1. hematologi dasar, blok 16, 2011
Embed Size (px)
TRANSCRIPT
Blok 16
Rini Sundari Harjono
21 Maret 2011
21-03-11
Hematologi: Rini HW
1
Definisi Hematologi adalah studi
tentang sel-sel darah dan koagulasi; mencakup analisis konsentrasi, struktur, dan fungsi sel-sel dalam darah
21-03-11
Hematologi: Rini HW
2
Pemeriksaan Hematologi Hb, hitung sel, hematokrit, LED, NAE, hitung jenis leukosit, retikulosit ADT, AST BT, CT, RL, RB, PT, aPTT, TEG Golongan darah Cross match
Faktor koagulasi lain Kimiawi: Fe, TIBC, ferritin, B12, Asam folat Elektroforesis Hb/Analisis Hb Sitokimia - Sitologi21-03-11 Hematologi: Rini HW 3
Antikoagulan EDTA (ethylenediaminetetra-Acetic Acid)1 Sodium Potassium rutin hematologi Lithium Chellating effect on the calcium molecul in blood FBC 1,2 mg/ml darah (4 mmol) K2EDTA: sangat mudah larut (1650 g/L) Na2EDTA 108 g/L Li2EDTA 160 g/L (analisis kimia)
21-03-11
Hematologi: Rini HW
4
EDTA (ethylenediaminetetra-Acetic Acid)2 K3EDTA (liquid) rekomendasi NCCLS
Penciutan eritrosit PCV 2-3%/4 jam Penurunan MCV
ICSH merekomendasikan Na2EDTA
(1,5 + 0,25 mg/mL darah), bukan Na3EDTA >> EDTA :
Eritrosit dan leukosit dan morfologi
21-03-11
Trombosit membengkak pecah, fragmented , jumlah Basophilic stippling hilang Leukoaglutinasi (netrofil dan limfosit)Hematologi: Rini HW 5
Trisodium Citrate (109 mmol/L) Na3C6H5O2.2HO2
Pemeriksaan koagulasi Pemeriksaan LED
1 : 9 1 : 4
Campuran EDTA + citrate + dextose
(acidcitrate oxidase [ACD] atau larutan Alsever preservasi eritosit untuk pemeriksaan tertentu dan transfusi
21-03-11
Hematologi: Rini HW
6
Heparin (109 mmol/L) Heparin bereaksi membentuk sebuah
kompleks dengan plasma antithrombin III yang menghambat pembentukan thrombin Lithium atau sodium 10 20 IU/mL darah Kimia, AGD, emergency test Tidak mempengaruhi ukuran eritrosit dan tidak lisis: osmotik fragilitas, immunophenotyping Tidak digunakan untuk leukosit dan trombosit Hematologi: Rini HW 21-03-11 7
Stabilitas1 RBC, WBC, PLT Terbaik kurang dari 2 jam
8 jam 24 jam
: suhu kamar : 4 0C
NAE 8 jam ? PCV dan MCV , fragilitas
osmotik meningkat, dan ESR menurun Retikulosit (EDTA, ACD) stabil 24 jam pada suhu 40C, pada suhu kamar jumlah mulai menurun pada jam ke-6 Normoblas mulai hilang dalam 1-2 hari pada suhu kamar21-03-11 Hematologi: Rini HW 8
Stabilitas2 Hemoglobin: dalam 2 3 hari eritrosit lisis RBC dan PCV MCH dan MCHC Tes koagulasi : sebelum 2 jam (22-240C), 4 jam (40C), 2 minggu (-200C), dan 6 bulan (700C)
Apusan : kurang dari 1 jam 3 jam sudah mulai perubahan morfologi
21-03-11
Hematologi: Rini HW
9
Homogenitas Mechanical rotating mixer > 2 menit Tabung dibolak-balik 8-10 kali
Jika tabungnya telah lama berdiri tegak, maka dibutuhkan sekurang-kurangnya 60 pembalikan tabung, atau 2 menit pada sebuah rotator mekanik; kurang dari ini akan menyebabkan unacceptable terhadap presisi. Jika disimpan dalam suhu 40C hangatkan
dalam suhu kamar homogenisasi
21-03-11
Hematologi: Rini HW
10
21-03-11
Hematologi: Rini HW
11
Haematology Tests1 Eritrosit Hemoglobin (Hb) Hematokrit (Ht/Hct/PCV) NAE Eritrosit RDW Leukosit leukosit Hitung jenis sel (absolut & relatif) Trombosit trombosit Pct-PDW-MPV21-03-11 Hematologi: Rini HW 12
Haematology Tests2 Retikulosit Morfologi darah tepi Morfologi sumsum tulang Hemostasis
21-03-11
Hematologi: Rini HW
13
GDT
Hematologi: Rini HW
14
Sel-sel Darah: ERITROSITEritrosit: jumlah paling banyak di dalam darah berpigmen gelap hemoglobin tidak memiliki inti sel yang banyak berkaitan
dengan respirasi jaringan. Pronormoblas - eritrosit Mengandung hemoglobin, sebuah kompleks protein-zat besi yang merupakan carrier utama untuk oksigen dan karbondioksida.
21-03-11
Hematologi: Rini HW
15
Sel-sel Darah: LEUKOSIT Leukosit: sel berinti (sel muda matur) Normal: 5 jenis sel basofil eosinofil neutrofil limfosit monosit Morfologi dan fungsi beda
21-03-11
Hematologi: Rini HW
16
MIELOBLAS
PROMIELOSITdiferensiasi granula
MIELOSIT EOSINOFIL METAMIELOSIT
MIELOSIT NETROFIL METAMIELOSIT
MIELOSIT BASOFIL METAMIELOSIT
EOSINOFIL BATANG EOSINOFIL SEGMEN EOSINOFIL
NETROFILBATANG NETROFIL
BASOFIL
BATANG BASOFIL SEGMEN BASOFIL
SEGMEN NETROFIL
Hematologi: Rini HW
17
Sel-sel Darah: TROMBOSIT Platelet adalah fragmen-fragmen sitoplasmik penting di dalam koagulasi & hemostasis. Jumlah: ammonium oksalat (1000 N) Morfologi: ADT
Hematologi: Rini HW
18
Gambar apakah ini?
Hematologi: Rini HW
19
Nilai Absolut Eritrosit MCV (mean cell volume (MCV): volume eritrosit rata-rata MCH (mean cell hemoglobin): jumlah rata-rata hemoglobin yang terkandung di dalam masingmasing sel MCHC (mean cell hemoglobin concentration): rata-rata konsentrasi hemoglobin dalam sel darah merahHematologi: Rini HW
20
Nilai Absolut Eritrosit
4 MCHC (KHER)Hb Hmt
4 MCV (VER)Hmt X 10 c Eritrosit
4 MCH (HER)Hb Eritrosit X 10 g
X 100%
32-36
83-101 c (fL) 76-96 c (fL)
27-32 g (pg)
Hematologi: Rini HW
21
Hemoglobin
21-03-11
Hematologi: Rini HW
22
Hemoglobin (Hb): komponen utama dalam
eritrosit (RBC) sebuah protein terkonjugasi yang berperan untuk mengangkut O2 dan CO2 Sebuah molekul Hb berisikan dua pasang
rantai polypeptide (globin) dan empat kelompok heme yang masing-masingnya mengandung satu atom zat besi.
21-03-11
Hematologi: Rini HW
23
Hemoglobinometri konsentrasi Hb diperkirakan dari warna
(kombinasi kandungan oksigen, CO, dan besi) oxygen-combining capacity darah: 1,34 mL O2 per g Hb hasil lebih rendah 2% daripada metode lain 0,347 g besi dalam 100 g Hb
21-03-11
Hematologi: Rini HW
24
Hematologi: Rini HW HAEMOMETER SAHLI (acid-hematin)
25
HEMOGLOBIN: TALQVISTBuku pemeriksaan golongan darah metode Talqvist, A. Hasil dinyatakan dalam persentase yang selanjutnya dikonversi ke g/dL (100% setara dengan 15,8 g/dL) B. Hasil langsung dinyatakan dalam g/dL
AHematologi: Rini HW
B26
Spektrofotometer Haemoglobincyanide (HiCN; cyanmethaemoglobin):
ICSH Larutan Drabkin pH 8,6 modifikasi ICSH pH 7,0-7,4 Botol gelas borosilicate Jika suhu kamar > 300C simpan di refrigerator
pH harus dicek 1 kali/bulan (pH meter) Larutan jernih dan kuning pucat Panjang gelombang 540 nm dibandingkan dengan
yang larutan Standar HiCN. Hemoglobin, Hi, HbO2, HbCO ( SHb) Spesifik Hb manusia (BM 64458; 16114 monomer)
21-03-11
Hematologi: Rini HW
27
Darah diencerkan dalam sebuah larutan potasium ferricyanide dan potasium cyanide. Potasium cyanide mengoksidasi hemoglobin menjadi hemiglobin (Hi; methemoglobin), dan menghasilkan ion-ion cyanide (CN-) membentuk HiCN.
Hb + KFeCN2 Hi (Hemiglobin) + KCN HiCN
Nonionik detergent : - Meningkatkan lisis RBC - Menurunkan kekeruhan akibat protein abnormal
21-03-11
Hematologi: Rini HW
28
Spektrofotometer Oxyhaemoglobin (HbO2) Kesulitan dalam menyiapkan HbO 2 yang stabil Tidak dipengaruhi oleh peningkatan bilirubin Hb, HbCO, Hi, SHb
21-03-11
Hematologi: Rini HW
29
Direct reading: Portable haemoglobinometer POCT
Oxyhaemoglobin (HbO2) HemoCue System (HemoCue AB) Sodium nitrit dan sodium azide mengubah hemoglobin menjadi azidemethaemoglobin Tidak dipengaruhi: bilirubin, lipid, leukosit Panjang gelombang 565 dan 880 nm Penyimpanan 15-300C DHT Haemoglobinometer Darah diencerkan 1 : 100 (0,4 g/L ammoniated water) Panjang gelombang 523 nm 21-03-11 Hematologi: Rini HW 30 Hasil 8-10% dari metode standar
Hematokrit (PCV)
21-03-11
Hematologi: Rini HW
31
Dalam kondisi normal: kadar Hb = 3 X jumlah eritrosit
kadar Hmt = 3 X kadar Hb
Hmt = 9 X E
Mikrohematokrit Tabung kapiler 75 mm, diameter 1 mm Plain atau 1 iu heparin
Sentrifus 5 menit, 12000 g PCV > 50% sentrifus 5 menit Darah EDTA 2%, EDTA > 2,2 mg/mL PCV
Hematologi: Rini HW
32
MIKROHEMATOKRIT B
A
C
F
D
tabung kapiler
plasmabuffy coat eritrosit
G
creatoseal
E
Hematologi: Rini HW
33
MAKROHEMATOKRIT
D CBahan pemeriksaan darah dengan antikoagulan EDTA
E
A
B
A Tabung Wintrobe B Pipet Pasteur (dengan ujung lancip-panjang) C Cara mengisi darah ke dalam tabung Wintrobe dengan pipet Pasteur D Perhatikan skala E Setelah disentrifus (3000 rpm, 30 menit) akan terpisah bagianbagian seperti tampak pada gambar, baca tinggi (persentase) hematokritHematologi: Rini HW
34
Hematologi: Rini HW
35
Jumlah SelLeukosit, Trombosit, Eritrosit
21-03-11
Hematologi: Rini HW
36
HITUNG JUMLAH ERITROSITHayem angka 101101 1 0 1
A
B1 m m
10.5
10 . 5 0 . 5
E
1Darah angka 0.5101
2
D
C 1 mm
1
0.5
Perbesaran 400XX faktor pengenceran
=
Jml eritrosit yg dihitung Volume yg dihitung = (N : 2/100) X 200 = 10 000 NHematologi: Rini HW
37
HITUNG JUMLAH LEUKOSIT1 0 1 1 1
11
1
0.5
1 10 . 5 0 . 5
Jml leukosit yg dihitung = Volume yg dihitung
X faktor pengenceran
= =
(N : 4/10) X 20 50 NHematologi: Rini HW
38
HITUNG JUMLAH TROMBOSIT1 0 11 0 1
101
1
0.5
10 . 5
10 . 5 0 . 5
1
2
1 2 10 9
=
Jml trombosit yg dihitung X faktor pengenceran Volume yg dihitung
= (N : 1/10) X 100 = 1000 N
3 4 5 8 7 6 11 12 13 14 15 20 19 18 17 16 21 22 23 24 251 mm
1 m m
Hematologi: Rini HW
39
LAJU ENDAP DARAHcampurkan 1,6 mL darah + 0,4 mL natrium sitrat 3,8%
1 jam 2 jam1
3
2
3
WestergreenHematologi: Rini HW
40
Prevents blood leakage Ensures a completely closed system Eliminates pipette filling and bio-hazard potentials Permits safe disposalSEDIPLAST includes a stoppered, prefilled vial containing 0.2 mL of 3.8% sodium citrate diluent. With a sample volume of only 0.8mL, SEDIPLAST is ideal for patients where limited blood draw is a concern.
Hematologi: Rini HW
41
Hematologi: Rini HW
42
ESR-100
The ESR-100 is a 100-position high-capacity ESR analyzer designed for laboratories that run over 100 samples daily. The instrument accurately and precisely measures the sedimentation rate of erythrocytes in 2.0 ml ESR-Vacuum Tubes. Results are measured in millimeters per hour (Modified Westergreen Method) and are available in 30 minutes. The ESR-100 features random access, a built-in printer and sample ID capability. Optional items include a barcode scanner and a 1.2ml pediatric sample module.21-03-11 Hematologi: Rini HW 43
21-03-11
Hematologi: Rini HW
44
Cara Pembuatan Sediaan Apus Darah1 2A
atau B A A. darah vena atau B. darah kapiler Teteskan 1 tetes darah pada gelas objek
B
Buat apusan, antara A. gelas objek & B. gelas penghapus membentuk sudut 30-450 4
3
Biarkan kering, kemudian fiksasi dengan methanol selama 3-5 menit
Sisa methanol dibuang, sediaan diwarnai dengan Giemsa selama 20-30
Selanjutnya sediaan dicuci di bawah air mengalir, kemudian keringkan
Lakukan pemeriksaan hitung jenis leukosit dan morfologi apus darah tepi dengan mikroskop perbesaran 100X, 400X, & 1000X * keterangan lihat di bawah)
Giemsa diencerkan dengan ratio 1 : 3
Hematologi: Rini HW
45
Efek Romanowsky Azur B (Trimetiltionin) basa : mewarnai komponen sel yang bersifat asam (Kromatin, DNA, dan RNA) Eosin Y (tetrabromfluresein) bersifat asam : mewarnai komponen sel yang bersifat basa (granula eosinofil dan hemoglobin). Ikatan Eosin Y pada Azur B yang beragregasi dapat menimbulkan warna ungu Efek Romanowsky Giemsa. Efek ini sangat nyata terjadi pada DNA (terutama dalam inti sel) terjadi kontras antara inti yang berwarna ungu dengan sitoplasma yang berwarna biru. Pewarnaan lainnya: pewarnaan Wright, Wright-Giemsa, May-Grunwald.Hematologi: Rini HW
46
Hematologi: Rini HW
47
HITUNG JENIS SEL41 2 4 6 4 3 5
basofil eosinofil batang (netrofil) - segmen (netrofil) limfosit monosit
Shift to the left
left
right
Basofil eosinofil batang segmen netrofil limfosit - monosit
0/7/3/60/26/4Hematologi: Rini HW
48
GRANULOSIT
Hematologi: Rini HW
49
Hematologi: Rini HW
50
NONGRANULOSIT MONOSIT
LIMFOSITHematologi: Rini HW
51
ERITROSIT & TROMBOSIT
Hematologi: Rini HW
52
KELAINAN ERITROSITKeterangan: 1 normal 2 ovalosit 3 ovalosit 4 pensil cell 5 pensil cell & cigar shape 6 akantosit 7 burr cell/ ekinosit 8 Cabots ring 9 leptosit 10 basophillic stippling 11 Howel Jollys bodies 12 Pappenheimers bodies 13 rouleaux 14 sel target 15 tear drop 16 stomatosit 17 sferosit 18 sel sabit
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12 13
14
15
16
17
18
Gambar 1.15 Kelainan morfologi eritrosit
Hematologi: Rini HW
53
KELAINAN LEUKOSITKeterangan: 1 granula toksik 2 agranulasi 3 vakuolisasi 4 sel Rieder 5 giant granulasi 6 auer rod 7 Dohles bodies 8 Anomali May Hegglin 9 hipersegmentasi 10 bisegmentasi(pseudo Pelger Huet)
11 sel smudge
Rini S. Hw
Hematologi: Rini HW
54
HAEMOSITOMETER
IMPROVED NEUBAUER
11
1
10.5
0.5
A
B
A
B
Hematologi: Rini HW
55
BILIK HITUNG
BIDANG BESAR L (BIDANG LEUKOSIT)
BIDANG BESAR TENGAH (BIDANG ERITROSIT)
Hematologi: Rini HW
56
Retikulosit Sisa RNA Teknik supravital staining: BCB, new methylene
blue Jumlah retikulosit dalam n lpi x Rata-rata jumlah eritrosit/lpi y Jumlah eritrosit dalam n lpi nXy % retikulosit [x : (nXy)] X 100% Absolute retikulosit % X eritrosit
21-03-11
Hematologi: Rini HW
57
Pewarnaan BCB
Pewarnaan Giemza21-03-11 Hematologi: Rini HW 58
Microscope to MachinesKX-21 K-4500
XT-1800i
XT-2000i21-03-11 Hematologi: Rini HW 59
MORFOLOGI DARAH TEPI
21-03-11
Hematologi: Rini HW
60
Morfologi eritrosit: ukuran, bentuk, kromasi, normoblas Morfologi leukosit: jumlah, jenis sel, kelainan sitoplasma, kelainan inti sel muda Morfologi trombosit: jumlah, kelompok trombosit, kelainan morfologi (giant thrombocyte)21-03-11 Hematologi: Rini HW 61
MORFOLOGI SUMSUM TULANG
21-03-11
Hematologi: Rini HW
62
Selularitas: normal (normosluler), menurun (hiposeluler), meningkat (hiperseluler) ASG: jenis sel hitung jenis sel ASE: jenis sel AST: jumlah megakariosit21-03-11 Hematologi: Rini HW 63
21-03-11
Hematologi: Rini HW
64
Rujukan1. Lewis, S.M., Bain, B.J., Bates, I. 2006. Dacie and Lewis Practical Haematology. Ed 10th. Philadelphia: Churcil Livingstone Elsevier. 2. Greer, J.P, Foerster, J., Lukens, J.N., Rodgers, G.M., Paraskevas, F., Glader, B. 2004. Wintrobes Clinical Hematology, Ed 11th. Philadelphia: Lipincott Williams & Wilkins. 3. Parekh, V. 2006. 4th Wet Workshop on Quality Assessment in Hemogram, Department of Haematology, AIIMS, 27th February 2006. 4. Kosasih, A.K. 2006. Perkembangan Alat Hitung Sel Darah Otomatis. 5. Harjono, R.S. 2007. Buku Petunjuk Praktikum Patologi Klinik. Fakultas Kedokteran Unjani, 6. Harjono, R.S. 2008. Modul Prakepaniteraan Patologi Klinik. Fakultas Kedokteran Unjani, 7. BrosurHematologi: Rini HW
65
21-03-11
Hematologi: Rini HW
66