difinisi hormon sejarah hormon klasifikasi hormon mekanisme kerja hormon hormon-hormon reproduksi
Post on 20-Jan-2016
588 Views
Preview:
DESCRIPTION
TRANSCRIPT
DIFINISI HORMONDIFINISI HORMONSEJARAH HORMONSEJARAH HORMON
KLASIFIKASI HORMONKLASIFIKASI HORMONMEKANISME KERJA HORMONMEKANISME KERJA HORMON
HORMON-HORMON REPRODUKSIHORMON-HORMON REPRODUKSI
ANATOMI HIPOFISIS DAN HIPOTHALAMUSANATOMI HIPOFISIS DAN HIPOTHALAMUSPOROS HIPOTALAMUS-HIPOFISIS-GONADPOROS HIPOTALAMUS-HIPOFISIS-GONADHORMON-HORMON YANG BERASAL DARI HORMON-HORMON YANG BERASAL DARI GONAD, UTERUS, PLASENTAGONAD, UTERUS, PLASENTAPENERAAN KADAR HORMONPENERAAN KADAR HORMON
Difinisi klasikDifinisi klasik- zat kimia organik- zat kimia organik- diproduksi sel-sel khusus- diproduksi sel-sel khusus- tanpa saluran- tanpa saluran- dirembeskan melalui aliran darah- dirembeskan melalui aliran darah- dengan jumlah sangat kecil- dengan jumlah sangat kecil- hambat/rangsang aktivitas - hambat/rangsang aktivitas fungsionalfungsional- target organ spesifik- target organ spesifik
Endokrinologi : cabang ilmu biologi Endokrinologi : cabang ilmu biologi yang mempelajari hormon dan yang mempelajari hormon dan reseptornya reseptornya
endon = di dalamendon = di dalam
krinein = terpisah krinein = terpisah Hormon dari bahasa Yunani kuno Hormon dari bahasa Yunani kuno hormaeinhormaein
artinya “yang menimbulkan gairah”artinya “yang menimbulkan gairah”
SEJARAH Berthold (1849):ayam di kastrasi, jengger atropi;
testes di implantasikan ke usus menunjukkan aktivitas jantan normal.
Kesimpulannya : testes melepaskan sesuatu kedalam darah untuk perilaku kejantanan
Thomas Addison (1855): penyakit Addison yang merupakan cacat klinis kelenjar endokrin (korteks adrenal)
Brown Sequard (1889):dokter Perancis, mempermuda diri dengan menyuntik secara subkutan ekstrak air testes anjing
von Merling dan Minkowski (1889) terjadinya diabetes militus, lewat pengambilan pankreas
Murray dan Gley (1891): terapi dengan emulsi gliserin kelenjar tiroid domba untuk hipotiroidism. Fungsi terpisah antara tiroid dan paratiroid
Bauman (1895) melihat kadar yodium yang tinggi pada kelenjar tiroid
Magnus Levy (1896):difisiensi tiroid berlanjut pada menurunnya laju metabolisme basal
Awal abad 20
Hormon dipopulerkan oleh Bayliss dan Sterling (1902)
Isolasi, identifikasi struktur hormonIsolasi insulin (Banting dan
Best,1921)Abel (1926) membuat insulin dalam
bentuk kristal
FISIOLOGI REPRODUKSI Stockard dan Papanicolaou (1917); siklus estrus
marmut Allen (1922) : siklus estrus mencit Long & Evans (1922): siklus estrus tikus Allen & Doisy (1922) cairan folikel besar babi
menimbulkan perubahan siklus mencit yang dikastrasi
Ascheim & Zondek :urine primata bunting mengandung hCG
Doisy & Butenandt (1929) mengkristalkan zat estrogenik dari urin wanita hamil => estron
Doisy (1935) ; isolasi estrogen dari ovary Mc Corquodale (1936) isolasi estradiol 17 beta dari
ovary babi
Corner & Allen (1929) membuat ekstrak korpus luteum untuk memelihara kebuntingan kelinci yang mengalami ovariektomi
Butenandt (1932). Pregnandiol, metabolit lewat urin dari Korpus Luteum
Hisaw (1926) menemukan relaksin Pezard (1911) ekstrak jaringan testis McGee(1927) ekstrak jar testes sapi Stricker & Grueter (1928) pituitary esensial utk
inisiasi dan memelihara sekresi air susu Riddle (1933) zat pituitary menginduksi laktasi
dan sebabkan pertumbuhan kelenjar tembolok Kopec (1917)menunjukkan adanya neurohormon
dari otak
KELENJAR HIPOFISIS DAN HIPOTALAMUS
VISALIUS (BANGSA YUNANI) : MENEMUKAN BENDA BULAT OVAL DIBAWAH DASAR OTAK YANG MENGHASILKAN LENDIR KENTAL (PITU) PITUITA / PITUITARY
RATUSAN TAHUN PITUITA DIGUNAKAN ORANG SEBAGAI PUSAT KECERDASAN; PUSAT EMOSI,ALAT YANG MENGHASILKAN CAIRAN OTAK DAN SUMSUM
LORAIN (1871); MENGHUBUNGKAN DENGAN ADANYA GANGGUAN PERTUMBUHAN HIPOPHYSIS(HIPO = HYPON = DI BAWAH DAN PHYEIN = TUMBUH)
OLIVER & SHAFER 1895 MENGEKSTRAK HIPOPHYSIS DAN MELIHAT GEJALA PADA HEWAN SETELAH PENYUNTIKANGEJALA ; VASOKONSTRIKSI; HYPERTENSI
HARVEY & CUSHING 1905 ; HYPOPHYSECTOMY PADA ANJING UMUR 3 BLN DAN TERJADI GANGGUAN PERTUMBUHAN
SMITH 1926 : HYPOPHYSECTOMY PADA TIKUS, GANGGUAN PERTUMBUHAN; ATROPI KELENJAR ADRENAL; TIROID;GONAD DAN KELENJAR ALAT KELAMIN
TX/ EKSTRAK HIPOFISIS SEMBUHKARENA PERANNYA : MASTER GLAND
ANTIHORMON SUNTIKAN HORMON YANG TERUS MENERUS AKAN
MENIMBULKAN RESPON YANG BERBEDA TAHUN 1920 ORANG MULAI MENELITI ADANYA ZAT
ANTIHORMON TAHUN 1935, COLLIP et.al ADANYA ANTIHORMON MAKIN
JELAS TAHUN 1960, WIDE & GEMZELL MENCIPTAKAN METODA
KEHAMILAN SECARA IMUNOLOGIS 1962, YALOW & BERSON MENCIPTAKAN METODE
PENGUKURAN INSULIN 1963, WOLSTENHOLME, SEMUA HORMON DAPAT DITERA
SECARA IMUNOLOGIS KINI METODA IMUNOLOGIS DIKOMBINASIKAN DENGAN
TEKNIK RADIO ISOTOP MERUPAKAN METODA TERBAIK UNTUK MENGUKUR KADAR HORMON DALAM DARAH
FAKTOR YANG MEMPENGARUHI KERJA FAKTOR YANG MEMPENGARUHI KERJA HORMON PADA TARGET ORGANHORMON PADA TARGET ORGAN
1.1. KECEPATAN SINTESIS HORMON DAN KECEPATAN SINTESIS HORMON DAN SEKRESI HORMONSEKRESI HORMON
2.2. SISTEM TRANSPOR HORMON DALAM SISTEM TRANSPOR HORMON DALAM PLASMAPLASMA
3.3. KECEPATAN DEGRADASI HORMON KECEPATAN DEGRADASI HORMON
4.4. KECEPATAN PERUBAHAN HORMON KECEPATAN PERUBAHAN HORMON (INAKTIF (INAKTIF AKTIF) AKTIF)
5.5. PERBEDAAN LETAK RESEPTOR SPESIFIKPERBEDAAN LETAK RESEPTOR SPESIFIK
PEMBAGIAN HORMONPEMBAGIAN HORMON
1.1. MENURUT CARA KERJAMENURUT CARA KERJA
A. HORMON REPRODUKSI PRIMERA. HORMON REPRODUKSI PRIMER
B. HORMON METABOLIKB. HORMON METABOLIK
2.2. STRUKTUR KIMIASTRUKTUR KIMIA PROTEIN/GLIKOPROTEIN/POLIPEPTIDAPROTEIN/GLIKOPROTEIN/POLIPEPTIDA STEROIDSTEROID DERIVAT ASAM LEMAKDERIVAT ASAM LEMAK DERIVAT AMINEDERIVAT AMINE
HORMON REPRODUKSI PRIMER
HIPOTHALAMUS- GnRH- PIH- OKSITOSIN
HIPOFISIS- FSH- LH/ICSH- PRL
GONAD- E2;P4;T4;INHIBIN;RELAKSIN;AKTIVIN
UTERUS- PGF
PLASENTA- PLASENTAL LACTOGEN- P4;PROTEIN B- PMSG; hCG
HORMON METABOLIK
TIROKSINGH; CORTISONACTHTSH
STRUKTUR KIMIA
PROTEIN BERAT MOLEKUL 300 – 70.000 DALTON
TIDAK BOLEH DIBERIKAN SECARA ORAL RESEPTOR BERADA PADA MEMBRAN
SEL- HORMON-HORMON YANG BERASAL DARI
HIPOTHALAMUS DAN HIPOFISIS ANTERIOR- HORMON YANG BERASAL DARI GONAD
(INHIBIN; RELAKSIN; AKTIVIN)- HORMON YANG BERASAL DARI PLASENTA
STEROID BM 300 – 400 DALTON STEROID ALAMI TIDAK EFEKTIF JIKA
DIBERIKAN SECARA ORAL STEROID SINTETIK DAN ASAL TANAMAN
DIBERIKAN SECARA ORAL DAN INJEKSI RESEPTOR ADA PADA SITOPLASMA
- P4,E2;T4
DERIVAT ASAM LEMAKBERAT MOLEKUL 400 DALTONDIBERIKAN MELALUI SUNTIKAN- PG (PGA;PGB;PGE;PGF)
DERIVAT AMINE (BIASANYA SEJUMLAH ASAM AMINO BERYODIUMCONTOH:
-MIT (MONO IODO TIRONIN) -DIT (DIIODO TIRONIN) -TETRA IODO TIRONIN (TIROKSIN)
MEKANISME KERJA HORMONMEKANISME KERJA HORMON
PROTEIN PROTEIN
HORMON BERIKATAN DENGAN HORMON BERIKATAN DENGAN RESEPTOR YANG TERDAPAT PADA RESEPTOR YANG TERDAPAT PADA PERMUKAAN MEMBRAN SELPERMUKAAN MEMBRAN SEL
STEROIDSTEROID
HORMON BERIKATAN DENGAN HORMON BERIKATAN DENGAN RESEPTOR YANG TERDAPAT DALAM RESEPTOR YANG TERDAPAT DALAM
SITOPLASMASITOPLASMA
Gambar Mekanisme kerja hormon protein
Gambar Mekanisme kerja hormon steroid
SUMBER HORMON SUMBER HORMON REPRODUKSIREPRODUKSI
HIPOTHALAMUSHIPOTHALAMUSGnRH; TRH; PIH; OksitosinGnRH; TRH; PIH; Oksitosin
HIPOFISIS ANTERIORHIPOFISIS ANTERIORFSH; LH; PRLFSH; LH; PRL
GONADGONADE2; P4; T4; RELAKSIN; INHIBINE2; P4; T4; RELAKSIN; INHIBIN
UTERUSUTERUSRELAKSIN; PGFRELAKSIN; PGF
PLASENTAPLASENTAhCG; PMSG; PL; PROTEIN BhCG; PMSG; PL; PROTEIN B
AblationAblationMEMBUANG KELENJAR ENDOKRIN UNTUK MEMPELAJARI MEMBUANG KELENJAR ENDOKRIN UNTUK MEMPELAJARI GEJALA YANG TIMBUL AKIBAT KEKURANGAN SESUATU GEJALA YANG TIMBUL AKIBAT KEKURANGAN SESUATU HORMONHORMON
Replacement therapyReplacement therapySINDROMA YANG TERJADI AKIBAT ABLASI KEMUDIAN SINDROMA YANG TERJADI AKIBAT ABLASI KEMUDIAN DILAKUKAN IMPLANTASI KEMBALI ATAU MENYUNTIKKAN DILAKUKAN IMPLANTASI KEMBALI ATAU MENYUNTIKKAN EKSTRAK KASAR HORMONEKSTRAK KASAR HORMON
Isolasi hormonIsolasi hormonPEMISAHAN HORMON DARI SUBSTANSI LAINNYA UNTUK PEMISAHAN HORMON DARI SUBSTANSI LAINNYA UNTUK MENGUKUR KADAR SUATU HORMON ATAU BUAT SINTETIKNYAMENGUKUR KADAR SUATU HORMON ATAU BUAT SINTETIKNYA
Regulasi kelenjar endokrinRegulasi kelenjar endokrinPERUBAHAN SINTESIS DAN SEKRESI HORMON DAPAT PERUBAHAN SINTESIS DAN SEKRESI HORMON DAPAT DIPELAJARI PADA KONDISI FISIOLOGIS DENGAN TEKNIK DIPELAJARI PADA KONDISI FISIOLOGIS DENGAN TEKNIK ASSAYASSAY
Endokrin-2
HIPOTHALAMUSHIPOTHALAMUS
Letak pada dasar otakLetak pada dasar otak Bag anterior berbatas dgn optic Bag anterior berbatas dgn optic
chiasmachiasma Bag posterior berbatas dgn Bag posterior berbatas dgn
mammilary bodiesmammilary bodies Bagian dorsal dgn thalamusBagian dorsal dgn thalamus Bagian ventral tulang sphenoidBagian ventral tulang sphenoid
BERDASARKAN UKURAN AXON ADA BERDASARKAN UKURAN AXON ADA DUA NEURON DALAM HIPOTALAMUSDUA NEURON DALAM HIPOTALAMUS
1.1. PARVICELLULERPARVICELLULERHASILKAN : HASILKAN :
- releasing hormon releasing hormon (GnRH;ACTHRH;GHRH;TRH)(GnRH;ACTHRH;GHRH;TRH)
- inhibiting hormon (GHIH; PIH)inhibiting hormon (GHIH; PIH)2. 2. MAGNOCELLULERMAGNOCELLULER HASILKAN 2 NUKLEUS HASILKAN 2 NUKLEUS1.1. PARAVENTRIKULARISPARAVENTRIKULARIS2.2. SUPRAOPTIKUSSUPRAOPTIKUS
YANG MENGHASILKAN HORMON YANG MENGHASILKAN HORMON OKSITOSIN DAN VASOPRESINOKSITOSIN DAN VASOPRESIN
PEMELIHARAAN PEMELIHARAAN HOMEOSTASISHOMEOSTASIS
1.1. Menerima rangsangan Menerima rangsangan internal dan eksternalinternal dan eksternal
2.2. Mengintegrasi Mengintegrasi informasiinformasi
3.3. Meneruskan perintah Meneruskan perintah ke target organke target organ
4.4. Memelihara / Memelihara / mencapai mencapai keseimbangankeseimbangan
PERINTAH DARI PERINTAH DARI HIPOTALAMUS HIPOTALAMUS MELALUI ;MELALUI ;
1.1. LISTRIK LISTRIK (autonomic (autonomic nervous system)nervous system)
2.2. KIMIA (endokrin)KIMIA (endokrin)
HIPOFISIS HIPOFISIS
Letak di dasar otakLetak di dasar otak Dihubungkan oleh tangkai infundibulumDihubungkan oleh tangkai infundibulum Didalam lekukan os sphenoid => sela tursica Didalam lekukan os sphenoid => sela tursica
= fossa hipofisa= fossa hipofisa Embriologis : bagian anterior merupakan Embriologis : bagian anterior merupakan
perkembangan ektoderm usus dari langit perkembangan ektoderm usus dari langit mulut, sedangkan bagian posterior mulut, sedangkan bagian posterior merupakan perkembangan dari neural merupakan perkembangan dari neural ektodermektoderm
Hipofisis anterior terdiri dari pars distalis, Hipofisis anterior terdiri dari pars distalis, pars tuberalis dan pars intermediapars tuberalis dan pars intermedia
Vaskularisasi hipotalamus – hipofisis : a. Vaskularisasi hipotalamus – hipofisis : a. hipofisis superior dan inferior (lingkaran hipofisis superior dan inferior (lingkaran kapiler dalam median eminence dan sistem kapiler dalam median eminence dan sistem portal)portal)
Hipofisis anterior = Hipofisis anterior = AdenohipofisisAdenohipofisis
PARS DISTALISPARS DISTALIS SEKRESIKAN LH; FSH; LTH; ACTH; SEKRESIKAN LH; FSH; LTH; ACTH; TSH; GHTSH; GH
PARS TUBERALISPARS TUBERALIS TIDAK ADA FUNGSI ENDOKRIN; TIDAK ADA FUNGSI ENDOKRIN; PERTUMBUHAN EPITELIUM KELUAR DARI PARS PERTUMBUHAN EPITELIUM KELUAR DARI PARS DISTALIS; SEDIKIT SEL KELENJARDISTALIS; SEDIKIT SEL KELENJAR
PARS INTERMEDIAPARS INTERMEDIA- PADA SAPI DAN KUDA FUNGSI TIDAK JELASPADA SAPI DAN KUDA FUNGSI TIDAK JELAS- PADA BURUNG DAN IKAN PAUS TIDAK ADAPADA BURUNG DAN IKAN PAUS TIDAK ADA- PADA KATAK DAN REPTIL HASILKAN PADA KATAK DAN REPTIL HASILKAN
MSH(MELANOCYTE STIMULATING HORMONE = MSH(MELANOCYTE STIMULATING HORMONE = MELANOTROPIN)MELANOTROPIN)
Neurohipofisis
Sinonim : hipofisis posterior
Terdapat ujung axon sel saraf magnoseluler
Axon-axon ini sebagian besar dari nukleus supraopticus dan paraventrikularis
Material neurosekretori dalam axon terdapat dalam kantong-kantong kecil membentuk bintik-bintik koloid disebut Herring Bodies (ditemukan oleh Herring)
GnRH
Hipotalamus
Hipofisisanterior
FSH LH
Ovari
Ovulasi
Korpus luteum
Progesteron
Kel. Mamae
PRL/LTH
Inhibin
Folikel
Estrogen
+-
Poros Hipotalamus-hipofisis-gonad
PRL-RH/PRL-IH
HORMON PLASENTAHORMON PLASENTA PMSGPMSG
ditemukan pada serum bangsa kuda yang bunting, merupakan ditemukan pada serum bangsa kuda yang bunting, merupakan hormon glikoprotein dengan kandungan karbohidrat yang hormon glikoprotein dengan kandungan karbohidrat yang tinggi (asam sialat) sehingga waktu paruh jadi panjang. Fungsi tinggi (asam sialat) sehingga waktu paruh jadi panjang. Fungsi mirip FSHmirip FSH
hCGhCGmerupakan hormon glikoprotein, disintesis dari sel merupakan hormon glikoprotein, disintesis dari sel syncitiotropoblast plasenta golongan primata. Fungsi mirip LHsyncitiotropoblast plasenta golongan primata. Fungsi mirip LH
Placental lactogenPlacental lactogenmerupakan hormon protein, diisolasi dari jaringan plasenta merupakan hormon protein, diisolasi dari jaringan plasenta hewan. Fungsi ada kaitan dengan produksi susuhewan. Fungsi ada kaitan dengan produksi susu
Protein BProtein Bdiisolasi dari jaringan plasenta sapi dan domba tapi tidak diisolasi dari jaringan plasenta sapi dan domba tapi tidak ditemukan pada babi dan kuda. Fungsi diduga sebagai ditemukan pada babi dan kuda. Fungsi diduga sebagai pengiriman pesan dari plasenta ke induk agar mencegah pengiriman pesan dari plasenta ke induk agar mencegah perusakan korpus luteumperusakan korpus luteum
HORMON HORMON GONADHORMON HORMON GONAD
RELAKSINRELAKSIN INHIBININHIBIN STEROIDSTEROID
1.1. ANDROGENANDROGEN
2.2. ESTROGENESTROGEN
3.3. PROGESTERONPROGESTERON
HORMON UTERUS : PGFHORMON UTERUS : PGF22
Mekanisme Steroidogenesis
KOLESTEROL PREGNANOLON PROGESTERON
17-OH – PREGNANOLON 17-OH – PROGESTERON
DEHIDROEPIANDROSTERON ANDROSTERON TESTOSTERON
19-OH-ANDROSTENEDION 19-OH-TESTOSTERON
ESTRON ESTRADIOL 17β
Counter-Current Mechanism
Rumus Bangun Hormon Steroid
(Sumber : Partodihardjo, 1995)
TESTOSTERON
ESTRADIOL
CYCLOPENTANO
PERHIDROPENANTHRENE
A. A. Estrogen alamiEstrogen alami Contoh : estradiol, estriol dan estron.Contoh : estradiol, estriol dan estron.
B. Estrogen non steroid (Estrogen sintetik) Contoh : benzestrol, dienestrol, dietilstilbestrol,
heksestrol,
C. Estrogen asal tanaman /fitoestrogen Contoh : Isoflavon, coumestrol, genistein, zeranolBioassay hormon estrogen dengan :
1. Cuboni test
- pada kuda dan babi bunting trimester ke-2
- Urine + HCl + H2SO4 pekat Fluoresen hijau (+)
Urine + HCl + H2SO4 pekat Coklat muda (-)
2. Penyuntikan pada tikus infantil/prapuber
PREPARAT DAGANG PROSTAGLANDIN: PREPARAT DAGANG PROSTAGLANDIN: GLANDIN F GLANDIN F LUTALYSELUTALYSE PROSOLVINPROSOLVIN PROSTAVETPROSTAVET
PREPARAT DAGANG PMSG :PREPARAT DAGANG PMSG : FOLLIGONFOLLIGON
PREPARAT DAGANG HCG :PREPARAT DAGANG HCG : CHORULONCHORULON
PREPARAT DAGANG GnRH :PREPARAT DAGANG GnRH : GONADORELINGONADORELIN
PENERAAN KADAR HORMONPENERAAN KADAR HORMON1.1. PHYSICOCHEMICAL ASSAY/ METODA KIMIAPHYSICOCHEMICAL ASSAY/ METODA KIMIA2.2. BIOASSAY / UJI BIOLOGISBIOASSAY / UJI BIOLOGIS - UJI GALIMAININI- UJI GALIMAININI - PENENTUAN E2, T4, PMSG- PENENTUAN E2, T4, PMSG3.3. BINDING ASSAYBINDING ASSAY - UJI PENENTUAN RESEPTOR- UJI PENENTUAN RESEPTOR
IRMA (Immuno Radiometric Assay)IRMA (Immuno Radiometric Assay) IEMA (Immuno Enzymometric Assay)IEMA (Immuno Enzymometric Assay)
- UJI PENENTUAN LIGAND- UJI PENENTUAN LIGAND RIA (Radio Immuno Assay)RIA (Radio Immuno Assay) EIA (Enzyme Immuno Assay)EIA (Enzyme Immuno Assay) ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay)Assay)
METODE KIMIA
Analisis hormon dengan spektrofotometri
Kurang peka hanya dapat menera sampai mikrogram
Prinsip spektrofotometri :
zat kimia/hormon yang mampu menyerap sinar infra merah/UV
energi cahaya dari zat kimia ditangkap spektrofotometer dan dibaca pada panjang gelombang tertentu
UJI BIOLOGIS / BIOASSAY
Bersifat kualitatif, hanya diketahui respon biologisnya, kadar hormon tidak dapat dideteksi
Kelemahan :
- waktu lebih lama untuk mengamati respon
- butuh hewan coba
Prinsip :
cairan diduga mengandung hormon disuntikkan ke hewan coba, dilihat respon biologisnya
GALLIMAININI TEST
-Tes kehamilan pada wanita
-Prinsip : urine wanita hamil disuntikkan ke katak jantan dewasa
positif, jika ditemukan sperma di kloaka
PENENTUAN ESTROGEN
-untuk tes kebuntingan pada kuda dan babi
-Prinsip : urine disuntikkan ke tikus prapuber
jika terdapat sel kornifikasi pada
pemeriksaan vaginal smear
PENENTUAN PMSG
-Uji kebuntingan pada bangsa kuda
-Prinsip menyuntikkan serum kuda betina setelah 40- 120 hari kawin
-Hasil pertumbuhan folikel dan ovulasi, 3-4 hari setelah disuntikkan ke tikus prapuber
PENENTUAN TESTOSTERON
-menyuntikkan spesimen diduga mengandung testosteron pada ayam jantan muda
-hasil pertumbuhan jengger, BB meningkat
BINDING ASSAY
Terdiri dari 2 bagian :
1. uji penentuan reseptor
misalnya : IRMA (Immuno Radiometricassay)
IEMA (Immuno Enzymometricassay)
Prinsip : yang dilabel adalah antibodinya
Ag + Ab* + Ab AgAb* + Ab*
2. uji penentuan ligan
yang dilabel adalah antigen/ligandnya
misalnya : RIA dan ELISA
Prinsip :
Ag + Ab + Ag* Ag Ab + Ag + Ag*
Ag*Ab
penentuan hormon secara kuantitatif
dapat menera hormon nanogram(10 -3 mikrogr),
picogram (10-6mikrogr), fentogram (10-
9mkr gr)
jenis molekul label (tracer) : substansi fluoresen,
enzim, radioaktif
1. Uji Ligand dengan bantuan fluoresent/ Imunofluoresent
- menggunakan conjugate warna fluoresen
- menggunakan mikroskop fluoresen
- bersifat subyektif, penghitungan binding berdasar warna fluoresen
2. Uji Ligand dengan Bantuan Enzym/ ELISA/EIA
- tracer yang digunakan adalah enzim
- enzim yang digunakan : peroksidase, alkalinfosfatase
glukosa oksidase, glukoamilase, katalase, glukosa 6
fosfatase.
3. Uji Ligand dengan Radioaktif = Radio ligand assay
A. Competitive Protein Binding Assay - tidak digunakan karena sensitivity dan spesificity kurang
B. Radioreseptor Assay (RRA) - tujuan untuk menentukan reseptor pada target organ - reseptor dilabel dengan radioaktif (125I, 131I, 129I) - Accuracy dan Sensitivity rendah, tidak digunakan
C. Radio Immuno Assay (RIA) - yang dilabel dengan radioaktif adalah antigen/hormon - ada 2 macam : RIA fase cair dan fase padat
FASE CAIR
RADIOAKTIF 3H
MEMANCARKAN SINAR
RADIASI TIDAK BAHAYA
LIMBAH BANYAK & MUDAH TERBAKAR
PELARUT & ALAT PENERA MAHAL
PERLU WAKTU LAMA
FASE PADAT
RADIOAKTIF 125I / 131I
MEMANCARKAN SINAR
RADIASI LEBIH BAHAYA
MENYEBABKAN KERUSAKANJARINGAN LEBIH LUAS
RADIO IMMUNO ASSAY (RIA)
Prinsip dasar RIA fase padat(sumber : Mahaputra, 1990)
top related