8/2/2019 Gula Pereduksi Merupakan Golongan Gula

1/8

Gula pereduksi merupakan golongan gula (karbohidrat) yang dapat mereduksi senyawa-senyawa

penerima elektron, contohnya adalah glukosa dan fruktosa.[1] Ujung dari suatu gula pereduksi adalah

ujung yang mengandung gugus aldehida atau keto bebas. Semua monosakarida (glukosa, fruktosa,

galaktosa) dan disakarida (laktosa,maltosa), kecuali sukrosa dan pati (polisakarida), termasuk sebagai

gula pereduksi.[1] Umumnya gula pereduksi yang dihasilkan berhubungan erat dengan aktifitas enzim,

dimana semakin tinggi aktifitas enzim maka semakin tinggi pula gula pereduksi yang dihasilkan.[1]

Jumlah gula pereduksi yang dihasilkan selama reaksi diukur dengan menggunakan pereaksi asam dinitro

salisilat/dinitrosalycilic acid (DNS) pada panjang gelombang 540 nm.[1] Semakin tinggi nilai absorbansi

yang dihasilkan, semakin banyak pula gula pereduksi yang terkandung.[2]

glucose

fructose

UJI IDENTIFIKASI KARBOHIDRAT

Posted: 19 November 2010 inall about my task

0

A. Tujuan

Memahami metode identifikasi karbohidrat.B. Teori Dasar

Karbohidrat adalah polihidroksi aldehida atau keton dengan rumus empirik (CH2O)n, dapatdiubah menjadi aldehida dan keton dengan cara hidrolisis, disusun oleh dua sampai delapan

monosakarida yang dirujuk sebagai oligosakarida. Karbohidrat tersebar luas baik dalam jaringan

hewan maupun jaringan tumbuh-tumbuhan. Dalam tumbuh-tumbuhan, karbohidrat dihasilkanoleh fotosintesis dan mencakup selulosa serta pati. Pada jaringan hewan, karbohidrat berbentuk

glukosa dan glikogen. Fungsi karbohidrat yaitu, untuk sumber energi, pemanis pada makanan,

penghemat protein, pengatur metabolisme lemak, penawar racun, baik untuk yang terkena

konstipasi (sembelit), dan masih banyak lagi manfaat-manfaat yang lainnya.Pada umumnya karbohidrat merupakan zat padat berwarna putih yang sukar larut dalam pelarut

organik tetapi larut dalam air (kecuali beberapa polisakarida). Karbohidrat dibagi dalam tiga

http://nikku92.wordpress.com/category/uncategorized/all-about-my-task/http://nikku92.wordpress.com/category/uncategorized/all-about-my-task/http://nikku92.wordpress.com/category/uncategorized/all-about-my-task/http://nikku92.wordpress.com/2010/11/19/uji-identifikasi-karbohidrat/#respondhttp://nikku92.wordpress.com/2010/11/19/uji-identifikasi-karbohidrat/#respondhttp://nikku92.wordpress.com/2010/11/19/uji-identifikasi-karbohidrat/#respondhttp://nikku92.wordpress.com/category/uncategorized/all-about-my-task/

8/2/2019 Gula Pereduksi Merupakan Golongan Gula

2/8

golongan yaitu :

1. Monosakarida; adalah karbohidrat yang tidak dapat dihidrolisis menjadi bentuk yang lebihsederhana lagi, dapat dibedakan berdasarkan banyaknya atom C pada molekulnya, dan gugus

aldehid atau keton yang dikandung berubah menjadi aldosa dan ketosa. Monosakarida

merupakan gula sederhana yang memiliki satu atom karbon asimetrik, contoh : glukosa,

galaktosa, fruktosa, manosa, dan ribosa.2. Oligosakarida; adalah karbohidrat yang tersusun dari dua sampai sepuluh molekul

monosakarida yang digabungkan oleh ikatan kovalen. Biasanya dikenal dengan disakarida,

contoh : maltosa, laktosa, dan sukrosa.3. Polisakarida; adalah karbohidrat yang mengandung lebih dari sepuluh monosakarida yang

berikatan. Bila dihidrolisis dapat menghasilkan lebih dari 6 molekul monosakarida, contoh :

glikogen dan amilum (pati) merupakan polimer glukosa. Berfungsi untuk penyimpanankarbohidrat.

Ada beberapa metode uji kualitatif karbohidrat :

1. Uji Molisch

Adalah uji untuk membuktikan adanya karbohidrat. Uji ini efektif untuk berbagai senyawa yang

dapat di dehidrasi menjadi furfural atau substitusi furfural oleh asam sulfat pekat. Senyawafurfural akan membentuk kompleks dengan -naftol yang dikandung pereaksi Molisch dengan

memberikan warna ungu pada larutan.2. Uji Benedict

Adalah uji untuk membuktikan adanya gula pereduksi. Gula pereduksi adalah gula yang

mengalami reaksi hidrolisis dan bisa diurai menjadi sedikitnya dua buah monosakarida.Karateristiknya tidak bisa larut atau bereaksi secara langsung dengan Benedict, contohnya semua

golongan monosakarida, sedangkan gula non pereduksi struktur gulanya berbentuk siklik yang

berarti bahwa hemiasetal dan hemiketalnya tidak berada dalam kesetimbangannya, contohnya

fruktosa dan sukrosa. Dengan prinsip berdasarkan reduksi Cu2+ menjadi Cu+ yang mengendapsebagai Cu2O berwarna merah bata. Untuk menghindari pengendapan CuCO3 pada larutan

natrium karbonat (reagen Benedict), maka ditambahkan asam sitrat. Larutan tembaga alkalis

dapat direduksi oleh karbohidrat yang mempunyai gugus aldehid atau monoketon bebas,

sehingga sukrosa yang tidak mengandung aldehid atau keton bebas tidak dapat mereduksi larutanBenedict.

3. Uji Barfoed

Adalah uji untuk membedakan monosakarida dan disakarida dengan mengontrol kondisi pHserta waktu pemanasan. Prinsipnya berdasarkan reduksi Cu2+ menjadi Cu+. Reagen Barfoed

mengandung senyawa tembaga asetat.

4. Uji SeliwanoffPrinsipnya berdasarkan konversi fruktosa menjadi asam levulinat dan hidroksimetil furfural oleh

asam hidroklorida panas dan terjadi kondensasi hidroksimetilfurfural dengan resorsinol yang

menghasilkan senyawa berwarna merah, reaksi ini spesifik untuk ketosa. Sukrosa yang mudah

dihidrolisis menjadi glukosa dan fruktosa akan memberikan reaksi positif dengan uji seliwanoffyang akan memberikan warna jingga pada larutan.

5. Uji Hidrolisis PatiPati dan iodium membentuk ikatan kompleks berwarna biru. Pati dalam suasana asam bila

dipanaskan dapat terhidrolisis menjadi senyawa yang lebih sederhana, hasilnya diuji dengan

iodium yang akan memberikan warna biru sampai tidak berwarna dan hasil akhir ditegaskan

8/2/2019 Gula Pereduksi Merupakan Golongan Gula

3/8

dengan uji Benedict.

C. Alat dan Bahan

Alat :- Pipet tetes

- Tabung reaksi

- Rak tabung reaksi- Gelas ukur

- Penangas air (hot plate)

- Stirrer- Kertas saring

- Kertas lakmus

- Plat tetes- Penjepit kayu

Bahan :

- Larutan Iodium 0,05 M

- Larutan NaOH 2 %- Larutan HCl 2 N

Pereaksi :- Pereaksi Molisch

- Pereaksi Benedict

- Pereaksi Barfoed

- Pereaksi SeliwanoffLarutan Karbohidrat :

- 0,1 M Sukrosa

- 0,1 M Glukosa

- 0,1 M Arabinosa

- 0,1 M Maltosa- 0,1 M Galaktosa

- 0,1 M Fruktosa- 0,1 M Laktosa

- Larutan Pati (amilum) 1%

D. Prosedur Percobaan

Uji Molisch3 tetes pereaksi Molisch

1 ml larutan karbohidrat ( 0,1 M glukosa, sukrosa, maltosa, arabinosa, larutan 1% amilum, dan

selulosa/kapas yang disuspensikan dalam air.)

Dikocok perlahan

1 ml asam sulfat pekat

Uji Benedict3 tetes larutan karbohidrat

8/2/2019 Gula Pereduksi Merupakan Golongan Gula

4/8

dimasukkan

Tabung reaksi 2 ml reagen Benedict

Penangas air mendidih selama 3 menit

Dibiarkan dingin dan diperhatikan perubahan warna serta endapan (endapan hijau, kuning ataumerah, menunjukkan reaksi positif).

Uji Barfoed

1 ml larutan karbohidrat

Tabung reaksi 1 ml reagen Barfoed segar

Penangas air mendidih dan direbus selama 1 menit atau lebih. Jika perlu hingga reaksi reduksiterjadi. Biarkan dingin pada air mengalir selama 2 menit.

Uji Seliwanoff3 tetes larutan karbohidrat (sukrosa, galaktosa, fruktosa, glukosa, arabinosa)

dimasukkan

3 ml pereaksi Seliwanoffdididihkan di atas api kecil selama 30 detik

Penangas air mendidih 1 menit

Perubahan warna merah jingga dan endapan, menunjukkan reaksi positif ketosa. Bila endapan

dilarutkan dalam alkohol menjadi merah.

Uji Hidrolisis Pati

Tabung reaksi 5 ml amilum 1%

2,5 ml HCl 2 N

Dikocok sampai tercampur

Penangas air mendidihSetelah 3 menit

Uji dengan Iodium : 2 tetes larutan + 2 tetes Iodium dalam plat tetes

Perubahan warna dicatat dan diamati

Uji Iodium dilakukan setiap 3 menit sampai hasil larutan berwarna kuning pucat

Hidrolisis dilanjutkan 5 menit lagi

didinginkan2 ml larutan hasil hidrolisis diambil

dinetralkan

NaOH 2 %, lalu diuji kertas lakmus merah

8/2/2019 Gula Pereduksi Merupakan Golongan Gula

5/8

diuji

Pereaksi Benedict

Apa yang dihasilkan dari hidrolisis pati disimpulkan

E. Data Pengamatan

Pada uji molisch direaksikan berbagai macam larutan karbohidrat seperti : glukosa, sukrosa,maltosa, arabinosa, amilum 1 %, selulosa, dengan pereaksi molisch. Pereaksi molisch memiliki

bentuk larutan dan berwarna jingga sedangkan macam-macam larutan karbohidrat berwarnaputih bening.

Pereaksi Molisch + Glukosa Larutan berwarna putih keruh, dan ada endapan putih yangmengapung-ngapung.

+ H2SO4 Larutan menjadi dua lapis, lapisan atas berwarna putih keruh dengan endapan putihdan lapisan bawah berwarna putih dan endapan berwarna ungu.

Pereaksi Molisch + Sukrosa Larutan berwarna putih keruh, dan ada endapan putih yangmengapung-ngapung.

+ H2SO4 Larutan menjadi dua lapis, lapisan atas berwarna putih keruh dengan endapan putih

dan lapisan bawah berwarna putih dan endapan berwarna hitam. Pereaksi Molisch + Maltosa Larutan berwarna putih keruh, dan ada endapan putih yangmengapung-ngapung.

+ H2SO4 Larutan menjadi dua lapis, lapisan atas berwarna putih keruh dengan endapan putih

dan lapisan bawah berwarna putih dan endapan berwarna hitam.

Pereaksi Molisch + Arabinosa Larutan berwarna putih keruh, dan ada endapan putih yangmengapung-ngapung.

+ H2SO4 Larutan menjadi dua lapis, lapisan atas berwarna putih keruh dengan endapan putih

dan lapisan bawah berwarna putih dan endapan berwarna ungu kehitaman.

Pereaksi Molisch + Amilum 1% Larutan berwarna putih keruh, dan ada endapan putih yangmengapung-ngapung.

+ H2SO4 Larutan menjadi dua lapis, lapisan atas berwarna putih keruh dengan endapan putihdan lapisan bawah berwarna putih dan endapan berwarna ungu.

Pereaksi Molisch + Selulosa Selulosa menjadi berwarna jingga.

+ H2SO4 Selulosa bagian atas berwarna putih bening agak kehijauan, bagian tengahnyaberwarna hijau kehitaman, dan bagian bawahnya berwarna hitam.

Dalam uji Benedict direaksikan berbagai macam larutan karbohidrat seperti : fruktosa, galaktosa,

maltosa, glukosa, sukrosa, dan arabinosa. Reagen Benedict memiliki bentuk larutan danberwarna biru sedangkan macam-macam larutan karbohidrat berwarna putih bening.

Reagen Benedict + Fruktosa Larutan tetap berwarna biru, tidak berubah.

Reagen Benedict + Galaktosa Endapan berwarna merah.

Reagen Benedict + Maltosa Endapan berwarna merah.

Reagen Benedict + Glukosa Endapan berwarna merah.

Reagen Benedict + Sukrosa Larutan tetap berwarna biru, tidak berubah.

Reagen Benedict + Arabinosa Endapan berwarna merah.Uji Barfoed direaksikan berbagai macam larutan karbohidrat seperti : laktosa, fruktosa,

galaktosa, maltosa, arabinosa, glukosa, sukrosa, amilum. Reagen Barfoed memiliki bentuk

larutan dan berwarna biru sedangkan macam-macam larutan karbohidrat berwarna putih bening.

Reagen Barfoed + Laktosa tidak ada perubahan warna.

8/2/2019 Gula Pereduksi Merupakan Golongan Gula

6/8

Reagen Barfoed + Fruktosa tidak ada perubahan warna.

Reagen Barfoed + Galaktosa tidak ada perubahan warna.

Reagen Barfoed + Maltosa tidak ada perubahan warna.

Reagen Barfoed + Arabinosa tidak ada perubahan warna.

Reagen Barfoed + Glukosa tidak ada perubahan warna.

Reagen Barfoed + Sukrosa tidak ada perubahan warna. Reagen Barfoed + Amilum larutan berwarna biru keruh, dan terbagi dua lapisan. Lapisan atas

adalah amilum, lapisan bawah adalah reagen barfoed.Uji Seliwanoff direaksikan berbagai macam larutan karbohidrat seperti : sukrosa, galaktosa,

fruktosa, glukosa, arabinosa. Reagen Seliwanoff berbentuk larutan berwarna bening, dan macam-

macam larutan karbohidrat berwarna putih bening.

Reagen Seliwanoff + Sukrosa setelah dipanaskan 20 menit berubah warna menjadi merahjingga.

Reagen Seliwanoff + Galaktosa setelah dipanaskan berubah warna menjadi jingga pucat.

Reagen Seliwanoff + Fruktosa setelah dipanaskan 50 menit berubah warna menjadi merahjingga.

Reagen Seliwanoff + Glukosa setelah dipanaskan berubah warna menjadi jingga pucat.

Reagen Seliwanoff + Arabinosa setelah dipanaskan berubah warna menjadi jingga pucat.Pada uji hidrolisis pati, amilum 1% direaksikan dengan HCl 2 N. Larutan amilum memiliki

bentuk larutan yang berwarna putih keruh sedangkan HCl 2 N memiliki bentuk larutan berwarna

putih bening. Setelah direaksikan hasil larutan berwarna putih agak bening, dan dihidrolisiswarna menjadi semakin bening. Kemudian hasil hidrolisis diambil 2 tetes dan direaksikan

dengan 2 tetes iodium yang berwarna jingga, hasilnya larutan berubah warna menjadi ungu

kehitaman. Lalu, hasil hidrolisis tadi diuji menggunakan kertas lakmus merah dan hasilnya kertas

lakmus tidak berubah menjadi biru. Terakhir, setelah diuji dengan kertas lakmus hasil hidrolisisdiuji dengan pereaksi Benedict. Hasilnya tidak ada perubahan warna apapun, larutan tetap

berwarna bening.

F. PembahasanPereaksi molisch terdiri dari -naftol dalam alkohol yang akan bereaksi dengan furfural

membentuk senyawa kompleks berwarna ungu yang disebabkan oleh daya dehidrasi asam sulfat

pekat terhadap karbohidrat dan akan membentuk cincin berwarna ungu pada larutan glukosa,fruktosa, sukrosa, laktosa, maltosa, arabinosa, dan pati. Hal ini menunjukkan bahwa uji molisch

sangat spesifik untuk membuktikan adanya karbohidrat. Tujuan ditambahkannya asam sulfat

pekat adalah untuk menghidrolisis ikatan pada sakarida agar menghasilkan furfural. Hasil reaksi

yang positif menunjukkan bahwa larutan yang diuji mengandung karbohidrat, sedangkan hasilreaksi yang negatif menunjukkan bahwa larutan yang diuji tidak mengandung karbohidrat.

Terbentuknya cincin ungu menyatakan reaksi positif, pada percobaan yang memberikan reaksi

positif adalah glukosa, sukrosa, maltosa, arabinosa, dan amilum. Dalam hasil percobaan, hampir

seluruhnya larutan karbohidrat yang direaksikan dengan asam sulfat pekat memebentuk larutanmenjadi dua lapisan dan pada bidang batas kedua lapisan tersebut akan terbentuk cincin ungu

yang disebut kwnoid.

8/2/2019 Gula Pereduksi Merupakan Golongan Gula

7/8

Reaksi uji Molisch :

Pada uji Benedict larutan tembaga alkalis akan direduksi oleh gula yang mempunyai gugus

aldehid atau keton bebas dengan membentuk kuproksida yang berwarna. Gula pereduksi beraksi

dengan pereaksi menghasilkan endapan merah bata (Cu2O). Pada gula pereduksi terdapat gugusaldehid dan OH laktol. OH laktol adalah OH yang terikat pada atom C pertama yang menentukan

karbohidrat sebagai gula pereduksi atau bukan. Sekalipun aldosa atau ketosa berada dalam

bentuk sikliknya, namun bentuk ini berada dalam kesetimbangannya dengan sejumlah kecil

aldehida atau keton rantai terbuka, sehingga gugus aldehida atau keton ini dapat mereduksiberbagai macam reduktor. Hasil uji positif ditunjukkan oleh galaktosa, glukosa, maltosa, dan

arabinosa, sedangkan untuk karbohidrat jenis fruktosa, sukrosa dan pati menunjukkan hasilnegatif. Fruktosa memberikan hasil yang negatif yang seharusnya memberikan hasil positif,

karena fruktosa bukanlah gula pereduksi. Tetapi memiliki gugus -hidroksi keton, maka fruktosaakan berubah menjadi glukosa dan manosa dalam suasana basa serta memberikan hasil positif

dengan pereaksi benedict. Sedangkan sukrosa tersusun oleh glukosa dan fruktosa, namun atom

karbon anomerik keduanya saling terikat, sehingga pada setiap unit monosakarida tidak lagiterdapat gugus aldehida atau keton yang dapat bermutarotasi menjadi rantai terbuka, hal ini

menyebabkan sukrosa tak dapat mereduksi pereaksi Benedict.

Reaksi uji Benedict :O O|| [o] ||

RCH + Cu2+ OH- RCOH + Cu2O (merah bata)

Pada percobaan uji Barfoed, karbohidrat direduksi pada suasana asam. Dalam asam, polisakarida

atau disakarida akan terhidrolisis parsial menjadi sebagian kecil monomernya. Hal inilah yang

menjadi dasar untuk membedakan antara monosakarida, oligosakarida/disakarida, danpolisakarida. Monomer gula dalam hal ini bereaksi dengan fosfomolibdat membentuk senyawa

berwarna biru. Dibanding dengan monosakarida, polisakarida yang terhidrolisis oleh asam

mempunyai kadar monosakarida yang lebih kecil, sehingga intensitas warna biru yang dihasilkanlebih kecil dibandingkan dengan larutan monosakarida. Disakarida juga akan memberikan hasil

positif pada larutan memberikan warna biru dan bagian bawah terdapat endapan kemerahan bila

didihkan cukup lama hingga terjadi hidrolisis. Tapi dalam percobaan, hasil yang diperoleh sama

sekali tidak ada yang memberikan hasil yang positif, melainkan tidak ada perubahan warna samasekali. Hal ini terjadi dikarenakan proses hidrolisis kurang cukup waktu dan suhu yang masih

kurang panas.

Reaksi karbohidrat dengan Cu pada uji Barfoed :O O

RCH + CuCH3COO RCOH + Cu2O (s) + CH3COOH

http://nikku92.files.wordpress.com/2010/11/uji-molisch.jpg

8/2/2019 Gula Pereduksi Merupakan Golongan Gula

8/8

Di dalam uji Seliwanoff ada pembentukan 4-hidroksimetilfurfural yang terjadi pada reaksi antara

fruktosa, sukrosa, galaktosa, glukosa, dan arabinosa yang mendasari uji seliwanof. Fruktosamerupakan ketosa, dan sukrosa terbentuk atas glukosa dan fruktosa, sehingga reaksi dengan

pereaksi Seliwanof akan menghasilkan senyawa berwarna jingga. Warna jingga yang muncul

disebabkan oleh senyawa kompleks. Dalam percobaan yang dilakukan sukrosa dan fruktosa

memberikan warna merah jingga, sedangkan pada galaktosa, glukosa, dan arabinosa memberikanwarna jingga pucat. Hidroksimetilfurfural yang mengalami kondensasi akan membentuk

senyawa kompleks.

Reaksi uji Seliwanoff :

Pada percobaan uji hidrolisis pati, amilum yang direaksikan dengan HCl menjadi berwarna

bening kemudian dihidrolisis dan ditambahkan dengan iodium menghasilkan warna ungu

kehitaman. Hal ini karena ada dua macam amilum atau pati, yaitu pati yang larut dan pati yangtidak larut. Contoh pati yang larut adalah amilosa, dan pati yang tidak larut adalah amilofektin.

Jika amilosa direaksikan dengan iodium maka akan berwarna biru, sedangkan jika amilofektin

direaksikan dengan iodium akan memberikan warna ungu kehitaman. Jadi, hasil yang diperolehmerupakan jenis pati yang yang tidak larut, yaitu amilofektin.

G. Kesimpulan

Karbohidrat adalah polihidroksi aldehida atau keton dengan rumus empirik (CH2O)n, dapat

diubah menjadi aldehida dan keton dengan cara hidrolisis.

Karbohidrat dibagi dalam tiga golongan yaitu : monosakarida, oligosakarida/disakarida, danpolisakarida.

Uji Molisch : uji untuk membuktikan adanya karbohidrat dengan memberikan warna ungupada larutan. Uji Benedict : uji untuk membuktikan adanya gula pereduksi, dengan memberikan

warna merah bata pada karbohidrat. Uji Barfoed : uji untuk membedakan monosakarida dan

disakarida. Uji Seliwanoff : prinsipnya berdasarkan konversi fruktosa menjadi asam levulinatdan hidroksimetil furfural oleh asam hidroklorida panas dan terjadi kondensasi

hidroksimetilfurfural dengan resorsinol yang menghasilkan senyawa berwarna merah. Uji

Hidrolisis Pati : untuk mengetahui kelarutan amilum, dengan mereaksikan pati dan iodium yangakan membentuk ikatan kompleks berwarna biru.

H. Daftar Pustaka

Murray RF; Granner OK; Rodwell V. Harpers Review of Biochemistry. Penerbit : BukuKedokteran. Jakarta. 1995.

Lehninger.1982. Dasar-Dasar Biokimia. Penerjemah : Maggy Thenawijaya. Jakarta. Erlangga.

Hart, Harold. 1983. Kimia Organik. Jakarta. Erlangga.

Anonim. Penuntun Praktikum Kimia Dasar Umum. Universitas Indonesia FMIPA Jurusan

Kimia. 1998 : 115-118.

http://nikku92.files.wordpress.com/2010/11/600px-seliwanow-svg.png