11. skrining farmakologi fso

Skrining Farmakologi

Laboratorium Farmakologi

PERCOBAAN XI

SKRINING FARMAKOLOGI

Tujuan Percobaan

Setelah menyelesaikan percobaan ini diharapkan mahasiswa:

1. Dapat menerapkan metode skrining farmakologi dalam penentuan potensi aktivitas

suatu senyawa obat baru.

2. Dapat mengaitkan gejala-gejala yang diamati dengan sifat farmakologi suatu obat.

3. Memahami faktor-faktor yang berperan dalam skrining farmakologi suatu senyawa obat

baru.

Teori

Skrining farmakologi terhadap suatu obat atau senyawa obat baru ditujukan untuk

memperoleh gambaran yang jelas mengenai aktivitas farmakologi dari obat atau senyawa

tersebut. Turner (1965) menyebutkan terdapat tiga macam prosedur skrining aktivitas

biologi yaitu skrining sederhana (simple screening) atau skrining umum (general

screening), skrining buta (blind screening), dan skrining terprogram (programmed

screening) atau skrining spesifik (spesific screening). Pemilihannya berdasarkan kepada

tujuan yang ingin dicapai.

Skrining sederhana adalah suatu prosedur pengujian obat dasar yang meliputi satu

atau dua pengujian yang sama untuk mendeteksi apakah suatu senyawa memiliki

aktivitas farmakologi. Prosedurnya sederhana dan tidak memerlukan sederetan pengujian

yang interpretasi hasil suatu pengujiannya tergantung kepada pengujian lain. Misalkan,

jika injeksi suatu senyawa uji menyebabkan hewan percobaan kehilangan kesadaran,

kemungkingan senyawa tersebut bersifat depresan sistem saraf pusat. Kadang-kadang

pendekatan ini disebut juga skrining awal (preliminary or initial screening).

Skrining buta adalah sederetan pengujian sederhana terhadap senyawa yang tidak

diketahui aktivitas farmakologinya yang bertujuan untuk mendapatkan petunjuk aktivitas

potensial senyawa tersebut. Skrining buta biasanya diterapkan untuk senyawa yang tidak

memiliki kriteria spesifik untuk aktivitas farmakologi yang telah diterapkan. Beberapa

prosedur dapat membandingkan potensi suatu senyawa dengan senyawa lain yang telah

diketahui aktivitas farmakologinya. Terdapat banyak kegunaan skrining ini. Peneliti dapat

menentukan aktivitas farmakologi primer atau sekunder melalui penggunaan beberapa

metode pengujian yang spesifik. Irwin (1962) menguraikan suatu skema multidimensional



yang komprehensif yaitu suatu pengembangan prosedur skrining Hippokratik. Prosedurnya

membutuhkan beberapa pengamatan perilaku sederhana yang dilakukan setelah injeksi

(biasanya intraperitoneal) senyawa uji sehingga peneliti dapat menentukan profil aktivitas

suatu senyawa. Jika efek positif teramati, pengujian harus diulang pada kelompok hewan

yang baru untuk tujuan konfirmasi dan reproduksibilitas.

Pada skrining terprogram, tujuan metode pengujian konvensional adalah untuk

mendapatkan informasi tipe aktivitas farmakologi yang spesifik. Suatu senyawa dapat

diteliti secara spesifik untuk aktivitas potensialnya misalnya aktivitas antihipertensi

(berdasarkan kemampuan untuk menurunkan tekanan darah). Tujuan skrining ini lebih

terbatas daripada skrining buta yaitu untuk menemukan aktivitas yang spesifik dan dapat

mencakup metode pengujian kuantitatif untuk senyawa yang potensial. Desain penelitian

harus meliputi beberapa indikasi efek samping yang potensial yang dapat diperoleh dengan

menentukan profil dosis-respons suatu senyawa uji. Jadi, skrining terprogram harus

menjawab pertanyaan yang berkaitan dengan bagaimana potensi suatu senyawa

berdasarkan pada aktivitas farmakologinya.

Jadi, berdasarkan latar belakang dan tujuan yang ingin dicapai skrining dapat

bersifat skrining buta, skrining terprogram, dan skrining sederhana. Skrining buta adalah

program skrining terhadap senyawa baru tanpa informasi apapun mengenai aktivitas

farmakologinya. Hasil yang diharapkan adalah paling sedikit dapat diketahui ada atau

tidaknya aktivitas farmakologi obat dan lebih jauh lagi dapat memberikan arah untuk

indikasi aktivitas farmakologi tersebut pada manusia. Skrining terprogram yang terbatas

dilakukan terhadap senyawa yang telah diperkirakan khasiatnya. Misalnya, senyawa yang

dikembangkan atau dimodifikasi dari senyawa obat lain yang telah diketahui khasiat dan

potensinya. Hasil skrining ini diharapkan lebih teliti daripada skrining buta.

Apabila pengujian dilakukan untuk mengetahui potensi farmakologi suatu obat

dengan khasiat tertentu, skrining menjadi sederhana dan terarah. Misalnya, pada

penentuan aktivitas hipoglikemik suatu senyawa dengan mengukur kadar gula darah.

Dalam skrining buta pada mulanya dilakukan pengujian neurofarmakologi, toksisitas

(LD50), kemudian pengujian terhadap organ yang diisolasi serta pengujian lain yang

dianggap penting. Uji neurofarmakologi meliputi pengamatan terhadap sikap, profil

neurologis, dan fungsi otonomik.



Tabel 11.1 Gejala-gejala Neurofarmakologi

Gejala Neurofarmakologi

Skor Normal

Keterangan

A. SIKAP 1. Awareness Alertness 4 Kewaspadaan hewan

Visual placing

4 Respons hewan terhadap pemindahan pada tempat yang berbeda, dan kemampuannya mengorientasi diri tanpa jatuh

Stereotypy

0

Pengulangan gerakan yang mekanis dan sering. Pada mencit meliputi pergerakan mencari dari kepala, berputar, menggigit diri sendiri, jalan mundur, menjilat bibir, dan cambukan ekor

Passivity

0 Respons hewan apabila ditempatkan pada posisi yang tidak biasa

2. Mood

Grooming

4 Belaian atau gosokan kaki depan pada muka, sering juga dilakukan oleh mencit yang tidak diberi obat

Vocalization 0 Memberi suara Restlessness 0 Keadaan tidak tenang Iritability 0 Keadaan tidak tenang yang hebat, sikap agresif menyerang Fearfulness 0 Ketakutan bila diperlakukan oleh manusia 3. Aktivitas Motorik

Aktivitas spontan 4 Reaksi yang ditunjukkan bila mencit dimasukkan ke dalam botol

menunjukkan rasa ingin tahu

Reaktivitas 4 Pengamatan yang sama apabila dipindahkan dari wadah gelas

ke atas meja

Touch response 4 Respons yang diberikan bila hewan disentuh dengan pensil atau pinset pada berbagai bagian tubuhnya, misalnya pada sisi tengkuk, abdomen, atau lipat pahanya

Respons nyeri 4 Respons yang diberikan bila pangkal ekor dijepit dengan klem

atau pinset



Tabel 11.1 Gejala-gejala Neurofarmakologi (lanjutan)

Gejala Neurofarmakologi Skor Normal

Keterangan

B. PROFIL NEUROLOGIS 1. Eksitasi SSP

Startle response 0 Respons yang diberikan bila hewan diberi kejutan dengan suara yang keras

Straub response 0 Kenaikan dari ekor mencit (dalam derajat) Tremor 0 Konvulsi 0 2. Inkoordinasi motorik Posisi tubuh 4 Dinilai terhadap mencit normal Posisi anggota badan 4 Dinilai terhadap mencit normal Staggering gait 0 Hewan berjalan dengan terhuyung Abnormal gait 0 Hewan berjalan dengan cara yang tidak normal

Somersault-test 0

Righting reflex mencit bila dipegang pada ekornya kemudian diputar dua kali di udara dan dijatuhkan pada suatu bantalan. Dinilai posisi mencit pada waktu jatuh. Cara penilaian diambil rata-rata dari 8 kali percobaan.

3. Tonus otot Otot anggota tubuh 4 Diukur dengan menilai resistensi kaki bila digenggam

Grip strength

Mencit dibiarkan menggenggam pensil dalam posis horizontal dan dinilai mudahnya atau cepatnya kedua kaki depannya jatuh pada meja kembali.

Body tone 4 Bandingkan tonus otot dengan mencit kontrol Abdominal tone 4 Bandingkan tonus otot dengan mencit kontrol 4. Reflex

Pinna 4 Refleks bila pusat pinna (daun telinga) disentuh dengan rambut atau benda yang halus

Corneal 4 Refleks bila kornea disentuh dengan rambut yang kaku

Ipsilaterial flexor 0 Refleks menarik kaki, bila tapak dijepit dengan pinset C. PROFIL OTONOMIK 1. Optik Ukuran pupil 4 Pupil mata diukur

Pembukaan palpebral (ptosis)

4 Pembukaan kelopak mata

Exophtalmus 0 Bola mata menonjol keluar 2. Sekresi Urinasi 0 Dibandingkan terhadap hewan kontrol Salivasi 0 Dibandingkan terhadap hewan kontrol 3. Umum Writhing 0 Menggeliat Piloereksi 0 Bulu tubuh berdiri Hypothermis 0 Penurunan suhu tubuh dari suhu normal Warna kulit 4 Terutama warna telinga

Kecepatan denyut jantung

4 Jumlah/satuan waktu

Kecepatan respirasi 4 Jumlah/satuan waktu



Gambar 11.1 Respons Pasif pada Mencit

Keterangan:

1. Mencit normal yang tidak mendapatkan obat.

2, 4, 6, dan 8 Respons pasif setelah pemberian obat.



Gambar 11.2. Hasil yang diperoleh dari Somersault Test

Penilaian Somersault Test

Berdiri di atas 4 kaki pada 5 pengujian: 5/5, skor 0.

Berbaring pada satu sisi: 1/5 atau 2/5, skor 1; 3/5 atau 4/5, skor 2; 5/5, skor 3.

Berbaring pada punggung: 1/5 atau 2/5, skor 4; 3/5 atau 4/5, skor 5; 5/5, skor 6.

Kembali ke posisi normal dengan lambat dari posisi telentang atau samping: skor: 7

Tetap telentang di atas punggung: skor 8



Bahan dan alat

Hewan percobaan : Mencit putih jantan dengan berat badan 25-30 gram

Bahan : - Obat A dan obat B

- Larutan NaCl fisiologis atau larutan suspensi gom arab 1-2%

Alat : - Alat suntik 1 mL, sonde oral

- Stopwatch

- Timbangan mencit

Prosedur

1. Tiap kelompok bekerja dengan 3 ekor mencit. Mencit ditimbang dan ditandai.

2. Amati keadaan mencit sebelum diberi obat meliputi semua hal yang akan diamati

setelah pemberian obat.

3. Berikan kepada masing-masing mencit secara peroral obat A, obat B, atau blanko.

4. Tempatkan mencit pada tempat pengamatan.

5. Amati keadaan mencit sesudah diberi obat. Tentukan waktu mulai munculnya efek

obat, lamanya efek berlangsung, dan intensitas obat tersebut.

6. Bahas selengkap mungkin semua hasil pengamatan sehingga dapat disimpulkan kerja

farmakologi obat yang diuji.



Pertanyaan

1. Jelaskan apa yang anda ketahui tentang tahap-tahap pengembangan obat baru sejak

skrining sampai dapat digunakan dalam terapi.

2. Rumuskan secara garis besar rancangan suatu skrining yang mencakup pemilihan

hewan, percobaan, dan jenis skrining sampai diperoleh suatu kepastian akan khasiat

farmakolgis untuk suatu senyawa yang baru berhasil diisolasi dari suatu tanaman dan

belum ada informasi baik mengenai sifat kimia maupun sifat farmakologinya.

3. Apa yang dimaksud dengan reliabilitas, validitas, dan objektivitas dalam suatu

percobaan.

4. Jelaskan hubungan antara gejala-gejala neurofarmakologis yang tercantum dalam

tabel dengan jenis aktivitas obatnya.

Telah diperiksa Asisten

Tanggal :

Nilai :

Paraf Asisten :

11. skrining farmakologi fso

Documents