bakmi info pewarnaan

8/18/2019 Bakmi Info Pewarnaan

1/62

LAPORAN PRAKTIKUM "MIKROBIOLOGI PEWARNAAN GRAM DAN

PENGAMATAN MORFOLOGI BAKTERI"

A. Judul Praktikum

PEWARNAAN GRAM DAN PENGAMATAN MORFOLOGI BAKTERI

B. Tujuan Praktikum

Meneta!ui dan mema!ami "r#$edur "e%arnaan ram dan menel#m"#kkan

&akteri ram "#$iti' atau &akteri ram neati' $erta menentukan m#r'#l#in(a.

). Penda!uluan

*. Latar BelakanBakteri mem"un(ai m#r'#l#i+ $truktur dan $i'at,$i'at (an k!a$. Bakteri meru"akan

mikr##rani$me (an &erukuran mikr#$k#"ik. -elain mikr#$k#"ik+ &akteri jua !am"ir tidak

&er%arna atau tran$"aran dan k#ntra$ denan air. -e!ina meli!at dan menamati &akteri

dalam kedaan !idu" $anat $ulit. ntuk menata$i !al ter$e&ut maka dikem&ankan $uatu

teknik "e%arnaan $el &akteri. Ini meru"akan $ala! $atu /ara (an "alin utama dalam

"enelitian,"enelitian mikr#&i#l#i. 0al itu untuk mem"ernuda! "r#$e$ identi'ika$i &akteri.

ntuk menidenti'ika$i $uatu &iakan murni &akteri !a$il i$#la$i mula,mula diamati

m#r'#l#i $el $e/ara mikr#$k#"ik melalui "ene/etan atau "e%arnaa+ $ala! $atun(a adala!

denan "e%arnaan ram. Pe%arnaan ram meru"akan $ala! $atu "r#$edur (an "alin

&an(ak diunakan untuk men/irikan &an(ak &akteri. Dari "e%arnaan ram da"at diketa!ui

m#r'#l#i $el antara lain $i'at ram+ &entuk $el+ dan "enataan $el. Pe%arnaan ram atau

met#de ram adala! $uatu met#de em"iri$ untuk mem&edakan $"e$ie$ &akteri menjadi dua

kel#m"#k &e$ar+ Gram "#$iti' dan ram neati'+ &erda$arka $i'at kimia dan 'i$ika dindin $el

mereka+ met#de ini di&eri nama &erda$arkan "enemun(a+ ilmu%an denmark !an$ )!ri$tian

ram *112. Pe%arnaan Gram di&ai menjadi dua (aitu "e%arnaan majemuk karena

menunakan le&i! dari $atu ma/am 3at %arna. Dan "e%arnaan di'eren$ial karena "e%arnaan

ini mam"u mende'eren$ia$i atau mem&edakan &akteri+ $e!ina &akteri da"at di#l#nkan

menjadi dua (aitu Gram neati' dan Gram "#$iti'.

-elain denan "e%arnaan atau "ene/atan+ identi'ika$i &akteri da"at &eru"a meli!at

m#r'#l#i k#l#ni dan uji &i#kimia &akteri. M#r'#l#i &akteri meli"uti &entuk+ ukuran+ tek$tur+

%arna k#l#ni+dll. -emantara uji &i#kimia dilakukan untuk mema$tikan jeni$4$"e$ie$

&akterin(a. Ole! karena itu+ dilakukan "raktikum ini untuk meneta!ui teknik "e%arnaan

&akteri+ m#r'#l#i k#l#ni+ dan uji &i#kimia $e!ina da"at mem"ernuda! untuk i$denti'ika$i

&akteri.5. Tinjauan Te#ri


2/62

Pada umumn(a &akteri &er$i'at tem&u$ /a!a(a+ !al ini di$e&a&kan karena &an(ak

&akteri (an tidak mem"un(ai 3at %arna 6Walu(#+ 57789 . -ala! $atu /ara untuk menamati

&entuk $el &akteri $e!ina muda! untuk diidenti'ika$i iala! denan met#de "ene/atan atau

"e%arnaan. 0al ter$e&ut jua &er'un$i untuk meneta!ui $i'at 'i$i#l#i$n(a (aitu

meneta!ui reak$i dindin $el &akteri melalui $erankaian "ene/atan.

Pe%arnaan atau "ene/atan ter!ada" mikr#&a &an(ak dilakukan &aik $e/ara lan$un

6&er$ama &a!an (an ada9 atau"un $e/ara tidak lan$un 6melalui &iakan murni9. Tujuan dari

"e%arnaan ter$e&ut iala! untuk :

*. Mem"ermuda! meli!at &entuk ja$ad+ &aik &akteri+ rai+ atau"un 'uni.

5. Mem"erjela$ ukuran dan &entuk ja$ad.

;. Meli!at $truktur luar dan kalau memunkinkan jua $truktur dalam ja$ad.

2. Meli!at reak$i ja$ad ter!ada" "e%arna (an di&erikan $e!ina $i'at,$i'at 'i$ik

dan kimia (an ada akan da"at diketa!ui 6-uria%iria+ *


3/62

Per&edaan %arna antara &akteri Gram Neati' dan &akteri Gram P#$iti' di$e&a&kan

#le! adan(a "er&edaan $truktur "ada dindin $eln(a. Dindin Gram P#$iti' menandun

&an(ak "e"tid#likan+ $edankan dindin &akteri Gram Neati' &an(ak menandun

li"#"#li$akarida6-uria%iria+ *


4/62

denan &akteri. Bakteri (an !idu" !am"ir tidak &er%arna dan k#ntra$ denan air+ dimana el,

$el &akteri ter$e&ut di $u$"en$ikan+. $ala! $atu /ara untuk menamati &entuk $el &akteri

$e!ina muda! untuk diidenti'ika$i iala! dean met#de "ene/atan atau "e%arnaan. 0al

ter$e&ut jua &er'un$i untuk meneta!ui $i'at 'i$i#l#i$n(a (aitu meneta!ui reak$i dindin

$el &akteri melalui $eranakaian "ene/atan 6Entjan+ 577;9.

Bakteri meru"akan #rani$me "r#kari#t. mumn(a ukuran &akteri $anat

ke/il+ &entuk tu&u! &akteri &aru da"at dili!at denan menunakan mikr#$k#" denan

"em&e$aran *.777 atau le&i! 6Walu(#+ 57729. -el &akteri memiliki "anjan (an &eraam+

$el &e&era"a $"e$ie$ da"at &erukuran *77 kali le&i! "anjan dari"ada $el $"e$ie$ (an lain.

Bakteri meru"akan mak!luk !idu" denan ukuran antara 7+* $am"ai 7+; m. Bentuk &akteri

&erma/am ma/am (aitu eli"$+ &ulat+ &atan dan $"iral. Bakteri le&i! $erin diamati dalam

#le$an ter%arnai denan $uatu 3at "e%arna kimia aar muda! diamati atau dili!at denan

jela$ dalam !al ukuran+ &entuk+ $u$unan dan keadaan $truktur internal dan &utiran. -el $el

indi?idu &akteri da"at &er&entuk $e"erti la4eli"$+ &atan 6$ilindri$9+ atau $"iral 6!elik$9

6Pel/3ar = )!an+ 57789.

Pe%arnaan &akteri &ertujuan untuk memuda!kan meli!at &akteri denan mikr#$k#"+

mem"erjela$ ukuran dan &entuk &akteri+ untuk meli!at $truktur luar dan $truktur dalam

&akteri $e"erti dindin $el dan ?aku#la+ men!a$ilkan $i'at,$i'at 'i$ik dan kimia (an k!a$

dari"ada &akteri denan 3at %arna+ $erta meninkatkan k#ntra$ mikr##rani$me denan

$ekitarn(a. Teknik "e%arnaan %arna "ada &akteri da"at di&edakan menjadi tia ma/am (aitu

"ene/atan $eder!ana+ "ene/atan di'eren$ial dan "ene/atan $truktural. Pem&erian %arna

"ada &akteri atau ja$ad, ja$ad renik lain denan menunakan larutan tunal $uatu "e%arna

"ada la"i$an ti"i$+ atau #le$an+ (an $uda! di'ik$a$i+ dinamakan "e%arnaan $eder!ana.

Pr#$edur "e%arnaan (an menam"ilkan "er&edaan di antara $el,$el mikr#&a atau &aian,

&aian $el mikr#&a di$e&ut teknik "e%arnaan di'eren$ial 6Pel/3ar = )!an+ 57789. Teknik

"e%arnaan %arna "ada &akteri da"at di&edakan menjadi tia ma/am (aitu "ene/atan

$eder!ana+ "ene/atan di'eren$ial dan "ene/atan $truktural. Pem&erian %arna "ada &akteri

atau ja$ad, ja$ad renik lain denan menunakan larutan tunal $uatu "e%arna "ada la"i$an

ti"i$+ atau #le$an+ (an $uda! di'ik$a$i+ dinamakan "e%arnaan $eder!ana. Pr#$edur

"e%arnaan (an menam"ilkan "er&edaan di antara $el,$el mikr#&a atau &aian,&aian $el

mikr#&a di$e&ut teknik "e%arnaan di'eren$ial 6Pel/3ar = )!an+ 57789.

Bakteri (an di%arnai denan teknik "e%arnaan Gram ter&ai dua #l#nan+ (aitu:

Gram "#$iti' + &ila %arna 3at "e%arna "ertama 6karl entian ?i#let9 teta" &erta!an+ denan

demikian %arna $e &akteri tam"ak unu tua dan Gram neati'+ &ila %arna 3at "e%arna


5/62

"ertama tidak &erta!an 6luntur9 kemudian ter/at #le! 3at "e%arna tandinann(a+ mi$al: air

'u/!$in+ $a'ranin+ dan #le! 3at "e%arna tandinan lainn(a. 6Ra3ali+ *


6/62

Prin$i" da$ar dari "e%arnaan adala! adan(a ikatan i#n antara k#m"#nen $elular dari

&akteri denan $en(a%a akti' dari "e%arna (an di$e&ut kr#m#en. Ikatan i#n da"at terjadi

karena adan(a muatan li$trik &aik "ada k#m"#nen $eluler mau"un "ada "e%arna. Terda"at

tia m/am met#de "e%arnaan (aitu "e%arnaan $eder!ana+ "e%arnaan di'eren$ial dan

"e%arnaan ram. Pe%arnaan $eder!ana menunakan "e%arna tunal+ "e%arnaan

di'eren$ial memakai $erankaian larutan "e%arna atau reaen. Pe%arnaan ram meru"akan

met#de "e%arnaan (an "alin umum diunakan untuk me%arnai $el &akteri 6m$l+ 57719.

Hat "e%arna adala! aram (an terdiri ata$ i#n "#$iti' dan i#n neati'+ $ala! $atu di

antaran(a &er%arna. Pada 3at %arna (an &er$i'at &a$a+ %arna terda"at "ada i#n "#$iti' 63at

"e%arna )l,9 dan "ada "e%arna a$am+ %arna akan terda"at "ada i#n neati' 63at "e%arna ,

Na9. 0u&unan antara &akteri denan 3at "e%arna &a$a (an men#nj#l di$e&a&kan terutama

#le! adan(a a$am nukleat dalam jumla! &e$ar dalam "r#t#"la$ma $el. Jadi+ jika &akteri itu

di%arnai+ muatan neati' dalam a$am nukleat &akteri akan &ereak$i denan i#n "#$iti' 3at

"e%arna &a$a+ Kri$tal ?i#let+ $a'ranin dan metilin &lue adala! &e&era"a 3at "e%arna &a$a

(an &ia$a diunakan. -e&alikn(a 3at "e%arna a$am dit#lak #le! muatan neati' &akteri

men(eluru!. Jadi+ me%arnai &akteri denan 3at "e%arna a$am akan men!a$ilkan !an(a

"e%arnaan "ada daera! latar &elakan $aja. Karena $el &akteri tak &er%arna di ata$ latar

&elakan (an &er%arna 6#lk = W!eeler+ *


7/62

k#m"lek$ Kri$tal i#dine (an &er%arna &iru. -etela! di tam&a!kan $a'ranin+ &akteri Gram

"#$iti' akan &er%arna unu. )#nt#! &akteri Gram "#$iti' adala! -tre"t#/#//u$+ Ba/illu$+

-ta"il#/#//u$+ )l#$tridia+ )#r(ne&a/terium d!("teriae+ Pe"t#/#//u$+ Pe"t#$tre"t#/#//u$+ dll.

-edankan &akteri Gram neati' akan terdek#l#ri$a$i #le! al/#!#l dan "em&erian $a'ranin

akan mem&erikan %arna mera! "ada &akteri Gram neati'. )#nt#! &akteri Gram neati?e

adala! Nei$$eria+ Kle&e$iella+ ell#nella+ -!iella+ -alm#nella+ 0em#"!illu$+ dll 6)a""u//in#

= -!erman+ *


8/62

Memurut Pele3ar and )!an+ 5778 $e/ra m#r'#l#i $el &akteri memn(ai &aian,&aian

$e&aai &erikut:

*. Ka"$ul : la"i$an te&al dari lendir (an mem&unku$ $el. Fun$i ka"$ul adala! melinduni $el

dari k#ndi$i linkunan (an tidak menuntunkan $e&aai $arana "enikat antar $el $atu

denan (an lainn(a. Ka"$ul &er!u&unan denan $i'at "at#enita$ dimana &akteri (an

&erka"$ul &ia$an(a &er$i'at "at#en akan !ilan4 &erkuran. 0al ini terjadi karena ka"$ul

melinduni &akteri dari dari $i$tem imun tu&u!+ $e!ina ketika &akteri ma$uk ke tu&u!

!#$"e$+ $i$tem imun tu&u! tidak mam"u lela%an &akteri.

5. Dindin $el : &aian $el (an mem&unku$ i$i $el+ terletak antara ka"$ul dan mem&ran

$it#"la$ma denan $truktur $anat kaku. Te&al $el *7,;Cmm. Fun$i dindiin $el adala!

"elindun $el dari tekanan #$m#$i$+ mem&eri &entuk "ada $el+ dan &er"erann dalam

re"r#duk$i.;. Mem&ran $el4$it#"la$ma : la"i$an ti"i$ (an &er$i'at "ermia&el+ 'un$in(a untuk menatur

3at,3at ma$uk dan keluar $el.

2. Pili : &enan,&ena !alu$ (an keluar dari dindin $el 6$e"erti 'ilamen teta"i &ukan

'laela9.Jumla! "ili le&i! &an(ak+ le&i! "endek+ dan le&i! ke/il dari 'laela.

C. Flaela : alat erak dari &akteri terdiri dari ram&ut ti"i$ (an men/uat menem&u$ dindin $el

dan &ermula dari da$ar tu&u!+ meru"akan $uatu $truktur ranular (an te"at di&a%a!

mem&ran $el dalam $it#"la$ma. Flaela terdiri dari tia &aian (aitu tu&u! da$ar+ $truktur

$e"erti kait dan $e!ellai 'ilamen "anjan di luar dindin $el. Panjan 'lael: &e&era"a kali

"anjan $el+ namun diametern(a le&i! ke/il dari"ada diameter $$el 6*7,579.

>. Kr#m#$#n : meru"akan "em&a%a $i'at (an diturunkan "ada $el anakan.

8. Kr#mm#$#m : &akteri tidak ter&entuk mem&ran 6DNA telanjan9+ &ia$an(a terdiri dari $atu

$el DNA (an $irkuler

1. Pla$mit : &a!an enetk tam&a!an (an &er$i'at #t#n#m.


9/62

/. Gram B: I#dium

d. Gram ): Alk#!#l

e. Gram D: -a'ranin

'. Air

. Min(ak imer$i

F. )ARA KERJA

#&(ek la$$ di'ik$a$i4dia$e"ti$kan

$atu #$e &iakan kuman murni 6&a/ilu$ $".9 diletakkan di ata$ #&(ek la$$

diratakan &iakan kuman murni denan jarum #$e

di'ik$a$i denan melida! a"ikan &aian (an tidak ada kumann(a di ata$ &un$en 5,;

kali denan /e"at

dituankan "e%arna /arl entian ?i#let+ &iarkan $elama * menit

di&uan $i$a /arl entian ?i#let+ di/u/i "re"arat denan air menalir

dikerinkan "re"arat denan mem&iarkan di udara ter&uka4 di!air drier

dituankan "e%arna i#dium+ &iarkan $elama 5 menit


10/62

di&uan $i$a i#dium

di/u/i "re"arat denan air menalir

dikerinkan "re"arat diudara ter&uka4 di!air drier

di"u/atkan denan alk#!#l


11/62

ditam&a!kan min(ak imer$i "ada "re"arat dan amati "re"arat di&a%a! mikr#$k#" denan

"er&e$aran lema! 6*7 9 kemudian "er&e$aran kuat 6*779

G. Data dan 0a$il

KELOMPO

K

NAMA

BAKTERI

TERMA-K WARNA GAMBAR

GRAM 69 GRAM 6,9

8 Ba/illu$ $". nu

Ber&entuk

&atan 6&a$il9

0. Pem&a!a$an

La"#ran "raktikum mikr#&i#l#i kali ini adala! "e%arnaan dan "enamatan

m#r'#l#i "ada &akteri. Pe%arnaan Gram meru"akan $ala! $atu teknik "e%arnaan (an

dikerjakan di larat#rium mikr#&i#l#i untuk ke"entinan identi'ika$i

mikr##rani$me. M#r'#l#i mikr#$k#"ik mikr##rani$me (an di"erik$a dan $i'atn(a (an

k!a$ ter!ada" "e%arnaan tertentu 6"e%arnaan ram9 da"at diunakan untuk identi'ika$i

a%al. Pe%arnaan ram di&ai menjadi dua !a$il (aitu ram "#$iti' dan ram neati?e+

terantun dari reak$i dindin $el ter!ada" tinta $a'ranin atau Kri$tal ?i#let.

Pr#$e$ $terili$a$i $anat "entin di&utu!kan $e&elum memulai mau"un menak!iri

$e&ua! "ekerjaan di larat#rium denan menunakan teknik a$e"tik. Alk#!#l 87 (an

di$em"r#tkan "ada tanan+ ka/a "re"arat dan meja+ &a!kan tanan "un $e&elumn(a !aru$

di/u/i denan $a&un terle&i! da!ulu. 0al ter$e&ut &er'un$i untuk mem&unu!

mikr##rani$me (an tak diininkan aar menda"atkan "enukuran (an akurat.

Pada "r#$e$ "e%arnaan ram+ !aru$ ela$ #&(ek (an &er$i!. Pem&er$i!an inidilakukan $u"a(a ela$ #&(ek &e&a$ lemak dan de&u. Pem&er$i!an &ia$an(a menunakan

alk#!#l. -etela! di /u/i kemudian di &eri $atu tete$ auade$ "ada "ermukaan ela$ #&(ek.

Kultur &akteri murni diam&il dan diratakan diata$ ka/a #&(ek. Penam&ilan kultur &akteri

tidak diam&il terlalu &an(ak+ karena jika terlalu &an(ak akan $ulit diratakan dan a"a&ila

kultur &akteri tidak da"at diratakan ti"i$,ti"i$ maka &akteri akan tertim&un !al ini akan

menaki&atkan "emerik$aan &entukn(a $atu "er $atu menjadi tidak jela$.

A"a&ila $uda! kerin+ dilakukan 'ik$a$i denan /ara mele%atkan diata$ n(ala a"i.

Pr#$e$ 'ik$a$i dilakukan $u"a(a &akteri &enar,&enar melekat "ada ka/a #&(ek $e!ina


12/62

#le$an &akteri tidak akan ter!a"u$ a"a&ila dilakukan "en/u/ian. an "erlu di"er!atikan

dalam "r#$e$ 'ik$a$i adala! &idan (an menandun &akteri dijaa aar tidak terkena n(ala

a"i.

-etela! dilakukan 'ik$a$i kemudian ditete$i denan larutan ram A 6met!(lene &lue9

$e&an(ak *,5 tete$ dan di&iarkan $elama * menit. Kemudian di/u/i denan air menalir dan

di&iarkan $am"ai kerin denan /ara dianinkan dan menunakan ti$$ue untuk

menerinkan &aian &a%a! #jek ela$. Pen/u/ian denan air &ertujuan untuk menurani

kele&i!an 3at %arna dari met!(len &lue.

Kemudian ditam&a!kan larutan ram B (an meru"akan i#dium. Gram B

meru"akan larutan (an &er'un$i untuk meninkatkan a'inita$ "enikatan 3at %arna #le!

&akteri $e!ina "enikatan 3at %arna #le! &akteri le&i! kuat+ mem"erjela$ %arna dari 3at

%arna ter$e&ut+ mem"er$ulit "elarutan 3at %arna. Pada "e%arnaan ram+ "enam&a!an larutan

m#rdan men(e&a&kan ter&entukn(a "er$en(a%aan k#m"lek$. Tan"a "enam&a!an larutan

m#rdan+ 3at %arna met!(lene &lueakan larut $aat "enam&a!an larutan alk#!#l. Lalu di&iarkan

$elama * menit untuk di&ila$ kem&ali denan auade$. Aki&at "em&erian /at Gram B+ maka

"enikatan %arna #le! &akteri akan le&i! &aik 6le&i! kuat9.

Alk#!#l


13/62


14/62

untuk identi'ika$i dan kla$i'ika$i &akteri. K#m"#$i$i dindin $el &akteri ram "#$iti' &er&eda

denan &akteri ram neati' $e!ina !a$il "e%arnaan ram akan &er&eda.

5. Bakteri ram "#$iti' adala! &akteri (an mem"erta!ankan %arna met!(lene &lue $e%aktu

"r#$e$ "e%arnaan ram. Bakteri ini mem"un(ai la"i$an "e"tid#likan (an te&al.

;. Bakteri ram neati' adala! &akteri (an tidak mem"erta!ankan %arna met!(lene &lue

$e%aktu "r#$e "e%arnaan ram. Bakteri ini mem"un(ai la"i$an "e"tid#likan (an ti"i$.

2. Berda$arkan !a$il "enamatan da"at diidenti'ika$i &a!%a &akteri Bacillus $". meru"akan

&akteri &er&entuk &atan 6&a$il9+ dan ter#l#n dalam &akteri ram "#$iti' .

J. Da'tar Pu$taka

)a""u//in#+ J.+ G.+ = Natalie.+ -+ *


15/62

Laporan Mikrobiologi Pewarnaan

BAB I

PENDAULUAN

!! La#ar Belakang

Bakteri memiliki &e&era"a &entuk (aitu &a$il 6t#nkat9+ /#//u$+ $"irilum. Bakteri

(an &er&entuk t#nkat mau"un k#ku$ di&ai menjadi &e&era"a ma/am. Pada &entuk &a$il

"em&aiann(a (aitu &a$il tunal+ di"l#&a$il+ dan tri"#&a$il.-edankan "ada /#//u$ di&ai

menjadi m#n#/#//u$+ di"l#/#//u$+ $am"ai $t#"!(l#/#//u$. K!u$u$ "ada $"irilum !an(a

di&ai dua (aitu $etena! melenkun dan melenkun 6D%idj#$e"utr#.*


16/62

utama dalam "enelitian,"enelitian mikr#&i#l#i 6D%idj#$e"utr#.*


17/62

"e%arnaan. 0al ter$e&ut jua &er'un$i untuk meneta!ui $i'at 'i$i#l#i$n(a (aitu

meneta!ui reak$i dindin $el &akteri melalui $erankaian "ene/atan

Mikr##rani$me $ulit dili!at denan mikr#$k#" /a!a(a+ karena tidak menad$#r"$i

atau"un mem&ia$kan /a!a(a. Ala$an inila! (an men(e&a&kan 3at %arna diunakan untuk

me%arnai mikr##rani$me atau"un latar &elakann(a. Hat %arna menad$#r"$i dan

mem&ia$kan /a!a(a $e!ina k#ntra$ mikr##rani$me di$ekelilin(a ditinkatkan.

Penunaan 3at %arna memunkinkan "enamatan $truktur $el $e"erti $"#ra dan &a!an

in'ek$i (an menandun 3at "ati dan ranula '#$'at. Pe%arnaan (an diunakan untuk

meli!at $ala! $atu $truktur $el di$e&ut "e%arnaan k!u$u$. -edankan "e%arnaan (an

diunakan untuk memila!kan mikr##rani$me di$e&ut "e%arnaan di'eren$ial (an

memila!kan &akteri menjadi kel#m"#k ram "#$iti' dan ram neati'. Pe%arnaan di'eren$ial

lainn(a iala! "e%arnaan 3ie!l neel$en (an memili!kan &akterin(a menjadi kel#m"#k,

kel#m"#k ta!an a$am dan tidak ta!an a$am 6D%idj#$e"utr#.*


18/62

Hat %arna (an diunakan dalam "e%arnaan &er$i'at &a$a dan a$am. Pada 3at %arna

&a$a &aian (an &er"eran dalam mem&erikan %arna di$e&ut di$e&ut kr#m#'#r dan memiliki

muatan "#$iti'. -e&alikn(a+ "ada 3at %arna a$am &aian (an &er"eran mem&erikan 3at

%arna mem"un(ai muatan neati' 3at %arna &a$a le&i! &an(ak diunakan karena muatan

neati' &an(ak ditemukan didindin $el+ mem&ran $el dan $it#"la$ma$e%aktu "r#$e$

"e%arnaan muatan "#$iti' "ada 3at %arna &a$a akan &erkaitan denan muatan neati' dalam

$el+ $e!ina mikr##rani$me le&i! jela$ terli!at 6D%idj#$e"utr#.*


19/62

;. Mematikan &akteri

Pada "e%arnaan $eder!ana !an(a diunakan $atu ma/am 3at %arna untuk

meninkatkan k#ntra$ antara mikr##rani$me dan $ekelilinn(a. La3im+ "r#$edur "e%arnaan

ini menunakan 3at %arna &a$a $e"erti $e"erti /r($tal ?i#let+ &iru metilen+ karl 'u/!$in

&a$a+ $a'ranin atau !ijau malakit. Kadan kala diunakan 3at %arna neati' untuk "e%arnaan

$eder!ana : 3at %arna a$am (an $erin diunakan adala! nir#$in dan mera! k#n#

6La(.*


20/62


21/62

BAB IIIMETODOLOGI PER)OBAAN

*!Wak#% +an Te,pa#

Praktikum mikr#&i#l#i menenai "e%arnaan dan /ara,/ara "e%arnaan (an

dilak$anakan !ari Ra&u+ > A"ril 57** "ukul *7.77,*5.77 WITA. Bertem"at di Larat#rium

Mikr#&i#l#i Fakulta$ Matematika dan Ilmu Peneta!uan Alam ni?er$ita$ Mula%arman

-amarinda.*$ Ala# +an Ba-an

;.5.*. Alat,alat

− Mikr#$k#"

− Jarum #$e

− )a%an "etri

− Bun$en

− Ka"a$

− Pi"et tete$

− B#t#l

− Beaker ela$

− Gela$ "iala

− )#?er la$$

− Kerta$ $arin

− Pin$et

− O&jek la$$

− Guntin

;.5.5. Ba!an,&a!an

− Alk#!#l


22/62

− )r($tal i#let

− Nir#$in

− Tinta /ina

− Mala/!ite reen

− Lu#l$ i#dida

− -a'ranin

− Ti$u

− Alk#!#l 87

− Biakan murni &akteri

** )ara Ker&a

;.;.*. Pe%arnaan -eder!ana

*. Di&er$i!kan "re"arat la$$ denan alk#!#l 87 kemudian di'ik$a$i di ata$ &un$en

5. Di"ijarkan jarum #$e kemudian di/elu"kan ke auade$ dan di&eri jua $edikit auade$ "ada

"re"arat la$$ menunakan jarum #$e

;. Di"ijarkan lai jarum #$e dan diam&il &akteri dari media lalu diratakkan di ata$ "re"arat

la$$

2. Dikerinkan dan dianinkan "re"aratn(a

C. Ditete$kan larutan 3at %arna /r($tal ?i#let $e&an(ak * atau 5 tete$

>. Dikerinkan dan dianinkan $elama * menit

8. Di/u/i denan air menalir

1. Dikerinkan "re"arat denan dianinkan+ dan


23/62

1. Dikerinkan "re"arat denan dianinkan+ dan


24/62

BAB I.

A(IL DAN PEMBAA(AN

/! a0il Penga,a#an

2.*.*. Ta&el !a$il "enamatan "e%arnaan

N#

.

Teknik Pe%arnaan Penamatan

*. Pe%arnaan -eder!ana Keteranan :

• Per&e$aran 277

• Ber%arna nu

• Ber&entuk &a$il

5. Pe%arnaan Neati' Keteranan :

• Per&e$aran 277

• Ber%arna Kunin

• Ber&entuk /#//u$

;. Pe%arnaan Gram Keteranan :

• Per&e$aran 277

•

Ber%arna Mera!• Ber&entuk &a$il

• Gram neati'

2. Pe%arnaan -"#ra Keteranan :

• Per&e$aran 277

• Ber%arna Mera!

• Ber&entuk /#//u$

/$ Pe,ba-a0an

Pe%arnaan $eder!ana (aitu "e%arnaan denan menunakan $atuma/am 3at %arna

denan tujuan !an(a untuk meli!at &entuk $el &akteri dan untuk meneta!ui m#r'#l#i dan

$u$unan $eln(a . "e%arnaan ini da"at menunakan "e%arnaan &a$a "a$da umumn(a antara

lain kri$tal ?i#let + met(len &lue + karl + 'u/!$in + dan $a'ranin6la( +*


25/62

Pe%arnaan ram meru"akan "e%arnaan (an diunakan untuk menel#m"#kan

&akteri ram "#$iti' dan ram neati'. Bakteri ram "#$iti' akan mem"erta!ankan 3at %arna

/r($tal ?i#let dan akan tam"ak &er%arna unu tua di &a%a! mikr#$k#". Ada"un &akteri ram

neati' akan ke!ilanan 3at %arna /r($tal ?i#let $etela! di/u/i denan alk#!#l+ dan $e%aktu

di&eri 3at "e%arna air 'u/$in atau $a'ranin akan tam"ak &er%arna mera!. Per&edaan 3at %arna

ini di$e&a&kan #le! "er&edaan dalam $truktur kimia%i dindin $eln(a. Pe%arna (an

diunakan dalam "e%arnaan ram antara lain : /r($tal ?i#let+ alk#!#l+ $a'ranin+ dan i#dine

6La(.*


26/62

diunakan untuk "e%arnaan neati' &akteri. Bentuk dan #rani$me (an terli!at $e&aai

%arna &e&a$ menuraikan ter!ada" latar &elakan ela". Keuntunan dari menunakan

met#de ini dari"ada n#da "#$iti' &ia$a $e"erti 'u/!$in+ metilen &lue+ atau /arl+ iala! &a!%a

'ik$a$i $e&elumn(a #le! "ana$ atau alk#!#l tidak di"erlukan $e!ina #rani$me

terli!at. -elain itu "e%arnaan neati' denan nir#$in da"at menunka"kan &e&era"a

mikr##rani$me (an tidak da"at di%arnai denan met#de &ia$a.

Lu#l$ (#dium+ jua dikenal $e&aai $#lu$i lu#l+ meru"akan $#lu$i dari i#dium dan

i#dida dalam air. Larutan (#dium lu#l diunakan $e&aai anti$e"tik dan de$in'ektan+ dan

untuk de$in'ika$i darurat air minum+ dan $e&aai reaen untuk detek$i "a$ti di dalam

larat#rium+ "e%arnaan dan te$ medi$ 6D%idj#$e"utr#.*


27/62

"en/u/ian terlalu dera$ dalam mem&ila$ 3at %arna denan air $e!ina da"at men(e&a&kan

&akteri larut ter&a%a air

BAB .

PENUTUP

1! Ke0i,p%lan

Dari "er/#&aan "e%arnaan (an dilakukan da"at ditarik ke$im"ulan :

− Pe%arnaan &akteri di"enaru!i 'akt#r,'akt#r antara lain 'ik$a$i+ "elunturan %arna+ $u&$trat+

inten$i'ika$i "e%arnaan dan "enunaan 3at %arna "enutu"

− Per&edaan "ada aram neati' dan ram "#$iti' terletak "ada %arnan(a "ada ram "#$iti'

&er%arna unu kareana da"at mem"erta!ankan 3at "e%arna kri$tal ?i#let $erta "er&adaan

terjadi "ada dindin $eln(a

− Ma/am,ma/am "e%arnaan anatara lain : "e%arnaan $eder!ana+"e%arnaan

di''eren$ial+"e%arnaan $"#ra dan "er%arnaan ka"$ul


28/62

− Larutan 3at %arna (an diunakan "ada "er/#&aan "er%arnaan antara lain : alk#!#l+ /arl

'u/!$in+ /r($tal ?i#let+ nir#$in+ mala/!ite reen+ lu#l$ i#dida+ dan $a'ranin.

1$ (aran

-e&aikn(a "ada "raktikum dilakukan "er/#&aa& (an lain $e"erti "e%arnaan ka"$ul+ &a$il ta!an a$am+ dan "er%arnaan 'ult#n+ di!ara"kan denan mem"elajari &er&aai ma/am

met#de "e%arnaan le&i! &an(ak menenai tentan "r#$e$ dan met#de "e%arnaan.

DAFTAR PU(TAKA

D%idj#$e"utr#+ D.*


29/62

BAB I

PENDAULUAN

!! La#ar Belakang

Mikr##rani$me (an ada di alam ini mem"un(ai m#r'#l#i+ $truktur dan $i'at,$i'at

(an k!a$+ &eitu "ula denan &akteri. Bakteri (an !idu" !am"ir tidak &er%arna dan k#ntra$

denan air+ dimana $el,$el &akteri ter$e&ut di$u$"en$ikan. -ala! $atu /ara untuk menamati

&entuk $el &akteri $e!ina muda! untuk diidenti'ika$i iala! denan met#de "ene/atan atau

"e%arnaan. 0al ter$e&ut jua &er'un$i untuk meneta!ui $i'at 'i$i#l#i$n(a+ (aitu

meneta!ui reak$i dindin $el &akteri melalui $erankaian "ene/atan 60a$t#%#+ 57759.

Mikr##rani$me $ulit dili!at denan mikr#$k#" /a!a(a+ karena tidak menad$#r"$i

atau"un mem&ia$kan /a!a(a. Ala$an inila! (an men(e&a&kan 3at %arna diunakan untuk

me%arnai mikr##rani$me atau"un latar &elakann(a. Hat %arna menad$#r"$i dan

mem&ia$kan /a!a(a $e!ina k#ntra$ mikr##rani$me di$ekelilin(a ditinkatkan.

Penunaan 3at %arna memunkinkan "enamatan $truktur $el $e"erti $"#ra dan &a!an

in'ek$i (an menandun 3at "ati dan ranula '#$'at. Pe%arnaan (an diunakan untuk

meli!at $ala! $atu $truktur $el di$e&ut "e%arnaan k!u$u$. -edankan "e%arnaan (an

diunakan untuk memila!kan mikr##rani$me di$e&ut "e%arnaan di'eren$ial (an

memila!kan &akteri menjadi kel#m"#k ram "#$iti' dan ram neati'. Pe%arnaan di'eren$ial

lainn(a iala! "e%arnaan #iel $eelsen (an memili!kan &akterin(a menjadi kel#m"#k,kel#m"#k ta!an a$am dan tidak ta!an a$am 6D%idj#$e"utr#+ *


30/62

Pe%arnaan Gram atau met#de Gram adala! $ala! $atu teknik "e%arnaan (an "alin

"entin dan lua$ (an diunakan untuk menidenti'ika$i &akteri. Dalam "r#$e$ ini+ #le$an

&akteri (an $uda! ter'ik$a$i dikenai larutan,larutan &erikut: 3at "e%arna kri$tal ?i#let+

larutan (#dium+ larutan alk#!#l 6&a!an "emu/at9+ dan 3at "e%arna tandinann(a &eru"a 3at

%arna $a'ranin atau air fucsin 60a$t#%#+ 57759.

!$ T%&%an

Ada"un tujuan dilak$anakann(a "raktikum Pene/atan4Pe%arnaan Bakteri ini adala!

untuk menamati m#r'#l#i &akteri+ untuk menamati dan mem&edakan $truktur (an

terda"at dalam $el dan jua untuk mem&edakan kel#m"#k &akteri &erda$arkan reak$in(a

ter!ada" %arna (an $ekaliu$ menunjukkan $i'at &akteri ter$e&ut+ $erta untuk mem"elajari

"e%arnaan $"#ra &akteri.

BAB II

TIN'AUAN PU(TAKA

$! Penger#ian Pewarnaan Bak#eri

Penenalan &entuk mikr#&a+ ke/uali mikroalgae !aru$ dilakukan "e%arnaan terle&i!

da!ulu aar da"at diamati denan jela$. Tujuan dari "e%arnaan adala! untuk mem"ermuda!

"enamatan &entuk $el &akteri+ mem"erlua$ ukuran ja$ad+ menamati $truktur dalam dan luar

$el &akteri+ dan meli!at reak$i ja$ad ter!ada" "e%arna (an di&erikan $e!ina $i'at 'i$ik atau

kimia ja$ad da"at diketa!ui 60adi#et#m#+ *


31/62

$$ Ma2a,3Ma2a, Pewarnaan Bak#eri

Pe%arnaan "ada &akteri di&ai menjadi tia+ (aitu :

! Pewarnaan (e+er-ana

Pe%arnaan $eder!ana meru"akan teknik "e%arnaan (an "alin &an(ak diunakan.

Di$e&ut $eder!ana karena !an(a menunakan $atu jeni$ 3at %arna untuk me%arnai

#rani$me ter$e&ut. Ke&an(akan &akteri muda! &ereak$i denan "e%arnaan,"e%arnaan

$eder!ana karena $it#"la$man(a &er$i'at &a$#'ilik 6$uka denan &a$a9. Hat,3at %arna (an

diunakan untuk "e%arnaan $eder!ana umumn(a &er$i'at alk#lin. Denan "e%arnaan

$eder!ana da"at meneta!ui &entuk dan rankaian $el,$el &akteri. Pe%arna &a$a (an &ia$a

diunakan untuk "e%arnaan $eder!ana iala! metilen &iru+ kri$tal ?i#let+ dan karl fucsin

(an mana "e%arnaan $eder!ana ini di&ai lai menjadi dua jeni$ "e%arnaan

6D%idj#$e"utr#+ *


32/62


33/62

kimia. Tujuan dilakukann(a "e%arnaan end#$"#ra adala! mem&edakan end#$"#ra denan $el

?eetati'+ $e!ina "em&edaann(a tam"ak jela$. End#$"#ra teta" da"at dili!at di &a%a!

mikr#$k#" me$ki"un tan"a "e%arnaan dan tam"ak $e&aai &ulatan tran$"aran. Namun jika

denan "e%arnaan $eder!ana+ end#$"#ra $ulit di&edakan denan &adan inklu$i 60a$t#%#+

57759.

a. Pe%arnaan Ka"$ul

Pe%arnaan ini menunakan larutan kri$tal ?i#let "ana$+ lalu larutan tem&aa $ul'at

$e&aai "em&ila$an men!a$ilkan %arna &iru "u/at "ada ka"$ul+ karena jika "em&ila$an

denan air da"at melarutkan ka"$ul. Garam tem&aa jua mem&eri %arna "ada latar &elakan

(an &er%ana &iru ela" 60a$t#%#+ 57759.

&. Pe%arnaan -"#ra

Dindin $"#ra relati' tidak &ermeable+ namun 3at %arna &i$a menem&u$n(a denan

/ara memana$kan "re"arat 60a$t#%#+ 57759.

/. Pe%arnaan Flael

Pe%arnaan 'lael denan mem&eri $u$"en$i k#l#id aram a$am tanat (an tidak $ta&il+

$e!ina ter&entuk "re$i"itat te&al "ada dindin $el dan 'lael 60a$t#%#+ 57759.

d. Pe%arnaan Nukle#id

Pe%arnaan nukle#id menunakan "e%arna 'u/!$in (an k!u$u$ untuk DNA

60a$t#%#+ 57759.

BAB III

METODOLOGI PRAKTIKUM

*! Wak#% +an Te,pa#

Praktikum Mikr#&i#l#i denan judul Pene/atan4Pe%arnaan Bakteri dilak$anakan "ada !ari -enin+ tanal < De$em&er 57*; "ada "ukul *;.57 WIB !ina $ele$ai. Praktikum

ini &ertem"at di Larat#rium Bi#l#i In$titut Aama I$lam Neeri 6IAIN9 Raden Fata!

Palem&an.

*$ Ala# +an Ba-an

*$! Ala#

Alat (an diunakan (aitu:

+ -b.ect Glass


34/62

5. Ti$u

;. Jarum O$e

2. Mikr#$k#"

C. Bun$en

>. Nam"an

8. Rak dari Ka%at1. Penara$ Air

*$$ Ba-an

Ba!an (an diunakan (aitu:

*. Akuade$

/ Metilen Blue

0 Gentian 1iolet

2. Larutan I#dium

C. Alk#!#l >. Larutan -a'ranin

8. Bakteri (an akan diuji

** )ara Ker&a

**! Pewarnaan 0e+er-ana

a Pewarnaan 0e+er-ana po0i#i4

*9 Ber$i!kan ob.ect glass denan ka"a$.

59 Jika "erlu tuli$kan k#de atau nama &akteri "ada $udut ob.ect glass

;9 Bila menunakan &iakan /air "inda!kan $etete$ &iakan denan "i"et tete$ atau da"at jua

di"inda!kan denan jarum in#kulum. Janan lu"a &iakan dik#/#k terle&i! da!ulu. Jika

diunakan &iakan "adat+ maka &iakan di"inda!kan denan jarum in#kulum+ $atu ula$an $aja

kemudian di&eri auade$ dan di$e&arkan $u"a(a $el merata.

29 Kerinkan ula$an ter$e&ut $am&il mem'ik$a$in(a denan a"i &un$en 6le%atkan "ada a"i 5,;

kali9.

C9 -etela! &enar,&enar kerin dan ter$e&ar $elanjutn(a ditete$i denan "e%arna 6da"at

diunakan metylen blue, safranin, crystal )iolet2 dan tunu kuran le&i! ;7 detik.

>9 )u/i denan auade$ kemudian kerinkan denan kerta$ ti$u.89 Perik$a denan mikr#$k#" 6"er&e$aran *77 *79.

b Pewarnaan 0e+er-ana nega#i4

*9 Am&il dua ob.ect glass, tete$kan nigrosin atau tinta /ina diujun kanan $ala! $atu ob.ect

glass.

59 Biakan diam&il lalu diula$kan atau ditete$kan dalam tete$an nitr#en tadi+ lalu di/am"urkan.

;9 Tem"elkan $i$i ob.ect glass (an lain kemudian e$ekkan ke$am"in kiri.

29 Biarkan "re"arat menerin diudara+ janan di'ik$a$i atau di"ana$kan diata$ a"i.

**$ Pewarnaan gra,

)ara kerja 0a$il atau dam"ak Buat "re"arat ula$ 6 smear2 (an -el &akteri tertem"el "ada


35/62


36/62

$e&aai "en#ntra$ $aja.

)u/i denan auade$ menalir.

Kerinkan "re"arat denan

kerta$ ti$u (an ditem"elkan

di$i$i ula$an 6janan $am"ai

meru$ak ula$an9 lalu &iarkan

menerin diudara.

*** Pewarnaan (pora

a. -ediakan ob.ect glass (an &er$i!+ lalu 'ik$a$i.

&. Tete$kan $etete$ auade$ $teril diata$ ka/a ob.ect glass ter$e&ut.

/. Am&il &akteri (an akan diuji denan menunakan jarum #$e 6in#kula$i9+ lalu letakkan

diata$ tete$an auade$ itu+ ratakan "elan,"elan.

d. Am&il ob.ect glass (an lainn(a (an &er$i!+ lalu letakkan diata$ ob.ect glass $ediaan

ter$e&ut $e!ina mem&entuk $udut 2C7.

e. Ge$er ob.ect glass+ $e!ina $ediaan menjadi ti"i$ dan merata+ &iarkan !ina kerin

'. Fik$a$i denan /ara mele%atkan $ediaan diata$ n(ala a"i &un$en denan /e"at.

. Tete$kan larutan !ijau metalik diata$ a"u$an &akteri ter$e&ut+ lalu "an$kan diata$ ua" air

mendidi! $elama C menit. Jaala! janan $am"ai a"u$an menerin+ jika menerin

tam&a!kan kem&ali larutan !ijau metalik.

!. )u/i denan air menalir.

i. Tete$kan denan larutan $a'ranin "ada a"u$an $e!ina $eluru! a"u$an tertutu" &iarkan

$elama *,5 menit. j. )u/i denan air menalir+ lalu kerinkan denan menunakan kerta$ !i$a" atau ti$u.

k. Amati denan menunakan mikr#$k#" denan min(ak imer$i. -el ?eetati' akan &er%arna

mera! muda dan $"#ra akan &er%arna !ijau.

l. Gam&ar $el denan $"#ran(a.

BAB I.

A(IL DAN PEMBAA(AN

/! a0il

Bentuk Warna Gam&ar


37/62

Batan4Ba$il nu

Bacillus subtilis

6Gram P#$iti'9

Bulat Mera! Muda

!erratia marcescens

6Gram Neati'9

/$ Pe,ba-a0anPe%arnaan ram meru"akan "e%arnaan (an diunakan untuk menel#m"#kan &akteri

ram "#$iti' dan ram neati'. Bakteri ram "#$iti' akan mem"erta!ankan 3at %arna kri$tal

?i#let dan akan tam"ak &er%arna unu tua di &a%a! mikr#$k#". Ada"un &akteri ram neati'

akan ke!ilanan 3at %arna kri$tal ?i#let $etela! di/u/i denan alk#!#l+ dan $e%aktu di&eri 3at

"e%arna air fucsin atau $a'ranin akan tam"ak &er%arna mera!. Per&edaan 3at %arna ini

di$e&a&kan #le! "er&edaan dalam $truktur kimia%i dindin $eln(a. Pe%arna (an diunakan

dalam "e%arnaan ram antara lain: kri$tal ?i#let+ alk#!#l+ $a'ranin+ dan i#din 6La(+ *


38/62

Nir#$in adala! /am"uran dari "e%arna $inte$i$ !itam (an di&uat denan

memana$kan /am"uran nitr#&en3ena+ anilin+ dan !idr#kl#rida. Indu$tri utaman(a adala!

$e&aai "e%arna untuk lak+ "erni$+ dan tinta "enanda "ena. Didalam &i#l#i+ nir#$in

diunakan untuk "e%arnaan neati' &akteri. Bentuk dan #rani$me (an terli!at $e&aai

%arna &e&a$ menuraikan ter!ada" latar &elakan ela". Keuntunan dari menunakan

met#de ini dari"ada n#da "#$iti' &ia$a $e"erti fucsin+ metilen blue+ atau carbol + iala! &a!%a

'ik$a$i $e&elumn(a #le! "ana$ atau alk#!#l tidak di"erlukan $e!ina #rani$me terli!at.

-elain itu "e%arnaan neati' denan nir#$in da"at menunka"kan &e&era"a

mikr##rani$me (an tidak da"at di%arnai denan met#de &ia$a 6La(+ *


39/62

Pada "raktkum di da"ati !a$il &a!%a "ada "e%arnaan &akteri Bacillus subtilis denan

"enamatan mikr#$k#" "ada "er&e$aran 2*7 &entuk &akterin(a &a$il4&atan+ lalu %arna

(an teta" menem"el adala! %arna unu+ $e!ina diketa!ui &a!%a Bacillus subtilis

meru"akan ram "#$iti'. -edankan "ada &akteri !erratia marcescens (an diamati denan

mikr#$k#" "ada "er&e$aran 2*7 jua+ &akteri &er&entuk &ulat4k#ku$ dan teta"

mem"erta!ankan %arna mera! muda+ (an &erarti !erratia marcescens meru"akan ram

neati'.

0al ini di"erkuat #le! 6Pel/3ar+ *9. Be&era"a "er&edaan $i'at (an da"at dijum"ai

antara &akteri ram "#$iti' dan &akteri ram neati' (aitu &akteri ram,"#$iti' adala! &akteri

(an mem"erta!ankan 3at %arna metil unu $e%aktu "r#$e$ "e%arnaan ram. Bakteri jeni$

ini akan &er%arna &iru atau unu di&a%a! mikr#$k#"+ $edankan &akteri ram,neati' akan

&er%arna mera! atau mera! muda. Per&edaan kla$i'ika$i antara kedua jeni$ &akteri ini

terutama dida$arkan "ada "er&edaan $truktur dindin $el &akteri.

Menurut 6La(+ *


40/62

Di"#$kan #le! De&( N#?i(anti di >4*8457*C 7*:7>:77 AM

Kirimkan Ini le%at EmailBl#T!i$QBer&ai ke T%itterBer&ai ke Fa/e#kBaikan ke

Pintere$t

La&el: La"#ran Praktikum Mikr#&i#l#i

III. 0A-IL DAN PEMBA0A-AN

https://plus.google.com/115435104601855514359http://debynoviyanti29.blogspot.co.id/2015/06/laporan-mikrobiologi.htmlhttps://www.blogger.com/share-post.g?blogID=442419986273764906&postID=2681269640161329485&target=emailhttps://www.blogger.com/share-post.g?blogID=442419986273764906&postID=2681269640161329485&target=bloghttps://www.blogger.com/share-post.g?blogID=442419986273764906&postID=2681269640161329485&target=twitterhttps://www.blogger.com/share-post.g?blogID=442419986273764906&postID=2681269640161329485&target=facebookhttps://www.blogger.com/share-post.g?blogID=442419986273764906&postID=2681269640161329485&target=pinteresthttps://www.blogger.com/share-post.g?blogID=442419986273764906&postID=2681269640161329485&target=pinteresthttp://debynoviyanti29.blogspot.co.id/search/label/Laporan%20Praktikum%20Mikrobiologihttps://plus.google.com/115435104601855514359http://debynoviyanti29.blogspot.co.id/2015/06/laporan-mikrobiologi.htmlhttps://www.blogger.com/share-post.g?blogID=442419986273764906&postID=2681269640161329485&target=emailhttps://www.blogger.com/share-post.g?blogID=442419986273764906&postID=2681269640161329485&target=bloghttps://www.blogger.com/share-post.g?blogID=442419986273764906&postID=2681269640161329485&target=twitterhttps://www.blogger.com/share-post.g?blogID=442419986273764906&postID=2681269640161329485&target=facebookhttps://www.blogger.com/share-post.g?blogID=442419986273764906&postID=2681269640161329485&target=pinteresthttps://www.blogger.com/share-post.g?blogID=442419986273764906&postID=2681269640161329485&target=pinteresthttp://debynoviyanti29.blogspot.co.id/search/label/Laporan%20Praktikum%20Mikrobiologi


41/62

;.* 0a$il Penamatan Terlam"ir

;.5 Pem&a!a$an

Pada "er/#&aan "ertama (aitu "e%arnaan &a$a menunakan metiline

&lue. -etela! dimati di &a%a! mikr#$k#"+ da"at diketa!ui &a!%a $el &akteri

-ta"!(l#/#//u$ aereu$+ Ba/illu$ $". dan E. )#li+ &er%arna &iru. Pada i$#lat &akteri

jantun a(am dan dain a(am+ $eln(a jua &er%arna &iru di$e&a&kan #le!dindin $el &akteri (an memiliki muatan neati' &er$atu denan i#n (an

&ermuatan "#$iti' dari metiline &lue dan men(e&a&kan $el &akteri ter$e&ut

ter%arnai 6Ram#na dkk+ 57789. -edankan "ada i$#lat &akteri !ati a(am $eln(a

tidak &er%arna+ !al ter$e&ut diaki&atkan "ada $aat "en/u/ian denan air menalir

(an terlalu lama+ dan "ada $aat "enerinan ter$entu! #le! "raktikan+ $e!ina

%arna metiline &lue luntur.

Pada "er/#&aan kedua (aitu "e%arnaan neati'+ menunakan /airan

nir#$in 6tinta /ina9. 0a$il (an dida"at $etela! diamati di&a%a! mikr#$k#"

adala! $emua i$#lat &akteri $eln(a &er%arna &enin+ teta"i "ada linkunan di

$ekitar $el tam"ak &er%arna !itam. 0al ter$e&ut terjadi karena "e%arna ini tidak

menem&u$ atau &erikatan denan dindin $el &akteri aki&at adan(a da(a t#lakmen#lak antara muatan neati' "e%arna dan muatan neati' dindin $el &akteri.

Pe%arna akan mem&entuk de"#$it di $ekitar &akteri atau men!a$ilkan latar


42/62

PEWARNAAN GRAM DAN PENGAMATAN MORFOLOGI BAKTERIDiposkan oleh ina sholihah di 07.17 1 komentar

I. TujuanMengetahui dan memahami pr!edur pe"arnaan gram dan

menge#mp$$an %a$teri $e da#am $e#mp$ %a$teri gram p!iti& atau

%a$teri gram negati& !erta menentu$an mr&#gin'a.II. Pendahu#uan

Mi$rrgani!me 'ang ada di a#am ini mempun'ai mr&#gi( !tru$tur

dan !i&at)!i&at 'ang $ha!( %egitu pu#a dengan %a$teri. Ba$teri ada#ah

dmain 'ang terdiri dari ma$h#u$ hidup 'ang tida$ memi#i$i mem%ran

inti *pr$arita+. Ba$teri memi#i$i %eragam ,aria!i %entu$(!eperti

---u!( %a!i#( dan !pira#( !erta dapat hidup !#iter maupun

%er$#ni.a%itat %a$teri !angat %er,aria!i dari air( tanah( udara(

hingga da#am tu%uh he"an. Ba$teri umumn'a tida$ memi#i$i pigmen

!ehingga tida$ %er"arna dan hampir tida$ $e#ihatan $arena tida$

$ntra! dengan medium dimana mere$a hidup. O#eh $arena itu( per#u

di#a$u$an pe"arnaan agar %a$teri tampa$ je#a! %i#a diamati dengan

mi$r!$p *D"idj!eputr( /001+.

2ntu$ mengidenti3$a!i !uatu %ia$an murni %a$teri ha!i# i!#a!i mu#a)

mu#a diamati mr&#gi !e# !e-ara mi$r!$pi$ me#a#ui penge-etan atau

pe"arnaa( !a#ah !atun'a ada#ah dengan pe"arnaan gram. Pe"arnaan

gram merupa$an !a#ah !atu te$ni$ pe"arnaan atau penge-atan 'ang

di$erja$an di #a%ratrium mi$r%i#gi untu$ $epentingan identi3$a!i

%a$teri. Mr&#gi mi$r!$pi$ mi$rrgani!me 'ang diperi$!a dan

!i&atn'a 'ang $ha! terhadap penge-atan tertentu *penge-atan gram+

dapat diguna$an untu$ identi3$a!i a"a#. Dengan metde penge-atan

gram( %a$teri dapat di$e#mp$$an menjadi dua( 'aitu %a$teri Gram

p!iti& dan Gram negati& %erda!ar$an rea$!i atau !i&at %a$teri terhadap

-at ter!e%ut. Rea$!i atau !i&at %a$teri ter!e%ut ditentu$an #eh

$mp!i!i dinding !e#n'a. O#eh $arena itu( penge-atan gram tida$ %i!a

di#a$u$an pada mi$rrgani!me 'ang tida$ mempun'ai dinding !e#.

Da#am pr!e! ini( #e!an %a$teri 'ang !udah ter3$!a!i di$enai #arutan)

#arutan %eri$ut 4 5at pe"arna $ri!ta# ,i#et( #arutan idium( #arutan

http://inasholihah2006-laporan-praktikumgizi.blogspot.co.id/2014/08/laporan-praktikum-mikrobiologi-pangan_73.htmlhttp://inasholihah2006-laporan-praktikumgizi.blogspot.co.id/2014/08/laporan-praktikum-mikrobiologi-pangan_73.htmlhttp://inasholihah2006-laporan-praktikumgizi.blogspot.co.id/2014/08/laporan-praktikum-mikrobiologi-pangan_73.html#comment-formhttp://inasholihah2006-laporan-praktikumgizi.blogspot.co.id/2014/08/laporan-praktikum-mikrobiologi-pangan_73.htmlhttp://inasholihah2006-laporan-praktikumgizi.blogspot.co.id/2014/08/laporan-praktikum-mikrobiologi-pangan_73.htmlhttp://inasholihah2006-laporan-praktikumgizi.blogspot.co.id/2014/08/laporan-praktikum-mikrobiologi-pangan_73.html#comment-form


43/62

a#$h# *%ahan pemu-at+( dan 5at pe"arna tandingann'a %erupa

!a&ranin.

Ba$teri garam p!iti& ada#ah %a$teri 'ang mempertahan$a 5at "arna

meti# ungu atau Kri!ta# ungu !e"a$tu pr!e! pe"arnaan gram. Ba$teri jeni! ter!e%ut a$an %er"arna %iru atau ungu di %a"ah mi$r!$p(

!edang$an %a$teri gram negati,e a$an %er"arna merah muda atau

merah. Per%edaan $#a!i3$a!i antara $edua jeni! %a$teri ter!e%ut

terutama dida!ar$an pada per%edaan !tru$tur dinding !e# %a$teri

*Karmana( /006+.Berda!ar$an ha# ter!e%ut ma$a di#a$u$an#ah agar

pra$ti$an dapat memahami dan me#a$u$an pe"arnaan gram terhadap

!uatu jeni! %a$teri7 mengidenti3$a!i !uatu jeni! %a$teri gram p!iti&

atau gram negati&7 dan mengamati %entu$ %a$teri.

III. Tinjauan Pu!ta$aA. Pe"arnaan Gram

Ba$teri merupa$an rgani!me pr$arit. 2mumn'a u$uran %a$teri

!angat $e-i#( %entu$ tu%uh %a$teri %aru dapat di#ihat dengan

mengguna$an mi$r!$p dengan pem%e!aran 8.000 9 atau #e%ih

*Wa#u'( /00:+. ;e# %a$teri memi#i$i panjang 'ang %eragam( !e#

%e%erapa !pe!ie! dapat %eru$uran 800 $a#i #e%ih panjang daripada !e#

!pe!ie! 'ang #ain. Ba$teri merupa$an ma$h#u$ hidup dengan u$uran

antara 0(8 !ampai 0(< =m. *Pe#-5ar dan >han( /00?+.

Pe"arnaan %a$teri %ertujuan untu$ memudah$an me#ihat %a$teri

dengan mi$r!$p( memperje#a! u$uran dan %entu$ %a$teri( untu$

me#ihat !tru$tur #uar dan !tru$tur da#am %a$teri !eperti dinding !e# dan

,a$u#a( mengha!i#$an !i&at)!i&at 3!i$ dan $imia 'ang $ha! daripada

%a$teri dengan 5at "arna( !erta mening$at$an $ntra! mi$rrgani!medengan !e$itarn'a. *Pe#-5ar @ >han( /00?+.

at "arna ada#ah !en'a"a $imia %erupa garam)garam 'ang !a#ah

!atu inn'a %er"arna. Garam terdiri dari in %ermuatan p!iti& dan in

%ermuatan negati&. ;en'a"a)!en'a"a $imia ini %erguna untu$

mem%eda$an %a$teri)%a$teri $arena rea$!in'a dengan !e# %a$eri a$an

mem%eri$an "arna %er%eda. Per%edaan ini#ah 'ang diguna$an !e%agai

da!ar pe"arnaan %a$teri. *Pe#-5ar @ >han( /00?+.


44/62

Prin!ip da!ar dari pe"arnaan ada#ah adan'a i$atan in antara

$mpnen !e#u#ar dari %a$teri dengan !en'a"a a$ti& dari pe"arna 'ang

di!e%ut $rmgen. I$atan in dapat terjadi $arena adan'a muatan

#i!tri$ %ai$ pada $mpnen !e#u#er maupun pada pe"arna.*#$ dan

Whee#er( 8CC


45/62

!edang$an 5at)5at "arna 'ang diguna$an untu$ pe"arnaan !ederhana

umumn'a %er!i&at a#$a#in *$mpnen $rm&ri$n'a %ermuatan

p!iti&+.at "arna 'ang dipa$ai han'a terdiri dari !atu 5at 'ang

di#arut$an da#am %ahan pe#arut. Pe"arnaan ;ederhana merupa$an !atu

-ara 'ang -epat untu$ me#ihat mr&#gi %a$teri !e-ara umum.

Be%erapa -nth 5at "arna 'ang %an'a$ diguna$an ada#ah %iru meti#en

*han( /00?+

/. Pe"arnaan dieren!ia#Pe"arnaan %a$teri 'ang mengguna$an #e%ih dari !atu 5at "arna

!eperti pe"arnaan gram. Pe"arnaan gram atau metde gram ada#ah

!a#ah !atu te$ni$ pe"arnaan 'ang pa#ing penting dan #ua! di guna$anuntu$ mengidenti3$a!i %a$teri. Metde ini di %eri nama %erda!ar$an

penemun'a( i#mu"an Denmar$ an! >hri!tian Gram *861han( /00?+.

>iri)-iri %a$teri gram negati& 'aitu4

a. ;tru$tur dinding !e#n'a tipi!( !e$itar 80 81 mm( %er#api! tiga atau

mu#ti#a'er.%. Dinding !e#n'a mengandung #ema$ #e%ih %an'a$ *88)//+(

peptidg#i$an terdapat dida#am #api!an $a$u( !e%e#ah da#am dengan

jum#ah !edi$it 80 dari %erat $ering( tida$ mengandung a!am te$at.-. Kurang rentan terhadap !en'a"a peni!i#in.d. Pertum%uhann'a tida$ %egitu diham%at #eh 5at "arna da!ar mi!a#n'a

$ri!ta# ,i#et.e. Kmp!i!i nutri!i 'ang di%utuh$an re#ati& !ederhana.

&. Tida$ re!i!ten terhadap gangguan 3!i$.*Pe#-5ar dan >han( /00?+


46/62

>iri)-iri %a$teri gram p!iti& 'aitu4

a. ;tru$tur dinding !e#n'a te%a#( !e$itar 81)60 nm( %er#api! tungga# atau

mn#a'er.%. Dinding !e#n'a mengandung #ipid 'ang #e%ih nrma# *8):+(

peptidg#i$an ada 'ang !e%agai #api!an tungga#. Kmpnen utama

merupa$an #e%ih dari 10 %erat ringan. Mengandung a!am te$at.-. Ber!i&at #e%ih rentan terhadap peni!i#in.d. Pertum%uhan diham%at !e-ara n'ata #eh 5at)5at "arna !eperti ungu

$ri!ta#.e. Kmp!i!i nutri!i 'ang di%utuh$an #e%ih rumit.&. Le%ih re!i!ten terhadap gangguan 3!i$.

*Pe#-5ar dan >han( /00?+

Da#am pe"arnaan gram diper#u$an empat reagen 'aitu 4

a. at "arna utama *,i#et $ri!ta#+%. Mrdan *#arutan Idin+ 'aitu !en'a"a 'ang diguna$an untu$

menginten!i&$an "arna utama.-. Pen-u-i H pe#untur 5at "arna *a#-h# H a!etn+ 'aitu !#,en rgani-

'ang diguna$an uantu$ me#untur$an 5at "arna utama.d. at "arna $edua H -at penutup *!a&ranin+ diguna$an untu$ me"arnai

$em%a#i !e#)!e# 'ang te#ah $ehi#angan -at utama !ete#ah per#a$uan

dengan a#-h#. *Pe#-5ar dan >han( /00?+

Pen'e%a% terjadin'a dua g#ngan %a$teri 'aitu Gram p!iti& dan

Gram negati& ia#ah !ete#ah di%eri 5at pe"arna &enmenan'a ini(

%erhu%ungan dengan !tru$tur dan $mp!i!i dinding !e#. Per%edaan

$ete%a#an antara $edua g#ngan itu dapat merupa$an ha# 'ang

penting7 dinding !e# %a$teri Gram negati& pada umumnn'a #e%ih tipi!

dari 'ang dimi#i$i %a$teri Gram p!iti&. Pre!enta!i $andungan #ipid

%a$teri Gram negati& #e%ih tinggi daripada Gram p!iti&. Ken'ataann'a

da#am e$!perimen penge-atan menunju$$an %ah"a per#a$uan dengan

a#$h# menge!$!tra$ #ipid( 'ang men'e%a%$an pi!ita! atau

permea%i#ita! dinding !e# mening$at. Dengan demi$ian( $mp#e$!

$ar%# gentian ,i#et dan #ug# dapat di!ari $e#uar dan %a$teri Gram

negati& ter"arna$an. Keterangan #ain 'ang hampir !ama juga

menda!ar$an pada per%edaan permea%i#ita! antara $edua g#ngan

%a$teri itu( 'aitu pada %a$teri Gram negati& $andungan peptidg#i$an

jauh #e%ih !edi$it !ehingga $erapatan ja#inann'a jauh #e%ih !edi$it

daripada %a$tri gram p!ii&. Pri)pri da#am peptidg#i$an %a$teri Gram


47/62

negati& tetap ma!ih -u$up %e!ar untu$ dapat di!ari $e#uar $mp#e$!

$ar%# gentian ,i#et dan #ug#. ;e#anjutn'a( %i#a !e#)!e# Gram p!iti&

diper#a$u$an dengan #i!5im untu$ men'ing$ir$an dinding !e#n'a( !i!a

!tru$turn'a 'ang di!e%ut prtp#a! atau !e# tanpa dinding a$an

ter-atat juga #eh $mp#e$! $ar%# gentian ,i#et dan #ug#. Tetapi( !e#

ini mudah dihapu!$an #eh a#$h#. Ken'ataan ini menunju$$an %ah"a

!tru$tur dinding !e# %a$teri Gram p!iti& itu 'ang menjadi tempat

pertahann'a 5at pe"arna pertama 'aitu $ar%# gentian ,i#et.

*Karmana( /006+

Teri ;a#tn menje#a!$an %ah"a ada $n!entra!i #ipid 'ang tinggi

pada dinding !e# %a$teri Gram negati&. ;ehingga ji$a #ipid di#arut$an

da#am pem%erian a#-h#( ma$a pri‐pri a$an mem%e!ar dan tida$

mengi$at pe"arna. a# ini men'e%a%$an %a$teri menjadi tida$

%er"arna. ;edang$an %a$teri Gram p!iti& a$an menga#ami denatura!i

!e#ama pem%erian a#-h#. a# ini a$an menge-i#$an pri‐pri !ehingga

mengha!i#$an $mp#e$! $ri!ta# idium. Ba$teri Gram p!iti& memi#i$i

dinding !e# 'ang $uat dan #api!an peptidg#i$an !e%an'a$


48/62

a. Gram p!iti& 4 Pem%e#ahan %iner%. Gram negati& 4 Pem%e#ahan %iner( $adang)$adang pertuna!an:. Meta%#i!mea. Gram p!iti& 4 $emrganhetertr& %. Gram negati& 4 Fttr&( $em#itauttr&( atau $emrganhetertr& 1. Mti#ita!a. Gram p!iti& 4 Ke%an'a$an nnmti#( %i#a mti# tipe Jage#an'a ada#ah

petritri$u! * petritrichous+%. Gram negati& 4 Mti# atau nnmti#. Bentu$ Jage#a dapat %er,aria!i)

p#ar(#ptri$u! *lophtrichous+( petritri$u! * petritrichous+.. Anggta tu%uh *apenda!e+a. Gram p!iti& 4 Bia!an'a tida$ memi#i$i apenda!e%. Gram negati& 4 Dapat memi#i$i pi#i( 3m%riae( tang$ai?. End!praa. Gram p!iti& 4 Be%erapa grup dapat mem%entu$ end!pra%. Gram negati& 4 Tida$ dapat mem%entu$ end!pra

*Tra-'( /001+

Per%edaan re#ati& !i&at %a$teri gram p!iti& dan gram negati&.

;i&at Ba$teri garam *+ Ba$teri gram

negati&*)+

Kmp!i!i dinding

!e#

Kandungan #ipid rendah

*8):+

Kandungan #ipid

tinggi

Ketahanan

terhadap peni!i#in

Le%ih !en!iti& Le%ih tahan

Pengham%atan

#eh pe"arna

%a!a *K+

Le%ih diham%at Kurang diham%at

Ke%utuhan nutri!i Ke%an'a$an !pe!ie!

re#ati& $mp#e$!

Re#ati& !ederhana

Ketahanaa

terhadap

per#a$uan 3!i$

Le%ih tahan Kurang tahan

*Tra-'( /001+


49/62


50/62

dan 5at)5at 'ang tim%u# !e%agai 5at)5at pertu$aran 5at %ertim%un)

tim%un dan &a$tr)&a$tr #uar #ain'a merugi$an tetapi pada %e%erapa

!pe!ie! mampu mem%entu$ !pra me!$ipun tida$ terganggu #eh

&a$tr #uar. ;pru#a!i dapat di -egah( ji$a !e#a#u diada$an pemindahan

piaraan $e medium 'ang %aru( %e%erapa !pe!ie! %a$teri dapat

$ehi#angan $emampuan'a untu$ mem%entu$ !pra)!pra dapat tum%uh

#agi menjadi %a$teri apa%i#a $eadaan di #uar menguntung$an. Mu#a)

mu#a air mere!ap $e da#am !pra( $emudian !pra mengem%ang dan

$u#it !pra menjadi reta$ $arenan'a $ereta$an ini dapat terjadi pada

!a#ah !atu ujung. Tetapi juga dapat terjadi di tengah)tengah !pra. a#

ini merupa$an -irri $ha! %agi %e%erapa !pe!ie! %a-i##u!( ji$a $u#it !pra

pe-ah di tengah)tengah ma$a ma!ing)ma!ing pe-ahan a$an merupa$an

!uatu tutup pada $edua ujung %a$teri *Pe#-5ar dan >han( /00?+.%. Pewarnaan fagel

Pe"arnaan Jage# dengan mem%eri !u!pen!e $#id garam a!am tanat

'ang tida$ !ta%i#( !ehingga ter%entu$ pre!ipitat te%a# pada dinding !e#

dan Jage#. *Tra-'( /001+.

-. Pewarnaan kapsul

Pe"arnaan ini mengguna$an #arutan Kri!ta# ,i#et pana!( #a#u #arutan

tem%aga !u#&at !e%agai pem%i#a!an mengha!i#$an "arna %iru pu-at

pada $ap!u#( $arena ji$a pem%i#a!an dengan air dapat me#arut$an

$ap!u#. Garam tem%aga juga mem%eri "arna pada #atar %e#a$ang. ang

%er"ana %iru ge#ap. *Pe#-5ar dan >han( /00?+.

d. Pewarnaan nucleoid Pe"arnaan nu-#eid mengguna$an pe"arna &ue#gen 'ang $hu!u! untu$

DNA *amid( /080+.1. Pe"arnaan negati&

Pe"arnaan negati& 'aitu dengan pe"arnaan #atar %e#a$ang !e#

dengan 5at "arna a!am( !ehingga !e# !e# ter!e%ut !e-ar $ntra! tida$

%er"arna. ang %ia!an'a dipa$ai ada#ah 5at "arna hitam nigr!in.

Metde ini diguna$an untu$ !e# !e# dan !tru$tur !tru$tur 'ang !u$ar

di"arnai !e-ara #ang!ung. *amid( /080+.

Adapun &a$tr)&a$tr 'ang mempengaruhi pe"arnaan %a$teri !e%agai

%eri$ut4


51/62

8. Fi$!a!i

Fi$!a!i per#u di#a$u$an !e%e#um pe"arnaan %a$teri $arena %erguna

mere$at$an !e# %a$teri pada ge#a! %je$( mem%unuh %a$teri(

me#epa!$an granu#a *%utiran+ prtein menjadi gugu!an rea$ti& *N<

+mem%uat !e#)!e# #e%ih $uat( men-egah terjadin'a t#i!i! !e#(

mengu%ah a,inita!( 3$!a!i dapat di#a$u$an !e-ara 3!i$ atau dengan

%ahan $imia.

/. Pe#untur 5at "arna

Pe#untur 5at "arna %erguna untu$ mengha!i#$an $ntra! 'ang #e%ih

%ai$ pada %a'angan mi$r!$p. Pada umumn'a( !e#)!e# 'ang mudah

di"arnai a$an #e%ih mudah pu#a di#untur$an "arnan'a. ;edang$an !e#)

!e# 'ang !u$ar di"arnai a$an #e%ih !u$ar di#untur$an "arnan'a.


52/62

dengan 5at "arna mu#a)mu#a. at "arna penutup di%eri$an pada a$hir

pe"arnaan dengan tujuan untu$ mem%eri$an $ntra! pada !e#)!e# 'ang

tida$ men'erap 5at "arna utama.

*Pe#-5ar @ >han( /00?+.

B. Mr&#gi Ba$teriBa$teri merupa$an mi$r%ia pr$ariti$ uni!e#u#ar( terma!u$ $#a!

;-hi5m'-ete!( %er$em%ang %ia$ !e-ara a!e$!ua# dengan pem%e#ahan

!e#. Ba$teri tida$ %er$#r3# $e-ua#i %e%erapa 'ang %er!i&at

&t!inteti$. >ara hidup %a$teri ada 'ang dapat hidup %e%a!( para!iti$(

!apr3ti$( patgen pada manu!ia( he"an dan tum%uhan. a%itatn'a

ter!e%ar #ua! di a#am( da#am tanah( atm!&er *!ampai 80 $m diata!

%umi+( di da#am #umpur( dan di #aut. Ba$teri mempun'ai %entu$ da!ar

%u#at( %atang( dan #eng$ung. 2mumn'a %a$teri %eru$uran 0(1)80 =m.

*#$ dan Whee#er( 8CC


53/62


54/62

Ba$teri ter!u!un ata! dinding !e# dan i!i !e#. Di!e%e#ah #uar dinding

!e# terdapat !e#u%ung atau $ap!u#. Di da#am !e# %a$teri tida$ terdapat

mem%rane da#am *endmem%ran+ dan rgane# %ermem%ran !eperti

$#rp#a! dan mit$ndria. ;tru$tur tu%uh %a$teri dari #api!an #uar

hingga %agian da#am !e# 'aitu Jage#a( dinding !e#( mem%rane !e#(

me!!m( #em%aran &t!inteti$( !itp#a!ma( DNA( p#a!mid( ri%!m(

dan end!pra. *I!tamar( /00:+

a. F#age#a

F#age#a terdapat !a#ah !atu ujung( pada $edua ujung atau pada

peru$aan !e#. Fung!in'a untu$ %ergera$. Berda!ar #eta$ dan jum#ahn'a(

tipe Jage##a dapat di%eda$an menjadi mntri$( am3tri$( #&tri$( dan

peritri$.F#age#a ter%uat dari prtein 'ang di!e%ut Jage#in. F#age##a

%er%etu$ !eperti pem%u$a !um%at %t#. Fung!in'a ada#ah untu$

%ergera$. F#age##a %erputar !eperti %a#ing)%a#ing untu$ menggera$$an

%a$teri. F#age#a me#e$at pada mem%rane !e#. *I!tamar( /00:+

%. Dinding !e#

Dinding !e# ter!u!un ata! peptidg#i$an 'a$ni p#i!a$arida 'ang

%eri$atan dengan prtein. Dengan adan'a dinding !e# ini( tu%uh %a$teri

memi#i$i %entu$ 'ang tetap. Fung!i dinding !e# ada#ah untu$ me#indungi

!e#. *I!tamar( /00:+

Di !e%e#ah #uar dinding !e# terdapat $ap!u#. Tida$ !emua !e# %a$teri

memi#i$i $ap!u#. an'a %a$teri patgen 'ang %er$ap!u#. Kap!u#

%er&ung!i untu$ mempertahan$an diri dari anti%di 'ang diha!i#$an

!e#inang. Kap!u# juga %er&ungdi untu$ me#indungi !e# dari $e$eringan.

Kap!u# %a$teri ter!u!un ata! per!en'a"aan antara prtein dan g#i$gen'aitu g#i$prtein. *I!tamar( /00:+

-. Mem%rane !e#

Mem%rane !e# ter!u!un ata! m#e$u# #ema$ dan prtein( !eperti

ha#n'a mem%ran !e# rgani!me 'ang #ain. Mem%rane !e# %er!i&at

!emipermia%#e dan %er&ung!i mengatur $e#uar ma!u$n'a 5at $e#uar

atau $e da#am !e#. *I!tamar( /00:+

d. Me!!m


55/62

Pada tempat tertentu terjadi pennj#an mem%ran !e# $earah da#am

atau $e !itp#a!ma. Tnj#an mem%rane ini %erguna untu$ men'edia$an

energi atau pa%ri$ energi %a$teri. Organ !e# *rgane#+ ini di!e%ut

me!!m. ;e#ain itu me!!m %er&ung!i juga !e%agai pu!at

pem%entu$an dinding !e# %aru diantara $edua !e# ana$ pada pr!e!

pem%e#ahan. *I!tamar( /00:+

e. Lem%ar &t!inteti$

Khu!u! pada %a$teri %er&t!inte!i!( terdapat pe#ipatan mem%rane

!e# $earah !itp#a!ma. Mem%rn 'ang %er#ipat)#ipat ter!e%ut %eri!i

$#r3#(di$ena# !e%agai #em%ar &t!inteti$ *ti#a$id+. Lem%ar

&t!inteti$ %er&ung!i untu$ &t!inte!i! -nthn'a pada %a$teri ungu.

Ba$teri #ain 'ang tida$ %er&t!inte!i! tida$ memi#i$i #ipatan demi$ian.

*I!tamar( /00:+

&. ;itp#a!ma

;itp#a!ma ada#ah -airan 'ang %erada di da#am !e# *-'t! !e#(

p#a!ma -airan+. ;itp#a!ma ter!u!un ata! $#id 'ang mengandung

%er%agai m#e$u# rgani$ !eperti $ar%hidrat( #ema$( prtein( minera#(

ri%!m( DNA( dan en5im)en5im. ;itp#a!ma merupa$an tempat

%er#ang!ung'a rea$!i)rea$!i meta%#i!m. *I!tamar( /00:+

g. DNA

A!am de$!iri%nu$#eat *de'ri%nu-#ei- a-id( di!ing$at DNA+ atau

a!am inti( merupa$an materi geneti- %a$teri 'ang terdapat di da#am

!itp#a!ma. Bentu$ DNA %a$teri !eperti $a#ung 'ang tida$ %erujung

pang$a#. Bentu$ demi$ian di$ena# !e%agai DNA !ir$u#er. DNA ter!u!un

ata! dua uta! p#inu$#etida %erpi#in. DNA merupa$an 5at pengntr#

!inte!i! prtein %a$teri( dan merupa$an5at pem%a"a !i&at atau gen.

DNA ini di$ena# pu#a !e%agai $rm!m %a$teri. DNA %a$teri tida$

ter!e%ar di da#am !itp#a!ma( me#ain$an terdapat pada daerah tertentu

'ang di!e%ut daerah inti. Materi geneti$ ini#ah 'ang di$ena# !e%agai inti

%a$teri. *I!tamar( /00:+

h. P#a!mid


56/62

;e#ain memi#i$i DNA $rm!m( %a$teri juga memi#i$i DNA

nn$rm!m. DNA n$rm!m %entu$n'a juga !ir$u#er dan ter#eta$

di #uar DNA $rm!m. DNA nn$rm!m !ir$u#er ini di$ena# !e%agai

p#a!mid. 2$uran p#a!mid !e$itar 8H8000 $a#i DNA $rm!m. P#a!mid

mengandung gen)gen tertentu mi!a#n'a gen $e%a# anti%iti$( gen

patgen. ;eperti ha#n'a DNA 'ang #ain( p#a!mid mampu me#a$u$an

rep#i$a!i dan mem%entu$ $pi dirin'a da#am jum#ah %an'a$. Da#am !e#

%a$teri dapat ter%entu$ 80)/0 p#a!mid. *I!tamar( /00:+

i. Ri%!m

Ri%!m merupa$an rgane# 'ang %er&ung!i da#am !inte!i! prtein

atau !e%agai pa%ri$ prtein. Bentu$n'a %erupa %utir)%utir $e-i# dan

tida$ di!e#u%ungi mem%ran. Ri%!m ter!u!un ata! prtein dan RNA. Di

da#am !e# %a$teri scherichia coli ter$andung 81.000 ri%!m( atau

$ira)$ira ma!a !e# %a$teri ter!e%ut. Ini menunju$$an %ah"a ri%!m

memi#i$i &ung!i 'ang penting %agi %a$teri. *I!tamar( /00:+

j. End!pra

Ba$teri ada 'ang dapat mem%entu$ end!pra( pem%entu$an

end!pra merupa$an -ara %a$teri mengata!i $ndi!i #ing$ungan 'ang

tida$ menguntung$an. End!pra tahan terhadap pana! !ehingga tida$

mati #eh pr!e! mema!a$ %ia!a. ;pra mati di ata! !uhu 8/0 >. ji$a

$ndi!i te#ah mem%ai$( end!pra dapat tum%uh menjadi %a$teri

!eperti !edia $a#a.* I!tamar( /00:+

I. Metde:.8 A#ata. O%'e$ g#a!!

%. >,er g#a!!-. Mi$r!$p >aha'a Li!tri$ d. arum in$u#a!ie. Bun!en&. Ra$ ta%ungg. Ta%ung rea$!ih. Bea$er g#a!!i. Pipet tete! j. air dr'er:./ Bahana. Bia$an $uman Staptyloeoccus aereus%. Gram A 4 >ar%# gentian ,i#et

-. Gram B 4 Idiumd. Gram > 4 A#$h# C1


57/62

e. Gram D 4 ;a&ranin&. Airg. Kapa!h. Min'a$ imer!i

:.ara $erjaa. Mem%er!ih$an tangan dan meja dengan a#$h#.%. Diam%i# %'e$ g#a!! dan 3$!a!i dengan me#idah api$an di ata! Bun!en

!e%an'a$ / < $a#i !e-ara -epat.-. Diam%i# antara 8 / !e %ia$an $uman Staptyloeoccus aereus dan

di#eta$$an di ata! %'e$ g#a!!.d. Dirata$an %ia$an murni Staptyloeoccus aereus dengan jarum !e.e. Di3$!a!i dengan me#idah api$an %agian 'ang tida$ ada $umann'a di

ata! %un!en / < $a#i dengan -epat.&. Dituang$an pe"arna >ar%# gentian ,i#et( %iar$an 8 menit.g. Di%uang !i!a >ar%# gentian ,i#et.h. Di-u-i preparat dengan air menga#ir.i. Di$ering preparat dengan mengguna$an hair dr'er. j. Dituang$an pe"arna Idium( %iar$an !e#ama / menit.$. Di%uang !i!a Idium.#. Di-u-i preparat dengan air menga#ir.m. Di$ering$an preparat mengguna$an hair dr'er.n. Dipu-at$an dengan a#$h# C1 dengan -ara menete!$an per#ahan

!ampai "arna ungu hi#ang.. Di%i#a! dengan air menga#ir.p. Dituang$an pe"arna ;a&ranin !e%agai "arna penutup atau

pem%anding %iar$an !e#ama


58/62

Pada pra$ti$um $a#i ini( di#a$u$an per"arnaan gram pada %a$teri.

Pe"arnaan gram di#a$u$an %ertujuan !ama dengan uji gram 'aitu untu$

mem%eda$an %a$teri apa$ah gram p!iti& atau gram negati&.

Pe"arnaan gram mengguna$an #e%ih dari !atu pe"arna dan memi#i$i

rea$!i 'ang %er%eda untu$ !etiap %a$teri !ehingga dapat diguna$an

untu$ mem%eda$an %a$teri. Pe"arnaan gram ini mampu mem%eda$an

dua $e#mp$ %e!ar %a$teri( 'aitu gram p!iti& dan gram negati&.

Pada pe"arnaan Gram( %a$teri 'ang diguna$an 'aitu

Staphyloecoccus aureus. 2mur %a$teri pada pe"arnaan gram haru!

%erumur /: jam atau 8 hari.

Dari ha!i# pe"arnaan Gram dan !ete#ah diamati dengan %antuan

mi$r!$p -aha'a #i!tri$ %ah"a Staphylococcus aureus merupa$an

%a$teri gram p!iti& $arena %er"arna merah muda dan ada 'ang !edi$it

%iru tua ( mr&#gin'a !ta3#$$u!( dan %er%entu$ %u#at. Ba$teri ini

umumn'a tum%uh %ergrm%# !ehingga tampa$ !eperti anggur.

Ba$teri garam p!iti& ia#ah %a$teri 'ang mengi$at "arna utama

*-r'!ta# ,i#et+ dengan $uat !ehingga tida$ dapat di #untur$an #eh

pe#untur dan tida$ di"arnai #agi #eh 5at "arna #a"an *!a&ranin+ pada

mi$r!$p !e#)!e# %a$teri tampa$ %er"arna ungu.Ba$teri Gram p!iti& ter#ihat %er"arna ungu $arena dinding !e#n'a mengi$at Kri!ta# ,i#et

#e%ih $uat. Namun !e#ama pra$te$( ha!i# "arna %a$teri 'ang $ami amati

%er"arna merah muda dan ada 'ang !edi$it %iru tua. Per%edaan "arna

ini di!e%a%$an #eh $e!a#ahan pada pr!e! pe"arnaan da#am tahap

pengeringan preparat 'ang ter#a#u pana! !ehingga mengha!i#$an "arna

merah muda dan %a$teri 'ang !eharu!n'a gram p!iti& %eru%ah menjadi

%a$teri gram negati&.

Staphylococcus terma!u$ $e da#am %a$teri gram p!iti&. Karena

mengguna$an te$ni$ pe"arnaan gram( %a$teri ini memi#i$i

peptidg#i$an 'ang te%a#( !ehingga dapat mengi$at -at gram dengan

$uat(!ehingga di!e%ut gram p!iti&. $arena dia terma!u$ da#am

$e#mp$ %a$teri gram p!iti&( ma$a "arna dari Staphylococcus ada#ah

ungu dengan "arna da!ar merah. a# ter!e%ut di$arena$an $andungan

#ipid dari %a$teri gram p!iti& #e%ih rendah dan %an'a$ mengandung

peptidg#i$an.Karena $andungan #ipidn'a 'ang #e%ih rendah (dinding

!e# %a$teri gram p!iti& menjadi terdehidra!i !e#ama per#a$uan dengan


59/62

etan# !ehingga %a$teri gram p!iti& mempertahan$an 5at pe"arna

ungu Kri!ta#n'a.

Lang$ah #ang$ah 'ang di#a$u$an !e#ama pe"arnaan gram ada#ah

pr!e! !teri#i!a!i !angat penting di%utuh$an !e%e#um memu#ai maupunmenga$hiri da#am pra$te$. A#$h# 'ang di!emprt$an pada tangan(

$a-a preparat dan meja( %ah$an tangan pun !e%e#umn'a haru! di-u-i

dengan !a%un ter#e%ih dahu#u. a# ter!e%ut %er&ung!i untu$

men'eteri#$an atau mem%unuh mi$rrgani!me 'ang ta$ diingin$an

agar mendapat$an ha!i# 'ang a$urat.

;amp#e %ia$an %a$teri Staptyloeoccus aereus diam%i# !e$itar 8 /

!e( di#eta$$an di ata! %'e$ g#a!! !erta dirata$an dengan jarum !e.

Kemudian di3$!a!i untu$ menguap$an air !ehingga han'a a$an

didapat$an %a$teri !aja. Pr!e! 3$!a!i juga %ertujuan !upa'a %a$teri

%enar)%enar me#e$at pada %'e$ g#a!! !ehingga #e!an %a$teri %erupa

tete!an !ampe# tida$ a$an terhapu! apa%i#a di#a$u$an pen-u-ian.

Pr!e! 3$!a!i dengan pemana!an %ia!an'a di ata! %un!en pada

pe"arnaan gram dapat men'e%a%$an %a$teri ter!u!pen!i mati atau

tida$ prdu$ti& apa%i#a !uhu ter#a#u tinggi( "a#aupun dapat me#e$at$an

%a$teri pada $a-a preparat. ;ete#ah itu %ia$an %a$teri dituangipe"arna -ar%# gentian ,iet 'ang %er&ung!i mem%eri$an pe"arnaan

pada %a$teri ter!e%ut. Ba$teri a$an %er"arna ungu. Penuangan -ar%#

gentian ,iet haru! merata pada !e#uruh area %ia$an %a$teri pada $a-a

preparat agar %a$teri dapat ter"arnai dengan !empurna. Ba$teri 'ang

te#ah di"arnai di%iar$an !e#ama 8 menit agar pengi$atan "arna #eh

%a$teri menjadi !ema$in $uat. Kemudian !i!a -ar%# gentian ,iet dan

di-u-i dengan air menga#ir dan di$ering preparat dengan hair drier.

Lang$ah !e#anjutn'a( penuangan idium $emudian didiam$an !e#ama

/ menit. Idium merupa$an pe"arna Mrdan( 'aitu pe"arna 'ang

%er&ung!i meng3$!a!i pe"arna primer 'ang di!erap mi$rrgani!me

target atau menginten!i&$an "arna utama. Pem%erian idium %ertujuan

untu$ memper$uat pengi$atan "arna #eh %a$teri. Kmp#e$! 5at idin

terperang$ap antara dinding !e# dan mem%ran !itp#a!ma rgani!me

gram p!iti&( !edang$an pen'ing$iran 5at #ipida dari dinding !e#

rgani!me gram negati& dengan pen-u-ian a#$h# memung$in$an

hi#ang dari !e#. Idium 'ang ditete!$an didiam$an !e#ama / menit


60/62


61/62

'ang !edang di%eri$an. ;etiap a$hir pem%i#a!an pada ma!ing)ma!ing

reagen( per#u di#a$u$an pen'erapan air %i#a!an dengan mengguna$an

hair drier( agar air tida$ ter-ampur dengan reagen atau pe"arna %aru

'ang a$an di%eri$an. ;ete#ah pem%i#a!an tera$hir( preparat di$ering$an

dan ditam%ah$an min'a$ imer!i pada preparat dan diamati di %a"ah

mi$r!$p dengan pem%e!aran #emah %aru $emudian di%e!ar$an

dengan pem%e!aran $uat * 8009 +. i$a ter%entu$ "arna ungu ma$a

terma!u$ g#ngan %a$teri gram p!iti& ( dan ji$a ter%entu$ "arna

merah atau merah muda ma$a terma!u$ g#ngan %a$teri gram

negati&.a!i# a$hirn'a( Staptyloeoccus aereus merupa$an %a$teri gram

p!iti& 'ang !eharu!n'a %er"arna ungu.

Pengamatan %entu$ dan jeni! %a$teri a$an tampa$ je#a! ji$a

di#a$u$an pe"arnaan terhadap !e#. Ke%an'a$an !e#)!e# %a$teri tida$

%er"arna( !ehingga ji$a di #ihat di %a"ah mi$r!$p tida$

memper#ihat$an "arna $ntra!.Warna 'ang mem%eda$an antara

%a$teri Gram p!iti& dengan %a$teri Gram negati& 'aitu "arna ungu dan

merah( %a$teri ter!e%ut a$an men'erap "arna ungu di$ata$an !e%agai

Gram p!iti& dan men'erap dminan "arna merah %erarti Gram negati&.

a# itu di!e%a%$an $arena per%edaan !tru$tur dinding !e# diantara

$eduan'a. Pengamatan Staphylococcus aureus dengan per%e!aran 800

%entu$n'a ada#ah $$u! atau %u#at terma!u$ da#am %a$teri Gram

p!iti& $arena %a$teri ini men'erap "arna ungu dan dapat

mempertahan$ann'a !e#ama pr!e! pe"arnaan ter!e%ut. Pe"arnaan

%a$teri ini dipengaruhi #eh &a$tr)&a$tr !eperti 3$!a!i( pe#untur

"arna( !u%!trat( inten!i3$a!i pe"arnaan( dan penggunaan 5at "arna

penutup.

II. Ke!impu#anDari ha!i# pra$ti$um dan pengamatan pe"arnaan gram dan mrg#gi

%a$teri dapat di!impu#$an %ah"a 48. Staphylococcus aureus merupa$an %a$teri gram p!iti& $arena

%er"arna merah muda dan ada 'ang !edi$it %iru tua ( mr&#gin'a

!ta3#$$u!( dan %er%entu$ %u#at. Ba$teri ini umumn'a tum%uh

%ergrm%# !ehingga tampa$ !eperti anggur./. Terjadi pen'impangan "arna( Staphylococcus aureus 'ang !eharu!n'a

%er"arna ungu atau %iru tua tapi %eru%ah menjadi merah 'ang


62/62

di!e%a%$an pr!e! pengeringan 'ang ter#a#u #ama !ehingga menjadi

pana!.

bakmi info pewarnaan

Documents