and biological resources in Asia. P. 59
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
42
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
Pusponegoro AD, 2005. Luka Dalam: Buku Ajar Ilmu Bedah 2nd . Jakarta: EGC.
Pp 66-88.
Rachmawati, F., M.C. Nuria, Sumantri. 2010. Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi
Kloroform Ekstrak Etanol Etanol Pegagan (Centella asiatica (L) Urb) serta
Identifikasi Senyawa Aktifnya. Universitas Wahid Hasyim. Semarang.
Rajalakshmi, D dan S. Narasimhan. 1985. Food Antioxidants: Sources and Methods
of Evaluation. Dalam D.L. Madhav., Food Antioxidant, Technological,
Toxilogical and Health Perspectives. Hongkong: Marcel Dekker Inc.
Ravindra, V., Karadi, Avneet, B., Gadge,, K. R., and Alagawadi, R. V. S. 2005.
Effect of Moringa oleifera Lam. root-wood on ethylene glycol induced
urolithiasis in rats. K.L.E.S's College of Pharmacy, India. Journal of
Ethnopharmacology Volume 105, Issues 1–2, 21 April 2006, pages 306–311
Setyawan, Ari. 2007. Na-CMC. Universitas Brawijaya.
Shahid, I., Bhanger, M. I. 2004. Effect of Season And Production Locatio on
Antioxidant Activity of Moringa Oleifera Leaves Grown In Pakistan.
University of Sindh, Pakistan. Journal of Food Composition and Analysis
Volume 19, Issues 6–7, September– November 2006, pages 544–551
Sihombing C.N., Nasrul W., & Taofik R.. 2009. Formulasi Gel Antioksidan Ekstrak
Buah Buncis (Phaseolus vulgaris L.) dengan Menggunakan Basis Aquapec
505 HV. Jurnal Farmaka. 7 : 3.
Singer AJ, Clark RAF. 1999. Cutaneous wound healing. The New England J of Med
341 : 738 – 746
Sofianty, Dian. 2010. Minimalisir Trauma Pencabutan Gigi di Puskesmas.
http://www/surabayahealth.org/berita/minimalisir-traumapencabutan-gigi-
di-puskesmas.html. Diakses tanggal 8 Maret 2016
Ueno, C., Hunt, T. K., Hopf, H.W. 2006. Using physiology to Improve Surgical
Wound Outcomes. J. Plastic reconstruction Surgery. Vol. 1, pp 59-71.
Unuigbe, Charles, Henry A. Okeri, Osayemwenre Erharuyi , Emmanuel E.
Oghenero1 and Dominic A. Obamedo. 2014. Phytochemical and antioxidant
evaluation of Moringa oleifera (Moringaceae) leaf and seed. Vol. 11 no. 2,
pp. 51-57.
Venny LA,. 2010. Percepatan Pembekuan Darah Ekstrak Etanol Daun Sendok
(Plantago mayor L.). Skripsi Faskultas Kedokteran Gigi Universitas
Airlangga Surabaya: p. 7
William, W. Li, Vincent, W. Li. 2003. Angiogenesis in Wound Healing. Dowden
Health Media. New York. P.5.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
43
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
Yudistira, F. A., Murwani, S dan Trisunuwati, P. 2013. Potensi Antimikroba
Ekstrak Air Daun Kelor (Moringa oleifera) Terhadap Salmonella enteritidis
(SP-1-PKH) Secara In Vitro. Program Kedokteran Hewan, Universitas
Brawijaya. Malang. Hal.4-5.
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
44
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
LAMPIRAN
1. Keterangan laik etik
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
45
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
2. Tabel Hasil Penelitian
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
46
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
3. Kandungan Ekstrak Daun Kelor
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
47
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
4. Proses Penelitian
Tikus wistar diadaptasi selama
7 hari
Tikus wistar dianastesi
menggunakan ketamin
Dilakukan pencabutan gigi
insisif rahang bawah
Pemberian gel ekstrak daun
kelor 15%
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
48
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
5. Hasil Uji Statistik
1. Uji Distribusi Normal
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
Kontrol 3 ∑ Pembuluh
Darah Kontrol 5
∑ Pembuluh
Darah
N 6 6 6 6
Normal
Parameters
(a,b)
Mean 5.5000 16.3300 8.6667 11.0000
Std. Deviation 0.54772 2.65832 0.51640 3.03315
Most
Extreme
Differences
Absolute 0.319 0.175 0.407 0.172
Positive 0.319 0.158 0.259 0.167
Negative -0.319 -0.175 -0.407 -0.172
Kolmogorov-Smirnof Z 0.782 0.430 0.998 0.421
Asymp. Sig. (2-tailed) 0.573 0.993 0.272 0.994
a. Test distribution is normal
b. Calculated from data
2. Independent t – Test Kelompok 3
Group Statistic
Group N Mean Std. Deviation Std. Error
Mean
Ekstrak Daun Kelor
Kontrol 3 6 5.5000 0.54772 0.22361
Pembuluh
Darah 3 6 16.3333 2.65832 1.08525
Independent Sample Test
Levene's Test
for Equality of
Variances
t-test for Equality of Means
F Sig. t df
Sig.
(2-
tailed)
Mean
Differenc
e
Std. Error
Difference
95% Confidence
Interval of the
Difference
Lower Upper Lower Upper Lower Upper Lower Upper Lower
Ekstrak
Daun
Kelor
Equal
Variances
Assumed
5.956 0.035 -9.777 10 0.000 -10.83333 1.10805 -13.30223 -8.36444
Equal
Variances
not
Assumed
-9.777 5.424 0.000 -10.83333 1.10805 -13.61602 -8.05065
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
49
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
3. Independent t – Test Kelompok 5
Group Statistic
Group N Mean Std. Deviation Std. Error
Mean
Ekstrak Daun Kelor
Kontrol 3 6 5.5000 0.54772 0.22361
Pembuluh
Darah 3 6 16.3333 2.65832 1.08525
Independent Sample Test
Levene's Test
for Equality of
Variances
t-test for Equality of Means
F Sig. t df Sig. (2-
tailed)
Mean
Difference
Std. Error
Difference
95% Confidence
Interval of the
Difference
Lower Upper Lower Upper Lower Upper Lower Upper Lower
Ekstrak
Daun
Kelor
Equal
Variances
Assumed
7.940 0.018 -1.858 10 0.093 -2.33333 1.25610 -5.13209 0.46542
Equal
Variances
not Assumed
-1.858 5.29 0.119 -2.33333 1.25610 -5.50978 0.84311
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K
50
ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN ... ELOK AMANDA K
6. Preparat Pembuluh Darah
Pembuluh darah kontrol hari ke 3 Pembuluh darah perlakuan hari ke 3
Pembuluh darah kontrol hari ke 5 Pembuluh darah perlakuan hari ke 5
ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI PENGARUH EKSTRAK DAUN.... ELOK AMANDA K