bakteri anaerob dan mikroaerofilik

23
Bakteri anaerob dan mikroaerofilik

Upload: muh-adhy-prabowo

Post on 26-Dec-2015

528 views

Category:

Documents


23 download

DESCRIPTION

Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

TRANSCRIPT

Page 1: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

Bakteri anaerob dan mikroaerofilik

Page 2: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

Ini Bacteri apa ya....Coba tebak Aku ??

Page 3: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

Tujuan

• Praktikum ini bertujuan untuk mempelajari bakteri anaerob, yang meliputi cara mengisolasinya, mengkultur dan mengidentifikasinya menggunakan pewarnaan

Page 4: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

Prinsip Kerja

• Bakteri obligat anaerob akan tumbuh optimal pada kondisi yang kaya akan CO2, jika bakteri terpapar oleh O2 maka bakteri akan mati.

• Pada medium Thyoglicolat bakteri Anaerob akan tumbuh sangat cepat pada dasar media → dasar media akan keruh

• Pada Medium Cooped Meat Anaerob akan memfermentasi karbohidrat → terbentuk asam laktat → terbentuk gas → tekanan Gas → Lilin akan naik

• Bakteri Mikroaerofilik akan tumbuh dalam keadaan sangat sedikit Oksigen dalam media.

Page 5: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

Alat dan Bahan

1. Isolat tanah yang mengandung bakteri Anaerob

2. Nutrient Broth

3. Medium Thyoglicolat

4. Medium Cooked/Cooped meat

5. Medium Blood Agar Plate ( BAP )

6. Gas Generating kit

7. Pseudomonas aeroginosa pada agar miring

8. Indikator Biologis (Anaerobic Jar)

9. Indikator kimiawi (Kertas Indikator)

Page 6: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

Media Nutrient Broth

• Merupakan Media UMUM pertumbuhan Bakteri

Page 7: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

Medium Tyoglicolat

• KADAR OKSIGEN TINGGI

• KADAR OKSIGEN RENDAH

• KADAR OKSIGEN SANGAT RENDAH/TIDAK ADA

Page 8: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

Medium Cooped meat

• CACAHAN DAGING

• FUNGSI : Sebagai Indikator Bahwa Bakteri Anaerob dapat memfermentasi karbohidrat dalam daging sehingga daging hancur

• BAKTERI MAMPU MEMFERMENTASI DAGING

Page 9: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

BAP (BLOOD AGAR PLATE)

• Fungsi : sebagai media diperkaya (enrichment) dalam pertumbuhan bakteri

Page 10: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

Gas Generating Kit

• Fungsi : Untuk mengikat O2, sehingga digunakan untuk membuat kondisi Anaerob

Page 11: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

Anaerobic Jar

1.Candle Jar

•Fungsi : Mengurang kadar oksigen Hanya Kadar Co2 yang ditingkatkan

Didalamnya terdapat Indikator Methylen Blue dan Indikator Biologi (Pseudomonas aeroginosa)

Page 12: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

Membuat kondisi Anaerob yang sangat Optimal seperti pada

gambar karena bakteri sangat peka terhadap

O2

Page 13: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

INDIKATOR KIMIAWI

• Menggunakan Indikator Methylen Blue (Seperti pada gambar).

• Indikator BIRU → (+) O2

PUTIH → (-) O2

Page 14: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

INDIKATOR BIOLOGI

• Menggunakan Bakteri Pseudomonas aeroginosa (AEROB OBLIGAT) dalam agar miring.

• Koloni bakteri → (+) O2

• Tidak ada Koloni Bakteri → (-) O2

Page 15: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

PROSEDUR KERJA

1. Masukkan tanah ke dalam Nutrient Broth

2. Lakukan heat shock dengan memanaskannya pada suhu 80o C selama 15 menit (fungsi untuk isolasi bakteri berspora)

3. Ambil cairan dari Nutrient Broth dan masukkan ke dalam Medium Thoglicolat , Cooped Meat dan Apuskan pada BAP

4. Masukan BAP ke anaerobic jar, tambahkan gas generating kit untuk membuat suasana anaerob, tambahkan Indikator Kimia Dan Biologis

5. Inkubasi Ke tiga media suhu 37o C selama 24-48 Jam

6. Diamati dan lakukan pewarnaan gram dan spora (media BAP)

Page 16: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

INKUBASI SUHU 37o C, 24 jam

Masukan tanah pada Nutrient Broth (NB)

Lakukan Heat shock Suhu 80o C, 5 menit

Diambil cairan dari Nutrient Broth (NB)

Apuskan Pada BAP menggunakan Inokulum

Masukan dalam Thyoglicolat

Masukan dalam Cooked Mear

LANGKAH KERJA UJI BAKTERI ANAEROB

Page 17: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

Masukan BAP dalam

ANAEROBIC JAR dalam Keadaan

ANAEROB

Tambahkan

Indikator KIMIA dan BIOLOGI

LANGKAH KERJA lanjutan....

BAP

INDIKATOR KIMIA

INDIKATOR BIOLOGI

INKUBASI SUHU

37OC, 24 JAM

Page 18: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

Setelah Inkubasi.....

LAKUKAN PEWARNAA

N GRAM

Page 19: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik
Page 20: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

INTERPRETASI HASIL

MEDIUM THYOGLICOLAT (berdasarkan tingkat KEKERUHAN)

1. BAKTERI AEROB TUMBUH PADA PERMUKAAN MEDIA

2. MIKROAEROFILIK TUMBUH PADA TENGAH MEDIA

3. BAKTERI ANAEROB TUMBUH PADA DASAR MEDIA

Page 21: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

MEDIUM COOPED

MEAT

• HASIL POSITIF (+)

1.LAPISAN LILIN YANG TERANGKAT

2.TERDAPAT GAS

3.DAGING TERFERMENTASI

Page 22: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

MEDIUM BAP SETELAH INKUBASI DALAM KONDISI ANAEROB TERBETUK KOLONI BAKTERI

Page 23: Bakteri Anaerob Dan Mikroaerofilik

ANY QUESTION...