asistensi hematologi ii
DESCRIPTION
Praktikum HematologiTRANSCRIPT
Dian Widyaningrum spPK
PEMERIKSAAN DARAH RUTIN
Sederhana:
Hb, LED, Hitung jumlah Leukosit,
Apusan darah tepi
Lengkap:
Jumlah Eritrosit, index eritrosit
Automatic cell counter
Praktikum anda
Jumlah eritrosit
Hematokrit
Retikulosit
Indeks eritrosit
Menggunakan sampel EDTA ataupun kapiler
Jumlah Eritrosit
Prinsip :darah diencerkan dalam larutan yang isotonis agar mudah menghitung eritrosit dan mencegah hemolisis
Larutan Hayem : Natrium sulfat 2.5 g,
Natrium klorid 0.5 g,
Merkuri klorid 0.25 g,
aquadest 100 ml.
Pada keadaan hiperglobulinemia, larutan ini tidak dapat dipergunakan karena dapat menyebabkan precipitasi protein, rouleaux, aglutinasi.
Metode pemeriksaan jumlah eritrosit
darah diambil dengan pipet mikro hingga 0,5
Kemudian diambil larutan hayem hingga angka 101
digoyang-goyang agar homogen.
Larutan hayem berfungsi untuk memecah leukosit dan
trombosit tetapi tidak memecah eritrosit
Sebelum diteteskan di bilik hitungdibuang 1-2 tetes,
agar yang diteteskan dibilik hitung adalah campuran
yang benar-benar homogen.
Bilik hitung yang sudah ditetesi oleh campuran
kemudian ditutup dengan cover glass dan diamati di
bawah mikroskop.
Hitung eritrosit yang terletak pada 100 bilik kecil di
tengah
Perhitungan harus dilakukan dengan cepat sebelum
eritrosit rusak dan menggumpal.
Rumus jumlah eritrosit
Hitung eritrosit
= (N / V ) x Pengenceran
= (N / [5 x 0.2 x 0.2 x 0.1 ] ) x 200
= ( N / 0.02 ) x 200
= N x 10.000
N = jumlah eritrosit yg dihitung di 5 bilik
V = volume tiap bilik
Nilai Rujukan
Dewasa pria : 4.50 - 6.50 (x106/mmk)
Dewasa wanita : 3.80 - 4.80 (x106/mmk)
Bayi baru lahir : 4.30 - 6.30 (x106/mmk)
Anak usia 1-3 tahun : 3.60 - 5.20
(x106/mmkl)
Anak usia 4-5 tahun : 3.70 - 5.70
(x106/mmk)
Anak usia 6-10 tahun : 3.80 - 5.80
(x106/mmk)
Faktor-faktor yang mempengaruhi temuan
hasil laboratorium
Pengambilan sampel darah di daerah lengan yang terpasang jalur intra-vena menyebabkan hitung eritrosit rendah akibat hemodilusi
Pengenceran tidak tepat
Larutan pengencer tercemar darah atau lainnya
Alat yang dipergunakan seperti pipet, bilik hitung dan kaca penutupnya kotor dan basah
Hematokrit
adalah persentase volume
eritrosit dalam darah yang
dimampatkan dengan cara
diputar pada kecepatan tertentu
dan dalam waktu tertentu.
Tujuan untuk mengetahui
konsentrasi eritrosit dalam
darah.
Metode mikrohematokrit
Tabung kapiler yang digunakan ada 2
macam:
1. berisi heparin (bertanda merah)
untuk sampel darah kapiler (langsung)
2. tanpa antikoagulan (bertanda biru)
untuk darah dengan anti koagulan (sampel dari tabung dengan
EDTA/heparin/amonium-kalium-oksalat)
Prosedur pemeriksaan
1. Sampel darah dimasukkan ke dalam tabung kapiler sampai 2/3 volume tabung.
2. Salah satu ujung tabung ditutup dengan dempul (clay)
3. disentrifus selama 5 menit dengan kecepatan 15.000 rpm.
4. Tinggi kolom eritrosit diukur dengan alat pembaca hematokrit, nilainya dinyatakan dalam %.
Nilai Rujukan
Dewasa pria : 40 - 52 %
Dewasa wanita : 35 - 47 %
Bayi baru lahir : 44 - 72 %
Anak usia 1 - 3 tahun : 35 - 43 %
Anak usia 4 - 5 tahun : 31 - 43 %
Anak usia 6-10 tahun : 33 - 45 %
Faktor-faktor yang mempengaruhi
temuan laboratorium :
Jika sampel darah diambil pada lengan yang terpasang jalur intra-vena, nilai hematokrit cenderung rendah karena terjadi hemodilusi.
Pemasangan tali turniket yang terlalu lama berpotensi menyebabkan hemokonsentrasi, sehingga nilai hematokrit bisa meningkat.
Pengambilan darah kapiler : tusukan kurang dalam sehingga volume yang diperoleh sedikit dan darah harus diperas-peras keluar,
kulit yang ditusuk masih basah oleh alkohol sehingga darah terencerkan,
terjadi bekuan dalam tetes darah karena lambat bekerja.
Indeks Eritrosit
Adalah Nilai eritrosit rata-rata
Memperkirakan:
Ukuran/ volume eritrosit rata-rata
Banyaknya Hb tiap eritrosit
Macam:
MCV (Mean Corpuscular Volume)
MCH (Mean Corpuscular Hemoglobin)
MCHC (Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration)
UNTUK KEPERLUAN PEMERIKSAAN INDEKS
ERITROSIT MAKA DILAKUKAN PEMERIKSAAN :
Kadar Hb
Hitung Jumlah Eritrosit
Hematokrit
…indeks eritrosit…
MCV
Volume eritrosit rata-rata
MCV = Ht/eritrosit (juta) X 10
Satuan: femtoliter
Harga Normal = 80 - 100 fl
o Makrositosis: > 100fl
o Normositosis: 80–100 fl
o Mikrositosis: < 80 fl
…indeks eritrosit…
MCH
Hemoglobin rata-rata dlm eritrosit (banyaknya Hb per eritrosit)
MCH = Hb/eritrosit (juta) X 10
Satuan: pikogram
Harga normal = 26-34 pg
o Normokrom : 26-34 pq.
o Hipokrom : < 26 pq.
…indeks eritrosit…
MCHC
Konsentrasi Hb eritrosit rata-rata
Kadar Hb eritrosit yang didapat per eritrosit
MCHC = Hb/Ht * 100%
Satuan: %
Harga Normal = 32 – 37% (Normokrom) o Hipokrom: <32%
o Hiperkrom: >37%
TAHAPAN PEMERIKSAAN
1) PRE ANALITIK
- Persiapan penderita
- Macam bahan pemeriksaan
- Cara Pengambilan
- Antikoagulan
- Penyimpanan bahan
- Pengiriman bahan
RETIKULOSIT
Eritrosit muda
Sitoplasma sisa-sisa ribosom dan RNA
Retikulosit:
Refleksi peningkatan produksi eritrosit pada sumsum tulang
Hitung Retikulosit
Eritrosit muda
granula filamentosa hanya terlihat dalam keadaan hidup
Cat Supravital: brilliant cresyl blue atau new methylene blue
Menghitung retikulosit dlm 1000 eritrosit (%)
Metode: Kering, Basah
Kering
Basah: 1 tts cat hapuskan pd object glass, keringkan 1 tts drh pd deck glass, tutupkan 20’ hitung di bwh mikroskop
Nilai rujukan (Dacie) = 0,5 – 1,5%
Metode Kering
Ke dalam tabung reaksi kecil teteskan 3 tetes larutan Brilliant cresyl blue dalam natrium chlorida
Tambahkan 4 tetes darah, campurkan baik-baik dan biarkan selama 15 menit agar pewarnaan sempurna.
Inkubasi 37 C selama 15 menit, Setelah 15 menit, tabung tersebut kocok sekali lagi
Buat preparat darah hapus
Periksa dengan perbesaran oyektif 100 kali. Carilah daerah yang cukup tipis di mana eritrosit tidak membentuk reuleaux. Eritrosit biru muda dan retikulosit akan tampak sebagai sel yang mengandung granula /filament biru.
Hitung per 1000 eritrosit, kalau perlu dengan bantuan pengecil medan penglihatan okuler.
Pewarnaan: supravital, BCB
Perbesaran: x 1000
Ukuran: 8 - 12 m Bentuk: bulat Warna sitoplasma: pucat Granularitas: granul tunggal atau multipel, pekat, lembayung Bentuk inti: tidak ada Distribusi dalam darah: 0.5 - 1.5 % dari jumlah eritrosit
PEMATANGAN RETIKULOSIT DARAH
1.5 2.5
2.5 2.0
3.0 1.5
3.5 1.0
Normoblast &
retikulosit Retikulosit HCT
45
35
25
15
Bone Marrow Peripheral Blood
PEMATANGAN RETIKULOSIT DARAH TEPI
No Hematokrit
(%)
Waktu Pematangan
(Hari)
1 40-45 1,0
2 35-39 1,5
3 25-34 2,0
4 15-24 2,5
5 05-14 3