calophyllum soulattri burm. f) · gambar 34. 1,17 korelasi karbon c 17,49 ppm dengan proton h ppm...

i

ISOLASI DAN ELUSIDASI STRUKTUR SENYAWA 4-

STIGMASTENA-3-ON DAN 4,22-STIGMASTADIENA-3-ON

DARI DAUN SLATRI

(Calophyllum soulattri Burm. f)

Disusun Oleh :

FRILIA ELFANI PUTRI

M0312023

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi sebagian persyaratan mendapatkan gelar

Sarjana Sains Bidang Ilmu Kimia

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

SURAKARTA

Mei, 2017

HALAMAN PENGESAHAN

SkriPsi

Isolasi dan Elusidasi Struktur Senyawa 4-stigmastena-3-on dan4?2'

stigmastadiena-3-on dari Daun Slatri (calophyllum soulufrti Bum. F)

FRILIA ELFANI PUTRI

M0312023

Skripsi ini dibimbing oleh:

nipe,rtaha*kan di depan Tim Penguji Slripsi pda :

Tarygal : 15 Mei 2017

Anggota Tim Penguji :

1. Dr.rer.nat. Maulidan Firdarx, M.ScNP. 19790205 200501 1001

2. Tegr$ Endah Sraswati, M.Sc-, Ph.D

NIP: 19790326200s0r 20tr :

Kepala Progr*m Studi Kimia

NIP. 19760E22 200s01 l00l

ffifi

i

PERNYATAAN

Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi saya yang berjudul “ISOLASI

DAN ELUSIDASI STRUKTUR SENYAWA 4-STIGMASTENA-3-ON DAN

4,22-STIGMASTADIENA-3-ON DARI DAUN SLATRI (Calophyllum soulattri

Burm. F)” adalah benar-benar hasil penelitian sendiri dan tidak terdapat karya

yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan

tinggi dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat kerja, pendapat yang

pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu

dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Surakarta, Mei 2017

Frilia Elfani Putri

ii

ISOLASI DAN ELUSIDASI STRUKTUR SENYAWA 4-

STIGMASTENA-3-ON DAN 4,22-STIGMASTADIENA-3-ON

DARI DAUN SLATRI


FRILIA ELFANI PUTRI

Prodi Kimia. Fakultas MIPA. Universitas Sebelas Maret

ABSTRAK

Calophyllum soulattri yang dikenal sebagai "slatri" di jawa tengah biasa

digunakan sebagai obat tradisional penyakit kulit. C. soulattri mengandung

senyawa terpenoid, steroid, kumarin, kromanon dan santon. Senyawa steroid

memiliki beberapa aktivitas biologis seperti antiinflamasi, antibakteri dan

antijamur. Pada penelitian ini, isolasi senyawa steroid dari daun C. soulattri

dilakukan dengan ekstraksi maserasi menggunakan pelarut etil asetat. Fraksinasi

dan pemurnian menggunakan kromatografi vakum cair dan kromatografi kolom

flash. Elusidasi struktur senyawa steroid dilakukan dengan metode spektroskopi

UV, FTIR dan NMR (1H NMR,

13C NMR, HSQC dan HMBC). Spektrum UV

menunjukkan satu puncak pada λmax 237 nm yang menunjukkan adanya gugus

kromofor suatu enon. Spektra IR menunjukkan adanya gugus fungsi serapan C=O

karbonil pada bilangan gelombang 1677 cm-1

dan C=C alkena pada 1618 cm-1

.

Spektra 13

C NMR menunjukkan terdapat 6 karbon alkena dan 52 karbon alkana, 1H NMR menunjukkan adanya proton alkana dan proton alkena. Berdasarkan

hasil Analisa data, senyawa yang disarankan merupakan senyawa campuran 4-

stigmastena-3-on dan 4,22-stigmastadiena-3-on.

Kata kunci : Calophyllum soulattri Burm.f, steroid, stigmastena, stigmastadiena

iii

ISOLATION AND ELUCIDATION STRUCTURE OF 4-

STIGMASTENE-3-ONE AND 4,22-STIGMASTADIENE-3-ONE

FROM LEAVES OF SLATRI


FRILIA ELFANI PUTRI

Department of Chemistry, Faculty of Mathematics and Natural Sciences

Sebelas Maret University

ABSTRACT

Calophyllum soulattri which is known as "slatri" in central java usually

used as skin diseases traditional medicine. C. soulattri contains compounds

terpenoid, steroid, coumarin, chromanon and xanthone. Steroid compounds have

some biological activity like antiinflamatory, antibactery and antifungal. In this

research, isolation of steroids constituent from C. soulattri leaves was conducted

by maceration method using ethyl acetate as solvent. The separation and

purification process has been done by vacuum liquid chromatography and flash

chromatography. The structure then analyzed by spectroscopy UV, FTIR, and

NMR (1H NMR,

13C NMR, HSQC and HMBC). The UV spectrum showed a peak

at λ max 237 nm that indicate as a chromophore group from an enon. The FTIR

spectra showed the presence of functional groups C=O carbonyl at 1677 cm-1

and

C=C alkene at 1618 cm-1

. The 13

C NMR spectra showed six alkenes carbons and

fifty two alkanes carbon. The 1H NMR spectra showed alkanes protons and

alkenes protons. Based on the analysis result, the compounds are suggested as a

mixture of two compounds (4-stigmastene-3-one and 4.22-stigmastadiene-3-on).

Keywords : Calophyllum soulattri Burm.f, steroids, stigmastene, stigmastadiene

iv

MOTTO

“Berlelah-lelahlah, manisnya hidup terasa setelah lelah berjuang. Jika engkau tak

tahan lelahnya belajar maka engkau akan menanggung perihnya kebodohan.”

(Imam Syafi’i)

“Tidak ada yang tidak mungkin, sampai kata ‘tidak mungkin’ itu anda proyeksikan

pada pikiran anda sendiri. Kata-kata adalah doa sekaligus rencana yang kita ajukan

pada semesta”

( Lenang Manggala )

v

PERSEMBAHAN

Karya ini saya persembahkan untuk :

Mama & Papa tersayang

Yang tak pernah lelah memberikan doa, semangat dan dukungannya

Adikku Difania Seftiaranisa Putri

Seluruh keluarga besar khususnya Mbah dan Pakde Joko

Panji Satria Pratama

Teman-teman kimia angkatan 2012, Karina, Ida, Respati, Dheo, Joni, Jes, Reno

dan Maria terima kasih atas persahabatannya

Untuk semua pembaca, semoga menjadi ilmu yang bermanfaat.

vi

KATA PENGANTAR

Alhamdulillah segala puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah

melimpahkan segala rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat

menyelesaikan skripsi ini untuk memenuhi sebagian persyaratan guna mencapai

gelar Sarjana Sains dari Prodi Kimia FMIPA, UNS.

Dalam penyusunan skripsi ini, penulis tidak lepas dari bimbingan,

pengarahan dan bantuan dari berbagai pihak, maka pada kesempatan ini penulis

menyampaikan ucapan terima kasih kepada :

1. Dr. Triana Kusumaningsih, M.Si selaku Kepala Program Studi Kimia

FMIPA UNS.

2. M. Widyo Wartono, M.Si selaku pembimbing I yang telah memberikan

bimbingan, arahan, kesempatan dan kesabaran selama menyelesaikan

skripsi.

3. Dr.rer.nat Fajar Rakhman Wibowo, M.Si selaku pembimbing II yang telah

memberikan bimbingan dan arahan selama menyelesaikan skripsi.

4. Dr. Sayekti Wahyuningsih, M.Si selaku pembimbing akademik yang telah

memberikan bimbingan dan motivasinya.

5. Dr. Khoirina Dwi Nugrahaningtyas, S.Si., M.Si selaku ketua Laboratorium

Kimia FMIPA UNS, serta laboran-laboran mas Anang dan mbak Nanik

atas bantuannya selama penelitian.

6. Seluruh Dosen di Prodi Kimia, FMIPA UNS atas ilmu yang berguna

dalam menyusun skripsi.

7. Kedua orang tua saya, Elwin Firmansyah, SH dan Sri Wahyuningsih, SH

yang telah memberikan doa, semangat dan dukungannya.

8. Adik saya Difania Seftiaranisa Putri, seluruh keluarga besar dan Panji

Satria yang telah memberikan semangat dan dukungannya.

9. Teman-teman Kimia 2012, Respati, Karin, Dheo, Jes, Joni, Ida, Maria,

Mba Euodia, Mba Gesti, kakak-kakak dan adik-adik seperjuangan saya

dijurusan Kimia terima kasih atas doa, semangat, bantuan dan

kebersamaannya.

vii

10. Semua pihak yang telah membantu.

Penulis mengucapkan terima kasih untuk semua pihak yang telah berjasa

kepada penulis khususnya dalam penyelesaian skripsi ini. Skripsi ini masih jauh

dari sempurna untuk itu penulis senantiasa mengharapkan saran dan kritik yang

membangun bagi kesempurnaan skripsi ini. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat

bagi pembaca.

Surakarta, Mei 2017

Frilia Elfani Putri

viii

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL.................................................................................... i

HALAMAN PENGESAHAN...................................................................... ii

HALAMAN PERNYATAAN..................................................................... iii

HALAMAN ABSTRAK.............................................................................. iv

HALAMAN ABSTRACT............................................................................. v

HALAMAN MOTTO.................................................................................. vi

PERSEMBAHAN........................................................................................ vii

KATA PENGANTAR................................................................................. viii

DAFTAR ISI................................................................................................ x

DAFTAR TABEL........................................................................................ xiii

DAFTAR GAMBAR................................................................................... xiv

DAFTAR LAMPIRAN................................................................................ xvii

BAB I PENDAHULUAN........................................................................... 1

A. Latar Belakang Masalah................................................................... 1

B. Perumusan Masalah......................................................................... 3

1. Identifikasi Masalah.................................................................... 3

2. Batasan Masalah.......................................................................... 3

3. Rumusan Masalah....................................................................... 4

C. Tujuan Penelitian............................................................................. 4

D. Manfaat Penelitian........................................................................... 4

BAB II LANDASAN TEORI..................................................................... 5

A. Tinjauan Pustaka.............................................................................. 5

1. Tumbuhan C. soulattri................................................................. 5

a. Deskripsi Tumbuhan C. soulattri............................................ 5

b. Manfaat Tumbuhan C. soulattri.............................................. 6

c. Kandungan Senyawa Kimia C. soulattri................................ 7

1) Kumarin.............................................................................. 7

2) Kromanon........................................................................... 8

3) Santon................................................................................. 8

ix

4) Terpenoid............................................................................ 10

5) Steroid................................................................................. 11

2. Metode Isolasi dan Pemurnian Senyawa Bahan Alam................ 12

a. Ekstraksi.................................................................................. 12

b. Kromatografi........................................................................... 13

1) Kromatografi Lapis Tipis................................................... 13

2) Kromatografi Vakum Cair (KVC)..................................... 14

3) Kromatografi Kolom Flash................................................ 15

3. Metode Elusidasi Senyawa Bahan Alam..................................... 15

a. Spektroskopi........................................................................... 15

1) Spektroskopi Ultraviolet-visible (UV-Vis)........................ 15

2) Spektroskopi Fourier Transform Infra Red (FTIR)........... 16

3) Spektroskopi NMR............................................................ 16

a. Spektroskopi 1H NMR................................................... 17

b. Spektroskopi 13

C NMR................................................. 18

c. HSQC (Heteronuclear Single Quantum Correlation)... 19

d. HMBC (Heteronuclear Multiple Bond Correlation).... 19

B. Kerangka Pemikiran......................................................................... 19

C. Hipotesis........................................................................................... 20

BAB III METODOLOGI PENELITIAN................................................... 21

A. Metodologi penelitian...................................................................... 21

B. Tempat dan Waktu Penelitian.......................................................... 21

C. Alat dan Bahan................................................................................. 21

1. Alat.............................................................................................. 21

2. Bahan........................................................................................... 22

D. Prosedur Penelitian.......................................................................... 23

1. Persiapan Sampel......................................................................... 23

2. Isolasi Senyawa dari daun C. soulattri........................................ 23

3. Fraksinasi dan Pemurnian Senyawa............................................ 23

a. Kromatografi Vakum Cair (KVC).......................................... 23

b. Kromatografi Kolom Flash.................................................... 24

x

4. Uji Kualitatif dengan pereaksi Lieberman Burchard................... 24

5. Elusidasi Struktur Senyawa......................................................... 25

E. Teknik Analisis data......................................................................... 25

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN.................................................... 27

A. Isolasi, Fraksinasi dan Purifikasi Senyawa...................................... 27

B. Elusidasi Stuktur Senyawa Fraksi E3..................................................................... 34

1. Analisis data UV.......................................................................... 34

2. Analisis data FTIR....................................................................... 35

3. Analisis data NMR...................................................................... 37

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN...................................................... 61

A. Kesimpulan...................................................................................... 61

B. Saran................................................................................................. 61

DAFTAR PUSTAKA.................................................................................. 62

LAMPIRAN................................................................................................. 67

xi

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1. Serapan Khas Beberapa Gugus Fungsi pada Spektroskopi

Inframerah….............................................................................

16

Tabel 2. Pergeseran Kimia Proton 1H yang Khas (Relatif terhadap

Tetrametilsilana/TMS)...............................................................

17

Tabel 3. Pergeseran Kimia pada spektra 13

C NMR................................. 18

Tabel 4. Sinyal Karbon 13

C NMR ........................................................... 38

Tabel 5. Nilai geseran kimia, multiplisitas dan jenis proton spektrum

1H NMR.....................................................................................

41

Tabel 6. Korelasi proton dan karbon dari data HSQC dan jenis atom

karbon........................................................................................

45

Tabel 7. Korelasi proton dengan karbon tetangga berjarak 2-3 ikatan

dari data HMBC.........................................................................

47

Tabel 8. Perbandingan data 1H NMR dan

13C NMR senyawa 1 dengan

senyawa pembanding.................................................................

58

Tabel 9. Perbandingan data 1H NMR dan

13C NMR senyawa 2 dengan

senyawa pembanding.................................................................

59

xii

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Tumbuhan Callophyllum soulattri .......................................... 5

Gambar 2. Kerangka dasar kumarin.......................................................... 7

Gambar 3. Senyawa golongan kumarin..................................................... 7

Gambar 4. Kerangka dasar kromanon....................................................... 8

Gambar 5. Senyawa golongan kromanon.................................................. 8

Gambar 6. Kerangka dasar santon............................................................. 8

Gambar 7. Senyawa golongan santon........................................................ 9

Gambar 8. Struktur senyawa mirsena........................................................ 10

Gambar 9. Kerangka dasar triterpenoid..................................................... 10

Gambar 10. Senyawa golongan terpenoid................................................... 11

Gambar 11. Kerangka dasar steroid............................................................. 11

Gambar 12. Senyawa golongan steroid....................................................... 12

Gambar 13. Ekstrak Kental daun C. soulattri.............................................. 27

Gambar 14. Diagram massa eluat KVC I dan KVC II................................ 28

Gambar 15. Hasil Uji KLT Fraksi hasil KVC I dan II dengan Eluen n-

heksana : Etil asetat (9,5:0,5) dengan penampak bercak

Ce(SO4)2..................................................................................

29

Gambar 16. Spot tunggal non polar sebelum dan sesudah ditambah

pereaksi lieberman burchard....................................................

30

Gambar 17. Hasil Uji Hasil Uji KLT Fraksi gabungan A-D dari

kromatografi kolom flash dengan Eluen n-heksan : Etil

asetat (9:1)................................................................................

31

Gambar 18. Hasil Uji KLT Fraksi 1-17 hasil Kromatografi kolom flash

ke-2 dengan Eluen n-heksan : Etil asetat (9:1)........................

32

Gambar 19. Hasil Uji KLT Fraksi gabungan A-D hasil Kromatografi

kolom flash ke-2 dengan Eluen n-heksan : Etil asetat

(8:2)..........................................................................................

32

xiii

Gambar 20. Uji kemurnian fraksi pada lampu UV dan setelah disemprot

dengan Ce(SO4)2 dengan 2 eluen yang berbeda......................

33

Gambar 21. Senyawa isolat sebelum dan sesudah ditambahkan pereaksi

lieberman burchard..................................................................

34

Gambar 22. Spektra UV-Vis dari fraksi E3................................................. 34

Gambar 23. Gugus kromofor pada steroid.................................................. 35

Gambar 24. Spektra FTIR dari fraksi E3..................................................... 36

Gambar 25. Spektra 13

C NMR senyawa isolat fraksi.................................. 37

Gambar 26. Spektra 1H NMR isolat fraksi E3............................................. 40

Gambar 27. Puncak atom karbon C 19,10; 19,13; 24,30; 24,36; 39,62;

39,72; 171,92 dan 171,96 ppm................................................

42

Gambar 28. Spektrum HSQC pada senyawa E3.......................................... 44

Gambar 29. Spektrum HMBC senyawa E3................................................. 46

Gambar 30. Korelasi proton H 5,71 ppm dengan karbon C 34,09; 33,07

dan 38,72 ppm dari data HMBC..............................................

48

Gambar 31. Korelasi proton H 2,37 ppm dengan karbon C 123,83;

38,72; 32,13 dan 32,15 ppm dari data HMBC.........................

49

Gambar 32. Korelasi proton H 5,71 ppm dan H 2,27; 2,37 ppm dengan

karbon tetangga........................................................................

50

Gambar 33. Korelasi proton H 2,40; 2,34 dan H 1,67; 2,02 ppm dengan

karbon tetangga........................................................................

50

Gambar 34. Korelasi karbon C 17,49 ppm dengan proton H 1,17 ppm

pada HSQC.......................................................................

51

Gambar 35. Korelasi proton H 1,17 ppm dengan karbon tetangga pada

senyawa 1 dan 2.......................................................................

52

Gambar 36. Korelasi proton H 0,71 ppm dan H 0,70 ppm dengan

karbon tetangga pada senyawa 1 dan 2....................................

52

Gambar 37. Korelasi proton dengan karbon pada struktur kerangka

dasar.........................................................................................

54

Gambar 38. Nilai pergeseran karbon pada rantai samping.......................... 55

xiv

Gambar 39. Nilai pergeseran proton pada rantai samping.......................... 55

Gambar 40. Hubungan korelasi proton dengan karbon antara kerangka

dasar steroid dengan rantai samping yang tersubstitusi pada

senyawa 1 dan 2.......................................................................

56

Gambar 41. Nilai pergeseran kimia proton (merah) dan karbon (hitam)

pada senyawa E3 secara eksperimen........................................

57

Gambar 42. Struktur senyawa 4-stigmastena-3-on dan 4,22

stigmastadiena-3-on.................................................................

60

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Diagram alir penelitian........................................................ 67

Lampiran 2. Tabel berat masing-masing fraksi hasil Kromatografi

Kolom Flash 1..............................................................

72


Kolom Flash 2.....................................................................

73


Kolom Flash 3.......................................................................

73

Lampiran 5. Spektra 13

C NMR perbesaran pada C 11-20 ppm............. 74


C NMR perbesaran pada C 21-27 ppm............. 74


C NMR perbesaran pada C 28,2-33,4 ppm.......... 75


C NMR perbesaran pada C 33,6-39,06 ppm........ 75






C NMR perbesaran pada C 120-204 ppm.......... 77

Lampiran 12. Spektra 1H NMR perbesaran pada H 0,65-2,48 ppm......... 77

Lampiran 13. Spektra 1H NMR perbesaran pada H 4,75-6,00 ppm......... 78

Lampiran 14. Spektra korelasi proton H 5,71 ppm dengan C 123,83

ppm pada HSQC...................................................................

78

Lampiran 15. Spektra korelasi proton H 5,10 ppm dengan C 138,25

ppm & H 5,03 ppm dengan C 129,52 ppm pada HSQC....

79

Lampiran 16. Spektra korelasi proton H 5,71 ppm dengan C 34,09;

33,07; 38,72 ppm pada HMBC.............................................

79


40,62; 51,34; 21,24 ppm & H 5,03 ppm dengan C 138,25;

40,62; 51,34 pada HMBC.....................................................

80


xvi

32,15; 32,13; 35,71 ppm pada HMBC.................................. 80


32,15; 32,13; 35,71 ppm pada HMBC..................................

81


40,62; 51,34; 21,24 ppm & H 5,03 ppm dengan C 138,25;

40,62; 51,34 pada HMBC.....................................................

81


32,15; 32,13; 35,71 ppm pada HMBC..................................

82

calophyllum soulattri burm. f) · gambar 34. 1,17 korelasi karbon c 17,49 ppm dengan proton h ppm...

Documents