PEDOMAN KHUSUSPEDOMAN KHUSUS UNTUK LABORATORI UM MI KROBI OLOGI* MENUJ U AKREDI TASI * MENUJ U AKREDI TASIM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoACUAN ACUAN ISO/IEC 17025 :2005 Persyaratan Manajemeny j(Elemen 4.1-4.15)Persyaratan Teknis Persyaratan Teknis (Elemen 5.1-5.10)M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoFAKTOR-FAKTOR YANG MENENTUKAN FAKTOR FAKTOR YANG MENENTUKAN KEBENARAN DAN KEHANDALAN PENGUJIAN Faktor Manusia (5.2) Kondisi Akomodasi dan Lingkungan Kondisi Akomodasi dan Lingkungan (5.3) Metode Pengujian (5 4) Metode Pengujian (5.4) Peralatan (5.5) Ketertelusuran pengukuran (5.6) Pengambilan Contoh (5 7) Pengambilan Contoh (5.7) Penanganan Barang yang diuji (5.8)J i M t H il Uji (5 9) Jaminan Mutu Hasil Uji (5.9)M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoPERSONIL PERSONIL Kecukupan jumlah personel penguji Mempunyai kompetensi yang memadai: Mempunyai kompetensi yang memadai: pendidikan, pelatihan, pengalaman untuk masing masing tingkatan: pengawas masing-masing tingkatan: pengawas, penguji, penandatangan f / / sertifikat/pemberi interpretasi/pendapat Memiliki uraian tugas personil : tugas Memiliki uraian tugas personil : tugas dan tanggung jawab serta wewenangR k il CV Rekaman personil: CVM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoKONDISI AKOMODASI DAN LINGKUNGAN Fasilitas : - fasilitas pengujian- fasilitas pendukung Pengaturan akses ke ruangan Kecukupan penerangan, sumber energi Program Kebersihan/hygiene dan pemantauan cemaran MOP d li d k k di i h Pengendalian dan rekaman kondisi ruangan: suhu, kelembabanP h tid k t j di k t i i il Pencegahan agar tidak terjadi kontaminasi silang Tata tertib laboratoriumP l l k ht b ik Pengelolaan kerumahtanggaan yang baikM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoMETODE PENGUJIAN METODE PENGUJIAN Metode standar Metode standar yang dimodifikasi Metode non standar Metode non standar Metode yang dikembangkan sendiri Metode yang dikembangkan sendiri Validasi dan verifikasi metode pengujianM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoPERALATAN PERALATAN Pemeliharaan & penyimpanan- Menghindari kontaminasi silang Menghindari kontaminasi silang- Pemeliharaan khusus: alat LAF, autoklaf, i k b t N d b inkubator, Neraca, dsb. Kalibrasi dan verifikasi kinerja: program,a b as da e as e ja p og a ,frekuensi, dan jarak waktuM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoPeralatan Utama Peralatan UtamaI k b t Inkubator Waterbath Autoclave Oven Oven Laminar air flow Stomacher/blender pH meter pH meter Plastik dan peralatan gelasM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoInkubator Inkubator Monitor suhu internal dengan termometer yang dikalibrasi y gH il it i h Hasil monitoring harus didokumentasikanM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoWaterbath Waterbath Suhu kritis : 44,5 0,1oC atau 45,5 0,1oC , Distribusi suhu merata M it i h i Monitoring suhu air Uji pertumbuhan bakteri pada ECUj pe tu bu a ba te pada CmediumE coli : terbentuk gas E. coli : terbentuk gas E. aerogenes : tidak terbentuk gasM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoLaminar Air Flow Laminar Air Flow Cek terjadinya kontaminasi udara : PCATerbuka 1 jam inkubasi 361oC selama 24 48 jam - Terbuka 1 jam, inkubasi 361 oC selama 24-48 jam, tidak boleh ada koloni- Jika masih ada ulang: tidak berfungsi atau kesalahan g ganalis Kebersihan Permukaan : RODAC metod Laju alir udara (0 45 20% m/s) lubang pada filter Laju alir udara (0,45 20% m/s), lubang pada filter Jumlah Partikel 0.5 m dan 5.0 m Efektifitas lampu UV p- Spread plate 0.5 ml E. aerogenes (200-250 koloni)- Diamkan 2 menit dibawah lampu UV dan lampubiasa inkubasi 361oC 24 48 jam biasa, inkubasi 361 oC, 24-48 jam- Lampu biasa : 200-250 koloni- Penurunan kurang dari 80 %, UV harus diganti Penurunan kurang dari 80 %, UV harus digantiM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoStomacher/blender Stomacher/blender Stomacher Melepaskan sel bakteri p Tidak perlu sampai hancur Blender Atur kecepatan blender Cek visual: jika masih kasar kecepatan dan Cek visual: jika masih kasar, kecepatan dan waktu perlu ditambahM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoAutoclave Autoclave Kalibrasi : suhu dan tekanan Siklus Sterilisasi : tergantung alat Warming up : mencapai 121oC Warming up : mencapai 121 C Sterilization : waktu pada 121oC, 15 psi, 15 15 Cooling down : suhu turun sampai 80oC Label : membedakan yang disteril atau tidak Label : membedakan yang disteril atau tidak Indikator mikrobiologi (Sterilisasi)B stearothermophilus B. stearothermophilusM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoOven Oven Sterilisasi : gelas dan metal Monitoring suhu internal Monitoring suhu internal Holding time dan temperatur Heating up : 1 jam Holding : 160oC (45 menit); 170oC (18g ( ); (menit); 180oC (7,5 menit); 190oC (1,5 menit) Cooling down : 2 jam Cooling down : 2 jamM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindopH meter pH meterK lib i L t b ff H 4 7 d 10 Kalibrasi : Larutan buffer pH 4,7 dan 10 Efisiensi elektrode Bersihkan setelah dipakai : air hangat untuk media agar, acetone untuk lemakPenyimpanan tergantung jenis elektrode (petunjuk Penyimpanan tergantung jenis elektrode (petunjuk alat). Gelas disimpan dalam larutan buffer pH 7 atau dalamp plarutan sedikit asam Reference disimpan dalam 0,1 M KCl Kombinasi disimpan dalam campuran 50% lar buffer pH 7 Kombinasi disimpan dalam campuran 50% lar buffer pH 7dan 50% 0,1 M KCl M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoPlastik/Peralatan gelas Plastik/Peralatan gelasPlastik Plastik Tidak dapat diautoclave: polyethilene, styrene, polystyrene, polyvinylchloridaD t di t l l l l b t l PTFE Dapat diautoclave: polypropylene, polycarbonate, nylon, PTFE (Teflon), polyallomer, TPX (methylpentene polymer)P l t l Peralatan gelas Pipet: 1-10 ml Botol pengencer: McCartney 14 ml, 28 ml p g y , Tabung reaksi: 4 ml (127 x 12,5 mm); 5-10 ml (152 x 16 mm); 10-15 ml (152 x 19 mm); 20 ml (178 x 25 mm); Jarum inokulasi: tidak lebih dari 3 mm Tabung durham: 25-30 x 5-6 mm cover glass: ketebalan 16 mm M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoMEDIA QUALITY CONTROLPenerimaan mediaPenyiapan dan penggunaanUmur simpan dan kondisi penyimpanan Umur simpan dan kondisi penyimpananMutu mediaM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoPenerimaan Media Penerimaan Media Pemeriksaan Administrasi : nama media, pemasok,, p ,kesesuaian, tanggal penerimaan, masa kadaluarsa dll Visual: abnormalitas, kebocoran, penggumpalan dll penggumpalan, dllM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoPenyiapan dan Penggunaan Penyiapan dan Penggunaan Titik kritis: mutu air TPC maks. 103CFU/ml Bebas dari logam beracun, bakterisida pH Catat penyiapan media pada log book Nama media, sumber, nomor batch, nama penyiap,, , , p y p,tanggal, jumlah, volume, pH, tekanan, suhu, dan waktu Pengukuran pH: pH meter bukan kertas pH Atur pH dengan 0,11N HCl atau 0,1N NaOH p gM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoUmur Simpan dan Kondisi PenyimpananMasa Kadaluwarsa Masa Kadaluwarsa Media dan bahan kimia tertera pada label Penyimpanan Penyimpanan Sesuai label Umumnya sejuk, kering dan terhindar dari matahari Faktor yang mempengaruhi penyimpanan Volume media : penyusutan maks. 10%Wadah dan suhu penyimpanan : agar pada petri 2 Wadah dan suhu penyimpanan : agar pada petri 2 minggu, pada botol 3 bulan pada suhu 4oC Sifat media : media selektif dapat kehilanganp gselektifitasnya jika disimpan terlalu lama petunjuk : tidak semua sama untuk media, reagen, dll ikuti petunjuk sesuai metode uji ikuti petunjuk sesuai metode ujiM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoMutu Media Mutu Media Fisik : Kering, dapat larut (tidak semua) Uji pertumbuhan Uji pertumbuhan Media isolasi dan media selektifT b hk k lt b kt i ( itif d tif) Tumbuhkan kultur bakteri (positif dan negatif) pada mediaMedia identifikasi Media identifikasi Uji karakteristik bakteriM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoMikroorganisme Acuan Posedur Penanganan & Pemeliharaan PJ MO acuan Kemampuan telusur/ketelusuran : dari koleksi nasional atau internasional----- COA, surat keterangan Persediaan acuan Persediaan acuan- ISO 11133-1: kultur acuan dapat disubkulturkan sekali untuk membuat persediaan acuan untuk membuat persediaan acuan- pengecekan kemurnian- liofilisasiTidak boleh dibekukan ulang atau digunakan ulang setelah dicairkan. Kultur Kerja- Hendaknya tidak di subkulturR k b k lt i h k lt Rekaman proses sub kultur sampai pemusnahan kultur dipeliharaM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoPENGAMBILAN CONTOH PENGAMBILAN CONTOH Lab. tidak bertanggungjawab untuk melakukan sampling primer thd bahan uji Jika melakukan pengambilan contoh maka harus memiliki jaminan mutu untuk sampling j g Transpor dan penyimpanan contohdi pantau dan dikendalikan mempertahankan di pantau dan dikendalikan, mempertahankan keutuhan samplePengujian dilakukan secepat mungkin setelah Pengujian dilakukan secepat mungkin setelah sampling Dilakukan oleh personil yang kompetenM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoPenanganan dan identifikasi sampel Penanganan dan identifikasi sampel Rekaman kondisi penerimaan sampel di pelihara Rekaman kondisi penerimaan sampel di pelihara Sampel diidentifikasi sedemikian rupa Sampel di simpan sesuai kondisi untuk meminimalkan Sampel di simpan sesuai kondisi untuk meminimalkan perubahan pada setiap populasi mikroba yang ada Sampel dikemas sedemikian rupa sehingga terjaga dari Sampel dikemas sedemikian rupa sehingga terjaga dari kontaminasi dan deteorisasi Sub sampling dilakukan sesuai dengan standar yangp g g y gditetapkan dengan memperhitungkan mikroorganisme yang tidak merata Pemusnahan direkam dan sampel yang telah terkontaminasi hendaknya didekontaminasi sebelum di b i i lk k t i i li k buang meminimalkan kontaminasi lingkunganM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoJaminan Mutu Jaminan Mutu Pengendalian mutu Internal- Penggunaan mikroorganisme acuan Penggunaan mikroorganisme acuan - Replikat pengujian Pengendalian mutu eksternal- Partisipasi uji banding/uji profisiensi - Partisipasi uji banding/uji profisiensi- Audit oleh customerM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoJaminan MutuUji profisiensiTUJUAN Pemeriksaan mutu data uji secara external Dukungan komitmen untuk mempertahankan mutu data Memberikan motivasi untuk memperbaiki unjuk kerja dalampengujian tersebut p g j Mendukung peningkatan mutu sesuai standar, untukkeperluan akreditasi dan sebagainya Membantu mengidentifikasi adanya penyimpangan Membantu mengidentifikasi adanya penyimpanganmasalah Unjuk kerja laboratorium yang bersangkutan dapatdibandingkan terhadap unjuk kerja laboratorium lain dibandingkan terhadap unjuk kerja laboratorium lain Merupakan cara QC yang baik pada keadaan dimanabahan acuan/reference materials tidak tersediaM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoUJI BANDING/UJI PROFISIENSI UJI BANDING/UJI PROFISIENSI (LANJUTAN) Membantu pelatihan staf laboratorium peserta Menjaga reputasi laboratorium dari hasil uji yang Menjaga reputasi laboratorium dari hasil uji yang kurang bermutu Meningkatkan kompetensi/kemampuan laboratorium (laboratorium menjadi lebih kompetitif) Menunjang dalam hal pemasaran jasa pengujianM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio BiotekindoTERI MA KASI HM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo